NDICE

1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8.

INTRODUCCIN SISTEMA CROMATOGRAFICO TEORA BSICA COLUMNAS DETECTORES ANLISIS CUALITATIVO ANLISIS CUANTITATIVO CROMATOGRAFA GAS SOLIDO BIBLIOGRAFA ANEXOS

1 2 8
22 32 45 47 52 55 57

-*

CROMATOGRAFA EN FASE GASEOSA i. INTRODUCCIN

La cromatografa de gases (C.G.) es una tcnica analtica utilizada en la separacin, identificacin y cuantificacin de los componentes de una mezcla. Se basa en la diferencia de velocidades de migracin que presentan los componentes de una mezcla, al ser arrastrados por un gas inerte, a travs de un tubo relleno de un material adecuado denominado fase estacionaria. Si la fase estacionaria es un lquido disperso sobre un slido inerte, entonces se tiene la llamada "cromatografa gas-lquido" (C. G.L.) y si la fase estacionaria es un slido activo, se habla de "cromatografa gas-slido (C.G.S.). Mediante esta tcnica se pueden analizar muestras gaseosas, lquidas y slidas que se vaporicen a temperaturas por debajo de 0C hasta 450C y para cualquier sustancia que pueda calentarse dando una presin de vapor de unos 30 mm de mercurio sin descomponerse. Ventajas del mtodo: a. Rapidez: Un anlisis completo puede duran entre 5 y 20 minutos. Versatilidad: Las separaciones se pueden modificar notablemente segn la fas< fase estacionaria escogida y las condiciones cromatogrficas empleadas. Simplicidad: Para operar un cromatgrafo no se requiere un conoc miento avanzado de la teora, pero s se deben poseer ciertos conocimientos bsicos a objeto de obtener el mximo provecho del equipo. Sensibilidad: Con ciertos detectores es posible detectar partes ' por billn y las cantidades de muestra inyectada pueden ser menores a 1 microlitro. Desventajas de la cromatografa de gases: a. La muestra debe ser voltil.

- ;

b.

c.

d.

b.

Requerimiento de instrumentacin especial para confirmar la identidad de los componentes. Se requiere de entrenamiento para tcnicas especiales. Algunos compuestos no pueden ser analizados: compuestos de peso molecular alto (> 600) compuestos muy polares y no voltiles, como azcares, aminocidos y nucletidos compuestos inicos-sales. En 1941, los qumicos ingleses Martin y Synge establecieron las bases de la cromatografa de particin y sugirieron el uso de un gas como fase mvil, en vez de un lquido. Despus de 11 aos, en 1952, James y Martin llevaron a la prctica la teora de cromatografa de particin desarrollada por Martin y Synge, demostrando la factibiLL dad del uso de un gas como fase mvil. A partir de 1955 se comenz la construccin de equipos a escala indus_ trial. Dada la magnitud de los problemas resueltos por los cromatgrafos de gases, stos tuvieron rpida aceptacin y el nmero de publicaciones que existen hasta hoy es enorme.

c. d.

2.
f

SISTEMA CROMATOGRAFICO Las partes bsicas de un cromatgrafo de gases son:

a. b. c. d. e. f.

Cilindro de gas portador. Control de flujo y regulador de presin. Inyector. Columna y horno. Detector. Registrador.

control d flujo inyector

t-pTO1
columna horno

. *r-cromofoyro/na

'

ng i tirador

-gas por factor

Figura 1 ^1 El gas portador Un cilindro de gas a alta presin sirve como suministro de gas tador. Gases comunes usados son: hidrgeno, helio y nitrgeno. El portador debe cumplir con varios requisitos entre los cuales se tienen: 1. 2. Inerte: no debe reaccionar con la muestra. Pureza: No debe tener impurezas, pues stas seran separadas y detectadas. Bajo costo: Debe ser fcil de conseguir y barato. Baja difusin: Debe ser capaz de minimizar la difusin gaseosa.

3. 4.

El flujo del gas portador es de suma importancia en la eficiencia de la columna. Este puede ser medido mediante un medidor de burbuja y un cronmetro, a la salida de la columna. 2.2. El sistema inyector La introduccin de la muestra al cromatgrafo se reqliza traspasan do un diafragma de un elastmero mediante una microjeringa o bien usando vlvulas de muestreo. Estas ltimas son utilizadas generalmente con mues_ tras gaseosas .

El inyector permite la introduccin de una muestra lquida, slida o gaseosa al sistema cromatogrfico y la evaporacin de la muestra slida o lquida. La muestra debe introducirse y evaporarse casi en forma instantnea, asimismo debe ser arrastrada, ya en forma de vapor, hasta la columna con un mnimo de ensanchamiento. 1. Inyeccin mediante jeringa

La muestra se introduce mediante una microjeringa atravesando un diafragma de caucho, el cual est colocado a la entrada de la columna. La muestra es evaporada casi instantneamente y arrastrada hacia la columna por el gas portador. La cmara de inyeccin est constituida por el diafragma, un tubo metlico que va a la columna, una resistencia de calefaccin y envoltura aislante y una entrada para el gas portador.

calfactor y ovo/furo aislante

fu&o metlico

j- o fa columna
de caucho
o o o o. o o o.

<
gas portador

Figura

Cmara de inyeccin

Para la introduccin de muestra slida se recurre al empleo de ^ ventas y subsiguiente inyeccin con microjeringa, o al empleo de jeringas especiales que permiten la introduccin a la muestra slida a travs del diafragma de caucho. La temperatura de la cmara de inyeccin suele ser independiente de la del horno y est a unos 25 a 30C sobre sta. 2. Vl\rula de muestreo

Para muestras gaseosas se puede emplear jeringas especiales, pero lo ms frecuente y conveniente es usar vlvula de muestreo, ya que sta.

permite una mayor reproductibilidad del volumen inyectado. Hay dos tipos de vlvulas de muestreo: a. Rotatorias: Estas vlvulas estn constituidas por un disco esttico de acero inoxidable con 6 vas y otro disco movible, usualmente de tefln, que va insertado dentro del primero. Las vlvulas rotatorias son manua

les.

Posicin A

Posicin B

Figura 3. Vlvula rotatoria En la posicin "A" la muestra llena el volumen de muestreo. En "B", el gas portador es conectado al volumen de muestreo, arrastrando la muestra hacia la columna. b. Vlvula de pistn: El cuerpo de esta vlvula tambin es de acero inoxidable y los sellos de tefln. Puede ser operado mediante un sistema de solenoide, lo cual la automatiza.

<

Anillo de. tellon

gas pot (actor

Posicin "A"

Posicin "B1 Figura 4. Vlvula de pistn

Las columnas van enrolladas para su instalacin en el cromatgrafo. En su interior llevan un relleno constituido por un soporte inerte sobre el cual se ha depositado una delgada capa de un lquido, en el caso de la cromatografa gas-lquido, que constituye la fase estacionaria o bien estn rellenas de un slido activo (cromatografa gas slido). Existen tam bien las llamadas columnas capilares, que se caracterizan por ser de un dimetro muy pequeo, 1/16" dimetro externo, de tener gran longitud, has_ ta 50 m y no tener soporte slido en su interior, si no solamente la fase lquida. La columna va situada en un medio de temperatura controlada, que consiste en un homo eficiente equipado con un sistema de circulacin forzada de aire. La temperatura del horno debe ser controlada con una precisin de + 0,1C, debido a que la temperatura es uno de los factores ms crticos en cromatografa de gases. 2.6. Sistema de deteccin La etapa final del proceso cromatogrfico es la deteccin de los componentes eluidos y la produccin de una seal medible. Eso se logra con el detector que indica la presencia y cantidad de los componentes en una mezcla. Las caractersticas que debe poseer un detector son: Alta sensibilidad. Bajo nivel de ruido'u^ ^ ^ ^ Respuesta a todo tipo de compuestos. Insensible a los cambios de flujo y temperatura. De bajo costo.

Los detectores ms usados son: De conductividad trmica. De ionizacin por llama. De captura de electrones. De nitrgeno fsforo. Fotomtrico de llama Foto ionizacin. La calefaccin del detector por lo general es independiente del hojr no y su temperatura debe ser de unos 25C sobre la del horno.

2.3. Mcccin y regulacin del flujo Para medir el flujo del gas portador se emplean rotmetros y medidor de burbujas de jabn. Los rotmetros son cmodos, pero imprecisos an calibrados, pues el flotador del rotmetro se va desgastando con el uso o bien se contamina con los productos que salen de la columna, lo cual hace variar su peso y el resultado estar afectado por algn error. Mas usado es el medidor de burbujas de jabn, que da valores bastante precisos y es de fcil construccin, se usa en conjunto con un manmetro.

tubo graduado

ds 0-58 mt

portador

S^ p*ro d* caucho con solucin Jabonosa

Figura 5. Medidor de flujo de burbuja de jabn. El flujo del gas portador se regula fijando la presin a la entrada de la columna, mediante un regulador de presin, si la operacin es isotrmica y la permeabilidad de la columna no cambia. Si la operacin no-.es isotrmica se requiere de un regulador de flu jo diferencial, que compense la variacin de la cada de presin, a tra vs de la columna, debido a la temperatura. 2.4. Columna y horno

A continuacin del sistema de inyeccin se encuentra la columna. Esta puede ser construida de cobre, acero inoxidable, aluminio o vidrio. El material ms usado es acero inoxidable y vidrio, debido a su inercia frente a los diferentes solutos usados. Normalmente se utilizan tubos de 2 a 10 m de largo y dimetro exter_ no de 1/8 y 1/4 de pulgada, para columnas analticas estndares.

2.7. Registrador La seal de salida del detector debe ser registrada para obtener el cromatograma. Esto se consigue usando un registrador po tee iomt rico que da un registro continuo de la seal del detector en funcin del tiempo. El registrador usado debe ser de respuesta rpida, 1 seg para deflexin total de la escala. 3. TEORA BSICA

3.1. Terminologa Los trminos ms usados corrientemente en cromatografa de gases son: a. Lnea de base: Es la lnea dibujada por el registrador en ausencia de muestra. b. Punto de inyeccin: Momento en que se introduce la muestra al sistema cromatogrfico. c. Tiempo muerto (tm) : Es el tiempo que tarda un compuesto no retenido por la columna, desde el punto de inyeccin hasta su pa_ so por el detector I cu/k o /nAetau^ Vwe Wk O*1 ^ R**<vuui/w d. Tiempo de retencin (tr) : Es el tiempo que transcurre desde la inyeccin de la muestra hasta el punto mximo del pico (peak) correspondiente al componente en estudio . e. Tiempo de retencin corregido (tr) : Corresponde al tiempo de retencin menos el tiempo muerto. TA^YV^ v\ Mt e*
*\

tr = tr-tm (1) f . Volumen de retencin (Vr) : Es el volumen de gas portador re,, ! querido para que un componente emerja. VVUu iwA Vju & MeWouU 1 l f =g. Volumen muerto (Vm) : Corresponde al volumen de retencin de un componente no retenido por la columna, bit t&ctai OCA ijflOttu tortfti de I teWvia,.to. -^ * d^>- ^' *vu> ^A kue Mios. v,ua /yu A>pca"fe- |o Uw<x
fUS<t-

h. Volumen de retencin corregido (V'r) : Es el volumen de retencin menos el volumen muerto.

Vr - Vr - Vm (2)

i. Factor de correccin por gradiente de presin (J): Es un factor de correccin por diferencia de presin dentro de la co lumna, siendo Pi y Po, las presiones de entrada y salida respectivamente, la. Ue. <WA ftuuk co/mpru/rwug lo. fW* e
*K m>

"ufv\. Vx tuufvawde fvr^ to-ip. .te Us.

(Pi/Po) - 1

-.~..,i. r t/ _k Ar> toi ?l,"f*vuiJ dr ooJJtv*'*

j. Volumen de retencin neto (Vn): Es el volumen de retencin co rregido multiplicado por el factor de correccin por gradiente de presin.
Vn = J V r

k. Volumen de retencin especfico (Vg): Es el volumen de retencin neto considerado 0C y por gramo de fase lquida.
Vg - ^ L c

(4)

donde, W, y T, corresponden al peso de la fase lquida y a la temperatura de la columna en grados Kelvin respectivamente. 1. Ancho de base (Wb): Es la porcin de la lnea base interceptada por las tangentes trazadas en los puntos de inflexin del wb-- l^J pico cromatogrfico. cromatog] Velocidad lineal media del gas: Se _ seg y est dada por la expresin u = de la columna y tm el tiempo muerto, " expresa usualmente en cm/ j^ ,d ty <tf*

n. Altura equivalente de un plato terico: Es la longitud de columna requerida por un plato terico. ^^ ^ Uwl U fe* W tc^Uul de cculou XVY^ ote U flota. .0.3 io. m de Gt^cultloto
.-T ^H ? ekus.viu.ar r H = - A-

o. Plato terico: Es la longitud de columna para que se establez ca el equilibrio del soluto entre la fase mvil y la fase estacionaria.

