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Contenidos: estructura, gentica, diversidad microbiana, crecimiento bacteriano y su control. Integracin de las actividades tericoprcticas Nivel creciente de exigencia, profundidad e integracin de contenidos Observacin, investigacin, realizacin de informes, planteo y resolucin de problemas prcticos Anlisis crtico de la informacin recibida
Objetivos
Que los alumnos aprendan: Principios generales de estructura y funcin de clulas procariticas Principios generales de clasificacin y diversidad de microorganismos, procesos bioqumicos que ocurren en ellos y bases genticas del crecimiento y evolucin microbiana Mecanismos de intercambio y adquisicin de informacin gentica en bacterias; causas, consecuencias y uso de las mutaciones. Mtodos de control del crecimiento microbiano. Antibiticos y resistencia Usos de microorganismos en alimentacin, agricultura, procesos industriales y biotecnolgicos. Relacin husped-parsito, evasin de la respuesta inmune y patogenia
Ejercicios de Laboratorio
Parcialitos
Evaluacin
Ciencia
biolgica bsica: suministra algunas de las herramientas de investigacin ms verstiles para determinar la naturaleza de los procesos caractersticos de la vida. Ya que las clulas microbianas comparten con los organismos pluricelulares muchas propiedades bioqumicas, alcanzan elevadas densidades de poblacin y son fcilmente manipulables para estudios genticos, lo que los convierte en modelos adecuados para comprender funciones celulares en animales y plantas
Ciencia
biolgica aplicada: en campos diversos como medicina, salud pblica, agricultura e industria (empleo de microorganismos cultivados a gran escala en la elaboracin de productos comerciales de alto valor agregado), microbiologa alimentaria etc.
Perodo especulativo
Enfermedades
infecciosas miasmas humores Lucrecio (s. I a. C.): semillas de enfermedad Frascatorius (1546): grmenes vivos Alimentos y bebidas fermentados (queso, leches fermentadas, vino, cerveza, etc)
(1668): experimentos que descartan la generacin espontnea de animales Omne vivo ex ovo Spallanzani vs. Needham Los experimentos se interpretan errneamente (Needham) como que al calentar los frascos el aire pierde su fuerza vital (vitalismo)
La solucin de Pasteur
Experimentos con frascos abiertos al aire dotados de largos cuellos curvados (cuellos de cisne). Una vez llevados a ebullicin, solamente aparecen microorganismos si el lquido alcanza el cuello curvo
Las fermentaciones
Dos teoras sobre el origen de las fermentaciones: qumica y biolgica Pasteur (1857) es llamado a resolver un problema de las destileras de Lille 1857: bacterias que producen ferm. lctica 1860: levaduras producen ferm. alcohlica Descubre la fermentacin butrica y la vida en ausencia de aire (anaerobiosis) Reconciliacin de las dos teoras: Buchner asla un preparado libre de clulas (zimasa) de levadura
Cultivos puros
Dos teoras sobre forma de microorganismos: pleomorfismo y monomorfismo Su resolucin dependi de cultivos puros (laboratorio de Robert Koch) Medios slidos a base de rodajas de papa Medios slidos a base de gelatina Medios slidos a base de agar-agar Petri (en el laboratorio de Koch) inventa la placa que lleva su nombre Medios de enriquecimiento y medios diferenciales (Beijerink, Winogradsky
Microscopa y tinciones
Koch colabora con la industria alemana del vidrio (Schott) y pide ayuda a expertos en ptica (Abb, Zeiss) Lentes acromticas mejoradas Iluminacin inferior con condensador Objetivo de inmersin (1878) Koch colabora con industria qumica BASF: Tinciones para observar bacterias (azul de metileno, fuchsina, violeta de genciana, etc), 1877 y siguientes Ziehl y Neelsen: tincin diferencial AAR (1883) Hans C. Gram: tincin diferencial Gram (1884)
