ARTIGO DE REvISO

REvIEW ARTICLE

Inuncia de Processos Redox na Resposta Inamatria da Artrite Reumatide

Redox Inuence on the Inammatory Response in Rheumatoid Arthritis
Lidiane Isabel Filippin(), Rafael Vercelino(2), Norma Possa Marroni(), Ricardo Machado Xavier(4)

RESUMO
As espcies reativas de oxignio (ROS) so produzidas, essencialmente, durante a fosforilao oxidativa e por ativao de clulas fagocticas durante uma exploso oxidativa. A produo excessiva de ROS pode levar ao dano em lipdeos, protenas, membranas e cidos nuclicos e tambm serve como um importante sinalizador intracelular que amplica respostas inamatrias. Inmeros estudos demonstram o envolvimento de ROS na patognese das artropatias crnicas inamatrias, como a artrite reumatide. Acredita-se que as ROS possam atuar como segundos mensagei ros para ativao do fator de transcrio nuclear kappa-B que orquestra a expresso de vrios genes que perpetuam a resposta inamatria. Portanto, o conhecimento da complexa interao entre essas vias poderia ser til para desenvolver novas estratgias teraputicas para a artrite reumatide. Palavras-chave: inamao, estresse oxidativo, artrite reumatide.

ABSTRACT
Reactive oxygen species (ROS) are produced mainly during the oxidative phosphorylation and by activated phagocytic cells during oxidative burst.The excessive production of ROS can damage lipids, protein, membrane and nucleic acids. They also serve as important intracellular signaling that amplify the inammatory response. A lot of studies have demonstrated an role of ROS in the pathogenesis of inammatory chronic artropathy, such as rheumatoid arthritis. It is known that an ROS can function as a second messenger to stimulate nuclear factor kappa-B that orchestrate the expression of a spectrum of genes that perpetuate an inammatory response. Therefore, an understanding of the complex interactions between these pathways might be useful for the development of novel therapeutics strategies for rheumatoid artritis. Keywords: inammation, oxidative stress, rheumatoid arthritis.

INTRODUO
Espcies reativas de oxignio (ROS) so produzidas nas clulas por diversos estmulos siolgicos e ambientais, tais como infeces, radiaes UV e poluentes, os quais so coletivamente chamados de oxidantes. Curiosamente, as ROS tambm so consideradas como fatores de risco e aceleradores de doenas auto-imunes(1), visto que existe uma estreita relao entre o estresse oxidativo e essas doenas(2). A artrite reumatide (AR) uma doena sistmica inamatria de etiologia auto-imune e caracterizada basicamente por sinovite crnica, simtrica e erosiva, preferencial-

mente de articulaes perifricas. A maioria dos pacientes apresenta o auto-anticorpo fator reumatide reagente(3,4). A AR tem prevalncia de aproximadamente 0,46% na populao brasileira(5) e 1% na populao mundial(6). Na tentativa de esclarecer a etiologia da AR, pesquisas sugerem fatores genticos, defeitos na imunorregulao e mecanismos levando ao dano tecidual, incluindo o estresse oxidativo(7). A denio clssica de estresse oxidativo um desequilbrio entre pr-oxidantes e antioxidantes em favor do proxidante(8). No entanto, esse conceito vem se adaptando s recentes descobertas as quais demonstram que as ROS

Recebido em 28/9/2007. Aprovado, aps reviso, em 02/12/2007. Declaramos que os autores Lidiane Isabel Filippin, Rafael Vercelino e Norma Possa Marroni no apresentam conitos de interesse. O autor Ricardo Machado Xavier declara honorrios de consultoria dos laboratrios Wyeth e Schering-Plough e verba de pesquisa dos laboratrios Abbott e Roch. Servios de Reumatologia e Servio de Patologia Clnica do Hospital de Clnicas de Porto Alegre (HCPA), Faculdade de Medicina, Universidade Federal do Rio Grande do Sul (UFRGS). Agncia Financiadora: Coordenao de Aperfeioamento de Pessoal de Ensino Superior (Capes), Fundo de Incentivo a Pesquisa e Eventos (Fipe). 1. Fisioterapeuta, doutoranda do Programa de Ps-Graduao em Cincias Mdicas da Faculdade de Medicina da UFRGS. 2. Fisioterapeuta, doutorando em Fisiologia Humana pela UFRGS. 3. Professora titular, Ph.D. em Fisiologia, coordenadora do Laboratrio de Hepatologia Experimental e Fisiologia do Hospital de Clnicas de Porto Alegre (HCPA/ UFRGS), professora do Programa de Ps-Graduao em Toxicologia e Biologia Molecular da Universidade Luterana do Brasil. 4. Professor adjunto, Ph.D. em Imunologia, mdico reumatologista do Servio de Reumatologia do HCPA/UFRGS, coordenador do Laboratrio de Biologia Molecular e Doenas Auto-Imunes e Infecciosas do HCPA. Endereo para correspondncia: Ricardo Machado Xavier, Servio de Reumatologia do Hospital de Clnicas de Porto Alegre, Rua Ramiro Barcelos, 2.350, sl. 645, CEP 90035-003, Porto Alegre, RS, e-mail: rmaxavier@hcpa.ufrgs.br
Rev Bras Reumatol, v. 48, n.1, p. 17-24, jan/fev, 2008

17

Filippin e cols.

podem atuar como segundos mensageiros de vias especcas na sinalizao celular(9-11). Esses dois conceitos tm sido recentemente incorporados dentro de uma nova denio: um desequilbrio entre oxidantes e antioxidantes em favor dos oxidantes, levando a um desarranjo da sinalizao e do controle redox e/ou a um dano molecular(9). O objetivo desta reviso relatar a participao das espcies ativas de oxignio da sinalizao redox na siopatologia da artrite reumatide.

