Quim. Nova, Vol. 30, No. 3, 695-706, 2007 INTERFERENTES ENDCRINOS NO AMBIENTE Gislaine Ghiselli e Wilson F.

Jardim* Instituto de Qumica, Universidade Estadual de Campinas, CP 6154, 13081-970 Campinas - SP, Brasil Recebido em 6/4/06; aceito em 3/7/06; publicado na web em 7/2/07

ENDOCRINE DISRUPTORS IN THE ENVIRONMENT. Although the hypothesis that environmental chemicals may exhibit endocrine disrupting effects is not new, the issue has been a growing level of concern due to reports of increased incidences of endocrine-related disease in humans, including declining male fertility, and more significantly, to adverse physiological effects observed in wildlife where cause and effect relationships are more evident. The list of endocrine disrupting chemicals (EDCs) includes a range of anthropogenic compounds, phytoestrogens, naturally occurring sex steroids and synthetic estrogens. Within the aquatic environment, the presence of EDCs has concerned many scientists and water quality regulators. Discharge of effluents from treatment facilities is likely to be a significant source of input of contaminants to many systems, and the potential for concentration of hydrophilic compounds and transformation products within sludges has implications for their disposal. Then, understanding the processes and the fate of EDCs on the environment, as well as the mechanisms of endocrine disruption, may facilitate controlling or limiting exposure of both humans and the environment to these compounds. Keywords: endocrine disruptors; physicochemical properties; sources.

INTRODUO Os modelos de desenvolvimento adotados pelo homem para a agricultura, a pecuria, a indstria e os centros urbanos no tm levado em conta, h muito tempo, o meio ambiente. Como resultado, diversos problemas ambientais surgem a cada momento, muitos deles praticamente irreversveis e de extrema relevncia. Como exemplo, pode-se citar as conseqncias ambientais da expanso do uso de produtos qumicos orgnicos sintticos, com nfase naquelas substncias cuja toxicidade chega a afetar a sade humana, especialmente no que diz respeito ao cncer e aos defeitos congnitos, assim como o bem-estar de organismos inferiores1,2. Ainda que grandes quantidades de produtos qumicos sintticos tivessem sido lanadas no meio ambiente desde 1940, a gerao nascida entre 1950 e 1960 foi a primeira a sofrer os efeitos desta exposio, no desenvolvimento intra-uterino, principalmente devido ao estoque disponvel destas substncias no tecido adiposo materno. Como os representantes mais velhos desta gerao ainda no haviam adquirido a sua maturidade plena at o final dos anos 70, apenas recentemente foi possvel avaliar o impacto, em longo prazo, desta exposio na sade humana3. Embora j existissem, desde o incio do sculo XX, hipteses prevendo alteraes no funcionamento do sistema endcrino de algumas espcies animais expostas a determinadas substncias qumicas txicas, apenas recentemente esta importante questo tem recebido ateno por parte da comunidade cientfica, principalmente devido ao nmero crescente de publicaes que relatam o aumento da incidncia de disfunes no sistema endcrino de seres humanos (incluindo a infertilidade masculina) e, mais significativamente, efeitos fisiolgicos adversos observados em espcies animais para as quais a relao causa/efeito mais evidente. De fato, as evidncias observadas em estudos envolvendo moluscos, crustceos, peixes, rpteis, pssaros e alguns mamferos tm sugerido que possveis alteraes de sade humana envolvendo o sistema reprodutivo, tais como o cncer de mama e de testculo, podem estar relacionadas exposio a tais substncias3-8.
*e-mail: wfjardim@iqm.unicamp.br

Uma grande parte da evidncia dos possveis efeitos destas substncias em seres humanos foi obtida a partir da experincia envolvendo mulheres grvidas que tomaram o estrognio sinttico dietilestilbestrol (DES), prescrito para evitar o aborto espontneo e promover o crescimento do feto, no perodo entre 1948 a 1971. Muitas das filhas dessas mulheres so hoje estreis e, uma minoria, tem desenvolvido um tipo raro de cncer vaginal. Os homens adultos mostram maior incidncia de anormalidades em seus rgos sexuais, apresentam contagem mdia de espermatozides diminuda e podem sofrer um risco maior de desenvolver cncer de testculos2,3,6,9. Esta nova ameaa sade de espcies animais, incluindo os seres humanos, tem despertado interesse pblico neste tema, principalmente aps a publicao do livro Our Stolen Future (Nosso Futuro Roubado), de Theo Colburn e seus associados, em 19962-4. Devido complexidade deste tema, muitas vezes as constataes cientficas encontradas na literatura, relatadas quase que exclusivamente em ingls, so polemicamente discutidas entre os pesquisadores, os ambientalistas e as autoridades. Deste modo, este presente artigo tem como principal objetivo divulgar, em mbito nacional, a problemtica atual envolvendo a presena dos interferentes endcrinos no meio ambiente, fornecendo ao leitor, tanto da academia como dos rgos legisladores e de controle ambiental, informaes sobre os mecanismos de ao destas substncias nos organismos vivos, incluindo uma listagem contendo diversas substncias classificadas como interferentes endcrinos, suas propriedades fsico-qumicas mais relevantes, bem como suas principais fontes. DEFINIES Muitas definies3-6,9-17 tm sido propostas para um interferente endcrino. Entretanto, em todas elas existe um ponto em comum: trata-se de uma substncia qumica que pode interferir no funcionamento natural do sistema endcrino de espcies animais, incluindo os seres humanos. Tal substncia pode ser de origem antrpica, tambm denominada xenoestrognio, ou de origem natural, como por ex., os fitoestrognios. Alguns pesquisadores definem um interferente endcrino com base nos seus efeitos, ou seja, trata-se de uma substncia qumica

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que, mesmo presente em concentrao extremamente baixa, capaz de interferir no funcionamento natural do sistema endcrino causando cncer, prejudicando os sistemas reprodutivos (por ex., reduzindo a produo de espermatides) e causando outros efeitos adversos. Por isso, tais substncias so mundialmente denominadas endocrine disruptors (EDs) ou ainda endocrine disrupting compounds or chemicals (EDCs)3-6,9-17. A traduo para a lngua portuguesa tem gerado algumas denominaes diferentes, uma vez que h poucos grupos de pesquisadores brasileiros trabalhando com esta temtica. Podem ser encontradas as seguintes denominaes: perturbadores endcrinos18, disruptivos ou disruptores endcrinos19, desreguladores endcrinos9, interferentes endcrinos20, estrognios ambientais2, dentre outras. Embora a traduo exata para a palavra disrupt seja desfazer, perturbar, interromper, decidiu-se adotar o termo interferentes endcrinos para se referir s tais substncias, j que as mesmas interferem ou alteram, de alguma forma, o funcionamento natural do sistema endcrino de espcies animais. Uma definio mais precisa para um interferente endcrino foi primeiramente proposta em 1996, pela Comunidade Cientfica Europia, durante a Conferncia de Weybridge, no Reino Unido. Tal definio comumente referida como definio de Weybridge12, e diz que an endocrine disrupter is an exogenous substance that causes adverse health effects in an intact organism, or its progeny, consequent to changes in endocrine function3,4. Muitas substncias qumicas tm demonstrado potencial para serem classificadas como interferentes endcrinos, embora sejam ainda necessrias novas pesquisas para, de fato, comprovar tais suspeitas. Por este motivo, uma nova definio surgiu para esta classe de substncias. Um interferente endcrino em potencial trata-se de a substance that possesses properties that might be expected to lead to endocrine disruption in an intact organism3,4,12. Em maio de 1997, a agncia de proteo ambiental dos Estados Unidos (U.S. Environmental Protection Agency USEPA), atravs do seu comit consultivo responsvel pela avaliao e diagnstico de interferentes endcrinos (Endocrine Disrupter Screening and Testing Advisory Committee EDSTAC4,13), props uma definio mais detalhada que considerava tambm a ampla diversidade de mecanismos envolvidos nas disfunes do sistema endcrino. O EDSTAC13 descreve um interferente endcrino como sendo uma substncia ou mistura qumica exgena que altera uma ou mais funes do sistema endcrino, bem como a sua estrutura, causando efeitos adversos tanto sobre um organismo e sua descendncia, como em populaes ou subpopulaes de organismos, tendo como base estudos cientficos, dados, evidncias de peso e princpios de precauo3-5,13. Outras definies continuam sendo propostas por vrias organizaes como o Programa Internacional de Segurana Qumica (International Programme on Chemical Safety-IPCS16), mas trata-se de verses redigidas das definies acima mencionadas3,4,16. Os interferentes endcrinos podem exibir tanto um comportamento estrognico como andrognico. Estrognios so esterides hormonais que regulam e sustentam o desenvolvimento sexual feminino e suas funes reprodutivas. J os andrognios so esterides hormonais responsveis pelo desenvolvimento das caractersticas sexuais secundrias masculinas3,5,21,22. De fato, vrias substncias qumicas suspeitas de causar alterao no sistema endcrino (listadas por algumas organizaes como a USEPA) esto relacionadas com uma srie de problemas de sade humana e animal. Segundo o Comit Cientfico de Toxicidade, Ecotoxicidade e Ambiente CCTEA9, h associaes envolvendo a presena destas substncias no organismo humano e o surgimento de algumas doenas como cncer de testculo, de mama e de prstata, a queda da taxa de espermatozides, deformi-

