La resonancia magntica nuclear (RMN) es una tcnica transversal, cuyos fundamentos y/o aplicaciones abarcan todo el mbito de las

ciencias experimentales clsicas (matemticas, f sica, !u mica, biologia, geologia), las tecnolog as (informtica, ciencia de materiales) y las ciencias de la salud, en especial la medicina" #$ora bien, en este %ltimo mbito es frecuente !ue los facultativos se refieran a la resonancia magntica (denominaci&n incompleta con !ue es conocida incluso por el gran p%blico), sin el ad'etivo nuclear, conscientemente omitido por la profesi&n mdica (y en consecuencia por los medios de comunicaci&n), posiblemente por temor a !ue el p%blico desinformado pueda asociar esta tcnica a eventuales radiaciones potencialmente peligrosas producidas por desconocidos procesos radiactivos" (erm tanme tran!uili)arles inmediatamente* la estabilidad del prot&n, n%cleo mayoritariamente utili)ado para la obtenci&n de las espectaculares imgenes mdicas por RMN a !ue estamos $abituados, es muy elevada" La vida media del prot&n es de unos +,-+ a.os, muc$o mayor !ue la edad del /niverso desde el 0ig 0ang" 1nicamente gracias a su gran abundancia se espera poder detectar en alguna ocasi&n la desintegraci&n espontnea de un prot&n, y las probabilidades de !ue ello ocurra durante los pocos minutos !ue dura una exploraci&n mdica por RMN son realmente muy, muy pe!ue.as" 0romas aparte, la supresi&n in'ustificada del ad'etivo nuclear debe ser enrgicamente rec$a)ada por toda la comunidad cient fica" 2eamos someramente las interrelaciones entre las ciencias bsicas y la RMN" La matemtica, por e'emplo, $a proporcionado $erramientas como la transformaci&n de 3ourier en una o varias dimensiones, o la teor a estocstica, !ue son imprescindibles para la obtenci&n de espectros a partir de mediciones primarias de magneti)aci&n" La f sica, por supuesto, se encuentra en la ra ) misma del fen&meno de la RMN, a partir de estudios del momento angular intr nseco (o spin) de ciertos n%cleos" La informtica $a permitido el control rpido, fiable y reproducible de las muy diversas variables experimentales involucradas en la obtenci&n de espectros RMN, tales como pulsos de radiofrecuencia de unos pocos microsegundos, con fases predeterminadas $asta una precisi&n de menos de medio grado sexagesimal, per odos de evoluci&n de micro4 a milisegundos, potencias de irradiaci&n, control de temperatura, etc" 5ambin la informtica $a permitido la digitali)aci&n de la se.al, as como la transformaci&n de 3ourier numrica" La !u mica $a sido, desde $ace ms de cincuenta a.os, la gran beneficiaria de las aplicaciones de esta tcnica, !ue permite descifrar detalles muy sutiles de la estructura molecular de los compuestos, as como estudiar su comportamiento dinmico y sus reacciones" La biolog a, especialmente la fisiolog a, la bio!u mica y la biolog a molecular, $a podido investigar con gran detalle las biomolculas, tanto en estudios estructurales de biopol meros como en el seguimiento dinmico de rutas metab&licas y, ms recientemente, empleando la espectroscop a locali)ada in vivo. La geolog a, por su parte, $a podido aprovec$ar las tcnicas de RMN en fase s&lida en estudios estructurales de minerales o de nuevos materiales, e incluso se $an descrito aplicaciones de antenas RMN para la determinaci&n del contenido en aceites minerales (petr&leo) de las rocas" 6ado !ue los fundamentos de la RMN son sobradamente conocidos, no se repetirn a!u " 0astar con enumerar los conceptos de spin nuclear 7 y el momento angular P asociado, su cuanti)aci&n (en magnitud y en orientaci&n respecto al campo magntico 0,), su relaci&n con el momento magntico 8 (de la forma 8 9 :(), !ue introduce la constante magnetog rica : como caracter stica de cada is&topo, y la frecuencia de Larmor, ;,, a la !ue precesionan los spins, y !ue lleva a la bien conocida expresi&n

;9 <=

: B0

+>, !ue para el prot&n, cuya constante magnetog rica vale :> 9 <?"@A x +,@ rad 54+ s4+ , operando con un campo magntico 0, 9 <"-A 5 (<-A,, gauss), da una frecuencia de Larmor de +,,",, M>), dentro del rango de la radiofrecuencia" Bomo es bien sabido, la irradiaci&n de la muestra, por medio de radiaci&n electromagntica polari)ada circularmente en el plano perpendicular a 0, y cuya frecuencia sea precisamente la de Larmor, lleva a la resonancia del sistema, producindose transiciones entre los niveles energticos" La detecci&n de la absorci&n de esta radiofrecuencia en un espectr&metro RMN no es inmediata, ya !ue las cantidades de energ a involucradas ($;,) son muy pe!ue.as, alrededor de unas pocas milicalor as por mol" Cllo impide el uso de tcnicas tradicionales en las espectroscop as &pticas (/24vis, 7R), en las !ue se comparan las intensidades de dos $aces de radiaci&n, uno de los cuales $a atravesado la muestra mientras !ue el otro constituye el $a) de referencia" #s , a causa del pe!ue.o valor de las energ as involucradas, la RMN es una tcnica espectrosc&pica de muy ba'a sensibilidad" Cn condiciones &ptimas, en un espectr&metro moderno de alto campo magntico, se re!uiere un m nimo de +,+A spins de una determinada especie isot&pica (de las DfcilesD de medir) para poder detectar se.ales %tiles en un per odo de una $ora" E, a pesar de estas limitaciones, la RMN es la tcnica ms ampliamente utili)ada en investigaciones estructurales o dinmicas de compuestos !u micos en fase condensada, tanto desde el punto de vista de los f sicos como, en especial, del de los !u micos, y ms recientemente de los bi&logos o los mdicos" # diferencia de otras tcnicas de investigaci&n estructural, la RMN no se limita al caso de pe!ue.as molculas de ba'o peso molecular y alta simetr a, sino !ue proporciona datos precisos y muy %tiles incluso con biopol meros de peso molecular relativamente elevado (prote nas), sin re!uerir la previa cristali)aci&n de la muestra" , Csta gran utilidad de la RMN se puede describir usando las palabras de Ric$ard R" Crnst, (remio Nobel de Fu mica +GG+* Los sistemas de spins nucleares presentan caractersticas singulares que los predestinan para el estudio de las molculas: 1) Los ncleos atmicos empleados como sensores se encuentran per ectamente locali!ados, con di"metros de unos pocos emtometros, # pueden proporcionar in ormacin so$re la situacin de su entorno inmediato, %aciendo as posi$le una e&ploracin mu# detallada de las molculas # de la materia. ') La energa de interaccin de los sensores con el entorno es peque(sima, in erior a 0.' ) mol*1, equivalente a la energa trmica a +0 m,. -e este modo, la o$servacin # la medicin de propiedades moleculares se puede reali!ar pr"cticamente sin pertur$aciones. .o o$stante, las interacciones presentan una elevada sensi$ilidad respecto del entorno local.

