Estudio Nutricional Comparativo y Evaluacin Biolgica de Tortillas de Maz Elaboradas por Diferentes Mtodos de Procesamiento.
TESIS
Que para obtener el grado de Maestro en Ciencias en Tecnologa Avanzada
Presenta
Biol. Susana Garca Mndez
Director
Dr. Hctor Eduardo Martnez Flores.
DEDICATORIA
A mi mam por haberme inculcado el gusto por el estudio y ensearme a luchar por las metas propuestas.
A Ivn por demostrarme su amor apoyndome en todo para alcanzar mis metas.
Omar y Daniel, por su amor, su alegra y por ser el motor de mi vida.
A mis hermanos Alejandro y Patricia.
A mis sobrinos Yuneili, Adair, Yovani, Owen y Alan.
A mi abuelita, tios y primos.
A mis amigos del MFC por los nimos que siempre me dieron.
Agradecimientos
Quiero agradecer muy en especial al Dr. Hctor E. Martnez Flores por todo el apoyo que recib para la realizacin de la tesis, demostrando ser una excelente persona y maestro.
Al comit de revisin Dr. Juan de Dios Figueroa, Dra. Myriam Leal, Dr, Jos Luis Fernndez y M.C Lombardo Gmez por las sugerencias dadas para el mejoramiento del trabajo.
A la Asociacin de ganaderos de estado de Quertaro en especial a la Dra Myriam Leal, por las facilidades prestadas para la realizacin de los anlisis bromatolgicos y a sus colaboradores: Maru, Felipe, Gustavo, Mario, Dolores, Jos Luis.
CIVESTAV-IPN. Unidad Quertaro, en la realizacin de los anlisis de Microscopia Electrnica de barrido (Eleazar Urbina lvarez) y Difraccin de Rayos-X (Qum. Martn Adelaido Hernndez Landaverde).
Jos Juan Veles Medina. Laboratorio de Materiales Orgnicos.
Dr. Marcos Gallegos. Profesor de Universidad Autnoma de Quertaro.
Bioterio de la Escuela de Nutricin de la UAQ ( M. Vet. Vernica y laboratorista Javier).
CICATAA-IPI. Legaria. Por proporcionar las harinas.
Proyecto con Clave CGPI 200135. Estudios Nutricionales y Ensayos Biolgicos en Harinas Instantneas de Maz Elaboradas por un Mtodo Alterno de Produccin de Tortillas.
Al PIFI por haberme otorgado una beca durante la realizacin de mis estudios.
INDICE Pg.
INDICE i
RELACION DE TABLAS iv
RELACION DE FIGURAS v
GLOSARIO DE TERMINOS vi
RESUMEN 1
ABSTRACT 2
1.0 INTRODUCCIN 3
2.0 ANTECEDENTES 5
2.1 Generalidades 5
2.2 Importancia del maz en Mxico 6
2.3. Proceso de nixtamalizacin 8
2.4. Cambios nutricionales durante el proceso de nixtamalizacin 8
2.5 Prdidas de nutrientes por efecto del procesamiento trmico-alcalino 10
2.6 Importancia del calcio en la dieta 10
2.6.1 Absorcin y utilizacin 13
2.6.2 Factores que incrementan la absorcin de calcio 13
2.6.3 Factores que disminuyen la absorcin de calcio 14
2.7 Mtodos alternativos de produccin de Harinas instantneas 14
3.0 JUSTIFICACION 19
4.0 OBJETIVOS 20
i 5.0 MATERIALES Y METODOS 21 5.1. Materiales. 21 5.1.1. Materia Prima. 21 5.1.2 Obtencin de harina instantnea elaborada por el proceso 21 CICATA-IPN 5.1.3 Tortillas de maz (mtodo tradicional) 21 5.1.4 Elaboracin de tortillas obtenidas con los diferentes procesos 22 5.2 Mtodos 22 5.2.1 Humedad 22 5.2.2 Protena 22 5.2.3 Cenizas 23 5.2.4 Extracto etreo 23 5.2.5 Fibra cruda 23 5.2.6 Fibra detergente cida y fibra neutro detergente 24 5.2.7 Determinacin de calcio por absorcin atmica 24 5.2.8 Determinacin de fsforo 25
5.3 EXPERIMENTO BIOLGICO 25
5.3.1 Metodologa 25 5.3.2 Medidas fsicas de los fmures 26 5.3.3 Resistencia ala fractura 26 5.3.4 Grado de cristalinidad por difraccin de rayos-X 27 5.3.5 Conversin alimenticia 27 5.3.6 Anlisis estadstico 27 ii
6.0 DISCUSIN Y RESULTADOS 28
Ensayo biolgico Difraccin de rayos X
7.0 CONCLUSIONES 44
8.0 BIBLIOGRAFIA 45
iii
RELACION DE TABLAS
Pg.
