CITOESQUELETO, MATRIZ EXTRACELULAR Y UNIONES CLULA A CLULA

El citoesqueleto es propio de las clulas eucariticas. Es una estructura tridimensional dinmica que se extiende a travs del citoplasma. Por lo tanto la idea de que el citoplasma de la clula es una masa amorfa y gelatinosa es equivocada. Esta matriz fibrosa de protenas se extiende por el citoplasma entre el ncleo y la cara interna de la membrana plasmtica, ayudando a definir la forma de la clula e interviniendo en la locomocin y divisin celular. Es decir que el citoesqueleto no slo da estabilidad a la clula como un esqueleto, sino que es tambin como el msculo interviene en el movimiento celular. Por lo tanto podramos llamarlo tambin citomusculatura. Podemos agregar que el citoesqu eleto condiciona el movimiento de las organelas del interior de la clula y tiene gran importancia metablica, dando un andamiaje a los procesos moleculares que se realizan en el citoplasma. El citoesqueleto es caracterstico de las clulas eucariontes ya que ESTA AUSENTE EN LOS PROCARIONTES. Por lo que podra ser un factor esencial en la evolucin de los eucariotas De esta forma podemos enunciar las siguientes funciones del citoesqueleto: Estabilidad celular y forma celular Locomocin celular Divisin celular Movimiento de los orgnulos internos Regulacin metablica

Sistemas de Filamentos
En los aos 1950-1960, la microscopia electrnica consigui sacar a luz tres sistemas distintos de filamentos del citoplasma. Estudios bioqumicos e inmunolgicos posteriores identificaron el conjunto especfico de protenas que caracteriza a cada sistema de filamentos. Los tres sistemas primarios de fibras que componen el citoesqueleto son: microfilamentos, microtbulos y filamentos intermedios.

Protenas Accesorias

Estos sistemas primarios de filamentos (microfilamentos, filamentos intermedios y microtbulos), estn asociados a un conjunto de protenas llamadas protenas accesorias. Las protenas accesorias cumplen distintas funciones y de acuerdo a estos roles se las clasifican en: Protenas reguladoras: regulan los procesos de alargamiento (polimerizacin) y acortamiento (despolimerizacin) de los filamentos principales. Protenas ligadoras: conectan los filamentos entre si y con distintas estructuras celulares Protenas motoras: sirven para la motilidad, contraccin y cambios de forma celulares. Tambin trasladan macromolculas y organoides de un punto a otro del citoplasma.

Microfilamentos
Son las fibras ms delgadas de 3-6 nm (nanmetros=milmillonsimas de metro= 10 -9), estn formados por la protena actina. La actina es una protena con funciones contrctiles, es tambin la protena celular ms abundante. La asociacin de estos microfilamentos de actina con la protena miosina es la responsable de la contraccin muscular. Los microfilamentos tambin pueden llevar a cabo los movimientos celulares, incluyendo desplazamiento, contraccin y citiocinesis.

Fig. 6.1- Polimerizacin y despolimerizacin de los filamentos de actina. (a) actina G, (b) nucleacin, (c) polimerizacin y despolimerizacin. La actina es la protena base de los microfilamentos. El monmero es conocido como actina G, o actina globular. En presencia de ATP, se polimeriza formando largas hlices dobles, denominadas actina F, o actina filamentosa. Para que se lleve a cabo esta polimerizacin el ATP debe convertirse en ADP, liberando la energa necesaria para el proceso. La actina, presenta polaridad, tiende a polimerizarse (alargarse) y despolimerizarse (acortarse) a gran velocidad por un extremo ms (el extremo positivo), y a realizar los mismos procesos por el otro extremo, menos (extremo negativo), a menor velocidad.

Fig. 6.2 - Esquema de una clula en movimiento. (1) Filopodios (prolongaciones digitiformes); (2) Lamelipodios (lminas citoplasmticas)

Fig. 6.3 - Distribucin de los filamentos de actina en los filopodios

Distribucin celular
1. 2. Filamentos Transcelulares (atraviesan el citoplasma en todas las direcciones). Filamentos Corticales (por debajo de la membrana plasmtica)

En las clulas epiteliales , los filamentos transcelulares transportan organoides, asociados a la protena motora miosina I. En las clulas del tejido conectivo los filamentos de actina transcelulares se llaman fibras tensoras y estn asociadas a la protena motora miosina II.

Los filamentos de actina cumplen un rol principal en la motilidad celular, decisiva en el desarrollo embrionario. En las clulas musculares los filamentos de actina no se acortan ni se alargan. La droga citocalasina B provoca la despolimerizacin de los filamentos de actina, debido a que se une a sus dos extremos y bloquea su crecimiento.

Microtbulos
Los microtbulos son tubos cilndricos de 20-25 nm de dimetro. Estn compuestos de subunidades de la protena tubulina, estas subunidades se llaman alfa y beta. Los microtbulos actan como un andamio para determinar la forma celular, y proveen un conjunto de pistas para que se muevan las organelas y vesculas. Los microtbulos tambin forman las fibras del huso para separar los cromosomas durante la mitosis y la meiosis. Cuando se disponen en forma geomtrica dentro de cilios y flagelos, son usados para la locomocin (autopropulsin) o para mover lquido circundante o partculas (motilidad).

