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COMPONENTE CURRICULAR
Orientaes
para
funcionamento
do
Salvador, BA
(2013)
BIBLIOGRAFIA:
ALBERTS, B., JOHNSON, A., LEWIS, J., RAFF, M., ROBERTS, K., WALTER, P. Biologia molecular da clula. Trad. de Ana
Letcia de Souza Vanz et al. 5 ed. Porto Alegre: Artmed. 2010. 1396 p. Il.
COOPER, G. M. A Clula: uma abordagem molecular. 3.ed. Porto Alegre: Artmed. 2007.
LODISH, H.; BERK, A.; MATSUDAIRA, P.; KAISER C.A.; KRIEGER, M.; SCOTT, M.P. Biologia celular e molecular. Trad. de
Ana Leonor Chies Santiago-Santos. 5 ed. Porto Alegre: Artmed. 2005. 1054 p. il.
INSCRIO NO MOODLE:
Para inscrio no MOODLE, procurar Instituto de Biologia, disciplina Biologia Celular e Molecular para o curso de
Medicina em: http://www.moodle.ufba.br/. Todos devem se inscrever usando o cdigo bio158ci, para ter acesso disciplina.
ROTEIROS DAS AULAS:
Os roteiros das aulas tanto tericas quanto prticas esto disponveis a seguir neste manual.
Orientaes para o estudo (OE) - Os roteiros de aula possuem uma sesso denominada Orientao para o estudo que
deve ser utilizada para nortear o estudo em casa, antes da aula a que se referem.
Aulas tericas Exposio participativa com discusso do roteiro. Sero ministradas no Pavilho de aulas do canela
(PAC).
Aulas prticas Sero abordados alguns temas do contedo terico, possibilitando a observao direta ou indireta de
fenmenos celulares. Proporcionaro aos alunos uma iniciao manipulao de material laboratorial. Sero ministradas no
Instituto de Biologia (IBIO).
Salas de aula:
Turma: Colegiado (IBIO)
Horrio
Sala
Seg (07-10 h)
Seg (07-10 h)
Seg (13-16 h)
Seg (13-16 h)
Qua (07-09 h)
Qua (09-11 h)
Qua (07-09 h)
Qua (09-11 h)
Qua (13-15 h)
Qua (15-17 h)
Qua (13-17 h)
Qua (15-17 h)
CRONOGRAMA
ATIVIDADE DIA
1e2
CONTEDO
AVALIAO
16/10 Qua
Prtica de microscopia.
21/10 Seg
23/10 Qua
28/10 Seg
30/10 Qua
04/11 Seg
06/11 Qua
Prtica de endocitose.
11/11 Seg
13/11 Qua
18/11 Seg
14
20/11 Qua
15
25/11 Seg
Citoesqueleto e junes.
27/11 Qua
02/12Seg
04/12 Qua
09/12 Seg
11/12 Qua
16/12 Seg
22
18/12 Qua
23
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06/01 Seg
13/01 Seg
20/01 Seg
27/01 Seg
03/02Seg
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05/02 Qua
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10/02 Seg
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SUPERFCIE CELULAR
- INTRODUO:
Todas as clulas possuem um envoltrio que separa e protege seus constituintes qumicos, evitando a sua perda
ou mistura com o meio circundante. ainda por meio desse envoltrio, denominado de membrana plasmtica, que
nutrientes so internalizados e resduos so eliminados, possibilitando a sobrevivncia e o crescimento celular.
Nas clulas eucariticas, as membranas internas que encapsulam organelas, como o retculo endoplasmtico e as
mitocndrias, apresentam estrutura e propriedades semelhantes da membrana plasmtica, o que possibilita a
esses compartimentos realizarem atividades prprias (adaptado de Alberts et al., 2010).
- OBJETIVOS:
1. Caracterizar os componentes lipdicos da membrana plasmtica, associando suas propriedades funo de
barreira que impede a mistura dos componentes intra e extracelulares.
2. Relacionar a fluidez da membrana com a composio e estrutura das molculas lipdicas.
3. Caracterizar os componentes proticos da membrana celular, considerando a forma de associao com a
membrana e as suas funes no transporte de molculas e na comunicao celular.
4. Descrever as diferentes formas de passagem de pequenas molculas atravs da membrana de acordo com
seus gradientes de concentrao.
- PROCEDIMENTO:
A partir da leitura dos captulos 10 (pgs. 617 a 648) e 11 (pgs. 651 a 669; 675 a 683) de Alberts et al. (2010) ou
dos captulos 2 (pgs. 4447; 7884), 10 (pgs. 399408) e 12 (pgs. 475509; 523524) de Cooper e Hausman
(2007), responda as questes propostas abaixo, para posterior discusso em classe:
OBS.: Para um melhor aproveitamento nas discusses, a leitura deve ser realizada ANTES da data programada
para a realizao da aula.
- QUESTES PARA ORIENTAO DO ESTUDO:
Estrutura e propriedades das membranas celulares:
1. Analise propriedades dos fosfolipdeos que favorecem a formao de bicamadas em meio aquoso.
2. Descreva a estrutura bsica das membranas celulares, considerando a distribuio dos lipdeos e as
diferentes formas de associao das protenas com a bicamada lipdica.
3. Aponte a importncia da assimetria da bicamada lipdica na comunicao celular.
4. Explique como a composio e a estrutura dos lipdeos constituintes da membrana influenciam na sua fluidez.
5. De acordo com a resposta acima, como voc esperaria que fosse a constituio das membranas celulares de
peixes que vivem em guas geladas?
6. Muitas protenas de membrana difundem-se no plano da bicamada lipdica, como demonstrado nos
experimentos de fuso celular realizados por Frye e Edidin. As clulas, entretanto, podem limitar a mobilidade
lateral das protenas. De que maneira isso pode ocorrer? Qual a importncia dessa restrio de movimento
das protenas em clulas epiteliais?