+) La in ormacin so$re la estructura de las molculas puede o$tenerse a partir de las interacciones entre pares de ncleos. /s, las interacciones magnticas dipolo*dipolo proporcionan in ormacin so$re las distancias internucleares. Por su parte, los acoplamientos escalares H permiten la determinacin de "ngulos de torsin. Cste con'unto de propiedades es el !ue $a $ec$o !ue la RMN sea $oy una $erramienta imprescindible en todos los laboratorios de !u mica preparativa y de bio!u mica estructural o dinmica" Cn otro contexto, los instrumentos de imagen por RMN son tambin imprescindibles en los $ospitales" (ero para llegar a la situaci&n actual $a sido preciso superar las dificultades asociadas a la ba'a sensibilidad caracter stica de la RMN" 6e $ec$o, la $istoria de la RMN es una sucesi&n de brillantes avances experimentales !ue $an permitido ir aumentando con los a.os la sensibilidad de la tcnica" 0n poco de pre%istoria: la gestacin de la 12. /n resumen de los acontecimientos !ue llevaron al descubrimiento de la RMN en fase condensada ser a incompleto sin la inclusi&n de su pre$istoria, caracteri)ada por notables esfuer)os experimentales destinados a demostrar primero y a detectar despus la existencia de un momento angular de spin asociado a los n%cleos, con su correspondiente momento magntico" Los conceptos de spin electr&nico y del momento magntico del electr&n fueron experimentalmente confirmados al comien)o de los a.os veinte por medio del famoso experimento de Itern4Jerlac$, en el cual se separaron $aces de tomos en un campo magntico in$omogneo de acuerdo con la orientaci&n del momento magntico de sus electrones desapareados" >acia finales de los a.os veinte, (auli demostr& claramente !ue muc$as de las caracter sticas de la estructura $iperfina de los espectros at&micos %nicamente se pod an explicar si determinados n%cleos at&micos presentaban tambin spin y su correspondiente momento magntico" (osteriores refinamientos del experimento de Itern4 Jerlac$ lo confirmaron en el a.o +G--, y proporcionaron unos primeros valores aproximados del momento magntico del prot&n" Ie $ab a formulado, as , la predicci&n de la existencia de un spin nuclear para ciertos tomos, incluyendo el $idr&geno, !ue era preciso medir con exactitud" @Li Cn +G-? el f sico B"H" Jorter intent& medir la resonancia magntica de n%cleos de en LiBl s&lido mediante tcnicas microcalorimtricas, pero sin resultado" 5ampoco consigui& +> detectar la resonancia de en cristales de alumbre potsico $idratado" (osteriormente lo volvi& a intentar con Li3 s&lido, nuevamente sin xito" >oy sabemos !ue una posible causa de su fracaso es !ue el Li3 cristalino de gran pure)a presenta una rela'aci&n longitudinal anormalmente lenta, de modo !ue se re!uieren tiempos anormalmente elevados para !ue se polarice la muestra una ve) sumergida en el campo magntico y se pueda, as , medir su resonancia magntica nuclear" 3u precisamente Jorter el primero en usar por escrito la expresi&n .uclear 2agnetic 1esonance en el t tulo de uno de sus art culos, publicado en +GK<, pero siempre atribuy& esta expresi&n a 7"7" Rabi" Cn +G-@ 0"J" LasareL y L"M" Ic$ubniNoL demostraron !ue, a ba'as temperaturas, los momentos magnticos nucleares contribuyen apreciablemente a la susceptibilidad magntica esttica observada en el $idr&geno s&lido"

Cl experimento crucial en la pre$istoria de la RMN lleg& en +G-G, cuando 7"7 Rabi y colaboradores dise.aron y probaron una importante me'ora de las tcnicas de $aces !ue permiti&, por primera ve), la observaci&n de resonancia magntica nuclear, aun!ue en $aces moleculares (carentes de spin electr&nico), y !ue constituy& la primera medici&n del momento magntico del prot&n" #dems de $acer pasar un $a) de molculas por un campo magntico in$omogneo (para deflectarlas) y por un segundo campo tambin in$omogneo pero de signo opuesto (para reenfocarlas), Rabi intercal& entre ambos campos in$omogneos un tercer campo, variable pero $omogneo" #l irradiar la regi&n central (campo $omogneo) con radiaci&n electromagntica de frecuencia constante, dentro del rango de la radiofrecuencia, y reali)ar un barrido del campo magntico central $omogneo, el $a) result& inalterado excepto para un muy estrec$o rango de valores del campo central $omogneo" (ara los valores de este estrec$o rango el $a) diverg a y ya no se produc a el reenfo!ue sobre el detector" >ab a nacido la resonancia magntica nuclear, aun!ue Rabi la denomin& espectroscop a de radiofrecuencia" (or este importante descubrimiento se concedi& a Rabi el (remio Nobel de 3 sica de +GKK" (oco despus de este brillante experimento, y usando el mismo tipo de instrumento, Olvare) i 0loc$ midieron el momento magntico del neutr&n, pero la guerra mundial introdu'o un parntesis en estas investigaciones fundamentales sobre RMN" No fu sino en +GKA, acabada la guerra, !ue dos grupos de Cstados /nidos, traba'ando independientemente, intentaron nuevamente medir resonancia magntica nuclear en materia condensada, pese a la falta de xito anterior de Jorter" /no de estos dos grupos, dirigido por C"M" (urcell, traba'aba en la /niversidad de >arvard, Massac$usetts" Cl otro, dirigido por 3elix 0loc$, lo $ac a en la /niversidad de Itanford, Balifornia" #mbos investigadores no se conoc an personalmente, pese a !ue 3" 0loc$ $ab a pasado los a.os de la guerra traba'ando en proyectos militares precisamente en >arvard" Ieg%n el relato de M"J" (roctor, disc pulo de 0loc$ !ue descubri& el fen&meno del despla)amiento !u mico, fu 'ustamente durante los a.os de guerra pasados en >arvard cuando 0loc$ desarroll& tran!uilamente (en casa, traba'ando de noc$e) sus ideas sobre RMN en fase condensada" (or este motivo fu posible efectuar con xito el experimento a los pocos meses de su retorno a Itanford, acabada la guerra" 12. en ase condensada: el nacimiento de la 12. La primera detecci&n de resonancia magntica nuclear en materia condensada fu conseguida por el e!uipo de (urcell, 5orrey y (ound en >arvard, poco antes de las Navidades de +GKA (su art culo se recibi& en P%#s. 1ev. el d a de Noc$ebuena)" Cl experimento consisti& en situar un blo!ue de parafina s&lida, de PA, mL, en una cavidad resonante de radiofrecuencia, alimentada a <G"P M>) por medio de un circuito apropiado" Cste con'unto se $allaba dentro de un electroimn de campo magntico variable" La se.al de salida del resonador se e!uilibr& con una parte de la se.al procedente de la fuente de radiofrecuencia, y al proceder a un barrido del campo magntico se observ& una aguda absorci&n por resonancia para un valor del campo de @+,, gauss" Cste experimento de detecci&n directa de la absorci&n resulta e!uivalente a los intentos infructuosos de Jorter unos pocos a.os antes" Cs interesante se.alar !ue al planificar su experimento (urcell desconoc a el fracaso anterior de Jorter" Buando Rabi supo lo !ue (urcell !uer a $acer, le $i)o notar !ue Jorter no lo $ab a conseguido, pero (urcell decidi& !ue los preparativos estaban ya demasiado avan)ados para renunciar, y sigui& adelante con lo !ue, en definitiva, acabar a siendo la primera detecci&n de RMN en materia condensada" 6e manera completamente independiente, el e!uipo de 3elix 0loc$ en Itanford consigui&, a fines de diciembre de +GKA, detectar tambin se.ales de RMN de prot&n, utili)ando un

