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Sem|nar|ode8|oqu|m|caAvanzada

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Lima 30 de marzo del 2014
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(UNIVERSIDAD DEL PER,DLCANADLAMLkICA)

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LISTA DE ABREVIATURAS

APS: protena adaptadora con dominios PH y SH2
CAP: protena asociada a Cbl
CrkII: regulador del virus tumoral de pollo de la cinasa II
Glut4: transportador de glucosa 4
Gab-1: ligador asociado a Grb-2
MAP: cinasa, proteincinasa activada por mitgeno
PDK: cinasa dependiente de fosfoinositido
PKA: protena quinasa A
PI3-cinasa: fosfatidilinositol-3-cinasa
PIP3: trifosfato de fosfatidilinositol
PKB: proteincinasa B
PKC: protena quinasa C
aPKC: isoforma atpica de la proteincinasa C
TOG: tolerancia normal a la glucosa
Y: residuo tirosnico
Y-P: residuo tirosnico fosforilado








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1. EPIGENTICA
El trmino epigentica significa literalmente por encima de los genes y fue acuado en 1942 por
el paleontlogo y genetista escocs Conrad Hal Waddington, quien defini a la epigentica como
las interacciones de los genes con su ambiente que provoca un fenotipo dado. Actualmente la
epigentica estudia los cambios hereditarios que tienen lugar en la expresin gnica, sin involucrar
cambios en la secuencia del ADN, que pueden ser originados por factores externos.
1.1 MECANISMOS DE REGULACIN EPIGENTICA
1.1.1. La metilacin del ADN, es el proceso por el cual un rea del cromosoma es metilada. Este
proceso se da en regiones genmicas que contienen una alta frecuencia de citosina-guanina (CG),
en mamferos se asocia a menudo con el silenciamiento de genes. (Fig.1)





1.1.2. Acetilacin de histonas, las acetiltransferasas de histonas (HAT) son las enzimas
responsables de aadir un grupo acetil en las colas de las histonas. La estructura del dominio HAT
muestra un ncleo central muy conservado que es importante para la unin del cofactor acetil-
coenzima A y dominios N- y C. terminal ms divergentes entre especies. La acetilacin de lisinas
puede ser revertida por histonas deacetilasas (HDACs), por tanto el estado de acetilacin de
histonas resultar del balance entre la expresin y la actividad del HAT y HDAC.
1.1.3. Metilacin de histonas, metiladas tanto en residuos de lisina como en residuos de arginina.
Los residuos de lisina pueden ser monometilados, dimetilados o trimetilados, mientras que las
argininas pueden incorporar uno o dos grupos metil. Las protenas encargadas de aadir hasta tres
grupos metil a la lisina son las metiltransferasas de histonas (HMT). Estas protenas poseen tanto el
dominio SET el cual posee la actividad enzimtica responsable de la metilacin de lisinas como el
cofactor S-adenosyl-metionina (SAM) que se une a la superficie cncava de la enzima, actuando
como donante de metilos.
2. CAVEOLAS/CAVEOLINA
Las caveolas son microdominios lipdicos de la membrana celular, caracterizados por ser
estructuras ricas en colesterol y en esfingolpidos e insolubles en detergentes no inicos. Poseen
una estructura invaginada, y tienen el potencial de formar vesculas para el trasporte de algunas
sustancias. Estas estructuras son abundantes en muchas clulas diferenciadas de mamferos, tales
como adipocitos, clulas endoteliales y clulas musculares, entre otras.
Figura 1: La metilacin del
ADN ocurre sobre el carbono 5
de la citosina: S-adenosil-
metionina (dador del grupo
metilo CH3) SAH: S-adenosil-
homocistena DMNT: ADN
metiltransferasa



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Otro componente estructural caracterstico de las caveolas son unas protenas integrales conocidas
como Caveolinas que, adems de su papel en la formacin de las caveolas, desempean tambin un
papel funcional en diferentes vas de sealizacin asociadas a estas estructuras de membrana. En
clulas de mamferos, la familia de las Caveolinas consta de al menos tres miembros (Caveolinas 1,
2 y 3), que son codificados por tres genes independientes. Caveolina-1 y 2 son coexpresadas en
todos los tipos celulares estudiados, y forman un complejo hetero-oligomrico, con niveles
particularmente altos en adipocitos; la expresin de Caveolina-3, por su parte, es especfica de
clulas musculares.
Los 3 miembros de la familia de las Caveolinas poseen una organizacin semejante con varios
dominios funcionales: un dominio de oligomerizacin, un dominio de andamiaje, un dominio de
membrana y un dominio C terminal.




