= 5'54

10

Coeficiente de particin (K) : Es una propiedad fsica fundamen tal, es una caracterstica del soluto y del solvente. Es constante a una temperatura dada. -s. b)/yicte ew flolufc ^ U
K

cs

b Wwu>. t~ 4-

( e

Donde: C = concentracin del soluto en la fase estacionaria. C, = concentracin del soluto en la fase mvil. k = factor ,de capacidad.* pwjWMmlyb la. oowwvwB = razn^de las fases mvil y estacionaria (volumen) q. Razn de fase (3) mL de fase mvil mL de fase estacionaria

r. Factor de capacidad (k): Razn de la cantidad de soluto en la fasee>iyen la fase mvil o razn del tiempo que el soluto permanece en la fase estacionaria y en la fase mvil

G -? K T> tn 7- CftJo4 e
" Mm " Sn Cl-Wf^ "*

Donde: M = cantidad de soluto en la fase estacionaria. M = cantidad de soluto en la fase mvil. s. Resolucin (R): Es la medicin cuantitativa de la separacin de dos picos: - j^iUucV\o\ kpjp<tfu,.' ^ * W b^VVt ^ At R = 2 " W. + W2 Donde: At = intervalo de tiempo entre dos picos W 1 = ancho de base del pico 1 W? = ancho de base del pico 2 t. Selectividad (a): Un mayor valor de a significa una columna ms selectiva.
t

'r2
'

u W)l

11
3.2. Cromatograma

Es el grfico dibujado por el registrador y representa la seal dada por el detector en funcin del tiempo.

'..i
O. U|

T/tmpo

Figura 6. Cromatograma En el Cromatograma se distingue: O t m t t' W, punto de inyeccin tiempo muerto tiempo de retencin no corregido tiempo de retencin corregido ancho de la base, es la distancia entre las intersecciones de las tangentes a los puntos de inflexin, de la curva,

= = = =

con la lnea base. h = altura del pico cromatogrfico W,/? = ancho del pico cromatogrfico a media altura.

3 3 Principios tericos Para explicar el fenmeno ocurrido en la cromatografa gas-lquido (GGL), se pustul la teora del "plato terico", ms adelante se desarrollarn nuevas teoras con especial mencin a la teora dinmica de Van Deemter y colaboradores, que tomaba en cuenta aspectos no considerados en la teora del plato terico.

K
a. Teora del plato terico Si se considera la columna cromatogrfica como un simple tubo lleno, hasta cierto nivel, de un material denominado fase lquida, la cual est depositada sobre un soporte solido inerte, formando una delgada pelcula lquida. Al conjunto fase lquida y soporte se le designa como fase f i l a . t-louH Jl jbvWu^ |c$ UXM Jfe tofofefe fS W- >Ha/rv<lo U - u o VvaVwf <c 1

la /
gs'j portador
7"

*.

fase mvil

Figura 7. Esquema simplificado de una columna cromatogrfica La fase lquida debe tener una presin de vapor despreciable a la temperatura de trabajo. Si se introduce un compuesto cualquiera al sistema cromatogrfico, ste ser vaporizado en la cmara de inyeccin y arrastrado por el gas portador hasta la columna, donde se disolver en la fase lquida hasta que se establezca un equilibrio de acuerdo al coeficiente de particin del soluto que rige la distribucin de ste en las fases lquida y mvil. El coeficiente de particin est dado por:
C
V

1 '

(5)

donde : K = coeficiente de reparto C 1 = concentracin del soluto en la fase lquida o estacionaria C-i ? = concentracin del soluto en la fase mvil. De acuerdo a la teora del plato terico, la columna se considera dividida en un nmero de unidades iguales, denominadas "platos teri^ eos". En cada una de estas secciones iguales en que se ha dividido la columna, se establece el equilibrio lquido- vapor. A lo largo de la columna se establecern "N" equilibrios, siendo "N" igual al nmero de pa tos tericos en que est dividida la columna.
l r 2 N = 16 ( , / r (7) 1

t 2 r N = 5,54 ( - )

(8)

Donde : N = nmero de platos tericos t = tiempo de retencin no corregido W, = ancho de la base del pico cromatogrfico
= anc

^ ^ Pico cromatogrfico a media altura.

El nmero de platos tericos puede ser calculado a partir del cromatograma. A partir del nmero de platos tericos y conociendo la lon_ gitud de la columna, se puede encontrar el valor de la altura equivalente de un plato terico (H.E.T.P.).

H & C9)
Donde : L = longitud de la columna, La teora del plato terico fue propuesta inicialmente por Martin y Synge en 1941. Para el desarrollo de la teora se hacen tres consideraciones bsicas: 1. En el momento de la inyeccin, todo el soluto queda en el primer plato, de donde despus de haberse producido el equilibrio pasa al resto de los platos. 2. El equilibrio del soluto entre las dos fases debe ser instantneo y completo, en cada plato terico. 3. Las coeficientes de particin para todos los componentes, permanecen constantes. La base de separacin de dos componentes que llegan a la colum na, estar dada por la diferencia que presenten en sus coeficientes de Viu*' distribuciny Esta diferencia determina que los tiempos de residencia sean diferentes y emerjan, por lo tanto, de lacolumna, en forma diferen ciada. b. Teora cintica La teora del plato terico no explica los fenmenos de difusin que ocurren en la columna y no da informacin acerca del valor del H.F.T.P. en trminos de la variable de la co]urnna. Para llenar este va-

14

co, se desarroll la teora cintica, que es un tratamiento dinmico del problema, basado en la naturaleza continua del proceso cromatogrfico y que toma en cuenta el fenmeno de difusin y lo relaciona con la eficiencia de la columna, medida de acuerdo a la teora del plato teri^ co. Esta teora fue establecida en 1956 por J.J. Van Deemter y colaboradores, quienes en base a consideraciones cinticas, encontraron una ecuacin que relaciona la altura equivalente de un plato terico (H.E.T.P.) con los parmetros de la columna y con el flujo del gas portador; esta ecuacin en su forma simplificada corresponde a la siguiente expresin: H.E.T.P. = A +- + C * u (10)

Donde: A = trmino de los multipasos B = trmino de difusin molecular *' [Iwf* C = trmino de transferencia de masalUm^, n u = velocidad lineal promedio del gas portador (cm/seg) Esta ecuacin es vlida para columnas rellenas.
= ^~ m
(10)

Los trminos anteriores influyen en el ensanchamiento de las bandas cromatogrficas y dependen de las condiciones operacionales. Un adecuado control de los parmetros operacionales, har que estos trminos sean pequeos y con ello H.E.T.P. tendr un valor bajo y la eficiencia de columna ser alta. Si se grfica H.E.T.P. vs u se obtendr una hiprbola con un valor mnimo de H.E.T.P. A este valor corresponde un u ptimo y para efectos prcticos, un flujo (mL/min) ptimo. Para estos valores de H.E.T.P. y (F), la columna estar operando de la manera ms eficiente.

15

Figura 8. Grfico de H.E.T.P. vs u Trmino de los multipasos A = 2 A dp Contribuye al ensanchamiento de la banda cromatogrfica, debido a la dispersin que sufren las molculas del soluto en virtud de los diferentes caminos que pueden tomar a travs del empacado de la columna, lo cual provoca el retraso de unas molculas con respecto a otras. A = constante que depende de la homogeneidad del relleno y de la forma de ste. ue/A ((?\ho j wscotoja. dp = dimetro promedio de las partculas.

70 ^ o coT) JvbflO

?f/*sl&&

Figura 9. Ilustracin de los multipasos

16

Para que A sea mnimo se requiere que las partculas sean de di metro pequeo y los canales que dejan entre ellas, lo ms uniforme posible, es decir, se requiere una granulometra muy homognea y un llenado sumajnen_ te regular. Trmino de la difusin molecular B = 2 y Dg y = factor de tortuosidad; Dg = coeficiente de difusin del so
M ^ i po?ia tuto \J&ao.>- (UiuAudvi luto en la f ase. gaseosa

<

Este trmino describe la difusin ^rfr*^' iohgiaSina ctl ls mo lculas de soluto en la fase gaseosa. La difusin axial en la fase lquida es mucho menor y puede ser ignorada. La difusin molecular es proporcional al coeficiente de difusin del gas portador. Para reducir el trmino B se debe incrementar el flujo o velocidad lineal y usar un gas portador de peso molecular alto (bajo coeficiente de difusin) . k te Ojuw. 4 tu{o
- Tm-rminri de. la .res i st enra a Ja

O \' wiiiTwita al W\MXwivfo IAOC ^(auTeCj i^ KwwJ

k
1

tr^n^f^renri n ,d

c = JL
u '

. _i
D

(1 + k) 2

k = factor de capacidad; d,- = espesor de la pelcula de fase estacionaria D = coeficiente de difusin del soluto en la fase lquida
j_j

Presenta el ensanchamiento de la banda cromatogrfica debido a la resistencia de la transferencia de masa en la fase lquida: La resisten_ ca a la transferencia de masa en la fase gaseosa es mucho menor a la que hay en la fase lquida, sobre todo en las columnas rellenas y puede no tomarse en cuenta. Vfl^g V&&W. i \lutAU.dM ttolA* HJt < btcAo, O- V o^e, Para minimizar el trmino C se debe usar una pelcula de fase l_ quida delgada y de baja viscosidad. El flujo de gas portador no debe ser muy alto y el coeficiente de distribucin, lo suficientemente alto para favorecer el equilibrio entre la fase lquida y gaseosa. Las conclusiones que se deducen de la teora cintica de Van Deem ter son de inters prctico y se pueden usar para mejorar la eficiencia de la columna. En resumen se tiene que, para obtener una buena eficiencia de columnas se deben considerar:
i

a. Razn Pi/Po: La razn de la presin de entrada a la de salida de la columna debe ser baja. ?o*a S' * ^vU. &<Mx^- ^ *a\*' b. Dimetro de partcula: La eficiencia de la columna se mejora con el uso de partculas de relleno de pequeo dimetro.

17

c. Flujo: Para obtener un mximo de eficiencia, la columna debe ser operada al flujo ptimo. Este valor se encuentra experimentalmente del grfico H.E.T.P. vs (F). d. Cas portador: Usando gas portador de alto peso molecular se obtienen mayores eficiencias, pero si se requieren anlisis rpidos se pueden usar gases con pesos moleculares menores, sacrificando eficiencia por rapidez. e. Tipo de fase lquida: Debe ser de baja viscosidad y baja presin de vapor, con buen poder solvente sobre el soluto. f. Cantidad de fase lquida: Es conveniente utilizar bajos porcentajes de fase lquida (1-101), de manera que la pelcula lquida depositada sobre el soporte sea delgada. g. Dimetro de la columna: Conviene el uso de dimetros menores, con lo cual se minimiza el trmino A (usar de preferencia dimetro 1/8"). 3.4. Eficiencia del solvente Este punto se refiere al papel que juega en la separacin la fase lquida. La separacin en C.G.L. se debe a la interaccin de las siguien tes fuerzas: a. Fuerzas de orientacin: Resultan de la interaccin entre dos dipolos permanentes. El enlace de hidrgeno es un tipo importante de fuerzas de orientacin. b. Dipolo inducido o fuerzas de Debye: Resultan de la interaccin entre un dipolo permanente en una molcula y el dipolo inducido en otra molcula vecina. Estas fuerzas son, por lo general, pequeas. c. Fuerzas de London o no polares: Estas fuerzas estn presentes en todas las molculas y son las nicas fuerzas que existen entre las molculas de compuestos apelares. Son de naturaleza muy dbil. Estas fuerzas o interacciones determinan la solubilidad del soluto en la fase lquida y hacen posible que se lleve a cabo la separacin.

