TRANSPORTE A TRAVS DE MEMBRANA

FUNCIONES DE LAS MEMBRANAS

Producci n de ATP Produccin Transporte selectivo Especificidad celular Fijaci n de agentes Fijacin reguladores Transmisi n de Transmisin impulsos el ctricos elctricos Transducci n de Transduccin se ales seales
Lugar para reacciones enzim ticas enzimticas Protecci n de la Proteccin celula L mite entre Lmite organelos Comunicaci n Comunicacin intercelular

MEMBRANAS BIOLGICAS
Las membranas celulares no son paredes rgidas, sino estructuras complejas y dinmicas compuestas por molculas que poseen caractersticas especiales. Ello hace posible la existencia de interacciones selectivas, como la regulacin del transporte de molculas hacia adentro y afuera de la clula, la transmisin de seales e informacin entre el medio y el interior de la clula, la capacidad de actuar como sistema de transferencia y almacenamiento de energa y el reconocimiento del entorno celular.

Modelo del mosaico fluido Singer y Nicholson, 1972

Bicapa Lipdica: Autoensamble y Autosellado

Su forma le permite asociarse con el agua en forma de una estructura de doble capa (bicapa lipdica) que tiende a cerrarse sobre s misma formando compartimientos hermticos, eliminando los bordes libres en los que las colas hidrofbicas podran estar en contacto con el agua. Los compartimientos formados por bicapas lipdicas tienden a cerrarse de nuevo despus de haber sido rotos (autoensamblaje y autosellado)

Tipos de fosfolpidos
fosfatidilcolina (lecitina) fosfatidiletanolamina (cefalina)

fosfatidilserina

fosfatidilinositol

esfingosina Esfingomielina

Bicapa Lipdica
Las dos cadenas de cidos grasos son hidrfobas y tienen longitud variable (14 a 24 C). Una de estas cadenas presenta enlaces cis (es insaturada) y la otra no tiene dobles enlaces (es saturada). Las diferencias en longitud y grado de instauracin afectan la capacidad de las molculas de fosfolpidos para empaquetarse, modificando su fluidez. El tercer C del glicerol est unido por un grupo fosfato a una molcula orgnica hidroflica, que generalmente contiene un tomo de nitrgeno o un hidrato de carbono. Las molculas con una regin hidrofbica y otra hidroflica, se denominan anfipticas.

Bicapa Lipdica: Asimetra

Las molculas lipdicas que tienen colina en su grupo cabeza (fosfatidilcolina y esfingomielina) se encuentran en la mitad exterior de la bicapa, mientras que las que contienen un grupo amino (fosfatidiletanolamina y fosfatidilserina) se hallan en la mitad interior. La prdida de la asimetra es una seal de muerte celular (apoptosis o muerter programada), ya que la exposicin de fosfatidilserina en la capa externa favorece la fagocitosis de estas clulas por macrfagos

Bicapa Lipdica: Asimetra

Bicapa Lipdica: Fluidez

A mayor cantidad de colesterol menor fluidez A mayor temperatura mayor fluidez

Transporte Biolgico
El transporte biolgico involucra paso o movimiento de iones y molculas a travs de la membrana celular, independientemente de su tamao y del mecanismo mediante el cual la atraviesa.

Debido a su interior hidrofbico, la bicapa lipdica es una barrera altamente impermeable al flujo de la mayora de las moleculas polares, con lo cual se evita la prdida de stas desde el interior celular, pero es permeable al agua.

Esta funcin de barrera es importante ya que la combinacin de permeabilidades selectiva y transporte activo a travs de la membrana crea grandes diferencias en la composicin inica entre el LIC y el LEC, lo que permite a la membrana celular almacenar energa potencial en la forma de gradientes inicos que pueden usarse para el transporte, conduccin de seales elctricas, etc.