FISIOPATOLOGIA DA AR
A patologia da sinovite reumatide caracteriza-se fundamentalmente por proliferao da membrana sinovial e eroso subseqente da cartilagem articular e do osso subcondral. Embora se desconhea o evento desencadeador, parece envolver alguma estimulao antignica especca de linfcitos T suscetveis que expressam as molculas de MHC apropriadas. Isto resulta em proliferao das clulas T e B, estimulao da proliferao de vasos sangneos na membrana sinovial, acmulo de clulas inamatrias, incluindo leuccitos polimorfonucleares, proliferao de clulas sinoviais e desenvolvimento de um pannus invasivo de rpido crescimento. Este ltimo cresce de modo quase semelhante a um tumor benigno, invade a cartilagem, ativa os condrcitos e libera enzimas proteolticas que degradam a cartilagem e o osso, resultando, por m, em eroses e destruio articular(12). Na sinovite, as clulas inamatrias respondem com incremento na produo de prostaglandinas, citocinas e intensa formao de espcies reativas de oxignio e radicais livres (RLs). Isso leva ao estresse oxidativo, que rapidamente amplica o processo inamatrio, causando destruio articular, edema e dor(13,14). Estudos demonstram que embora a caracterstica persistente seja a inamao, a gerao de altos nveis de radicais livres na articulao inamada e os nveis decitrios dos sistemas antioxidantes esto envolvidos na AR(15).

A excessiva formao endgena de radicais livres pode ser causada por: (1) ativao aumentada de fagcitos; (2) interrupo dos processos normais de transferncia de eltrons na cadeia respiratria mitocondrial; (3) aumento da concentrao de ons metlicos de transio por escape do grupamento heme de protenas em locais de leso ou doenas metablicas; e (4) por nveis diminudos das defesas antioxidantes. Entretanto, torna-se difcil determinar se na doena humana os radicais livres so a causa ou potencializam o dano patolgico(18-20). Por outro lado, as espcies reativas de oxignio so reconhecidas como importantes sinalizadoras intracelulares e esto envolvidas na regulao redox no interior das clulas do sistema imune(20-22). Sabe-se que clulas fagocitrias, como macrfagos e neutrlos, so ativadas sob condies oxidativas. Essa ativao mediada pelo sistema da NADPH oxidase que resulta um marcado incremento no consumo de oxignio e conseqente produo de nion superxido(16). A ativao da NADPH oxidase pode ser induzida por lipopolissacardeos (LPS), lipoprotenas e citocinas, como inteferon-gama (IFN-), interleucina-1 beta (IL-1) e fator de necrose tumoral alfa (TNF-)(19, 23) (Figura 1).

LPS, IL-1b, TNF-a

L-arginina

Meio intracelular NOS NOS

ONOOdepleo -SH GSSH/GSH + IKK

IkBa p50

Meio extracelular

+ NADPHox Ac Araquidnico Cadeia transporte eltrons

O2SOD

LPS, IL-1b, TNF-a +

H2O2 Fe2+ GAT/GPx peroxissomos Fenton H2O + O2 HO Feedback IkBa

P
p65

Fe
p50 p65

dano membranas bases de DNA

lpideos protena

ncleo

Sobrevivncia celular

Proliferao celular

Citocinas inamatrias COX-2 cPLA IL-1b iNOS TNF-a 2

GERAO DAS ESPCIES REATIVAS DE OXIGNIO

As espcies reativas de oxignio, tais como nion superxido (O2-), perxido de hidrognio (H2O2), nion radical hidroxil (HO) e outros, podem ter origem endgena e exgena. As principais fontes endgenas de gerao de ROS so peroxissomos, NADPH oxidase, xantina oxidase, mitocndria e citocromo P-450. Como vias exgenas, podem ser citadas radiao-, cigarro e solventes orgnicos(16,17). 18

