METABOLISMO DE LA GLUCOSA

La glucosa es un azcar vital en el metabolismo. El control de su transporte depende de hormonas, como la insulina, adrenalina o glucagn, y su almacenamiento se realiza de forma compacta, en forma de glucgeno. As, el glucgeno puede hidrolizarse en glucosas, y esta se puede oxidar a piruvato. El azcar se almacena de varias formas, y estas se asimilan en la dieta. Sin embargo, los glcidos nicamente pueden ser absorbidos por el intestino como monosacridos, y nunca en forma de dmeros... o polmeros.

Como resultado de la digestin de los glcidos asimilables presentes en la dieta, se originan, fundamentalmente, glucosa, fructosa y galactosa. En el intestino delgado participan la -glucosidasa y las -dextrinasas, que transforman derivados de la glucosa en -Dglucopiranosa. Sin embargo, tambin est la sacarasa y lactasa (galactosidasa), que hidrolizan sacarosa y lactosa, con el fin de obtener finalmente glucosa. La amilasa rompe el almidon en dextrinas (oligosacridos de 6 a 8 G), y en maltosa y derivados ramificados. 1

ABSORCIN DE LOS MONOSACRIDOS

Tiene lugar en tres pasos: 1.- Transporte desde el lumen intestinal al interior de la clula absortiva, a travs de la membrana luminal en cepillo. 2.- Transporte desde el interior celular hasta el espacio intercelular, a travs de la membrana contraluminal (= vasolateral) de la clula epitelial absortiva. 3.- Transporte hacia el interior de las clulas endoteliales de los capilares, y de stas hacia la sangre. El transporte puede darse mediante difusin facilitada o transporte activo: En la difusin facilitada, el soluto a transportar lo hace a favor de gradiente, la difusin est facilitada por la existencia de protenas canal, que son las que facilitan el transporte de algunos iones y molculas hidrfilas. Estas protenas integrales de membrana conforman estructuras en forma de poro inmersas en la bicapa, que dejan un canal interno hidroflico que permite el paso de molculas altamente lipfobas. La difusin facilitada de la glucosa a travs de la membrana celular es catalizada por transportadores de glucosa GLUT o SLC2 (por sus siglas en ingls: Solute Carrier Family 2) que pertenecen a la superfamilia de transportadores facilitadores y que incluyen aniones inorgnicos y transportadores de cationes. El transporte de molculas por parte de estas protenas transportadoras es un ejemplo de difusin facilitada y no requiere del ATP para el mecanismo de su transporte. En el transporte activo se efecta un transporte en contra de gradiente de concentracin y, para ello, las protenas transportadoras implicadas consumen energa metablica.

TRANSPORTADORES
Existen dos sistemas de transporte de glucosa y otros monosacridos: Transportadores de sodio y glucosa (SGLT): o SGLT 1: Km = 0,3 mM para glucosa (en el intestino delgado) o SGTL 2: Km = 1,6 mM en el rin o SGLT 3: Km = 6 mM Transportadores GLUT: existen 13 diferentes (GLUT 1 13). Sin embargo, los 5 ms importante son: o GLUT 1 y 3: se encuentran en casi todas las clula y transportan glucosa constantemente (Km GLUT 1 = 1,5 mM y GLUT 3 = 2 mM) o GLUT 2: se encuentra en el hgado y en las clulas pancreticas . Tambin transporta glucosa y fructosa. Al poseer una Km muy elevada (16-18 mM) solo entra la glucosa cuando su concentracin es elevada. As, el pncreas puede percibir el nivel de glucosa y ajustar la rasa de secrecin de insulina. Cuando los niveles son bajos, se utiliza preferiblemente en el cerebro y tejidos con sistemas con Km menor. o GLUT 4: posee una Km de 5-6 mM. Se trata del mediador de la entrada de glucosa en el msculo y los adipocitos. La insulina induce un rpido aumento del nmero de transportadores GLUT 4 en PM (membrana plasmtica), estimulando la entrada de glucosa en estos tejidos. o GLUT 5: es un transportador de fructosa, con una Km 11 15 mM. Su afinidad por otros monosacridos es mnima. Se localiza en el yeyuno, tbulos renales, testculos y tejido adiposo.

IMPORTANCIA DE LA GLUCOSA
La glucosa es el principal combustible para la mayora de los organismos. Es una molcula rica en energa, cuya oxidacin completa a CO2 y H2O produce 2840 KJ/mol. Es una molcula que, cuando hay demanda energtica, se libera directamente. Su degradacin proporciona gran cantidad de metabolitos, que sirven de partida para reacciones biosintticas (3-BPG, F-6-P). Es una molcula verstil que posee tres destinos: el almacenamiento (en forma de glucgeno), su oxidacin va gluclisis y su oxidacin va pentosas fosfato.

GLUCLISIS
La glucolisis es la principal ruta para la degradacin de la glucosa. Tambin se conoce como la ruta de Embden-Meyerhof. Es una ruta vital, puesto que es casi universal, produce energa e intermediarios intermedios y se conoce su regulacin. La gluclisis se trata de un proceso anaerobio en la que una molcula de glucosa se oxida para producir 2 molculas de piruvato y una cantidad limitada de ATP. Se trata de una ruta de 10 reacciones. Se trata de un proceso con dos fases: Preparatoria: 5 reacciones en las que se consumen 2 ATP Beneficios: 5 reacciones en las que se forman 4 ATP y 2 NADH

FASES DE LA GLUCLISIS
R1. FOSFORILACIN DE LA GLUCOSA
La glucosa es activada mediante su fosforilacin a G6P (irreversible bajo condiciones intracelulares). Se utiliza ATP. La reaccin es catalizada por la enzima hexoquinasa, la cual necesita Mg+2. La hexoquinasa no es una enzima especfica, por lo que puede fosforilar otros monosacridos, como fructosa. En el caso de los hepatocitos, la enzima es la glucokinasa, especfica para la glucosa.

