20 Perguntas e Respostas

sobre Fixao Biolgica

de Nitrognio
281
ISSN 1517-5111
ISSN online 2176-5081
Fevereiro, 2010
Documentos
ISSN 1517-5111
ISSN online 2176-5081
Fevereiro, 2010
Documentos 281
Ida de Carvalho Mendes
Fbio Bueno Reis Junior
Mariangela Hungria da Cunha
Embrapa Cerrados
Planaltina, DF
2010
20 Perguntas e Respostas
sobre Fixao Biolgica de
Nitrognio
Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuria
Embrapa Cerrados
Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento
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1
a
edio
1
a
impresso (2010): tiragem 100 exemplares
Edio online (2010)
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Embrapa Cerrados
M538v Mendes, Ida de Carvalho.
20 perguntas e respostas sobre fxao biolgica de nitrognio
/ Ida de Carvalho Mendes, Fbio Bueno Reis Junior, Mariangela
Hungria da Cunha. Planaltina, DF : Embrapa Cerrados, 2010.
19 p. (Documentos / Embrapa Cerrados, ISSN 1517-5111,
ISSN online 2176-5081 ; 281).
1. Perguntas e respostas. 2.Nitrognio - fxao. I. Reis Junior,
Fbio Bueno. II. Hungria, Mariangela. III. Ttulo. IV. Srie.
631.417 - CDD 21
Embrapa 2010
Autores
Ida de Carvalho Mendes
Engenheira Agrnoma, Ph.D.
Pesquisadora da Embrapa Cerrados
mendesi@cpac.embrapa.br
Fbio Bueno dos Reis Junior
Engenheiro Agrnomo, Ph.D.
Pesquisador da Embrapa Cerrados
fabio@cpac.embrapa.br
Mariangela Hungria da Cunha
Engenheira Agrnoma, Ph.D.
Pesquisadora da Embrapa Soja
hungria@cnpso.embrapa.br
Apresentao
Entre os nutrientes minerais essenciais s plantas, o nitrognio (N)
o mais caro, o que consome mais energia e, potencialmente, o mais
poluente, sendo geralmente o mais limitante produo vegetal.
No entanto, no Brasil, o uso do nitrognio bem menor quando
comparado a outros pases, o que se deve, em parte, utilizao e
busca por sistemas produtivos que se benefciem da fxao biolgica
do nitrognio atmosfrico. Neste documento, so disponibilizadas
informaes bsicas e atualizadas sobre esse importantssimo processo
biolgico, seus benefcios e sua utilizao na agricultura brasileira.
Jos Robson Bezerra Sereno
Chefe-Geral da Embrapa Cerrados
Sumrio
Introduo ................................................................................... 9
20 Perguntas Bsicas ................................................................. 10
Abstract ................................................................................... 19
20 Perguntas e Respostas
sobre Fixao Biolgica de
Nitrognio
Ida de Carvalho Mendes
Fabio Bueno Reis Junior
Mariangela Hungria da Cunha
Introduo
O grupo de pesquisa em Microbiologia do Solo da Embrapa Cerrados
foi criado em 1975. O incio dos trabalhos coincidiu com a expanso
da cultura da soja no Cerrado e concentrou-se exatamente na busca
por estirpes de bactrias fxadoras de nitrognio efcientes e adaptadas
s condies do Brasil Central. O objetivo principal desses estudos foi
colaborar para o aumento da produtividade da soja, visando fornecer
todo o nitrognio necessrio para as plantas via fxao biolgica (FBN).
Esse trabalho culminou com a seleo e lanamento das estirpes de
Bradyrhizobium elkanii, 29W e SEMIA 587, em 1980, e das estirpes de
Bradyrhizobium japonicum, CPAC-7 (SEMIA 5080) e CPAC-15 (SEMIA
5079), em 1993, que hoje so recomendadas para a formulao dos
inoculantes comerciais produzidos no Brasil para a cultura da soja.