Tabla 1. Composicin qumica del maz y tortilla (% en base seca) 11
Tabla 2. Anlisis proximal de las harinas de maz 32
Tabla 3. Anlisis proximal de las tortillas de maz 33
Tabla 4. Efecto del crecimiento de ratas de 21 das alimentadas con 35 Diferentes dietas a base de tortillas
Tabla 5. Medidas fsicas de huesos 36
Tabla 6. Minerales (mg/g) presentes en hueso 38
iv RELACION DE FIGURAS
Pg.
Figura 1. Caractersticas principales de la estructura del hueso 12
Figura 2. Elaboracin de harina por el proceso CICATA QRO 13
Figura 3. Patrn de difraccin de rayos X de huesos de ratas 39 alimentadas con dietas de tortillas sin adicin de calcio
Figura 4. Patrn de difraccin de rayos X de huesos de ratas 41 alimentadas con dietas de tortillas con adicin de calcio
v GLOSARIO DE TERMINOS
Nixtamalizacin: coccin alcalina del maz.
Pericarpio: cascarilla que envuelve al grano de maz.
Nejayote: agua de desecho del remojo de los granos del maz del proceso de nixtamalizacin.
Osteoporosis: fragilidad de los huesos por falta de calcio.
RDA: recomendacin diaria recomendada de algn componente de la dieta.
Hidroxiapatita: forma del calcio presente en el hueso.
Fitatos: sales del cido ftico.
Maz integral: maz con pericarpio.
PER: ganancia en peso en funcin de la calidad de la protena consumida en la dieta.
Conversin alimenticia: cuanto alimento se requiere comer para aumentar 1 g de peso.
HCIC: harina elaborada por el mtodo CICATA-IPN.
HMAS: harina instantnea Maseca.
HMIN: harina instantnea Minsa.
HM: harina de maz sin procesar.
TCIC: Tortillas elaboradas por el mtodo CICATA-IPN.
TMAS: Tortillas elaboradas con la harina instantnea Maseca.
TMIN: tortillas elaboradas con la harina instantnea Minsa.
TNIX: tortillas elaboradas por el mtodo tradicional de nixtamalizacin.
DTNIX: dieta de tortillas de maiz nixtamalizado por el mtodo tradicional.
DTCIC: dieta de tortillas elaboradas por el mtodo CICATA-IPN.
vi DTMAS: dieta de tortillas elaboradas con harina instantnea Maseca
DTMIS: dieta de tortillas elaboradas con harina instantnea Minsa.
DTNIXT-ca. dieta de tortillas de maz nixtamalizado por el mtodo tradicional adicionadas con calcio.
DTCIC-ca: dieta de tortillas de maz elaboradas por el mtodo CICATA-IPN adicionadas con calcio.
DTMAS-ca: dieta de tortillas preparadas con la harina instantnea Maseca adicionadas con calcio.
DTMIN-ca: dieta de tortillas de maz elaboradas con la harina instantnea Minsa adicionadas con calcio.
vii
1 Estudio Nutricional Comparativo y Evaluacin Biolgica de Tortillas de Maz Elaboradas por diferentes Mtodos de Procesamiento
RESUMEN El Centro de Investigacin en Ciencia Aplicada y Tecnologa Avanzada del Instituto Politcnico Nacional (CICATA- IPN) desarroll un proceso de elaboracin de tortillas con ventajas tecnolgicas y ambientales, al reducir el consumo de energa y tiempo de proceso. Adems, utiliza solamente el agua necesaria para su cocimiento, por lo que no genera efluentes contaminantes. Este proceso presenta algunas modificaciones con respecto al proceso tradicional de nixtamalizacin, en cuanto a la cantidad reducida en agua, cal y tiempo utilizados para la coccin del maz, que no alteran las caractersticas fsico-qumicas, texturales y nutricionales del producto. Este nuevo proceso utiliza el maz entero. En el presente trabajo se realizo la caracterizacin qumica y nutricional de la harina de maz elaborada con el proceso CICATA-IPN con la hiptesis de que las tortillas obtenidas presentaran mayor cantidad de nutrientes. Adems, por medio de un modelo experimental se realizaron ensayos biolgicos utilizando ratas wistar, donde se evalu la ganancia en peso que esta en funcin de calidad de la protena ingerida proveniente de la dieta. Estos resultados fueron comparados con tortillas elaboradas por el proceso tradicional de nixtamalizacin y con las tortillas preparadas a partir de harinas de las marcas comerciales Maseca y Minsa. Al final del ensayo biolgico, le fueron extrados los fmures a las ratas y les fue evaluada su resistencia a la fractura y la cristalinidad de los huesos, que a su vez estar dada en funcin del calcio absorbido. As como el anlisis cualitativo de algunos minerales presentes en el hueso, tales como el calcio, fsforo y magnesio. Los resultados obtenidos en este trabajo demuestran que a pesar de las desventajas tecnolgicas que presenta el proceso de nixtamalizacin, ste sigue siendo la mejor opcin en cuanto a calidad nutricional y sobre todo en biodisponibilidad de calcio, aunque no se debe descartar la idea del uso de la harina integral CICATA-IPN por las ventajas tecnolgicas, ecolgicas y nutricionales comparadas con las tortillas obtenidas a partir de las harinas comerciales. 2