R2. ISOMERIZACIN DE G6P

Cambio de glucosa-6-fosfato (piranosa) a fructosa-6-fosfato (furanosa) , es decir, la isomerizacin reversible de una aldosa (glucosa) a una cetosa (fructosa), catalizada por la enzima fosfoglucosa isomerasa.

R3 FOSFORILACIN DE F6P A F 1,6 BIP

Se trata de un punto principal de la regulacin de la glucolisis. Es una reaccin IRREVERSIBLE en la que la fructosa-6-fosfato es fosforilada a fructosa-1,6-bisfosfato por la fosfofructokinasa-1. En el proceso, el ATP (sustrato) se trasforma en ADP. Hay dos sustratos: el ATP y la F6P.

R4 ESCISIN DE F-1,6-BISP
Se produce la condensacin aldlica reversible por una aldolasa de la fructosa 1,6-bisfosfato en dihidroxiacetona-fosfato y gliceraldehido-3-fosfato. La rotura se produce entre el C3 y el C4; por lo que el C3 pasar a ser C1 en la dihidroxiacetona; y el C4 pasar a ser el C1 en el GAP. 3

R5. INTERCONVERSIN DE TRIOSAS FOSFATO

Mientras que el gliceraldehdo-3-fosfato sigue la glicolisis, la dihidroxiacetona fosfato es isomerizada por la triosa fosfato isomerasa en gliceraldehido-3-fosfato (pasando por enediol). As, concluimos con la fase preparatoria de la glucolisis; formando dos GAP.

R6. OXIDACIN DE GAP PARA DAR 1,3-BISFOSFOGLICERATO

El grupo aldehdo del GAP se oxida por la gliceraldehido-3-P-deshidrogenasa y se fija un grupo fosfato. El H lo acepta el NAD+. En consecuencia, se produce un acil-fosfato, que es un compuesto de alta energa. El C1 pasa de ser un aldehdo a un cido, de ah la oxidacin. En la segunda reaccin, el cido se deshidrata, unindose el fosfato.

En otras fuentes el agua no aparece

R7 TRANSFERENCIA DEL FOSFATO DEL BPG AL ADP

La reaccin es catalizada por la fosfoglicerato quinasa. La energa liberada por la oxidacin de un aldehdo (con el P) a un grupo carboxlico se conserva con la formacin acoplada de ATP. En consecuencia, el 1,3bisfosfoglicerato se transforma en 3-fosfoglicerato. El BPG se encuentra cargado porque est a pH fisiolgico. Si no se llamara cido fosfoglicrico.

R8. CONVERSIN DE 3 FOSFOGLICERATO A 2-FOSFOGLICERATO

Se trata de una reaccin de isomerizacin reversible catalizada por la fosfoglicerato mutasa, en la que el P del C3 pasa al C2.

R9. DESHIDRATACIN DE 2-FOSFOGLICERATO PARA DAR FOSFOENOLPIRUVATO

Es una reaccin catalizada por la enolasa. Se trata de una reaccin de deshidratacin en la que el 2fosfoglicerato para a 2-fosfoenolpiruvato, un compuesto de alta energa.

R10 TRANSFERENCIA DE FOSFATO DEL PEP A ADP

Es la reaccin en la que se produce el segundo ATP. Se trata de un fosforilacin irreversible catalizada por la piruvato quinasa en la que la energa de la ruptura del enlace O-P produce la sntesis de ATP.

OXIDACIN DEL NADH

El NADH generado en el interior mitocondrial se encuentra en el compartimento adecuado para poder ser oxidado y producir ATP en la fosforilacin oxidativa. Sin embargo, el NADH+ producido en el citosol no puede atravesar la membrana interna mitocondrial por lo que tiene que ser transportado. La reaccin catalizada por la gliceraldehido-3-P-DH en el citosol forma NADH+, el cual debe ser oxidado para producir ATP (en la cadena respiratoria). Sin embargo, el NADH+ no puede atravesar la membrana interna mitocondrial. El problema se puede solucionar de dos formas:

LANZADERA MALATO-ASPARTATO
Comienza con el oxalacetato citoslico. Esta es reducido a malato por accin de la malato deshidrogenasa y es transportado a la matriz mitocondrial. All, el malato es deshidrogenado de nuevo a oxalacetato en el ciclo de Krebs. De este modo, conseguimos el NADH que necesitbamos, el cual se oxida en la cadena respiratoria. El oxalacetato puede ser devuelto al citosol, pero no puede pasar la membrana interna mitocondrial, Para ello, es transformado a aspartato por la aspartato aminotransferasa (transaminacin); atraviesa la mmi, se transamina a oxalacetato y se completa el ciclo. Esto sucede en el corazn, hgado y rin. El glutamato y ceto glutarato se usaran, posiblemente, porque pueden ceder y tomar grupos, as como poder pasar junto con sus respectivas molculas por los transportadores.

Hay que tener en cuente que el cetoglutarato es la 4 molcula de Krebs.

L-GLICEROL-3-P
El glicerol-3-fosfato utiliza el NADH en presencia de glicerol-3-fosfato-deshidrogenasa para reducir la dihidroxiacetona-P en glicerol-3-P. Este difunde al espacio intermembranal de la mitocondria, donde es oxidado por el isoenzima G-3-P-DH mitocondrial. Los productos de la reaccin son dihidroxiacetona-P, la cual vuelve al citosol, y FADH2 (que siempre se halla unido al centro activo dl enzima), que se oxida en la cadena respiratoria (1.5 ATP). En el proceso, el FADH2 reduce la Q (ubiquinona) y forma QH2, la cual cede sus e- al complejo III. Es un proceso que funciona en el msculo y el cerebro. En la lanzadera se obtiene menos energa, porque la enzima que ayuda a reducir la FAD no es la natural de la cadena de electrones, sino la flavoprotena deshidrogenasa (GAP DH, o ambas)por lo que se generan 2 ATP en lugar de 2,5 por cada NADH citoplasmico reoxidizado.