18

El efecto combinado de estas fuerzas est expresado por el coeficiente de particin "K", mientras mayor sea la diferencia entre los coeficientes de particin de dos conponentes, menor ser el numero de platos o menor el largo de la columna requerida para su separacin. 3.5. Eficiencia del solvente y temperatura La eficiencia del solvente (fase lquida) est dada por:
K

a = coeficiente de separacin de dos compuestos 1 y 2 K2 = coeficiente de distribucin del componente 2 K, = coeficiente de separacin del componente 1 . Tambin, se puede expresar como:

(12)
r

Donde t' y t' son los tiempos de retencin corregidos del comr r 1 ponente dos y 2 uno respectivamente, a y K dependen de la temperatura. Al incrementar la temperatura a y K decrecen con lo que la separacin de los componentes es menor. Bajas temperaturas de trabajo, por lo tanto, aumen taran la separacin, pero aumentar el tiempo de anlisis. 3.6. Resolucin La separacin real entre dos picos consecutivos es medida por la re_ solucin R. La resolucin es una medida de la eficiencia de la columna y del solvente (fase lquida). La resolucin est dada por:

D =
Donde: d = distancia entre los picos cromatogrficos de los componentes
(t2 - tl} W, = ancho de la base componente (1) W = ancho de la base componente (2)

19

d, W , W pueden expresarse en unidades de tiempo, conociendo la velocidad de la carta del registrador, pero en este caso carece de importancia, pues R es adimensional. Si: R = 1, la separacin es de un 981 R = 1,5 la separacin es completa 99,71. Ecuacin de la resolucin

( ^ ( < _ ! ) (J)

C14)

termino termino termino de capa_ se se- eficien cidad lectivi^ ca de . dad columna

I .\ I
_-

Rr

-i

Nmero de platos requeridos para una separacin: A . Cosux. U--I.5- t v sW ^ ^

N =
16 R

(15)

20

bp

Normal

incremento en la efcancid efe /o columna (ms platos tericos)

Incremente en la eficiencia de solvente (mayor razn <e /os tiempos de retencin)

Figura 10. Ilustracin de la eficiencia de columna y solvente

21

3.7.

Isotermas de distribucin

En cromatografa de gases se presentan dos tipos de isotermas de distribucin: a. Isoterma lineal:

Este tipo de isotermas se obtienen cuando la concentracin del soluto en la fase gaseosa es proporcional a su concentracin en la fase lquida. Esta situacin se presenta comnmente en la cromatografa gas lquido, cuando el soluto est presente en bajas concentraciones y los equilibrios que han tenido lugar son termodinmicamente reversibles. El pico cromatogrfico en este caso es simtrico. b. Isoterma no lineal:

Aqu se presentan dos casos, cuando la isoterma es convexa y cuando es cncava. El primer caso se presenta preferentemente en la crp_ matografa gas slido, en que la fase estacionaria es un slido adsorben te en que la fase estacionaria es un slido adsorbente y en C.G.L., cuan do hay interaccin entre el soluto y el soporte que no siempre es totalmente inerte. En el cromatograma se observa la formacin de colas (tailing) . En el segundo caso, se obtienen en el cromatograma los llamados frentes difusos, su origen puede deberse en el uso de una temperatura de columna, inyector o detector, demasiado baja. Tambin se obtienen frentes difusos si se inyecta una cantidad demasiado grande de soluto, con lo cual se sobrecarga la columa.

CONVEXA

u*

C'Cmologromo
(SuitOPltt

i
titmpo

Figura 11. Isotermas de distribucin

22 4.

COLUMNAS Introduccin

4.1.

La columna es el corazn del cromatgrafo, la separacin se lleva a cabo en ella y el xito o fracaso de ella depender en gran parte de la calidad de la columna utilizada. En cromatografa gas-lquido hay columnas capilares y rellenas. Las columnas capilares son tubos de pequeo dimetro, cuyas paredes internas estn recubiertas por una fina pelcula de una fase lquida. Las columnas rellenas consisten en un slido inerte sobre el cual est depositada una fina capa de una fase lquida. El material de construccin de la columna puede ser vidrio, metal o plstico y se enrolla en espiral, para que ajuste en el horno del crp_ matgrafo. El tipo de soporte escogido, la fase lquida y porcentaje de sta, mtodo de relleno, longitud y temperatura de la columna son importantes factores a considerar en la obtencin de una deseada resolucin. Las dimensiones de la columna y el porcentaje de fase lquido deter minan el tamao de la muestra que puede aceptar sin sobrecargarse. Las columnas analticas normalmente tienen dimetros externos de 1/8" y 1/4", capilares 1/16" D.E. y las preparativas 3/8" de dimetro externo (D.E.) TABLA I. DATOS USUALES DE LAS COLUMNAS COLUMNAS RELLENAS ANALTICAS PREPARATIVAS Dimetro Longitud Porcentaje de fa se lquida Tamao de muestra 1/16"-1/4" De 2-6 mm Di
2-10 m

COLUMNAS CAPILARES
1/16" De 0,1-0,5 mm Di

1/4"-3/4" De 6-500 mm Di
2-6 m

10-100 m Pelcula lquida de 0,004-0,5 uL

1-15%

20-309o

0,5-10 uL

10-1000 uL

Altura equivalente de un plato terico H.E.T.P. 0,5-1 mm

1-5 mm

0,5 mm

25

4.2.

Fase lquida a. Requisitos: Los requisitos que debe cumplir la fase lquida son:

- Buena solubilidad para los conponentes de la muestra; si la so 1 ubi 1 i dad es baja, los componentes e luyen rpidamente y la S pa rae ion es mala. - No voltil, debe tener una presin de vapor de 0,01 a 0,1 mm Hg a la temperatura de trabajo. JO>ICL Estabilidad trmica; no debe presentar prdidas de material a las temperaturas de trabajo. JccQumicamnete inerte; debe presentar inercia qumica frente a los compuestos analizados. b. Seleccin:

La seleccin que se haga de la fase lquida, depender de la naturaleza de los solutos a separar. Para lograr una buena separacin, la fase lquida usada debe tener una estructura similar a la del soluto. Las propiedades fsico -qumicas, fase lquido-soluto deben ser semejantes. Compuestos polares sern mejor separados por fases lquidas polares y aquellos solutos apelares fases lquidas apelares. Existen alrededor de unas 400 fases estacionarias diferentes, pero es posible resolver la mayora de los problemas que se presentan en cromatografa de gases, con no ms de una docena.

24

TABLA II.

CLASIFICACIN DE LOS SOLUTOS SEGN EWEL, EN BASE A LA POLARIDAD.

CLASE I (Ms polares) agua glicol amino alcoholes polifenoles cidos dibsicos CLASE III (intermedios) teres cetonas aldehidos esteres aminas terciarias CLASE V (apolares) hidrocarburos saturados disulfuro de carbono mercaptanos tetracloruro de carbono

CLASE II (polares) alcoholes cidos grasos fenoles aminas ..ias y O 2 amonaco CIASE IV (baja polaridad) cloroformo diclorometano dicloroetano, etc. hidrocarburos aromticos hidrocarburos olefnicos

FASES ESTACIONARIAS RECOMENDADAS PARA CIERTAS APLICACIONES Soluto cidos libres

--i^

Fase estacionaria FFAP poliester + H~PO. cromserb 101

Alcoholes

FFAP W carbowax 600 carbowax 1540 porapak Q

kfV\

25

Alcoholes C

1-18

carbowax 20 M FFAP carbowax 154( DEGS (Dietiln Glicol Succinato) OV-17 carbowax 1540 carbowax 20 M cromosorb 101 cromosorb 102 FFAP carbowax 20 M DEGS apezon escualano SE-30 polif'enil ter didecilftalato cromosorb 102 molecular SIEVE (5A, slica gel porapak Q V cromosorb 101 cromosorb 102 cromosorb 104

Aldehidos y cetonas

Esteres

Hidrocarburos: alifticos y aromticos

Gases permanentes

Para las fases estacionarias lquidas, se debe operar en un rango tal de temperatura de manera que, para el lmite superior, no haya prdida de fase apreciable y para el inferior la viscosidad de la fase no sea tan. alta que aumente demasiado la resistencia a la transferencia de masa disminuyendo con ello la eficiencia de la columnaL \,c;TT\

26
4.3. Soporte El soporte est constituido por granos de un slido sobre los que se reparte un lquido no voltil que constituye la fase estacionaria. 1. Caractersticas de un soporte ideal a. Inerte: Debe ser qumicamente inerte con respecto a los solutos y no debe tener adsorcin sobre stos. rea superficial: Debe poseer un rea superficial grande 1-20 m /g, de manera de asegurar un porcentaje de carga razonable de fase lquida. c. Porosidad: Debe ser lo suficientemente poroso para que presen_ te baja resistencia al flujo gaseoso. Es conveniente que los poros sean grandes y de distribucin uniforme, lo que asegura una impregnacin uniforme por la fase lquida. (

b.

(U.

d.

Resistencia mecnica: Debe tener buena resistencia mecnica a objeto de evitar que se rompan los granulos en el llenado de la columna. ^ tAfl&AQ/Vi de <W&VY\A-fi*A.U/VUiVV\1& ^ frfiyiYi/aM^ (k W OVCtMuta M O'WASK^ > AlUiT.

No existe un soporte que cumpla exactamente con todas las especifi_ caciones dadas, pero el que ms se acerca a ellos es la tierra de diatomitas. La diatomita est formada por esqueletos de algas microcelulares fosilizadas. Su estructura tridimensional est formada por enlace silicio-oxg no-silicio y silicio-oxgeno-hidrgeno en la superficie. H 5i?H -O-

Si - OH Grupo silanol Si - O - Si Grupo siloxano

^"^

/ / / / / / /^r

Figura 12. Estructura superficial del soporte de diatomita ' En el Manville. comercio se encuentran cuatro tipos principales de soporte

bajo el nombre de CROfOSORB, que es una marca registrada de la Johns

27

2.

Tipos de soporte CROMOSORB A:

Preparado por calcinacin de la tierra de diatomitas. Se rec mienda para uso de cromatografa preparativa, por su capacidad para sostener la fase estacionaria hasta un 251. utM C0tt CROMOSORB P: Es una diatomita calcinada de color rosado, debido a su contenido de xido frrico. Presenta ms adsorcin superficial que los otros tipos de Cromosorbs y exhibe gran reactividad con los compuestos polares. Tiene buena resistencia mecnica. V)o CROMDSORB W 14. \flPPreparado por calcinacin de la diatomita con carbonato de sodio, lo cual forma un agregado de estructura fina y de color blanco. No tiene tan buena resistencia mecnica como el tipo P, pero es menos reactivo frente a los compuestos polares. Usado en la separacin de compues_ tos polares . CROMDSORB G: Este soporte es de estructura muy fina y de color blanco, tiene buena resistencia mecnica, es poco reactivo lo que lo hace ideal para la separacin de compuestos polares. Su densidad es 2 a 5 veces la del tipo W, lo que limita su capacidad de carga a un 5% de fase lquida. Esto equivale a un 121 en Cromosorb W.toco,CWtt UxteXiao) A I i' ^ * * f ' * ^ al TABLA III TIPO Cromosorb Cromosorb Cromosorb Cromosorb
A

CARACTERSTICAS FSICAS DE LOS SOPORTES CROMATOGRAFICOS DENSIDAD LIBRE

0,40 (g/cm3) P 0,38 W 0,18 G 0,47

DENSIDAD EMPACADO

REA SUPER FICIAL

o MXIMO DE CARGA
251 20 15 5

0,48 (g/an3) L ,7 (m2/g) 0 ,47 4 ,0 0,24 ; ,o o ,5 0,58

28

3.

Desactivacin del soporte

Se haba visto anteriormente que la actividad presentada por el soporte era perjudicial, pues causa la formacin de colas e incluso puede inducir reacciones no deseadas, al actuar como catalizador de superficie. Ejemplo: la deshidratacin de alcoholes terciarios formando olefinas. La formacin de colas no es deseable debido a que har que los resultados de un anlisis cualitativo y cuantitativo sean errneos. Para reducir la reactividad es necesario eliminar los sitios activos del soporte, que estn formados principalmente por los grupos silanoles (Si -OH) , que tienen la capacidad de interaccionar fuertemente con los solutos por formacin de puente de hidrgeno. Existen varios mtodos de desactivacin del soporte: a. Lavado con cidos: Se utiliza en especial para eliminar el hierro de los soportes debido a que ste tiene efectos catalticos nefastos para la cromatografa de gases. Se emplea para ello cido clorhdrico concentrado, agua regia o cido ntrico concentrado. J& A^ltu-u* 3~l JW^Mr, CM, b. Tratamiento con agentes silanizantes : ( ih*?M \AA Se utilizan normalmente dimetil clorosilano y trimetilclorosi lao. Estos agentes silanizantes sustituyen los hidrgenos del grupo hidroxilo libre por grupos sililo. (CH3)? SiCl2 ( C H , ) , Si Cl DMCS, dimetil cloro silano TMCS, trimetil cloro silano

OH
5, O s

4. (-H^ , -

Figura 13. Tratamiento del soporte con dimetilclorosilano

01 el & i e fce fta ^ Wfiwwl f ^ ek^UMOJ* <J

29

c.