7. Justifique a ausncia de glicolipdeos na monocamada citoslica da bicamada lipdica.
8. Caracterize o glicoclice quanto sua composio e suas funes.
Transporte de pequenas molculas atravs da membrana:
9. Analise a funcionalidade da permeabilidade seletiva da membrana plasmtica.
10. correto afirmar que os canais permitem que os solutos atravessem uma membrana com taxas muito mais
rpidas do que os carreadores? Justifique sua resposta.
11. Analise a participao de diferentes tipos de canais inicos na conduo do impulso nervoso.
12. Caracterize o transporte ativo dirigido por hidrlise de ATP a partir do mecanismo de funcionamento da bomba
de Na+/K+.
13. O transporte descrito acima (bomba de Na+/K+) poderia ser dirigido por gradiente de ons? Justifique sua
resposta.
14. Relacione o funcionamento da bomba de Na+/K+ com o equilbrio osmtico em clulas animais.
15. Caracterize a famlia de transportadores ABC, considerando sua importncia clnica.
.- CASO CLNICO:
1. Para que haja contrao em uma clula muscular necessrio um aumento na concentrao intracelular de
clcio (Ca+2). O relaxamento celular subsequente se d pela sada de clcio, que ocorre, principalmente,
atravs de um antiportador na membrana plasmtica, que troca Ca +2 por Na+ extracelular. Algumas drogas,
como os digitlicos so importantes para o tratamento de pacientes com doena cardaca porque elas fazem o
msculo cardaco se contrair mais fortemente. Essas drogas inibem parcialmente a bomba de Na +-K+ na
membrana da clula muscular cardaca.
a. Explique o mecanismo de ao dos digitlicos.
- BIBLIOGRAFIA BSICA:
ALBERTS, B., JOHNSON, A., LEWIS, J., RAFF, M., ROBERTS, K., WALTER, P. Biologia molecular da clula.
Trad. de Ana Letcia de Souza Vanzet al. 5 ed. Porto Alegre: Artmed. 2010. 1396 p. Il.
COOPER, G. M.; HAUSMAN, R. E. A Clula: uma abordagem molecular. 3.ed. Porto Alegre: Artmed. 2007.
- BIBLIOGRAFIA COMPLEMENTAR:
LODISH, H.; BERK, A.; MATSUDAIRA, P.; KAISER C.A.; KRIEGER, M.; SCOTT, M.P. Biologia celular e
molecular. Trad. de Ana Leonor Chies Santiago-Santos. 5 ed. Porto Alegre: Artmed. 2005. 1054 p. il.
ENDOMEMBRANAS
- INTRODUO:
A clula eucaritica subdividida em compartimentos funcionalmente distintos envoltos por membranas,
cada um contendo seu prprio conjunto de enzimas e outras molculas especializadas. Para entender a clula
eucaritica essencial conhecer como ela cria e mantm esses compartimentos, o que ocorre em cada um deles
e como as molculas se movem entre eles (Alberts et al., 2010).
- OBJETIVOS:
1. Caracterizar estrutural e funcionalmente os compartimentos intracelulares.
2. Analisar o trnsito de protenas e RNAs entre o ncleo e o citoplasma.
3. Analisar o trnsito de macromolculas nas vias secretora e endoctica.
- PROCEDIMENTO:
A partir da leitura dos captulos 12 e 13 de Alberts et al. (2010) ou dos captulos 7 (pgs. 297 a 307), 8 (pgs.
321 a 332), 9 (pgs. 351 a 388) e 12 (pgs. 500 a 509) de Cooper & Hausman (2007), responda as questes
propostas abaixo para posterior discusso em classe.
OBS.: para um melhor aproveitamento nas discusses, a leitura deve ser realizada ANTES da data programada
para a realizao da aula.
QUESTES PARA ORIENTAO DO ESTUDO:
1. Discuta a importncia da evoluo dos compartimentos celulares presentes nas clulas eucariticas.
2. Caracterize as diferentes formas de endereamento de protenas entre os compartimentos celulares.
Ncleo
1. Descreva a estrutura do envelope nuclear considerando a presena da lmina nuclear e dos complexos de
poro.
2. Analise o papel da protena Ran na importao e exportao de protenas nucleares.
3. Caracterize duas estratgias de regulao do processo de importao de fatores de transcrio para o ncleo.
4. Discuta a importncia biolgica da fragmentao nuclear durante a mitose.
Retculo endoplasmtico
5. Caracterize o Retculo Endoplasmtico (RE) considerando sua estrutura e funes.
6. Descreva o mecanismo de transporte de protenas solveis e de membrana para o RE.
7. Descreva o processo de glicosilao e enovelamento de protenas no RE.
8. Analise o papel do RE na montagem das bicamadas lipdicas.
9. Analise a distribuio de lipdeos e protenas a partir do RE.
1. A doena de incluso celular (do ingls, inclusion-cell disease), causada por mutao num gene estrutural que
codifica a enzima GlcNAc fosfotransferase, consiste numa doena grave, na qual todas as enzimas hidrollicas
esto ausentes dos lisossomos de fibroblastos. Ela classificada como uma das doenas de depsito ou
estocagem lisossmica, que consiste no acmulo em lisossomos de susbstrato no digerido. Indivduos com
essa doena apresentam grandes incluses em suas clulas que consistem em lisossomas contendo material
no digerido. Neles, todas as hidrolases, ausentes nos lisossomos, so encontradas no sangue circulante.
a. Explique como alteraes no trajeto das hidrolases lisossomais (do seu local de sntese at a chegada
aos lisossomos) podem levar patologia descrita acima.
- BIBLIOGRAFIA BSICA:
ALBERTS, B., JOHNSON, A., LEWIS, J., RAFF, M., ROBERTS, K., WALTER, P. Biologia molecular da clula.
Trad. de Ana Letcia de Souza Vanzet al. 5 ed. Porto Alegre: Artmed. 2010. 1396 p. Il.
COOPER, G. M.; HAUSMAN, R. E. A Clula: uma abordagem molecular. 3.ed. Porto Alegre: Artmed. 2007.