FERMENTACIN LCTICA
Se trata del uso anaerbico del piruvato. El piruvato es transformado a L-lactato por la lactato deshidrogenasa. En el proceso, el NADH se oxida a NAD+. Solo se produce 2 ATP, ya que el NADH que se podra utilizar se transforma en NAD+ para que pueda ser reutilizado en el gluolisis, pero no en reacciones para obtener energa. Es un proceso que se da en eritrocitos y msculo esqueltico tras un ejercicio intenso en un breve periodo de tiempo.

CICLO DE CORI
El ciclo de Cori comprende una serie de rutas. La primera parte se produce en el msculo, con la gluclisis y fermentacin de glucosa a cido lctico. Posteriormente, una vez ha cesado la actividad, ese lactato viaja al hgado para que se produzca la gluconeognesis y se forme glucosa. Pese a generarse glucosa, el balance de energa es negativo, ya que se necesita ms ATP en la gluconeognesis que el que se forma en la glucolisis.

FERMENTACIN ALCOHLICA
La fermentacin alcohlica comprende una serie de reacciones para metabolizar el piruvato en condiciones anaerobias. El producto resultante es etanol. Esta ruta es utilizada para producir pan y bebidas alcohlicas (cerveza). En la fermentacin alcohlica, el piruvato es descarboxilado por la piruvato descarboxilasa, producindose acetaldehdo y CO2. Este acetaldehdo ser reducido a etanol por la alcohol deshidrogenasa. 6

En la descarboxilacin, la piruvato descarboxilasa suele necesitar tiamina difosfato y Mg, que acta como coenzima, no necesita NAD+. La TDP ( o TPP) es un derivado de la tiamina, o vitamina B1, que se encuentra en cereales y en el hgado. Su deficiencia produce beriberi. Por el hecho de tener el pirofosfato, la enzima se activa.

REGULACIN DE LAS RUTAS METABLICAS

A la hora de estudiar la regulacin metablica, hay que comprender que en funcin de sus necesidades, la clula sintetizar mayor o menor cantidad de un compuesto, lo que significa que una va determinada estar ms o menos activa. Asimismo, las vas de sntesis y degradacin no tienen por qu estar activas a la vez. Una ruta metablica comprende varios pasos, y distinguimos dos puntos clave: Reacciones en equilibrio, cuya velocidad est controlada por la disponibilidad del sustrato. Reacciones altamente exergnicas, que son irreversibles. La regulacin de las vas se realizar por estos puntos.

REGULACIN DE LA GLUCOLISIS
La gluclisis posee tres reacciones irreversibles, que sern los tres puntos de regulacin. Estos puntos recaen sobre tres quinasas: la hexoquinasa (R1), la fosfofructoquinasa (R3) y la piruvato quinasa (R10).

En la hexoquinasa el producto es el propio inhibidor (G6P), cosa que en la glucoquinasa no. En el caso del msculo, la G6P inhibe la hexoquinasa, debido a que las cantidades que se producen son muy elevadas (Km = 0,1 mM). En cambio, en el hgado la produccin de G6P no es tan elevada (Km = 10 mM), y la glucoquinasa no es inhibida. La fosfofructoquinasa es el enzima con ms relevancia en la regulacin. Todos los monosacridos, excepto la fructosa heptica, pasan por la fosfofructoquinasa. La fosfofructokinasa es inhibida por el citrato (Si la concentracin de citrato es alta el Ciclo de Krebs va ms despacio de lo que el sustrato (acetil-CoA) llega para degradarse, y la concentracin de glucosa ser ms alta. En el Ciclo de Krebs se produce mucho NADH y FADH2, para que funcionen 7

se han de reoxidar en la cadena de transporte electrnico creando gradiente de protones, si el gradiente no se gasta los coenzimas no se reoxidan y el Ciclo de Krebs se para.) y el ATP (si hay ATP significa que no es necesario un aporte energtico, y la gluclisis se detiene); y activada por AMP y ADP (su presencia indica falta de ATP), y fructosa 2,6-bisfosfato. Para anular la inhibicin del ATP, tanto AMP como F-2,6-bP deben estar presentes.

La piruvato kinasa es activada por la F-1,6-bP; mientras que es inhibida por el ATP, la alanina (produce piruvato, lo que inhibe el enzima) y Acetil-CoA (es la molcula con la que se consigue energa; si hay Acetil-CoA no es necesario mas piruvato). Asimismo, la piruvato kinasa tambin es inhibida siendo fosforilada. Tambin se regula hormonalmente, de modo que el glucagn la inactiva (induce su fosforilacin) y la insulina la activa.

DEGRADACIN DE DISACARIDOS Y MONOSACRIDOS DERIVADOS

La glucosa es la molcula que mayoritariamente se degrada a piruvato, por lo que los dems sacridos se convertirn en glucosa de diferentes maneras. La hidrlisis de disacridos produce monosacridos tal que:

Los monosacridos tambin se transforman: La galactosa se fosforila a galactosa-1-P y se isomeriza de galactosa-1-P a glucosa-1-P y despus a glucosa-6-P. La fructosa se transforma segn el tejido: o Se fosforila a F6P en musculo y rin o Se fosforila a F1P y se hidroliza en hgado.

10

GLUCONEOGNESIS
La gluconeognesis es la sntesis de novo de glucosa a partir de precursores no glucdicos, que se produce en microorganismos, hongos, plantas y animales. En estos ltimos ocurre prcticamente en el hgado, y en menor medida en la corteza renal. El rin toma mayor relevancia en estados de ayuno prolongado. El higado sintetiza glucosa a partir de lactato, piruvato, aminocidos glucognicos, glicerol, etc. La glucosa sintetizada va al sistema nervioso y msculo esqueltico, as como para la formacin de glucgeno, glucoprotenas, disacridos, etc. AMINOCIDOS GLUCOGNICOS Y CETOGNICOS Los aminocidos pueden ser glucognicos, cetognicos o ambos. Los glucognicos son los que dan lugar a una produccin neta de piruvato o intermediarios del ciclo TCA, tales como -cetoglutarato u oxalacetato, que son precursores de la glucosa via gluconeognesis. Todos lso aminocidos excepto la lisina y la leucina son al menos en parte glucognicos. La lisina y la leucina son los nicos aminocidos solamente cetognicos, dando lugar a acetil-CoA y acetoacetil-CoA, ninguno de los cuales puede producir glucosa.