Figura 2: Homologa de secuencia en las isoformas de Caveolina en
Mamferos .Los nmeros indican la posicin de los aminocidos. C: Cisteina.

El dominio de oligomerizacin permite la interaccin entre monmeros de Caveolina para formar
agrupamientos estables de 14 a 16 monmeros. Por su parte, el dominio de andamiaje media la
interaccin de Caveolina con distintas molculas de sealizacin tales como la subunidad alfa de
PKC y la xido ntrico sintetasa endotelial. (Fig.3)


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Figura 3: Estructura primaria y topologa de Caveolina-1.a): Dos monmeros de Caveolina- 1 en la membrana.
Los extremos C-terminal y N-terminal se orientan hacia el citoplasma celular. b): Detalle de los dominios presentes
en Caveolina-1.
Estas observaciones han permitido la reevaluacin del concepto acerca de las Caveolinas en los
ltimos aos, reconocindose su papel no slo en el transporte de solutos y endocitosis, sino como
reguladoras de distintas vas de sealizacin. Por esta razn es de gran inters conocer las
implicaciones de Caveolina-1 en el comportamiento celular y los mecanismos involucrados en la
modulacin de su expresin. En general, las Caveolinas son conocidas como inhibidores de la
actividad de muchas enzimas que se ubican en las regiones caveolares de membrana, tales
como las quinasas, por tanto funcionan ms que todo como inhibidoras de transduccin de seales.
El receptor de insulina (IR) y las molculas que intervienen en esta va de sealizacin se
encuentran ubicados en las caveolas sin embargo, en este caso especfico, el IR parece ser regulado
positivamente por Caveolina-1.
1.2.2. Mecanismos de Regulacin de Caveolina
A nivel molecular se han descrito varios mecanismos de regulacin de Caveolina-1 en distintas
lneas celulares., en fibroblastos normales de piel humana, demostraron que cambios a nivel de la
transcripcin del gen CAV-1 inducidos por colesterol y otros anlogos estructurales, son mediados
por elementos de respuesta a esteroles (SREs). Otros autores sugieren que los SREs no son
suficientes para regular la transcripcin de Caveolina. Engelman y col (1999) proponen que la
regulacin de la expresin del gen puede estar mediada, en parte, por metilacin de regiones ricas
en citosina y guanina (CpG), al encontrar que los CpGs de la regin promotora del gen CAV-1 son
funcionalmente metilados en dos lneas celulares de cncer de mama (MCF7 and T-47D) que fallan
al expresar Caveolina-1
2.3. FUNCIN DE LAS CAVEOLAS Y CAVEOLINAS
Endocitosis mediada por caveolas
Papel de las caveolas en la salida de los virus
Caveolas y adhesin celular


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Papel de las caveolas/caveolinas en la transduccin de seales
Papel de las caveolas/caveolina en la homeostasis y el transporte de colesterol
Caveolina y gotas lipdicas
Caveolina y transformacin celular y formacin de tumores.
2.4. GEN DE LA CAVEOLINA
El gen de CAV-1 se compone de tres exones que se encuentran muy conservados en todas las
especies y se han descrito dos isoformas, la predominante CAV-1, de 178 residuos, y una
isoforma derivada de una iniciacin de la traduccin interna denominada Cav-1, de 147 residuos.
El gen de CAV-2 posee tres exones que codifican para una protena de 162 residuos cuya secuencia
es muy similar a la de CAV-1. El gen CAV-2 representa la secuencia completa de la protena. Se
han descrito dos isoformas truncadas, CAV-2 y CAV-2, que no se han caracterizado. El gen
CAV-3 fue identificado a travs de una base de datos que buscaba y analizaba libreras de ADNc
para genes homlogos a CAV-1, y est compuesto por dos exones que codifican una protena de
151 residuos. Los tres genes estn localizados en el cromosoma 6. El gen CAV-1 comparte con el
gen CAV-3 una elevada similitud en la secuencia aminoacdica.

3. SEALIZACION INSULINICA
La unin de la insulina con su receptor en la membrana plasmtica activa una cascada de seales
corriente abajo. La unin de la hormona promueve la actividad intrnseca de tirosincinasa propia del
dmero receptor, con lo cual hay fosforilacin de la tirosina de las subunidades del receptor y de
un corto nmero de sustratos especficos: las protenas del Sustrato del Receptor de Insulina (IRS)
que son Gab-1 y SHC; en el interior de la membrana un acervo caveolar del receptor insulnico
fosforila la caveolina (Cav), APS y Cbl. Estas protenas con fosforilacin de tirosina interactan con
cascadas de seales a travs de los dominios SH2 y SH3, para mediar los efectos de la insulina, y
segn cada va surgen efectos especficos de la hormona.