e!uipo experimental muy diferente y sobre una muestra de agua" Cn lugar de un %nico circuito de radiofrecuencia, en el experimento de 0loc$ se utili)aron dos bobinas, mutuamente ortogonales, una para la excitaci&n y la otra como detector" 5ambin en este caso, las dos bobinas se $allaban dentro de un fuerte campo magntico variable, perpendicular a ambas bobinas, y la elegante aproximaci&n de 0loc$ preve a detectar sobre la segunda bobina la fuer)a electromotri) inducida por la precesi&n de la magneti)aci&n nuclear de la muestra, provocada por la primera bobina al producirse la absorci&n" (or este motivo, en Itanford el fen&meno se denomin& inicialmente inducci&n nuclear" Resulta interesante seguir el relato de uno de los investigadore participantes" 6ice M"C" (acNard* 3acia el cuarto trimestre de 1456, en 7tan ord, $a8o la direccin del Pro . Bloc%, nos %a$amos propuesto la tarea de detectar las se(ales de induccin nuclear 9nom$re que en aquella poca d"$amos a la 12.) de los protones en ase condensada. / este in 1ussell :arian, que tam$in perteneca al -epartamento, constru# un electroim"n con una cavidad que, llena de agua, era nuestra muestra de protones en ase condensada. La $o$ina de e&citacin # la de deteccin eran mutuamente ortogonales entre s, # tam$in lo eran con el campo magntico. La uente de radio recuencia era mu# parecida a uno de los radares utili!ados durante la guerra. Pero el campo magntico era demasiado in%omogneo. Pese a todos nuestros es uer!os, no conseguamos ver la se(al de induccin nuclear en la pantalla del osciloscopio, de modo que propuse un mtodo consistente en reali!ar un $arrido r"pido de la corriente del im"n con la esperan!a de que, en algn instante, el campo magntico # la radio recuencia tendran la relacin precisa para dar la se(al esperada. ;ras diversos intentos, unos das despus de .avidad, %all"ndome solo en el su$terr"neo del la$oratorio, consegu ver la se(al deseada al apagar la corriente del electroim"n 9ciertamente, el m"s r"pido $arrido imagina$le). Bomo es de suponer, la excitaci&n en Itanford fu mxima, y rpidamente se escribi& un art culo describiendo el nuevo fen&meno, sin tener conocimiento del art culo de (urcell sobre el mismo tema" Cl art culo de 3" 0loc$, M" >ansen y M"C" (acNard lleg& a P%#s .1ev. el <G de enero de +GK?, y ambos art culos se publicaron en el mismo n%mero de la revista" (ocos a.os despus, en +GA<, (urcell y 0loc$ recibieron con'untamente el (remio Nobel de 3 sica por su descubrimiento, ya definitivamente conocido como resonancia magntica nuclear (RMN)" Resulta interesante indicar !ue, a diferencia de (urcell, 0loc$ conoc a perfectamente los traba'os infructuosos de Jorter, pero cre a tener una explicaci&n para su fracaso" 0loc$ supon a !ue el experimento de Jorter $ab a fallado por!ue el tiempo de rela'aci&n ;1 era muc$o ms largo de lo !ue se imaginaba" (ara superar esta dificultad, 0loc$ propuso a sus colaboradores !ue pusieran su muestra de agua dentro del fuerte campo magntico del electroimn durante unos cuantos d as, antes de intentar las mediciones, para permitir !ue el sistema de spins nucleares llegara al e!uilibrio trmico" #s se $i)o, y tras poner la muestra 0loc$ se marc$& a es!uiar durante unos d as" #l regresar al laboratorio, tras diversos intentos infructuosos, finalmente se logr& medir la se.al de resonancia, pero tambin se pudo determinar !ue el tiempo de rela'aci&n era muc$o ms corto de lo supuesto" Cn realidad, Qs&lo eran precisos unos segundos, en lugar de d as, para establecer el e!uilibrioR La brillante concepci&n de 0loc$ sobre la resonancia magntica nuclear, tanto desde el punto de vista te&rico como desde el experimental, $a sido confirmada por sus numerosas aportaciones durante el resto de la dcada de los a.os cuarenta" (ero uno de los