dades dos rgos reprodutivos, disfuno da tireide e alteraes relacionadas com o sistema neurolgico3-5,9,22-26. O SISTEMA ENDCRINO O sistema endcrino (Figura 1) constitudo por um conjunto de glndulas localizadas em diferentes reas do corpo, como a tireide, as gnadas e as glndulas supra-renais, e pelos hormnios por elas sintetizados, tais como a tiroxina, os estrognios e progestagnios, a testosterona e a adrenalina3-5,9.

Figura 1. O sistema endcrino

Hormnios so substncias qumicas (mensageiros) produzidas e secretadas pelas glndulas endcrinas e que, lanadas na corrente sangnea, coordenam o funcionamento do organismo como um todo. Algumas funes que controlam so: atividades de rgos completos, nveis de sais, acares e lquidos no sangue, o uso e armazenamento de energia, o crescimento e o desenvolvimento de um determinado organismo, sua reproduo, suas caractersticas sexuais, etc3,4,21,23,27,28. A hipfise ou pituitria a principal glndula do sistema endcrino, localizada na base do crnio, embaixo do crebro. Influi direta ou indiretamente na produo e liberao de outros hormnios e est sob controle do sistema nervoso central. dividida em duas partes: a adeno-hipfise (anterior), que responsvel pela produo de hormnios que regulam as atividades de outras glndulas endcrinas, como o hormnio estimulador do folculo (FSH) e o hormnio luteizante (LH), produzindo tambm um hormnio responsvel pelo crescimento; e a neuro-hipfise (posterior), responsvel pela produo do hormnio que controla a reteno e excreo da gua pelos rins4,5,21,27,28. As paratireides constituem quatro pequenas glndulas localizadas no pescoo, atrs da tireide. Secretam o hormnio responsvel pelo equilbrio metablico de clcio e fsforo no organismo. J a tireide est localizada em volta da traquia, sendo dividida em dois lbulos. Regula o metabolismo, ou seja, a proporo e a maneira pela qual os alimentos so transformados em energia. responsvel tambm pela produo de calor corporal e energia muscular, pelo crescimento e desenvolvimento, e pela distribuio e reserva de gua e sais no corpo. Secreta os hormnios tiroxina e triiodotironina, que controlam o crescimento e a taxa metablica, e a calcitonina que canaliza o clcio no sangue para ser armazenado nos ossos21,27,28.

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O timo a glndula associada ao sistema linftico, responsvel por colher os dejetos da atividade celular, pela distribuio de nutrientes (principalmente gorduras), e pelo transporte dos glbulos brancos (leuccitos). Ajuda a treinar os glbulos brancos na luta contra as infeces, atravs do reconhecimento dos germes e outros invasores do corpo21,27,28. As supra-renais ou adrenais so as glndulas localizadas acima dos rins. So divididas em duas camadas distintas: medula (parte interna) e crtex (parte externa). A medula responsvel por secretar, na corrente sangnea, os hormnios adrenalina e noradrenalina. Tambm prepara o corpo para a ao em uma situao de perigo ou estresse. O crtex o responsvel pela produo de hormnios corticides como a aldosterona, que mantm o equilbrio de gua e sais nos rins (ons K+ e Na+), os glucocorticides, que aceleram o metabolismo e atuam no armazenamento dos acares, protenas e gorduras, e tambm auxilia a produo de hormnios sexuais21,27,28. O pncreas atua tanto como uma glndula excrina quanto endcrina. Como glndula excrina produz vrios sucos digestivos, ricos em enzimas, que passam do canal pancretico para o intestino delgado e atuam na digesto dos alimentos. Como glndula endcrina produz hormnios que fluem diretamente para a corrente sangnea. O pncreas pontilhado por pequenos aglomerados de clulas (ilhotas de Langerhans) que secretam dois tipos de hormnios: a insulina e o glucagon. O equilbrio entre estes dois hormnios que controla o nvel de glicose no sangue21,27,28. Os testculos so os responsveis pela produo de espermatozides e andrognios, os hormnios sexuais masculinos. Os espermatozides so produzidos durante toda a vida e, quando no so liberados, morrem e so reabsorvidos pelo organismo. A formao dos espermatozides controlada pelo hormnio estimulador do folculo (FSH), hormnio luteizante (LH) e pela testosterona, principal andrognio. Ela responsvel pelo desenvolvimento do orgo reprodutor masculino, desde a gestao, alm de aumentar a sntese de protenas, especialmente nos msculos, e contribuir com as funes anablicas4,21,27,28. Os ovrios so responsveis por produzir e expelir o vulo, aps o seu amadurecimento. Tambm produzem os hormnios sexuais, regulam a ovulao e a menstruao, garantem a manuteno da gravidez e so os responsveis pelo desenvolvimento dos caracteres femininos, influenciando no crescimento dos orgos reprodutivos. O ciclo menstrual controlado por quatro hormnios: o hormnio estimulador do folculo (FSH), o hormnio luteizante (LH), os estrognios (como o estradiol, que estimula o desenvolvimento do endomtrio e influencia a libido) e a progesterona, essencial para o desenvolvimento do embrio (placenta e glndulas mamrias)4,21,27,28. MECANISMOS DE AO DOS INTERFERENTES ENDCRINOS A ao de um determinado hormnio inicia-se atravs da sua ligao a um receptor especfico, no interior de uma clula. O complexo resultante liga-se a regies especficas do DNA presente no ncleo da clula, o que determina a ao dos genes. Certas substncias qumicas podem tambm se ligar ao receptor hormonal e, conseqentemente, mimetizar ou bloquear a ao do prprio hormnio2-4,9,24. Aps complexos processos bioqumicos em cadeia, o hipotlamo secreta hormnios que controlam a liberao de outros hormnios pela glndula pituitria. Estas glicoprotenas (tambm denominadas glandotrofinas) por sua vez, induzem a sntese e a atividade de hormnios de tecidos especficos presentes nas glndulas internas. Os hormnios produzidos nestas glndulas so transportados, pela corrente sangnea, at tecidos-alvo, iniciando uma mudana na atividade celular nos seus receptores. Esta mudana de atividade trans-

mitida por vrios caminhos, atravs da membrana plasmtica, dependendo do tipo de homnio. Estes diferentes processos fisiolgicos (em cascata e independentes) so controlados por mecanismos complexos como os de feedback, que so ativados ou desativados de acordo com os nveis de hormnios encontrados no organismo. Por exemplo, quando a concentrao de um determinado hormnio no organismo elevada, o caminho que leva a sua produo conseqentemente desativado. Embora muitos destes caminhos possam ser influenciados por estimulaes externas ao organismo, a grande maioria dos distrbios endcrinos observados e explicados at o momento atribuda ao funcionamento das gnadas, responsveis pelas caractersticas sexuais secundrias e pelo desenvolvimento e funcionamento dos rgos sexuais2-5,9,24. Um receptor hormonal possui elevada sensibilidade e afinidade por um hormnio especfico, produzido no organismo. Por isso, concentraes extremamente baixas de um determinado hormnio geram um efeito, produzindo uma resposta natural (Figura 2a). Entretanto, estes receptores hormonais tambm podem se ligar a outras substncias qumicas. Isso explica o porqu de determinados interferentes endcrinos presentes no organismo, mesmo em baixssimas concentraes, serem capazes de gerar um efeito, provocando conseqentemente uma resposta3,4.