En tejidos efectores como el msculo de fibra estriada y los adipocitos, un fenmeno decisivo es
la translocacin del transportador de glucosa Glut-4 desde las vesculas intracelulares hasta la
membrana plasmtica; tal translocacin es estimulada por las vas caveolares y no caveolares. En
las segundas la activacin de PI3K es crucial y participan PKB/Akt (anclada en la membrana por
accin de PIP3), una forma tpica de PKC o ambas formas. En la va caveolar la flotilina, protena
caveolar, localiza el complejo de seales hasta la caveola; la va de seales incluye series de
interacciones con dominio SH2 que agregan la protena adaptadora CrkII, de intercambio del
nucletido guanina C3G y pequea de unin con GTP. Las vas son inactivadas por fosfatasas
fosfoprotenicas especficas (como PTB1B) y posiblemente por acciones de sus proteincinasas
ser/thr. Adems de las acciones mostradas, la insulina tambin estimula la bomba de Na+, K+-
trifosfatasa de adenosina (ATPasa) de la membrana plasmtica o de un mecanismo no dilucidado;
como consecuencia, se incrementa la actividad de bomba y hay acumulacin neta de potasio en el
interior de la clula.


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Diversos trabajos muestran que la Y14 de la CAV-1 puede ser rpidamente fosforilada en respuesta
a estrs oxidativo y a factores de crecimiento. (Fig.4)










5. LA EPIGENTICA DE LA CAVEOLINA-1 EN EL METABOLISMO DE LPIDOS
La comida chatarra es alta en caloras pero baja en nutrientes, especialmente aquellos elementos que
son esenciales para el desarrollo de un embrin en las etapas tempranas de su gestacin. Si una
mujer embarazada, se pasa las primeras semanas de su embarazo comiendo una dieta basada en
comida grasa, el embrin puede recibir la seal de que va a nacer en un entorno hostil donde los
alimentos esenciales escaseen. Por medio de una combinacin de efectos epigenticos, varios genes
se prenden y se apagan, resultando un beb que nacer pequeo, necesitando menos comida para la
supervivencia y volvindose obeso en el futuro.

En la obesidad, la metilacin de los genes
responsables comienza mucho antes de que nazca el nio y la comida chatarra, puede ser
responsable por la epidemia de obesidad.


La insulina desempea un doble papel en la homeostasis del tejido adiposo siendo responsable de la
lipognesis y tambin de la inhibicin de la liplisis, la sealizacin de la insulina depende de la
caveolina-1, como tal tiene un rol en la formacin de gotas de lpidos y la descomposicin.

Los
adipocitos con caveolina-1 unido al receptor de la insulina, permiten que se d la cascada que activa
la glucgeno sintasa y la lipognesis. Al ser deficiente la caveolina 1 la insulina no puede unirse a
su receptor, activndose la liplisis. La liplisis normalmente se produce a travs de la estimulacin
de los receptores - adrenrgicos y la posterior activacin de la PKA. En el adipocito, los dos
principales objetivos lipolticos de la PKA son la lipasa sensible a hormonas (HSL) y perilipina. La
perilipina es una protena que acta como una capa protectora de las gotas de lpidos, es fosforilada
en 6 residuos por la enzima PKA tras el estmulo de receptores -adrenrgicos. La perilipina
fosforilada sufre cambios conformacionales, exponiendo los triglicridos acumulados en las gotas
Figura 4: sealizacin insulnica y caveolina


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lipdicas a la accin de la lipasa sensible a hormonas (LSH). LSH se considera que es la principal
enzima lipoltica en el adipocito, regulado por la fosforilacin mediada de PKA.

6. CAVEOLINA-1 Y SU IMPORTANCIA EN LOS ADIPOCITOS
En adipocitos, donde se ha estimado que las caveolas representaran cerca del 20% del rea total de
la superficie de la membrana plasmtica se ha relacionado a Caveolina-1 con procesos tales como
la formacin de la gota lipdica, la liplisis la homeostasis del colesterol y la respuesta a insulina
como lo sealan algunas evidencias resumidas a continuacin (Fig. 5).