ABSTRACT
The Centro de Investigacion en Ciencia Aplicada y Tecnologia Avanzada of the Instituto Politecnico Nacional (CICATA-IPN) has developed a new process to elaborate corn tortilla which has both technological and environmental advantages by reducing both time and energy respect to the traditional method. The new process differs from the traditional one, mainly because it uses the whole corn grain, requires a reduced amount of water and lime, and a short period of time for cooking the corn, all these, without altering the physicochemical, texture and nutritional characteristics of quality of the product. The present paper, reports on the chemical and nutritional characterization of the corn flour, elaborated with the CICATA-IPNs process, from which, tortillas with greater amount of nutrients are obtained. Biological tests were performed by using an experimental model with Wistar rats, where its gain in weight was evaluated, which is function of the quality of the ingested protein from the diet. Results were compared against those obtained form the traditional method of nixtamalization and, brand name commercially available: Maseca and Minsa. In the last experimental test, femur bone was extracted from the rats and then crack resistance and cristalinity measurements were carried out. Cristalinity is directly related to the amount of calcium absorbed. A qualitative analysis of minerals such as calcium, phosphorus and magnesium, contained in the bone was also performed. Results obtained in this work show that in spite of the technological disadvantages that the process of traditional nixtamalizacin presents, it continues being the best option as far as nutritional quality and biodisponibility of calcium, although the idea of the use of the integral flour CICATA-IPN with its technological , ecological and nutritional advantages as compared to those tortillas obtained from the commercial instantant corn flours.
3 1.0 INTRODUCCIN El maz fue domesticado hace aproximadamente 3,500 aos, en paralelo con otros alimentos, como el frijol, el chile y la calabaza. Con la domesticacin de estos alimentos, se sentaron las bases de la actividad agrcola y con ello las grandes culturas de Mesoamrica (FAO, 1973). Por otra parte, la versatilidad del maz hizo que se cultivase en todas las regiones de nuestro Pas. Por ello buena parte de nuestro territorio se cubri por su cultivo y sus frutos sirvieron de base para la alimentacin de diversos grupos que se asentaron en l. Se comi de diversas formas, tanto lquido, como atoles y bebidas, como cocido, o bien en su estado natural o nixtamalizado para hacer masa y despus tortillas, quesadillas, sopes, huaraches, tacos y otros productos. De tal forma que el maz y las tortillas y sus derivados representaron la base del desarrollo y supervivencia de las culturas antiguas que habitaron nuestro territorio. Actualmente, nuestro pas sigue estrechamente vinculado al consumo de esos mismos productos derivados del maz (Baza, 1988). En Mxico, la industria de la tortilla y sus derivados representa la quinta industria de mayor volumen de ventas (Figueroa y col., 1994). Los industriales de la masa y la tortilla basan su proceso en modificaciones ligeras que le han realizado al mtodo tradicional de nixtamalizacin. El mtodo de nixtamalizacin tradicional consiste de la coccin alcalina del maz (una parte) en agua (tres partes) utilizando cal (1-3% p/p en relacin al peso del maz) durante 20 a 60 min., dependiendo de la materia prima utilizada. Posteriormente, se realiza un reposo que puede variar de 12 a 16 hrs. Al trmino de ese tiempo, los granos de maz son lavados; el maz cocido, reposado y lavado (llamado nixtamal) es molido hasta la obtencin de masa, la cual es formateada a unidades circulares y cocida en una superficie metlica calentada a 280-300 C con gas, hasta la obtencin de las tortillas. Las condiciones del proceso dependen de las caractersticas del tipo de maz. Este proceso emplea grandes cantidades de agua que no es reutilizada, elevada concentracin de calcio, consume demasiado tiempo de proceso y su gasto energtico tambin es alto al utilizar gas 4 para el cocimiento de los granos de maz y cocimiento de la tortilla. Debido a lo anterior, se ha propuesto el uso de nuevas tecnologas para la elaboracin de tortillas, tales como la de extrusin (Martnez-Bustos y col. 1996; Johnson y Williams, 1992; Serna-Saldvar y col., 1988; Baza y col., 1979), la de cocimiento por radiacin infrarroja (Bedolla, 1983) y proceso hidrotrmicos con cocimiento por presin (Molina y col., 1977), sin que hasta el momento se este aplicando actualmente alguna de ellas a escala industrial.