O2- = radical nion superxido; H2O2 = perxido de hidrognio; HO = radical hidroxila; SOD = enzima endgena superxido dismutase; CAT = enzima endgena catalase; GPx = enzima endgena glutationa; L = arginina enzima precursora do xido ntrico; NO = xido ntrico; NOS = xido ntrico sintase; ONOO- = peroxinitrito; -SH = grupamento suldrila; GSSH/GHS = relao glutationa oxidada/ reduzida; IKK = inibidor kappa quinase; IB = inibidor kappa B; P = fosforilao; cPLA2 = fosfolipase A2 citoslica; COX2 = ciclooxigenase 2; iNOS = xido ntrico sintase induzvel; LPS = lipopolissacardeos; TNF- = fator de necrose tumoral alfa; IL-1 = interleucina 1 beta. Figura 1 Formao das espcies ativas de oxignio e nitrognio (canto superior esquerdo), alvos dessas espcies reativas (canto inferior esquerdo), relao das ROS com a ativao do NF-B e transcrio de citocinas pr-inamatrias ( direita).
Rev Bras Reumatol, v. 48, n.1, p. 17-24, jan/fev, 2008

Inuncia de Processos Redox na Resposta Inamatria da Artrite Reumatide

O nion superxido convertido em perxido de hidrognio espontaneamente e pode ser catalisado pela enzima superxido dismutase (SOD). Essa enzima possui duas isoformas denominadas cobre-zinco-SOD e mangans-SOD, uma constitutiva e outra induzvel, respectivamente(16). Em presena de ons ferro (Fe2+) ou outros metais de transio, o superxido e o perxido de hidrognio so convertidos, via reao de Fenton, a radical hidroxil (HO), que provavelmente responsvel pela toxicidade celular associada s ROS(22). Quando formado o HO, ele rapidamente reagir com a molcula mais prxima, que pode ser com lipdeos, protenas ou bases de DNA. Isso acontece porque a taxa constante de reao do radical hidroxil bastante alta quando comparada s outras espcies reativas (k >109 M-1s-1)(22). O nion superxido pode reagir com xido ntrico formando o peroxinitrito (ONOO-), uma espcie reativa de nitrognio. A adio de ONOO- s clulas, aos tecidos e aos uidos corporais leva rpida protonao, podendo resultar: depleo de grupos-SH e outros antioxidantes, oxidao e nitrao de lipdeos, quebra de DNA, nitrao e desaminao de bases de DNA (especialmente a guanina)(19,22). A nitrao em resduos de tirosina amplamente usada como um biomarcador da gerao de ONOO- in vivo. Neste sentido, tem sido considerada como um importante instrumento para estudo do estresse nitrosativo em doenas humanas, ainda que no seja um biomarcador especco para ONOO-(22). Dentre os radicais de oxignio e nitrognio, o ONOO- capaz de depletar os grupamentos -SH e com isso alterar o balano redox da glutationa no sentido do estresse oxidativo. Esse desequilbrio no estado redox da glutationa induz por regulao redox(23) o inibidor kappa quinase (IKK) a fosforilar o inibidor kappa-B (IB), possibilitando a translocao do fator de transcrio nuclear kappa-B (NF-B) para dentro do ncleo, levando transcrio de diversos mediadores inamatrios (Figura 1). Se por um lado altas concentraes de ROS esto envolvidas na ativao do NF-B com a manuteno do processo inamatrio(24), atuando como agente causal de dano a macromolculas, por outro, sugere-se que baixas concentraes de ROS participem na regulao de diferentes funes nas clulas eucariticas, tais como proliferao, biossntese de hormnios, quimiotaxia, exploso oxidativa, apoptose e outras(20). Atualmente, sabe-se que espcies reativas podem contribuir na ativao das caspases, tanto por via intra quanto extracelular, levando apoptose(22). Em modelos animais de
Rev Bras Reumatol, v. 48, n.1, p. 17-24, jan/fev, 2008

AR, a induo de apoptose em sinvia reumatide por anticorpo monoclonal anti-FAS ou transfeco gnica de FAS ligante (FasL) melhora a artrite por eliminar tanto as clulas sinovicitas proliferativas quanto as inltradas linfocitrias na sinvia inamada(25,26). Esses achados sugerem fortemente que a apoptose mediada por receptores extracelulares Fas pode ser um fator importante na siopatologia da AR(25), e o estresse oxidativo seria um mediador dessa ao.

Papel fisiolgico das espcies reativas de oxignio e das defesas antioxidantes As ROS participam em vrias funes siolgicas e so parte integrante na defesa contra microorganismos invasores. Elas so produzidas durante o metabolismo celular aerbico normal e tm papel importante na manuteno do estado celular redox(2,20). O desequilbrio no estado redox tem efeitos potencialmente deletrios sobre a biologia celular, anteriormente discutida. Por isso, existem vrios mecanismos antioxidantes envolvidos na proteo de clulas e organismos para um eventual dano causado por quantidades excessivas desses mediadores altamente reativos(27,28). Os antioxidantes so importantes para manuteno de nveis baixos de radicais livres e espcies reativas no-radicais derivadas de radicais. Essas enzimas incluem superxido dismutase, responsvel pela dismutao do nion superxido. A SOD possui duas isoformas, uma constitutiva e outra induzvel. Mangans-SOD (MnSOD) reside na mitocndria e induzvel por citocinas atravs da via do NF-B e outros co-fatores(22), E cobre-zinco-SOD constitutivo. Em eucariotos, localizam-se principalmente no citoplasma, mas tambm nos lisossomos, ncleo, espaos entre membrana interna e externa da mitocndria e peroxissomos(22). A glutationa peroxidase (GPx) e catalase (CAT) responsvel pela dismutao do perxido de hidrognio(19). A catalase reside na matriz do peroxissoma e, portanto, s capaz de degradar o H2O2 produzido na matriz e no o H2O2 produzido no ncleo do peroxissoma. O perxido de hidrognio produzido no ncleo transportado para o citoplasma por tbulos existentes no ncleo, onde a GTx far a degradao(29). A GPx degrada, alm do perxido de hidrognio, outros perxidos. a primeira defesa mitocondrial do perxido de hidrognio e regulada por p53 e por hipxia(30). Participam ainda desse sistema antioxidante as enzimas no-enzimticas provenientes da dieta, que incluem: vitamina E, betacaroteno, vitamina C e a glutationa, esta ltima
19