Uso de polisteres:

Si se reviste el soporte con un 0 , 5 - 1 % de compuesto polar como un polister, se reduce la actividad de soporte debido a la saturacin de sus sitios activos. U. taUJk Ik^MCOi 0U ! W. |4$ ^ AsLuU. U_,

Factor de cola: Para medir la distorsin de un pico cromatogrfico, debido al efecto de cola, se utiliza el llamado factor de cola.
W

W~TTv~
a b

b " Wa

X 1

Factor

de

cola

c/e/^VUHcujP

Figura 14. Clculo del factor de cola (tailing) En la cromatografa gas-solido se utiliza como fase estaciona^ ria un solido activo como carbn activado, molecular Sieve, Silicagel y copolmeros estireno-divinilbenceno (PORAPAK). Esto se ver en ms deta_ lie en el captulo dedicado a la cromatografa gas-soli.:o. 4.4. Preparacin de columnas 1. Recubrimiento del soporte:

Varios mtodos se usan para recubrir el soporte solido con la fase lquida, de los cuales slo se vern dos: a. Mtodo mediante el evaporador rotatorio: Una cantidad, pesada, de fase lquida, segn el porcentaje que

30

se desea, se disuelve en un solvente apropiado en un matraz de fondo re_ dondo. Sobre esta disolucin se agrega una cantidad pesada de soporte lquido. El matraz se conecta a un evaporador rotatorio y se reduce la presin mediante una bomba de vaco de agua. El matraz se rota y calien ta en bao de agua hasta que todo el solvente se ha evaporado. b. Mediante matraz: En caso de no disponer de un evaporador rotatorio, se pueden utilizar matraces Erlenmeyer y vaco, procediendo en forma similar como en (a). En este caso habra que agitar el matraz cada cierto tiempo.

Tubo de caucho

^4 la bomba
da yaci

-d

soporte t fase y solvente Figura 15. Preparacin del relleno Cuando se agite la mezcla se debe tener cuidado para evitar romper las partculas de cromosorb. TABLA IV. CANTIDAD DE SOLVENTE A USAR CON EL SOPORTE

SOPORTE

M|XsMvente g soporte

Ejemplo para 20 g de soporte 7 v ?n

Cromosorb P Cromosorb W Cromosorb G

1,5
2,0 0,5

30 mL 40 mL 10 mL

31

2. Llenado de la columna Una vez preparado el relleno y elegido el tubo adecuado (material, dimetro y largo), se cierra este ltimo en uno de sus extremos mediante lana de vidrio y por el extremo abierto, con un embudo unido a la columna con un tubo plstico, se procede a su llenado. Para lograr un llenado homogneo se vibra la columna y adems, conjuntamente, se puede usar vaco si fuese necesario. El proceso dura hasta que no es posible intrp_ ducir ms relleno a la columna. Si la columna no es muy larga, se procede a su llenado sin doblarla, si fuese muy larga se enrolla en espiral.

Relleno rudo plstico

(tygon}

-* Vibracin

^Porcin lana ta vidrio \ Vacio

Figura 16. Llenado de la columna.

3. Condicionamiento

una vez preparada la columna, debe ser condicionada a lo menos dos horas a 25C sobre la temperatura a la que se ve a trabajar, pero no se debe sobrepasar el lmite mximo de temperatura dado para esa fase lquida. Durante el perodo de condicionamiento se hace pasar un flujo pequeo de gas portador y la salida de la columna debe estar desconectada del detector, si se efecta el acondicionamiento en el mismo cromatgrafo, para.evitar su contaminacin. |e, ^u a 2

<t/> Da a |b\o e UJ.

Oo MI dtaa i ooviectao < <

5.

DETECTORES

5 1 Introduccin El detector utilizado en cromatografa de gases es un instrumento que indica y mide la cantidad de componente separado en el gas portador. Pueden ser clasificados como "integrales" detector integral da una respuesta proporcional ponente eluido. Un detector diferencial da una ya sea a la concentracin o al flujo msico del ms usados son los detectores diferenciales. y "diferenciales". Un a la masa total del comrespuesta proporcional conponente eluido. Los

La altura "h" es proporcional a la masa total del componente eluido en el intervalo de tipmpo (t2 J, 9 - t 1 u t t t w ? cfemte t\

El rea bajo la curve es proporcional a la masa total dej. componente eludo en el ntervalo de.tiempo. (t- - t ).

Figura 17. Cromatograma integral y diferencial Tambin es posible clasificar los detectores como: 1. Dependientes de la concentracin (conductividad trmica, captu ra de electrones) . - el detector mide la concentracin de la muestra en el gas portador. C ' - el uso de un mayor flujo diluye la muestra y produce una seal menor ( La Ma. e\ <kwwlA& ^ JW - sensibilidad - mv/mg muestra/mL gas portador.

<-

- Para detectores que responden al flujo msicofkk mato [ ! t>w- t* AMMAJ dfe ^wNgj \ tjmtfWJMA C 1 C7

Donde S', A, C*, C- y W tienen el mismo significado que en el caso anterior. Se advierte que S' es independiente del flujo, en cambio S es proporcional al flujo.

AJW \JOAAXM ei(\exi, ou^wve\4ct PtVv o

Otra forma de expresar la sensibilidad de un detector es dividiendo la cantidad mnima detectable, que es igual a dos veces el ruido^ por el ancho de la base del pico, en segundos.
s

naa
VttMM,/lw

o *-

- f

'9>

Donde:
S = sensibilidad (g/seg) R = ruido elctrico o^ /A W, = ancho de la base del pico cromatogrfico en segundos. RangQjLineal : La exactitud de los anlisis cuantitativos depende de la relacin lineal que exista entre la concentracin y la respuesta del detector. El rango lineal de un detector puede ser definido como la razn entre la concentracin mayor a la menor, dentro del rango en el cual la res_ puesta del detector es lineal. ^IQAPQ &\ Cav y e d. Ruido: La seal de salida de un detector puede ser aumenta^ da tanto como se desee por amplificacin electrnica y con ello la sensibilidad del detector. No obstante, el ruido elctrico inherente al detector y a la parte electrnica, es tambin amplificado y llega a un punto tal que la respuesta del detector es ocultada por el ruido. Por lo tanto, el ruido limita la concentracin (o flujo msico) de los componentes que pueden ser detectados. Se define: Cantidad mnima detectable = 2 ruido. Ejemplo: Si el ruido es de 4 micro volts, entonces la concentracin mnima detectable es aquella que da una respuesta del detector de 8 microvolts.

33

2. Dependientes del flujo msico (ionizacin por llama) - el detector mide masa (gramos) de muestra que entra al detec tor/tiempo. - flunois mayores aumentan la sensibilidad. . 7 M o, axurTyyu) w-, & afecta .. F>? UflrtfDqTa ,w5owm& fe. iewiWlM /A */, I - sensitJilicfad sensiDilicad -m mv/mg/seg. vmse. 5.2. Caractersticas generales de los detectores a. Selectividad: La selectividad de un detector depende de su principio operacional. Por ejemplo hay detectores que responden a un cambio en la conductividad trmica entre la muestra y el gas portador. b. Sensibilidad: Para detectores cuya respuesta es proporcional a la concentracin, la sensibilidad est dada por la siguiente expresin:

S =

A C C -/F L _L_c

( 1 6 )

Donde: _ Mv cm S = sensibilidad del detector en ( ) C-, = sensibilidad del registrador en (Mv/cm) de carta Cj ? = recproco de la velocidad de la carta en (min/cm). F = flujo del gas portador a la temperatura de la columna c en mL/min. W = peso del componente que pasa por el detector en (mg). 2 A = rea^dei-pi-co cromatografa) en (cm ) La correccin de temperatura se logra mediante la siguiente frmula:
F F c = r a 'a W

Donde: F = flujo a la temperatura de la columna (mL/min) T = temperatura de la columna ( K ) Ta = temperatura ambiente (K) F^ = flujo a la salida de la columna (mL/min)
el

35

e. Calibrado: Debido a que la respuesta de los detectores no es la misma para todos los compuestos, se hace necesaria su calibracin.-Cuav\c \xa ^AAcMa M Pan*Wa -i ?
5.3. Tipos de detectores

Hay muchos detectores usados en cromatografa de gases, de ellos los ms comunes son: Detector de conductividad trmica, detector de ionizacin por llama y detector de captura de electrones. 1. Detector de conductividad trmica: a. Principio:

Una corriente de intensidad constante recorre un filamento o termistor hecho de un material cuya resistencia elctrica vara mucho con la temperatura, situado en la corriente de gas portador. \ \ K *f *&-> $ ' COA/A/ \A? ,, ACAJ' Cuando .s alcanza el equilibrio entre la aportacin de energa '"'CUOrt. ' -""" " " por efecto Joule y su disipacin por radiacin, conveccin y conduccin, el filamento se encuentra a una temperatura determinada. Esta es fun cin de la intensidad de corriente, de la conductividad trmica del medio y de las dems prdidas de energa. Si la composicin del gas porta dor que pasa por el detector cambia al emerger un componente, la conductividad del medio cambia, con ello la temperatura del filamento y su resistencia elctrica. Esta variacin de resistencia es medida por puente

de Wheaststone. \)aa tf
b Circuito: ( ck .

El puente de Wheatstone para los detectores de conductividad trmica est constituido por cuatro filamentos, dos de los cuales estn ubicados en una celda denominada de referencia y los otros dos en otra, llamada de medida. El puente en un principio est balanceado y slo pasa gas portador por ambas celdas. Cuando se introduce muestra en el sistema por la celda de medida pasa el gas portador ms la muestra y por la de referencia slo gas portador. Esto desequilibra el puente, se produce una defierencia de potencial que debidamente amplificada, se registra en un inscriptor y da el cromatografa.

\V He

36

<

ai registrador
gontrol de corriente
3

fuente de poder V-

/ A

Figura 19. Circuito simplificado del puente de Wheatstone

c. Elementos sensibles:
l.d.s el finen tu.-, .seiisihk'.s cstn coust i 1 iiiilu;, por ni:uncn! o:, en espiral de tungsteno, slo o en aleacin con renio. Puede usarse termis_ tor en vez de filamentos. Los termistores son mezclas sinterizadas de xidos de manganeso, cobalto y nquel.

Los termistores son ms sensibles que los filamentos, pero tienen menor estabilidad. Los elementos sensibles se encuentran ubicados en un bloque macizo de acero aislado trmicamente. d. Gas portador: Su influencia es muy grande y conviene usar gases de conducti (cMJpifv itui vidad trmica alta como H7 y He para aumentar la sensibilidad. Si se usa
Lt

nitrgeno, la sensibilidad baja debido a su menor conductividad trmica. k /VnvjuiAje tcvs. V 'e. Sensibilidad:

La sensibilidad en trminos de los parmetros de la celda est dado por:

S = K I2 R

CAC

(T - Tb)

(20)

Donde : S = sensibilidad K = constante de la celda, depende de su geometra(, I = corriente en el filamento ? U>Wvofe ? R = resistencia del filamento p t\ji& > A Ac = conductividad trmica del gas portador AS = conductividad trmica de la muestra gaseosa Tr. = temperatura del filamento T, = temperatura del bloque del detector cWde AWtt' Segn la ecuacin (20) para incrementar la sensibilidad del de_ tector se debe incrementar la corriente del filamento, disminuir la temtrrrn peratura del bloque V escoger un gas portador df ca, adems se debe mantener el flujo constante, pues la respuesta de este detector vara con el flujo.

- conexiones elctricas

BloCK

Ras porta, dor

filamento

Esquema del detector de conductividad trmica

2.

Detector.de i o n i z cin! por llama: A. VT^WCCR - Ot<Tf IrvO

, .4*w\> |"

a.

Principio:

, V"

Este detector opera segn el principio de que la conductividad >u>^ te elctrica de un gas es directamente proporcional a las partculas cargadas que hay en l. El efluente gaseoso proveniente de la columna se mezcla con hidrgeno y es quemado usando aire como comburente. Se producen iones y electrones que son colectados por un electrodo colector (nodo), lo cual produce una corriente I, que es amplificada y registrada en un regis_ trador como una diferencia de voltaje. Si slo pasa gas portador por el detector, se obtiene una peque_ a corriente de fondo debido a la ionizacin de las impurezas que trae ste. Esa corriente de fondo se anula oponiendo otra en sentido contrario, por lo tanto, cuando pasa muestra por el detector, se produce la ioniza ci6n de los componentes por la llama generndose una seal que es proporcional al nmero de molculas ionizadas de la muestra...

iV i
O
U (quemado^

ET Fuente i-n

da ionizacin

(4-?
amplificador registrador

voltajg opuesto a la corriente d fondo

Ht

Figura 20. Circuito simplificado de un detector de ionizacin por llama El electrodo negativo est constituido comnmente por el cuerpo del quemador y el positivo por el electrodo colector.

AciMo.
39

aislador

salida

electrodo ', quemador aire aislacin de cermica hidrgeno

Figura 21.Detector de ionizacin por llama,. b. Selectividad: El detector de ionizacin por llama responde prcticamente a todos los compuestos orgnicos. No tiene respuesta frente a los compuestos inorgnicos, por ejemplo: agua, gases inorgnicos (CO, CO^, H-CLjSC^, NO, N02, etc.). c. Respuesta:

La respuesta del detector es fuertemente dependiente de los flujos de hidrgeno y aire. En general buena sensibilidad y estabilidad se obtiene con un flujo de hidrgeno unas 10 veces menor que el del aire. En la prctica se trabaja con flujos de 30 mL/min para el hidrgeno y 300 mL/min para el aire. * tJL fc

^e . a Se ha ha comprobado

. tambin

^^^

tra del colector y del quemador. del gas portador. d. Rango lineal:

que la respuesta depende de la geomeSu respuesta es independiente del flujo

El detector de ionizacin por llama tiene el rango lineal ms amplio de todos los detectores en uso. Su rango lineal est entre 10 y 10 , La combinacin de su alta sensibilidad y su amplio rango lineal lo hacen ideal en el anlisis de trazas.

i* W w

^(

3.