Figura 5: Papel de Caveolina-1 en adipocitos
La expresin de Caveolina-1 en el adipocito aumenta de 10 a 25 veces durante el proceso de
diferenciacin; en acuerdo con esto, adipocitos de ratones knock-out para Cav-1 carecen de
caveolas morfolgicamente identificables lo que lleva a una inhabilidad para la acumulacin de
grasa; la sobreexpresin de Cav-1, en cambio, aumenta el transporte de cidos grasos de cadena
larga hacia el interior del adipocito. Asimismo, la presencia de protenas de unin a cidos grasos
como FAT/CD36 en las caveolas, han relacionado a estas estructuras con el transporte y
metabolismo de triglicridos. Ratones knockout en Cav-1 presentan niveles bajos de CD36
Lay y col (2009) identificaron la presencia de Caveolina-1 en la membrana de la gota lipdica y la
relacionaron con el contenido de colesterol de esta estructura. Con experimentos posteriores se
demostr que el colesterol no afecta la expresin de Caveolina-1 sino que induce su movilizacin
desde la membrana hacia la gota lipdica. Toda esta evidencia indicara el papel de esta
protena en el almacenamiento de colesterol intracelular.
Por otro lado, se ha observado que las caveolas poseen todas las protenas necesarias para la sntesis
de triglicridos a partir de cidos grasos. Los experimentos de Ost y col (2005) comprobaron que
una fraccin aislada de membrana plasmtica de adipocitos, rica en Caveolina-1, era capaz de
sintetizar triglicridos al suplirla con precursores tales como cido oleico y 3-glicerol. Considerando
que el flujo de cidos grasos hacia el adipocito es alto y que stos deben ser neutralizados de
manera rpida y eficiente para evitar daar la membrana celular, es probable entonces que en


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adipocitos existan dos vas para la sntesis de triglicridos: una a partir de cidos grasos libres
exgenos que ocurre en la membrana, especficamente en la caveola, y otra a partir de la sntesis de
novo de cidos grasos que ocurre en el retculo endoplasmtico (va clsica).
7. LA CAVEOLINA-1 Y LA INSULINA
La insulina estimula a los adipocitos y a las clulas musculares para que capten glucosa. As el
transporte de glucosa se realiza por difusin facilitada hacia el interior de las clulas se incrementa
de 6 y 12 veces. Al desaparecer la insulina, la velocidad de captacin de glucosa vuelve a su nivel
basal dentro del lapso de 20 minutos a 2 horas, segn las condiciones. La insulina desempea un
doble papel en la homeostasis del tejido adiposo siendo responsable de la lipognesis y tambin de
la inhibicin de la liplisis, la sealizacin de la insulina depende de la caveolina-1, as tiene un rol
en la formacin de gotas de lpidos (lipid droplets) y la descomposicin.
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Los adipocitos con
caveolina 1 unido al receptor de la insulina, permiten que se d la cascada que activa la glucgeno
sintasa y la lipognesis. Al ser deficiente la caveolina 1 la insulina no puede unirse a su receptor,
activndose la liplisis.

Todo lo anterior evidencia el importante papel de Caveolina-1 en el metabolismo de lpidos y
carbohidratos, lo que la convierte en una potencial diana farmacolgica para el control de
alteraciones metablicas relacionadas con la funcin del tejido adiposo, tales como resistencia
a insulina y dislipidemias; sin embargo, el conocimiento acerca de los mecanismos
implicados en la regulacin de esta protena es escaso. Algunos antecedentes
sugieren la participacin de miembros de la familia de los receptores nucleares en este
proceso, pero todos ellos han sido observados en clulas no adiposas.

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS

1. Ring A, Le Lay S, Pohl J, Verkade P, Stremmel W. Caveolin-1 is required for fatty acid
translocase (FAT/CD36) localization and function at the plasma membrane of mouse
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2. Gonzales Muoz, E. Tesis doctoral: Papel de las caveolas/caveolina-1 en la fisiologa del
adipocito. Universidad de Barcelona- Facultad de biologa. Espaa; 2007. Pags: 19-22.
Disponible en:
http://www.tdx.cat/bitstream/handle/10803/1023/01.EGM_INTRODUCCION.pdf?sequenc
e=2
3. Razani B. Cohen A. Schubert W. Williams T. Wang X. Iyengar P. Brasaemle D. Scherer
P. Lisanti M. Role of Caveolin-1 in the Modulation of Lipolysis and Lipid Droplet
Formation. Vol. 53: 1261- 1270, 2004
4. Ondarza R. La epigentica, la otra cara de la gentica. Facultad de Medicina, UNAM.
ISSN-0188-137X, 2012. Disponible en: http://bq.unam.mx/mensajebioquimico. Accesado
el 28 de marzo de 2014