- BIBLIOGRAFIA COMPLEMENTAR:
LODISH, H.; BERK, A.; MATSUDAIRA, P.; KAISER C.A.; KRIEGER, M.; SCOTT, M.P. Biologia celular e
molecular. Trad. de Ana Leonor Chies Santiago-Santos. 5 ed. Porto Alegre: Artmed. 2005. 1054 p. il.
CITOESQUELETO E JUNES
- INTRODUO:
A capacidade de migrao das clulas uma das realizaes que coroam a evoluo. Em organismos
multicelulares, entretanto, a migrao de clulas isoladas e de grupos de clulas de uma parte de um embrio
para outra crtica para o desenvolvimento do organismo. Em organismos adultos as clulas buscam por
invasores estranhos como parte da defesa do hospedeiro contra a infeco; por outro lado, a migrao celular
descontrolada um sinal funesto de uma clula cancerosa. At mesmo as clulas estacionrias, que predominam
no corpo, podem exibir alteraes dramticas na sua morfologia: a contrao das clulas musculares, o
alongamento dos axnios dos neurnios, a formao de protuberncias na superfcie celular, a constrio de uma
clula em mitose, se dividindo. Ainda mais sutis que esses movimentos so aqueles que ocorrem dentro das
clulas: a separao ativa dos cromossomos, a corrente do citosol, o transporte de vesculas de membrana. Esses
movimentos internos so elementos essenciais no crescimento e na diferenciao das clulas, e so controlados
cuidadosamente pela clula para que ocorram em momentos e em locais especficos. Lodish et al. (2005).
- OBJETIVOS:
1. Caracterizar o citoesqueleto quanto sua organizao e dinmica funcional.
2. Analisar a estrutura e a dinmica dos diferentes filamentos do citoesqueleto.
3. Analisar a participao do citoesqueleto na forma, organizao espacial e movimentos celulares.
4. Descrever a participao de filamentos do citoesqueleto em junes celulares.
5. Analisar os mecanismos de reorganizao rpida do citoesqueleto.
- PROCEDIMENTO:
Responda as questes propostas a partir da leitura dos captulos 16 (pgs. 965 a 1052) e 19 (pgs. 1131
a 1163) de Alberts et al (2010) ou dos captulos 8 (pgs. 342347) e 11 (pgs. 427469) de Cooper e Hausman
(2007), para posterior discusso em classe.
Pontos para orientao de estudo
1. Descreva o mecanismo de polimerizao dos filamentos de actina e microtbulos.
2. Relacione a instabilidade dinmica com a rpida reorganizao do citoesqueleto.
3. Analise o efeito de frmacos na organizao do citoesqueleto, associando com a terapia anticncer.
4. Analise o efeito da ligao de protenas na organizao e na dinmica dos filamentos de actina e
microtbulos.
5. Caracterize estruturalmente os filamentos intermedirios.
6. correto afirmar que todas as clulas eucariticas apresentam filamentos intermedirios citoplasmticos?
Justifique sua resposta.
7. Descreva a organizao intracelular dos filamentos intermedirios e sua participao em junes celulares.
8. Analise o envolvimento de filamentos intermedirios em doenas de pele e do sistema nervoso.
9. Analise a participao das protenas motoras no transporte intracelular de organelas.
10. Descreva o mecanismo de contrao muscular.
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A formao de um organismo multicelular exige que as clulas se comuniquem, bem como ocorre com os
seres humanos, os quais necessitam da comunicao para se organizarem em uma sociedade complexa. A
comunicao entre as clulas mediada, principalmente, por molculas-sinal extracelulares. A maioria das clulas
em um organismo multicelular emite e recebe sinais. A recepo dos sinais depende das protenas receptoras,
geralmente (mas nem sempre) localizadas na superfcie celular, s quais as molculas-sinal se ligam. A ligao
ativa o receptor, o qual, por sua vez, ativa uma ou mais vias intracelulares de sinalizao (Alberts et al.,2010).
- OBJETIVOS:
1. Compreender a importncia da regulao do comportamento de cada clula individual para a homeostase dos
organismos multicelulares;
2. Descrever o funcionamento dos diferentes receptores envolvidos na sinalizao celular;
3. Analisar vias celulares de recepo e transduo de sinais.
4. Descrever os mecanismos de comunicao celular que regulam a sobrevivncia celular e a morte celular
programada.
- PROCEDIMENTO:
Responda as questes propostas a partir da leitura do captulo 15 (pgs. 879-954) e 18 (pgs.1115-1128)
de Alberts et al. (2010) ou do captulo 13 (pgs. 533575) de Cooper e Hausman (2007), para posterior
discusso em classe.
QUESTES:
1. Identifique modelos de sinalizao intercelular.
2. Caracterize tipos de molculas sinalizadoras.
3. Descreva a ao dos receptores acoplados protena G, bem como as vias de formao e ao dos
mediadores intracelulares AMPc e IP3;
4. Compare o processo de ativao de receptores protena-tirosina quinases com o de receptores de citocinas.
5. Identifique e caracterize receptores ligados a outras atividades enzimticas.
6. A partir de exemplos, caracterize diferentes vias de transduo de sinal intracelular.
7. Descreva o funcionamento das protenas intracelulares na transduo dos sinais;
8. Descreva os mecanismos de comunicao celular que regulam a sobrevivncia celular e a morte celular
programada.
12
- INTRODUO:
O comprimento total do DNA celular impe um problema importante para as clulas. O DNA de uma nica
clula humana, com cerca de 2 metros de comprimento total, deve ser acondicionado dentro de uma clula com
um dimetro menor que 10 m, em uma proporo de compactao de mais de 10 5. Protenas eucariticas
especializadas, associadas ao DNA nuclear, fazem a compactao das estruturas de DNA e protenas,
observadas como cromossomos individuais durante a mitose. As mitocndrias e os cloroplastos tambm
apresentam DNAs, provavelmente resqucios evolucionrios de suas origens, que codificam componentes
essenciais desses organelas vitais. (Lodish et al. 2005, pg. 400).