Detector de captura de electrones: a. Principio:

Este detector es tambin un detector de ionizacin, pero la fuen te de ionizacin es radiactiva,tritum(H ) o^NiJ^ emisores de partcula beta. Las molculas de gas portador que pasan por el detector son ionizadas por la fuente radiactiva generndose electrones lentos. Estos electrones lentos n gran al nodo bajo un potencial fijo, denominado veltaje de la celda. Est@s electrones colectados producen una corriente que es amplificada. Si por el detector pasa una muestra que posea afinidad por electrones, la corriente anterior ser reducida. Esta baja de corriente se registra como una seal en el registrador y es proporcional al nmero de molculas del compuesto y a su afinidad electrnica. Fuente radiactiva > g (partculas beta) ( &f(7\jo\t\<& c.jaiU "
cu cux/\ po-vjfe'Ctej / Mft'

3 + N2 + 2e + N*

2o + molculas electronegativas -> iones negativos b. Fuente radiactiva: Est constituida por una lmina radiactiva de tritum (ir] o Ni -\ En el primer caso el tritum est adsorbido en titanio depositado sobre una lmina de acero. Tambin el tritum se puede adsorber sobre escandio, lo que le da mayor estabilidad frente a la temperatura. La lmina constituye el ctodo, el nodo est constituido por un tubo que va> por el interior de la lmina.

escape de gasas "

Terminales aislantts de tefIon

Lmina radiactiva cilindrica Of JermirtaQS aislantes ob

Figura 22. Esquema del detector de captura de electrones

' ;'

41

c. Selectividad: Este detector es muy y organometlicos, debido a a los hidrocarburos, alcoholes, frente a compuestos halogenados sis de pesticidas. d. Rango lineal: Su rango lineal es bajo, alrededor de 10' TABLA V. CARACTERSTICAS DE LOS ISTOPOS
H3

sensible a compuestos halogenados nitrisu afinidad electrnica. Es poco sensible cetonas, etc. Por su excelente respuesta hacen a este detector ideal para el anli^

1
Vida media Partcula emitida Energa Estado fsico Limitacin de temperatura Toxicidad

Ni63 125 aos

| "

12,5 aos 6 18 KeV gas 220C baja

e
67 KeV solido 350C moderada

4.

Detector termoinico (NPD),>"

" ( 6

. :"

El detector nitrgeno-fsforo (N,P) es en su diseo bsico, idntico al de ioni zacin por llama (FID) excepto que una sal de un metal alcalino se colocajentre el quemador y el colector. Un metal alcalino como Na, Rb o Cs se introduce en una matriz de slice o cermica de alta densidad, La fuente alcalina se calienta por una corriente elctrica y la temperatura de la iprla de la sal del metal alcalino^ es controlada por la intensidad de la corriente de entrada. La temperatura de la fuente alcalina (perla) afecta la sensibilidad, corriente de fondo y duracin de la misma.

42

electrmetro
Grnd. BIAS VOLTAGE
fJW-W - W>

capa Caseosa perla caliente quemador

corrente d e a pela

te cuwtcwi
Figura 23. Detector nitrgeno-fsforo (NPD)

&

Durante el funcionamiento del detector se requiere un exacto control del flujo de hidrgeno y aire, pues afectan notablemente la sensibilidad. Con flujo de hidrgeno de 6,3 mL/min se aumenta la respuesta para el fsforo y con valores menores (3,1 mL/min) se aumenta la especificidad para el nitrgeno. Resumen de caractersticas NPD : 1. 2. 3. 4. 5.
5.

-11 MCD = 10 g (paratin) Selectividad - sensible a fsforo, nitrgeno y algunos halgenos Estabilidad - aceptable Lmite de temperatura - 300C Gas portador - nitrgeno o* helio.

fua CflWji*

-V

iv 1 -

11?

Este detector posee alta especificidad y selectividad en la determinacin de compuestos azufrados y fosforados. Este detector posee una fuen te de ionizacin semejante al detector de ionizacin por llama (FID), pro duciendose la combustin de la muestra que contiene azufre y/o fsforo en una atmsfera rica en hidrgeno formndose especies quimiluminescen-

43

tes que emiten radiacin caracterstica del heterotomo introducido en la llama. La emisin caracterstica para el sulfuro es de 394 nm y para el fsforo de nm. Mediante un filtro se selecciona la longitud de onda apropiada. ^ UU^TlCt M Id M-OffvCt gj S .l^'fistol &rif i\ i ^ % ^-JP-^** . \ **s

Caractersticas del detector: \f>. 1. Mnima cantidad detectable Azufre 10 -9 " g Fsforo 10" ' g 2. Respuesta:

i la a>a & 4i$<2/xaACL toa

Muy selectivo para compuestos de azufre y fsforo 3. Lincaldad. Azufre Fsforo 103 10

4. Estabilidad: Buena 5. Lmite de temperatura: 350C 6. Gas portador: Nitrgeno o helio. Aplicaciones: Anlisis de residuos de pesticidas fosforados o azufrados, contamiites atmosfricos (sulfures, anhdrido sulfuroso)

44

ignicin

^ti^SSSF'^S^S
tubo fotomultiplicadoi

?TS

"

! I !! lVlllJl

r "iau

aire s ,

efluente de la columna

Figura 24. Detector fotomtrico de llama (FFD) TAB VI. RESUMEN DE I AS CARACTERSTICAS DE LOS DETECTORES
LIMITE GAS PORTADOR

DETECTOR PRINCIPIO SELECTIVI SENSIBILI RANGO

DE OPERA- DAD DAD g/seg LINEAL DE T CIN Conducti Conducti^ Un ver . 60 x 1(f10 1$4 450C vidad vidad de trmica gases Ioniza- Llama Responde 9 x 10 cin por H?0? pas a com - para alcallama ma ZOOOC puestos nos orgnic. Captura de e lee trones Ioniza cin por partculas beta responde 2 x 10~14 a comfH3) -14 puestos 5 x 10 con afi- (Ni63) nidad para CC1. por elec trones
-1 -z.

10

400C

e H N 2 H e N 2
N

103

225C (H3) 350C (Ni 63)

2 An+101 CH

45

6.

ANLISIS CUALITATIVO

6.1. Introduccin: La cromatografa de gases, adems de separar los componentes de una mezcla, permite su identificacin. En la identificacin se pueden emplear tcnicas cromatogrficas y no cromatogrficas. 6.2. Identificacin cromatografica: a. Por datos de retencin:

Si las condiciones cromatogrficas se mantienen constantes, los tiempos de retencin y volmenes de retencin permanecern constantes para los componentes de una mezcla. Siendo as es posible utilizar patrones para identificar los picos cromatogrficos que aparecen en el cromatograma por coincidencia con los tiempos o volmenes de retencin.
('

i
U

n.^ ilo te (WAQ

i
o-* **w-

WwUk iMWiu

s
Mezcla descop.DCidq de alcoholes

JO

J2

)6

Figura 25. Identificacin de compuestos desconocidos usando patrones.

En la figura 24 se tiene una mezcla desconocida de alcoholes y se compara, para su identificacin, con una mezcla patrn de alcoholes normales de metanol a pentanol. b. Uso de grficos semilogartmicos: Si se grfica el logaritmo de retencin corregida de una serie ~i ^ ^ ^ * " " ^ ^ " homologa en funcin de alguna propiedad creciente de esa serie, como nmero de tomos de carbono, puntos de ebullicin, etc., se obtendrn rectas a partir de las cuales se pueden identificar otros miembros de esa serie homologa conociendo sus tiempos de retencin.

//limero efe ato/nos cte carbono

Figura 26. Grfica log tiempo de retencin v/s nmero de tomos de carbono Este mtodo tiene la ventaja de que bastan 2 3 compuestos para establecer la pendiente de la recta y as identificar otros miembros de la misma serie. c. Por coinyeccin: Este mtodo es muy simple, consiste en agregar a la mezcla desconocida un compuesto que se sospecha est en dicha mezcla y ver, al efe tuar el cromatograma de la mezcla nuevamente si alguno de los picos ha crecido. Aw

ta a

oj

6.3.

Identificacin no cromatogrfica

En este caso los componentes de la muestra pueden ser identificados mediante espectrometra infrarroja y de masas. En ambos casos el cromato^ grafo puede conectarse directamente con el espectrofotmetro infrarrojo o de masas, los cuales haran las veces de detector. AYtm*
i

7. 7.1.

ANLISIS CUANTITATIVO Introduccin

Se basa en el hecho de que la cantidad de determinada sustancia es directamente proporcional al ara del pico cromatogrfico, obtenido en el cromatograma correspondiente a dicha .sustancia.
\NV v*- v f*

Dado que cada detector no tiene igual respuesta frente a todos los compuestos, es necesario calibrarlo a objeto de determinar los factores o coeficientes de respuesta para cada componente. En el anlisis de trazas se suele usar la altura en vez de rea. 7.2. Mtodos en anlisis cuantitativo a. Normalizacin i-terRa:

^jjc w *& ^Jte *

l-n este mtodo se obtiene el porcentaje de la composicin, midiendo el rea del pico cromatogrfico correspondiente a cada componente y dividiendo cada una de estas reas por el total del rea. Se requiere que todos los componentes aparezcan en el cromatograma.
A

9 A1 = A

1 + A2

i +A

3 + An

e 100 rzn *\ /u ctUM^-lft 0w / w* f *' C }

Cuando la mezcla analizada contiene compuestos similares con di_ ferencias pequeas de pesos moleculares siendo stos elevados, se puede tomar el rea relativa como el porcentaje en peso de los componentes de la mezcla. Se asume que todos los componentes tienen la misma respuesta frente al detector. Por lo general el porcentaje de rea no es directamente proporcional al porcentaje en peso, debido a que los distintos compuestos tienen diferente respuesta frente al detector. Es necesario, por lo tanto,

48

determinar factores de correccin. De la relacin (21) se puede deducir que: (22)

% peso Xi = Fx Ai (%)

FY

representa el factor de correccin el cual depende de la empleado.

i naturaleza qumica del conpuesto y del tipo del detector

El valor del factor de correccin se obtiene relativo a otro compuesto que se utiliza como estndar y al cual se le asigna un valor uno a su factor de correccin. Supngase se tiene una muestra de dos componentes, de los cuales uno de ellos se utiliza como estndar:

I Px1 = Fx1 Ax1 (%)

Estndar X1

% Px2 = Fx2 ' Ax2 (%)

Dividiendo miembro a miembro se obtiene:

% Px1

Fx1 Ax1 (I)

Se le asign a Fx. un valor arbitrario de 1 Luego:

Fx2

Una serie de factores de respuesta para el detector de conductividad trmica e ionizacin por llama aparecen descritos en : Dietz, W.A. Journal of Gas Chromatography 5,68 (1967).
b. Calibracin directa:

Por este mtodo se inyectan cantidades conocidas de muestra pura y los valores de las reas de los picos cromatogrficos se grafican en funcin de los pesos inyectados. Con esto se obtiene una curva de calibracin que es lineal y pasa por el origen.

49

Una cantidad de muestra desconocida, exactamente medida, se inyecta en el cromatgrafo. Se mide el rea obtenida y con ese valor de rea a partir de la curva de calibracin se calcula la cantidad del compp_ nente presente en la muestra desconocida.

6 o
u

o u

Peso compon ente

Figura 27 Calibracin directa Puede usarse la altura en vez del rea del pico,rromatogrfico. La desventaja de la calibracin directa es que se debe conocer exactamer^ te la cantidad de muestra inyectada, lo cual es difcil de reproducir exactamente, pues las medidas absolutas de rea y altura son muy dependientes de las variaciones en las condiciones cromatogrficas.
c. Calibracin interna:

En este mtodo se preparan mezclas de razones de peso conocidas de los componentes a determinar y un estndar. Se obtiene el cromatograma y a partir de l se miden las reas, las razones de esas reas se grafican versus las razones de peso, con lo cual se obtiene una curva de calibracin. A continuacin a la muestra desconocida se agrega una cantidad conocida del estndar igual a la empleada en la confeccin de la curva de calibracin. Se obtiene el cromatograma de esta mezcla, se calculan las razones de rea y a partir del grfico de calibracin se obtiene la razn de pesos del compuesto, cuya concentracin se desea determinar y el estndar. Luego, para obtener la cantidad o concentracin del compuesto en estudio, se realiza un simple clculo.

s o

peso componente peso standard"

Figura 28. Calibracin interna Ventajas del mtodo: - Las cantidades inyectadas no necesitan ser exactamente medidas, pues es un mtodo relativo. - La respuesta del detector no necesita conocerse. -- No se requiere que todos los componentes aparezcan en el cromatograma. Requerimientos del estndar interno usado: - Debe resolverse' bien de los otros componentes. - Debe eluir cerca de los compuestos de inters. - Debe tener aproximadamente la misma concentracin que el compuesto a determinar y similitud estructural.