Figura 2. Disfunes endcrinas: a) resposta natural, b) efeito agonista, c) efeito antagonista

A alterao no sistema endcrino ocorre quando o interferente endcrino interage com os receptores hormonais, modificando a sua resposta natural. Dois processos distintos podem ser desencadeados (Figuras 2b e 2c). A substncia qumica pode se ligar ao receptor hormonal e produzir uma resposta, atuando ento como um mimetizador, ou seja, imitando a ao de um determinado hormnio. Este processo denominado de efeito agonista (Figura 2b). Se a substncia qumica se ligar ao receptor mas nenhuma resposta for produzida, ela estar agindo como um bloqueador, ou seja, estar impedindo a interao entre um hormnio natural e seu respectivo receptor. Este processo denominado de efeito antagonista3,4 (Figura 2c). Outros efeitos que podem ocorrer no sistema endcrino so alteraes na sntese e na remoo dos hormnios de seus respectivos receptores e, ainda, interaes com sistemas multi-hormonais. Como se pode perceber, os processos aqui envolvidos so complexos e por este motivo ainda no foram completamente elucidados3,4. Muitos interferentes endcrinos competem com o estradiol (hormnio sexual feminino produzido naturalmente pelo organismo) pelos receptores de estrognio. Outros competem com a diidrotestosterona (hormnio sexual masculino produzido naturalmente pelo organismo) pelos receptores de andrognio. Portanto, estas substncias exercem efeitos de feminizao ou masculinizao sobre o sistema endcrino. Substncias que produzem efeitos de feminizao so conhecidas como estrognicas, enquanto que as que produzem efeitos de masculinizao so conhecidas como andrognicas. Portanto, se uma substncia considerada antiandrognica como a flutamida, ela certamente inibir a ao biol-

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gica dos andrognios, ligando-se e, conseqentemente, inativando os receptores de andrognios presentes nos tecidos-alvo. J uma substncia anti-estrognica, como o tamoxifeno, inibe a ao biolgica dos estrognios ligando-se e, conseqentemente, inativando os receptores de estrognios presentes nos tecidos-alvo3-5. Em suma, os interferentes endcrinos podem interferir no funcionamento do sistema endcrino pelo menos de trs formas possveis: imitando a ao de um hormnio produzido naturalmente pelo organismo, como o estrognio ou a testosterona, desencadeando deste modo reaes qumicas semelhantes no corpo; bloqueando os receptores nas clulas que recebem os hormnios, impedindo assim a ao dos hormnios naturais; ou afetando a sntese, o transporte, o metabolismo e a excreo dos hormnios, alterando as concentraes dos hormnios naturais2-5,9,24. PROPRIEDADES FSICO-QUMICAS MAIS RELEVANTES O destino e o comportamento dos interferentes endcrinos, tanto no organismo como no meio ambiente, esto diretamente relacionados com suas propriedades fsico-qumicas. Portanto, para que se possa compreender os efeitos destas substncias no meio ambiente, suas propriedades fsico-qumicas necessariamente devem ser usadas como ferramentas durante os estudos. Solubilidade em gua A solubilidade em gua (sat) definida como sendo a concentrao mxima de uma substncia dissolvida em gua pura, a uma dada temperatura. Nas guas superficiais, a solubilidade fortemente dependente da temperatura, do pH, dos sais dissolvidos ou ainda da existncia de substncias hmicas ou materiais suspensos. Todavia, os valores experimentais so tambm teis para se determinar o grau de hidrofobicidade (Kow) de uma determinada substncia2-4,29,31. Para substncias gasosas ou que apresentam elevada volatilidade, a solubilidade em gua definida pela lei de Henry, que descreve uma relao linear entre a atividade de uma espcie voltil na fase aquosa e sua atividade na fase gasosa. Ou seja, a solubilidade de um gs em um lquido proporcional presso parcial deste gs, quando em contato com o lquido29-31. Coeficiente de partio Partio a distribuio de uma substncia qumica entre duas fases, seja ela abitica como gua, sedimentos suspensos ou de fundo, ou bitica como plantas e animais, que esto em equilbrio ou estado estacionrio. expressa pela razo da concentrao da substncia qumica nas duas fases avaliadas30,31. Hidrofobicidade O grau de hidrofobicidade de uma substncia representado pelo coeficiente de partio octanol/gua (Kow), ou seja: Kow = Coctanol / Cgua

substncia em fases orgnicas apolares (outros solventes ou biota)2,30,31. O coeficiente de partio octanol/gua, por uma questo de convenincia, geralmente utilizado em sua forma logartmica decimal (log Kow), dado sua magnitude ser, na maioria das vezes, muito grande, excedendo em algumas ocasies a um milho. Tambm considerado um excelente parmetro para inferir o fator de bioconcentrao de uma determinada substncia qumica2,30,31. A polaridade de uma substncia qumica tambm est inversamente relacionada com sua hidrofobicidade. A ausncia de grupos polares nas molculas de uma substncia altera a polaridade da mesma diminuindo, conseqentemente, sua solubilidade em gua. Deste modo, pode-se dizer que tal substncia apresenta elevada hidrofobicidade e elevada lipofilicidade. o caso, por ex., das substncias organocloradas30,31. O peso molecular tambm tem relao com a hidrofobicidade de uma substncia. Molculas com alto peso molecular tendem a apresentar menor solubilidade em gua. Portanto, a sua hidrofobicidade relativamente elevada30,31. Biomagnificao O fenmeno da biomagnificao resulta, essencialmente, de uma seqncia de etapas de bioacumulao que ocorrem ao longo da cadeia alimentar. Bioacumulao um termo geral que descreve a tomada de um contaminante qumico, do ambiente, por uma ou todas as rotas possveis (respirao, dieta, via drmica, etc.), a partir de qualquer fonte no ambiente onde tais substncias esto presentes. Por exemplo, os peixes assimilam algumas substncias qumicas procedentes de sua alimentao, ou ainda atravs da ingesto de material particulado adsorvido nos sedimentos ou presente em suspenso nas guas. Em muitos casos, tais substncias no so metabolizadas pelo peixe, ou seja, acabam se acumulando nos tecidos adiposos, nos quais sua concentrao aumenta com o tempo. Aves predadoras que se alimentam destes peixes, por conseqncia, apresentaro concentraes ainda maiores destas substncias no organismo2,30,31. Coeficiente de adsoro A soro de substncias qumicas (contaminantes) est diretamente relacionada com o transporte e a mobilidade das mesmas no meio ambiente. Geralmente, molculas que esto sorvidas apresentam menor mobilidade e, conseqentemente, acabam no ficando disponveis para participar de processos de transferncia de fases. Tambm esto menos biodisponveis e mais protegidas da luz ultravioleta, ocasionando menor degradao das mesmas no ambiente, atravs da fotlise direta. Substncias qumicas sorvidas no reagem com foto-oxidantes indiretos como os radicais hidroxilas, muitas vezes gerados nos ambientes aquticos30. O coeficiente de adsoro (Koc) bastante til para descrever a adsoro de uma determinada substncia qumica no material em suspenso (matria orgnica) presente nas guas superficiais. Este parmetro aumenta com o aumento da hidrofobicidade de uma substncia, isto , quanto maior o valor de Kow, maior ser a hidrofobicidade e maior ser a afinidade da substncia pela matria orgnica4,30,31. Toxicidade

onde: Coctanol a concentrao da substncia em n-octanol e Cgua a concentrao da substncia em gua. O n-octanol empregado uma vez que apresenta tanto caractersticas hidrofbicas como hidroflicas. Portanto, uma ampla faixa de substncias apresenta valores mensurveis de Kow. Tambm serve como modelo para simular os tecidos adiposos (gorduras) encontrados em espcies animais, podendo ser usado para estimar a partio de uma

A toxicologia o estudo dos efeitos nocivos de substncias sobre os seres vivos. As substncias de interesse incluem tanto os produtos qumicos sintticos quanto aqueles naturalmente presentes no ambiente. Na toxicologia, os efeitos so determinados, em geral, pela injeo ou pela administrao oral da substncia de interesse em animais, observando-se como a sade dos mesmos pode ser afetada2,32.