El Centro de Investigacin en Ciencia Aplicada y Tecnologa Avanzada del Instituto Politcnico Nacional (CICATA- IPN) desarroll un proceso de elaboracin de tortillas con ventajas tecnolgicas y ambientales que pueden ser de aplicacin industrial (U.S PAT. #6 265 013, 2001). Este proceso presenta algunas modificaciones con respecto al proceso de nixtamalizacin, en cuanto a la cantidad de agua, cal y tiempo utilizados para la coccin del maz, que no alteran las caractersticas propias de la calidad del producto, y utiliza el maz entero.
Debido a lo anterior, el objetivo del presente trabajo es realizar un estudio de composicin qumica y valor nutricional de las tortillas de maz elaboradas por el proceso alternativo CICATA-IPN y compararlas con tortillas obtenidas a partir del proceso tradicional de nixtamalizacin y de tortillas elaboradas con harinas de las marcas comerciales Maseca y Minsa.
5 2.0 ANTECEDENTES 2.1 Generalidades El maz (palabra de origen indio caribeo, significa literalmente lo que sustenta la vida), que es junto con el trigo y el arroz uno de los cereales ms importantes del mundo; suministra elementos nutritivos a los seres humanos y a los animales y es una materia prima bsica de la industria de transformacin, de la que se obtienen diversos componentes como el almidn, aceite y protenas, y a partir de ellos se obtienen productos como las bebidas alcohlicas y edulcorantes alimenticios (FAO, 1973).
El maz (Zea mays) pertenece a la familia de las gramneas y es una planta anual alta dotada de un amplio sistema radicular fibroso, se trata de una especie que se reproduce por polinizacin cruzada y la flor femenina (elote) y la masculina (espiguilla) se hallan en distintos lugares de la planta. Las cuatro estructuras fsicas fundamentales del grano son: el pericarpio, que se caracteriza por un elevado contenido de fibra cruda, aproximadamente el 87%, la que a su vez est formada fundamentalmente por hemicelulosa (67%), celulosa (23%) y lignina (0.1%) (Burge y Duensing, 1989). El pericarpio, se emplea fundamentalmente como alimento para animales, aunque en los ltimos aos ha despertado inters como fuente de fibra diettica en alimentacin humana. El endospermo contiene 87% de almidn, aproximadamente 8% de protenas y un contenido de grasas crudas relativamente bajo (0.8%). El germen o embrin; se caracteriza por un elevado contenido de grasas crudas, el 33%, y contiene tambin un nivel relativamente alto de protenas (prximo al 20%) y minerales. La cuarta estructura es el pedicelo, que es la parte que une al grano de maz con el olote y representa menos del 0.5% del grano y se compone bsicamente de celulosa. La distribucin ponderal de las partes del grano, su composicin qumica y su valor nutritivo tienen gran importancia cuando se procesa el maz para consumo; a este respecto, hay dos cuestiones de importancia desde la perspectiva nutricional: el 6 contenido de cidos grasos y el de protenas. Se puede definir la planta del maz como un sistema metablico cuyo producto final es almidn depositado en unas estructurales especializadas: los grnulos.
La planta tierna es empleada como forraje; se ha utilizado con gran xito en las industrias lcteas y crnicas y, tras la recoleccin del grano, las hojas secas y la parte superior, incluidas las flores, an se utilizan hoy en da como forraje de calidad relativamente buena para alimentar a los rumiantes de muchos pequeos agricultores de los pases en desarrollo. Tambin tienen importancia las aplicaciones de los residuos de la planta de maz, que se utilizan, entre otras cosas, como base para extraer diversos productos qumicos de las panojas, como por ejemplo, furfural y xilosa. Estos residuos tambin tienen importancia como elementos para mejorar los suelos.