Ainda nas dcadas de 1980 e 1990, foram lanadas estirpes para o
cultivo do feijoeiro (CPAC V-23), da ervilha (CPAC EV-5 e CPAC EV-6 )
e da lentilha (CPAC L-3 e CPAC L-12). A parceria com a Embrapa Soja,
desde o incio da dcada 1990, tem sido fundamental para o sucesso
desses estudos e resultaram, entre outros, no lanamento da estirpe
CPAC H-12 para o cultivo do feijo em 2008 e no sequenciamento da
estirpe CPAC-15.
10
20 Perguntas e Respostas sobre Fixao Biolgica de Nitrognio
A importncia da FBN em temas como a segurana alimentar e as
mudanas climticas globais cresce a cada ano. Em 2009, a FBN
foi selecionada pela plataforma ABC (Agricultura de Baixo Carbono)
como um dos mecanismos a serem adotados pelo Brasil para mitigar
os efeitos de gases de efeito estufa juntamente com o plantio direto,
a integrao lavoura/pecuria e a recuperao de pastos degradados.
Este documento voltado para estudantes e o pblico em geral que
pretendem obter informaes bsicas e atualizadas sobre a FBN, e
busca, alm de informar, chamar a ateno das pessoas para esse
processo biolgico to importante quanto fascinante.
20 Perguntas Bsicas
O que a fxao biolgica do nitrognio (FBN)?
o processo por meio do qual o nitrognio presente na atmosfera
(N
2
) convertido em formas que podem ser utilizadas pelas plantas.
A reao catalisada pela enzima nitrogenase, que encontrada em
todas as bactrias fxadoras. Em termos de agricultura, a simbiose entre
bactrias fxadoras de nitrognio (denominadas rizbios) e leguminosas
(famlia de plantas qual pertencem a soja, o feijo, a ervilha entre
outras) a mais importante.
Todas as plantas fxam nitrognio biologicamente em simbiose com os
rizbios?
Infelizmente no. A simbiose praticamente restrita s leguminosas e
se caracteriza pela formao de estruturas especializadas nas razes,
chamadas ndulos, nos quais ocorre o processo de FBN. Aps a
formao de ndulos nas razes, a bactria passa a fxar o nitrognio
atmosfrico em compostos orgnicos que so utilizados pelas plantas,
eliminando ou diminuindo a necessidade de uso de adubos nitrogenados.
Isso quer dizer que apenas as leguminosas so benefciadas pela FBN?
No. Outras espcies de bactrias capazes de fxar o N
2
atmosfrico j
foram encontradas em associao com gramneas como o milho, o trigo
e a cana-de-acar. Nessas plantas, no ocorre a formao de ndulos
nas razes e as quantidades de N fxadas so mais baixas. Por essa
razo, no possvel dispensar a utilizao de adubos nitrogenados
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20 Perguntas e Respostas sobre Fixao Biolgica de Nitrognio
nessas lavouras. Microrganismos fxadores de nitrognio tambm j
foram encontrados em plantas como o caf, dend, mandioca, mamo
e banana, e a sua contribuio para essas plantas tem sido objeto de
vrios trabalhos de pesquisa.
J que no h formao de ndulos, onde fcam localizadas as
bactrias que se associam com plantas no leguminosas?
Localizam-se preferencialmente na regio rizosfrica, na superfcie das
razes ou at mesmo dentro dos tecidos de razes, colmos e folhas,
quando so conhecidas como bactrias endftas ou endofticas.
Em que consiste o processo de inoculao?
A inoculao o processo por meio do qual bactrias fxadoras de
nitrognio, selecionadas pela pesquisa, so adicionadas s sementes
das plantas antes da semeadura. A inoculao feita com um produto
chamado inoculante.
Como a tecnologia da inoculao chega ao agricultor?
O agricultor compra um produto chamado inoculante. No inoculante,
um caldo com elevada concentrao de bactrias misturado a
um veculo, que pode ser um solo muito rico em matria orgnica
denominado turfa (inoculante em p), formulaes lquidas (inoculante
lquido), ou combinaes de turfa-lquido ou gis. O produto fnal deve
conter no mnimo 1 bilho de clulas de bactrias fxadoras de N
2
vivas
por cada g ou ml de inoculante.
Como deve ser feita a inoculao?