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Dados toxicolgicos relacionados nocividade de uma substncia para um organismo, como um pesticida organoclorado ou um metal pesado, so coletados mais facilmente determinando-se sua toxicidade aguda, que o incio rpido de sintomas (incluindo a morte no limite extremo) que se seguem absoro de uma dose da substncia. Embora a toxicidade aguda de uma substncia seja de grande interesse quando ocorre, acidentalmente, uma exposio acentuada mesma, na toxicologia ambiental a maior preocupao se d mediante exposies, em longo prazo, a doses individuais relativamente baixas de uma determinada substncia txica presente no meio ambiente. Trata-se da toxicidade crnica. De modo geral, quaisquer efeitos como, por ex., cncer ou defeitos congnitos decorrentes destas exposies contnuas so tambm de longa durao e, portanto, classificados como crnicos2,29,32. Ainda que recentemente alguns estudos toxicolgicos tenham sido desenvolvidos a partir de testes envolvendo certas bactrias, a maior parte da informao relativa toxicidade das substncias qumicas obtida a partir de experimentos efetuados mediante a administrao de doses aos animais. A dose da substncia administrada nos testes de toxicidade normalmente expressa em massa por unidade de peso corporal do animal testado2,29,32. Os indivduos diferem significativamente quanto sua susceptibilidade a uma dada substncia qumica alguns respondem substncia mesmo em doses muito baixas, enquanto que outros requerem uma dose muito mais elevada para reagirem. Por esta razo, os toxicologistas criaram as relaes dose-resposta. Na maioria das vezes o efeito resposta buscado nos testes com animais para construir as curvas dose-resposta a morte2,5,29,31,32. Em sntese, a toxicidade uma resposta biolgica adversa induzida pela presena de uma ou mais substncias qumicas e/ou de seus metablitos. Deve-se enfatizar que, a simples presena ou acumulao de uma ou mais substncias qumicas em um determinado organismo no corresponde necessariamente a um efeito biolgico adverso. Somente uma resposta biolgica induzida pela presena de uma ou mais substncias qumicas e/ou de seus metablitos, referenciada como um efeito biolgico adverso em potencial. Portanto, uma vez que o tipo e a natureza da resposta biolgica e o potencial para induzir tal resposta variam de acordo com os organismos e as substncias qumicas, o julgamento sobre os efeitos biolgicos adversos tem de ser, obrigatoriamente, realizado com base nas relaes dose-resposta, ao invs de simplesmente ser baseado na magnitude da acumulao31. PRINCIPAIS FONTES DOS INTERFERENTES ENDCRINOS Tanto os interferentes endcrinos como outras classes de poluentes ambientais apresentam uma variedade de fontes2-4,6,18,33-48. Todavia, tais fontes podem ser classificadas em dois grandes grupos: pontuais e no pontuais (ou difusas). As fontes pontuais apresentam um ponto de entrada no meio ambiente bem caracterizado, geralmente atravs dos cursos dgua. Como exemplo, pode-se citar as descargas de efluentes industriais e esgotos domsticos, derramamentos acidentais, atividades de minerao, enchentes, dentre outras. Trata-se de descargas diretas para os corpos dgua3. Por outro lado, as fontes no pontuais so definidas como fontes que no apresentam um ponto de entrada no meio ambiente bem caracterizado. Bons exemplos destas fontes so as deposies atmosfricas e os escoamentos superficiais, sobretudo provenientes das prticas agrcolas. Trata-se de rotas resultando em deposies parciais dos poluentes antes destes atingirem os corpos dgua3. A questo central que fontes no pontuais so mais difceis de serem controladas uma vez que o ponto de entrada dos poluentes

no ambiente depende do tipo da fonte, da sua localizao e, ainda, da combinao de uma srie de processos envolvendo a concentrao do poluente, sua distribuio no meio ambiente, suas propriedades fsico-qumicas e as condies ambientais3. O transporte de um determinado poluente oriundo de uma fonte no pontual de uma rea urbana tambm parece ser diferente daquele proveniente de uma zona rural. Existem algumas razes para isso: boa parte da rea urbana coberta com materiais impermeveis; como na rea urbana h pouca exposio do solo ao meio ambiente, o processo de eroso menos favorecido e as partculas do solo acabam sendo transportadas preferencialmente para as guas superficiais; na rea urbana a poluio pode se dar tambm pelo acmulo de lixos, durante o trnsito, nas emisses radioativas, enquanto que na rea rural a poluio advm basicamente da eroso do solo; na rea urbana a maioria dos poluentes depositados na superfcie do solo (impermevel) acaba sendo escoada para os corpos dgua (lixiviao), enquanto que na rea rural as deposies podem ser incorporadas ao solo, ou seja, sorvidas ou infiltradas, dificultando a remoo3. Para os seres humanos a mais importante fonte de contaminao dos interferentes endcrinos a alimentao, uma vez que muitas destas substncias so utilizadas durante a produo de alimentos industrializados e/ou no processo de embalagem dos mesmos, ou ainda atravs da ingesto de gua potvel contaminada, pois vrias destas substncias no so totalmente destrudas ou degradadas durante o processo empregado nas estaes de tratamento, tanto de gua como de esgoto3,4,6,10,38. SUBSTNCIAS CLASSIFICADAS COMO INTERFERENTES ENDCRINOS Muitos dos interferentes endcrinos esto tambm classificados em uma srie de grupos de compostos orgnicos potencialmente txicos, tais como micropoluentes orgnicos, substncias txicas persistentes (STP), poluentes orgnicos persistentes (POP), poluentes emergentes, dentre outros2,48-50. Entretanto, existem basicamente duas classes de substncias que podem alterar o funcionamento do sistema endcrino: os hormnios naturais que incluem estrognio, progesterona e testosterona, presentes no corpo humano e nos animais, e os fitoestrognios, substncias contidas em algumas plantas, como nas sementes de soja, e que apresentam uma atividade semelhante aos esterides hormonais quando ingeridas por um determinado organismo; e as substncias sintticas que incluem os hormnios sintticos (hormnios idnticos aos naturais, fabricados pelo homem e utilizados como contraceptivos orais e/ou aditivos na alimentao animal), bem como os xenoestrognios, substncias produzidas para utilizao nas indstrias, na agricultura e para os bens de consumo. Esto includos nesta categoria os pesticidas e aditivos plsticos, as bifenilas policloradas, os hidrocarbonetos policclicos aromticos, compostos de organoestanho, alquilfenis, e ainda subprodutos de processos industriais, como as dioxinas e furanos2-4,6,9,10,23,24. Os interferentes endcrinos ainda podem ser classificados, segundo sua ao biolgica, em agonista ou antagonista, termos estes mais genricos. Conforme j mencionado, uma substncia exibe um comportamento agonista quando mimetiza um determinado hormnio (so as substncias estrognicas ou andrognicas). Quando determinada substncia bloqueia um hormnio, ligando-se ao seu receptor, diz-se que ela exibe um comportamento antagonista. Estas so as substncias anti-estrognicas ou anti-andrognicas3,4. Vrias substncias qumicas classificadas por diversas organizaes mundiais como interferentes endcrinos (ou interferentes endcrinos potenciais) so listadas na Tabela 1. A Unio Europia tambm elaborou um relatrio contendo uma vasta lista de subs-

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tncias suspeitas de interferir no sistema endcrino, tanto de seres humanos como de diferentes espcies animais, com base em seus estudos. Foram identificadas 118 substncias, sendo 12 destas designadas prioritrias para a conduo de estudos mais detalhados. So elas: dissulfeto de carbono, orto-fenilfenol, difenil ter tetrabromado, 4-cloro-3-metilfenol, 2,4-diclorofenol, resorcinol, 4nitrotolueno, 4-octilfenol, estrona, estradiol, etinilestradiol e 2,2bis(4-(2,3-epoxipropoxi)fenil)propano3. At o momento, a maioria das substncias classificadas como interferentes endcrinos so pesticidas. Alguns metais, como cdmio e mercrio, tambm apresentaram atividade semelhante no sistema endcrino, especialmente nas suas formas orgnicas (por ex., metilmercrio51). Porm, neste artigo focado um grupo especfico de substncias classificadas como interferentes endcrinos: os esterides e fitoesterides, os surfactantes, os pesticidas, herbicidas e fungicidas (relatados coletivamente como pesticidas), os compostos poliaromticos, os compostos orgnicos contendo oxignio e os compostos de organoestanho.