Las variedades cultivadas fundamentalmente para alimentacin comprenden el maz dulce y el reventador, aunque tambin se usan en buena medida el maz dentado, el harinoso y el cristalino. El maz harinoso es un grano con endospermo blando que se emplea como alimento en Mxico. 2.2 Importancia del maz en Mxico El maz ha sido alimento, moneda y religin para el pueblo de Mxico. Durante siglos, la historia nacional y las condiciones de vida de los Mexicanos han estado asociadas estrechamente a su cultivo (Salazar, 1985). El maz era tan importante en las sociedades mesoamericanas que muchas ceremonias se dedicaban a Centotl, dios azteca de maz, o a Yum Kaak, dios del maz y la vegetacin en la cultura maya. La representacin de plantas de maz, o partes de ella, en esculturas, cdices y cermicas prehistricas, as como estudios de fsiles, indican que Mxico fue el centro primario de su origen, domesticacin y dispersin a otras regiones de Amrica del sur hace 5 o 6 millones de aos (Reyes, 1990). 7 En el Mxico moderno, el maz representa el componente ms importante de la produccin agrcola, pues ocupa aproximadamente la mitad de la superficie destinada a la agricultura. De los 14.4 millones de hectreas cultivadas en el territorio nacional en 1991, un total de 6.8 millones correspondieron al maz (47.2%), lo cual representa el 75.2 % del volumen de la produccin agrcola. En Mxico 2.6 millones de persona se dedican al cultivo del maz, cifra que equivale al 68% de la poblacin ocupada en todo el sector agropecuario, y contribuye en una cuarta parte del valor de la produccin total de los granos, significando la base de la dieta alimentara de la mayor parte de la poblacin (aproximadamente para 15 millones de mexicanos es el nico medio de subsistencia). Tambin su importancia radica en la gran diversidad de usos a que es destinado y una amplia penetracin y trayectoria por mltiples encadenamientos agroindustriales alimentarios e industriales (INEGI, 1992 y Gordillo, 1990).
En Mxico, la tradicin de la tortilla se remonta al origen de nuestras races indgenas y las etapas bsicas de la preparacin han permanecido inalteradas desde esas pocas. La tortilla se emplea como producto bsico para la elaboracin de innumerables alimentos tradicionales como son las botanas, totopos, tacos, tostadas, enchiladas y nachos entre muchos otros (Baza, 1988). La tortilla forma parte de la dieta de todos los estratos sociales de los mexicanos con un consumo per cpita de 325 g/ por da (Paredes-Lopez y Saharpulos, 1983). Las tortillas solas proveen 38.8% de las protenas, 45.2% de las caloras y 49.1% del calcio de las necesidades diarias de la dieta en Mxico (Figueroa, 1994). Adicionalmente, el calcio imparte propiedades funcionales deseables (color, sabor, textura y vida de anaquel) y juega un papel esencial en la prevencin de la osteoporosis (Bressani y Scrimshaw, 1958a; Niewohner, 1988).
8 2.3. Proceso de nixtamalizacin
El maz para consumo humano ha sido procesado en Mxico siguiendo la tcnica precolombina conocida como nixtamalizacin (del nhuatl nextli, cal de cenizas, y tamalli, masa cocida de maz) (Cabrera, 1992). La tcnica se basa en el cocimiento de los granos de maz (1 parte) en agua (2-3 partes) y cal (1-3% p/p de Ca [OH] 2 ) durante 30-60 min., con posterior reposo de 12 a 16 hr. Ocurre en seguida, un lavado de los granos de maz reposados para eliminar el exceso de cal y fragmentos del pericarpio desprendidos. Los granos cocidos, reposados y lavados, denominados nixtamal, son molidos en molino de piedras hasta obtener masa. Porciones de masa de 20-25 g son moldeados en for00000000000000ma circular y cocidas en 3 tiempos (primer lado 20 seg., segundo lado 30 seg., y primer lado nuevamente, hasta que ocurra el inflado), en comal con temperatura de 280-300 C. La masa cocida es denominada tortilla.
2.4. Cambios nutricionales durante el proceso de nixtamalizacin
La tecnologa de nixtamalizacin no solo sirve para suavizar al grano de maz sino que el cocimiento alcalino ha sido importante en el desarrollo de las culturas Mesoamericanas, por los cambios nutricionales que en l ocurren. Los anlisis qumicos han demostrado que durante el proceso de nixtamalizacin se pierden nutrientes del maz (Gmez- Aldapa y col., 1996; Pflugfelder y col., 1988; Bressani y Scrimshaw, 1958a; Bressani y col., 1958b). Sin embargo, dicho proceso hace que las tortillas tengan mayor calidad nutricional comparada con el maz crudo, por los cambios qumicos de los nutrientes que en l ocurren.
El maz como todos los cereales es deficiente en aminocidos esenciales (principalmente, en lisina, y en menor grado otros, como el triptofano y los azufrados, Waliszewski y col., 2003; Figueroa, 1999). La nixtamalizacin es un proceso selectivo de las protenas del maz, ya que durante el cocimiento, la zena, protena deficiente en lisina y triptfano (Maner, 1990; Baza, 1988), y que es una protena 9 nutricionalmente pobre, disminuye su solubilidad, mientras que la glutelina que tiene un mayor valor nutricional aumenta su solubilidad y con ello la disponibilidad de los aminocidos esenciales (Martnez-Flores y col., 2002; Paredes-Lpez y Saharpulos- Paredes, 1983; Bressani y col., 1958b). Despus de la nixtamalizacin, existe un aumento de 2.8 veces de lisina, de triptofano y la relacin de isoleucina a leucina se incrementa 1.8 veces (Katz y col., 1974; Bressani y Scrimshaw (1958a). Lo anterior indica que el proceso de nixtamalizacin incrementa el balance de aminocidos esenciales, agregndole ms valor nutricional a las protenas.