aspectos ms importantes le pas& por alto* la gran disminuci&n de la anc$ura natural de las se.ales RMN en l !uidos causada por sus movimientos trmicos, convincentemente demostrada por 0loembergen, (urcell y (ound en >arvard, en su art culo publicado en +GKP" >asta conocer en Itanford el contenido de este art culo, la gran anc$ura de banda de las se.ales RMN observadas por el e!uipo de 0loc$ se atribuy&, err&neamente, a su anc$ura natural, causada por las interacciones dipolo4dipolo descritas por 0loc$ en s&lidos" Cn realidad, para muestras l !uidas, esta gran anc$ura de banda era debida a la gran in$omogeneidad de campo magntico de todos los imanes disponibles en Itanford durante a!uellos a.os iniciales" -escu$rimientos de gran signi icacin qumica: la primera in ancia de la 12. Cl per odo +GKA4+GAA est marcado por el gran ritmo de los descubrimientos efectuados por los f sicos dentro del campo de la RMN" 7nicialmente, tras el descubrimiento de (urcell y 0loc$, tanto sus grupos como otros investigadores se dedicaron a medir los momentos magnticos (o, ms precisamente, las constantes magnetog ricas) de todos los elementos (o is&topos) todav a no estudiados, con el ob'etivo de buscar relaciones entre la magnitud medida y la estructura nuclear" Iubyacente en este mtodo se encontraba la $ip&tesis de !ue el momento magntico de un determinado n%cleo (o is&topo) presentar a siempre el mismo valor, independientemente de cul fuera el compuesto utili)ado para la determinaci&n" #l me'orar la calidad de los dispositivos experimentales fu posible aumentar la resoluci&n de las se.ales" Csto condu'o al descubrimiento del despla)amiento !u mico, de evidente trascendencia en !u mica, y consistente en !ue las se.ales de una determinada especie isot&pica presentan frecuencias !ue dependen de la especie !u mica sobre la cual se efect%an las determinaciones" Cste descubrimiento fu efectuado en Itanford por (roctor y Eu, dos '&venes estudiantes postdoctorales del grupo de 0loc$" Iigamos el relato de M"J" (roctor* ;ras %a$er dise(ado # construido un espectrmetro 12. de campo mu# %omogneo, que constitu# mi tesis doctoral en 7tan ord, el Pro . Bloc% nos encarg a <u 9recin graduado en =%io 7tate 0niversit#) # a m la tarea de locali!ar las resonancias # medir los momentos magnticos # los spins de cuantos istopos esta$les uera posi$le, con el o$8etivo de completar la ta$la peridica en un a(o, apro&imadamente. >n el curso de estos tra$a8os, al tocarle el turno al nitrgeno como ncleo de re erencia, nos propusimos 15. medir su momento magntico con gran precisin 9creo recordar que la resonancia de %a$a sido medida el a(o anterior por Pound en 3arvard). 1ecuerdo que u al almacn de qumica # anduve re$uscando un compuesto que diera la resonancia m"s uerte posi$le. Pronto eleg el rasco marcado .35.=+, #a que o$viamente %a$a de ser mu# solu$le en agua #, adem"s, al tener dos nitrgenos %a$a de dar una se(al mu# uerte. ;ras preparar una solucin concentrada e introducirla en el im"n, <u # #o aguard"$amos e&pectantes 8unto al im"n, esperando que el peque(o motor de relo8 que cam$ia$a gradualmente la recuencia del espectrmetro %iciera aparecer la resonancia. /s u, # apareci una magn ica se(al de resonancia en la cinta que registra$a el espectro. Pero mientras mir"$amos, para nuestro asom$ro, apareci una segunda se(al de igual amplitud que la primera. ?ncrdulos, repetimos el e&perimento diversas veces para descartar cualquier posi$le error instrumental, siempre con igual resultado. 7u$imos los registros al despac%o del Pro . Bloc%, que se mostr mu# interesado, e inmediatamente nos pusimos a discutir posi$les causas para este enmeno. 7eleccionamos dos posi$les e&plicaciones, una muc%o m"s interesante que la otra. La m"s interesante era la posi$le e&istencia de ismeros nucleares esta$les, de la misma masa, con propiedades ligeramente distintas.

@reamos %a$er %ec%o un descu$rimiento sico trascendental. Pero era preciso descartar la segunda posi$le causa, sin ningn inters para nosotros, consistente en algn enmeno qumico, tal como un apantallamiento diamagntico del ncleo, dependiente de su entorno qumico, que pudiera a ectar la densidad electrnica del ncleo de nitrgeno. Para descartar esta segunda # poco interesante %iptesis, Bloc% pidi al Pro . 7egra una 16.. peque(a muestra de 7i las dos resonancias no aparecan en una muestra de nitrato 16., amnico preparada a partir de o$viamente la e&plicacin %a$a de ser nuclear, como 16. nosotros dese"$amos, # no simplemente qumica. La conversin de la muestra de en nitrato amnico tard tres semanas, mu# angustiosas para todos nosotros. Ainalmente la muestra lleg #, a las pocas %oras, %a$amos vuelto a o$servar las dos se(ales de igual intensidad, proporcionalmente con la misma separacin entre am$as. Por tanto, nos vimos or!ados a admitir que se trata$a de un eno8oso e ecto meramente qumico, que poda llegar a impedirnos progresar r"pidamente en nuestra carrera. .uestro artculo se pu$lic en 1460 en orma de carta, # por casualidad en el mismo nmero de ($ys" Rev" que contena un artculo de B.@. -icCinson, de 2?;, que descri$a el mismo enmeno 14A. para el ncleo de 6e este modo se descubri& el despla)amiento !u mico, sin el cual la RMN no tendr a $oy gran utilidad anal tica" E fu precisamente durante sus estudios para clarificar las causas del despla)amiento !u mico cuando JutoLsNy, a principios de +GA,, descubri& el acoplamiento escalar spin4spin" Iigamos su relato* / comien!os de 1460 nos interesa$a investigar despla!amientos qumicos en lquidos, # 14A. seleccionamos el ncleo de ?nicialmente pro$"$amos cualquier compuesto luorado que nos ca#era en las manos, %asta que el 'D de a$ril de 1460 conseguimos resolver las se(ales de un tri luorometil$enceno luorado tam$in en el ncleo arom"tico. >sto nos motiv muc%o, # nos llev a pensar de qu modo podramos correlacionar los despla!amientos qumicos con la estructura molecular. ?n luenciado por el li$ro de Linus Pauling, 5$e Nature of t$e B$emical 0ond, pens que el despla!amiento qumico, como enmeno elctrico, de$era estar relacionado de algn modo con la naturale!a del enlace qumico. Este, a su ve!, depende de la naturale!a de los "tomos que se enla!an, de modo que decid estudiar los luoruros $inarios sencillos, eleccin que result ser mu# a ortunada. >l da F de septiem$re de 1460, en nuestro la$oratorio, @. 3o mann o$serv por primera 14A ve! una lnea do$le en la resonancia de de una peque(a muestra de PA+ que l mismo %a$a sinteti!ado como parte de nuestro estudio de los despla!amientos qumicos del lor. @omo la sntesis se e ectu por luoracin de P@l+, decidimos que la do$le lnea era de$ida a la presencia de impure!as de P@lA' o P@l'A. Pero, tras puri icar la muestra, el par de se(ales permaneca inmuta$le. >l mismo resultado se o$tuvo con una muestra de PA+ preparada por otra ruta. ;am$in en una muestra de PA6 se o$servaron dos $andas, # en este caso la e&plicacin que pareca m"s ra!ona$le era que se trata$a de despla!amientos qumicos di erentes para los A ecuatoriales # los apicales. Ainalmente, +1P en mar!o de 1461, al e&aminar el espectro de de P=@l'A, se o$serv un do$lete 1:1 que me convenci de que %a$amos %allado un nuevo tipo de interaccin internuclear

relacionada con los estados de spin de am$os ncleos. >n e ecto, el espectro de @3+=PA' present un triplete 1:':1, tal como #o %a$a predic%o.