Filippin e cols.

considerada o antioxidante no-enzimtico hidrossolvel mais importante por participar de inmeras reaes de oxirreduo(20,27). A glutationa atua como co-fator para GPx e outras enzimas, est envolvida em muitos outros processos metablicos, incluindo o metabolismo do ascorbato, comunicao entre clulas, preveno da oxidao de grupos tiis de protenas e radioproteo. Sua principal contribuio na manuteno do estado redox da clula(22).

AVALIAO DO ESTRESSE OXIDATIVO

Atualmente, o uso de biomarcadores de estresse oxidativo pode fornecer uma relao entre o dano oxidativo, as macromolculas (DNA, lipdeos e protenas) e vrias doenas. A grande quantidade de testes, tanto in vivo quanto ex vivo, inclui mensuraes de oxidao de DNA, peroxidao lipdica e protenas(24). Um dos produtos mais estudados quando falamos em danos no DNA o produto nal da oxidao da guanina por radicais hidroxil, o 8-hidroxi-desoxiguanosina (8-OHdG). Ele um marcador de estresse oxidativo, isto , sua presena no organismo indica oxidao das bases do DNA. O teste cometa tambm utilizado como marcador de dano oxidativo no DNA, um mtodo bastante sensvel para mensurar quebras de clulas individuais e amplamente utilizado para deteco de dano de DNA causado por cncer, radiaes biolgicas e toxicologia ambiental(24). A peroxidao lipdica pode ocorrer por via enzimtica (ciclooxigenases e peroxidases) e por via no-enzimtica (auto-oxidao) e, desta forma, pode ser avaliada por diferentes mtodos dependendo da via de oxidao e do produto nal mensurado. O malondialdedo um produto secundrio da peroxidao lipdica por via enzimtica, derivado da -ruptura de cidos graxos poliinsaturados, tais como cido linolico, araquidnico e docosahexanico. As substncias reativas ao cido tiobarbitrico (TBA-RS) objetivam avaliar esse produto nal. Um teste mais especco formao do MDA a cromatograa lquida (HPLC), na qual as partculas so separadas e somente o MDA detectado(31). Um recente avano na investigao do estresse oxidativo foi o uso das isoprostanas como marcador da peroxidao lipdica. As isoprostanas so substncias produzidas in vivo, de maneira independente da enzima ciclooxigenase, pois se trata de ismeros produzidos por oxidao noenzimtica do cido araquidnico quando ainda estericado na membrana(32). Est estabelecido que a mensurao da isoprostana-F2 a abordagem mais convel para avaliar 20

o estado oxidativo in vivo, fornecendo uma importante ferramenta para explorar o papel do estresse oxidativo em fatores de risco em diversas doenas, tais como as doenas cardiovasculares, doena de Alzheimer, esclerose mltipla, asma, hepatite, arteriosclerose, esclerodermia, osteoporose e doena de Crohn(33,34). Por m, a oxidao de protenas tem grande importncia, pois com o dano oxidativo ocorrem fragmentao das cadeias e oxidao de quase todos os tipos de aminocidos, com produo freqente de compostos carbonilados, particularmente a partir de prolina, arginina e lisina. Essa modicao facilmente mensurvel(22). O contedo carbonlico de protenas amplamente utilizado como marcador de dano oxidativo em protenas, sob condies de estresse oxidativo. H diversas tcnicas para se medir a presena de grupo carbonila em protenas. O mtodo mais conveniente o espectrofotomtrico, com base na reao de DTNB com o grupo carbonila, que forma a hidrazona da protena(35).