La enfermedad de la pelagra, conocida como la enfermedad de las tres D, al causar dermatitis, demencia y diarrea, ocurre en poblaciones cuya dieta est basada en el maz procesado sin tratamiento trmico-alcalino. La pelagra se presenta debido a deficiencias de niacina y triptofano en la dieta. El triptofano es el precursor de la sntesis de niacina en el ser humano, y su equivalencia es de 60 mg de triptofano por 1 mg de niacina. Otro factor que influye en el desarrollo de la pelagra es la elevada concentracin de leucina en el maz, que es de un 12 a un 15% de la protena. Sin embargo, el contenido de leucina en el maz se reduce debido a su degradacin durante el tratamiento trmico-alcalino, lo que mejora el valor nutritivo de la protena (Badui, 1984). Adems, la niacina en el maz esta unida a otros constituyentes del grano, de tal forma que el tratamiento trmico-alcalino la libera, al hidrolizar los enlaces que la unen, hacindola disponible (Badui, 1984). De esa forma la niacina liberada, y ahora disponible, es un factor fundamental en la prevencin de la pelagra (Katz y col., 1974; Trejo-Gonzlez y col., 1982).
El calcio desempea un papel importante durante la nixtamalizacin del grano de maz. El tratamiento con cal facilita la remocin del pericarpio durante la coccin y el reposo, controla la actividad microbiana, mejora el sabor, aroma, color, vida de anaquel y el valor nutricional de las tortillas (Rooney, 1993). En relacin al calcio, Trejo-Gonzlez y col. (1982) realizaron estudios enfocados a la absorcin del calcio despus de someter el maz al proceso de nixtamalizacin. Dichos autores indican que el calcio se incorpora al grano de maz durante la nixtamalizacin, enlazndose 10 con el almidn y aumentando aproximadamente tres veces la cantidad de calcio unida al almidn en relacin al calcio determinado en muestras sin nixtamalizar. La alta disponibilidad de calcio en la tortilla es importante porque evita la osteoporosis, que se manifiesta como fragilidad de los huesos por prdida de masa del sistema seo (Vargas, 1992; Niewohner, 1988).
2.5 Prdidas de nutrientes por efecto del procesamiento trmico-alcalino
Las desventajas que presenta el proceso de nixtamalizacin, desde el punto de vista nutricional, es la prdida de componentes qumicos del grano, las cuales se incrementan con el tiempo de cocimiento, altas concentraciones de cal y durante el reposo. Fragmentos de pericarpio, almidn, protena, germen y cal, constituyen la mayor proporcin de materia seca en el agua de cocimiento. Del germen se pierden aproximadamente 41.5% de los lpidos y el 41.5% de los carbohidratos. Existen prdidas de tiamina, riboflavina y niacina del 60, 52 y 32%, respectivamente, en relacin al total del grano. As como 44 y 46% de reduccin de lpidos y fibra cruda (Bez-Ramrez y Martnez-Borrego, 1990). A pesar de existir prdidas de nutrientes, el maz nixtamalizado presenta mayor valor nutricional que el maz crudo, ya que el resultado de algunos estudios indican un aumento de lisina, de triptofano y la relacin leucina-isoleucina se incrementa en 1.8 veces (Bressani y col., 1958b; Katz y col., 1974). En el Cuadro 1 se muestran diferentes datos reportados por varios investigadores respecto a la composicin qumica del maz y tortilla.
2.6. Importancia del calcio en la dieta. En Mxico, las tortillas de maz son la principal fuente primaria de energa y protena en la dieta de los Mexicanos. Adems, stas proveen aproximadamente el 22% del total de la Recomendacin Diaria Permitida (RDA) para calcio y el 19% para el fsforo (NAS, 1999).
11 Tabla 1. Composicin qumica del maz y tortilla (% en base seca). Producto Protena (N x 6.25) Lpidos Carbohidratos Cenizas Fibra cruda Maz (a) 9.6 5.1 84.0 1.3 1.5 Nixtamal 10.3 3.9 84.3 1.5 1.3 Tortilla 10.7 3.0 84.7 1.5 1.1 Nixtamal 11.1 4.6 - - 1.5 - - Tortilla 11.2 4.4 - - 1.6 - - Tortilla (b) 9.7 1.5 86.0 1.8 2.4 (a) Datos de Bressani y col. (1958b). (b) Datos de Saldaa y Brown (1984). Fuente: Serna-Saldivar y col. (1990).