- OBJETIVOS:
1. Analisar a estrutura e a funo do DNA
2. Analisar a estrutura e a funo dos cromossomos.
3. Descrever a organizao dos genes nos cromossomos.
4. Descrever a dinmica da organizao do material gentico ao longo do ciclo celular.
5. Caracterizar a organizao interna do ncleo interfsico.
6. Estudar a evoluo dos genomas.
- PROCEDIMENTO:
A partir da leitura e interpretao do captulo 4 (pgs. 195-262) de Alberts et al. (2010) ou dos captulos 2
(pgs. 4749; pg. 7778), 3 (pgs. 8994), 4 (pgs. 139158), 8 (pgs. 332336; 345346) de Cooper e Hausman
(2007), responder as questes propostas para posterior discusso em sala de aula.
- ORIENTAES PARA O ESTUDO:
1. Por que a estrutura dos cidos nuclicos DNA e RNA importante para suas funes na clula?
2. Analise a estrutura e a funcionalidade do centrmero e dos telmeros nos cromossomos eucariticos.
3. Discuta a funo dos mecanismos de regulao da cromatina para as mudanas de condensao da
cromatina durante o ciclo celular de eucariotos.
4. Relacione a estrutura interna do ncleo interfsico com seus processos celulares.
14
16
- INTRODUO:
Em termos moleculares, um gene comumente definido como a sequencia completa de cidos nuclicos
necessria para a sntese de um produto gnico funcional (polipetdeo ou RNA). De acordo com essa definio, o
gene inclui mais do que os nucleotdeos que codificam a sequencias de aminocidos de uma protena, chamada
regio codificante. O gene inclui, tambm, todas as sequencias necessrias para sntese de um determinado
transcrito de RNA. Nos genes eucariticos as regies de controle da transcrio, conhecidas com amplificadores
(enhancers), podem estar a um distncia de 50 kb ou mais da regio codificante. Outras regies no-codificantes
crticas nos genes eucariticos so as sequencias que especificam a clivagem e a poliadenilao da extremidade
3, conhecidas como stios poli A, e o processamento (splicing) do RNA primrio, conhecido como stios de
processamento. (Lodish et al. 2005).
- OBJETIVOS:
1. Caracterizar o processo de transcrio em procariotos e eucariotos.
2. Situar a transcrio no fluxo da informao gentica.
3. Analisar aspectos da regulao gnica em procariotos e eucariotos, considerando a organizao do genoma.
4. Analisar a importncia dos processos de regulao gnica.
5. Caracterizar mecanismos de processamento de RNA.
6. Analisar o significado biolgico dos RNAs catalticos.
- PROCEDIMENTO:
A partir da leitura e interpretao dos captulos 6 (pgs. 331 a 366; 400 a 410) e 7 (pgs. 411 a 453), de Alberts
et al. (2010) ou dos captulos 1 (pgs. 4 a 7), 3 (pgs. 96 a 99), 6 (pgs. 229 a 272) e 8 (pgs. 336 a 341) de
Cooper e Hausman (2007), responda as questes propostas para posterior discusso em sala de aula.
- PERGUNTAS PARA ORIENTAO DE ESTUDO:
Transcrio e sua regulao
1. Descreva o processo de transcrio em clulas procariticas, considerando a ao da RNA polimerase e a
ocorrncia de sequencias sinal de incio e trmino do processo.
2. Analise aspectos que diferenciam a transcrio em procariotos e eucariotos.
3. Analise mecanismos de regulao positiva e negativa em procariotos.
4. Relacione a atuao de sequencias regulatrias na expresso de genes eucariticos com a ao de seus
ativadores e repressores transcricionais.
5. Relacione a estrutura da cromatina com a regulao da transcrio.
Processamento de RNAs
6. Caracterize o processamento de RNAs ribossomais em procariotos e eucariotos.
7. Caracterize o processamento de RNAm em eucariotos, considerando alteraes e fatores implicados.
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- INTRODUO:
Esta faanha da traduo atraiu a ateno dos bilogos primeiramente no fim dos anos 1950, quando foi
colocado o problema da codificao: como a informao em uma sequencia linear de nucleotdeos no RNA
traduzida para uma sequencia linear de um conjunto de subunidades quimicamente bastante diferentes - os
aminocidos em protenas? Esta questo fascinante gerou grande excitao entre os cientistas naquele
momento. Havia um criptograma montado pela natureza que, aps mais de trs bilhes de anos de evoluo,
poderia finalmente ser resolvido por um dos produtos da evoluo os seres humanos. De fato, no somente o
cdigo foi finalmente decifrado passo por passo, mas, no ano 2000, a elaborada maquinaria pela qual as clulas
lem esse cdigo o ribossomo foi finalmente revelada em seus detalhes atmicos. (Alberts et al. 2004).
- OBJETIVOS:
1. Analisar a base molecular e as caractersticas do cdigo gentico.
2. Situar a traduo no fluxo da informao gentica.
3. Caracterizar o processo de traduo em procariotos e eucariotos.
4. Identificar mecanismos de atuao de antibiticos relacionados traduo.
5. Caracterizar os mecanismos de regulao da traduo.
- PROCEDIMENTO:
A partir da interpretao dos captulos 6 (pgs. 366 a 400) e 7 (pgs. 488 a 495) de Alberts et al. (2010) ou dos
captulos 3 (pgs. 99 e 100), 7 (pgs. 279 a 297) e 8 (pgs. 341 a 342) de Cooper e Hausman (2007), responda
as questes propostas para posterior discusso em sala de aula.
- PERGUNTAS PARA ORIENTAO DE ESTUDO:
1. Caracterize o cdigo gentico considerando a colinearidade entre genes e protenas.
2. Discuta a importncia do aminoacil-RNAt no processo de decodificao da informao gentica.
3. Caracterize o ribossomo considerando sua estrutura e descreva sua montagem no nuclolo.
4. Descreva o processo de traduo em procariotos e compare com o dos eucariotos considerando os elementos
envolvidos.
5. Analise mecanismos que contribuem para a acurcia do processo de traduo.
6. Considerando diferenas entre fatores durante o processo de traduo procaritico e eucaritico pesquise
sobre a especificidade de antibiticos.