EVIDNCIAS DO ESTRESSE OXIDATIVO NA AR

Na artrite reumatide, a perpetuao do processo inamatrio atribuda s citocinas pr-inamatrias, tais como o TNF- e IL-1, conhecidos iniciadores da cascata de ativao do NF-B(2). Assim sendo, ao mesmo tempo em que o TNF- participa positivamente na regulao do inibidor kappa quinase, permitindo que os dmeros do NF-B (pores p50 e p65) migrem para o ncleo, ligando-se aos promotores de genes pr-inamatrios(36), estimula a ativao da NADPH oxidase (Figura 1). A ativao do NF-B participa no somente da resposta inamatria, mas tambm da hiperproliferao sinovial na AR, indicando que atua como um determinante para a patognese da doena(25). Os radicais livres tm sido implicados como mediadores de dano tecidual na artrite reumatide, em conjunto com as citocinas pr-inamatrias. Experimentalmente, verica-se que a excessiva produo de ROS pode levar a uma acelerao no dano cartilagem articular e ativao de osteoclastos(37,38). Estudos com uido sinovial e tecidos na AR tm demonstrado dano oxidativo do cido hialurnico(39), aparecimento de produtos da lipoperoxidao(40), oxidao de lipoprotenas de baixa densidade (LDL)(41) e incremento carbonil por oxidao protica(42). Evidncias de dano
Rev Bras Reumatol, v. 48, n.1, p. 17-24, jan/fev, 2008

Inuncia de Processos Redox na Resposta Inamatria da Artrite Reumatide

oxidativo em cartilagem, colgeno extracelular e DNA tambm tm sido relatadas. Alm do dano dupla camada lipdica causado pelos radicais livres, j bem estabelecido, tem-se investigado o dano de DNA, um importante alvo para a injria oxidativa. Estudos avaliando o dano de DNA por intermdio do teste cometa em casos incidentes de artrite reumatide demonstram elevados nveis de dano, o qual estava relacionado com o incremento do estresse oxidativo e decrscimo da capacidade antioxidante total(4). Isso reitera as evidncias de associao entre o estresse oxidativo e o dano articular de pacientes reumticos. Jikimoto et al.(43) reportaram correlao entre atividade da doena e presena de estresse oxidativo em pacientes com artrite reumatide. Outros estudos demonstraram correlaes mais fracas(4). Parece que a correlao mais forte se d entre o dano de DNA e o ndice de estresse oxidativo, ou seja, a relao entre os nveis de oxidaes e da capacidade antioxidante {OSI = [(TOS, mol/L) / (TAS, mmol trolox equivalent/L) x 100]}(4). H relato demonstrado que as espcies ativas de nitrognio tm papel importante na cronicao da reao inamatria e destruio ssea e articular em pacientes com artrite reumatide, osteoartrite e lpus eritematoso sistmico(44). A formao de 3-nitrotirosina um marcador relativamente especco de dano nitrosativo mediado pelo xido ntrico. Khan e Siddiqui(44) sugeriram que existe uma crescente evidncia que o dano nitrosativo tem importante papel no estresse oxidativo da etiologia e patognese do lpus eritematoso sistmico. Nesse estudo foram avaliados anticorpos presentes no lquido sinovial de 60 pacientes com diagnstico de artrite reumatide (n = 30), osteoartrite (n = 15) e lpus eritematoso sistmico (n = 15). Foi sugerido que os radicais livres de nitrognio podem produzir inamao e que os nveis de 3-nitrotirosina tambm so correlacionados com a atividade da doena. A sntese de protenas do choque trmico (HSP), tambm conhecidas como protenas de estresse, pode ser desencadeada por exposio das clulas a metais pesados, agentes oxidantes, etanol e infeces. Algumas dessas protenas existem na forma constitutiva e outras aumentam drasticamente sob condies oxidativas(22,45). As HSPs inibem a ativao do NF-kB pela inibio do IKK pelas prostaglandinas ciclopentennicas (CP-PGs). Essas prostaglandinas so formadas pelo acmulo destas nos meios intra e extracelulares (Figura 2).
Rev Bras Reumatol, v. 48, n.1, p. 17-24, jan/fev, 2008

LPS, IL-1b, TNF-a

TNF-a, Fas, FasL,

D AD TR D FA

IKK +
IkBa p50

P
p65

+ Feedback +

ROS

Feedback IkBa ncleo

pr-caspases apoptose

Figura 2 Interao entre as ROS, citocinas inamatrias e receptores de morte celular. As ROS, assim como as citocinas inamatrias, ativam o IKK que dar incio cascata do NF-B, levando a clula a trs possibilidades: sobrevivncia celular, produo de citocinas inamatrias e proliferao celular. Podem tambm ativar pr-caspases, assim como os receptores extracelulares de morte, levando a clula apoptose. Interessantemente, a produo de citocinas inamatrias pelo NF-B libera cPLA2, que tem a funo de hidrolisar o cido araquidnico dos fosfolpides de membrana que, por sua vez, podem ser sintetizados por diferentes vias (COX, LOX e EPOX) em prostaglandinas. O acmulo de PGs no meio intracelular leva produo de prostaglandinas ciclopentennicas que podem inibir a fosforilao do IB bloqueando o processo. Da mesma maneira, atuam as HSPs.