Pasteur es llamado a Provenza para resolver una enfermedad del gusano de seda (pebrina) En 1869 identifica al protozoo Nosema bombycis como el responsable Davaine (1863-1868): la sangre de ganado afectado por carbunco contiene grandes cantidades de microorganismos
(1883) Difteria (1884) Ttanos (1885) Neumona (1886) Meningitis (1887) Peste (1894) Sfilis (1905)
Robert Koch
Asepsia, quimioterapia
La introduccin de anestesia (mediados siglo XIX) trae infecciones quirrgicas Lister introduce el uso del fenol y de sales de mercurio (asepsia en quirfano) Paul Ehrlich: idea de las balas mgicas
Antibioticoterapia
Fleming (1929): extracto crudo de penicilina (del hongo Penicillium notatum) Chain y Florey (1940): purificacin penicilina. Uso en 2 Guerra Mundial Descubrimiento estreptomicina (Waksman, 1944) de Streptomyces griseus Tras la Guerra, se descubren numerosos antibiticos, producidos sobre todo por Actinomicetos
Sergei Winogradsky 1888: Bacterias del hierro crecen en medios minerales 1889: Bacterias del azufre oxidan sulfuros o S y obtienen energa de ello litotrofa 1890: Bacterias nitrificantes fijan CO2 con la energa de la oxidacin del amonio o nitrato quimiolito-autotrofa
Mitad del s. XX: la organizacin celular de las bacterias y algas verdeazuladas es muy diferente al del resto de seres vivos 8 edicin del Manual Bergeys (1974) Reino Prokaryotae, dividido en Cyanobacteria (antiguas cianofceas) Bacteria Reino Eukaryotae En los aos 70 se descubre que los procariotas constan de dos grupos muy distintos: Eubacterias (hoy Bacteria) Arqueobacterias (hoy Archaea)
Eucariota Generalmente con esteroles, ausencia de hopanoides Complejas; Retculo endoplasmtico, aparato de Golgi 80 S (salvo en mitocondrias y cloroplastos)
Membranas
internas
Ribosomas
Ausentes
En membrana citoplasmtica En membranas internas o Clorosomas
respiratorio
En cloroplastos
Pigmentos
fotosintticos
Procariota
Pared
Eucariota
Presente en plantas, celular Generalmente presente, con algas, hongos peptidoglucano, otros Sin peptidoglucano polisacridos, protenas, glicoprotenas Protemas homlogas: FtsZ MreB Filamentos de Actina y microtbulos de Tubulina
Citoesqueleto
FtsZ: a- localizacin del anillo Z en la zona central de B. subtilis b- filamentos autoensamblados inducidos por GTP; c- comparacin de estructuras tridimensionales.
FtsZ: homloga de tubulina, responsable de divisin celular, formacin de anillo Z, reclutamiento de otras protenas en complejos macromoleculares.
Ensamblado en orden (intermediarios estables) o equilibrio dinmico (continuo y rpido intercambio de subunidades con pool citoplasmtico)
MreB y Mbl: homlogos bacteriano de actina, determinantes de la forma celular, autoensamblado en estructuras filamentosas helicoidales (a y b) en B. subtilis. Isoformas: Mbl, MreBH. Bacterias esfricas: no poseen homlogo MreB. ParM: requerida para la separacin activa de plsmidos R1 en E. coli (c)
Eucariota Ausentes
Endosporas
Presentes (solo en gneros Gram +) Muy termorresistentes Compuestos de un solo tipo de protena, anclados a pared y membrana, rotacin
Formas de motilidad
Flagelos
No
flagelar
Procariota
Ausentes
Eucariota
Nucleolo
nuclear y
Presentes
Presente Si
Complejo
DNA/ Histonas
de mitosis
Ausente
No
Desarrollo
Intrones
Raro
gentica Parcial, transferencia unidireccion al de DNA
Recombinacin
Microscopa Estudios
y tinciones
poblacionales Browniano
Movimiento Efecto
Migracin
Aglutinacin
La relacin Superficie/volumen es muy alta Mayor contacto directo con el medio (reciben de modo inmediato las influencias ambientales) Gran tasa de entrada de nutrientes Altas tasas de crecimiento Gran tasa de salida de productos de desecho