7. Analise mecanismos de regulao da traduo, considerando o envolvimento de protena repressoras, a
modulao da atividade de fatores de iniciao e a poliadenilao do RNAm.
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Semestre: Data:
Regras de formato: O texto do relatrio dever estar em letra Arial 10, com espaamento simples entre linhas,
pargrafo com primeira linha de 1,5 cm e 6 pontos de separao entre um pargrafo e outro. As citaes ao longo
do texto devero estar conforme as regras do arquivo Citacoes_abnt.pdf e as referncias bibliogrficas conforme
o arquivo Normalizacao_de_referencias_abnt.pdf. O relatrio dever conter os seguintes itens:
Avaliao:
-INTRODUO (0,5): Contextualizao histrico-cientfica fundamentada em literatura a respeito do tema da aula
(meia pgina no mximo).
-MATERIAIS E MTODOS (0,2): Listar os materiais sumarizados no roteiro de cada aula e quanto ao mtodo,
registrar neste item os procedimentos adotados durante as aulas para a obteno dos resultados observados.
-RESULTADOS (0,6): Registro dos resultados observados durante a aula (duas pginas no mximo).
-DISCUSSO (1,0): Registro das explicaes de sua equipe para os fatos observados no item anterior
RESULTADOS, que dever ser fundamentado em literatura (duas pginas no mximo).
-REFERNCIAS BIBLIOFRFICAS (0,2): Indicao dos textos consultados pela equipe para a elaborao do
relatrio, conforme o arquivo Normalizacao_de_referencias_abnt.pdf (Nmero de pginas indeterminado).
Obs.: O total de pginas de cada sesso no relatrio poder variar, desde que o relatrio no total no
ultrapasse 5 (mais ou menos uma pgina). Os relatrios discrepantes neste quesito no sero
considerados para avaliao.
Os estudos de casos clnicos em formato PBL abordaro temas atuais visando a interface Biologia Celular
e Molecular e Medicina, aprofundando o entendimento da organizao e funcionamento das clulas,
atravs da apresentao e discusso de casos pelos alunos. A atividade ser realizada em grupos de
cinco a seis alunos definidos no primeiro dia de aula pratica (os grupos sero os mesmos formados para a
construo do relatrio de aula pratica de endocitose).
OBJETIVOS:
PROCEDIMENTO:
1) Os casos clnicos sero distribudos pelos professores no moodle.
2) A apresentao dever ser planejada para o tempo mximo de 30 minutos, com mais 20 minutos para
discusso.
2.1) A apresentao dever ser objetiva e contemplar a aplicao dos fundamentos da Biologia Celular e
Molecular ao problema mdico indicado no caso clnico.
AVALIAO:
A nota desta atividade ser composta por: (1) Nota dada ao material utilizado para a exposio do caso clnico
(0,5 ponto). Ex.: Qualidade e contedo das figuras, grficos, vdeos e outros recursos. (2) Nota individual
considerando a relevncia e abrangncia do contedo apresentado pelo aluno (1,5 pontos) e (3) Auto-avaliao
(0,5 ponto).
24
INTRODUO:
Em 1830, Matthias Schleiden e Theodore Schwann sugeriram que as clulas constituam a unidade fundamental
da vida. Essa primeira idia sobre a teoria celular foi baseada em observaes realizadas com um microscpio
ptico um tanto primitivo. Os biologistas celulares modernos dispem de ferramentas mais eficazes para revelar a
arquitetura celular. Por exemplo, variaes do microscpio de luz convencional permitem que os cientistas vejam
objetos que eram indetectveis dcadas atrs. (Lodish et al., 2005)
OBJETIVOS:
1. Identificar os componentes principais de um microscpio ptico.
2. Realizar o procedimento padro para a focalizao de um objeto.
3. Identificar fatores que interferem na resoluo do aparelho.
4. Aplicar procedimentos para a conservao do microscpio.
5. Comparar diferentes tipos de microscpios.
6. Estabelecer relaes entre as unidades de medida utilizadas em microscopia.
7. Discutir a relevncia da microscopia na biologia celular.
MATERIAL:
Microscpio
Conta-gotas
Estilete
Lmina de barbear
Papel de filtro
Letra digitada
Lminas
Linhas de costura
Lamnulas
PROCEDIMENTO:
Leia o captulo 1 (pgs. 20 a 28) do livro: A clula: uma abordagem molecular (Cooper e Hausman,
2007). Siga as orientaes do professor para identificar os componentes principais do microscpio ptico e, em
equipe, realize os procedimentos sugeridos.
1. Identificando os componentes principais do microscpio ptico
O microscpio ptico composto assim chamado porque utiliza dois sistemas de lentes: as objetivas, que
produzem a imagem ampliada e as oculares, que a amplia mais.
Os sistemas objetiva e ocular do microscpio composto so combinaes elaboradas de partes individuais
adaptadas umas s outras, segundo uma frmula determinada, cujo propsito proporcionar a melhor imagem do
objeto examinado. Para saber qual o aumento proporcionado pelo microscpio basta multiplicar o nmero gravado
na ocular pelo nmero gravado na objetiva. Esses nmeros indicam quantas vezes aquela lente aumenta a
imagem do objeto observado.
Tambm integram a parte ptica do microscpio composto a FONTE DE ILUMINAAO (espelho ou
lmpada eltrica), o CONDENSADOR (curto tubo metlico que contm um sistema de lentes convergentes que,
ao ser atravessado pelos raios luminosos, projeta um cone de luz sobre a preparao), o DIAFRAGMA (pea
situada abaixo do condensador que gradua a quantidade de raios luminosos que atingiro a preparao) e
FILTROS.
26
1.
2.
3.
Mesa ou platina
4.
Charriot
5.
7.
Presilha ou Valete
Parafusos
macro
micromtricos
Revlver
8.
Tubo ou canho
6.
Parte ptica
Fonte de luz
9.
Diafragma
10.
11.
Condensador
12.
13.
