I.

Factores para controlar el crecimiento de organismos a. Razn; i. ii. Prevenir transmisin de enfermedades Evitar contaminacin

b. Trminos importantes: i. Esterilizacin: Destruir toda forma de vida ii. Agente anti-microbial: Compuesto qumico que mata o interfiere con el crecimiento y actividad de microorganismos. 1. Germicida: Agente qumico que mata los microorganismos pero no las esporas 2. Agente microbiosttico: Inhibe el crecimiento pero no mata las bacterias 3. Desinfectante: Mata microorganismos pero no inactive las esporas. 4. Antisptico: Desinfectante que puede ser usado sobre tejido orgnico c. Factores que influyen en que un agente qumico o fsico afecten los microorganismos i. Concentracin del agente qumico: Mientras ms concentrado ms rpido se destruyen los microorganismos. ii. Intensidad del agente fsico: Cuanto ms intenso ms rpido destruye a los microorganismos. iii. Tiempo de exposicin: Mayor tiempo de exposicin, significa mayor cantidad de microorganismos muertos. iv. Temperatura: Mayor temperatura destruya ms microorganismos.

v.

Numero de organismos: Mientras mayor sea el nmero de organismos, ms tiempo requiere destruirlos. (Relacin inversamente proporcional con el tiempo de exposicin)

vi.

Clase de organismo: La susceptibilidad de las bacterias dependen de su estado metablico, ya que las que estn activas son ms susceptibles que las esporas.

vii.

Estado fisiolgico de las clulas: Mientras ms viejas ms rpido se destruyen.

viii. Naturaleza del medio ambiente: Algunos ambientes como los ambientes viscosos desfavorecen la destruccin rpida de los microorganismos. d. Factores fsicos para el control de microorganismos: i. Temperatura: La temperatura es importante para el crecimiento de los organismos, cuando est por encima de la temperatura ptima, mayor es la velocidad de muerte de los microorganismos. a. Las temperaturas altas se usan para el control de microorganismos. b. El calor hmedo es ms eficiente ya que coagula las protenas celulares. c. El calor seco destruye la clula por oxidacin de agente qumicos en la clula. e. Formas de aplicacin de calor hmedo: i. Vapor a presin: Vapor saturado debido a alta presin, es el mtodo de esterilizacin mas practico y seguro. El autoclave es el equipo que se utiliza para la aplicacin de la misma. a. Se utiliza para esterilizar sustancias y cristalera.

b. Se aplica a temperatura de 121C durante 15 minutos con 20 libras de presin. c. No se debe esterilizar en el autoclave productos como grasas o aceites. ii. Tindalizacin o esterilizacin fraccionada: Se usa en sustancias que no pueden calentarse a temperaturas mayor de 100C para evitar un cambio en composicin. a. Se calienta el material a 100C tres das consecutivos con periodos de incubacin entre ellos. b. Las esporas germinan en los periodos de enfriamiento para luego ser destruidas al subir la temperatura a 100C. iii. Agua Hirviendo: Los materiales contaminados que se tratan con agua hirviendo no quedan esterilizados, slo desinfectados. iv. Pasteurizacin: Proceso de tratamiento con calor por debajo de los 100C. a. Louis Pasteur. b. Puede ser a 63C por 30 minutos, 71C por 15 segundos o 141 C por 2 segundos. c. No destruye todos los organismos. f. Formas de aplicacin de calor seco: i. Horno Convencional: Usado en la aplicacin de calor seco y para que los materiales no queden humedecidos por vapor. ii. Incineracin: Destruye los microorganismos, se usa para esterilizar las agujas de inocular y otros materiales. a. Una forma de destruir cadveres.