Esterides Sexuais Esterides compreendem um grupo de substncias, tais como os hormnios e seus precursores, freqentemente determinado em materiais biolgicos como sangue e urina. De acordo com suas funes, podem ser divididos em trs principais classes: esterides hormonais, como os andrognios, corticides, estrognios e progestagnios; colesterol e derivados; e fitoesterides2-4,21,23,27,32,52,53. Os andrognios so esterides que contm em sua estrutura dezenove tomos de carbono (C19), distribudos de forma cclica e cuja substncia mais caracterstica a testosterona, principal hormnio sexual masculino. Os corticides so produzidos nas glndulas supra-renais, na parte externa denominada crtex, cujos principais representantes so os glucocorticides e a aldosterona, que tem como principal funo regular o metabolismo dos ons potssio e sdio nos rins3,4,21,27. Os estrognios apresentam em sua estrutura um grupo fenlico e em alguns casos um grupo hidroxila aliftico, enquanto que nos

Tabela 1. Lista de substncias classificadas como interferentes endcrinos por vrias organizaes SUBSTNCIAS Esterides Etinilestradiol 17-Estradiol Estrona Mestranol Dietilestilbestrol Alquilfenis Nonilfenol Nonilfenol Etoxilado Octilfenol Octilfenol Etoxilado Compostos Poliaromticos Bifenilas Policloradas Retardantes de Chama Hidrocarbonetos Policclicos Aromticos (PAH) Compostos com Oxignio Ftalatos Bisfenol A Pesticidas Atrazina Simazina Diclorvos Endossulfan Trifluralina Demeton-S-metil Dimetoato Linuron Permetrina Lindano Clordano Dieldrin Hexaclorobenzeno Pentaclorofenol Outros Dioxinas e Furanos Tributilestanho UKEA USEPA OSPAR in vivo in vitro x x x x x x x x x x x x x JEA WWF

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UKEA: Agncia Ambiental do Reino Unido; USEPA: Agncia de Proteo Ambiental dos Estados Unidos; OSPAR: Comisso de Paris e Oslo; JEA: Agncia Ambiental do Japo; WWF: Organizao no Governamental

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progestagnios este grupo fenlico substitudo por um grupo cetona. Como so os principais responsveis pelo crescimento e pela reproduo de espcies animais, incluindo os seres humanos, seus derivados sintticos so bastante empregados como contraceptivos (hormnios inibidores do processo de ovulao), ao passo que os estrognios so tambm administrados no controle dos sintomas que envolvem a menopausa, distrbios fisiolgicos e no tratamento do cncer de prstata e de mama. J os progestagnios so empregados nos tratamentos voltados para as causas de infertilidade e descontrole do ciclo menstrual. Em geral, so rapidamente absorvidos pelo organismo e, ento, metabolizados no fgado3,4,21,23,27,52. Ainda existem os esterides anablicos ou anabolizantes sintticos que nada mais so que substncias qumicas relacionadas estruturalmente com a testosterona. A testosterona pode ser aromatizada a estradiol, sendo esta a principal via de biossntese de estrognios em homens e mulheres aps a menopausa. A aplicao teraputica mais evidente que os andrognios possuem a de suprir a deficincia da funo endcrina dos testculos e aumentar a sntese protica do organismo. Para obter esses efeitos os steres da testosterona so preferidos sua forma livre, podendo ser aplicados por via intramuscular. Foram feitas muitas alteraes na molcula da testosterona para diminuir seus efeitos andrognicos e manter ou aumentar os efeitos anabolizantes. Por exemplo, a remoo do grupamento metila em C19 aumenta o efeito anablico e diminui a ao andrognica, caso da 19-nortestosterona21,32. Os esterides sintticos so basicamente obtidos a partir de reaes de alquilao (principalmente grupos metila e etila) ou esterificao dos hormnios naturais, prevenindo-os da metabolizao rpida quando no organismo, garantindo assim o efeito desejado. Os esterides sintticos mais utilizados so o etinilestradiol e mestranol (estrognios), norgestrel e noretisterona (progestagnicos), metiltestosterona, fluoximesterona, etilestrenol, mesterolona, fenilpropionato de nandrolona (Durabolin) e steres da testosterona, como anabolizantes3,4,21,32. Estrognios, andrognios e progestagnios, tanto naturais quanto sintticos, so excretados principalmente pela urina, na forma biologicamente inativa, ou seja, como conjugados solveis em gua (principalmente glucorondios ou sulfatos) e em menor proporo pelas fezes (na forma livre), apresentando variaes com relao solubilidade em gua, taxa de excreo e catabolismo biolgico. Sob condies ambientais estes conjugados so rapidamente hidrolisados, levando aos hormnios livres e seus metablitos3,4,21,27,52. Vrios organismos excretam diferentes quantidades de esterides sexuais (hormnios), dependendo da idade, do estado de sade, da dieta ou gravidez. Apenas como curiosidade, a quantidade de estrognio excretada por uma mulher grvida pode ser at mil vezes maior que a de uma mulher em atividade normal (da ordem de 2 a 20 g estrona/dia, 3 a 65 g estriol/dia, e 0,3 a 5 g estradiol/dia), dependendo do estgio da gravidez4. Shore et al.54 foram um dos primeiros pesquisadores que investigaram a influncia e a concentrao dos esterides sexuais como poluentes ambientais. Posteriormente, vrios estudos foram realizados com o objetivo de determinar as concentraes dos hormnios sexuais em diversas matrizes ambientais, identificando suas possveis fontes. Um destes estudos, realizado nos EUA, mostrou que na gua de 10 riachos avaliados, 40% deles apresentavam concentrao de testosterona acima de 1,0 ng/L. Dentre estas reas, trs estavam localizadas em regies que empregavam como fertilizante, altas quantidades de adubo animal (frango) enquanto que apenas uma havia recebido esgoto domstico. Amostras de esgoto domstico (bruto e tratado), provenientes de uma estao de tratamento, tambm apresentaram elevados teores de hormnios naturais: 19-273 ng/L para testosterona e 49-73 ng/L para estrognios

no esgoto bruto e 1,6-7,2 ng/L para testosterona e 0,8 a 4,0 ng/L para estrognios no esgoto tratado. Assim, as duas principais fontes de esterides sexuais, naturais e sintticos, esto localizadas nas reas rurais destinadas agropecuria, atravs da contaminao do solo e da gua pelos dejetos animais, como o estrume de gado, bem como na rea urbana, atravs de descargas de esgotos domsticos nas guas superficiais4. Na Figura 3 so ilustradas as frmulas estruturais dos principais esterides mencionados. A Tabela 2 fornece algumas propriedades fsico-qumicas, ocorrncia e utilizao dos esterides aqui abordados. Apenas para o etinilestradiol foi encontrado um valor que estimasse sua toxicidade aguda. O LD50, via oral em camundongos, equivale a 1737 mg/kg55. Os compostos estradiol, estriol, progesterona e etinilestradiol so classificados como sendo potencialmente cancergenos27.

Figura 3. Estruturas qumicas dos principais esterides sexuais e fitoesterides

Fitoestrognios Os fitoestrognios so substncias qumicas naturais contidas nas plantas, que possuem atividade estrognica e que atuam como constituintes das membranas celulares, como hormnios de crescimento, como antioxidantes (proteo contra as radiaes UV), fungicidas, e algumas vezes como herbicidas. Estes fitoqumicos no nutricionais somam mais de 12.000 substncias qumicas naturais presentes nos alimentos de origem vegetal. Diferentemente dos hormnios sexuais, os fitoestrognios so substncias no