Transporte Biolgico
La velocidad a la cual difunde una molcula o partcula depende:

1.- tamao de la molcula 2.- carga 3.- solubilidad en lpidos (Coeficiente de particin lpido/H20) 4.- gradiente de concentracin y elctrico 5.- rea 6.- fluidez

Bicapa Lipdica: Permeabilidad

Debido a su interior hidrofbico, la bicapa lipdica constituye una barrera altamente impermeable a la mayora de las molculas polares. Esta funcin de barrera es de especial importancia, ya que permite a una clula mantener en su citosol ciertos solutos a concentraciones diferentes a las que estn en el fluido extracelular y en cada uno de los compartimientos intracelulares

Protenas de membrana
Aunque la estructura bsica es provista por los fosfolpidos, la mayora de las funciones especficas de la membrana son llevadas a cabo por protenas. En promedio, hay un 50% de lpidos y otro tanto de protenas, pero como las protenas son mucho ms grandes, la relacin numrica es de alrededor de 50 molculas de fosfolpidos por cada molcula de protena

Las protenas integrales poseen algunas regiones insertadas en las regiones hidrfobas. Pueden atravesar una sola vez la membrana (1) o muchas veces (2), estar solubles en el citosol pero ancladas a la cara interna por un resto acilo o prenilo (3), o estar unidas a un resto de glicosilfosfatidilinositol, que las ancla a la cara externa de la membrana (4) Las protenas perifricas se unen a regiones expuestas de protenas integrales y usualmente unidas no covalentemente a protenas integrales y pueden ubicarse hacia adentro (5) o fuera (6) de la membrana

Mecanismos de transportes a travs de la membranas celulares

De acuerdo a sus caractersticas, los transportes biolgicos se les puede clasificar de la siguiente manera: a.- Si requieren o no energa: a.1.- Transporte pasivo a.2.- Transporte activo

a.1.- Transporte Pasivo: no requiere energa metablica. Ej. a.1.a.- Difusin simple a.1.b.- Difusin facilitada

a.2.- Transporte Activo: requiere de energa metablica. Ej. a.2.a.- Primario a.2.b.- Secundario

Mecanismos de transportes a travs de la membranas celulares

b.- Si participan o no protenas carriers.

b.1.- Transporte Mediado: participan protenas carriers. Ej. b.1.a.- Transporte Activo b.1.b.- difusin Facilitada

b.2.- Transporte No Mediado: no participan protenas carriers. Ej b.2.a.- Difusin simple b.2.b.- Osmosis

1. Difusin simple
Gradiente de concentracin

2. Difusin facilitada (transportador)

Lehninger. Principios de Bioqumica. 2006 Ed. Omega. 4/e

Tasa de transporte

Concentracin
Cintica del transporte por difusin simple

Transporte pasivo

Lehninger. Principios de Bioqumica. 2006 Ed. Omega. 4/e

AQUAPORINA

Transporte Mediado
La caracterstica distintiva de los procesos de transporte mediado es el requerimiento de la interaccin especfica del soluto transportado con un componente especializado de la membrana celular.A causa de ello, estos procesos presentan propiedades cinticas comunes, entre ellas tenemos:

a.- Cintica de saturacin b.- Especificidad (estereoespecificidad) c.- Competencia d.- Alto coeficiente trmico
La cintica de saturacin se basa en el hecho de que las protenas transportadoras tienen un nmero limitado de sitios de unin para el soluto, por lo tanto, la velocidad o flujo de un soluto no vara en forma directa con la concentracin del soluto, alcanzandose, a una determinada concentracin, el transporte mximo.

