UNIVERSIDAD TECNOLGICA DE MORELIA

INGENIERIA EN QUMICO AREA BIOTECNOLOGA PRACTICA N3 OPTIMIZACIN DE LA FUENTE DE NITRGENO PARA LA PRODUCCIN DE BIOMASA (SACCHAROMYCES CEREVISIAE) Y CONSUMO DE AZCAR

ELABORADO POR: JOSE CRISTIAN ALEJO GARCIA LUIS ANGEL GARCIA NAMBO RAL GONZLEZ NAMBO DANIEL ROMERO SOTO

ASIGNATURA: INGENIERIA DE LA FERMENTACION

PROFESOR: D.C. DAVID GARCIA HERNANDEZ

MORELIA, MICHOACN, 14 DE MARZO DEL 2014

INTRODUCCIN En general, las condiciones de cultivo son tradicionalmente optimizadas por las estrategias de una variable a la vez, es decir, cambiando un factor mientras se mantiene constante los otros. Aunque esta estrategia es sencilla y no exige aplicar un anlisis estadstico, requiere un gran nmero de experimentos y la interaccin entre factores es ignorada. En contraste, los diseos experimentales basados en las estadsticas son aproximaciones ms eficientes que pueden llevarse a cabo con un gran nmero de

variables simultneamente; adems se puede estimar la interaccin entre variables. Actualmente, esta tcnica ha sido ampliamente usada por diferentes investigadores para optimizar los componentes de un medio de cultivo, ya que es una herramienta eficiente que permite el desarrollo de modelos matemticos empricos. ( Masetto et al., 2001; Joo et al., 2002). Los gongos han sido utilizados desde la antigedad, siendo quizs el ejemplo ms registrado el dela produccin de etanol. En los ltimos aos un gnero particular de levaduras. Nombrado saccharomyces, ha desempeado un papel fundamental en la explotacin comercial de estos microorganismos.
Camacho Ruiz Leonardo, Prez Guerra Nelson Ferro Nieto Alyn . Tecnologa Qumica vol. XXI, No. 1 2001

El azcar, un carbohidrato cristalino, comestible y soluble en agua, es esencial para la produccin de energa en todos los seres vivos. Aunque se asocia ms comnmente con la sacarosa que se encuentra en los alimentos de sabor dulce, el azcar tambin se encuentra en la mayora de las frutas (fructosa) y en casi todos los

aperitivos, alimentos procesados o bebidas con sabor como el jarabe de maz de alta fructosa. A nivel qumico, un azcar se considera "reductora" si reduce un agente oxidante dentro de una reaccin qumica, mientras que las que no reducen la oxidacin se llaman "no reductoras"

OBJETIVO: Es conocer la fuente de nitrgeno ms ptima biomasa (saccharomyces cerevisiae) y consumo de azcar.

para la produccin de

MATERIAL Y REACTIVOS Cantidad 10 Material Matraces Erlenmeyer 125 ml 3 3 3 Probetas 100ml Esptulas Vasos pp 250ml Extracto de carne Glucosa Balanza analtica Autoclave Campana de flujo laminar 15 Tubos de ensaye Agitadora Reactivos Peptona de carne Equipo Potencimetro

con tapn de rosca 5 1 Pipetas 10ml Micropipetas de 1 ml 20 Puntas de 1 ml Refrigerador

Metodologa Preparar 55 ml de medio lquido de acuerdo a la siguiente composicin (g/L) Glucosa %; Peptona de carne: 0, 2.5 y 5.0

Extracto de carne: o, 1.5, 3.0, (Por duplicado).

Meter a esterilizar todo el material en auto clave bajo las condiciones de operacin ya conocida (15 min / 1 atm / 121 C)

Una vez preparados los medios colocar en un tubo de ensaye con tapn de rosca 5 ml de cada uno de los medios antes mencionados

Una vez esterilizados y enfriados los medios inocular 50 mg de levadura y homogenizar el cultivo.

Tomar 5 ml del medio inoculado con micropipeta y colocarlo en un tubo de ensaye estril.

Realizar las lecturas del crecimiento de la levadura y de la produccin de etanol por espectrofotometra UVvisible.

Colocar los materiales inoculados en una agitadora a 100 rpm / 48 h.

RESULTADOS
Determinacion Biomasa a base de una Fuente de Nitrogeno (Peptona)
2.5

ABSORVANCIA

2
1.5 1 concentracion 1 concentracio 2.5 concentracion 5 control

0.5
0 Tiempo Tiempo Tiempo Tiempo Tiempo "0" "12" "24" "36" "48"

Grafico 1.- Determinacin de Biomasa con base a una fuente de nitrgeno (peptona) la cual fue evaluada en diferentes horas.

