CICLO CELULAR Y MITOSIS Todos los tejidos del cuerpo se mantienen gracias a un proceso continuo de multiplicacin celular, que

es ms o menos intensa dependiendo del tejido del que se trate. Por ejemplo, suele ser muy rpido en la piel, los epitelios y el tejido hematopoytico. Suele ser ms rpido en los embriones y fetos tambin. Todas las clulas vivas tienen un ciclo de vida: el ciclo celular, que consta de cuatro fases: G0, G1, S, G2, M. El avance intra-fase e inter-fase depende de numerosas seales positivas (activadoras) y negativas (inhibidoras). Estas seales se hallan interrelacionadas y su funcionamiento es coordinado de manera muy precisa. Las consecuencias en las fallas de sealizacin pueden ser: 1) Detencin de la clula en su proceso de divisin, y muerte 2) Descontrol de su proliferacin, que origina un crecimiento celular 3) Descontrol de su proliferacin y de su limitacin territorial, que origina invasin a tejidos vecinos y distantes La clula ha dispuesto sistema de control (check-points) para el cambio de una fase a otra del ciclo. La pRB y la p53 son las principales protenas de los sistemas de control. pRB es una protena de 900 AA que se une al ADN por su extremo carboxlico. En condiciones de infancia celular (G 0 y G1), se encuentra pobremente fosforilada, y por lo mismo, altamente capaz de secuestrar un factor de transcripcin llamado E2F. Mientras pRB secuestra E2F, no ocurre la transcripcin del ADN. Pero durante el ltimo tercio de G1, las enzimas CDK-D (cinasas ciclodependientes clase D) se activan y fosforilan pRB, con lo que sta pierde su capacidad de secuestro de E2F; por lo tanto, este factor queda libre para unirse en la secuencia TTTCGCGC, el arranque del proceso de sntesis de ADN. E2F son la llave con la que enciende el proceso. En las clulas que no deben dividirse, las CDK no fosforilan la pRB, y por tanto el E2F se mantiene secuestrado. No hay llave que arranque el proceso. Una pRB anormal es incapaz de secuestrar E2F, lo que facilita la proliferacin celular. Es lo que ocurre en el Retinoblastoma. La p53 es una protena de una vida media muy breve, que se une tambin al ADN por su parte media. Se encuentra en muy escasa cantidad en el ncleo de las clulas, pero aumenta en presencia de ciertos estmulos que daan el ADN. Es una protena guardin del ADN. Su importancia reside en que interrumpe el ciclo celular en tanto ocurre la reparacin del ADN. Es decir, impide que la clula se divida con ADN daado, lo que podra resultar en clulas mutadas. La interrupcin puede

ocurrir en G1, S o G2, y ocurre mediante la orden de sntesis de la protena p21, que es una potente inhibidora de las CDK. Una clula detenida por p53 es capaz de iniciar el proceso de apoptosis, el suicidio celular, la muerte celular programada. En ratones en quienes se ha suprimido el gen p53, se desarrollan completamente, pero con una altsima incidencia de tumores; o sea que la mitosis ocurre normalmente, pero sin control de calidad. MITOSIS Existe un grupo de protenas nucleares llamas SMC (Structural Maintenance of Chromosomes) , que tiene dos divisiones bsicas: las condensinas y las cohesinas. Las condensinas son pentmeros formados por las protenas SMC2 y SMC4 ms tres protenas ms pequeas de la familia de las CAP. Actan como ligas para las trenzas de cromatina, y de esa manera las condensan, compactan y estabilizan. Las cohesinas son tetrmeros de SMC y STAG que forman tambin anillos capaces de encerrar a dos cadenas de ADN, que corresponden a las cromtides hermanas, lo que ocurre durante la fase S del ciclo celular. Durante la primera fase de la mitosis, la profase, comienzan a ser degradadas (fosforiladas) y sustituidas por condensinas; durante la anafase son degradadas por una enzima llamada separina, que disocia sus tetrmeros, lo que rompe el anillo y permite que las cromtides queden liberadas y puedan dirigirse cada una a polos diferentes de la clula. La separina tiene un mecanismo de control, la securina, que se le une a su sitio activo central; la disociacin se securina y separina ocurre al final de la metafase, por la accin del APC, complejo promotor de la anafase. MEIOSIS La reproduccin sexual es una prioridad biolgica porque permite una evolucin ms eficiente de los organismos. Mientras que la reproduccin asexual o clonal mantiene en las clulas hijas los mismos caracteres de las progenitoras, en la sexual los organismos hijos adquieren combinaciones ventajosas de genes. Por qu? Porque durante la formacin de los gametos ocurre la meiosis, en una de cuyas fases ocurre una recombinacin de genes que reordena todo el genoma; as, los gametos llevan nuevas combinaciones gnicas diferentes de las propias del organismo progenitor. La meiosis permite, adems, reducir a la mitad el nmero de cromosomas de la clula normal (de diploide a haploide), de manera que durante la