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Tabela 2. Propriedades fsico-qumicas e toxicidade aguda dos interferentes endcrinos abordados Substncia Estrona Estriol Estradiol Etinilestradiol Progesterona Testosterona Norgestrel Dietilestilbestrol Androsterona -Sitosterol Estigmasterol Genisteina p,p-DDT p,p-DDE p,p-DDD Aldrin Dieldrin Endrin Lindano Endossulfan Heptacloro Metoxicloro Linuron Diuron Vinclozolina Malation Carbaril Tributilestanho Pentaclorofenol PCB Decabromodifenilter 2,3,7,8-TCDD 2,3,7,8-TCDF Bisfenol A Dibutilftalato Dietilftalato 4-Nonilfenol Octilfenis Naftaleno Fluoranteno Antraceno Benzo[a]pireno CAS Number 53-16-7 50-27-1 50-28-2 57-63-6 57-83-0 58-22-0 797-63-7 56-53-1 53-41-8 83-46-5 83-48-7 446-72-0 50-29-3 72-55-9 72-54-8 309-00-2 60-57-1 72-20-8 58-89-9 115-29-7 76-44-8 72-43-5 330-55-2 330-54-1 50471-44-8 121-75-5 63-25-2 56573-85-4 87-86-5 1336-36-3 1163-19-5 1746-01-6 51207-31-9 80-05-7 84-74-2 84-66-2 104-40-5 27193-28-8 91-20-3 206-44-0 120-12-7 50-32-8 Frmula Molecular C18H22O2 C18H24O3 C18H24O2 C20H24O2 C21H30O2 C19H28O2 C21H28O2 C18H20O2 C19H30O2 C29H50O C29H48O C15H10O5 C14H9Cl5 C14H8Cl4 C14H10Cl4 C12H8Cl6 C12H8Cl6O C12H8Cl6O C6H6Cl6 C9H6Cl6O3S C10H5Cl7 C16H15Cl3O2 C9H10Cl2N2O2 C9H10Cl2N2O C12H9Cl2NO3 C10H19O6PS2 C12H11NO2 C12H28Sn C6HCl5O C12H10-nCln C12Br10O C12H4Cl4O2 C12H4Cl4O C15H16O2 C16H22O4 C12H14O4 C15H24O C14H22O C10H8 C16H10 C14H10 C20H12 Massa Molecular (g/mol) 270,37 288,39 272,39 296,41 314,47 288,43 312,44 268,34 290,43 414,70 412,70 270,24 354,49 318,03 320,05 364,91 380,91 380,91 290,85 406,95 373,35 345,65 249,11 233,10 286,11 330,36 201,22 291,04 266,34 vrios 959,17 321,97 305,98 228,29 278,35 222,24 220,35 206,33 128,16 202,26 178,22 252,30 Solubilidade g/L H2O (25 C) 12.420 13.250 12.960 483 5.570 log Pow 3,13 2,45 4,01 3,67 3,32 5,07 3,69 LD50 (mg/kg)* Macho Fmea

1737

1737

8.750

3,4 24 90 27 140 220-260 7.000 320 180 45 75.000 42.000 3.400 145.000 82.600 8.000-10.000 14.000 0,1-6.000 0,0013 0,42 120.000 13.000 400.000 5.430 12.600 31.000 220 43,4 3,3

6,20 5,76 5,86 5,17-7,40 3,69-6,20 3,21-5,34 3,80 2,23-3,62 4,40-5,50 4,68-5,08 3,20 2,68 3,10

113 880 > 4000 39 46 18

118 1240 60 46 7,5 88,9 43,2 100 5000 1500 437 10.000 1000 250 175 1300 0,045

5000 1500 437 10.000 1375 250 146 1300 0,022

3,62 3,32-5,86 4,50-8,26 6,76 6,22 3,40

> 8000 5,1 mL 4,48-5,99 3,90 490 5,13 18.000 6,13

> 8000 5,1 mL

* LD50: dose letal para 50% das espcies estudadas (ratos ou camundongos), por via oral. esteroidais que apresentam uma estrutura do tipo 2-fenilnaftaleno. Estes compostos fenlicos pertencem, basicamente, famlia dos flavonides e das ligninas2-4,21,53. Durante o metabolismo secundrio das plantas vrios cidos hidroxibenzico e hidroxicinmico so formados, sendo que suas concentraes variam de acordo com a planta em questo53. Podese encontrar vrias classes de flavonides, de acordo com o nvel de oxidao e o modelo de substituio da cadeia heterocclica. As principais classes de flavonides so: flavonas, flavonis, flavanonas, antocianidinas, isoflavonas e chalconas3,4,53. Vrios cientistas tm focado suas pesquisas nas isoflavonas e nas ligninas. As isoflavonas so encontradas em uma variedade de plantas, incluindo as frutas, legumes e vegetais e so especialmente abundantes na soja e seus derivados, enquanto que as ligninas so produzidas a partir do catabolismo biolgico de gros inteiros, sementes, fibras e algumas frutas e vegetais, apresentando altas concentraes nas sementes do linho. As estruturas da genisteina (isoflavona) e enterolactona (lignina) so mostradas na Figura 3. As isoflavonas possuem uma estrutura difenlica que se assemelha aos estrognios sintticos como o dietilestilbestrol (DES). J as ligninas possuem uma estrutura derivada do 2,3-dibenzilbutano2-4,21,53. Ambos os tipos de fitoestrognios tm apresentado uma atividade estrognica da ordem de 10-2 a 10-3 quando comparada ao 17estradiol3. Isto significa que, se um fitoestrognio se ligar no organismo a um receptor de estrognio, ir produzir uma resposta cerca de 100 a 1000 vezes menor que a de um estrognio endgeno. Embora a concentrao destas substncias no corpo humano possa ser at 100 vezes maior que os valores encontrados para os estrognios

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endgenos, elas so facilmente metabolizadas e excretadas pela urina e pela blis, na forma de glucorondios e sulfatos conjugados. Portanto, a incluso destas substncias na dieta humana tem conferido mais um efeito benfico sade que deletrio. Afinal, evidncias cientficas tm mostrado que os fitoestrognios podem apresentar alguns benefcios sade quando relacionados a doenas cardiovasculares, cncer, osteoporose e sintomas da menopausa2-4,21,53. Por outro lado, estudos realizados com animais provenientes de regies agrcolas (monocultura) demonstraram que alguns fitoestrognios apresentaram atividade estrognica com efeitos deletrios sade animal. Algumas ovelhas, aps terem sido alimentadas por longo perodo com um tipo especial de pasto que continha as isoflavonas genisteina, formonoetina e biochanina A desenvolveram sintomas de infertilidade56. Posteriormente, estudos envolvendo ensaios in vivo com ratos e camundongos fmeas ovariectomizadas comprovaram tal potencial estrognico57. Ensaios in vitro mais recentes tambm mostraram que muitos fitoestrognios se ligam aos receptores de estrognios, produzindo um efeito agonista similar aos esterides sexuais exgenos58. Uma vez que a exposio ambiental s isoflavonas tem sido negligenciada pelos pesquisadores, poucos dados cientficos so encontrados na literatura4. Outras duas importantes substncias naturais que exibem atividade estrognica so a zearalenona, uma micotoxina produzida por um fungo presente nos alimentos embolorados, como milho, algodo e cevada, e o -sitosterol, encontrado em leos vegetais, legumes e na madeira. O -sitosterol usado como um moderador lipdico em medicamentos, podendo tambm ser detectado, em elevadas concentraes, nos efluentes provenientes de industrias de leo, polpa e papel4. Vrios testes e biomarcadores tm sido desenvolvidos para detectar a atividade estrognica de uma determinada substncia. Um marcador bastante usado a vitelogenina (VTG), uma protena presente no plasma sangneo e que desempenha importante papel no sistema reprodutivo de vertebrados ovparos fmeas. Tal substncia, sintetizada no fgado, regulada por estrognios e transportada atravs do sangue para os ovrios. Em organismos de machos a vitelogenina tambm est presente, mas apresenta uma concentrao pouco expressiva. Entretanto, sua concentrao no plasma pode se tornar elevada aps a exposio de um determinado organismo a substncias que apresentam atividade estrognica4,5,18,22,57. o caso do -sitosterol, capaz de induzir a produo de vitelogenina em peixes machos, bem como produzir efeitos andrognicos em peixes fmeas, tais como o desenvolvimento dos rgos reprodutivos masculinos59. Substncias qumicas sintticas Esta classe de substncia suspeita de causar alterao no sistema endcrino composta pelas substncias de origem antrpica como os xenoestrognios (tambm denominados estrognios ambientais) e aquelas comumente utilizadas como matria-prima ou fabricadas durante os processos industriais. Tambm fazem parte desta classe as substncias usadas nas atividades agrcolas, como os pesticidas2-5,22,40,44-46,48-51,60-64. Os produtos qumicos sintticos e os estrognios ambientais incluem uma srie de organoalogenados persistentes como os inseticidas DDT e seu metablito DDE, toxafeno, dieldrin, bifenilas, assim como uma variedade de outros compostos no organoclorados como os bifenis, ftalatos, alquilfenis, hidrocarbonetos policclicos aromticos, compostos organometlicos, dentre outros2. Os pesticidas compreendem um grupo de substncias produzidas com o objetivo de eliminar um organismo indesejvel ou control-lo de alguma maneira, por exemplo, interferindo em seu processo reprodutivo. Todos os pesticidas tm a propriedade comum de bloquear um processo metablico vital dos organismos para os quais so