Transporte Mediado

Efecto de la concentracin de soluto sobre su flujo a travs de un sistema de transporte mediado. La velocidad de paso del soluto a travs de la membrana en funcin de su concentracin es una curva de pendiente decreciente hasta que alcanza un valor mximo, a partir del cual el flujo no se modifica al aumentar la concentracin de la sustancia transportada

Transporte Mediado
Especificidad
El transporte mediado muestra una selectividad muy elevada ya que sustancias qumicamente muy parecidas a las transportadas no pueden atravesar la membrana ocupando este transporte. Los sitios de unin de las protenas carrier son estereoespecficos. Por ej., el transportador de glucosa de los eritrocitos transporta ms eficientemente los ismeros de D-glucosa que los L-glucosa

Competencia
Aunque los sitios de unin para los solutos transportados son muy especficos, pueden reconocer, unirse e incluso transportar solutos qumicamente relacionados y su presencia produce una inhibicin del flujo del soluto especfico. Por ej., el transportador de la glucosa es especfico para la D-glucosa, pero tambin reconoce y transporta la Dgalactosa, en consecuencia, la presencia de sta ltima inhibe el transporte de D-glucosa.

Transporte Mediado
La inhibicin puede ser competitiva, en el caso que se compita por el mismo sitio de unin y por lo tanto se altera la Ks, ej. D-glucosa DGalactosa; o puede ser no-competitiva, el soluto se une en un sitio diferente alterando la estructura del carrier y en esta caso se altera la Vmx.

Coeficiente Trmico (Q10)

Estos sistemas tienen un Q10 de 2 3, lo que significa que el flujo de soluto aumenta 2 a 3 veces por cada 10o que aumente la temperatura.

Ej. de transporte mediado: a.- Difusin facilitada b.- Transporte activo primario c.- Transporte activo secundario

Difusin Facilitada
Transporte pasivo mediado por carriers que se genera cuando la fuerza impulsora es el gradiente electroqumico del soluto. El carrier acta acelerando la transferencia del soluto. Ej. Transporte de D-glucosa hacia la clula muscular esqueltica. La D-galactosa y la floridcina son inhibidores competitivos

Modelo hipottico que muestra como los cambios conformacionales del carrier median la difusin facilitada del soluto A.Algunos pueden ser modificados por hormonas, ej., la insulina estimula el transporte de glucosa en el msculo esqueltico

Transportes pasivos a travs de la membrana plasmtica cuya fuerza impulsora es el gradiente electroqumico. Tienden a igualar las concentraciones. Son reversibles y simtricos ya que pueden funcionar en ambas direcciones dependiendo del gradiente.

Transporte Activo
Ocurre cuando se demuestra que hubo una transferencia neta de soluto desde un compartimiento cuyo potencial electroqumico es menor hasta otro compartimiento donde el potencial electroqumico es mayor.

Mientras la difusin simple y la facilitada ocurren espontneamente, el transporte activo requiere de energa metablica

Bomba de Sodio-Potasio o ATP-asa Sodio-Potasio (ATPasa de Tipo P)

Se les denomina de tipo P porque forman un intermediario fosforilado clave

a) b)

Unin de tres Na+ a sus sitios activos Fosforilacin de la cara citoplasmtica de la bomba que induce a un cambio de conformacin en la protena. Esta fosforilacin se produce por la transferencia del grupo terminal del ATP a un residuo de cido asprtico de la protena El cambio de conformacin hace que el Na+ sea liberado al exterior Una vez liberado el Na+, se unen dos molculas de K+ a sus respectivos sitios de unin de la cara extracelular de la protena La protena se desfosforila producindose un cambio conformacional de esta, lo que produce una transferencia de los iones de K+ al citosol

c)

d)

e)

Modelo que explica el funcionamiento de la ATP-asa Na+ -K+

Bomba de Sodio-Potasio o ATP-asa Sodio-Potasio (ATPasa de Tipo P)

Lehninger. Principios de Bioqumica. 2006 Ed. Omega. 4/e

Bomba de Sodio-Potasio o ATP-asa Sodio-Potasio (ATPasa de Tipo P)