SENTIDO DE LA GLUCONEOGNESIS
La gluconeognesis procede con las mismas reacciones que la gluclisis excepto 3 reacciones, que son las irreversibles de la glicolisis. Por tanto, las tres reacciones distintas que se producen en la gluconeognesis son la conversin de la G6P en glucosa (por la glucosa-6-fosfatasa), la conversin de la F-1,6-bP en F-6-P por la fructosa-1,6-bisfosfatasa, y la conversin del piruvato en fosfoenolpiruvato en dos reacciones: formacin de oxalacetato y posterior formacin de fosfoenolpiruvato.

La biotina acta como coenzima y proviene de las vitaminas H,B7 y B8. Sus anillos forman una silla y en el anillo de isoureido hay un grupo NH que transporta el CO2. Su deficiencia provoca dficit en sntesis de aas, cada de pelo y dermatitis.

11

PIRUVATO CARBOXILASA

POR QU SE PASA POR LA MITOCONDRIA?

En el citoplasma, el NADH es escaso y se requiere en la reduccin de 1,3-bisfosfoglicerato a gliceraldehido-3-P. Para ello, el NADH es exportado de la mitocondria al citoplasma. Para ello el piruvato es transformado a oxalacetato y malato en la mitocondria, y este ltimo es exportado al citosol para transfromarse de nuevo en oxalacetato y soltar NADH. Si el sustrato es lactato (en el hgado), su conversin a piruvato ya genera NADH en el citosol. As, el piruvato entra a la mitocondria y es carboxilado a OAA, para ser descarboxilado a PEP por la carboxiquinasa mitocondrial. Despus, este PEP para al citosol.

12

DE F-1,6-BP A F-1-P
La reaccin es catalizada por la fructosa-1,6-bisfosfatasa, segn la reaccin:

DE G6P A GLUCOSA
La reaccin es catalizada por la glucosa-6-fosfatasa, que se encuentra en el RE de los hepatocitos y clulas renales. La G6P debe ser transportada al RE. Se une a una prtoena estabilizadora (SP). Se produce G y Pi que deben ser transportados al citosol. En el proceso INTERVIENEN 5 ENZIMAS:una para introducir la G6P en el lumen del RE, otra para catalizar la hidrolisis, dos para sacar tanto la glucosa como el Pi al citosol, y la ltima para introducir la glucosa en la sangre.

BALANCE ENERGTICO DE LA GLUCONEOGNESIS

La conversin de piruvato a glucosa es un proceso caro e irreversible, por lo que para que se eviten errores de descoordinacin slo se da en hgado y rin.

AMINOCIDOS Y CIDOS GRASOS GLUCONEOGNICOS

Son aquellos aminocidos que pueden convertirse a glucosa: A, C, G, S, T, W (como piruvato); R, Q, E, H, P (como -cetoglutarato); I, M, T, V (como succinil-CoA); F, Y (como fumarato); N, D (como oxalacetato). Por el contrario, los AG no general glucosa en mamferos porque la reaccin de la piruvato-DH es irreversible (el acetil-CoA no puede ser reconvertido en piruvato). Las plantas, levaduras y otras especies se aprovechan del ciclo del glioxilato para producir dichos azucares. Pese a no poder sintetizar Glucosa a partir de AG, lo podemos hacer a partir del glicerol: el glicerol se transforma en glicerol fosfato, que pasa a DHAP y sigue la gluconeognesis

13

INSULINA, GLUCAGN Y ADRENALINA

La insulina es un anabolizante que se secreta en respuesta a una alta concentracin de glucosa en sangre, el glucagn se sintetiza cuando la concentracin de glucosa es baja y, por ultimo, la adrenalina moviliza los combustibles en respuesta a estrs o emergencia.

Esta regulacin de la gluclisis-gluconeogensis es vital ya que, si por ejemplo, la reaccin de F6P a F-1,6bP ocurriera en ambas reacciones de manera simultnea, tendramos un ciclo futil con degradacin de ATP sin que se realizara ningn trabajo neto, lo que implicaria la perdida innecesaria de energa de la clula. Sin embargo, no es un ciclo intil (antes se pensaba que era un error delmetabolismo), puesto que muchos organismos necesitan calor. Asimismo, esa capacidad de fosforilacin-desforforilacin instantnea permite regular las rutas (a continuacin).

14

Un metabolito A se convierte en B con una tasa de conversin de 100; mientras que la reconversin de B en A ocurre con una tasa de 90. Por tanto, la tasa de conversin de A a B es 10. Si consideramos una molcula con capacidad de unin a ambos enzimas, provocando una moificacin alostrica que aumento o disminuya afinidad. En consecuencia, la molcula nueva provocar que la tasa de A a B aumente a 120; y la inversa disminuir a 72. Ahora el flujo neto es 48. Esta es la razn porque los ciclos ftiles son importantes, ya que aumentan la capacidad de regulacin en una ruta. Las enzimas clave del ciclo F-6-P / F-1,6 bP con la fosfofructoquinasa I y la F-1,6-bisfosfatasa. En el hgado hay actividad fosfatasa 4 veces ms que quinasa, por lo que la direccin de la reaccin es hacia la gluconeognesis. En el musculo, por el contrario, predomina la actividad quinasa, por lo que el flujo va hacia glicolisis. La funcin de la F-1,6-bPasa es amplificar la respuesta glicoltica en respuesta a la demanta de ATP (ciclo futil o de sustrato).