+1P

de

#s se descubri& el segundo gran parmetro de la RMN, sin el cual carecer a de la gran utilidad anal tica !ue $a alcan)ado" Las me'oras instrumentales de a!uellos primeros a.os permitieron muy pronto la observaci&n de diferentes despla)amientos !u micos de prot&n en compuestos orgnicos (el primero fu el etanol), en forma de lo !ue por a!uel entonces se conoc a como se.ales Dbien resueltasD, de intensidad proporcional al n%mero de protones" Cl procedimiento $abitual para la observaci&n de l neas de RMN en a!uellos tiempos consist a en variar la frecuencia (o, ms a menudo, el campo magntico) a travs de la condici&n de resonancia, recoger las se.ales de deflexi&n en un osciloscopio y registrarlas" Cste mtodo, denominado de onda continua (BM, continuous Gave) $a sido el generalmente utili)ado durante muc$os a.os, por!ue permite la observaci&n secuencial de cada una de las muc$as l neas de absorci&n de multipletes comple'os, pero se re!uiere !ue el barrido sea muy lento para permitir el registro sin distorsiones de las bandas, y ello $a exigido considerables me'oras en la estabilidad de los instrumentos, ya !ue cada registro de un espectro suele re!uerir unos die) minutos" 0loc$ sugiri& desde el inicio un procedimiento alternativo de excitaci&n mediante un muy corto pulso de radiofrecuencia" Cn +GKG C" >a$n demostr& !ue este procedimiento, efectivamente, era capa) de inducir una se.al (376, ree induction deca#) correspondiente a la libre precesi&n de la inducci&n nuclear" #dems demostr& !ue empleando secuencias de pulsos se generaban ecos de spin !ue conten an informaci&n adicional sobre el sistema" Los mtodos de pulsos desarrollados por >a$n, !ue son la base de la RMN actual, se convirtieron en los preferidos por los f sicos para el estudio del comportamiento dinmico de la rela'aci&n de sistemas sencillos, a menudo de una %nica l nea en el espectro RMN, talos como, p"e'", las muy anc$as bandas de absorci&n de muestras s&lidas" (or otra parte, en el estudio de la rela'aci&n, en +GA- se descubri& el efecto nuclear Sver$auser (NSC), si bien sus aplicaciones !u micas tuvieron !ue esperar algunos a.os" 6e este modo, $acia principios de los a.os cincuenta, toda la teor a de la RMN $ab a sido completamente desarrollada por los f sicos, !ue progresivamente fueron perdiendo inters por un fen&meno ya tan bien conocido en sus principios fundamentales como la RMN" E, de modo casi natural, el inters por la RMN se despla)& de la f sica a la !u mica, gracias a sus numerosas aplicaciones" Cn palabras de M"C" (acNard, Hc%emists got t%e point ver# quicCl#, t%anCed t%e p%#sicists, and tooC overH. Primeras aplicaciones qumicas: la preadolescencia de la 12. Cl grupo de f sicos dirigido en Itanford por los profesores 0loc$ y >ansen estaba constituido, entre otros, por personas como Russell 2arian, Martin (acNard, M"J" (roctor, M"#" #nderson y otros !ue en +GKP fundaron una nueva empresa, denominada 2arian #ssociates, en (alo #lto, Balifornia, no muy le'os del campus de Itanford" (ara fundarla se vieron obligados a de'ar la /niversidad de Itanford, olvidar sus c&modos salarios e incluso vender sus casas" La segunda l nea de productos comerciali)ados por la nueva empresa era el espectr&metro de RMN" Russell 2arian estaba convencido de su gran valor, pero nadie en la empresa sab a demasiado bien para !u podr a servir" Cra el a.o +GA-, y 2arian $i)o insertar anuncios del nuevo producto en revistas de !u mica, como por e'emplo )/@7, con el t tulo H.21 at GorCH. Cs interesante rese.ar !ue en +GAA 2arian