fecundacin (singamia), el nmero resultante de cromosomas del huevo sea diploide. Cundo ocurre la meiosis? La meiosis ocurre en momentos totalmente diferentes en seres masculinos y femeninos. En los femeninos, la meiosis comienza en la vida fetal y contina durante toda la vida reproductiva, y termina al momento de la fecundacin; dura entre 10 y 45 aos, por lo que los ovocitos estn sujetos durante mucho tiempo a un riesgo de perturbacin del proceso. En el varn la meiosis inicia hasta la pubertad y contina por el resto de la vida. Su duracin es de alrededor de 2 semanas. Cmo ocurre? La meiosis consta de dos divisiones sucesivas sin que entre ellas exista un perodo S de sntesis de ADN. De esta manera, el contenido de ADN se reduce a la mitad en las clulas resultantes, los gametos. El proceso esencial de la meiosis consta de tres pasos esenciales: la sinapsis, la recombinacin y la segregacin; todos ellos ocurren en la primera de las dos divisiones; la segunda divisin es muy similar a una mitosis, con la diferencia que no se ve precedida de una fase S. La sinapsis consiste en el apareamiento especfico de los dos miembros de cada pareja de cromosomas homlogos (exceptuando los sexuales en el varn). Esta sinapsis ocurre gracias a un aparato de protenas llamado el complejo sinaptonmico (CS), que acta en la fase de cigoteno. La profase de la divisin I es la ms importante, y consta de 5 estadios: leptoteno, cigoteno, paquiteno, diploteno y diacinesis, que corresponden a cambios estructurales celulares. En la fase inicial, el leptoteno, aparecen los 46 cromosomas duplicados en forma de filamentos largos. En el cigoteno, los cromosomas se ordenan por parejas homlogas y se unen en sinapsis; la unin se conoce como ttrada. En los sitios de sinapsis se aprecian los complejos sinaptonmicos. Los complejos sinaptonmicos son complejos de protenas cuya estructura se ha mantenido constante en la cadena evolutiva. Se asemejan a los rieles de un ferrocarril, a los que lateralmente se adosa la cromatina de las cromtides sinpticas; el ancho de la va sera de 210 nm. Los rieles se denominan Elemento Lateral, constituidos por protena SYCP3 (Cor1) y trazas de ADN. Los elementos transversales a la va se denominan Filamentos Transversales, formados por protena SYCP1 (Syn1); entre las filamentos transversales de un riel y del otro se encuentra el Elemento Central, que son protenas globulares y filamentos longitudinales formados por protena SYCE1 y SESC1, capaces de interactuar con la protena SYCP1 (Syn1) de los filamentos transversales. Los CS se pueden observar con microscopa

electrnica, y tanto Cor1 como Syn1 pueden estudiarse mediante hibridacin in situ (microfotografa), con lo que pueden hacerse cariotipos de complejos sinaptonmicos (figura). En el paquiteno aparecen los ndulos de recombinacin, que son los que contienen el mecanismo del entrecruzamiento cromosmico; con ste ocurre la recombinacin gentica, mediante el que secciones completas de ADN son intercambiadas entre las cromtides homlogas. En el diploteno se aprecian los sitios de entrecruzamiento, que se denominan quiasmas. En la diacinesis los cromosomas se ven totalmente condensados y se siguen apreciando los quiasmas. La membrana nuclear se desintegra. En la metafase I se forma el huso acromtico y los 46 cromosomas duplicados se disponen en el plano ecuatorial de la clula, uniendo sus centrmeros a los filamentos del huso. En la anafase I los cromosomas homlogos recombinados se separan, dirigindose los paternos aleatoriamente a un polo y los maternos hacia el otro. Es importante anotar que las cromtidas paternas o maternas permanecen juntas, a diferencia de la mitosis, en que se separan. En cada polo se ubican 46 cromosomas. La segunda divisin no es ms que una mitosis, pero ocurre sin que haya tenido lugar una replicacin del ADN, de manera que los 46 cromosomas existentes se reparten entre las dos clulas hijas, correspondiendo a cada una 23, el nmero haploide. Todo lo anterior es vlido para todos los cromosomas llamados somticos, a excepcin de los cromosomas X y Y (en caso de varones), que forman un cuerpo condensado llamado Cuerpo XY, que slo sinapsa en una pequea seccin del cuerpo de los cromosomas, y que es de inters mdico en casos de esterilidad. A diferencia de las clulas corporales, en la gnadas las cohesinas estn estructuradas con SMC y Rec8; esta ltima es degradada muy temprano en la metafase I en los extremos de las cromtides, no as en el centrmero, que cuenta con protenas protectoras llamadas shugoshina (protectoras o guardianes) SGO1. La libertad de los brazos de la cromtide permite su entrecruzamiento y la formacin de un quiasma. En la anafase I la cohesina Rec8 mantiene su estabilidad, lo que permite la segregacin reduccional, pero en la metafase II finalmente se degrada, lo que permite la segregacin ecuacional. LAS CLULAS GERMINALES

