UNIVERSIDAD LIBRE

FACULTAD DE INGENIERIA PROGRAMA DE INGENIERIA AMBIENTAL AREA DE CIENCIAS BSICAS ESPACIO ACADMICO DE SISTEMAS BITICOS GUIAS DE LABORATORIO

Cdigo 02450 III s ! s"# $ %#&di"os DOCENTE' DOCENTES' D#() M(#*( T # s( O#"i+ ,i--o"(

BOGOTA. DISTRITO CAPITAL F /# #o 2004

MICROSCOPIA I

OBJETIVO Conocer el MICROSCOPIO OPTICO COMPUESTO que se utilizara en las practicas de Biologa Formular enumerar los cuidados !"sicos que se de!e tener en cuenta en el uso # mane$o del microscopio durante las sesiones de practica MARCO TERICO Un microscopio simple (de un lente o varios lentes) es un instrumento !ue ampli"ica una ima#en $ permite la o%servaci&n de ma$ores detalles de los posi%les a simple vista' El microscopio m(s simple es una lente de aumento o un par de anteo)os' El poder de resoluci&n del o)o *umano es de + , mm es decir !ue para ver dos o%)etos separados estos de%en estar como m-nimo a esa distancia' El microscopio aumenta la ima#en *asta el nivel de la retina para captar la in"ormaci&n' .a resoluci&n depende de la lon#itud de onda de la "uente luminosa el espesor del esp/cimen la calidad de la "i)aci&n $ la intensidad de la coloraci&n' Te&ricamente la m(0ima resoluci&n !ue se puede alcan1ar es de + , um dada por una lu1 con lon#itud de onda de 23+ nm la cual pasa por un "iltro verde (mu$ sensi%le por el o)o *umano) $ con o%)etos condensadores adecuados' El ocular aumenta la ima#en producida por el o%)etivo pero no puede aumentar la resoluci&n' E0isten distintos microscopios &pticos #enerales $ de investi#aci&n !ue se di"erencian en "actores tales como la lon#itud de onda de la iluminaci&n del esp/cimen la alteraci&n "-sica de la lu1 !ue incide en la muestra $ procesos anal-ticos !ue se aplican a la ima#en "inal'

E4UI5O6 7 MATERIA.E6 MICROSCOPIO OPTICO

5ROCE8IMIE9TO 5ARTE6 8E U9 MICRO6CO5IO 5TICO

6istema &ptico o OCU%&R' %ente situada cerca del o$o del o!ser(ador) &mpla la imagen del o!$eti(o) o OB*ETI+O' %ente situada cerca de la preparaci,n) &mpla la imagen de -sta) o CO./E.S&/OR' %ente que concentra los ra#os luminosos so!re la preparaci,n) o /I&FR&0M&' Regula la cantidad de luz que entra en el condensador) o FOCO' /irige los ra#os luminosos 1acia el condensador) 6istema mec(nico o SOPORTE' Mantiene la parte ,ptica) Tiene dos partes' el pie o !ase # el !razo) o P%&TI.&' %ugar donde se deposita la preparaci,n) o C&BE2&%' Contiene los sistemas de lentes oculares) Puede ser monocular !inocular 3)) o RE+4%+ER' Contiene los sistemas de lentes o!$eti(os) Permite al girar cam!iar los o!$eti(os) o TOR.I%%OS /E E.FO5UE' Macrom-trico que apro6ima el en7oque # microm-trico que consigue el en7oque correcto) MA9EJO 7 U6O 8E. MICRO6CO5IO 5TICO

8) Colocar el o!$eti(o de menor aumento en posici,n de empleo # !a$ar la platina completamente) Si el microscopio se recogi, correctamente en el uso anterior #a de!era estar en esas condiciones) 9) Colocar la preparaci,n so!re la platina su$et"ndola con las pinzas met"licas) :) Comenzar la o!ser(aci,n con el o!$eti(o de ;6 <#a est" en posici,n= o colocar el de 8> aumentos <8>6= si la preparaci,n es de !acterias) ;) Para realizar el en7oque' a) &cercar al m"6imo la lente del o!$eti(o a la preparaci,n empleando el tornillo macrom-trico) Esto de!e 1acerse mirando directamente # no a tra(-s del ocular #a que se corre el riesgo de incrustar el o!$eti(o en la preparaci,n pudi-ndose da?ar alguno de ellos o am!os)