Composicin qumica bsica >95% de macromolculas La mitad de las macromolculas son protenas Proporcin de ARN superior a eucariotas En bacterias, macromolculas exclusivas que no existen en eucariotas: Peptidoglucano Lipopolisacrido (en Gram-negativas)
Agrupaciones bacterianas A) Un solo plano de divisin De dos clulas: Diplococos Diplobacilos Cadenas de varias clulas Estreptococos Estreptobacilos B) Dos o ms planos de divisin (en cocos) Dos planos perpendiculares: ttradas Tres planos ortogonales: sarcinas (paquetes cbicos) Muchos planos aleatorios: estafilococos
Cpsula
(paracristalina) de anclaje
cpsulas en sentido estricto son rgidas e integrales las capas mucilaginosas son flexibles y perifricas glucoclix: capas superficiales compuestas de polisacrido Sirven para adhesin entre clulas, y colonizacin de nichos En muchas patgenas sirven, adems, para protegerse de agentes antibacterianos
Composicin qumica cpsulas polisacardicas heteropolisacridos aninicos heteropolisacridos neutros (levanos, dextranos, celulosa) alginatos cpsulas polipeptdicas (en Bacillus)
Funciones de la cpsula mejora difusin nutrientes proteccin contra la desecacin proteccin frente a la predacin proteccin contra agentes antibacterianos adhesin a sustratos
Cpsula: adhesin a sustratos: Sustratos inertes: microcolonias de la misma especie y consorcios de diferentes especies, con ventajas metablicas. Responsables de: corrosin de caeras, formacin de placa dental y caries formacin de biofilms en catteres y prtesis Sustratos vivos: actan como adhesinas efectos benficos: colonizacin de flora autctona en intestino de mamferos en sistemas patolgicos: como factores de virulencia; sirven para escapar del sistema inmune
Capa S
Arreglo cristalino macromolecular de subunidades proteicas, comn en archaeas y bacterias
Compuesta de una nica protena o glicoprotena, recubre la superficie celular Las subunidades se autoensamblan superficies, formando un arreglo regular en solucin o sobre
Glicosilacin
La glicosilacin es la principal modificacin en las protenas de capa S Los primeros indicios datan de mediados de la dcada del 70 El grado de glicosilacin en las protenas vara entre 2 y 10% W/W
Residuos glicosdicos Protena de capa S
Funciones de la capa S En arqueas: hace las funciones de la pared celular ( forma y rigidez). En bacterias: tamiz molecular protector frente a ag. Antibacterianos Proteccin frente a fluctuaciones inicas, de pH, etc En algunas patgenas, proteccin frente a fagocitosis
Vainas Tubos a base de heteropolmero, que engloba un conjunto de clulas bacilares que forman cadenas. En Sphaerotilus y Leptothrix se recubren de xidos e hidrxidos de Fe y Mn
Botones de anclaje acmulos de polisacridos cidos segregados en puntos concretos (como extremos de prostecas o pednculos). Ej. los de Caulobacter.
B. anthracis
Protoplastos
Pared celular bacteriana: entrcruzamiento del peptidoglucano, diferencias entre Gram positivas y Gram negativas.
cidos teicoicos, polmeros de glicerol o ribitol unidos por grupos fosfato. Se unen al PG por enlace covalente con hidroxilo 6 del NAM.
Porinas
Estructura de porina Omp32 de C. acidovorans A- Vista superior y lateral del monmero. Extremo N- terminal en azul, Cterminal en rojo D- Asociacin trimrica, vista superior y detalle del dimetro de poros
BAAR: Mycobacterium
Membrana citoplasmtica
Grnulos de azufre
A- Grnulos de PHB; b- cuerpo parasporal en BT; c- carboxisomas en Anabaena viriabilis; d- Grnulos de azufre en Beggiatoa.
TEM de Aquaspirillum magnetotacticum; MP: partculas de magnetita (Fe3O4), rodeadas por membrana. Otras bacterias poseen greigita (Fe3S4) o pirita (FeS2).
Endosporas bacterianas