txicos. Devido grande diversidade de produtos existentes (somente no Brasil so cerca de 300 princpios ativos em 2 mil formulaes comerciais diferentes), os pesticidas podem ser classificados de acordo com sua funo, como por ex., inseticidas, herbicidas, fungicidas, algicidas, dentre outros, e tambm de acordo com o seu poder txico. Esta segunda classificao fundamental para o conhecimento da toxicidade aguda de um determinado pesticida2,61. Vrios pesticidas, bem como muitos de seus metablitos, esto comprovadamente relacionados com alteraes no sistema endcrino, observadas em estudos envolvendo ensaios in vitro e in vivo, sobretudo de espcies animais provenientes de ambientes aquticos. Muitos deles tambm so persistentes no meio ambiente devido, principalmente, a sua estabilidade qumica, baixa solubilidade em gua e elevada lipofilicidade, podendo ser facilmente bioacumulados. Dentre as substncias, destacamse os inseticidas organoclorados como os ciclodienos (aldrin, dieldrin, endrin, clordano, toxafeno, telodrin, isodrin, endossulfan, heptacloro e mirex), os diclorodifeniletanos e seus derivados (DDT e metablitos DDE e DDD, bem como o metoxicloro), e os hexaclorocicloexanos (ismeros do hexaclorobenzeno HCH, sendo o lindano, ou -HCH, o mais importante deles); os inseticidas base de organofosforados e carbamatos (diclorvos, clorpirifos, paration, diazinon, carbaril e carbofurano); os fungicidas como a vinclozolina (usada em frutas e vegetais e cujos metablitos apresentam atividades anti-andrognicas); os herbicidas ( base de triazinas, como atrazina e simazina, e linuron, diuron e seus metablitos) e, ainda, os pesticidas organometlicos, como o tributilestanho (TBT), empregado como moluscicida, fungicida (preservante de madeira), biocida e inseticida, bem como estabilisante de plsticos base de PVC, e ainda usado pela Marinha como agente antimofo (algicida) nas tintas aplicadas em embarcadouros, cascos de navios, recipientes para conserva de lagostas, redes de pesca, etc., com o objetivo de evitar incrustaes e prevenir o acmulo de organismos marinhos viscosos, como larvas de blanos2-5,22,48-50,61. O pentaclorofenol tambm utilizado como pesticida com mltiplos usos: herbicida como desfolhante pr-colheita, inseticida no controle de cupins, fungicida como preservante de madeira e no tratamento de sementes, e como moluscicida no controle de lesmas. O interesse ambiental envolvendo tal substncia est na sua elevada toxicidade, uma vez que considerada como sendo uma das maiores fontes de gerao de dioxinas para o ambiente, por ex., aps a queima da madeira tratada com pentaclorofenol2,22. As bifenilas constituem um grupo de produtos qumicos sintticos caracterizados pela presena de anis aromticos halogenados. As bifenilas policloradas (PCB) foram introduzidas no meio ambiente em 1929 e produzidas por vrios pases a partir de diversos processos industriais. Teoricamente esta classe compreende 209 compostos individuais (congneres), mas apenas 130 deles so encontrados em produtos comerciais. Embora a produo destes compostos tenha sido banida em 1980, suas aplicaes incluem o uso em capacitores dieltricos, fluidos hidrulicos, lubrificantes, fluidos de transferncia de calor e plastificantes. Tais compostos so encontrados nos ambientes aquticos principalmente adsorvidos nos sedimentos e/ou materiais particulados, devido elevada bioestabilidade, hidrofobicidade e lipofilicidade, e seu potencial para bioacumulao e biomagnificao. Em vista de sua toxicidade e a de seus contaminantes (furanos), as bifenilas policloradas presentes no ambiente, bem como os seus metablitos como as PCB hidroxiladas, so bastante impactantes sade humana e animal, particularmente no que se refere ao crescimento e desenvolvimento de um determinado organismo, podendo exibir efeitos agonista e antagonista no sistema endcrino. Portanto, a principal fonte de exposio humana s bifenilas policloradas est nos alimentos, principalmente no consumo de peixes e derivados, e animais com altos teores de gorduras2-4,22,48-50,64.

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As bifenilas polibromadas (PBB) so empregadas como aditivos nas formulaes de materiais usados como agentes retardantes de chama, no combate a incndios. Tais agentes so usados em plsticos, circuitos eletrnicos, pela indstria txtil e em outros materiais empregados para prevenir incndios. Alm das PBB (dos 209 possveis congneres apenas 45 destes foram sintetizados), outras substncias como os difenilteres polibromados (PBDE), o hexabromociclododecano (HBCD) e o tetrabromobisfenol A (TBBPA) tambm so comumente utilizados como agentes retardantes de chama. Estas substncias so empregadas mundialmente em vastas quantidades. Estima-se que 600 mil t de retardantes de chama so produzidas mundialmente, a cada ano, sendo 60 mil correspondente aos compostos clorados e 150 mil aos compostos bromados. Estas substncias so bastante persistentes, lipoflicas e apresentam elevado potencial para bioacumulao. Tambm mostraram produzir uma resposta estrognica em estudos envolvendo ensaios in vitro3,5,22. As dioxinas e furanos so denominaes genricas para dois grupos similares de substncias qumicas aromticas e policloradas: as dibenzo-p-dioxinas (PCDD) e os dibenzofuranos (PCDF). Estas substncias no so produzidas comercialmente e sim geradas como subprodutos de vrios processos industriais e de combusto. Sem dvida, a principal fonte destas substncias a incinerao de resduos (lixo), como os provenientes de reas hospitalares e municipais2-4,22,48,49. Dioxinas e furanos so formadas na zona de ps-combusto dos incineradores, onde a temperatura muito menor (250-500 C) que a da prpria chama. Traos de ons metlicos contidos no resduo provavelmente catalisam o processo de combusto, sendo a quantidade de cloro presente no lixo mais que suficiente para formao das mesmas. Chamas provenientes de incndios florestais tambm emitem para o ambiente vrios congneres da famlia das dioxinas. Outras fontes incluem a reciclagem de metais e a produo de solventes comuns, e as indstrias de polpa e papel que ainda empregam processos de branqueamento da polpa de celulose base de cloro2-4. A tetraclorodibenzo-p-dioxina (TCDD) a substncia mais biologicamente ativa e mais txica das presentes neste grupo de contaminantes ambientais. Estudos com animais mostraram que a TCDD apresenta um efeito deletrio nas funes reprodutivas, produzindo ambos os efeitos anti-estrognico e antiandrognico. Dioxinas e furanos tambm so persistentes no meio ambiente e podem ser bioacumuladas nos organismos, causando alteraes no sistema endcrino, uma vez que so substncias comprovadamente cancergenas2-4,22,48,49. Bisfenol um nome genrico dado a um grupo de difenilalcanos comumente empregados na produo de plsticos. O bisfenol A, principal representante deste grupo, uma substncia amplamente utilizada durante os processos industriais como monmero na produo de polmeros, policarbonatos, resinas epxi e resinas de polisterestireno insaturadas, e ainda como fungicidas e agentes retardantes de chama. Outras aplicaes incluem seu uso como estabilizante na produo de plsticos (inclusive embalagens de alimentos), como revestimento interno nas latas de alumnio usadas em bebidas, como selante dentrio, como antioxidante, dentre outras. Este composto ocorre no ambiente como resultado do processo de lixiviao dos produtos finais manufaturados a partir deste, podendo estar presente nos vrios compartimentos: ar, gua, solo, sedimento e biota. Embora apresente solubilidade em gua moderadamente elevada, o valor do seu coeficiente de partio octanol-gua (log Kow 3,4) permite assumir que tal substncia est preponderantemente adsorvida na matria orgnica. Entretanto, seu transporte no ambiente aqutico constitui a maior rota de distribuio para os demais compartimentos ambientais. Uma vez presente no meio ambiente, o bisfenol A pode vir a ser degradado biologicamente, com velocidades bastante