ya $ab a vendido tres espectr&metros RMN de alta resoluci&n, a K, M>) para prot&n, precisamente a tres empresas del ramo de la !u mica (>umble Sil, 5exasT 6u(ont, 6elaLareT y I$ell 6evelopment, Balifornia)" 7nvestigadores de la talla de M"C" (acNard, H"N" I$oolery o >"C" Meaver, aparte de sus funciones como directivos de 2arian #ssociates, proporcionaban nuevas aplicaciones en un n%mero creciente de campos de la !u mica, entre los !ue no tard& en aparecer la !u mica orgnica" Cn contraste con el casi medio siglo transcurrido desde el descubrimiento de la espectroscop a infrarro'a (+G,,) $asta la introducci&n del primer espectr&metro 7R comercial (+GK?), la rapide) del desarrollo de la RMN es muy c$ocante" Iin duda, uno de los motivos es el clima de base tecnol&gica y la aceptaci&n de innovaciones !ue $ab a en a!uellos a.os postblicos" (ero tambin tuvo gran importancia la fuerte interacci&n entre una industria electr&nica de gran base tecnol&gica (2arian) y el grupo puntero de investigadores de la RMN comandado por 0loc$ en la /niversidad de Itanford" #!uellos primeros espectr&metros RMN a K, M>) para prot&n eran aparatos muy primitivos" Cra preciso registrar el espectro prot&nico entre , y +, ppm durante unos A4+, minutos, pero no era posible efectuar registros ms lentos a causa de la deriva aleatoria del campo magntico, !ue podia llegar a ser dominante incluso ba'o el control de los denominados superestabili)adores de campo" Cspecialmente cr tico era el proceso de a'uste de la $omogeneidad del campo magntico (field s%imming), !ue era preciso efectuar para cada muestra al ob'eto de obtener la mxima resoluci&n" Cntre unas cosa y otras, la obtenci&n de espectros RMN era una tarea larga y delicada, reservada a buenos especialistas instrumentales" (ero la recompensa por la obtenci&n de buenos espectros era muy importante" Los !u micos orgnicos pronto comprobaron !ue la espectroscop a RMN era la tcnica ideal para la elucidaci&n o comprobaci&n estructural de molculas de peso molecular moderado" Basi todos los compuestos de la poyata daban nuevos e interesantes datos espectrales de utilidad general" Cn +GAP apareci& el clsico art culo de I$oolery y Rogers sobre el estudio de esteroides por RMN, en el !ue se demostraba !ue incluso a K, M>) los despla)amientos !u micos de los metilos angulares eran de gran valor diagn&stico" 5ambin en a!uellos a.os se publicaron numerosos datos de biomolculas, tales como alcaloides, a)%cares, porfirinas y otros compuestos" (ronto Uarplus demostr& !ue las constantes de acoplamiento vicinales a tres enlaces se pod an correlacionar con los ngulos de torsi&n, y esto di& origen a numerosos estudios conformacionales, especialmente en el campo de los a)%cares" >acia finales de la dcada, en +GAG, aparecieron el clsico libro de HacNman, en el !ue se correlacionaban los datos de RMN con la estructura molecular, y el pe!ue.o op%sculo de Roberts, en el !ue se efectuaba una breve introducci&n de los principios te&ricos bsicos con argumentos sencillos, al alcance de los !u micos orgnicos" #parecieron en el mercado instrumentos comerciales de imn permanente, a ?, M>) para prot&n, con muc$a ms estabilidad y resoluci&n !ue los primeros aparatos comerciales, y con los cuales los espectros eran muc$o ms reproducibles" Cn +G?+4+G?< se instalaron en Cspa.a los dos primeros espectr&metros RMN" Cl primero de ellos se instal& en Madrid, ba'o la supervisi&n del (rof" Manuel Rico, de cuyo magisterio nos $emos venido beneficiando todos cuantos nos $emos dedicado a la RMN en Cspa.a" Cl segundo se instal& muy poco despus en 0arcelona, ba'o la supervisi&n del (rof" Hosep Bastells, introductor de la RMN en Batalunya y !ue fu mi director de tesis" Recuerdo bien !ue durante mi tesis utilic intensivamente este segundo instrumento, un (erNin4Clmer R4+,, a ?, M>), !ue re!uer a un m nimo de ?,4+,, mg de muestra s&lida, disuelta en BBlK, para compuestos de peso molecular inferior a -,,, a menos !ue la

muestra fuera l !uida, en cuyo caso se usaba el l !uido puro para maximi)ar las se.ales" = tempora, o moresI ;cnicas de pulsos # trans ormacin de Aourier: la adolescencia de la 12. La estabilidad y la fiabilidad de la electr&nica fueron me'orando la calidad de los espectr&metros RMN durante toda la dcada +GAA4+G?A" Cspecialmente importante fu el establecimiento de campos estables (con electroimn) de <-"A NJ, !ue permitieron medir prot&n a +,, M>) empleando cantidades de muestra inferiores a los +,, mg" La tecnolog a de los imanes superconductivos, refrigerados por $elio l !uido, $i)o posible finalmente la construcci&n de imanes permanentes de solenoide superconductor con campos estables muc$o ms elevados (primeros espectr&metros de prot&n a <<, M>), 2arian >R4<<,, en +G??)" Bon estos espectr&metros de campo alto fu posible culminar (el (rof" Manuel Rico, en Madrid, ya $ab a iniciado sus traba'os con la ribonucleasa Qa G, M>)R) el estudio de biopol meros tales como polipptidos, prote nas, etc" (ero todav a era preciso obtener todos los espectros mediante el lento barrido de campo (o de frecuencia) caracter stico del mtodo de la onda continua" 6e todos modos, la gran dispersi&n de frecuencias prot&nicas alcan)able con imanes superconductores permiti& la aparici&n, en +G?@, de un primer estudio detallado de prote nas por RMN" Cn +G?? lleg& tambin la primera gran revoluci&n metodol&gica instrumental de la RMN, veinte a.os despus de su descubrimiento, por parte de uno de sus primeros investigadores (Meston #" #nderson) y de un 'oven sui)o (Ric$ard R" Crnst) todav a poco conocido, !ue por a!uel entonces traba'aba en 2arian, (alo #lto" Ie trata del mtodo de pulsos y transformaci&n de 3ourier, $oy universalmente utili)ado por todos los espectr&metros, !ue ya $ab a sido investigado por >a$n en +GA," La gran venta'a de este mtodo es !ue permite excitar simultneamente, con un %nico pulso de radiofrecuencia de gran intensidad y de muy corta duraci&n (t picamente inferior a +, 8s), todos los protones de la muestra, independientemente de su despla)amiento !u mico, sin necesidad de efectuar un barrido de frecuencia" La respuesta transitoria del sistema (376) consiste en la aparici&n de una inducci&n nuclear, en forma de magneti)aci&n macrosc&pica transversa, !ue precesiona perpendicularmente al campo fi'o del imn, mientras se va amortiguando por la acci&n de los mecanismos de rela'aci&n" Bomo en los experimentos de 0loc$, esta inducci&n nuclear se puede medir gracias a la fuer)a electromotri) !ue induce en la bobina del detector, y suele tener una duraci&n del orden de un segundo" #dems, se puede almacenar digitalmente en la memoria de un ordenador y, tan pronto como se anula, inmediatamente se puede volver a enviar un pulso a la muestra, sumndose co$erentemente las sucesivas 376s en la memoria del ordenador" Csto permite me'orar en dos o tres &rdenes de magnitud la relaci&n se.al4ruido y ampliar as los mbitos de aplicaci&n de la RMN" La transformaci&n de 3ourier de esta 376, operaci&n matemtica !ue tambin reali)a digitalmente el ordenador, proporciona un espectro con el mismo formato y la misma informaci&n !ue si se $ubiera obtenido por onda continua, pero en muc$o menos tiempo" #s , durante los die) minutos $abitualmente necesarios para el registro de un %nico espectro por onda continua, el mtodo de pulsos puede sumar un total de ca. ?,, 376s" (ero es !ue, adems, la se.al de cada una de estas 376s es muc$o ms intensa !ue la de un espectro convencional de onda continua para la misma concentraci&n de muestra" >asta esta revoluci&n, las aplicaciones prcticas de la RMN se $ab an limitado a los muy +>, +G3, -+( pocos is&topos de elevada abundancia natural y de spin +/<, principalmente +GA(t" y 6esgraciadamente, esto excluye n%cleos tan abundantes e importantes como el