Mantenimiento de la osmolaridad y del volumen celular

La bomba de Na+/K+ juega un papel muy importante en el mantenimiento del volumen celular. Entre el interior y el exterior de la clula existen diferentes niveles de concentracin, siendo mayor la concentracin de solutos dentro que fuera de la clula. Como quiera que la bomba extrae de la clula ms molculas de las que introduce tiende a igualar las concentraciones y, consecuentemente, la presin osmtica. Sin la existencia de la bomba, dado que los solutos orgnicos intracelulares, a pesar de contribuir en s mismos poco a la presin osmtica total, tienen una gran cantidad de solutos inorgnicos asociados, la concentracin intracelular de estos (que generalmente son iones) es mayor que la extracelular. Por ello, se producira un proceso osmtico, consistente en el paso de agua a travs de la membrana plasmtica hacia el interior de la clula, que aumentara de volumen y diluira sus componentes. Las consecuencias seran catastrficas ya que se reducira la probabilidad de colisin molecular, e incluso es posible que la clula llegara a reventar (proceso conocido como lisis).

Bomba de Sodio-Potasio o ATP-asa Sodio-Potasio (ATPasa de Tipo P)

Transporte de nutrientes
El gradiente producido por el Na+ impulsa el transporte acoplado (activo secundario) de la mayora de nutrientes al interior de la clula. Lo que quiere decir que el fuerte gradiente que impulsa al sodio a entrar en la clula (vase ms adelante) es aprovechado por protenas especiales de membrana para "arrastrar" otros solutos de inters utilizando la energa que se libera cuando el sodio se introduce en la clula.

Potencial elctrico de membrana

Esta bomba es una protena electrognica ya que bombea tres iones cargados positivamente hacia el exterior de la clula e introduce dos iones positivos en el interior celular. Esto supone el establecimiento de una corriente elctrica neta a travs de la membrana, lo que contribuye a generar un potencial elctrico entre el interior y el exterior de la clula ya que el exterior de la clula est cargado positivamente con respecto al interior de la clula. Este efecto electrognico directo en la clula es mnimo ya que slo contribuye a un 10% del total del potencial elctrico de la membrana celular. No obstante, casi todo el resto del potencial deriva indirectamente de la accin de la bomba.

Bomba de Sodio-Potasio o ATP-asa Sodio-Potasio (ATPasa de Tipo P)

Flujo de entrada de K+ (mmol/L de clula/hora) en glbulos rojos humanos con y sin energa metablica y a distintas concentraciones de K+ radiactivo en el medio de incubacin a 37 oC.

Bomba de Sodio-Potasio o ATP-asa Sodio-Potasio (ATPasa de Tipo P)

Flujo de entrada activo de K+ en funcin de la concentracin de potasio en el medio de incubacin. Muestra que la velocidad de entrada de K+ crece rpidamente y alcanza la mitad de su valor mximo a un concentracin de K+ de 2 mM.

Bomba de Sodio-Potasio o ATP-asa Sodio-Potasio (ATPasa de Tipo P)

Efecto de la Ouabana (5x10-5 M) sobre el flujo de entrada de potasio en glbulo rojos humanos. El glicsido ouabana deriva del ncleo pentano-perhidro-fenantreno. C6H11O5 es un resto de deoxiglucosa

Bomba de Calcio o ATP-asa de calcio (ATPasa de Tipo P)

1.- La reaccin cclica se inicia con la enzima en su forma defosforilada y con dos iones calcio unidos. En esta conformacin puede intercambiar iones calcio con el interior citoplsmico 2.- En esta conformacin se puede unir el ATP. Los dominios N, P y A sufren un fuerte cambio conformacional a medida que se cierran sobre el ATP. Los iones calcio estn ahora atrapados en el interior del enzima. 3.- El grupo fosforilo se transfiere ahora del ATP al Asp 351 4.- Tras la liberacin del ADP, el enzima experimenta un nuevo cambio conformacional que, esta vez, incluye tambin al dominio de membrana. 5.- Se hidroliza el residuo fosfoaspartato y se libera el grupo fosfato. 6.- Con la liberacin del fosfato, se pierden las interacciones que estabilizaban la conformacin y el enzima revierte a la conformacin primera.