Tratamento farmacolgico da ar e o estresse oxidativo Atualmente a droga de primeira escolha para o tratamento da artrite reumatide o metotrexato, agente antagonista do folato desenvolvido inicialmente para o tratamento de neoplasias malignas. Na AR, as doses empregadas so muito inferiores s analgsicas, e no se acredita que sua eccia no controle da doena esteja relacionada a essa ao antiproliferativa. Outros mecanismos tm sido propostos, incluindo a inibio da sntese dos compostos txicos espermina e espermidina e o acmulo extracelular de adenosina, a qual tem conhecida ao antiinamatria atuando por intermdio dos receptores de adenosina(46). J foi demonstrado tambm que o metotrexato capaz de suprimir, direta ou indiretamente, a gerao de metablitos ativos de oxignio induzida pela interleucina-6, produzida aps estmulo com TNF- nas clulas sinoviais da artrite reumatide(47), bem como em polimorfonucleares(48). Contudo, estudos sugerem que baixas doses de metotrexato induzem apoptose com envolvimento de ROS mais acentuada em linhagem de clulas linfcitos T do que moncitos(49).
21

p50

p65

pr-caspases

Sobrevivncia celular

Proliferao celular

Citocinas inamatrias COX-2 cPLA 2 AA IL-1b TNF-a

PGs pr-inamattias

PGs anti-inamattias (CP-PGs) HSP70

Filippin e cols.

Mais recentemente, agentes biolgicos (anticorpos monoclonais ou protenas recombinantes) com ao antagonista do TNF- demonstraram marcante eccia no controle dos sinais ogsticos e na progresso radiolgica da AR. Esses agentes no parecem atuar diretamente sobre a produo de radicais do oxignio, mas levam inibio da ativao e quimiotaxia dos neutrlos para o tecido sinovial, com conseqente reduo da gerao desses radicais(50). Estudos com inibidores de TNF-, etanercepte e iniximabe demonstraram reduo de marcadores de estresse oxidativo em pacientes com artrite reumatide. Nesse estudo foram avaliados 22 pacientes com AR e, alm dos parmetros de estresse oxidativo, foram avaliados parmetros laboratoriais e clnicos. Os resultados demonstraram queda importante dos parmetros oxidativos nos pacientes tratados com etanercepte por seis meses, as variveis em estudo apresentaram boa correlao com os dados clnicos, porm fraca correlao com dados laboratoriais(51). Recentes estudos epidemiolgicos tm demonstrado correlao inversa entre os nveis de exposio antioxidantes, analisados por um questionrio padronizado incluindo dados demogrcos, histria reprodutiva e mdica, uso de terapia hormonal, histria de fumo e outros fatores de estilo de vida e incidncia de artrite reumatide. Essas observaes levantam a hiptese de que alimentao balanceada e suplementao de antioxidantes poderiam proteger contra o desenvolvimento ou agravamento da doena, pois tem sido relatado que pacientes com artrite reumatide possuem

nveis mais baixos de antioxidantes, incluindo vitamina C, vitamina E, betacaroteno, selnio e zinco quando comparados com pacientes controles(49,52,53). Alm das espcies ativas de oxignio, as espcies ativas de nitrognio tambm tm sido investigadas em doenas reumatolgicas auto-imunes. Essa ligao d-se pela participao das EAN na ativao do NF-B, visto que a formao de peroxinitrito interfere no balano redox da glutationa. Esses estudos indicam que os doadores das EAN acarretam ativao e incremento do NF-B, do sistema proteoltico bem como a degradao de protenas especcas do msculo esqueltico(54,55).

CONCLUSO
As artropatias crnicas inamatrias, como a artrite reumatide, so caracterizadas por um complexo processo inamatrio progressivo e crnico, que envolve inmeros fatores de transcrio e sinalizadores moleculares. Numerosos trabalhos tm observado que existe uma relao entre o dano oxidativo, causado a lipdeos, protenas e DNA, e a manuteno do processo inamatrio dessa doena, bem como os efeitos inibidores das medicaes com ao anti-reumtica sobre os processos oxidativos. Entretanto, a natureza dessa relao ainda no foi bem determinada e requer mais estudos. Esse conhecimento tem um potencial importante para oferecer uma compreenso dos mecanismos de ao das terapias atuais e, principalmente, para o desenvolvimento de novas estratgias teraputicas.

REFERNCIAS

1. Avalos I, Chung CP, Oeser A, et al.: Oxidative stress in systemic lupus erythematosus: relationship to disease activity and symptoms. Lupus 16(3): 195-200, 2007. 2. Surh YJ: Oxidative Stress, Inammation, and Health. Packer L (ed.). Londres: Taylor & Francis, 2005. 3. Kinne RW, Bruer R, Stuhlmller B, et al.: Macrophages in rheumatoid arthritis. Arthritis Res 2(3): 189-202, 2000. 4. Altindag O, Karakoc M, Kocyigit A, et al.: Increased DNA damage and oxidative stress in patients with rheumatoid arthritis. Clin Biochem 40(3-4): 167-71, 2007. 5. Senna ER, De Barros AL, Silva EO, et al.: Prevalence of rheumatic diseases in Brazil: a study using the COPCORD approach. J Rheumatol 31(3): 594-7, 2004. 6. Lee DM, Weinblatt ME: Rheumatoid arthritis. Lancet 358(9285): 903-11, 2001.