carbono (+<B, GP"GV) o el ox geno (+?S, GG"PV), ya !ue carecen de spin (7 9 ,)" (ero la aparici&n de este art culo de Crnst y #nderson abri& el campo de la RMN multinuclear, al posibilitar la suma co$erente, en poco tiempo, de centenares o miles de 376s correspondientes a n%cleos de ba'a abundancia natural, $asta entonces s&lo accesibles para molculas isot&picamente enri!uecidas" Cntre los n%cleos de mayor inters !ue la tcnica de pulsos y transformaci&n de 3ourier puso al alcance, $ay !ue mencionar en +-B +AN <> primer lugar al (+"+V de abundancia natural), el (,"-@V), el o deuterio (,",+AV) y, en general, todos los elementos de la tabla peri&dica" Naturalmente, tambin permiti& la obtenci&n en poco tiempo de excelentes espectros de prot&n de compuestos de estructura complicada utili)ando muestras de + mg o menos" Los primeros espectr&metros comerciales !ue incorporaron la nueva tcnica fueron comerciali)ados por la firma alemana 0ruNer, y estaban en el mercado $acia +G@," La combinaci&n de imanes superconductivos de campo permanente cada ve) ms alto y el mtodo de pulsos y transformaci&n de 3ourier, con su ya inseparable ordenador integrado, caracteri)& el incremento constante de la sensibilidad de la RMN durante los primeros a.os setenta" 5ambin permiti& convertir la RMN multinuclear en una +-B $erramienta prctica de investigaci&n estructural" #s , los espectros de a abundancia natural pronto se convirtieron en completamente rutinarios" Bon grados de dificultad variables, tambin muc$os n%cleos metlicos fueron accesibles en la prctica por primera ve)" Stra caracter stica de los avances producidos durante los a.os setenta fu el dise.o y la utili)aci&n de secuencias multipulso, con el ob'etivo de aumentar a%n ms la relaci&n se.al/ruido (p"e'", mediante transferencia de polari)aci&n) o de singulari)ar el tipo de informaci&n espectral producida (p"e'", espectroscop a diferencial, determinaci&n de NSCs, excitaci&n selectiva, etc)" Ii para la obtenci&n de un espectro convencional por onda continua se re!uiere simplemente un barrido de frecuencias, registrando la intensidad absorbida a cada frecuencia, con el mtodo de pulsos basta excitar la muestra con un %nico pulso de corta duraci&n, y acto seguido recoger y almacenar la 376 !ue, por transformaci&n de 3ourier, proporcionar un espectro idntico al anterior" (ero nada impide librar ms de un pulso durante la excitaci&n, como ya lo $ab a efectuado >a$n al estudiar los ecos de spin" #s , variando el n%mero de pulsos, su duraci&n, su fase, los per odos entre ellos, los n%cleos a los !ue excitan, su selectividad (duros o blandos), etc, se abri& paso una gran variedad de secuencias multipulso %tiles para la obtenci&n de informaciones estructurales espec ficas, $oy d a ya totalmente rutinarias, y !ue se desarrollaron durante los a.os setenta" 5ambin en esos a.os se perfeccionaron los estudios de muestras s&lidas mediante RMN de alta resoluci&n, con la introducci&n de mtodos de desacoplamiento de alta potencia y especialmente la rotaci&n de ngulo mgico" 3inalmente, tambin en los setenta, Lauterbur inici& un ambicioso programa de locali)aci&n espacial de se.ales RMN, !ue l denomin& )eugmatograf a, !ue acabar a siendo la base de la actual tcnica de obtenci&n de imgenes mdicas por RMN" 12. multidimensional: la primera 8uventud de la 12. 2emos, pues, !ue desde el descubrimiento (+GK?) de la RMN $asta la primera revoluci&n metodol&gica (pulsos y transformaci&n de 3ourier, +G??) $ab an transcurrido veinte a.os" La segunda gran revoluci&n metodol&gica, la RMN bidimensional (<6 NMR) tard& muc$o menos en llegar* conceptualmente fu formulada como posibilidad te&rica por H" Heener,

en uno de los unpu$lis%ed papers ms citados del mundo, durante el congreso #mpWre celebrado en +G@+ en 0asNo (ol'e, en un pa s todav a llamado Eugoslavia" Binco a.os ms tarde, el e!uipo de Crnst, ya definitivamente instalado en la C5> de XYric$, $ab a completado la teor a de la <6 NMR, $ab a incorporado a los espectr&metros las modificaciones necesarias y $ab a aplicado los mtodos experimentales bidimensionales, con e'emplos concretos y aplicaciones prcticas, todo ello publicado entre +G@- y +G@?" Bon la llegada de la segunda dimensi&n, nuevamente la RMN revelaba la existencia de un nuevo territorio inexplorado para investigar* correlaciones $omo4 y $eteronucleares, espectroscop a H, procesos de intercambio !u mico o topol&gico, transferencias de polari)aci&n, secuencias multipulso, excitaciones selectivas y un largo etctera" Iignificativamente, uno de los nuevos campos a$ora abiertos, gracias a la gran simplicidad de los espectros bidimensionales, fu el estudio de transiciones pro$ibidas, en particular las bicunticas" Cn palabras del propio Crnst* H@%emists Gill ind great e&citement in t%e or$idden ruits o spectroscop#H. Cl principio en !ue se basa la RMN bidimensional es sobradamente conocido por esta audiencia, y es conceptualmente muy sencillo" Cn RMN monodimensional se excita el sistema de spins y se mide la magneti)aci&n o se.al I en funci&n de la variable tiempo" Ie obtiene as la funci&n temporal I(t), o 376, !ue se debe monitori)ar a intervalos constantes, y cuya transformaci&n de 3ourier proporciona el espectro 3(;), en funci&n de la frecuencia" (ero si se somete el sistema de spins a dos perturbaciones, separadas en el tiempo por un periodo incrementable t+, tras medir la magneti)aci&n a lo largo del tiempo (!ue a$ora se denomina t<) se obtiene una se.al I(t+,t<) !ue es funci&n de ambas variables temporales" (or doble transformaci&n de 3ourier se obtiene un espectro bidimensional, 3(;+,;<), en el cual la intensidad de la se.al ser funci&n simultneamente de dos variables frecuencia" Bada una de estas dos variables frecuencia est relacionada con el comportamiento del sistema durante el correspondiente tiempo (;+ con el tiempo t+, ;< con el tiempo t<), as como con la naturale)a de las dos perturbaciones introducidas" Iurgen de este modo espectros de correlaci&n, tanto $omonucleares (BSIE) como $eteronucleares (>C5BSR, >MFB, >IFB, >M0B), pero tambin espectros H4resueltos, de doble cuanto, de intercambio (CZIE) o de rela'aci&n (NSCIE, >SCIE), y un largo etctera" 5odos ellos constituyen poderosos mtodos !ue ayudan a la asignaci&n estructural o a la investigaci&n de procesos de escala de tiempo adecuada" 6esde la introducci&n de estas tcnicas bidimensionales el concepto se $a extendido a +AN, tres y $asta cuatro dimensiones" Bon la ayuda del marca'e isot&pico (+-B y principalmente) y por medio del uso de tcnicas de ingenier a gentica (6N# recombinante) se puede disponer de prote nas c&modamente biosinteti)adas a partir de aminocidos doblemente marcados con ambos is&topos" Los resultados son totalmente espectaculares, especialmente gracias a la aceleraci&n en la obtenci&n de los resultados posibilitada por la selecci&n de co$erencias por medio de gradientes" La RMN da $oy una informaci&n tan precisa y fiable como la difracci&n de rayos Z para prote nas de peso molecular inferior a A,,,,, con la venta'a de !ue, al traba'ar en soluci&n, puede suministrar tambin informaci&n sobre procesos dinmicos, de gran inters para entender la funci&n biol&gica de estas macromolculas" Las me'oras instrumentales, aparecidas desde !ue en +G@A se inici& la prctica generali)ada de la RMN bidimensional, $an facilitado en gran medida la aplicaci&n de estos mtodos" 2eamos algunos e'emplos"