A operao de inoculao deve ser feita sombra, nas horas
mais frescas do dia (pela manh ou noite). Devem-se seguir as
recomendaes de dosagem e aplicao fornecidas pelo fabricante do
inoculante. Em solos de primeiro ano de plantio, a dose recomendada
o dobro da dose normal. Sementes bem inoculadas fcam recobertas,
por uma camada fna e uniforme de inoculante. Aps a inoculao, as
sementes devem ser secas sombra e semeadas em, no mximo, 24
horas, desde que fquem protegidas do sol e umidade. Caso isso no
seja possvel, deve-se repetir a inoculao no dia do plantio.
12
20 Perguntas e Respostas sobre Fixao Biolgica de Nitrognio
O tratamento das sementes com fungicida e (ou) micronutrientes deve
ser feito antes ou depois da inoculao?
Antes. muito importante que o produtor atente para o fato de que o
inoculante no pode ser misturado com os fungicidas e micronutrientes,
pois os mesmos so, em maior ou menor grau, txicos para as
bactrias. De maneira geral, fungicidas base de metais pesados, como
o zinco e o cobre, e alguns inseticidas organofosforados prejudicam
a nodulao de leguminosas. Os herbicidas e os defensivos contra
nematoides so menos txicos. No caso de sementes tratadas com
fungicidas e inoculadas, a semeadura deve ser efetuada em, no
mximo, 12 horas. Caso isso no seja possvel, as sementes devem ser
inoculadas novamente.
Quais os cuidados que se deve ter ao comprar os inoculantes?
a) Verifcar se o produto registrado pelo Ministrio da Agricultura,
Pecuria e Abastecimento (Mapa), evitando produtos sem a garantia
de estirpes (tambm conhecidas como cepas) recomendadas pela
pesquisa e de qualidade duvidosa.
b) Verifcar o prazo de validade do inoculante, que deve constar na
embalagem.
c) Certifcar-se de que o produto estava conservado em condies
adequadas de temperatura (no mximo 30 C) e umidade. Aps a
aquisio, conservar o inoculante em local arejado e protegido do sol
at o momento de sua utilizao, uma vez que o inoculante contm
bactrias sensveis ao calor.
d) No utilizar um inoculante registrado para uma cultura especfca
em outra planta. Por exemplo, no utilizar inoculante para soja no
plantio de feijo.
e) Em caso de dvida sobre a qualidade ou procedncia do inoculante,
acionar o fscal do Mapa responsvel pela sua rea, para retirar
amostras do local de venda e envi-las para anlise em laboratrios
credenciados.
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20 Perguntas e Respostas sobre Fixao Biolgica de Nitrognio
Quais os principais fatores responsveis pelo insucesso da inoculao?
a) Utilizao de inoculantes de m qualidade: os inoculantes devem ser
produzidos com veculo esterilizado e conter no mnimo um bilho de
clulas por g ou ml do produto, quando do momento da inoculao.
Muitas vezes a m qualidade do inoculante pode ser atribuda s
condies inadequadas de armazenamento e transporte.
b) Realizao do processo de inoculao de forma inadequada.
c) Problemas de acidez do solo e defcincia nutricionais, promovidas
por calagem e (ou) adubao de plantio realizadas de forma
incorreta.
d) Adio de produtos txicos s sementes, tais como fungicidas,
inseticidas e nematicidas.
e) Temperaturas elevadas e defcincia hdrica logo aps a semeadura.
Existem alternativas para a inoculao das sementes?
Recentemente, a inoculao no sulco de plantio vem ganhando
popularidade. Essa pode ser uma boa alternativa principalmente no caso
de sementes tratadas com agrotxicos e micronutrientes. Resultados de
pesquisas indicam que a dose de inoculante necessria para a aplicao
no sulco deve ser, no mnimo, seis vezes superior dose indicada para
a inoculao das sementes. Essa tecnologia j recomendada para a
cultura da soja desde a safra 2003/2004.
Qual a importncia e as principais vantagens do processo de inoculao
para a lavoura da soja?