b. Las temperaturas bajas no desnaturalizan las protenas. c. Temperaturas bajas hacen que la reproduccin de los microorganismos se detenga. d. Temperaturas bajas son microbiostaticas e. Temperaturas altas son microbicidas iii. Desecacin: Falta de agua detiene el metabolismo de los microorganismos a. Se logra evaporando el agua presente con aire caliente. b. Esta tcnica tiene un efecto microbiostatico ya que las seca pero no las destruye. (Detiene el crecimiento bacterial) c. Cuando se secan y luego se congelan el proceso se llama liofilizacin. iv. Presin Osmtica: Una cantidad de presin osmtica externa alta puede hacer que el organismo muera. g. Radiacin: Ciertas formas de radiacin destruyen microorganismos. i. Radiacin ionizante: Tienen gran poder de penetracin y matan formando iones txicos. ii. Luz Ultravioleta: No tiene poder de penetracin, mata microorganismos en las superficies. a. Forma dmeros de timina en el DNA. b. Se utiliza para esterilizar; i. Salas de hospitales ii. Cuartos aspticos iii. Superficies contaminadas

h. Ondas ultrasnicas (Alta frecuencia): Microorganismos sometidos a ondas ultrasnicas de altas intensidades durante cierto tiempo pierden la pared celular y mueren. i. Filtracin: Se emplea para esterilizar lquidos o soluciones que pueden ser afectadas si se someten a calor. Se usan filtros con poros con un dimetro de .2 micras, retiene las bacterias pero no los virus. j. Factores qumicos para el control de microorganismos: i. El fenol y sus derivados: Se adhiere a superficies inertes y proporciona lo que se llama una desinfeccin residual. Pueden actuar como microbicidas o microbiostticos dependiendo de la concentracin que se utilice. 1. Poseen efecto germicida pues daan la membrana y desnaturalizan las protenas bacteriales. k. Los alcoholes: Daan la membrana, desnaturalizan las protenas, disuelven lpidos y deshidratan la clula, concentracin ms efectiva de alcohol es el 70%. l. Halgenos: Oxidan protenas y enzimas esenciales, no matan esporas. i. Cloro: Desinfectante ms usado, limpia aguas contaminadas y se aplica en agua potable. ii. Iodo: Se utiliza como antisptico, microbicida para mayora de organismos. m. Metales pesados y sus compuestos: La accin antimicrobial proviene de la combinacin de iones metlicos con protenas y enzimas de microorganismos, daando as la clula. i. Compuesto de mercurio: Grupos orgnicos, todos antispticos y principalmente microbiostaticos. 1. Mercurocromo 2. Metiolato 3. Metafen

ii. Compuestos de plata: Nitrato de plata al 1% , se usa en ojos de recin nacidos. iii. Compuesto de cobre: Controlar el crecimiento de algas en las piscinas. n. Tintes: Se usan como agentes selectivos en medios de cultivos por su efecto bacteriosttico. o. Jabones y detergentes: Reducen la tensin superficial del agua (surfactantes) y que se emplean principalmente para la limpieza de superficies. p. cidos: Se usan como conservantes en muchos alimentos, el cido baja el pH y esto desnaturaliza las protenas, el pH bajo no elimina las esporas. II. Gentica Bacteriana: a. Experimento de Griffith: Trabajo con la bacteria patgena Streptococcus pneumoniae en 1928. i. Demostr que el DNA era necesario para adquirir virulencia. ii. Demostr la transformacin de bacterias no virulentas a bacterias virulentas. iii. Uso bacterias virulentas muertas que se mezclaban con bacterias no virulentas vivas. iv. Cuando se hacia la mezcla y se le inyectaba a los ratones los mismos moran y se extraan bacterias patgenas de ellos. b. Caractersticas del DNA: i. El cido desoxirribonucleico es el material gentico de todos los organismos y cerca de la mitad de los virus. ii. Lleva informacin necesaria para dirigir la sntesis de protenas y es capaz de auto duplicarse. iii. Cada molcula de DNA est constituida por dos hlices en forma de espiral que estn compuestas por nucletidos.