Objetivas
Oculares
As principais unidades de medida usadas para mensurar clulas e seus componentes so o micrmetro (m) e
o nanmetro (nm). Medidas usadas em microscopia:
- milmetro (mm)= 1/1000 m
BIBLIOGRAFIA:
COOPER, G. M.; HAUSMAN, R. E. A Clula: uma abordagem molecular. 3.ed. Porto Alegre: Artmed. 2007.
-ORIENTAES PARA O ESTUDO: Aps a leitura do texto indicado no captulo 1 (pgs. 20 a 28) do livro: A
clula, uma abordagem molecular (Cooper e Hausman, 2007), considerando tcnicas e instrumentos de
microscopia, registre no relatrio a discusso de sua equipe para as seguintes questes:
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
28
-INTRODUO:
Muitos organismos, como bactrias, amebas e leveduras, so constitudos de clulas isoladas que so
capazes de se replicar independentemente. Oganismos mais complexos so compostos de uma coleo de
clulas que funcionam de uma maneira coordenada, com diferentes clulas especializadas para realizar uma
funo determinada. O corpo humano, por exemplo, composto por mais de 200 tipos de clulas diferentes, cada
uma especializada para funes distintas, como memria, viso, movimento e digesto. A diversidade exibida por
esses vrios diferentes tipos de clulas surpreendente; considere, por exemplo, as diferenas entre as bactrias
e as clulas do crebro humano. (Cooper e Hausman, 2007).
-OBJETIVOS:
1. Observar diferentes tipos de clulas ao microscpio ptico.
2. ldentificar diferenas entre as clulas observadas.
3. Discutir a diversidade celular em organismos pluricelulares.
-MATERIAL:
Microscpio ptico
Lminas permanentes
Conta-gotas
Lminas e lamnulas
Papel de filtro
PROCEDIMENTO:
Leia o captulo 1 (pgs. 8 a 15) do livro: A clula: uma abordagem molecular (Cooper e Hausman,
2007).
1.1.2.
1.2. Macrfagos
1.2.1.
1.2.2.
2.
1.3.1.
1.3.2.
1.3.3.
1.3.4.
1.3.5.
1.3.6.
1.3.7.
1.3.8.
- BIBLIOGRAFIA:
COOPER, G. M.; HAUSMAN, R. E. A Clula: uma abordagem molecular. 3.ed. Porto Alegre: Artmed. 2007.
30
-INTRODUO:
A gua tende a atravessar uma membrana semipermevel de uma soluo de baixa concentrao de
soluto para uma de alta concentrao, um processo denominado osmose, ou fluxo osmtico.
As bicamadas de fosfolipdeos puras so praticamente impermeveis gua, mas a maioria das
membranas celulares contm protenas de canal de gua que facilitam o movimento rpido da gua para dentro e
para fora das clulas.
O movimento da gua atravs da membrana citoplamtica tambm determina o volume particular de cada
clula, o qual deve ser regulado para evitar danos clula (LODISH et al., 2005).
- OBJETIVOS:
1. Analisar, microscopia ptica, o efeito da alterao da osmolaridade do meio sobre clulas vegetais.
2. Discutir os resultados observados de acordo com o modelo do mosaico fluido.
3. Identificar a propriedade da membrana plasmtica evidenciada pelo experimento realizado.
4. Identificar processos celulares que envolvem a participao de aquaporinas.
- MATERIAL:
Ramo de Rhoeodiscolor.
Vidro de relgio.
gua destilada.
Pincel.
Dois conta-gotas.
Lmina de barbear.
Lminas e lamnulas.
Papel de filtro.
Microscpio.
- PROCEDIMENTO:
1. Com uma lmina de barbear, corte um fragmento da epiderme dorsal da folha de Rhoeodiscolor e coloque
em um vidro de relgio com gua destilada.
2. Coloque no centro de uma lmina, uma gota de gua destilada e o fragmento da epiderme da folha. Cubra
com a lamnula.
3. Leve a lmina ao microscpio e observe com as objetivas a seco.
4. Desenhe o que foi observado.
5. Mantendo a lmina focalizada, coloque um pedao do papel de filtro junto a uma das bordas da lamnula
para retirar a gua da preparao; ao mesmo tempo, coloque uma gota de soluo salina junto borda do
lado oposto.
6. Observe o que acontece com as clulas e registre num desenho.
7. Usando um novo pedao de papel de filtro, troque a soluo salina por gua destilada, de acordo com o
tem 5. Repita o processo para ter certeza de que a soluo salina foi realmente retirada. Faa novas
observaes.
- BIBLIOGRAFIA:
ALBERTS, B., JOHNSON, A., LEWIS, J., RAFF, M., ROBERTS, K., WALTER, P. Biologia molecular da clula.
Trad. de Ana Letcia de Souza Vanz et al. 5 ed. Porto Alegre: Artmed. 2010. 1396 p. Il.
LODISH, H.; BERK, A.; MATSUDAIRA, P.; KAISER C.A.; KRIEGER, M.; SCOTT, M.P. Biologia celular e
molecular. Trad. de Ana Leonor Chies Santiago-Santos. 5 ed. Porto Alegre: Artmed. 2005. 1054 p. il.
- ORIENTAES PARA O ESTUDO:
1. Explique as modificaes sofridas pelas clulas quando colocadas em solues de diferentes
concentraes a partir do movimento da gua atravs da membrana plasmtica.
2. Discuta os mecanismos envolvidos na regulao da osmolaridade em clulas animais e vegetais.
3. Analise o transporte de gua atravs da membrana plasmtica, enfatizando o papel das aquaporinas.
4. Descreva, em seres humanos, um processo fisiolgico que envolve a participao de aquaporinas.
32
- INTRODUO:
O termo endocitose foi cunhado por Christian deDuve em 1963 para incluir tanto a ingesto de grandes
partculas (como bactrias) como a captao de fluidos ou macromolculas em pequenas vesculas (COOPER e
HAUSMAN, 2007).
- OBJETIVOS
1. Interpretar resultados experimentais com base em mecanismos celulares relacionados com a
internalizao de substncias.
2. Relacionar a membrana plasmtica com o sistema de endomembranas em vias celulares de internalizao
de material extracelular.