Fig. 6.4- Polimerizacin de la tubulina a partir de las tubulinas alfa y beta Como mencionamos anteriormente la tubulina forma polmeros. La tubulina es una protena globular, de la que existen dos polipptidos distintos aunque similares, la alfa tubulina y la beta tubulina. La alfa y la beta tubulina se asocian y forman dmeros. En presencia de GTP, los dmeros de tubulina se unen y forman un tubo cuya parte central se mantiene vaca. Al igual que la actina F, los microtbulos manifiestan polaridad, un extremo tiende a la polimerizacin o despolimerizacin a mayor velocidad (extremo +) y en el otro extremo ocurre lo mismo pero a menor velocidad (extremo). Los microtbulos se organizan a partir de centros organizadores especializados, que controlan su localizacin y orientacin en cel citoplasma. El centro organizador principal en las clulas animales es el centrosoma, prximo al ncleo. El centrosoma esta formado por estructuras en forma de anillo que contiene otra tipo de tubulina, la gama tubulina. Estos anillos actuan como centros de nucleacin (crecimiento) de microtbulos. Los dmeros de tubulina se aaden al anillos de gama tubulina con una orientacin especfica, siempre el "extremo -" de cada microtbulo queda dentro del centrosoma y el crecimiento se produce por el "extremo + .

Fig. 6.5- Extremos + y - de un microtbulo Las protenas asociadas a los microtbulos reciben el nombre de protenas MAP (protenas asociadas a los microtbulos). Por su localizacin, podemos clasificarlos en: 1. 2. 3. 4. Citoplasmticos (clula en interfase) Mitticos (fibra del huso) Ciliares (en el eje de los cilios) Centriolares (en cuerpos basales y centrolos)

Los microtbulos citoplasmticos son necesarios como vas de transporte de macromolculas y organoides (vesculas, mitocondrias, etc.), intervienen dos protenas motoras quinesina y dinena. En la neurona existe otra protena motora asociada a los microtbulos, la dinamina. Tambin establecen la forma celular. En las neuronas se hallan en las dendritas y en el axn, donde son esenciales para el crecimiento de ste ltimo, que depende del alargamiento de sus microtbulos. Este alargamiento es dependiente de la protena motora dinamina, que provoca el deslizamiento de los microtbulos, unos sobre otros. En las neuronas se ha descubierto una MAP reguladora, denominada tau, que estabiliza los microtbulos. En la enfermedad de Alzheimer, caracterizada por el deterioro neuronal progresivo, esta alterado el funcionamiento normal de esta protena y por lo tanto se ve incrementada la inestabilidad de los microtbulos imposibilitando el transporte axnico. Los microtbulos mitticos movilizan los cromosomas durante la mitosis y la meiosis. Los microtbulos de cilias y flagelos crecen a partir de un cuerpo basal o cinetosoma de estructura idntica a la de un centrosoma que actua como centro de nucleacin de dmeros de alfa-beta tubulina. El cuerpo basal se encuentra por debajo de la membrana plasmtica. Existen diversas drogas que afectan a los microtbulos, por ejemplo, la colchicina que se une a las tubulinas e impide su polimerizacin, lo que en definitiva produce la despolimerizacin de los microtbulos. Tambin pueden hacerse desaparecer los microtbulos mitticos mediante el uso de las drogas vinblastina y vincristina, que actan de forma semejante a la colchicina, pero en

forma selectiva, sobre los microtbulos del huso mittico. Por lo tanto estas drogas bloquean la divisin celular. Otra droga que produce los mismos efectos es el taxol, que impide la despolimerizacin de los microtbulos, lo que induce su crecimiento descontrolado volvindose imposible la divisin celular.

Filamentos intermedios
Los filamentos intermedios tienen 10 nm de dimetro y proveen fuerza de tensin (resistencia mecnica) a la clula. Segn el tipo celular varan sus protenas constitutivas. Podemos decir que existen seis tipos de filamentos intermedios: 1) 2) Neurofilamentos (en la mayora de las neuronas). Filamentos de desmina, en el msculo.

3) Filamentos gliales, en las clulas del mismo nombre , que sirven de soporte en el cerebro, mdula espinal y sistema nervioso perifrico. 4) Filamentos de vimentina en clulas del tejido conjuntivo y en los vasos sanguneos. 5) Queratinas epiteliales, (o filamentos de queratina o tambin llamados tonofilamentos), en clulas epiteliales. 6) Laminofilamentos, forman la lmina nuclear, una delgada malla de filamentos intermedios sobre la superficie interna de la envoltura nuclear. Son los nicos que no se encuentran en el citoplasma. A diferencia de los microfilamentos y microtbulos, los filamentos intermedios al agruparse pierden polaridad, por lo tanto no presentan extremo + y extremo - (ver Fig. 6.6).

Fig. 6.6- Estructura de los filamentos intermedios

Distribucin celular
Los filamentos intermedios forman redes que conectan la membrana plasmtica con la envoltura nuclear, formando una red continua a su alrededor. Una red similar se encuentra en la cara interna de la envoltura (lmina nuclear).