iv. Nucletidos: estn formados por tres unidades, molcula de azcar, grupo fosfato y base nitrogenada. v. Pares AT dos enlaces de hidrogeno, GC tres enlaces de hidrogeno. c. Cdigo Gentico: i. 64 combinaciones diferentes (compuestas de tres nucletidos) basados en los cuatro nucletidos conocidos. ii. Cada combinacin codifica para uno de los 20 amino cidos conocidos, adems de la seal de pare y seal de comienzo. iii. El cdigo es universal. iv. Excepciones en los hongos, protozoarios y el ADN mitocondrial. d. Duplicacin del DNA: i. EL DNA se duplica antes de que la clula pueda dividirse. ii. La helicasa separa las bandas de DNA y forma la burbuja de replicacin. iii. Single stranded binding proteins mantienen la burbuja de replicacin abierta. iv. DNA polimerasa copia la informacin gentica v. La duplicacin del DNA es semiconservativa vi. La duplicacin siempre ocurre del terminal 5 al terminal 3 vii. En la banda lagging se forma el DNA discontinuamente lo que forma los fragmentos de okasaki, las ligasas unen los fragmentos de okasaki. viii. En los eucariotas hay varios orgenes de replicacin mientras que en los procariotas solo hay un origen de replicacin. e. Transcripcin del DNA: Transcripcin es el proceso de hacer RNA con DNA. i. Expresar el contenido del DNA:

1. Se sintetiza una molcula de ARN que es una copia de la secuencia de DNA equivalente a un gen. 2. El proceso se define como la transferencia de informacin de DNA a RNA. 3. Factores de transcripcin se pegan al DNA para preparar el DNA para la conjugacin de RNA polimerasa. 4. Se alarga el RNA en la direccin de terminal 5 al terminal 3. 5. Una vez se termina la transcripcin del DNA y tenemos una cadena de RNA, la RNA polimerasa se desasocia del DNA. 6. Una vez el proceso se termina lo que tmenos es Pre-mRNA que debe ser editado. 7. Los nucletidos que no codifican nada (intrones) se remueven mientras que los codones (exones, segmentos que codifican para protenas) se juntan. 8. Las enzimas que remueven los intrones se llaman Spliceosomes. 9. En el terminal 5 se coloca cap que se compone de un grupo methyl y un grupo fosfato. (Le permite al mRNA salir del nucleo por el poro nuclear) 10. En el terminal 3 se coloca la poly- A tail (Adeninas en secuencia seguida, esta cola determina la duracin de mRNA) f. Traduccin del ARN: Proceso por el cual la informacin del mRNA se cambia en una protena. Sucede en los ribosomas con la ayuda del tRNA. i. Tres molculas de RNA:

1. mRNA: Contiene la informacin para sintetizar todas las protenas del organismo. 2. tRNA: Responsable de transferir los amino cidos necesarios para producir la protena. 3. rRNA: Constituye los ribosomas. ii. La secuencia de nucletidos codifica la secuencia de amino cidos en una protena. g. Recombinacin Gentica en Bacterias: Las bacterias se multiplica por fisin binaria, este tipo de reproduccin no permite la variabilidad gentica. i. Los organismos poseen 3 mecanismos para aumentar su variabilidad gentica. 1. Transformacin: Obtencin por parte de una clula receptora un segmento de DNA el cual se incorpora al cromosoma de esta clula en forma heredable. a. Transformacin natural: procede de una batera donante y al azar. Sucede entre bacterias de la misma o diferentes especias. Cualquier porcin del genoma puede incorporarse siempre que sea similar al de la clula husped. b. Se necesitan las siguientes caractersticas: i. Ser doble hlice. ii. Similar al DNA de la clula receptora. iii. Bajo peso molecular. iv. Tamao pequeo