Figura 29. Tamao y ubicacin del estndar en una mezcla de componentes A, B y C.

51

7.3. Medicin de reas Existen varios mtodos para medir el rea de los picos cromatogrf icos: a. Planimetra: Se determina el rea mediante un planmetro. Esta tcnica es tediosa, lenta y menos precisa que otros mtodos. b. Triangulacin: Se calcula el rea formada por las tangentes a los puntos de inflexin de la curva. Este mtodo toma tiempo, pero su precisin es razonable. e. Altura x ancho a media altura: Como las curvas cromatogrficas normales se aproximan a un tringulo, se puede determinar el rea la altura del pico cromatogrfico por el ancho a media altura. Esta tcnica es rpida y simple y los resultados son buenos para curvas simtricas de ancho razonable. d. Cortar y pesar: En este caso las reas son determinadas cortando los picos cromatogrfieos del cromatograma y pesando el papel en una balanza analtica. El mtodo es largo, pero til en el caso de formacin de colas. e. Integrador de disco: Consiste en un instrumento electromecnico, el cual registra el rea sobre el mismo cronutograma, que se presenta como una serie de oscilaciones cuyo nmero es proporcional al rea bajo la curva. Este mtodo es preciso y rpido. f. Integrador digital electrnico: Este instrumento transforma la seal originada en el detector (voltaje), mediante un convertidor de frecuencia, en pulsos cuya frecuencia es proporcional al rea de pico cromatogrfico. Este sistema para medir el rea es el ms rpido y preciso de todos. .Ordenamiento de las diferentes tcnicas en orden creciente de precisin: 1. Planimetra

52

2. 3. 4. 5. 6.
8

Triangulacin Altura x ancho a media altura Cortar y pesar Integrador de disco Integrador digital electrnico.

CROMATOGRAFA GAS-SOLIDO Introduccin

8.1.

La cromatografa gas-slido tiene una historia ms larga que la cromatografa gas-lquido, pero ha sido relegada a un segundo lugar debido a la limitacin que hay en la seleccin de la fase estacionaria, en compara cin con la variedad de fases lquidas que pueden usarse en la cromatografa gas-lquido.

La fase estacionaria est constituida por un slido adsorbente. No se emplea fase lquida. El tipo de isoterma obtenida es la adsorcin, la cual raramente es lineal. La consecuencia de esta no linealidad hace que la forma de los picos cromatogrficos est distorsionada por la formacin de colas (tailing) . El tratamiento terico es similar al de la cromatografa gas-lquido . 82 Slidos adsorbentes usados a. Carbn activo: Se utiliza para separar Ne, H~, 2, CH., C-IHL, y C-H,. El mecanismo de separacin se debe principalmente a la interaccin de las molculas con el carbn a travs de las fuerzas de dispersin de London. b. Tamices moleculares: Owvdb^uloA AxjjAK ^ Los tamices moleculares se obtienen por deshidratacin de aluminio, silicatos de sodio y calcio. Los cristales resultantes de esta deshidratacin son uniformemente porosos. Existen 4 tipos principales

53

3A, 4A, 5A y 13X, que se diferencian entre ellos por su tamao de poro. Los tamices moleculares se emplean generalmente para el anlisis de gases. Uno de los ms usados, el 5A, es capaz de resolver H?, 0?, N?,
Lj j LJ

CH4 y co.
Antes de usar el tamiz molecular debe activarse a unos 300CC por dos horas. c. Polmeros porosos: Estos solidos adsorbentes son polmeros porosos constituidos por etilvinilbenceno copolimerizado con divinilbenceno, formando una estructura reticular. Hay varios tipos y se diferencian entre s por su polaridad. En el mercado existen dos marcas de importancia: PORAPAX y CRCMOSORB, ambas muy similares. Existen alrededor de 6 tipos diferentes de POROPAK: P, Q, R, S, T y N. Los tipos P y Q son no polares, el resto es moderadamente polar. Su polaridad ha sido modificada por copolimerizacin con monomeros polares. De CRONDSORB existen alrededor de 8 tipos diferentes: CROMOSOKB 101 a 108. Estos polmeros porosos son de gran utilidad en la resolucin de problemas como la separacin de agua, alcoholes, cetona y esteres de bajo peso molecular, gas natural, compuestos sulfurados, etc.. Es interesante hacer notar la rpida eleccin que tienen el agua y otras molculas altamente polares, sin formacin de colas. Ejemplos de algunas aplicaciones de los polmeros porososr

54

Solido adsorbente POROPAK Q (CROMOSORB 101)

Muestra 1. 2. A 3. 4. 5. 1. 2. 3. 4. 5. 6. Aire Metano Dixido de C Agua Propano Metanol Etanol Isopropanol N- propanol Butanol terciario 2-Butanol ORDEN CRECIENTE DE APARICIN EN EL CROMATOGRAMA

El PROPAK Q es uno de los adsorbentes ms usados de entre los polmeros porosos. Las temperaturas de trabajo son altas, sobre 100C, esto se debe a que las energas de adsorcin son mayores que las de di(ty/vf^W) , solucin, por lo que el anlisis de un mismo componente debera hacerse a temperatura ms alta en cromatografa gas -slido que en cromatografa gas -lquido.

55

BIBLIOGRAFA

1.

STAMBUCK, J.D. "Manual Prctico de Cromatografa de Gases" The Perkin-Elmer Corp. 1970. TRANCHANT, J. "Manual Prctico de Cromatografa de Gases" 2a. edicin, Toray-Mason S.A. 1972. GRANT, D.W. "Gas liquid-chromatography" Van Nostrand Reinhold Co. London 1971. McNAIR, H. M. and BONELLI , E.J. "Basic gas chromatography" edicin. Varan Aerograph 1969. AMERSE, D. "Gas Chromatography" 2a. edicin, Butterworths , London 1971. BAILEY, J.B.; BROWN, N.E. Analyst 447-451, vol. 96, junio 1971. MORETTI, E. LEOFANTI, G. "Journal of chromatographic Science, pg. 64-66, vol 12 1974. ROBERT GROB Modera practice of gas chromatography John Wiley sons, New York 1977.

2.

3.

4.

5.

6.

7.

8.

COLUMNAS CAPILARES

, /O

t?

2000

57

COLUMNAS CAPILARES Caractersticas : 1. Tubos abiertos : 5-60 metros de largo. confeccionados en vidrio, slice fundida, acero inoxidable dimetro interno pequeo 0,20 - 0,75 mm una delgada capa de fase lquida 0,1-1,0 micrones (yin) 2. Dos tipos: WCOT - columna abierta con la pared recubierta SCOT - columna abierta con soporte recubierto

?lof ***

WCOT

SCOT

laoae

O, 63- O^S" irrvnn e

Columnas capilares vs columnas rellenas:

Capilares Longitud N/m Platos totales

5-160 m

Rellenas
2-3 m

3.000
180.000

2.000 6.000

COLUMNA RELLENA
PACKEO COLUWN ICO AROCIOH \.!60 ISOTMEBMAl < ZIO'C

COLUMNA CAPILAR:

SPLIT (30 TO 1) - ECO AHOCLOB 1260 ISOTMERMAL 9 210C

60

59

Material de las columnas capilares: 1. Slice fundida (> 95s) flexible, ms inerte
Di de 0,10; 0,25; 032 j o,53 rom

espesor de pelcula 0,1-1,0 micrones (ym)

2. Vidrio O 5a)

ms inerte que el metal; pero muy frgil requiere desactivacin el tubo puede ser obtenido en el laboratorio. 3. Metal ( =U) menor eficiencia; sitios activos, no es adecuada para productos termolbiles. Espesor de pelcula de las columnas capilares: 1. Pelcula muy delgada 0,10-0,15 micrones adecuada para compuestos de alto peso molecular y temperaturas de trabajo altas
bajo sangrado (bleeding)

rpidas, pero baja capacidad. 2. Pelcula estndar

0,22-0,32 micrones

buen compromiso entre resolucin y capacidad 3. Pelcula gruesa 0,5-1,0 micrones

recomendada para compuestos voltiles tiene mayor capacidad, pero es menos eficiente presenta mayor "sangrado"

60

Ecuacin de Golay (1957)

H =
'

+ (Cg + C ) u

(1)

B = 2 Dg trmino de la difusin molecular. 1 6k + 11 k , ri + vi2 9

+

?
^8

resistencia a la transferencia de n1353 en 1a fase gaseosa

r = L 3

k . f ,- + ,-,2 D,

r,^

resistencia a la transferencia de masa en la fase lquida

0JP

Para columnas de pelcula de fase lquida delgada:

CL cg
Luego: H = + Cg ' u u (4)

para columnas de pelcula gruesa:

L H = - + CT ' u L
(5)

La ecuacin de Golay desarrollada para columnas capilares es:

2Dg.

1 + 6k + 11 k2 . .u 24(1 + k) 2 g

2_ .

1_ . 2 (1+ k) DL

.u

61

Efecto del gas portador en el grfico de Van Deemter:

ojos* WCOT
E E
lA OV-IOI 25fti X 0 . 2 5 m m

UJ

* \ s -Y \\X

\> (3

Velocidad lineal media (cm/s)

Platos efectivos por segundo vs velocidad lineal media.

Clf ot!75C Gfoss WCGT

200
U OJ

25m X O.25mm

He

S
03

1 00

20

40

60

80

Velocidad lineal media (cm/s)

Dimetro de la columna y platos tericos: Di. (rom)

0,50 0,32 0,22 0,10 0,05

HETP (mm)
0,42 0,27 0,19 0,08 0,04

N/m 2.400 3.700 5.400 12.000 24.000

Condiciones para optimizar resolucin, capacidad o velocidad:

ALTA RESOLUCIN Espesor de pelcula lquida (micrones) Dimetro interno (mm) Longitud (m) Flujo (mL/min) Platos tericos Tiempo de anlisis (min)

ALTA CAPACIDAD

ANLISIS RPIDO

0,1 0,25 30-60 1 100.000 30-120

1,0 0,5 - 0.75 50-100 4 - 6 10.000-30.000 10-60

0,1 0,25 5-15 2 - 5 5.000-20.000 1-10

63

Separacin de aromticos con una columna SCOT

2
Conditions

10

12

14

16

Time (rnin 1. Column - SCOT CW-20m, 31na x O.Smm 2. Sample - 0. 3yl (Need ewer capillary columns)

Esquema de la instrumentacin capilar

INJECTOR SPLITTER

V A R I A B L E SPLIT IOOfT(l/min
FIO

CARR1ER GAS 5 IN PRESSURE CONTROL CAPILLARY COLUMN

PRESSURE GAUGE

64

Efecto de la temperatura:

75C

J
0

12

16

20

24

!2

12

1 10C

130C

2 4 6

8 10

0 2 4 6

Programacin de temperatura

CI2

Isotrmica

10

20

30

90 95 M!N

Ce

C17

ce

C19
C

UJ J
O 4 8

20

C21

temperatura programada
MIN

12

16

20

24

28

32

36

r,np. -i

m I LK:
~j

n,s,

1 1 1 " T " " " '" M * ?*mp or ,..,

s.i Bl
-

___^

"T

'"^r". psr- -!
Di.nelfijna

'-"i-.-ubeGR "j'ycerol Mallconnd f,v 3

50

00
/'Phtha.'ste i .,l Adipate He

^*neG,,:0l5!utarafeg D>e!r/,e~,e Glycol , SO Dietiylene Glycol Succinae -'DECS! 90 Di '2-r';;/;iexy!i Sebxe Oiet '!/.' D-T,-"tra;e Diglycerol Diisodcy! Pfitnalate Diisoc'y! "pbacate DimerAcid 2,4 Dimethylsulfolane DimenylsL'lfrjxide Dinonyi PMfialale Dncnyl Scbacale Diocty; Phthalite DioctylSefcacale Dowfax 9N3 Dowfax 9N40 EPONResin COI lhofat60 25 ' ^-'-'ycolAd.pate

hailCTlid ,'v: .;.5.Ci_ He.'Cufe 600 i n-Hcxaderar;. Hexddecene H K.h. MIX I ' f e3-:e!hyl p >.. sp!l . m 'de 'HMPA; " 2.5 He>anedio^c 'se ! p? cetonyi Acet;r!c; " "' Hyp r ose SP-gn 3iSh I IGEPAl fiony: P,^n.v,.
p ,

14

Pol>oyelhne.-eE"lh7'GEP.AL. CO 990 i 'soquiroline l'fiF Creas K e l F O . I -j KelFOil -10 WCl-R.296; S eeOEGADiethyene Glycol Adipolc: LAC 2 R-446 :DEGA cross-linked; , LC3.R. 7 2 8 ! s e e O E G l'O j%l%'J> Ethylene Glycoi Suc'-maie' Lcxan 'Polycafbonale rcsin Mannio|

25 25 20 175 175 150 50 50 175 125 175 100 225 225 225 140 75
00

3S4 G9
3S 344 3S4 3&4 3SJ 34 3

j ,

j Ncopentyl Glycol

E'iylene Glycol
'soph!hala!e ;fGIP tfiylene Glycil P|,ih3|s!e Eviene Glycol Glutarate I Ethylene Glycol Sebacate (EGSE)

v50 50 50 2>5

K^ Jfilh Isoph.halateNPGIP, "" I Jie|Penlyl Glyco! 1 Sebacaic NPGSF' eupentyl Giycol lccinae (NPGS; NonxlPhencl 3 .thni' Phena"ypolyoxy. 3 ettiylenetlhaiol 'ser IGEPAL) Nujcl 'Mineral Cil:

67

J.