Determinacion Biomasa a base de una Fuente de Nitrogeno (Extracto de carne)

2.5

ABSORVANCIA

2 1.5 1 control (glucosa) 0.5 0 Tiempo Tiempo Tiempo Tiempo Tiempo "0" "12" "24" "36" "48" concnetracion 1.5 concentracion 3

Grafico 2.- Determinacin de Biomasa con base a una fuente de nitrgeno (Extracto de carne) la cual fue evaluada en diferentes horas.

Conclusin 1.- En la determinacin de biomasa utilizando diferentes concentraciones de la fuente de Nitrgeno que en este casi fueron de 1, 2.5 y 5% de peptona de carne se observa en la grfica que en la concentracin 1% se mantiene una mayor concentracin de biomasa a las 24 horas y 48 horas pero su crecimiento no es constante ya que es irregular, en cambio la concentracin que se mantiene de forma ascendente y constante conforme al tiempo es la de peptona al 5% esto haciendo la comparativa con el control que fue de glucosa al 2.5%. NOTA: A las 48 hrs no hay una lectura del control de glucosa debido a que se extravi la muestra en el laboratorio. En cuanto al diferentes concentraciones de la fuente de Nitrgeno de extracto de carne 1.5 y 3% las dos concentraciones desde el Tiempo 0 van de forma ascendente y con valores muy perecidos y regulares esto en base con el control y dentro de las 24 horas, ya en las 36 horas su crecimiento no es constante. Nota: A las 48 horas los valores de la concentracin de extracto de carne al 3% no se conoce debido al extravi de muestra.

DNS (PEPTONA)
concentracion 1% concnetracion 2.5% 2.435 2.4793 2.421

0.6763 0.3884 0.0554 tiempo 0

2.3948 2.3004 2.0522 2.3986 2.4013 0.2737 0.3051 0.6763 0.2041 0.073 0.0817 0.0777 0.0139 0.0128
tiempo 24 tiempo 36 tiempo 48

tiempo 12

Grafico 3.- Determinacin de Fuente de Nitrgeno (Peptona) por el mtodo DNS (Extracto de carne) la cual fue evaluada en diferentes horas.

DNS (EXTRACTO DE CARNE)

concetracion 1.5% 2.4419 concentracion 3% 2.4025 2.4013 1.0279 0.6763 control (glucosa 2.5%) 2.4645 2.3004 2.427 2.0522

0.6763 0.2557 0.2005 tiempo 12

0.231 tiempo 24

0.2541

0.1673
tiempo 48

tiempo 0

tiempo 36

Grafico 3.- Determinacin de Fuente de Nitrgeno (Extracto de carne) por el mtodo DNS (Extracto de carne) la cual fue evaluada en diferentes horas.

Conclusin 2.- Este mtodo nos ayuda a hidrolizar molculas de glucosa con ayuda del cido dinitrosaliclico y asi poder determinar molculas de nitrgeno que es lo queremos determinar para saber que fuente de nitrgeno es el ptimo para la produccin de biomasa en la peptona como sabemos es un medio de cultivo rico en nitrgeno y en la grfica se demuestra que en sus tres concentraciones de 1, 2.5 y 5%. La concentracin que mantuvo un mayor rendimiento y regularidad es de 5% ya que hasta las 24 horas se mantuvo de manera ascendente y constante. Y de las 36 horas en adelante se detuvo su concentracin. En cuanto se refiere al extracto de carne se puede determinar que la concentra que tuvo un mayor rendimiento fue la concentracin de 1.5% en ls tiempos de 36 y 48 horas pero su crecimiento fue muy disperso.

Conclusin General: Como sabemos una de las requisiciones de la biomasa es que sea rica en nutrientes en la pasada practica determinamos que fuente de carbono era el ptimo para la produccin de la misma la cual era la glucosa a comparacin de la melaza, ahora determinamos que fuente de nitrgeno es la ptima para la produccin de biomasa la cual al hacer la comparativa de peptona con extracto de carne notamos que las dos contienen altas cantidades de nitrgeno pero al determinar por medio de DNS se observ que la concentracin ptima para produccin de biomasa es de 5% de Peptona.

Bibliografa
( Masetto et al., 2001; Joo et al., 2002). Camacho Ruiz Leonardo, Prez Guerra Nelson Ferro Nieto Alyn . Tecnologa Quimica vol. XXI, No. 1 2001 http://www.ehowenespanol.com/diferencias-azucares-reductores-reductores-lista_122326/