Fig. 6.7- Distribucin de los componentes del citoesqueleto en la clula. 1- Filamentos intermedios unidos a desmosomas, 2- Microtbulos partiendo del centrosoma, 3Microfilamentos en el polo apical de la clula-(actina en microvellosidades).

Ejemplos de la funcin y estructura del citoesqueleto en clulas epiteliales Motilidad y movimiento celular La motilidad y movimiento celular se logra por medio de cilias y flagelos. Las cilias son apndices delgados, que surgen de la superficie de distintos tipos celulares. Los cilios de mayor longitud se llaman flagelos. Las estructuras ciliares se encuentran en epitelios especializados en eucariontes. Por ejemplo, las cilias barren los fluidos sobre clulas estacionarias en el epitelio de la trquea y tubos del oviducto femenino (trompas de Falopio). Los flagelos, son importantes para el movimiento celular. Son ms largos que las cilias pero sus estructuras internas de microtbulos son similares. Los flagelos procariticos y eucariticos poseen estructuras muy diferentes.

Fig. 6.8 - (a) Corte transversal de un centrosoma o cuerpo basal con su estructura tpica, "9+0". Nueve tripletes perifricos y ninguno en el centro. Cada triplete esta formado por tres microtbulos. (b) Esquema de un centrosoma o cuerpo basal, recordemos que posee idntica estructura.

Fig. 6.9 - Distribucin de los microtbulos en cilios y cuerpos basales.

Ambos, flagelos y cilias tienen una disposicin de tbulos de 9+2. Esta disposicin se refiere a los 9 pares fusionados de microtbulos perifricos y de 2 microtbulos no fusionados en el centro. Brazos de dinena sirven como motores moleculares (protena accesoria motora). Si los brazos de dinena son defectuosos ( a causa de una mutacin en los genes de la dinena), las cilias y los flagelos son inmviles, lo que provoca problemas en el tracto respiratorio (bronquitis crnicas), e infertilidad en la mujer y el varn (flagelos de los espermatozoides inmviles y cilias de las trompas uterinas inmviles).

Fig. 6.10(a) - Esquema de un cilio (corte transversal)

Fig. 6.10 (b) Microfotografas electrnicas del flagelo de un espermatozoide normal y con dinena defectuosa La clula en movimiento puede tomar tambin un aspecto poligonal por modificaciones en los filamentos de actina corticales, formndose lminas citoplasmticas, llamadas lamelipodios con

prolongaciones denominadas filopodios. Lamelipodios y filopodios alteran perodos de crecimiento y acortamiento, base de la motilidad celular. Los axones crecen en su extremo distal por una especializacin, llamada cono de crecimiento que responde a estmulos fsicos y qumicos. Movimiento de organelos internos Anteriormente hemos mencionado que el citoesqueleto acta como un andamiaje sobre el cual, con la ayuda de las protenas accesorias (como por ejemplo las protenas motoras) es posible mover organelas, cromosomas, provocar flujos citoplasmticos y lograr la divisin celular (citocinesis). Para tener una visin mas precisa de estos y otros fenmenos celulares veremos como actan las protenas accesorias motoras. Las protenas accesorias motoras, son motores proteicos que ligan dos molculas y que utilizando ATP , provocan el desplazamiento de una molcula con respecto a la otra. Estas protenas tienen un extremo motor que unen al citoesqueleto (microtbulos y actina) y por el extremo ligante pueden unirse a diferentes tipos de estructuras moleculares, como por ejemplo organelas, vesculas u otras protenas del citoesqueleto. Ejemplos de protenas motoras: Miosina que se une a actina Quinesina o Kinesina que se une a microtbulos Dinena que se une a microtbulos

Cuando se conectan a otros microtbulos, las protenas motoras pueden causar movimiento si los extremos estn fijos (cilias y flagelos) o extender la longitud de los paquetes de fibras si los extremos estn libres.

Fig. 6.11 - Movimiento de protenas motoras sobre los microtbulos

Fig. 6.12 - Disposicin de los microtbulos en el axn de una neurona. Observe los distintos tipos de transporte, uno antergrado del cuerpo celular a la terminal sinptica y un transporte retrgrado, de la terminal al cuerpo celular. Los microtbulos junto con las protenas motoras

transportan los distintos materiales, por ejemplo vesculas con neurotransmisores. (De Kinesin and Dynein Superfamily Proteins and the Mechanism of Organelle Transport. Nobutaka Hirokawa Science.279:519-526)

Fig. 6.13 - Microtbulos asociados a protenas motoras. (a) Los extremos fijos de los microtbulos permiten a los motores proteicos mover las fibras. (b) Los extremos libres de los microtbulos permiten a los motores proteicos extender la longitud de las fibras.