- MATERIAL
02 conta gotas
01 becker de 50 ml
01 basto de vidro
01 colher pequena
Etiquetas
01 caixa de fsforos
01 pipeta de 10,0 ml
Lamparina lcool
01 pipeta de 5,0 ml
- PROCEDIMENTO:
Para alcanar os objetivos propostos, siga os passos seguintes:
1. Ponha 1,0 ml de vermelho neutro em tubo de ensaio e coloque soluo de bicarbonato de sdio, gota a
gota, at que haja mudana de colorao. Anote o observado.
2. Em outro tubo de ensaio, repita a operao substituindo a soluo de bicarbonato por cido clordrico.
Anote o resultado.
3. Coloque 15,0 ml da soluo de bicarbonato de sdio no tubo de ensaio maior (15 x 2).
4. Acrescente uma colher pequena de fermento granulado (levedura).
5. Adicione, gota a gota, 2,0 ml de vermelho neutro, observando a colorao. Anote suas observaes.
6. Em seguida, com o auxlio de um basto de vidro, proceda a homogeneizao do contedo do tubo de
ensaio e anote os novos fatos.
7. Numere outros tubos de ensaio de 1 a 6.
8. Distribua 2,0 ml da mistura, obtida no procedimento 6, nos tubos de ensaio 1, 3, 4, 5 e 6.
9. Filtre o contedo do tubo 1 no tubo 2, utilizando um pequeno filtro de papel. Anote o observado.
10. Aquea o contedo do tubo 3. Anote o observado.
11. Acrescente, nos tubos 4, 5 e 6, respectivamente, 1mI de: hidrxido de sdio (0,01 M), hidrxido de
potssio (0,01 M) e hidrxido de amnia (5 %). Anote os resultados.
34
-INTRODUO:
Todas as clulas eucariticas possuem um esqueleto interno denominado citoesqueleto, que dota as
clulas de uma forma, de capacidade de movimento, habilidade de arranjar as organelas e transport-las de uma
parte outra da clula. Os filamentos de actina permitem clulas eucariticas individuais rastejar. Os microtbulos
so os principais geradores de fora em clios e flagelos, que servem como instrumento de propulso. Os
filamentos de actina e microtbulos so tambm essenciais para o movimento interno que ocorre no citoplasma de
todas as clulas eucariticas.Tais estruturas datam dos primeiros estgios da evoluo, por serem encontradas
quase inalteradas na maior parte dos eucariotos. (Alberts et al., 1995, adaptado)
- OBJETIVOS:
5.
6.
7.
8.
- MATERIAL:
Clara de ovo.
Lminas e lamnulas.
Ramos de Elodea.
Soluo de lugol.
Papel absorvente.
Microscpio.
- PROCEDIMENTO:
1. Observao do movimento flagelar em Tetrasselmis.
1.1.Colocar uma gota da cultura de Tetrasselmis em uma lmina limpa e recobr-la com lamnula;
1.2.Observar ao microscpio usando as objetivas a seco e registrar os resultados;
1.3.Repetir a observao adicionando ao material uma gota de lugol;
1.4.Focalizar a preparao usando, respectivamente, as objetivas a seco; substituir a objetiva de maior
aumento a seco pela objetiva de imerso e examinar a preparao. Registrar a observao.
2. Observao do movimento ciliar em protozorios.
2.1.Colocar sobre a lmina uma gota da cultura de protozorios e recobr-la com uma lamnula.
Particularmente buscamos encontrar o Paramecium (Figura 1), mas outros microorganismos podem ser
encontrados nas preparaes.
2.2.Observar ao microscpio utilizando sucessivamente as objetivas a seco, e registrar as observaes.
2.3.Repetir os procedimentos dos tens2.1 e 2.2 adicionando ao material uma pequena quantidade de clara de
ovo.
2.4.Repetir os procedimentos dos tens2.1 e 2.2 adicionando uma gota de lugol suspenso de protozorios.
Examinar o material usando objetiva de imerso.
2.5.Repetir os procedimentos dos itens 2.1 e 2.2 adicionando a cada lmina, respectivamente, uma gota de
vermelho neutro e uma gota de azul de metileno. Examinar o material e registrar os resultados.
36
Figura 1. Parameciumsp.
3. Observao de ciclose em Elodea.
3.1.Colocar sobre uma lmina limpa uma gota de gua e nela imergir uma pequena folha retirada de um ramo
da Elodea;
3.2.Focalizar a preparao usando sucessivamente as objetivas a seco e registrar as observaes.
- BIBLIOGRAFIA:
ALBERTS, B., JOHNSON, A., LEWIS, J., RAFF, M., ROBERTS, K., WALTER, P. Biologia molecular da clula.
Trad. de Ana Letcia de Souza Vanz et al. 5 ed. Porto Alegre: Artmed. 2010. 1396 p. Il.
- ORIENTAES PARA O ESTUDO:
1.
Que estruturas celulares esto relacionadas com a motilidade de Tetrasselmis e de protozorios,
respectivamente? Descreva estas estruturas considerando componentes do citoesqueleto.
2.
Que estruturas celulares foram evidenciadas com a utilizao de vermelho neutro e de azul de metileno?
3.
Relacione os movimentos intracelulares observados nas clulas de Elodea com componentes do
citoesqueleto.
4.
- INTRODUO:
A expresso impresso digital do DNA foi utilizada para fazer aluso ao uso tradicional das impresses
digitais como caractersticas exclusivas de identificao de seres humanos. No entanto, enquanto as impresses
digitais clssicas analisam uma caracterstica fenotpica, a tipagem de DNA analisa diretamente a informao
genotpica. Quando realizados de maneira correta, os testes baseados em DNA podem fornecer evidncias
positivas da identidade de um indivduo.
O pesquisador britnico Alec Jeffreys foi o primeiro a perceber que os polimorfismos de DNA poderiam ser
utilizados para o estabelecimento da identidade de um indivduo humano. Ele cunhou a expresso impresses
digitais de DNA e foi o primeiro a usar os polimorfismos de DNA em testes de paternidade, casos de imigrao e
assassinatos (MICKLOS et al., 2005).