Cl campo magntico estable y $omogneo de los imanes superconductivos disponibles comercialmente $a ido aumentando desde los A"+@ 5 del vie'o 2arian >R4<<,, de +G??, $asta los <+"+ 5 (G,, M>) para prot&n) de los espectr&metros comerciales actuales de mayor campo" 6e $ec$o se $abla ya de la espectroscop a de J>), sin duda reservada para las aplicaciones (todav a le'anas, lamentablemente) de los nuevos materiales superconductores de alta temperatura" Cn cual!uier caso, a mayor campo magntico se tiene mayor sensibilidad, mayor dispersi&n y la posibilidad de extender las aplicaciones a casos ms dif ciles" Cl coste de estos futuros espectr&metros de J>), sin embargo, deber resultar astron&mico" Cl desarrollo de la informtica $a permitido la incorporaci&n a los espectr&metros RMN de ordenadores de gran capacidad y velocidad" #dems, el so tGare se $a dise.ado pensando en facilitar al usuario no especialista un control fcil sobre las variables instrumentales" (or otra parte, las redes informticas permiten el procesamiento o *line de los espectros en cual!uier ordenador personal o estaci&n de traba'o" Los avances en electr&nica aplicada $an permitido disponer de espectr&metros multicanal, con los cuales se pueden perturbar simultneamente diversos is&topos, usando excitaciones de radiofrecuencia precisables desde unos pocos m>) a varios N>) de amplitud de excitaci&n, con un control de fases de excitaci&n, desacoplamiento y detecci&n me'or !ue medio grado sexagesimal" Los $oy ya rutinarios mtodos de detecci&n inversa y de selecci&n de co$erencias por medio de gradientes pulsantes de campo magntico $an facilitado el dise.o y la reali)aci&n de todo tipo de experimentos estructurales y dinmicos, en una o varias dimensiones, para dilucidar cual!uier detalle de molculas orgnicas, inorgnicas o bio!u micas" (or otra parte, la RMN en estado s&lido $a experimentado grandes progresos con el desarrollo de mtodos !ue van ms all de la rotaci&n de ngulo mgico, tales como los mtodos de doble rotaci&n puestos a punto por (ines" 6e este modo se $an podido abordar por RMN los materiales s&lidos, cermicos, polimricos, etc" (ero, sin duda, es en las biociencias donde la moderna RMN tiene un futuro ms prometedor" #parte de las ya clsicas determinaciones estructurales y dinmicas de biopol meros (como las prote nas), !ue todav a $oy constituyen un reto importante en el caso de oligonucle&tidos de varias docenas de pares de bases, la RMN se $a usado ya con xito en estudios de metabolismo, tanto in vitro como in vivo, gracias a su carcter de -+( tcnica no invasiva" >ace ya treinta a.os de la observaci&n de se.ales de RMN de correspondientes a diversos metabolitos fosforilados de gran importancia, como #5(, #6(, fosfocreatina, etc" 5ambin son ya clsicos los estudios de p> intracelular monitori)ados por medio del despla)amiento !u mico de ciertas se.ales" Ie $an desarrollado mtodos de perfusi&n para el estudio de &rganos en fluidos nutrientes apropiados, antenas para el estudio de elementos de volumen cercanos a la piel en seres vivos, pulsos de profundidad predeterminada para el estudio de )onas ms internas, etc" 3inalmente, la RMN mdica, en la cual se mide casi siempre la se.al del agua, es $oy una tcnica rutinaria en los $ospitales para fines diagn&sticos" 5ambin es muy activo el campo de la espectroscop a locali)ada in vivo. Medio en broma, 0loc$ dec a !ue el primer experimento de RMN in vivo lo $ab a efectuado l mismo, en +GK?, poniendo su dedo en la sonda de su espectr&metro RMN, con lo !ue observ& una se.al de agua" E entre los !u micos orgnicos veteranos es muy

conocido un art culo de ). =rg. @%em., de los a.os sesenta, en !ue se describe el espectro de RMN de un rat&n entero y vivo" >oy, las aplicaciones de la RMN a las biociencias son de alcance cada ve) mayor, pero tambin lo son en ciencia de materiales, en geolog a (magnet&metros, sondas RMN para los po)os de petr&leo), en la industria alimentaria (!ue usa la RMN prot&nica para medir el contenido en agua) e incluso en estudios agr colas, en los !ue se puede usar la RMN como tcnica no invasiva para determinar el contenido de semillas y plntulas" @onclusin: Jse acerca la 12. a la madure!K No es muy frecuente !ue una tcnica instrumental siga siendo ob'eto de tanta investigaci&n fundamental a los sesenta a.os de su nacimiento" Cn el caso de la RMN, tras su infancia claramente marcada por la f sica, con (remios Nobel a Rabi (+GKK) y a (urcell y 0loc$ (+GA<), su adolescencia y 'uventud $an estado claramente ligadas a la !u mica, con (remios Nobel a Crnst (+GG+) y a MYt$ric$ (<,,<)" 6icen !ue la 'uventud es el per odo ms feli) de la vida" Ii en su futura madure) la RMN cae finalmente en manos de los mdicos, !ue sin duda le amputarn su segundo ad'etivo, siempre recordar con a.oran)a los agradables per odos en !ue se mantuvo unida a la !u mica"