No Brasil, graas ao processo de FBN, a inoculao substitui totalmente
a necessidade do uso de adubos nitrogenados nas lavouras de soja. O
inoculante contm bactrias selecionadas do gnero Bradyrhizobium
que, quando associadas s razes de soja, conseguem converter o N
2
da
atmosfera em compostos nitrogenados, em quantidades de at 300 kg
de N/ha, que sero utilizados pela planta.
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20 Perguntas e Respostas sobre Fixao Biolgica de Nitrognio
Alm da grande economia obtida quando se substitui a utilizao
de fertilizantes nitrogenados industriais pela inoculao da soja
com bactrias do gnero Bradyhrizobium, essa uma tecnologia
extremamente simples e que no polui o meio ambiente. Devido a sua
baixa efcincia de aproveitamento pelas plantas, em torno de 50% dos
adubos nitrogenados aplicados ao solo perdido por processos como
a lixiviao, desnitrifcao e volatilizao, causando a poluio de
mananciais hdricos (rios, lagos, lenis freticos) e contribuindo para a
reduo da camada de oznio que envolve o planeta, com consequente
efeito no aquecimento global.
Qual o custo desse inoculante para o produtor?
Apesar do investimento em pesquisa e tecnologia, o custo do
inoculante, sufciente para o plantio de um hectare, geralmente no
ultrapassa o valor de R$ 8,00.
A utilizao de adubos nitrogenados na lavoura da soja necessria?
No. Desde que o agricultor utilize um inoculante de boa qualidade e
faa a inoculao da forma adequada, no necessria a utilizao de
adubos nitrogenados nessa cultura. O uso de pequenas doses de
N no sulco de plantio, como doses de arranque (20 a 30 kg de N/ha
na semeadura), ou mesmo altas doses de N (200 kg/ha), no promove
nenhum benefcio em termos de aumentos de produtividade da lavoura.
Alis, resultados recentes da pesquisa indicam que no existe razo
para a utilizao desses insumos em nenhum estgio do cultivo da soja
no Brasil. Alm disso, doses de N no sulco superiores a 30 kg de
N/ha podem promover inibio na nodulao, retardando o processo de
formao de ndulos, o que no desejvel.
O que reinoculao da soja? Ela necessria?
Reinoculao o termo utilizado para descrever a inoculao da soja
em reas que j haviam sido cultivadas com soja e recebido inoculantes
anteriormente. Solos brasileiros que nunca foram cultivados com soja
no possuem populaes nativas de rizbio capazes de nodular a
soja. Nesses solos, se a soja for plantada sem inoculao, no haver
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20 Perguntas e Respostas sobre Fixao Biolgica de Nitrognio
formao de ndulos. Entretanto, aps o plantio sucessivo de soja
inoculada, ocorre o estabelecimento de populaes da bactria no
solo. Por essa razo, quando a soja no-inoculada plantada em reas
que j foram inoculadas anteriormente, ocorre a formao de ndulos
nas razes. Contudo, os resultados de pesquisa tm mostrado que
vantajoso inocular as reas de produo de soja a cada safra e que os
incrementos mdios na produo de gros giram em torno de 4% a 9%.
O feijo pode ser inoculado com rizbio?
Pode. Entretanto, devido a uma srie de fatores relacionados bactria,
planta e ao meio-ambiente, no feijoeiro, de modo diferente da cultura
da soja, a inoculao com bactrias fxadoras de N nem sempre
sufciente para fornecer todo o N exigido pela cultura. Mesmo assim,
vrios resultados de pesquisa indicam que o feijoeiro pode se benefciar
consideravelmente do processo biolgico, principalmente porque os
inoculantes incluem estirpes mais efcientes. Em Latossolos de Cerrado,
sob condies de sequeiro, trabalhos conduzidos na Embrapa Cerrados
evidenciaram ganhos mdios com a inoculao de 63 a 290 kg/ha,
dependendo da cultivar.