- OBJETIVOS
1. Relacionar os minissatlites com a tcnica de impresso digital do DNA.
2. Identificar recursos materiais necessrios tcnica.
3. Descrever os passos bsicos da tcnica de impresso digital do DNA.
4. Analisar situaes-problema a partir da interpretao de resultados em gel.
5. Analisar aplicaes da tcnica de impresso digital do DNA.
- ANLISE DE SITUAES-PROBLEMA:
1. A auto radiografia abaixo foi utilizada em um caso criminal no qual o ru era acusado de ter esfaqueado
mortalmente uma jovem mulher. As linhas contm as seguintes fontes:
1, 2, 3, 9 e 10 - amostras de DNA controle; 4 - sangue do ru; 5 mancha de sangue na cala do ru; 6 e 7
mancha de sangue na camisa do ru; e 8 sangue da vtima.
Analise os padres de bandas e discuta suas concluses sobre o caso (KARP, 2005).
38
Localize, nos dois segmentos de DNA de cada pessoa, todas as sequencias de corte e faa um trao
horizontal de modo a separar os pares C-G/C-G.
b)
Organize os fragmentos obtidos por ordem de tamanho. Para isso conte o nmero de pares de bases de
cada fragmento e preencha o grfico que representa um gel. Cada coluna do grfico simula o padro
eletrofortico de uma pessoa.
c)
d)
- BIBLIOGRAFIA:
KARP, G. Biologia celular e molecular: conceitos e experimentos. 3. ed. Barueri: Manole. 2005. 786 p. il.
LODISH, H.; BERK, A.; MATSUDAIRA, P.; KAISER C.A.; KRIEGER, M.; SCOTT, M.P. Biologia celular e
molecular. Trad. de Ana Leonor Chies Santiago-Santos. 5 ed. Porto Alegre: Artmed. 2005. 1054 p. il.
MICKLOS, D. A., FREYER, G. A., CROTTY, D. A. A cincia do DNA. 2 ed. Porto Alegre: Artmed. 2005.
- ORIENTAES PARA O ESTUDO: Aps a leitura do livro de LODISH et al., 2005 (p. 407 a 409), discuta as
seguintes questes:
3. Justifique as diferenas existentes nos minissatlites de indivduos da mesma espcie.
4. Comente as solues para as situaes-problema propostas.
5. Discuta aplicaes e limitaes dessa tcnica.
P1
P2
P3
P4
P5
Ca
Cb
Ca
Cb
Ca
Cb
Ca
Cb
Ca
Cb
C-G
C-G
A-T
T-A
T-A
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A-T
A-T
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C-G
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C-G
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T-A
G-C
G-C
40
- INTRODUO:
O ncleo de uma clula em intrfase contm fibras cromatinicas tremendamente grandes. O estado
estendido da cromatina interfsica ideal para os processos de transcrio e replicao, mas no para a
segregao em duas clulas-filhas. Antes de segregar seus cromossomos, a clula os converte em estruturas
mais curtas e grossas atravs de um processo notvel de compactao cromossmica (ou condensao
cromossmica), que ocorre durante a prfase inicial. (Karp, 2005).
- OBJETIVOS:
1. Identificar diferentes etapas da diviso celular com base na organizao e distribuio dos cromossomos.
2. Observar diferentes graus de compactao do material gentico.
3. Observar a estrutura de cromossomos metafsicos.
4. Analisar caritipos humanos.
- MATERIAL:
Razes de cebola
Pina
Lamparina a lcool
Esmalte incolor
Lmina de barbear
Papel de filtro
Microscpio
Orcena actica
Vidros de relgio
Lminas e lamnulas
Estilete
Papel de filtro
- PROCEDIMENTO:
1. MITOSE EM RAIZ DE CEBOLA
1.1.Cortar cerca de 3 mm da extremidade da raiz da cebola.
1.2.Colocar os fragmentos em um vidro de relgio, mergulhando-os em orcena actica recm filtrada.
1.3.Aquecer o material, com o apoio de um pegador de madeira, evitando ferver em demasia.
1.4.Colocar uma gota de orcena fria sobre uma lmina.
1.5.Transferir cada um dos fragmentos, previamente aquecido, para a lmina contendo orcena fria.
1.6.Corar por 3 minutos.
1.7.Cobrir a preparao com lamnula e, com o auxlio de um pequeno basto, esmagar o material, de
maneira a dissociar as fibras, sem danificar as clulas.
1.8.Retirar o excesso de orcena com papel de filtro.
1.9.Observar a preparao ao microscpio com as objetivas de menor, mdio e maior aumento, para
identificar clulas em diferentes fases do ciclo celular.
2. CARITIPO HUMANO
A tcnica para obteno de caritipo humano segue os seguintes passos: (1) Coleta de sangue, (2)
Cultivo das clulas em meio de cultura apropriado (para obteno de clulas em diviso), (3) Tratamento das
clulas com colchicina (age sobre o fuso mittico parando a diviso na metfase e mantendo os cromossomos
espalhados), (4) Colorao das clulas com corantes bsicos (reagem com a cromatina que cida), (5) Preparo
de lminas, (6) Anlise ao microscpio (procurando-se metfases com bom espalhamento) Na figura abaixo as
setas indicam algumas metfases, entre muitas outras clulas em intrfase, (7) Fotografia e (8) Montagem do
caritipo. Como uma simulao da montagem do caritipo humano execute as seguintes tarefas:
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Algumas tcnicas de anlise cromossmica revelam marcas diferenciadas ao longo da cromatina permitindo
identificar os cromossomos, como mostrado no caritipo abaixo. Esta tcnica chamada de bandeamento G e
revela pores heterocromticas dos cromossomos.
Identifique cada grupo de cromossomos com base no caritipo organizado na pgina seguinte.
Recorte cada um dos cromossomos da metfase em anexo e agrupe-os de acordo com seu
tamanho e posio do centrmero.
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___________________________________
1
2
A
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45
B
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6 12 e X
C
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13 15
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16
17
18
___________________________________
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19 20
21 22 e Y
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