Una adecuada ingesta de calcio durante la vida es importante para la homeostasis del hueso y la prevencin de varias enfermedades crnicas (osteoporosis). Con la ingesta adecuada de alimentos ricos en calcio se cubren los requerimientos de calcio (1100 mg/da) El calcio es el mineral ms abundante en el cuerpo, conforma cerca del 1.5% al 2% del peso corporal y 39% de los minerales corporales totales. El 99% del calcio est en los huesos y los dientes. El restante 1% est en la sangre y los lquidos extracelulares y dentro de las clulas de los tejidos blandos, donde regula muchas funciones metablicas importantes. Las dietas bajas en calcio hacen que este se movilice desde el hueso para poder suplir los requerimientos necesarios del organismo. La ingesta elevada de protenas contribuye a una prdida acelerada de hueso, pues intensifican la excrecin de calcio por el rin (Desantiago y col., 1999). El esqueleto almacena calcio ionizado y fsforo (en forma de iones de fosfato) de modo metabolicamente estable y estructuralmente utilizable. El calcio se presenta en los huesos en forma de hidroxiapatita, una estructura cristalina que consiste de fosfato de calcio que se arregla alrededor de una matriz orgnica de protena colagenosa para proporcionar fuerza y rigidez. Mediante la formacin y resorcin de 12 hueso, se cambian 1.000 mg/da de calcio entre el hueso y el lquido extracelular (un 1% de la reserva). La mayor parte del calcio del hueso no se difunde fcilmente al compartimiento extracelular, sino que debe ser movilizado por la resorcin sea mediada por clulas y regulacin endocrina. Mediante el proceso de acoplamiento, la formacin de hueso aumenta y los osteoblastos son estimulados para que rellenen el defecto de resorcin. En la Figura 1 se muestran las caractersticas principales de los componentes internos del hueso.
Figura 1. Caractersticas principales de la estructura del hueso Fuente: www.laosteoporosis.com/profesionales/fisiol/hfis05.html. 13 2.6.1 Absorcin y utilizacin El calcio se absorbe principalmente en la parte del duodeno donde prevalece un medio cido; en consecuencia, la absorcin se reduce en gran medida en la parte ms inferior del tracto intestinal donde los contenidos son alcalinos. Por lo general, slo se absorbe del 20 al 30% del calcio ingerido, y algunas veces tan solo el 10% (Schedl y col. 1986).
2.6.2 Factores que incrementan la absorcin de calcio
Diversos factores influyen de manera favorable en la absorcin de calcio. En general, a mayor necesidad y menor suministro por la dieta, mayor eficacia habr en la absorcin. El aumento de las necesidades del calcio, que se ven reflejadas durante el crecimiento, el embarazo, la lactancia, la deficiencia de calcio y los niveles de ejercicio, resultan en un elevada densidad sea que favorece la resorcin de calcio. Un sistema de transporte en el duodeno y el yeyuno proximal, es activo, saturable y controlado mediante la accin de la vitamina D en su forma activa (1,25(OH) 2 D 3 ). Esta hormona aumenta la captacin de calcio en el borde en forma de cepillo de la clula de la mucosa intestinal al estimular la produccin de una protena que se une al calcio (Schedl y col. 1986).
El calcio se absorbe mejor en un medio cido; por lo tanto, el cido clorhdrico que se secreta en el estmago favorece la absorcin de calcio mediante la disminucin del pH en el duodeno proximal. La vitamina D tambin estimula la actividad de las enzimas, como la fosfatasa alcalina intestinal. Un segundo mecanismo de transporte, pasivo, no saturable, e independiente de la vitamina D ocurre a todo lo largo del intestino. La mayor parte del calcio se absorbe en el leon y tambin puede absorberse en el colon.
El calcio se absorbe solo si est en una forma hidrosoluble y no si se precipita por otro constituyente de la dieta, como oxalatos. El calcio no absorbido se excreta por las heces. 14 2.6.3 Factores que disminuyen la absorcin de calcio
La carencia o una cantidad insuficiente de vitamina D en su forma activa, inhibe la absorcin del calcio. Se ha observado que el cociente ptimo de la relacin calcio:fsforo para la captacin de calcio en la dieta es de 1:1 1:2. La disposicin de calcio se ve afectada cuando el fsforo se presenta en la dieta en forma de fitatos (Wyatt y col., 2000)
2.7 Mtodos alternativos de produccin de Harinas instantneas
Cuando un mtodo nuevo es propuesto para suplir un mtodo previamente establecido, es importante considerar que no haya cambios sustanciales en las caractersticas particulares del producto. En el caso de la tortilla, al implementar un mtodo nuevo se busca que no se alteren las caractersticas de calidad (rolabilidad y suavidad), as como de los atributos sensoriales (color, olor y sabor) del producto. Sin embargo, un aspecto que a veces no se toma en cuenta y es trascendental en la salud humana de la poblacin consumidora del producto, es que no se altere la calidad nutricional del producto.