Fig. 6.14 - Asociaciones de las miosinas I y II con los filamentos de actina. (a) Los filamentos de actina transcelulares (que atraviesan toda la clula), sirven como vas de transporte para organoides en el citoplasma. Para esto necesitan de la protena motora miosina, que consume ATP para provocar el movimiento. (b) En los filamentos de actina que actun como fibras tensoras, se localizan numerosas unidades de miosina II. Estos filamentos de actina se unen a estructuras localizadas en la membrana plasmtica, llamadas contanto focales. De esta formase generan leves movimientos pero continuos

MATRIZ EXTRACELULAR
Bajo el nombre de matriz extracelular (MEC) se agrupan los elementos intercelulares presentes en los organismos pluricelulares. La composicin de la MEC es nica para cada tipo de tejido. La MEC es un medio dinmico que juega un rol central en la regulacin de las funciones celulares durante la remodelacin y el crecimiento celular normal y patolgico, como en el desarrollo embrionario y toda una serie de procesos que acontecen en el organismo adulto por ejemplo, la coagulacin sangunea, la curacin de heridas, la inflamacin, la reparacin de tejidos daados, y la erradicacin de infecciones. Paradjicamente, la adhesividad a la MEC puede facilitar tambin, la aparicin de artritis reumatoide, ataques cardacos, los accidentes cerebro vasculares (ACV), la invasin tumoral y la metstasis. Las clulas del cuerpo se mantienen pegadas unas a otras y a un material cohesivo extracelular (la MEC), que las circunda. Esta cohesin es esencial para la supervivencia, ya que mantiene unidos a los tejidos. Las clulas normales no logran sobrevivir si no estn adheridas a algn tipo de sustrato o entre ellas. Los componentes de la MEC pueden clasificarse en fluidos y fibrosos. Los componentes fluidos son los glicosaminglicanos (polisacrido) y proteoglicanos (glicoprotena). Por otro lado, los componentes fibrosos se dividen en protenas estructurales (colgenos) y protenas adhesivas (fibronectina, laminina).

Componentes Fluidos
La MEC posee glicosaminoglicanos, un heteropolisacrido que se hallan asociados entre s o a glicoprotenas llamadas proteoglicanos. Los glicosaminoglicanos y los proteoglicanos se asocian entre s formando agregados moleculares de gran tamao. Estos agregados tienen un papel estructural debido a que presentan excelente resistencia mecnica a los golpes debido a sus propiedades viscoso elsticas. Todos los glicosaminoglicanos, son molculas cidas con numerosas cargas negativas. Adems, todos los glicosaminoglicanos, excepto el cido hialurnico, poseen grupos sulfatos (tambin un grupo cido). Por lo tanto podemos decir que el carcter cido de los proteoglicanos y los

glicosaminoglicanos, los conduce a fijar cationes (Na+, K+), en consecuencia constituyen una reserva de estos. Por otra parte los cationes estn rodeados de agua, esto aumenta el volumen (turgencia) de la MEC. Debido a que los proteoglicanos retienen agua, son directamente responsables del grado de hidratacin de la matriz extracelular (ver otros polisacridos en Composicin qumica de los seres vivos).

6.15 - Agregado molecular compuesto por: proteoglicanos; glicosaminoglicanos y cido hialurnico

Componentes Fibrosos Colgeno

Es un grupo de glucoprotenas fibrilares presentes en los tejidos conjuntivos. Existen varios tipos que se denominan con nmeros romanas. Principales tipos de colgenos: Tipo I: presente en la dermis, los huesos y en los tendones. Tipo II: presente en el cartlago. Tipo III: existe en la dermis Tipo IV: se encuentra en la membrana basal

La subunidad de colgeno, se llama tropocolgeno (tropos, en griego significa bastoncito). Est formado por tres cadenas polipeptdicas de 1050 aminocidos cada una. Uno de cada tres aminocidos es una glicina, seguido muy probablemente de una prolina o hidroxiprolina. Cada cadena polipeptdica se denomina alfa. Por lo tanto deben unirse tres hlices alfa (alfa 1, alfa 2 y alfa 3), para formar el bastoncito de tropocolgeno.

Protenas adhesivas: Fibronectina y Laminina

La fibronectina, es una glicoprotena encontrada en la mayora de las matrices extracelulares en forma de agregados o fibrillas. Esta importante protena adhesiva, cumple funciones que involucran procesos de adhesin, como la migracin y la invasin celular. La fibronectina media una variedad de adhesiones unindose al fibringeno/fibrina (coagulacin sangunea), colgeno, heparn sulfato y al cido hialurnico (Fig.6.16). La laminina es una glicoproteina de adhesin que se encuentran en todas las membranas basales (se encuentra asociada al colgeno IV). La laminina cumple una funcin estructural muy importante. Participa en la migracin, proliferacin y diferenciacin celular. Es la primera protena adhesiva que aparece en la MEC, durante el desarrollo embrionario.

Receptores de la matriz extracelular y molculas de adhesin celular (MAC)

Son glicoprotenas transmembranosas que intervienen en el reconocimiento y la adhesin celular. Las molculas de Adhesin se encuentran en la superficie celular y solo se unen a molculas idnticas a ellas mismas (uniones homfilicas). Mediante las MAC (o CAM en ingls) la clula migratoria busca una clula del mismo tipo, para formar un tejido. (Cuadro 6.1) Los receptores de la matriz extracelular, las integrinas [1] (glicoprotenas transmembrana heterodimricas), forman parte de los denominados contactos focales. La integrina por sus dominios extracelulares se une a las fibras de colgeno a travs de una protena adhesiva, la fibronectina o laminina. Por sus dominios citoslicos se une a los filamentos de actina a travs de un conjunto de protenas ligadoras, como la talina, vinculina, paxilina y a-actinina. La unin de las integrinas es dependiente de calcio y magnesio. Cuadro 6.1 - Molculas de Adhesin calcio dependientes Tipo de Cadherina Localizacin E-Cadherina P-Cadherina Cadherina desmosomal N-Cadherina Epidermis Placenta Nervio, msculo Cinturn adhesivo Desmosomas Desmoplaquinas I, II; Placoglobina Cateninas, a-actinina, vinculina. Actina. Keratina; desmina Clulas epiteliales Estructura Cinturn adhesivo Proteina intracelular de unin Cateninas, a-actinina Filamento citoplasmtico Actina