15

RUTA DE LAS PENTOSAS FOSFATO

La glucosa-6-P tiene 3 destinos diferentes: Msculo y cerebro, donde sigue la gluclisis, dando piruvato o En condiciones aerobias da CO2 y agua (lo que ocurre siempre en el cerebro) o En condiciones anaerobias da lactato, que vuelve a glucosa por el ciclo de Cori (en msculo) En hgado, se da la gluconeognesis, en la que la G6P es desforsforilada a G libre y pasa al torrente circulatorio con transportadores especficos. Ruta de las pentosas fosfato: genera dos metabolitos esenciales: o Ribosa-5-P: componente esencial de cidos nucleicos, ATP o NADPH: posee poder reductor, por lo que se considera como otra forma de energa (SON CASI 3 ATP). Se requiere en: Vas de sntesis de cidos grasos, colesterol, neurotransmisores y nucletidos. Detoxificacin de glutatin oxidado y las ci 450 monooxygenasas.

Los tejidos donde se dan estas rutas son: Glndula adrenal (esteroides), hgado (AG y colesterol), testculos (esteroides), tejido adiposo (AG), ovario (esteroides), glandula mamaria (AG), eritrocito (mantenimiento de glutatin). La via de las pentosas fosfato comprende una serie de vas para generar NADPH, que posee poder reductor, y ribosa-5P, un metabolito que se utiliza en la sntesis de ATP, CoA, NAD+, FAD y cidos nucleicos. //RECORDAR QUE: NADH procesos catablicos y NADPH procesos catablicos La ruta de las pentosas fosfato est regulda por la G-6-P deshidrogenasa y por la disponibilidad de NADP+. El NADPH + H+ generado se utiliza para la biosntesis de FA, colesterol y glucatin reducido (en eritrocitos). Esta ruta est activa en el hgado, tejido adiposo, glndula mamaria, corteza adrenal y eritrocitos. El NADPH se utiza en varias reacciones: sintesis de acidos grasos, colesterol, neurotansmisores y nucleotidos; as como reduccin de glutation oxidado y en monooxigenasas del cit P 450.

FASES DE LA RUTA

La ruta posee dos fases: Fase oxidativa irreversible: comprende las reacciones catalizadas por la G-6-P-DH, lactonasa y 6-fosfogluconatoDH. Ribulosa-5-P se isomeriza a R-5-P a travs de un enodiol intermediario El NADPH es un inhibidor potente de la G-6-P-DH, ya que compite con el NADP+ por el mismo sitio de unin al enzima. (MODULADOR ALOSTERICO)

16

Fase no oxidativa reversible:se realiza la interconversin de azcares fosforilados. La va cataliza la interconversin de azcares de 3,4,5,6 y 7C en una serie de reacciones no oxidativas. Los azcares de 5C en exceso pueden convertirse en intermediarios de la glicolisis. La conversin de ribulosa-5-P en G-6-P ocurre a traves de una serie de reacciones que implican a dos enzimas nicos de esta ruta: transcetolasa y tranaldolasa. Las pentosas-P producidas en la fase oxidativa se reciclan a G6P. La ribulosa-5-P se isomeriza a ribosa-5-P y xilulosa-5-P. A continuacin, en una serie de reordenamientos de los esqueletos carbonados, 6 azcares-P de 5 C se convierten e 5 azcares-P de 6 C, completando el ciclo y permitiendo la oxidacin continua de G6P con produccion de NADPH.

17

La transcetolasa cataliza la transferencia de un fracmento de 2C desde un dador Cetosa a un aceptor aldosa (transfiere del C1 y C2 de la xilulosa-5P a la ribosa-5P formando sedoheptulosa y GA3P)

La transaldolasa cataliza la transferencia de un fragmento de 3C desde la sedoheptulosa-7P al GA-3P formando F6P y eritrosa-4P.

La transcetolasa vuelve a actuar formando F6P y GA-3P (trnafiere 2C de un dador cetosa, la xilulosa 5-P, a un aceptor aldosa, la eritrosa 4-P). Dos molculas de GA-3P por repeticiones de estas reacciones pueden dar lugar a F-1,6BP. La fructosa bisfosfataja junto con la isomerasa, teasforman la F-1,6-BP en G6P CONSIDERACIONES DE INTERS El metabolismo de la G-6-P a traves de la va de las pentosas-P est coordinado con la glicolisis. El destino de G-6-P depende de [NADP+] y de las necesidades de NADPH, R-5-P y ATP que tenga de la clula.

MODALIDADES (EJEMPLOS)
Se requiere mucha ms R-5-P que NADPH en clulas en divisin rpida para la sntesis de acidos nucleicos. En consecuencia, la fase oxidativa queda inactivada (ya que no es necesario el NADPH) y la G6P pasa a gluclisis formando F6P y GAP, que pasan a formar ribosa-5-P mediante fase no oxidativa. Cuando se necesita tanto NADPH como ribulosa-5-P, la glucosa puede transformarse en ribulosa 55-fosfato, generando 2 NADPH y CO2. Esta ribulosa se transformara posteriormente en ribosa-5-P.

Cuando se necesita ms NADPH que ribosa-5-P (sntesis de AG por el tejido adiposo), se activa la fase oxidativa, que genera el NADPH; y se sigue con una fase no oxidativa que produce fructosa-6-P y gliceraldehido-3-P, que regeneran en G6P mediante reacciones de glucognesis.

18

Si se requiere NADPH y ATP se activa la fase oxidativa y en la fase no oxidativa se produce F6P y GAP, que dan lugar a piruvato y ATP. Este piruvato puede oxidarse y producir ms ATP.