!) Mirando a1ora s a tra(-s de los oculares ir separando lentamente el o!$eti(o de la preparaci,n con el macrom-trico # cuando se o!ser(e algo ntido la muestra girar el microm-trico 1asta o!tener un en7oque 7ino) 9) Pasar al siguiente o!$eti(o) %a imagen de!era estar #a casi en7ocada # suele ser su7iciente con mo(er un poco el microm-trico para lograr el en7oque 7ino) Si al cam!iar de o!$eti(o se perdi, por completo la imagen es pre7eri!le (ol(er a en7ocar con el o!$eti(o anterior # repetir la operaci,n desde el paso :) El o!$eti(o de ;>6 en7oca a mu# poca distancia de la preparaci,n # por ello es 7"cil que ocurran dos tipos de percances' incrustarlo en la preparaci,n si se descuidan las precauciones anteriores # manc1arlo con aceite de inmersi,n si se o!ser(a una preparaci,n que #a se en7oc, con el o!$eti(o de inmersi,n) :) Empleo del o!$eti(o de inmersi,n' a) Ba$ar totalmente la platina) !) Su!ir totalmente el condensador para (er claramente el crculo de luz que nos indica la zona que se (a a (isualizar # donde 1a!r" que ec1ar el aceite) c) 0irar el re(,l(er 1acia el o!$eti(o de inmersi,n de$"ndolo a medio camino entre -ste # el de 6;>) d) Colocar una gota mnima de aceite de inmersi,n so!re el crculo de luz) e) Terminar de girar sua(emente el re(,l(er 1asta la posici,n del o!$eti(o de inmersi,n) 7) Mirando directamente al o!$eti(o su!ir la platina lentamente 1asta que la lente toca la gota de aceite) En ese momento se nota como si la gota ascendiera # se adosara a la lente) g) En7ocar cuidadosamente con el microm-trico) %a distancia de tra!a$o entre el o!$eti(o de inmersi,n # la preparaci,n es mnima aun menor que con el de ;>6 por lo que el riesgo de accidente es mu# grande) 1) Una (ez se 1a#a puesto aceite de inmersi,n so!re la preparaci,n #a no se puede (ol(er a usar el o!$eti(o ;>6 so!re esa zona pues se manc1ara de aceite) Por tanto si desea en7ocar otro campo 1a# que !a$ar la platina # repetir la operaci,n desde el paso :) i) Una (ez 7inalizada la o!ser(aci,n de la preparaci,n se !a$a la platina # se coloca el o!$eti(o de menor aumento girando el re(,l(er) En este momento #a se puede retirar la preparaci,n de la platina) .unca se de!e retirar con el o!$eti(o de inmersi,n en posici,n de o!ser(aci,n) $) %impiar el o!$eti(o de inmersi,n con cuidado empleando un papel especial para ,ptica) Compro!ar tam!i-n que el o!$eti(o ;>6 est" per7ectamente limpio) MA9TE9IMIE9TO 7 5RECAUCIO9E6 8) &l 7inalizar el tra!a$o 1a# que de$ar puesto el o!$eti(o de menor aumento en posici,n de o!ser(aci,n asegurarse de que la parte mec"nica de la platina no so!resale del !orde de la misma # de$arlo cu!ierto con su 7unda) 9) Cuando no se est" utilizando el microscopio 1a# que mantenerlo cu!ierto con su 7unda para e(itar que se ensucien # da?en las lentes) Si no se (a a usar de 7orma prolongada se de!e guardar en su ca$a dentro de un armario para protegerlo del pol(o) :) .unca 1a# que tocar las lentes con las manos) Si se ensucian limpiarlas mu# sua(emente con un papel de 7iltro o me$or con un papel de ,ptica) ;) .o de$ar el portao!$etos puesto so!re la platina si no se est" utilizando el microscopio) @) /espu-s de utilizar el o!$eti(o de inmersi,n 1a# que limpiar el aceite que queda en el o!$eti(o con pa?uelos especiales para ,ptica o con papel de 7iltro <menos recomenda!le=) En cualquier caso se pasar" el papel por la lente en un solo sentido # con sua(idad) Si el aceite 1a llegado a secarse # pegarse en el o!$eti(o 1a# que limpiarlo con una mezcla de alco1olAacetona <B':= o 6ilol) .o 1a# que a!usar de este tipo de limpieza porque si se aplican estos disol(entes en e6ceso se pueden da?ar las lentes # su su$eci,n) C) .o 7orzar nunca los tornillos giratorios del microscopio <macrom-trico microm-trico platina re(,l(er # condensador=)

B) El cam!io de o!$eti(o se 1ace girando el re(,l(er # dirigiendo siempre la mirada a la preparaci,n para pre(enir el roce de la lente con la muestra) .o cam!iar nunca de o!$eti(o agarr"ndolo por el tu!o del mismo ni 1acerlo mientras se est" o!ser(ando a tra(-s del ocular) D) Mantener seca # limpia la platina del microscopio) Si se derrama so!re ella algEn lquido secarlo con un pa?o) Si se manc1a de aceite limpiarla con un pa?o 1umedecido en 6ilol) Es con(eniente limpiar # re(isar siempre los microscopios al 7inalizar la sesi,n pr"ctica # al aca!ar el curso encargar a un t-cnico un a$uste # re(isi,n general de los mismos) CUE6TIO9ARIO a) E6plique !re(emente la de7inici,n del microscopio # su 7inalidad !) /i!u$e por lo menos tres clases de microscopios # de7ina cu"l es la 7uncionalidad de cada uno de ellos) c) F5u- clase de microscopio usa usted en su la!oratorioG d) FCu"l es la imagen total que pro#-ctale $uego de lentes de un microscopio ,ptico compuestoG E6plique !re(emente) e) Fe6plique !re(emente los Hpoderes del MOCI 7) FC,mo se determina el aumento total Jt del MOCG g) relaciona en un cuadro las partes mec"nicas # ,pticas con la 7unci,n que realizan 1) identi7ica en un gr"7ico de un microscopio todas sus partes)

BIBLIOGRAFA
<Consultar la entregada en el programa # la que se encuentra disponi!le en la Bi!lioteca=