Fig. 6.16 - Integracin del citoesqueleto con la matriz extracelular. Las integrinas que atraviesan la membrana plasmtica, por uno de sus extremos se unen a molculas de la MEC, en este caso fibronectina. Por el lado intracelular, se unen al citoesqueleto. La unin al citoesqueleto esta formada por el agregado molecular complejo (contacto focal) Degradacin y recambio de la matriz extracelular (MEC) La degradacin de la matriz extracelular y su recambio son importantes procesos en la remodelacin de tejidos durante el desarrollo, curacin de heridas, necrosis tumoral e inflamacin. Factores clave del recambio de la matriz extracelular son las metaloproteasas de la matriz (MPM) y sus inhibidores. Estas molculas degradan las molculas de la matriz extracelular, proteoglicanos, glicoprotenas y varios tipos de colgenos. Las metaloproteasas son secretadas por las clulas en una forma inactiva (prometaloproteasa), activndose luego en la matriz, por una cascada de metaloproteasas. Miniglosario:

Tejido conjuntivo: Constituye el compartimiento extracelular o matriz extracelular, en el que se encuentran sumergidas fibras y clulas especializadas. Las molculas que se encuentran en esta matriz son sintetizadas en el interior celular. Este compartimiento, es muy importante pues constituye del 15-20 % del volumen del organismo segn las especies. Lamina o membrana basal: Se denomina membrana basal a una formacin de membrana constituida por molculas que pertenecen al tejido conjuntivo y que sostienen los epitelios y los endotelios. Esta membrana no es de naturaleza fosfolipdica sino glucoproteica.

DIFERENCIACIONES DE MEMBRANA
Se denominan diferenciaciones de membrana a las regiones de la membrana plasmtica adaptadas a diferentes funciones, como la absorcin, la secrecin, el transporte de lquidos, la adherencia mecnica o la interaccin con clulas adyacentes. La Fig. 6.18 corresponde a una clula epitelial ideal que ilustra los distintos tipos de diferenciaciones.

Fig. 6.17 - Distribucin de los filamentos de actina en una microvellosida.

MICROVELLOSIDADES
La superficie apical de la clula se proyecta en delgadas prolongaciones denominadas microvellosidades (fig. 6.19). Estas son muy abundantes en el epitelio intestinal en el que aumentan la superficie efectiva de absorcin considerablemente. Cada clula puede tener hasta 3000 microvellosidades de 0,6 a 0,8 m de longitud. Las recorren internamente finos filamentos de actina.

Uniones Intercelulares
En organismos multicelulares, virtualmente toda clula acta en ntimo contacto con sus vecinas y con componentes de la matriz extracelular. Tales interacciones ocurren de varias formas y se inician luego de la fertilizacin. De hecho, el proceso de embriognesis puede en algn sentido ser resumido, como un complejo y exquisitamente orquestado juego de agrupamientos en diferentes poblaciones celulares. Desde el inicio, las interacciones especficas clula clula y clula - matriz son necesarias para que el mantenimiento de la integridad epitelial y la produccin de la respuesta imflamatoria ante una agresin, entre muchos otros procesos. La ruptura de los contactos celulares es incompatible con la supervivencia y es un signo caracterstico en la patognesis del cncer y de los estados de deficiencia inmunes. Las molculas de adherencia celular y las uniones intercelulares son las dos razones por las que las clulas actan recprocamente y con su ambiente extracelular. Algunas de las protenas de adherencia de las clulas son componentes de las uniones intercelulares. En casi todos los tipos de uniones, dichas molculas relacionan superficies de membrana contiguas y terminan fijando a las clulas al citoesqueleto. Las uniones intercelulares son clasificadas tpicamente en tres grupos que varan fsicamente en su composicin molecular y apariencia ultrastructural y funcionalmente en la relacin que establecen entre clulas adyacentes. En las uniones estrechas , oclusivas o zona ocludens se unen clulas epiteliales formando una capa continua que restringe la permeabilidad. Los Desmosomes, hemidesmosomes y uniones adherentes fijan clulas entre si y con la matriz extracelular, contribuyendo a la formacin y mantenimiento de los tejidos. Las uniones del hendidura, comunicantes, uniones gap o nexus forman poros entre clulas que permiten el acoplamiento qumico y/o elctrico facilitando la comunicacin intercelular. Mientras que las molculas de adherencia celular son un grupo de protenas que como su nombre lo indica, unen flojamente a manera de un "Velcro" a clulas vecinas, constituyen un preludio necesario al establecimiento de las uniones intercelulares que proporcionan reas ms fuertes de contacto, a manera de "cierres" y "remaches".