Esta lnea celular es la precursora de los gametos: vulos y espermatozoides en los organismos que se reproducen sexualmente. Estas clulas contienen el material gentico que se va a pasar a la siguiente generacin. No se originan en la gnada sino que tienen unos precursores conocidos como clulas germinales primordiales (CGP) que migran hacia las gnadas, dando inicio a la gametognesis. Las CGP se originan en el epiblasto a partir de la segunda semana del desarrollo embrionario; de all, estas clulas, que tienen movimiento, se desplazan hacia el saco vitelino, y despus a lo largo del alantoides hacia el mesenterio dorsal, hasta alcanzar las crestas gonadales durante la quinta semana. A la semana siguiente inicia en el embrin el proceso de diferenciacin gonadal. GNADA INDIFERENCIADA Se calcula que aproximadamente 5 millones de CGP llegan a existir en la cresta urogenital; ellas inducen una proliferacin de cordones de clulas del epitelio celmico, que se denominan cordones sexuales primarios. Esto ocurre durante la quinta y sexta semana. OVARIO En el proceso de diferenciacin hacia ovario, el 99% de las CGP desaparece, quedando slo 50,000. Los cordones sexuales involucionan y desaparecen, y las CGP se ubican cerca de la superficie de la cresta gonadal, donde una segunda generacin de cordones, llamados cordones corticales, las rodea para finalmente desligarse de la corteza y forman nsulas de ovogonia, rodeadas por clulas epiteliales (granulosa) y mesenquimatosas (tecales). Estas estructuras se llaman folculos. Al mismo tiempo ocurre la maduracin del conducto paramesonfrico, o de Mller. Hacia la semana 11 de la gestacin, la CGP realiza la primera parte de su profase meitica, formando un ovocito de primer orden; la segunda parte la realizar al madurar el folculo, formando un ovocito de segundo rden; la segunda divisin meitica tendr lugar al ocurrir la fecundacin. TESTCULO En la sptima semana los cordones sexuales y las CGP proliferan y se expanden hasta formar una red de de cordones, ahora llamados testiculares. LOS CIDOS NUCLEICOS Los cromosomas son la configuracin del ADN durante la mitosis. Cada cromosoma tiene slo una largusima cadena de ADN. La morfologa del ADN es como sigue: Cadena doble de ADN (2 nm) Nucleosomas (11 nm) Cromatina (30 nm) Cromatina enrollada (300 nm) Cromatina enrollada enrollada (700 nm) Cromtides (1,400 nm) Imaginemos que el genoma es un libro de instrucciones

El libro contiene tres mil millones de letras llamadas bases Las letras del genoma forman mil millones de palabras de tres letras llamadas codones (800 biblias). Tardaramos un siglo en leerlo a un ritmo de una palabra por segundo por 8 hs diarias. Los codones se construyen a base de 4 letras: A, C, G y T escritas en largas cadenas de azcar y fosfato llamado ADN. Los codones forman prrafos que contienen textos tiles llamados exones, con textos intiles intercalados llamados intrones. Los exones forman historias llamadas genes. El genoma es como un libro inteligente, porque puede fotocopiarse y enviar sus instrucciones para fabricar protenas. La fotocopia se llama replicacin, y se debe a una ingeniosa propiedad del ADN: A se empareja con T y G con C; as, un nico filamento de ADN puede copiarse a s mismo ensamblando las T frente a las A y las C frente a las G. De hecho, el estado natural del ADN es la famosa doble hlice. Una gran parte del ADN constituye un revoltijo de secuencias repetitivas que no se transcriben y que se llama ADN egosta o intergnico. Del total del ADN, 75% correspone a ADN egosta o intergnico, 24% a intrones y 1% a exones Dos cadenas antiparalelas de fosfato-desoxiribosa, con bases pareadas de A-T (dos puentes de H) y C-G (tres puentes de H) La informacin gentica contenida en el ADN se transcribe en ARNm (una cadena sencilla de ribosa y fosfato, con A, C, G y U); la contenida en este se traduce en protenas.