19

GLUCGENO
El glucgeno es una forma de almacenamiento de glucosa fcilmente movilizable. El exceso de glucosa de la dieta se almacena como glucgeno. Se moviliza cuando surge una necesidad: actividad muscular, entre comidas ste se halla en el citosol, en forma de grnulos de 10-40 nm. Estos grnulos contienen glucgeno sintasa y fosforilasa, as como enzimas reguladores. Los principales lugares de almacenamiento de glucgeno son el hgado y el msculo estriado esqueltico. Se encuentra hidratado en proporcin 3:1 (de qu???). En el hgado, su funcin es regular el nivel de glucosa en sangre, mientras que en el msculo es suministrar glucosa para la actividad muscular. Sin embargo, existen defectos enzimticos congnitos que alteran el metabolismo del glucgeno y que generan enfermedades de almacenamiento del glucgeno: Enfermedad de Von Gierke: El hgado carece ge G-6-fosfatasa, por lo que se acumulan cantidades anormales de glucgeno en el hgado. En consecuencia, el exceso de glucosa-6-P produce un incremento de glicolisis en el hgado, aumentando los niveles de piruvato y lactato en sangre. Enfermedad de Pompe: carencia de -1,4-glicosidasa, que genera lisosomas llenos de glucgeno. Enfermedad de Cori: la carencia de -1,6-glicosidasa provoca que solo puedan utilizarse las ramas externas del glucgeno. Enfermedad de McArdle: ausencia de actividad glucgeno fosforilasa en el msculo. En consecuencia el cuerpo es incapaz movilizar el glucgeno muscular, hay menor tasa de gliclisis y aumenta la incapacidad de realizar ejercicio.

El glucgeno es un polmero muy grande y ramificado de molculas de glucosa, unidas por dos tipos de enlace: -1 4 y -1 6. Los enlaces -1 6 se producen aproximadamente cada 10 residuos, son los responsables de las ramificaciones. Pese a que el glucgeno almacena menos energa que los cidos grasos (son ms compactos y menos hidratados), la glucosa es fcilmente movilizable, lo que permite mantener los niveles de glucosa en sangre y trabajar con ella rpidamente, lo que permite ser utilizada como fuente de energa en condiciones anaerobias, a diferencia de los cidos grasos.

20

DEGRADACIN DEL GLUCGENO

Glucogenlisis: origina G-1-P, que puede ser convertida a G-6-P, pudiendo seguir diferentes caminos: Mediante gluclisis puede formarse piruvato, que se transformar a lactato o a CO2 + H2O. La G-6-fosfatasa crea glucosa, que se dirige a la sangre y se utilizar en otros tejidos. Puede seguir la ruta de las pentosas, y transformarse en ribosa y NADPH.

Para degradar el glucgeno existen dos enzimas: la glucgeno fosforilasa y la enzima desramificante. Esta ltima posee una actividad transferasa (traslada bloques de 3 glucosas de una rama externa a otra) y -1,6-glucosidasa (libera la glucosa unida en 1 6, que ser fosforilada por la hexoquinasa). La degradacin fosforlisis: puede realizarse mediante hidrlisis y

En la hidrlisis la se realiza la digestin de polisacridos y disacridos, mediante la inclusin de una molcula de agua en el enlace O-glucosdico. Esta degradacin requiere un posterior gasto de ATP para que la glucosa pueda metabolizarse. En la fosforlisis se realiza la movilizacin del glucgeno mediante la formacin directa de glucosa-1-P. Al mostrar varias cargas negativas (del P) la glucosa no puede atravesar la membrana. En la fosforlisis se realiza la adicin de ortofosfato en los extremos no reductores por la glucgeno fosforilasa, la cual posee un piridoxal fosfato (PLP) como grupo prosttico. In vitro, esta reaccin es reversible; aunque no in vivo, ya que la [Pi]/[G-1-P]=100 lo que favorece la fosforlisis.

21

REGULACIN DE LA GLUCOGENLISIS
La glucgeno fosforilasa es el enzima regulador. Su actividad se regula mediante dos mecanismos: Modificacin covalente reversible, por fosforilacin-defosforilacin, como respuesta a la accin hormonal. Regulacin alostrica por metabolitos: AMP y ATP en musculo; y glucosa en hgado.

El enzima puede hallarse fosforilada en la forma a (activa) o desfosforilada en la forma b (inactiva). Para pasar de la forma b a la forma a hay que fosforilar un residuo de serina de cada subunidad. Estas formas existen en equilibrio entre un estado activo (R) o relajado, y un estado tenso (T),menos activo. FOSFORILASA MUSCULAR La forma b se activa en presencia de altas [AMP] y se desactiva por ATP (compite con AMP) o con G6P (por unin al centro de AMP). La forma a, por el contrario, est totalmente activa independientemente de AMP, ATP o G6P. En el msculo en reposo, la mayor parte est en forma b; y cuando se realiza ejercicio, la elevada [AMP] conduce su activacin. Asimismo, durante el ejercicio se libera adrenalina, que conduce la forma a. FOSFORILASA HEPTICA La fosforilasa heptica se encarga de repartir glucosa al resto del organismo. La forma b no es sensible al AMP, pero se activa por fosforilacin por accin del glucagn. Se desactiva por unin a la glucosa y por desfosforilacin.

22

Sin embargo, para que la glucogeno fosforilasa trabaje, es necesaria una cascada de reacciones:

23

SINTESIS DE GLUCGENO
El exceso de glucosa es convertido en molculas polimricas para almacenarla y transportarla. En vertebrados, la principal forma de almacenamiento de glucosa es el glucgeno, mientras que en p`lantas es el almidon. En animales ocurre de manera prominente en el hgado y musculo esqueltico. En el hgado los proceso de sntesis y degradacin de glucgeno tienen la funcin de mantener los niveles de glucosa sanguneos tal y como se requieren para satisfacer las necesidades globales del organismo. En cambio en el msculo el glucgeno juega un papel de almacn de glucosa para sus propias necesidades.

BIOSNTESIS DE UPD-GLUCOSA
Para la biosntesis de polmeros de glucosa, se utilizan monmeros de azcar modificados con un nucletido: UDP glucosa. La UDP-glucosa es sintetizada a partir de G1P y UTP mediante una reaccin catalizada por la UDP-glucosa pirofosforilasa. La reaccin es dirigida hacia la formacin de UDP-glucosa por la degradacin rpida e irreversible del pirofosfato mediante pirofosfatasa inorgnica. Estas unidades de UDPglucosa son tramsferidas a los extremos no reductores del glucgeno por la glucgeno sintasa, que resuta ser el enzima regulador en la sntesis del glucgeno. El UDP es regenerado a UTP por la nuclesido difosfoquinasa a partir de ATP. La glucgeno sintasa requiere un cebador de glucgeno ya formado (de unos 8 residuos) para catalizar la reaccin. Este cebador es sintetizado por la glucogenina. Para ello, en primer lugar se realiza la transferencia de 24

una glucosa desde UDP-G al OH de la Tyr 194 de glucogenina. A continuacin se ataca el C-1 de otra UDPG por el OH de la glucosa terminal. A partir de entonces (8 G) la glucgeno sintasa se encargar de la elongacin.