Uniones estrechas
Los epitelios son hojas celulares que separan dos compartimientos actuando como una barrera selectivamente permeable entre ellos. El epitelio del intestino delgado, por ejemplo, separa el lumen del intestino del lecho vascular y permite slo que determinadas molculas puedan ingresar del lumen a la sangre. Las uniones estrechas "pegan" de manera individual a las clulas vecinas mantenindolas juntas dentro de la misma capa de epitelio (Fig. 6.18). Las molculas e iones del lumen debern atravesar las clulas del epitelio (va transcelular) o difundir a travs de las uniones (va paracelular). La barrera de permeabilidad de un epitelio es definida por dos caractersticas de las uniones estrechas: a) Estas uniones impiden a la mayora de las molculas cruzar el epitelio entre las clulas. El agua puede difundir a travs ellas, pero la mayora de los iones y incluso las molculas pequeas, como azcares simples y aminocidos no pueden ingresar. b) Mantienen la asimetra de la membrana en las clulas epiteliales, que es una condicin necesaria para el transporte transcelular. En las clulas de los epitelios polarizadas, la composicin de la membrana celular que enfrenta un compartimiento es diferente a la que enfrenta al otro . Estas dos caras normalmente se llaman apical y basolateral. Las uniones estrechas abrazan las clulas y funcionan como un cerco para prevenir la difusin de protenas entre los compartimientos apical y basolateral contribuyendo a mantener la asimetra. Esto es importante porque permiten el transporte vectorial (en un sentido) de molculas a travs de los epitelios. Por ejemplo, se transporta glucosa del lumen del intestino delgado a la sangre, pero nunca de la sangre al lumen. Esto es porque los transportadores de glucosa en la membrana apical (en contacto con el lumen) transportan dentro de la clula, mientras otros transportadores en la basolateral (enfrentados al capilar) transportan fuera de la clula. Si ambos tipos de transportadores estuvieran presentes en ambas membranas, no se absorbera glucosa eficazmente del lumen a la sangre.

Fig. 6.18 - Uniones estrechas y asimetra de membrana Estructuralmente, estas uniones son regiones de contacto clula-clula muy ntimo. La hoja de plstico que une las latitas de gaseosa es un anlogo de esta estructura. Observando al ME, se ven las uniones estrechas como regiones de membrana celular que se tocan o incluso se funden sin espacio intercelular discernible . La naturaleza molecular de la unin es poco conocida. Recientemente se purifico una protena integral que forma parte de las mismas, la ocludina. Las ocludinas de las membranas de clulas contiguas se adhieren firmemente entre si, y generalmente se encuentran en grupos, formando una hilera de dos o tres uniones estrechas paralelas. Tambin se observan uniones similares en todas las clulas que forman revestimientos en rganos internos como la vejiga.

Uniones de anclaje: Desmosomas, hemidesmosomas y uniones adherens

Fig. 6.19 - Uniones de anclaje en un epitelio Las clulas que conforman tejidos y rganos deben fijarse entre si y a la matriz extracelular. Para tal fin, han desarrollado varios tipos de complejos de unin, y en cada caso, diferentes protenas transmembrana se extienden a travs de la membrana celular uniendo protenas del citoesqueleto de una clula con protenas del citoesqueleto de su vecina. Se observan tres tipos de uniones, y difiere entre si por la protena del citoesqueleto a la que se unen, as como por la protena transmembrana . Las uniones de anclaje no slo mantienen las clulas juntas, tambin proporcionan cohesin estructural a los tejidos. Estas uniones son muy abundantes en los tejidos que estn sujeto a tensin mecnica constante como la piel y el miocardio. Uniones de Anclaje Desmosomas Hemidesmosomas Uniones adherentes Protena del citoesqueleto Filamentos intermedios Filamentos intermedios Filamentos de actina Protena transmembrana Cadherina Integrinas Cadherinas e Integrinas Ejemplos Otras clulas Matriz extracelular Otras clulas Matriz extracelular

Fig. 6.20 - Estructura del desmosoma Desmosomas Los desmosomas puede visualizarse a manera de remaches a travs de la membrana de clulas adyacentes. Estn compuestos por glicoprotenas integrales de la familia de las cadherinas, cuyos dominios extracelulares se unen con iguales dominios de clulas vecinas. Por sus dominios citoslicos se fijan a filamentos intermedios compuestos de queratina y desmina. Esta ltima unin es mediada por protenas de unin asociadas a la membrana o ligadoras, que forman un placa densa en la cara citoplasmtica de la membrana. Las molculas de cadherina forman un ancla que extendindose a travs de la membrana se fija a la placa y a la vez se liga fuertemente a las cadherinas que se proyectan sobre la membrana de la clula adyacente. El nmero de desmosomas es proporcional al grado de tensin que soporta un tejido. Uniones adherentes, cinturn adhesivo o zonula adherens Las uniones adherentes comparten la caracterstica de fijar clulas a travs de componentes del citoesqueleto, en este caso los filamentos corticales de actina. De manera similar a los desmosomas y hemidesmosomas, sus protenas transmembrana son cadherinas, cuando se unen a otras clulas e integrinas, cuando la unin es a la matriz extracelular. Los filamentos de actina que forman parte de las uniones adherentes son protenas contrctiles que adems poseen funcin de fijacin. Se piensa que las uniones adherentes participan plegando y doblando las hojas de los epitelios.