7. Ozkan Y, Yardm-Akaydn S, Sepici A, Keskin E, Sepici V, Simsek B: Oxidative status in rheumatoid arthritis. Clin Rheumatol 26(1): 64-8, 2007. 8. Sies H: Oxidative Stress: Introdutory remaks. v.1. London: Academic Press, 1985. p. 1-8. 9. Jones DP: Disruption of mitochondrial redox circuitry in oxidative stress. Chem Biol Interact 163(1-2): 38-53, 2006. 10. Forman HJ, Fukuto JM, Torres M: Redox signaling: thiol chemistry denes which reactive oxygen and nitrogen species can act as second messengers. Am J Physiol Cell Physiol 287(2): C246-56, 2004. 11. Rosa RM, Roehrs R, Saf J, Henriques JAP: O papel da reparao de leses oxidativas induzidas no DNA na reduo do risco de desenvolvimento de cncer. In: Salvador M, Henriques JAP. (Orgs.). Radicais livres e a resposta celular ao estresse oxidativo. 1.ed. Canoas: Editora da Ulbra, 2004.

22

Rev Bras Reumatol, v. 48, n.1, p. 17-24, jan/fev, 2008

Inuncia de Processos Redox na Resposta Inamatria da Artrite Reumatide

12. Andreoli TE, Carpenter CCJ, Benett JC, Plum F: Medicina Interna Bsica. 4.ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 1997. p. 568-70. 13. Vignaud A, Cebrian J, Martelly I, Caruelle JP, Ferry A: Effect of anti-inammatory and antioxidant drugs on the long-term repair of severely injured mouse skeletal muscle. Exp Physiol 90(4): 487-95, 2005. 14. Henrotin Y, Kurz B, Aigner T: Oxygen and reactive oxygen species in cartilage degradation: friends or foes? Osteoarthritis Cartilage 13(8): 643-54, 2005. 15. Fang YZ, Yang S, Wu G: Free radicals, antioxidants, and nutrition. Nutrition 18(10): 872-9, 2002. 16. Hitchon CA, HS El-Gabalawy: Oxidation in rheumatoid arthritis. Arthritis Res Ther 6(6): 265-78, 2004. 17. Bell-Klein A, Llesuy SF: Estresse Oxidativo e Antioxidantes. Canoas: Ulbra, 2002. p. 15-19; 21-32. 18. Halliwel B, Gutteridge JCM: Free Radicals in Biology and Medicine. 3.ed. Londres: Oxford University Press, 1999. 19. Droge W: Free radicals in the physiological control of cell function. Physiol Rev 82(1): 47-95, 2002. 20. Oktyabrsky ON, Smirnova GV: Redox regulation of cellular functions. Biochemistry (Mosc) 72(2): 132-45, 2007. 21. Grifths HR: ROS as signalling molecules in T cells evidence for abnormal redox signalling in the autoimmune disease, rheumatoid arthritis. Redox Rep 10(6): 273-80, 2005. 22. Barry Halliwell JG: Free Radicals in Biology and Medicine. 4.ed. New York: Oxford University Press, 2007. 23. Bitencoutt PIH: Metabolismo do cido Araquidmico na Sepse, in Sepse. Manole, So Paulo, 2007. 24. Hwang ES, Kim GH: Biomarkers for oxidative stress status of DNA, lipids, and proteins in vitro and in vivo cancer research. Toxicology 229(1-2): 1-10, 2007. 25. Okamoto T, Sakurada S, Yang JP, Merin JP: Regulation of NFkappa B and disease control: identication of a novel serine kinase and thioredoxin as effectors for signal transduction pathway for NF-kappa B activation. Curr Top Cell Regul 35: 149-61, 1997. 26. Kim WU, Yoo SA, Min SY, et al.: Hydroxychloroquine poten tiates Fas-mediated apoptosis of rheumatoid synoviocytes. Clin Exp Immunol 144(3): 503-11, 2006. 27. Blair IA: Endogenous glutathione adducts. Curr Drug Metab 7(8): 853-72, 2006. 28. Soneja A, Drews M, Malinski T: Role of nitric oxide, nitroxidative and oxidative stress in wound healing. Pharmacol Rep 57 Suppl: 108-19, 2005. 29. Fritz R, Bol J, Hebling U, et al.: Compartment-dependent management of H(2)O(2) by peroxisomes. Free Radic Biol Med 42(7): 1119-29, 2007. 30. Bierl C, Voetsch B, Jin RC, Handy DE, Loscalzo J: Determinants of human plasma glutathione peroxidase (GPx-3) expression. J Biol Chem. 279(26): 26839-45, 2004. 31. Del Rio D, Stewart AJ, Pellegrini N: A review of recent studies on malondialdehyde as toxic molecule and biological marker of oxidative stress. Nutr Metab Cardiovasc Dis 15(4): 316-28, 2005.