MXIMUM TEMPERATURE, SOLVENTS AND POLARITY OF LIQUID PHASES

These are the mximum allowable temperatures for columns used with a thermal conductivity detector; a higher temperature will destroy the columns. However, the mximum usable temperatures for columns with ionization detectors may be as much as 100 C lower. ii

yx^ j e teiJ Jo
Sovent Code
1 Acetona 2 Qenzcne 3- -Chluroform Meth>lene Chlonde ", Ethy! Actate 6 Metnanol * Tcluent 8 Carbn Disulfide 9 Water h Hot

Polarity Code
N Non-polar P Polar H Hydro^en Bonding 1 Intermedate S Specific {lwi. J f j f f

^M(
Solvent

jia PIUSI

Reeommcnoed PolarM. Temp. C. II

Solvent

Llqulll nist

ReCQfntnsntlsd Polar Mil Tmp. " c. it>

/ .etonyl Acetone ;; .5 Hi'xanedione) Adiponitriie AlkattigeT Arninc 220 Apiezon H Apiezon J pp'tzon L piezort M Ap.ezort N ArmeenSO Armeen 120 Armeer, 2HT Arollor 1254 -Chiorinated Biphenyl! Asphalt Bentcne ,4 7.8 Benzoquinoline izyl Cellusolve Btnzyl Cyanide 'Pnenyl Acetonitrilel Benzyl Cyande Silver Nitral

25 50 75

P, 1 1 1
P

1 3&4

Bis (2-Etdylhexyl Tetrachlorophthalate) Bis 2-Mefhoxy Ethyl ArJipae Bis (2(2 Methoxyethoxy) Ethyl) Eiher Butanedic! Adipate

150 150

1
4

W1

275 300 303 275 300 100 100 00 125 330 2CO 150 30

N N N N N
H,P
11, P

3S4 3
3(44

50

H, P

3&4 344 3&4 3&4 3 3 3&4 3&4 4 3&4 3S4 3&4

225 225 Butanediol Succinate Carbowax 20M 250 Carbowax 20M TPA 250 Carbowax 300 100 Carbowax 400 25 Carbowax 400 Monooleafe 125 Carbowax 550 125 Carbowax 600 12S
Carbowax 600 Mcnostearate Carbowax Carbowax Carbowax Car-owa 750 JOCO 1500 1540

? \,f
!, P

3S4
-l

F P P P P P P P P P P P P P P

3&4 354 4&6 364 3&4 3&4 3S4 344

3h&4h

N S 1 1 1 S 1 1

35

25 50 Benzyl Ether Bis 12-Ethoxyethyl) Wipate 150

4 3&4 4

Carbowax -1000 Carbowax 4000 TPA Carbowax 4000 Monastearate

125 153 175 200 2CO ?00 75 220

3S4 344 3S4 384 344 4&6

J.

MXIMUM TEMPFRATURE, SOLVENTS AND POLARITY OF LIQULD PHASES

T. -i

I3X

These are the mximum allowable temperatures for columns used with a thermal conductivity detector; a higher temperaturc \vill destroy the oolumns. However, the mximum usable temperatures for colunuis with ionization detectors may be- as much as 100 C lower.
Solvent Cade 1 Acetone 1 Biruene 3 Chtoroform

4 Methyient' Chtoride Ehy! Au-tate 6- Methano! 7 To'uene

S O.rbon Oisulfidc '! Water . Hot

FIGURE V-16SEPAPATiON Of OXYGEN-N1TROGEN MIXTURE ON MOLECULAR SIEVE 5A and 13X

Figure TV-17 shows a typical example of a series column system in the analysis of a mixture of gases. The first column, a 20 inch silica gel isinstalled in the column oven and held at!00C. Thesecondcolumn, a20foot, 10% Molecular Sieve 5A - 90% Molecular Sieve 13X is connected externally from the sensing side of the T.C. detector to the reference side of the detector. This system permits complete analysis for a single sample injection.

Polarity Code N Non-polar P PUJ.T. H - Hydrogen Bondmg

1 Intermedate S Specsfic

Uquiti Ttast

Kcca nmefidc Pc^arMal. Temp. > 6. ty

Sol-

yent

Liquid PhasB

Mi. Temp. C.

Polarity

Solvnt

CH4

UU
O * 12

Acetonyl Acetone !2,5Hesanedone) Adiponitre Alkaterge T Amine 220 Apiezon H Apiezon J Apiezon L Apiezon M Apiezon N Armeen SO Armeen 12D Armeen 2HI Aroclor 1254 (Chlorinated Biphenyl) Asphalt Bentone 34 7,8 Benzoquinoline Benzyl Cellosolve Benzyl Cyanide (Phenyl Acetonirile) Benzyl Cyanide Silver Nitrate Benzyl Ether Bis !2-Ethoxyethyl) Adipate

25
50 75

P, 1

1
344

1 P N

344h
3S4

180 2/5

300 300 275 300 100 100 100 125 300 200 150 50

N N N N
H, P

H,P
H, P

3&4 3S4 3&4 3&4 344 3 3 3&4 344 4 344 344 344

1 N S 1 1 1 S 1 I

35 25 50 150

4 344 4

Bis (2-Ethylhexyl Tetrachlcrcphthaiate! 150 Bis 2-Methoxy Ethyl Adipate !50 Bis (2!2 Metnoxyethoxy) Ethyl) Ether 50 Butanediol Adipate 225 Butanedio! Succinate 225 Caibowax 20M 250 Carbowax 20M TPA 250 Carbowax 300 100 Carbowax 400 125 Caibowax 400 Monoolea'e 125 Carbowax 550 125 Csrbowax 600 125 Carbowax 600 Monostearate 125 Carbowax 750 150 Carbowax 1000 175 Csrbowax 500 200 Carbowax 1540 200 Carbowax 4000 200 Carbowax 4000 TPA 175 Carbowax 4000 Monostearate 220

1 1 P
I,P I,P P

3?,4

P P P P P P P P P P P p P P

344 344 344 344 445 344 344 344 344 344
3h44h 344 344 344 344 344 446

FIGURE IV-17A TYPiCAL SERIES CCLUMN SYSTEM

-70-

-71-

Stationary Phases or Gas C

\

fet _a)ia A#JL\ta>lo)u*W' 4aW>U ' Ia* ^ WW'MA. oLJjfrw

Description Same
Same 100% Methy! Silicone Gum 100% Methyl Silicone Gum 99% Methyl 1 % Vinyl Gum 100% Methyl Silicone Fluid 100% Methyl Silicone Fluid OV-101, SP2100 DC-200, SP2100
OV-1

Tirad* ames
Squalane Apiezon M SE-30-Otf-l ^OV- tt^UM UCW-982 DC-200 OV-101

Temp. Limil Equivalen! Phases Min./Max. C

20/100 50/300 50/300 100/350 0/300 0/250 0/350 0/350 50/300 50/450 0/375 0/350 0/200

" I- ! l^ | - McReynolSs ConstatsS $$ A B C D E *' ! f

T

' i MP'

? _

0 32 15 16 16 16 16 17 32 47 119 178 176

0
22 53 55 55 57 57 57 72 80
158 204 227 233 238 381 369 536 537 495 580 607 751 757 787 857

0
32
64

0
4? 41

0
143 217 222 224

15 44

SE-30

44

65 66 66 67 67
148

42

45

42

1
45 43

227 229 229 267 474 884

45

43

SE 52 (or SE-54) DexsiISOO ^\Axt4\(t'u^P -\ fifcM' ^'uccJcb V^ V-17 OV-25

OV-101, DC-200 100% Methyl Silicone Fluid 5% Phenyl \ /l4 WUJHfl. OV-73 Carborane/Methyl Silicone 50% Phenyl -Methyl Silicone 75% Pheny! Methyl Silicone PS-300 SP-2250, DC-710

45 65
103 162 208 224 355 358 340 338 368 367 446 397 418 593 659 643

43 98
96

243

202

p<tei .

305

280 1175

Polyphenyl Ether SameKU Aro ). V / 5-Ring / 50% 3,3,3-Trifijoropropyl 'v3F-1 fc$t*U*kw CU- V"rVQ F^ *\ ttvtiitt. | i UcruwS (fdos -'OV-210 XE-60
J

306

283 1216

i
.
!

i
:

SP-2401, OV-202, OV-210 SP-2401, OV-202, QF-1 OV-225, AN-600 XE-60, AN-600

0/250 0/275 0/250 0/265 60/225 60/250

144 146 204 228 322 321 319 340

463

305 1500
/

50% 3,3,3-Trifluoropropyl 25% 2-Cyanoethyl 25% Cyanopropyl Polyethylene Glycol Polyethylene Glycol (Modified with Terephthalic Acid) uA/MuDVUu/i/ux Free Fatty Acid Phase Polyethylene Glycol Diethylene Glycol Succinate 100% Cyanopropyl Silicone Ethylene Glycol Succinate 1 ,2,3-Tns(2-Cyanoethoxy) Propane Same Same Same

468

310 1520

493 492 572

367 1785 386 1813 510 2308

X/QV-225 ///Carbowax 20M Cartiowax 20M

/TPA

'
573 520 2318

Silar 5CP FFAP

SP-2300, CS-5 SP-1000, OV-351, AT-1000

0/250 50/250

637 602

531 2428 627 2546 589 2587 860 3543 801 3582 889 3759

/
^Carbowax 1500 '/ // t/J DEGS nOM^ H^aMiA\ HTSK>vJUi Silar 10C v^qi\aw<i, *
EGS

40/200 20/200 347 499 523 537

626 840 942 942

SP-2340, CS-10

0/250 100/200 0/125 0/125

0/75

TCEP Bis-(2-Cyanoethyl) Formamide Sebacomtnie Bis-(2-Methoxyethyl) Adipate

'. . 593
690

752 1028

. _J 915 4145

991 853 1110 1000 4644

Not Available
1

20/100

Not Available

(A) Benzene, (B) n-Butanol, (C) 2-Pentanone, (D) Nitropropane, (E) Pyridine

75

where: Wjj - weight of component b Wa = weight of standard a Aa = measured rea of standard a A>D - measured rea of component b Fk = correction f actor ofcompound "b" reative to compound "a"atequalweights. The responso of aFIDis inaependent of temperature, carrier gas, and flow rate. This raakes it well suitcd, possibly the best detector, or quantitative analysis. For weight percent calculitions, Tablo VIT-2canbeused. Divide the peak rea by relative sensitivity, then normalize vales to get weight percent. An excellent reference for response factors forbothflame ionizaticn and thermalconductivity detectors is the articie by Dieta* J) .
TABLE VII-2-FIO RELATIVE SENSITIVITIES (

TABLE VII-2FID RELATIVE SENSITIVITIES (cont/' J i

COMPOUND

SF

R EL ATIVE 1 I
SSITIVITY

COMPOUND

SFJi

Ri:LATIVE
0.01 0.24 0.40 0.48 0.63 0. (il 0.65
0. 20 0.38 0.49 0. 52 U. 54 0. 55 0.62 0.03 0. 72 0.7-H 0. 50

| Aromatics (cunt. ) ! 1,2,4-Trirnethylbenzene 0.97 1,3,5-Trimethylbenzene 0. 98 Isopropylben/.ene 0. 97 n-Propylbenzenc 1.01 lM2-Isopropylbenzenu 0.99 ! lM3-Isopropyl1 ben/.ene l.ul lM4-Isopropylbenzcne 0.99 sec. -Butylben/ene 1 . 00 tert. -Butyibenzene -.1.02 n-Butylbenzene V-W Unsaturates Acetylene Ethylene Hexene-1 Octene-l De^ene-1 ! Alcohola ! Methanol i Ethanol n-Pi'Opanol Isopropanol n-Butanol Isobutanol sec. -Butanol tert. -Butanol Amyl alcohol Methylsobutylcarbinol Methylamyl alcohol Hexvl alcohol octyl alcohol Decyi alcohol
1.07 1.02 0.99 1.03 1.01 0.23 0.46 0.60 0.53 0. 66 0.68 0.63 0.74 0.71
0. 74 0.65 0. 74 0. 85 0.84