ENZIMA RAMIFICANTE
La glucgeno sintasa solo cataliza enlaces 1 4 glucosdicos. Por tanto, es necesario otro enzima para formar enlaces 1 6 para crear las ramificaciones del glucgeno. La ramificacin tiene lugar despus de que un cierto nmero de unidades glicosilo se hayan unido mediante enlaces 1 4 por la glucgeno sintasa. Las ramas se forman por ruptura de un enlace 1 4 y formacin de un enlace 1 6.

El enzima ramificante transfiere bloques de 7 residuos de glucosa hacia un lugar ms interior. Este bloque debe incluir el extremo no reductor y proceder de una cadena de al menos 11 residuos. El nuevo punto de ramificacin que se genera debe distar de otro preexistente al menos en cuatro residuos. La ramificacin del glucgenpo es importante, ya que se incrementa su solubilidad y se genera un gran nmero de residuos terminales no reductores, lugares de accin de glucgeno fosforilasa y sintasa, lo que incrementa la velocidad de sntesis y degradacin del glucgeno.

REGULACIN DE LA SNTESIS DE GLUCGENO

La regulacin de sntesis y degradacin del glucgeno es compleja: Regulacin alostrica: control de las actividades enzimticas para ajustar el metabolismo del glucgeno a las necesidades de la clula Regulacin hormonal: ajustar el metabolismo del glucgeno a las necesidades del organismo entero.

REGULACIN ALOSTRICA Se produce la activacin de la Glucgeno sintasa b (inactiva por la G6P REGULACIN COVALENTE DE LA GLUCGENO SINTASA La glucgeno sintasa se inactiva por fosforilacin en hasta 11 residuos. La kinasa ms importante es la glucgeno sintasa quinasa 3 (GSK3), que fosforila en 3 sitios. Para que esta se d, se requiere la fosforilacin por la GSK2. La GSK3 es inactivas por insulina, ya que activa la PKB, que fosforila la GSK3, inhibindola. La glucgeno sintasa se activa por la desfosforilacin por PPP1. La PP1 es activada por insulina e inhibida por adrenalina/glucagn. 25

SNTESIS DE ALMIDN
La ADP-G se forma por condensacin de G1P con ATP. Entonces la almidon sintasa transfiere glucosa a una cadena de almidon en crecimeinto. El enzima regulafor es la ADP-G pirofosforilasa, la cual se activa por 3-fosfoglivcerato, el ual se acumula durante la fotosntesis.

FIJACIN DEL CARBONO

La sntesis de carbohidratos en animales parte de compuestos de 3C, como pirvico, lctico o glicerol. En las plantas, se realiza a partir de CO2 y H2O con el ATP y el NADPH generados en la fase lumnica de la fotosntesis. El CO2 se fija en fosfoglicerato, que se forma en el estroma de los cloroplastos. La asimilacin del CO2 implica, a parte de la propia reaccin de fijacin de CO2, un ciclo de reacciones descubierto por Melvin Calvin.

CICLO DE CALVIN
El ciclo de Calvin posee tres etapas: la primera etapa, en la que se produce la fijacin del CO 2; la segunda, en la que se da la reduccin y produccin de triosa fosfato (G3P); y la tercera etapa, en la que se da la regeneracin de la ribulosa-1,5-bisfosfato (aceptor de CO2). El rendimiento neto ser una molcula de gliceraldehdo-3-fosfato por cada 3 molculas de CO2 asimiladas. La ribulosa-1,5-bisfosfao carboxilasa (RubisCO) cataliza la unin covalente del CO2 a la ribulosa-1,5bisfosfato y la ruptura del intermediario de 6 carbonos. La RubisCO es uno de los enzimas ms importantes, y constituye el 50% de las protenas del estroma. Presenta un Mg+2 en el centro activo del enzima.

26

El ciclo de Calvin consta de tres fases: Fase de fijacin: La ribulosa-5 fosfato se une a 3 CO2 mediante la ribulosa-1,5-bisfosfato carboxilasa-oxigenasa para dar 3-fosfoglicerato. Fase de Reduccin: El 3-fosfoglicerato se transforma en 1,3-bisfosfoglicerato por la fosfoglicerato quinasa, con el consumo de 6 ATP (que se transforman en 6 ADP). Despus, el 1,3-BPG se transforma en G3P por la gliceraldehido-3-P deshidrogenasa. En el proceso se forman 6 Pi y 6 NADPH se oxidan a NADP+. La reaccin hasta ese punto es la siguiente:

Fase de regeneracin del aceptor: comprende una serie de reacciones en las que 5 de los 6 gliceraldehidos-3-P (DE DONDE VIENEN 6 GAP)??????? se transforman en las 3 Ribulosas5-P iniciales del ciclo.

La reaccin general del ciclo de Calvin es la siguiente: 6RuBP + 6CO2 + 12NADPH + 18 ATP + 12H+ + 6H2O 6RuBP + C6H12O6 + 12NADP+ + 18ADP + 18 Pi

DESTINO DE LAS TRIOSAS FOSFATO

Las triosas fosfato sintetizadas mediante el ciclo de Calvin pueden transformarse en glucosa dentro del cloroplasto, y despus en almidn. Asimismo, la fructosa puede exportarse al citosol y tranformarse en sacarosa. La DHAP sale al citosol va un antiporter que la intercambia por Pi. Esto es importante porque as se puede sintetizar sacarosa en el citosol y adems se restablecen los niveles de Pi en el interior del cloroplasto (estroma), lo cual es relevante porque en el ciclo de Calvin se producen 9 ADP pero solo se liberan 8 Pi, de manera que es necesario otro Pi para sintetizar 9 ATP en total.

