INFORME DETERMINACIN COLIFORMES (NMP) LUZ AMANDA TORRES PIRA FICHA 433471 INTRODUCCION Los trminos coliforme y coliforme

fecal carecen de significado taxonmico. Solo tienen sentido metodolgico y solo cuando se definen las condiciones en que se hace su deteccin (propiedades del medio de cultivo, temperatura y tiempo de incubacin) Coliformes, coliformes fecales y E.coli se emplean como microorganismos indicadores. Su presencia en alimentos puede deberse a: elaboracin inadecuada, contaminacin del alimento ya preparado, o crecimiento en el alimento. Coliformes fecales y E. coli pueden indicar contaminacin fecal, aunque pueden vivir en ambientes no intestinales, incluyendo instalaciones industriales. Debido a que las aguas residuales son de composicin variada provenientes de descargas de usos municipales, industriales, comerciales, de servicios, agrcolas, pecuarios, domsticos, incluyendo fraccionamientos y en general de cualquier uso, as como la mezcla de ellas, contienen diferentes tipos de microorganismos contaminantes y las diferentes concentraciones, dependiendo de su fuente. La variada poblacin de microorganismos en esta agua, proviene del suelo y de origen intestinal, incluyen aerobios y anaerobios estrictos y facultativos as como tambin numerosos virus como: Polio virus y virus de la hepatitis. Igualmente pueden contener formas parasitarias variables como quistes de Protozoarios y huevecillos de Helmintos (Metazoarios).Asimismo, existe en nuestro pas el grave problema de contaminacin de ros, lagos acuferos y costas debido a que estos son utilizados como depsito de todos los desechos generados por las actividades humanas. Estos microorganismos pueden sobrevivir al tratamiento, por lo que su reso por ejemplo en riego agrcola, actividades recreativas: Aguas de piscinas, baos de hidromasaje, aguas potables naturales, actividades pisccolas y aguas marinas superficiales (playas), representan un riesgo potencial a la salud pblica. La presencia y extensin de contaminacin fecal es un factor importante en la determinacin de la calidad de un cuerpo de agua. Las heces contienen una variedad de microorganismos y formas de resistencia de los mismos, involucrando organismos patgenos, los cuales son un riesgo para la salud pblica al estar en contacto con el ser humano. El examen de muestras de agua para determinar la presencia de microorganismos del grupo coliforme que habitan normalmente en el intestino humano y de otros animales de sangre caliente, da una indicacin, pues dada la limitada capacidad de algunos miembros del grupo de organismos coliformes para sobrevivir en agua; sus nmeros tambin pueden emplearse para estimar el grado de contaminacin fecal.

Son Organismos coliformes aquellos capaces de crecimiento aerbico ya sea 35 37 1C en un medio de cultivo lquido lacto - sado con produccin de acido y gas dentro de un periodo de 48 h. L METODO DE NUMERO MAS PROBABLE (NMP) es una estrategia efeciente de estimacin de densidades poblacionales especialmente cuando una evaluacin cuantitativa de clulas individuales no es factible. La tcnica se basa en la determinacin de presencia o ausencia (pos o neg) en rplicas de diluciones consecutivas de atributos particulares de microorganismos presentes en muestras de suelo u otros ambientes. Por lo tanto, un requisito importante de este mtodo es la necesidad de poder reconocer un atributo particular de la poblacin(es) en el medio de crecimiento a utilizarse. El estimado de densidad poblacional se obtiene del patrn de ocurrencia de ese atributo en diluciones seriadas y el uso de una tabla probabilstica. Algunas de las ventajas del NMP son: (i) la capacidad de estimar tamaos poblacionales basados en atributos relacionados a un proceso (selectividad); por ejemplo se puede determinar la densidad poblacional de organismos que pueden nodular leguminosas en una muestra de suelo usando el mtodo de infeccin de plantas, (ii) provee una recuperacin uniforme de las poblaciones microbianas de suelos diversificados, (iii) determina slo organismos vivos y activos metablicamente, y (iv) suele ser ms rpido e igual de confiable que los mtodos tradicionales de esparcimiento en platos de cultivo, entre otros.

OBJETIVOS Evaluar la calidad e inocuidad alimentaria de una muestra de empanada

Determinar la presencia de coliformes totales y fecales por el mtodo del nmero Ms Probable, utilizando la tcnica de tubos de fermentacin mltiple. Interpretar adecuadamente los resultados para la determinacin de la calidad del alimento evaluado.

Materiales Diluciones de la muestra Incubadora a 35C Gradilla Pipetas de 1 mL estriles Asa bacteriolgica

 9 tubos de 150 x 15 mm conteniendo 10 mL de Caldo Bilis Verde Brillante con tubo de fermentacin de 70 x 10 mm Balanza con sensibilidad de 0.1 g Mechero

Procedimiento Inocular de cada una de las diluciones 10-1, 10-2, 10-3, 1 ml a cada uno de 3 tubos conteniendo Caldo Bilis Verde Brillante. Incubar los tubos a 35C durante 24-48 horas Observar los tubos que presenten produccin de gas Comparar en la tabla de N.M.P. e informar como Coliformes Totales por gramo ml RESULTADOS
MUESTRAS

Coliformes totales y fecales En embutido crnico SALCHICHA Caldo bilis verde brillante 3-2-2 POSITIVO Presencia de coliformes en la muestra

MEDIO

RECUENTO CARACTERISTICAS MACROSCOPICAS

Despus del periodo de incubacin realizaron las siguientes observaciones.

En las diluciones 10-1 se observ presencia de gas y los tres tubos tomaron un color turbio En la dilucin 10-2 dos de los tubos presenciaron un color turbio y presencia de gas En la dilucin 10-3 dos tubos presenciaron un color turbio y presencia de gas

se

La presencia de gas en los tubos y un color turbio nos indica la presencia de una o ms clulas microbianas provenientes de la muestra con presencia de coliformes.

IMAGEN

10- 1

10 2

10-3

DISCUSION

En la higiene de alimentos los coliformes no se consideran indicadores de contaminacin fecal sino solamente indicadores de calidad sanitaria. La calidad sanitaria son las caractersticas que debe cumplir un producto alimentario, para asegurar que el consumo no indica un riesgo para la salud humana del consumidor. Estas caractersticas abarcan todas las fases posteriores a la produccin primaria incluyendo preparacin, fabricacin, transformacin, envasado, almacenamiento, transporte, distribucin, manipulacin y venta o suministro al consumidor. Uno de los ms grandes problemas a la hora de consumir o comercializar los alimentos est asociado a la baja o nula calidad sanitaria de los mismos. Los alimentos no solo deben ser nutritivos y bien presentados, sino bien manufacturados y conservados hasta su consumo. Cada da proliferan muchos establecimientos de comida rpida, callejera e incluso muy elaborada, donde las normas sanitarias estn totalmente ausentes por considerarlas de poca importancia frente al afn de vender y conseguir una estabilidad econmica de ingresos que suplan las necesidades de sus propietarios, sin darse cuenta que con ese proceder no solo estn arruinando la imagen y la clientela, sino ocasionando daos a veces irreparables a la salud del consumidor.