2. Transduccin del DNA: Transferencia de genes de una bacteria a otra por medio de un virus. Este es el mecanismo ms frecuente de intercambio y recombinacin gentica de las bacterias. a. Transduccin generalizada: Ocurre durante el ciclo ltico (Fago rompe la bacteria) y transfiere cualquier parte del genoma bacteriano. i. Fragmentos del cromosoma bacteriano queda en la capsula viral y cuando el fago infecta a una nueva bacteria, el material puede ser transferido al cromosoma bacterial. ii. La cantidad transferida de DNA bacteriano depende del tamao de la capsula del virus. b. Transduccin especializada: La partcula viral modificada transporta porciones especficas del genoma bacteriano. i. Genes transportados son Bio y Gal. ii. Este proceso ocurre debido a un error en el ciclo lisognico. iii. El fago abandona la bacteria llevndose uno de los genes localizados a los extremos Bio y Gal. iv. Genoma viral resultante contiene porciones del cromosoma bacteriano justo al lado del sitio de integracin. 3. Conjugacin: Consiste en la unin de dos bacterias de la misma o diferentes especies para la transferencia del material gentico

a. Se intercambian plsmidos por medio de un puente citoplasmtico. 4. Mutaciones: Cambio en uno o ms nucletidos del DNA a. Pueden ser causadas por: i. Radiaciones ii. Sustancias qumicas iii. Condiciones ambientales b. Mutaciones producen nuevas formas de un gen. c. Diferentes tipo de mutacin: i. Delecion: Perdida de uno o varios nucletidos. ii. Insercin: Adicin de uno o varios nucletidos al DNA. iii. Inversin: Cambio de posicin de uno o varios nucletidos. iv. Corrida de lectura: Se inserta o se pierde uno o varios nucletidos, toda la informacin del gene se pierde. v. Translocacin: Ocurre cuando segmentos de nucletidos se separan y se unen en otro lugar del cromosoma. III. Biotecnologa: Conjunto de tcnicas que se utilizan para modificar un organismo con un fin particular. Campo multidisciplinario donde se aplican conocimientos de ingeniera, microbiologa, matemticas, bioqumica, gentica, biologa molecular y etc. a. Beneficios: Pan, vino, queso, cerveza. b. Origen de la biotecnologa: Comenz con los cruces selectivos de los primeros animales domesticados.

c. Desarrollo de la biotecnologa actual: i. Charles Darwin y Gregor Mendel: en el rea de la seleccin natural y la herencia. ii. Louis Pasteur: en el campo de la medicina y la microbiologa industrial iii. Oswald Avery: Descubri que el DNA es el material gentico por ende su aportacin fue la que abri las [puertas a la biotecnologa. iv. James Watson y Francis Crick: sugirieron que la estructura del DNA como una formada por dos cadenas de nucletidos en forma de doble hlice. v. Descubrimientos de: 1. Enzima transcriptasa al reverso 2. Enzimas de restriccin d. Hoy da en la biotecnologa: i. Produccin de animales y plantas transgnicas ii. Desarrollo de vacunas iii. Produccin de bioinsectisidas y biodetergentes iv. Produccin de anticuerpos monoclonales v. Fijacin biolgica del nitrgeno vi. Restauracin de lugares contaminados con organismos alterados. vii. Produccin de plantas con mayor valor alimentario viii. Plantas resistentes a enfermedades y condiciones ambientales hostiles. e. Industrias que utilizan biotecnologa: i. Industrias qumicas e industrias cerveceras 1. Utilizan la manipulacin gentica de levaduras ii. Clonacin de animales y plantas iii. Cultivo de tejidos humanos.