1 1 Acjds For me Acetic Propionic Butyric 1 Hexanoic | leptanoic Octanoic

jsrnvrrv

COMPOUND
Normil Piriff ins Methane Ethane Propano l Butane Pentane Hcxane Heptane Octane Nonane

sSsvirVi
0.97 0.97 0.98 1,09 1.04 1.03 1.00 0.97 0.98

COMPOUND

RELATIVE
3ENSmviTY

i ] Aldehvdes (conuj ! Octaldehyde Capric aldehyde

Arotnatics Benene Toluene Ethylbenzene para-Xylene meta-Xylene ortho-Xylene TM2-Ethylbenzene l'.TS-Ethylbenxene lM4~Ethylberenu 1,2,3-Trlmethylbenzene

I i i 1 1

tsters RlethylneeUite EthylaceUle Isopropyl acetato sec. -Butylacetate Isobutylaeetate n-Butylacetatc Isoamylacetate ! Muthyiamylacetate Ethyl-(2)ethylhexaiiorit e lexylcaproate Cellosolve actate i Nitrogen Compounds Acetonitrile Trimethylamine tert. -Butylamine | Diethylamne j Anitine , di-n-Butylamine Ketones Acetone Methylethylketone Methylisobutylketone Ethylbutyl-ketone Dlsobutylketone Ethylamylketon! Cyclohexanone

1 i I i

0. 78 0.80 1. 12 1.07 1.03 1.00 1.04

0.39 .4G 0.54 0.6 1 0.75 0.75 0.49 G.61

Aldohydes O.G2 Uutyraidehyde leptanoic aldehyde 0. 77

1.02 1.02 1.01 1.00 0.98

0.71 0.71 0.72 0.80 0.72

-142-143-

TABLE VU-3-T.C. WEGHT FACTORS 1 "

TABLE VII-3 T.C. W E I G H T FACTORS' "(cont)

COMPOUND Normal Paralns Methane Ethane Propane Butane Pentane Hexane Heptane Octane Nonane Decane Undecane Tetradecane C20toC36

WEIGHT FACTOR 0.45 0. 68 0- 68 0. 69 0. 70 0.70 0.71 0.72 0.71 0. 85 0.72

COMPOUND Unsaturates EUiylene Propylene Isobutylene Butene-1 trans-Butene-2 cis-Butene-2 3-Mcthylbutene-l 2-Methylbutene-l Pentene-1

WEIGHT FACTOR 0. 585 0. 652 0.683 0.697 0.658 0.643 0.707 0.707 0.710

COMPOUND Aromtica (cont.^ 1,2,3-Trimethylbenzene p-Ethyltoluene 1.3,5-TrimethyIbenzene

WEIGHT FACTOR 0.806 0. 800 0. SOS

COMPOUND

WEIGHT FACTOR

Hetero ronnpounds_Jcont. ) Propylcne oxide 0. 730 Hydrogen sulfide 0. 890 Methyl mercaptan 0.810 Ethyl mercaptan 1 -Propane thiol Tetrahydrofuran Thiophane (cyclic sulfide) Ethyl silicate Acetaldehyde Cellosolve 0.713 0.750 . 870 0. 855 0. 995 0, 680 o. 840

sec.-Butylbenzene 0. 847 Biphenyl o. 912 1 , 2-Diphenylbenzenel. OSO 1 , 3 -Diphenyl benzene 1. 00 1, 4-Diphenylbenzenel. 03 Triphenylmethane 1.05 Naphthalene Tctralin 1 -Methyltetralin 1-Ethyltetralin trans-Decalin cis-Decalia o. 923 0.910 0. 927 0.944 0.920 0.913

trans-Pentene-2 0.673 cis-Pentene-2 0.710 2 -Methypentene -2 0 , 7 29 2,4, 4-Trimethylpentene-1 0. 71 Propadiene 0.76 1,3-Butadiene 0.674 Cyclopentadiene 0. 97 Isoprene 0. 738 1-Methylcyclohex- 0.837 ene Methylacetylene 0.69 Dicyclopentadiene 1.73 4-Vinylcyclohexane 0. 83 Cyclopentene Aromtica Benzene Toluene Ethylbcnzene meta-Xylene para-Xylene ortho-Xylene Isopropylbenzeae n-Propylbenzene 1,2, 4-Trlmefhylbenzene 0. 844 , 0-780 0. 794 0. 822 0. 812 0. 812 0. 840 0. 847 0. 828 0.800

Branched Paraffins Isobutane Isopentane Neopentane

0. To 0. 707 0.727

2,2-Dimethylbutane 0.741 2,3-Dimethylbutane 0.741 2-Methylpentane 0. 714 3-Methylpentane 0.725 2, 2-Dlmethylketone 0.752 2, 4-DimethylpentaneO. 775 2, 3-DimethylpentaneO. 741 3, 5-Dimethylpentap.eO. 750 2,2, 3-Trlmethylbutace 0.775 2-Methylhexane 3-Methylhexane 3-Ethylpentane 2,2,4-TTlmethylpentane 0.735 0.752 0. 763 0. 775

Inorganic Compounds .'-ron 0.95 Nitrogen 0. 67 Oxygen o. 80

Nitro pen Compounds n-Butyamine n-Penylamine Pyrrole Pyrroline Pyrrolidine Pyridine 1,2,5,6-letrahydropyridine Piperidine Acryloaitrile Propionitrile n-Butyronitre Aniline Quinoline tr ans -De cahy dr o qu incline cis-Deeahydroqu incline Ammonia

0.64 0.57 0. 78 o. 83 0. 78 0.79 0.81 0. 83 0. 68 0. 65 0.66 o. 82 0. 67 1.19 1.19 o. 42

|
|

Carbn di oxide 0.915 Carbn monoxide 0. 67 Carbn tetraciiloridel.43 Iron carbonyl (Fe(C05)) Hydrogen sulfide Water 1.30 0. 89 o. 55

Hetero Compounds Pyrrole Hexylamine Ethylene oxide

0. 780 0. 970 0. 758

-146-

-147-

TABLE VM-3T.C. WEIGHT FACTORS"(cont.)

3,

COM'OUND

WEIGHT FACTOR

COMPOUND

WEIGHT FACTOR

Oxygenated Compounds K^tones Acetona 0. 68 Methyl ethy! ketone 0. 74 Dtethyl ketone 0. 78 (3-pentanone) 3-Hexanone 0. 81 2-Hexanone 0.77 3, 3-Dmethylbuta- 0,97 nono -2 Methyl -n-amylke- 0. 86 tone Methyl -n-hexylke- 0.87 tone Cyclopentanone 0. 79 Cyclohexanone 0.785 2-Nonanone 0. 84 Methyl isobutyl ke - 0. 86 tone Methyl isoamyl ke- 0. 83 tone Alcohola Methanol Ethanol 0. 58 0. 64

Oxygenaied Compounds (cont. ) Alcohola (conf. ) n -Hexanol 0. 87 3-Hexanol .80 2 -Hexanol 0.77 n-Heptanol Decanol-5 Dodecanol-2 Cyclopentanol Cyclohexanol Aceta teg Ethyl actate Isopropyl actate n-Butyl actate n-Amyl actate Iso-Amyl actate n-Heptyl actate Ethers Dlethyl ether Diisopropyl ether Di-n-propyl ether 0. 91 0.86 0.93 0.79 0. 89

Absoluta Calibration Exact amounts of the pur sample are injecled. The vales of the peak reas are then plotted against the known weight injected. 'l'his is a calibraion curve; it shoulcl be linear andpassthrough the origin (no sample, no responso). An exact amount of the unknown is now injected. Thepeak rea s measured and from the calibration curve the amount of sample present in the unknown is calculated.
Wt.

rea (A) (gms/area) (gm injected)

100

0. 79 0.84 0. 86 0.89 0.90 0.93

0. 67 0. 79 0. 78
Weight of Component FIGURE VII-3-ABSOLUTE CALIBRATION

n-Propanol
Isopropanol n-Butanol laobutanol

0.72
0.71 0.78 0. 77

Ethyl -n-butyl ether 0.79 Dl-n-butyl ether 0. 81 Di-n-amyl ether 0. 86 Piole 2, 5-Hexanediol 1,6-Hexanedlol 1, 10-Decanedlol

sec-3uianol 0. 76 tert-Butanol 0^77 8-Methylpentanol-l 0.80 2-Pentoaol 0. 80 3-Pentanol 0. 81 2-Methyl-2-butanol 0.83

0.93 0.98 1. 62

1,12-Decanedtol 1.58 C^4 Mol (from seo. 1. 80 C14 alcohol)

Peak heights, in additionto peak reas, may also be employed. Disadvaiitages ofdirectcalibration are that the precise amount of sample injected must be known and that calibration is time consuming. Also, he sensitivity' of the detector must remain constant from run to run and day to day in orderto compare resulta withthe calibration graph.

-149-148-

SQUALANE
CH, CH, CH, CH,

HC- (CH,),CH (CH,),CH (CH t ) 4 -CH (CH,),CH (CH,),CH

CH, CH, CH, CH,

NON-POLAR (xRI=0) SATURATED: .HIGHLY BRANCHED, C-30 HYDROCARBON; USED MAINLY FOR HYDROCARBON SEPARATIONS.

0-125C

OV-1 OR SE-30 OR SP-2100

CH3

CH3

(-Si-0-Si-0) n
^
o

1*11 \JLI -3

DI-2ETHYLPOLYS ILOXA.ME FJON--POLAR (5%) 100 - 350C MOST WIDELY USED LIQUID PHASE ALL SAMPLE TYPES

.
1. Ph*M Rallo (fl

Chromatographic Equations
S. HETP (Height Equhr*!nt of a Thortlcsi Ptat)
L = Cotumn Length

a s i of Theoretical Plates
2df

r = df =

column inslde radius (mm) stationary phase film thckness (un)

Typical p vaues for caplary columns are 50 to 30

2. Distrfbutlon Coefflctont (KD)

K0 = k/>
k = Partition ratio 0 = Phass ratio

U *
3. Coatina Efflclency (UTE) % Coatlng Effclency = A Is the Eddy diffusion term B is the term represanting longitudinal band broadenlng C !s the so called reslstance to mass transfer U is the average linear gas veloclty of the carrier gas

(^L
Vtheo

xioo

exp = Number of plates (observad) tNERTNESS (Calculatlon for HP Fusad Sllica Caplilary Columns, B/A ratio). Base/Acld ratio =
:

theo ~ Number of theoretlcal plates

4. Efflclency (n theoretlcal plates)

Height of Decylamine peak Height of 4-Chlorophenol peak

:
.-

n = 5.545 IR t- Retentlon time of peak of

OR
n = 16

interest Wh = Width at 1/2 height of peak of interest WD - Width at baseiine of peak of interest

6. Partitlon Ratio (k, capaclty ratio)

k =
Standard Equations

tR-t m

tm

m
Soluta

Equation used with HP 5830A GC Instruments

n = 5.545

width
Slart

Width reported by HP 3388A

n = 5.545
Equaion used wlth HP 339X Integrators

tR
0.939 x AR

Inert Gas

HT
AR/HT reported by HP 339X Integrators

Time

149

Ciiromatograpiic tsquations (Uont.)

7. Retenon Index (Rl) 9. Trannzahl (TZ)

Rl = lOOn 4- 100

[log t' (aubstance)- log t'R (n)). [log t'R (N) - log t'R (n)]

TZ =

(x

h (x + 1) + Wh (x)

where n and N are the smaller and largar n-paraffins, respectively, which bracket the substance. When using linear temperatura programming, R!s can be calculated by replacing the logarithms of the net retention times vvith the actual retention times. This gves Equation 2:

Wn = Width at 1/2 height

or

TZ =

1.177

R = Resolution number (substance) - tpj (n)]

or

Rl = 100n + 100
~ (tR(N) - tR{n)J

TZ =

100

ARI

"1

Rl - Retentlon ndex B. Resclution (R) 10. Talllng Factor (TF, Symmetry Factor)
R =
1)w b (x) b (x + 1)

Wb = width at baseline
or

R =
1.699 (W h(x
Wn(x)]

= width at 1/2 height

or

R = 1.177TZ + 1.177 TZ = Trennzahl If R = 1, the separation of two peaks is 98% If R = 1.5, the separation of two peaks is 99.7%

150