Quando o feijoeiro cultivado sob condies irrigadas, onde todo o
investimento tecnolgico feito no sentido de maximizar o rendimento
da cultura, geralmente o uso da inoculao no garante todo o N
necessrio para que tetos de produtividade sejam atingidos, sendo
necessria a suplementao com adubao nitrogenada. Entretanto,
trabalhos conduzidos no Distrito Federal, sob condies irrigadas, em
um solo Gley Hmico de vrzea sem populaes nativas de rizbio,
reportaram ganhos de at 1.500 kg/ha em relao testemunha no
inoculada em cultivares responsivas nodulao (esses ganhos foram
semelhantes aos obtidos com 100 kg N/ha).
Tambm no Paran, experimentos da Embrapa Soja apresentaram
respostas expressivas do feijoeiro inoculao, com ganhos mdios
de 450 kg gros/ha, utilizando as estirpes de Rhizobium tropici CPAC
H12 e CPAC H20. As produtividades obtidas com a inoculao foram
comparadas a das plantas que receberam 60 kg de N/ha.
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20 Perguntas e Respostas sobre Fixao Biolgica de Nitrognio
Atualmente, trs estirpes de Rhizobium so autorizadas para a
fabricao de inoculante comercial de feijo no Brasil, a CIAT 899 (ou
SEMIA 4077), isolada pelo CIAT, na Colmbia; a PRF 81(ou SEMIA
4080), isolada no Paran pelo IAPAR e pela Embrapa Soja, e que
permitiu ganhos de at 906 kg/ha em relao ao controle no-inoculado
nos trabalhos de seleo; e a CPAC H-12 (ou SEMIA 4088) isolada no
Distrito Federal.
Pode-se afrmar que a FBN nessa cultura realmente importante, pois
se estima que mesmo as estirpes nativas podem contribuir com at
40% do N presente na planta. A adoo da tcnica de inoculao
com estirpes selecionadas pela pesquisa, aliada ao uso de cultivares
melhoradas, tcnicas de manejo integrado de pragas e doenas e de
correo e adubao do solo poder, no mnimo, duplicar a mdia de
produtividade nacional a um baixo custo para o agricultor. Tambm
importante ressaltar que, tanto sob condies experimentais, como ao
nvel de fazenda, tm-se observado que os nveis de produtividade dos
tratamentos inoculados e suplementados com N (doses de at 80 kg N/
ha) so superiores aos nveis de produtividade dos tratamentos onde
somente se utiliza a adubao nitrogenada.
Alm da soja e do feijo, quais as outras leguminosas que se
benefciam da inoculao com rizbio?
A ervilha, lentilha, feijo-caupi, leguminosas forrageiras, arbreas e
de adubo verde. No caso da ervilha e da lentilha, a Embrapa Cerrados
selecionou e lanou estirpes de rizbio adaptadas s condies
de Cerrado, capazes de substituir totalmente o uso de adubos
nitrogenados nessas culturas, de modo semelhante ao que ocorre
com a soja. Para o feijo-caupi, em trabalhos coordenados pela
Embrapa Agrobiologia, a seleo de estirpes efcientes e adaptadas
s condies regionais culminou com o lanamento da estirpe BR
3267, que possibilitou incrementos de produtividade de at 40%
em condies experimentais e de at 52% nas reas de agricultores
experimentadores.
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20 Perguntas e Respostas sobre Fixao Biolgica de Nitrognio
Em relao ao uso de leguminosas forrageiras, dados experimentais
indicam que pastagens com uma composio botnica contendo,
aproximadamente, 30% de leguminosas consorciadas com gramneas
seriam sufcientes para manter a produtividade vegetal e animal, assim
como a fertilidade do solo no longo prazo. Alm de incorporarem N
fxado simbioticamente, as leguminosas contribuem efetivamente para
a produo e sustentabilidade dos sistemas de pastejo, especialmente
em regies com limitaes ambientais.
A utilizao de leguminosas arbreas nos programas de recuperao
de reas degradadas outro exemplo de sucesso onde a FBN tem
papel de destaque. O uso de leguminosas nativas ou introduzidas,
como Acacia spp., Albizia spp. e Mimosa spp., entre outras, em
associao com bactrias diazotrfcas selecionadas pela pesquisa e
fungos micorrzicos, tem sido preconizado para a revegetao de solos
depauperados, com o objetivo de restabelecer sua fertilidade.