27

REGULACIN DEL CICLO DE CALVIN

Pese a que el ciclo de Calvin se denomina como fase oscura, no tiene lugar en la oscuridad. Para que el ciclo suceda, la RubisCO y la F-1,6-bisfosfatasa son activadas por la luz. Esto (la luz) provoca que el pH del tilacoide disminuya debido al bombeo de H+ al interior. En consecuencia, el pH del estroma (donde estn las enzimas de Calvin) aumenta, y se genera el ambiente alcalino necesario para que el in Mg+2 de las enzimas sea efectivo. El ATP y NADPH generados son vitales para la reduccin de CO2. Las reacciones fotosintticas que los producen van acompaadas de movimiento de protones desde el estroma interior de los tilacoides creando condiciones alcalinas en el estroma. Esto hace que salgan iones Mg 2+ de los tilacoides al estroma, lo que favorece la activacin de la RubisCO y la F-1,6-BP. En segundo lugar, la RubisCO puede estar activa o inactiva. Se encuentra inactiva cuando est unida a la Ru-1,5-BP, ya que obstruye el acceso a Lys 201. La rubisco activasa, consecuentemente, expulsa la Ru-1,5-BP con gasto de ATP. As, la RubisCO con Lys 201 libre puede unir CO2 , al cual se le une el in Mg +2, quedando activa.

Otro mecanismo regulador es el inhibidor 2-carboxyarabinitol-1-fosfato, sintetizado por la rubisco carbamilada. Esta molcula es degradada cuando vuelve la luz o cuando es expelida por la RubisCO activasa. La tiorredoxina tambin desempea un papel importante en la regulacin del ciclo de Calvin. La forma reducida de la tiorredoxina activa a muchos enzimas biosinteticos al reducir los puentes S-S. Esto hace que la tiorredoxina se oxide y que el enzima correspondiente se reduzca, quedando activo. Posteriormente, la tiorredoxina oxidada (-S-S-) es reducida por la ferredoxina reductasa. La tiorredoxina activa de da a la Ribulosa-5-P-quinasa, F-1,6-bisfosfatasa, sedoheptulosa-1,7-bisfosfatasa y gliceraldehido-3-P DH.

28

FOTORRESPIRACIN
En la oscuridad, las plantas tambin realizan respiracin mitocondrial (oxidacin de los sustratos a CO 2 y conversin de O2 a agua). Existe otro proceso que consiste en el consumo de O2 y produccin de CO2 y que es activado por la luz; la fotorrespiracin. La fotorrespiracin aumenta a alta temperatura, ya que el O2 se hace ms soluble que el CO2. La causa de la fotorrespiracin es que la RubisCO es una enzima inespecfica, y cataliza tanto la unin del O2 como del CO2. En consecuencia, ambas molculas competirn por el centro activo. La fotorrespiracin es una reaccin lateral de la fotosntesis que resulta muy costosa, debido a que se forma un 2 fosfoglicolato, un producto sin utilizad metablica. Para que sea til, hay que recuperar los 2 C del fosfoglicolato, lo que ocasiona una gran prdida de energa para la planta.

LA RUTA DEL GLICOLATO

Para corregir el error de la RubisCO y la formacin de GAP a partir del 2-fosfoglicolato, exista la ruta del glicolato. En ella, dos molculas de 2-fosfoglicolato se transforman en una de serina (3C) y se libera un CO2. Estas reacciones se producen en el cloroplasto, peroxisoma y mitocondria. En el cloroplasto, una fosfatasa convierte el 2- fosfoglicolato en glicolato, que se exporta al peroxisoma y se convierte en glioxilato, el cual se transamina a Gly. El perxido de hidrgeno producido en el peroxisoma se metaboliza por la catalasa y se produce agua y oxgeno. La Gly pasa del peroxisoma a la mitocondria. Se condensan y descarboxilan dos Gly para producir serina, la cual vuelve al peroxisoma y se convierte en glicerato. Este ltimo pasa al cloroplasto y se convierte en 3-PG; y de ah a ribulosa-1,5-BP por la tercera fase del ciclo de calvin, completndose el ciclo.

LAS PLANTAS C4
En climas tropicales, donde la temperatura es elevada y la actividad de la luz es intensa, las plantas tropicales, as como el maz y la caa de azcar se ven muy afectadas por la fotorrespiracin. Para aliviar el problema, estas plantas (denominadas C4) en las clulas del mesfilo forman productos con 4C, como el oxalacetato o el malato. En las clulas del mesfilo, el CO2 se junta con fosfoenolpiruvato para producir oxalacetato (por la PEP carboxilasa), el cual se transforma en malato. Este pasa a travs de los plasmodesmos a la clula perivascular, donde la malato DH la descarboxila a piruvato. Este CO2 entrar al ciclo 29

de Calvin. El pirvico pasa al mesofilo y se convierte en PEP, repitindose el ciclo. El CO2 de la descarboxilacin del malato queda disponible para ser aceptado por 3- fosfoglicerato para regenerar ribulosa 1,5-bisfosfato y producir GAP (triosas fosfato) como en plantas C3.

PLANTAS CAM
Las Crasulceas (cactus, pia) tienen un metabolismo cido, que les permite crecer en ecosistemas ridos. Se llamn plantas CAM (crasulcea acid metabolism). En muchas plantas que crecen en climas calurosos y secos los estomas de las hojas permanecen cerrados durante el da para impedir la prdida de agua. Como consecuencia no pueden absorber CO2 durante las horas de insolacin que es cuando se precisa para la sntesis de glucosa. El CO2 entra en las hojas cuando se abren los estomas a la noche. As, el CO2 se fija mediante va C4 y se almacena en vacuolas. Durante el da se descaboxila el malato y el CO2 queda disponible para entrar en el ciclo de Calvin. A diferencia de las C4 en las plantas CAM, el almacenamiento y la utilizacin de CO 2 estn separadas en el tiempo. Por el contrario, la fijacin del CO2 en las plantas C4 est separada en el espacio.

30