Uniones en hendidura, uniones comunicantes, uniones gap o nexus

En contraste con las uniones estrechas y las adherentes, las uniones en hendidura no sellan cluas entre si, ni restringen el pasaje de material entre las clulas. Ms bien, este tipo de uniones esta compuesta de series de cauces pequeos que permiten el pasaje de pequeas molculas a travs de ellos. Las uniones en hendidura permiten el acoplamiento elctrico y metablico entre las clulas, porque la seal iniciada en una clula puede propagarse rpidamente a las clulas vecinas. En general, el lmite superior para el pasaje a travs de las uniones en hendidura es de 1000 daltons (Da). Adems de los iones, los ejemplos importantes de molculas que pasan incluyen AMPcclico (329 Da), glucosa-6-fosfato (259 Da) y nucletidos (250-300 Da). Se observan al ME como parches de tamao variable, donde las membranas celulares de las dos clulas implicadas en la unin, estn separadas por un espacio uniforme de 2-3 nm . En el espacio se observan tubos hexagonales llamadas conexones que forma poros acuosos de 2 nm de dimetro entre las dos clulas. La protena del conexn es la conexina que, cuando se expresa en clulas que normalmente no tienen uniones en hendidura, les permite formarlas. Se ven especies diferentes de conexinas entre organismos diferentes y entre los distintos tejidos de un organismo. Sin embargo, todos las conexinas comparten una estructura comn. Poseen cuatro dominios transmembrana, estando los extremos amino y carboxilo en la cara citoplasmtica. La fosforilacin del dominio contiguo al extremo carboxilo, provoca el cierre del conexn, al modificar la disposicin de las conexinas. Un conexn esta formado por seis molculas del conexina que se extienden fuera de la clula a distancia uniforme. La alineacin de los conexones de cada clula provoca la formacin de los poros que funcionalmente definen esta unin. Las uniones en hendidura son estructuras dinmicas, porque los conexones pueden abrirse y cerrarse independientemente. Se cierran cuando la concentracin intracelular de calcio se eleva o desciende el pH intracelular. Esta autonoma funcional del conexn de una clula dentro de un grupo de clulas, permite el cierre de las uniones en hendidura en una clula daada aislndola eficazmente y previniendo la extensin de la lesin. Se ven estas uniones en virtualmente todas las clulas. Algunos ejemplos representativos de su importancia fisiolgica incluyen: Acoplamiento elctrico: Las uniones en hendidura son abundantes en el msculo cardaco y liso. La despolarizacin de un grupo de clulas musculares rpidamente se extiende a las clulas adyacentes, causando contracciones coordinadas de todo el msculo.

Fig. 6.21 - Unin en hendidura o nexus Acoplamiento metablico: Muchas hormonas actan elevando las concentraciones intracelulares de AMP cclico, que inicia una va de sealizacin dentro de la clula. El AMP cclico rpidamente pasa a travs de las uniones en hendidura y as, el estmulo hormonal en una clula puede propagarse a un grupo de clulas .

Plasmodesmos
Las clulas vegetales a diferencia de las animales, carecen de uniones especializadas. Sin embargo, se conectan entre si por medio de conductos cilndricos, llamados plasmodesmos. Estos plasmodesmos se extienden entre clulas contiguas a travs de la pared celular. El interior del plasmodesmo se encuentra revestido por membrana plasmtico y contiene un desmotbulo, especie de varilla densa derivada del retculo endoplasmtico liso. Solo son permeables a las molculas de pesos inferiores a los 1000 Da, las cuales se mueven en el espacio delimitado entre la membrana perifrica y el desmotbulo central. Los plasmodesmos son sitios de comunicacin, permitiendo la integracin metablica en los tejidos vegetales

CITOSOL O MATRIZ CITOPLASMTICA

El citosol, hialoplasma o matriz citoplasmtica, consiste fundamentalmente en un sistema coloidal con grandes biomolculas como lo son las protenas, los polisacridos y los cidos nucleicos. Sin embargo no debemos olvidar que tambin es una solucin acuosa que tiene disueltos iones orgnicos e inorgnicos y pequeas molculas como monosacridos, aminocidos, pequeos cidos orgnicos, etc.

En esta matriz tienen lugar muchsimos procesos metablicos, por tal motivo entre las biomolculas encontramos muchas enzimas, como las que participan en el proceso de gluclisis o el de sntesis de las protenas. Para ste ltimo, son imprescindibles los ribosomas, organoides tambin presentes en el citosol de todas las clulas y en el estroma o matriz de cloroplastos y mitocondrias. En resumen podemos asegurar que el citosol no debe ser considerada una matriz amorfa y que adems contiene elementos muy variados, la mayor parte de ellos importantes para el mantenimiento de la vida.

Elementos del citosol en eucariotas

Componentes del citoesqueleto Enzimas Molculas de sealizacin Maquinaria de la sntesis proteca (ribisomas, ARNm.ARNt, etc. Proteosomas Chaperonas Inclusiones, etc.