No Brasil j existem inoculantes recomendados para gramneas?
No Brasil, em 2009, foi lanado o primeiro inoculante para no-
leguminosas, recomendado para as culturas do milho e do arroz e
contendo bactrias Azospirillum brasilense selecionadas pela Embrapa
Soja e pela Universidade Federal do Paran (UFPR). Os fabricantes
apontam um potencial para economia de at 50% na utilizao de
fertilizantes nitrogenados industriais pelo uso desses inoculantes e o
lanamento de novos produtos comerciais para essas gramneas, e o
trigo esperado para 2010.
Acredita-se que esse seja apenas o comeo de uma srie de inoculantes
para plantas no leguminosas a serem comercializados no Brasil. A
cana-de-acar, por exemplo, naturalmente colonizada por bactrias
fxadoras de N
2
, mas trabalhos recentes tm mostrado o potencial da
inoculao dessas plantas com bactrias selecionadas pela pesquisa.
Como desdobramento dos resultados alcanados nesses estudos, a
Embrapa Agrobiologia lanou um produto que vem sendo utilizado
em reas experimentais e avaliado em usinas produtoras de lcool e
acar espalhadas pelo pas. A princpio, a utilizao da inoculao
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20 Perguntas e Respostas sobre Fixao Biolgica de Nitrognio
tem como principal impacto a substituio de parte do N utilizado na
cana de primeiro ano. Os resultados tm mostrado que, com o uso do
inoculante, cerca de 30 kg de N/ha/ano podem deixar de ser aplicados.
A previso de que o inoculante esteja disponvel brevemente para o
mercado.
Alm da nutrio nitrogenada, a inoculao com as bactrias fxadoras
de N
2
pode trazer outros benefcios para as plantas?
Alm da FBN, a maioria dessas bactrias tambm conhecida pela
sua capacidade de produzir hormnios de crescimento das plantas.
A produo dessas substncias promotoras de crescimento pode
estimular o aumento da densidade de pelos radiculares, da taxa de
aparecimento de razes secundrias e da superfcie radicular. Esse
incremento resulta em melhoria na absoro de gua e nutrientes,
aumentando assim a capacidade de a planta produzir e suportar
estresses ambientais.
O que deve ser feito para obtermos ainda mais benefcios da associao
entre as bactrias fxadoras de nitrognio e as plantas?
As abordagens de pesquisa devem priorizar a realizao de estudos
que permitam o aprimoramento contnuo da FBN em plantas cultivadas.
Assim, deve-se garantir que as novas variedades e cultivares
estabeleam associaes mais efcazes com as bactrias. Em relao
s estirpes, os programas de seleo devem continuar. Finalmente,
necessrio dar continuidade ao desenvolvimento e validao de
novos inoculantes e tecnologias de inoculao, dos quais se pode citar
como exemplos a inoculao no sulco, para a compatibilizao com
o tratamento de sementes com fungicidas e o enriquecimento das
sementes em molibdnio, para garantir maiores taxas de FBN.
O investimento na pesquisa e difuso da FBN, por meio de estudos
multidisciplinares e integrados, em reas como microbiologia, cincia
do solo, melhoramento de plantas, manejo de culturas, etc., pode
trazer um grande benefcio para o planeta, aumentando a produo
de alimentos e reduzindo o uso de combustveis fsseis, graas
diminuio do uso de fontes externas de fertilizantes nitrogenados.
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20 Perguntas e Respostas sobre Fixao Biolgica de Nitrognio
20 Questions and Answers
about Biological Nitrogen
Fixation
Abstract
Among the mineral nutrients essential to plants, nitrogen (N) is
the most expensive, energy consuming and, potentially, the most
pollutant, generally being the most limiting to the vegetal production.
Nevertheless, in Brazil, the use of nitrogen is much lower when
compared to other countries, partially due to the search and utilization
of agricultural production systems based on the biological nitrogen
fxation. This document ofers basic and actualized information about
this important biological process, its benefts and utilization in the
Brazilian agriculture.
Index Terms: diazotrophic bacteria, growth promotion, inoculant,
soybean, common bean, gramineaceous.