TRANSPORTE ACTIVO SECUNDARIO Transporte activo secundario: La bomba de sodio/potasio mantiene

una importante diferencia de concentracin de Na+ a travs de la membrana. Por consiguiente, estos iones tienen tendencia a entrar de la clula a travs de los poros y esta energa potencial es aprovechada para que otras molculas, como la glucosa y los aminocidos, puedan cruzar la membrana en contra de un gradiente de concentracin. Cuando la glucosa cruza la membrana en el mismo sentido que el Na+, el proceso se llama Symporte o cotransporte ; cuando los hacen en sentido contrario, el proceso se llama Antiporte o contratransporte

TRANSPORTE ACTIVO SECUNDARIO

Uniporte

Simporte

Antiporte

Cotransporte

TRANSPORTE ACTIVO SECUNDARIO

TRANSPORTE SECUNDARIO DE GLUCOSA-SODIO

Transporte activo secundario de glucosa en clulas intestinales. Este modelo explica tambin la reabsorcin de glucosa en el tbulo proximal de la nefrona

Cotransporte y transporte mltiple integrado

La distribucin asimtrica de las protenas transportadoras en la membrana plasmtica de una clula epitelial intestinal da lugar al transporte transcelular de glucosa a travs del epitelio intestinal

TRANSPORTE ACTIVO SECUNDARIO

TRANSPORTE SECUNDARIO DE GLUCOSA-SODIO

El cotransportador Na+-Glucosa oscila entre dos estados ping y pong. La unin del sodio a la protena induce un cambio alostrico que aumenta grandemente la afinidad del carrier para la glucosa.Se requiere que la gradiente electroqumica del Na+ se mantenga por medio de la bomba la que indirectamente est proporcionando la energa para el cotransportador.

TRANSPORTE ACTIVO SECUNDARIO

TRANSPORTE SECUNDARIO DE GLUCOSA-SODIO

La distribucin asimtrica de protenas transportadoras en la membrana plasmtica de una clula intestinal resulta en el transporte transcelular de glucosa desde el lumen del intestino al fluido extracelular.

TRANSPORTE ACTIVO SECUNDARIO

TRANSPORTE SECUNDARIO DE LACTOSA-PROTONES

TRANSPORTE ACTIVO SECUNDARIO

TRANSPORTE SECUNDARIO DE LACTOSA-PROTONES

1.- El ciclo se inicia con las dos mitades orientadas de forma que el bolsillo de unin al azcar es accesible desde el exterior de la clula. Un protn procedente del exterior de la clula se une a un residuo de la permeasa, posiblemente al Glu 269. 2.- En su forma protonada, la permeasa une lactosa del exterior de la clula. 3.- La estructura cambia de conformacin 4.- La permeasa libera la lactosa al interior de la clula 5.- La permeasa libera un protn en el interior de la clula 6.- La permeasa vuelve a cambiar de conformacin para completar el ciclo

Transporte de grandes molculas

En la endocitosis la clula incorpora materiales hacia su interior . En la fagocitosis (literalmente "ingesta de clulas"), la clula ingiere partculas slidas como bacterias o nutrientes.

En otro tipo de endocitosis, llamada pinocitosis ("bebido de clulas"), la clula incorpora materiales disueltos A veces tambin se degradan por este mecanismo organelas con fallas (una mitocondria, en el ejemplo), envolviendo la organela en una vescula formada con membranas del retculo endoplsmico; a este proceso se lo denomina autofagocitosis o autofagia.

Transporte de grandes molculas

En un tercer tipo de endocitosis, llamado endocitosis mediada por receptor, algunas protenas especficas de determinadas partculas extracelulares se unen a protenas receptoras, localizadas en la membrana plasmtica de la clula.

En la exocitosis una clula expulsa productos de desecho o productos especficos de secrecin (como hormonas), mediante la fusin de una vescula con la membrana plasmtica de la clula. La exocitosis consiste en la fusin de la membrana de la vescula secretora con la membrana plasmtica. Es tambin un mecanismo primario de crecimiento de la membrana plasmtica.