iv. Cultivo de tejido vegetal v. Produccin de protenas de inters como la insulina vi. Hormona humana de crecimiento. vii. Interfern. f. HUGO (Human Genome Project) i. Secuencio todo el genoma humano. g. Criminologa: Identifica sospechosos con la tecnologa del DNA recombinante. IV. Ingeniera Gentica: Conjunto de tcnicas que cambien el material hereditario de una clula. a. Nuevos genes pueden introducirse en organismos de una manera controlada y predecible. Esto provee adems para detectar y curar enfermedades genticas. b. DNA recombinante: Le permite a los cientficos aislar y reproducir secciones especficas de la hlice de DNA. i. Corte DAN: ADN del organismo que contiene el gen deseado es cortado en piezas de un tamao razonable, estas piezas son llamadas ADN pasajero. ii. Vectores: Las piezas de ADN pasajero son unidas o ligadas a una segunda pieza de ADN que es capaz de duplicarse (vectores). iii. Las molculas recombinantes son introducidas a la clula husped (un proceso llamado transformacin) iv. La colonia de clulas que contiene el gen de inters es escogida o separada de la genoteca (conjunto de genes). V. Quimioterapia Antimicrobial: Comienza con el trabajo de Paul Ehrlich, su fin era obtener una sustancia qumica que matara el patgeno sin afectar las clulas humanas. a. Penicilina: Descubierta por Ernest Duchesne y luego redescubierto por Alexander Fleming.

b. Estreptomicina: Descubierto por Selman Waksman. c. Caractersticas generales de las drogas antimicrobiales: i. Deben poseer toxicidad selectiva. 1. Se expresa en trminos de; a. Dosis teraputica: Nivel requerido para tratar infeccin. b. Dosis toxica: Nivel excesivo y toxico para el husped. ii. Grupo de Sulfas: 1. Rango de Actividad; a. Tratamiento de infecciones de E. Coli y Nocardia spp. 2. Mecanismo de Accin; a. Bacteriostticas, interfieren con la sntesis de cido flico evitando que las bacterias puedan dividirse. 3. Grupo de las Penicilinas: Primer antibitico ampliamente utilizado en clnicas. a. Penicilina G (natural) b. Ampicilina (Semisintetica): Posee grupo NH2 que la hace de amplio espectro. c. Carbenicilina (Semisintetica): Acta sobre Pseudomonas y cepas Proteus. 4. Monobactams a. Origen i. Bacterias de suelo, Acetonobacter, Agrobacterium, Gluconobacte,r Chromobacter, Pesudomonas.

b. Mecanismo de Accin: Intervienen en la formacin de la pared celular c. Actividad: Bacterias aerbicas o facultativas, Enterobacter, Haemophilus, Klebsiella, Neisseria, Pesudomonas, Serratia. 5. Licosaminas: a. Ejemplos: Clindamicina b. Actividad: Gram Negativa, Pneumococcus, Streptococcus, Staphylococcus. 6. Cloramfenicol Tetraciclinas: a. Origen: Streptomyces spp b. Ejemplos: Doxyciclina monociclina. c. Mecanismo de Accin: Bloquean sntesis de protena. d. Actividad: Gram positivas y gram negativas, rickettsias, chlamydias, bacteria que causa fiebre tifoidea. 7. Aminoglicsidos: a. Origen: Streptomicens Grisens, S. Kanamyceticus, Micromonoespora. b. Ejemplos: Estreptomicina, Kanamicina, Gentamicina. c. Mecanismo de Accin: Interfieren con la sntesis de protenas, daa los riones. d. Actividad: Amplio espectro, bactericida. 8. Polipeptido: a. Origen: Bacillus de suelo. b. Ejemplos: polimixin B & polimixin E.

c. Mecanismo de Accin: Destruye las membranas. d. Actividad: Bacteriostticos o bactericidas dependiendo de la concentracin. 9. Antimicticos: a. Ejemplos: Polieno & Imidazoles. b. Mecanismo de Accin: Hacen ms susceptible la membrana celular distorsionando la permeabilidad selectiva & Interfieren con la sntesis de esteroides. c. Actividad: Hongos & Protozoarios patgenos. 10. Antivirales: a. Ejemplos: Acyclovir amantadine & AZT Cytarabin. b. Mecanismo de Accin: Interfiere con la sntesis de RNA & DNA.