A continuacin daremos una breve descripcin de algunos de estos componentes.

Inclusiones
Generalmente corresponden a la acumulacin citoplasmtica de diferentes tipos de sustancias en grandes cantidades. Podemos mencionar a los glicosomas que corresponden a la acumulacin de glucgeno, como as tambin las gotitas de grasa comunes en los hepatocitos, en fibras musculares estriadas y en las clulas secretoras de leche.

Fig. 6.22 - Microfotografa de clula secretora apcrina de alvolo mamario. BM, membrana basal, RER, retculo endoplasmtico rugoso; SV, vescula secretora; LD, gota de lpido.

En algunos tipos celulares el citosol contiene pigmentos fabricados por la misma clula o provenientes del exterior. Por ejemplo la lipofuscina, de color marrn, constituida por fosfolpidos y protenas. Tambin encontramos cristales de protenas cuya funcin todava no es del todo conocida.

Ribosomas
Como ya lo indicramos estos organoides estn presentes en todos los tipos celulares y su estructura ser descripta oportunamente. Debemos sealar que, con excepcin de algunas protenas mitocondriales que se sintetizan en los ribosomas de la matriz mitocondrial, todas las protenas se sintetizan en el citoplasma, y en el proceso intervienen siempre los ribosomas. Sin embargo, a pesar de la ubicacin del proceso, no todas las protenas permanecen en el citoplasma.

Fig. 6.23- Destino de las protenas en los ribosomas citoslicos El trnsito de protenas desde el citosol hasta los diferentes destinos, requiere como ya hemos mencionado de un sistema de sealizacin preciso, que asegure la llegada de las protenas al lugar adecuado. Estas seales se encuentran en la mismas protenas. Como ejemplo podemos mencionar al pptido seal y las seales de anclaje (ver Sistema de endomembranas). Obviamente las protenas destinadas al citosol no necesitan seales.

Chaperonas
Las chaperonas asisten a las protenas para su oportuno y adecuado plegamiento. Son protenas que aumentan durante los estres trmico y en condiciones de estrs metablico, siendo estas situaciones que producen la desnaturalizacin de un gran nmero de protenas. Las chaperonas ayudan a la renaturalizacin de las protenas afectadas. Como ejemplo mencionaremos a las chaperonas HSP60 y HSP70 (por las iniciles de Heath Shock Protein). Ambas chaperonas consumen energa para realizar su tarea. (Fig. 6.24).

Fig. 6.24 - Modelo de la actividad reparadora de las chaperonas sobre las protenas desnaturalizadas

Proteasomas
Podramos decir que los proteasomas desempean funciones opuestas a los ribosomas, pues se encargan de la degradacin de las protenas endgenas daadas (por ej. Factores de transcripcin, ciclinas, protenas codificadas por ADN viral o protenas mal plegadas), obtenindose de este modo oligopptidos. Los proteosomas estn formados por un complejo enzimtico, de ms de una docena de protenas diferentes, que se organizan en cuatro anillos apilados, que limitan una cmara central. En ambos extremos de este canal, se localiza la partcula regulatoria, formada por diferentes ATPasas y los varios sitios de reconocimiento de la protena ubiquitina. Las protenas daadas, que han cumplido su ciclo dentro de la clula, o que se plegaron inadecuadamente son marcadas con ubiquitina, una pequea protena de 76 aminocidos, altamente conservada y virtualmente idntica en secuencia en bacterias, levaduras y mamferos.

La protena ubiquitinizada, es reconocida por la partcula regulatoria del proteosoma. La protena pierde su plegamiento por la accin de las ATPasas, con gasto de energa. La protena desenrollada es translocada dentro de la cmara central, donde las proteasas la degradan. Se producen oligopptidos de aproximadamente 8 aminocidos de longitud. La partcula regulatoria libera la ubiquitina para ser nuevamente utilizada.

Fig. 6.25 - Modelo de la actividad de un proteosoma sobre las protenas daadas

BIBLIOGRAFA
Alberts, B. et al; (1996) Biologa Molecular de la Clula; 3 Edicin; Ediciones Omega S.A. Barcelona.

Karp, G.; (1998) Biologa Celular y Molecular; Ed. Mc Graw Hill Interamericana. Mxico.

De Robertis (h), Hib, Ponzio; (1996) Biologa Celular y Molecular de De Robertis; 12 Edicin; El Ateneo. Bs.As. De Robertis,E; Hib,J.; (1998) Fundamentos de Biologa Celular y Molecular; El Ateneo. Bs.As. Fuchs, E. And Cleveland, D. A Structural Scaffolding of Intermediate Filaments in Health and Disease , Science 279: 514-519 (1998). Hirokawa, N. Kinesin and Dynein Superfamily Proteins and the Mechanism of Organelle Transport. Science 279: 519-526 (1998). Smith and Wood; (1997) Biologa Celular; Ed. Addison-Wesley, Iberoamericana S.A.

Wickner, S; Maurizi, M. and Gottesman, S. Posttranslational Quality Control: Folding, Refolding, and Degrading Proteins, Science 286: 1888-1893 (1999).