16/03/2010

Molculas que so levadas ao estado excitado no podem nele permanecer e devem necessariamente retornar ao estado fundamental, perdendo o excedente de energia.
Coliso com outras espcies Relaxamento vibracional

Profa. Daniele Michelin

Emisso de um fton

Eletroluminescncia: energia cintica de eltrons ou

ons acelerados por um campo eltrico transferida a tomos ou molculas presentes em um gs provocando a emisso de um fton pelos tomos ou molculas excitados. qumica produz uma espcie excitada que emite fton de radiao para atingir o estado fundamental, mais estvel e de menor energia. molculas promovendo-as a um estado excitado. Ao retornar ao estado fundamental, as molculas emitem radiao.

Quemiluminescncia: reao

Fluorescncia: emisso de um fton por uma espcie que atingiu o estado excitado por meio de absoro de radiao eletromagntica, ou seja, absoro de um fton. Fosforescncia: excitao provocada por radiao eletromagntica, porm a emisso de radiao continua aps a excitao haver cessado.
A maior diferena entre fluorescncia e fosforescncia o tempo entre a absoro da energia e a emisso do fton, sendo que quando o intervalo de tempo curto, o processo chamado fluorescncia e quando o tempo longo, o processo chama-se fosforescncia.

Fotoluminescncia: quando ftons so absorvidos por

Fluorescncia Fosforecncia

COMPOSTO ORGNICO

FLUORESCNCIA

Duplas conjugadas Rigidez Pares de eltrons n em heterotomos - conjugao

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Fluorescncia: transio do primeiro estado excitado para o estado fundamental.

Presena de conjugao: reduz a diferena de energia

Rigidez

, s vezes, conseguida por meio de complexao com um metal de transio. fluorescncia pode ser obtida por meio da formao de quelatos com metais (Mg, Zn) no-fluorescentes podem, muitas vezes, ser derivados quimicamente e tornados fluorescentes com um reagente fluorognico.

entre o estado fundamental e o primeiro estado excitado e confere maior estabilidade ao estado excitado. meio em que se encontra e a probabilidade de desativao por processo no emissivos. fluorescncia. fluorescncia. que doam eltrons aumentam a

Rigidez molecular: reduz a interao da molcula com o

Compostos

Substituintes

Grupos que retiram eltrons diminuem ou eliminam

EXISTNCIA / INTENSIDADE DA FLUORESCNCIA

FLUORMETRO: mede

a fluorescncia

Estrutura da molcula: Duplas conjugadas Rigidez Pares de eltrons n em heterotomos conjugao

Ambiente: Temperatura Solvente ph do meio Presena de impurezas Concentrao da espcie fluorescente

Fonte (lmpada de xennio, hidrognio, deutrio) Monocromador (filtros, primas ou redes) Cubeta (quartzo ou silica fundida) Detector (faixa visvel tubo fotomultiplicador)

FLUORMETRO

Fotofluormetro Espectrofluormetro

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A intensidade da fluorescncia proporcional concentrao da espcie fluorescente.

Determinao da concentrao

Medies

relativas ao padro com fluorescncia mais intensa.

solues diludas: F = k.b.c
k = constante de proporcionalidade b = espessura da cubeta c = concentrao da espcie fluorescente
A curva padro uma reta em concentraes baixas

Presena de apenas uma espcie fluorescente (padres e amostras).

Na escolha do comprimento de onda de excitao e emisso considerar o solvente.

Em

Melhores limites de deteco (mximo) Condies experimentais

O analito pode sofrer decomposio pela radiao da fonte. Tempo de exposio

Determinao de alimentos (traos)

constituintes

de

Vitaminas

Frmacos Contaminantes

Fluorescncia das cubetas

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ALTA SENSIBILIDADE (partes por trilho)

ALTA ESPECIFICIDADE (fluorescncia)