32. Montuschi P, Barnes PJ, Roberts 2nd LJ: Isoprostanes: markers and mediators of oxidative stress. Faseb J 18(15): 1791-800, 2004. 33. Montuschi P, Barnes P, Roberts 2nd LJ: Insights into oxidative stress: the isoprostanes. Curr Med Chem 14(6): 703-17, 2007. 34. Cracowski JL, Marpeau C, Carpentier PH, et al.: Enhanced in vivo lipid peroxidation in scleroderma spectrum disorders. Arthritis Rheum 44(5): 1143-8, 2001. 35. Lushchak V, Semchyshyn H, Mandryk S, Lushchak O: Possible role of superoxide dismutases in the yeast Saccharomyces cerevisiae under respiratory conditions. Arch Biochem Biophys 441(1): 35-40, 2005. 36. Moynagh PN: The NF-kappaB pathway. J Cell Sci 118(Pt 20): 4589-92, 2005. 37. Goldring SR: Pathogenesis of bone erosions in rheumatoid arthritis. Curr Opin Rheumatol 14(4): 406-10, 2002. 38. Miossec P: An update on the cytokine network in rheumatoid arthritis. Curr Opin Rheumatol 16(3): 218-22, 2004. 39. Grootveld M, Henderson EB, Farrell A, Blake DR, Parkes HG, Haycock P: Oxidative damage to hyaluronate and glucose in synovial uid during exercise of the inamed rheumatoid joint. Detection of abnormal low-molecular-mass metabolites by protonn.m.r. spectroscopy. Biochem J 273(Pt 2): 459-67, 1991. 40. Taysi S, Polat F, Gul M, Sari RA, Bakon E: Lipid peroxidation, some extracellular antioxidants, and antioxidant enzymes in serum of patients with rheumatoid arthritis. Rheumatol Int 21(5): 200-4, 2002. 41. Dai L, Polat F, Gul M, Sari RA, Bakan E: Evidence for oxidised low density lipoprotein in synovial uid from rheumatoid arthritis patients. Free Radic Res 32(6): 479-86, 2000. 42. Dalle-Donne I, Rossi R, Giustarini D, Milzani A, Colombo R: Protein carbonyl groups as biomarkers of oxidative stress. Clin Chim Acta 329(1-2): 23-38, 2003. 43. Jikimoto T, Nishikubo Y, Koshiba M, et al.: Thioredoxin as a biomarker for oxidative stress in patients with rheumatoid arthritis. Mol Immunol 38(10): 765-72, 2002. 44. Khan F, Siddiqui AA: Prevalence of anti-3-nitrotyrosine antibodies in the joint synovial uid of patients with rheumatoid arthritis, osteoarthritis and systemic lupus erythematosus. Clin Chim Acta 370(1-2): 100-7, 2006. 45. Zugel U, Kaufmann SH: Role of heat shock proteins in protection from and pathogenesis of infectious diseases. Clin Microbiol Rev 12(1): 19-39, 1999. 46. Cronstein BN: Low-dose methotrexate: a mainstay in the treatment of rheumatoid arthritis. Pharmacol Rev 57(2): 163-72, 2005. 47. Sung JY, Hong JH, Kang HS, et al.: Methotrexate suppresses the interleukin-6 induced generation of reactive oxygen species in the synoviocytes of rheumatoid arthritis. Immunopharmacology. 47(1): 35-44, 2000. 48. Laurindo IM, Mello SB, Cossermelli W: Influence of low doses of methotrexate on superoxide anion production by polymorphonuclear leukocytes from patients with rheumatoid arthritis. J Rheumatol 22(4): 633-8, 1995.

Rev Bras Reumatol, v. 48, n.1, p. 17-24, jan/fev, 2008

23

Filippin e cols.

49. Mangge HJ, Hermann J, Schauenstein K: Diet and rheumatoid arthritis a review. Scand J Rheumatol 28(4): 201-9, 1999. 50. den Broeder AA, Wanten GJ, Oyen WJ, Naber T, van Riel PL, Barrera P: Neutrophil migration and production of reactive oxygen species during treatment with a fully human anti-tumor necrosis factor-alpha monoclonal antibody in patients with rheumatoid arthritis. J Rheumatol 30(2): 232-7, 2003. 51. Kageyama Y, Takahashi M, Nagafusa T, Torikai E, Nagano A: Etanercept reduces the oxidative stress marker levels in patients with rheumatoid arthritis. Rheumatol Int, 28(3): 245-51, 2008. 52. Cerhan JR, Saag KG, Merlino LA, Mikuls TR, Criswell LA: Antioxidant micronutrients and risk of rheumatoid arthritis in

a cohort of older women. Am J Epidemiol 157(4): 345-54, 2003. 53. Hagfors L, Leanderson P, Skldstam L, Anderson J, Johansson G : Antioxidant intake, plasma antioxidants and oxidative stress in a randomized, controlled, parallel, Mediterranean dietary intervention study on patients with rheumatoid arthritis. Nutr J 2: 5, 2003. 54. Bar-Shai M, Reznick AZ: Peroxynitrite induces an alternative NF-kappaB activation pathway in L8 rat myoblasts. Antioxid Redox Signal 8(3-4): 639-52, 2006. 55. Bar-Shai M, Reznick AZ: Reactive nitrogen species induce nuclear factor-kappaB-mediated protein degradation in skeletal muscle cells. Free Radic Biol Med 40(12): 2112-25, 2006.

24

Rev Bras Reumatol, v. 48, n.1, p. 17-24, jan/fev, 2008