diferenciadas, apresentando um tempo de meia-vida variando entre 1 a 180 dias em solos, bem como um tempo de meia-vida de 2,5 a 4 dias quando em gua. Com relao sua atividade estrognica, alguns estudos envolvendo ensaios in vitro mostram que o bisfenol A possui um potencial de 4 a 6 ordens de magnitude menor que o 17estradiol e, ainda, que pode apresentar atividade anti-andrognica. Pelo fato do bisfenol A ser bastante empregado nos processos industriais e tambm por participar das formulaes de produtos de uso domstico, suas principais fontes no meio ambiente so os efluentes industriais, os esgotos domsticos, bem como os lodos provenientes das estaes de tratamento de esgoto (ETE)2-4,22,44,45. Os disteres derivados do cido ftlico so empregados basicamente como plastificantes, principalmente aqueles contendo o grupo vinil como o cloreto de polivinila (PVC) e outras resinas como acetato de polivinila e poliuretano, bem como na fabricao de tintas, adesivos, papelo, lubrificantes e fragrncias, e tm sido utilizados h mais de 40 anos. Ftalatos podem ser introduzidos no ambiente atravs da lixiviao, sobretudo dos plastificantes utilizados na fabricao de plsticos de uso comum. Tais ftalados so encontrados no apenas na gua lixiviada como tambm nos lodos provenientes dos esgotos, na gua superficial, no sedimento e em algumas espcies aquticas, inclusive peixes. Por serem lipoflicos tendem a se acumular nos tecidos adiposos das espcies envolvidas em uma determinada cadeia alimentar, em um processo conhecido como biomagnificao. Como os seres humanos so muitas vezes o topo desta cadeia alimentar, altas concentraes destas substncias podero estar presentes na sua dieta. Em geral, a toxicidade aguda destes compostos relativamente baixa. Porm, estudos ecotoxicolgicos tm mostrado que alguns produtos da degradao destes, como os monosteres, podem ser txicos para os mamferos2,3,22,44,62,63. Os alquilfenis compreendem os surfactantes no inicos empregados principalmente na forma de etoxilados e que so sintetizados atravs da adio de xido de etileno ao nonilfenol, sob condies alcalinas. Dentre os alquilfenis, 4-nonilfenol e 4-octilfenol so os compostos de maior importncia ambiental devido escala em que so produzidos no ambiente, a partir de processos de biodegradao dos alquilfenis etoxilados. Embora nos ltimos anos o uso destes compostos na formulao de detergentes de uso domstico tenha sido diminudo em alguns pases da Europa, eles ainda continuam sendo empregados como componentes de detergentes industriais, como agentes dispersantes na produo de polpa e papel, como agentes emulsificantes nas formulaes de tintas ltex e pesticidas, como aditivos plsticos na produo de resinas fenlicas, como agente floculante, como espermicida em aplicaes contraceptivas, nas indstrias txteis, dentre outras. A maioria destes etoxilados, durante os processos de biodegradao como os empregados nas ETE, geram subprodutos txicos e persistentes que, aps serem introduzidos no meio ambiente, so acumulados nos organismos aquticos uma vez que so mais lipoflicos que os compostos que os originaram2-4,22,45,46. Os hidrocarbonetos policclicos aromticos (PAH) compreendem um grupo de mais de 100 substncias qumicas formadas principalmente durante a combusto incompleta da matria orgnica, tais como combustveis derivados do petrleo (gasolina e leo diesel) ou ainda a partir do carvo, madeira, etc. So formados a partir de fontes naturais ou antrpicas, sendo esta ltima a principal responsvel pela presena destes contaminantes no meio ambiente. As fontes naturais ocorrem como conseqncia de processos de sntese por bactrias, plantas e fungos, alm dos processos naturais de combusto, como os incndios florestais e as emisses vulcnicas. J as fontes antrpicas incluem os efluentes industriais e esgotos domsticos, processos de incinerao de resduos (inclusive lixos urbanos), derramamento acidental de petrleo, produo de asfalto e de alumnio e queima de combustveis fsseis, princi-

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Interferentes endcrinos no ambiente

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palmente provenientes de emisses veiculares2-4,22,50,64. Apresentam uma estrutura contendo dois ou mais anis aromticos fundidos, conforme ilustrado na Figura 4 para o benzo[a]pireno.

Figura 4. Frmulas estruturais de algumas substncias qumicas sintticas

A persistncia dos hidrocarbonetos policclicos aromticos no ambiente varia de acordo com a massa molar. Os que apresentam baixa massa molar, como naftaleno e antraceno, so degradados mais facilmente, apresentando um tempo de meia-vida que varia entre 9 a 43 h. Entretanto, a maioria deles apresenta elevada lipofilicidade podendo ser facilmente bioacumulados no meio ambiente. Pelo fato de apresentarem estruturas similares aos esterides sexuais podem tambm interferir no funcionamento natural do sistema endcrino, ligando-se aos receptores hormonais e produzindo um efeito antagonista, como j observado em estudos envolvendo ensaios biolgicos in vitro e in vivo2-4,22,50,64. A Figura 4 ilustra as estruturas das principais substncias qumicas sintticas mencionadas. As propriedades fsico-qumicas mais relevantes2-4,22,27,49,55,65 e a toxicidade aguda (LD50)49,55 dos interferentes endcrinos abordados neste artigo so fornecidas na Tabela 2. CONCLUSO Embora alguns estudos cientficos j terem relatado, h mais de 20 anos, a ocorrncia no meio ambiente de algumas substncias classificadas como interferentes endcrinos, somente nos ltimos 10 anos que pesquisas nesta rea comearam a ser intensificadas, principalmente em pases europeus, como Alemanha, Holanda, Sua e Espanha, e tambm nos EUA, visando no apenas a determinao analtica dos mesmos nos mais variados compartimentos

ambientais e a identificao de suas principais fontes, como tambm buscando desenvolver procedimentos analticos que permitissem avaliar os mecanismos de ao destas substncias no sistema endcrino de animais, incluindo os seres humanos. Hormnios sexuais naturais e sintticos so potentes interferentes endcrinos e podem ser encontrados nos ambientes aquticos em concentraes fisiolgicas, ou seja, muito prximas das encontradas no organismo. Entretanto, para se avaliar os riscos da exposio de organismos aquticos a tais substncias deve-se compreender tambm os mecanismos de degradao que as envolvem, alm do monitoramento das suas concentraes no meio ambiente. Para isso, deve-se recorrer aos ensaios biolgicos do tipo in vitro e/ou in vivo, embora este ltimo fornea dados ecotoxicolgicos mais relevantes quando se trata da identificao de interferentes endcrinos em potencial. Para muitas substncias qumicas sintticas como os pesticidas, os efeitos produzidos a partir das atividades dos mesmos no sistema endcrino (estrognica, andrognica, anti-estrognica e/ou antiandrognica), observados em ensaios in vitro, apresentam ordens de magnitude menores quando comparados aos hormnios endgenos como o estradiol, conforme relatado por alguns pesquisadores. Porm, no se deve ignorar a presena dos mesmos no meio ambiente, pois, embora paream ser menos potentes que os hormnios endgenos, muitos deles (especialmente os POP) so persistentes no ambiente, acumulando-se nos vrios compartimentos, principalmente biota, sendo posteriormente detectados nas guas, nos sedimentos, no material particulado rico em matria orgnica, mesmo aps terem deixado de ser produzidos industrialmente h vrias dcadas. Os interferentes endcrinos apresentam uma variedade de rotas de exposio no meio ambiente, dependendo basicamente das suas propriedades fsico-qumicas inerentes, das condies externas em que so utilizados, das condies ambientais como temperatura, radiao UV e contedo microbiolgico, dentre outros fatores. Uma das principais razes para que haja uma preocupao sobre este tema est nos possveis efeitos dos interferentes endcrinos na sade humana e no meio ambiente, incluindo vrias espcies animais. Substncias qumicas suspeitas de causar alterao no sistema endcrino esto potencialmente associadas a vrias doenas, como o cncer de testculo, de mama e de prstata, queda da taxa de espermatozides, deformidades dos rgos reprodutivos, disfuno da tireide e alteraes relacionadas com o sistema neurolgico. AGRADECIMENTOS Esse projeto tem o apoio da FAPESP (Fundao de Amparo Pesquisa do Estado de So Paulo), atravs dos processos 02/01829-4 (Doutorado), 01/02060-3 e 03/11757-3 (ambos Auxlio Pesquisa). REFERNCIAS
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