Las primeras investigaciones cientficas sobre aspectos fsico-qumicos y nutricionales de la tortilla se iniciaron en los aos 50s, donde tambin se efectuaron varios esfuerzos tendientes a mejorar el proceso tradicional de nixtamalizacin. Sin embargo, stos cubrieron aspectos bsicos del proceso ya comercial, tales como disminuir las relaciones de agua a maz, la concentracin de cal, la temperatura y el tiempo de cocimiento y de reposo, sin considerar cambios significativos al proceso tradicional de nixtamalizacin (Vaqueiro y Reyes, 1986).
Algunos investigadores han propuesto nuevos mtodos de procesamiento de tortillas, con la finalidad de reducir las desventajas ya mencionadas del proceso tradicional.
15 Desde el nixtamal, el metate y el comal hasta nuestros das el gran logro en este campo ha sido la fabricacin de harina instantnea nixtamalizada, debido a que eliminan las labores cotidianas, intensivas y tediosas del proceso tradicional y se pueden almacenar durante un cierto periodo de tiempo. El incremento de costos, carencia de olor y textura apropiada son las principales desventajas de productos preparados de masas deshidratadas. A continuacin se mencionan algunos de los mtodos alternativos al proceso de nixtamalizacin propuestos para elaborar harinas instantneas para la elaboracin de tortillas. El procedimiento, descrito por Deschamps (1985), se basa en el mtodo utilizado tradicionalmente en las zonas rurales. El maz es cocido con agua y cal, convirtindolo en nixtamal, ya sea en tandas o mediante un procedimiento de elaboracin continua. Tras su coccin y macerado, el maz tratado con agua y cal se lava con agua a presin o pulverizacin y se tritura hasta que forme una masa que se lleva a un secador y se convierte en harina. Dicha harina, formada por partculas de todos los tamaos, se pasa por un tamiz que separa las partculas gruesas de las finas. Las partculas gruesas regresan al molino para ser trituradas otra vez y las finas, que constituyen el producto acabado, se envan a las instalaciones de empaquetado, donde se empacan en bolsas de papel reforzado. El rendimiento industrial de la harina de maz cocido en agua de cal flucta entre el 86 y el 95%, segn el tipo del maz, de los granos enteros y las condiciones en que se realiza el tratamiento con cal. Cuando la harina tiene un contenido de humedad del 10 al 12%, es estable frente a la contaminacin microbiana. Si la humedad supera el 12% la atacan con facilidad los mohos y las levaduras. Otra cuestin relacionada con la estabilidad de la harina es la ranciedad, que normalmente no constituye un problema salvo que se empaquete a altas temperaturas. El tiempo mnimo para que la harina presente caractersticas de ranciedad es de cuatro a seis meses en invierno y de tres meses en verano. Por lo general, se vende al consumidor dentro de los 15 das siguientes a su venta a los comerciantes al por menor y al por mayor, mientras que su perodo de conservacin en los anaqueles es de un mes (Del Valle, 1972). La manera tradicional de cocer el maz en agua de cal para hacer tortillas en el medio rural requiere mucho tiempo y trabajo. Las operaciones de coccin y remojado toman 16 entre el 70 y el 80 % del tiempo. En cambio, la harina instantnea para tortillas ofrece muchas ventajas, como la comodidad, el menor trabajo requerido y un menor consumo de energa, dando un producto de confianza y estable. A nivel industrial o comercial, la molienda y la deshidratacin son factores que influyen considerablemente en el costo. El maz cocido en agua de cal contiene aproximadamente un 56 % de humedad, que debe disminuirse al 10-12% en la harina.
Bressani y col. (1962) analizaron un procedimiento basado en la coccin bajo presin de 0.35 y 1.05 Kg por cm 2 en condiciones secas y hmedas, durante 15, 30 y 60 min., sin emplear cal. No existi ningn efecto por el tratamiento en la composicin qumica y digestibilidad real de las protenas, pero sin embargo, se disminuy la solubilidad del nitrgeno. El mtodo de coccin bajo presin sin cal no redujo el contenido de fibra cruda, que es uno de los efectos concretos de la cal, y el contenido de calcio fue notablemente inferior al de la masa seca elaborada segn el mtodo tradicional.
Mendoza (1975) describe un mtodo de cocimiento alcalino de harina de maz utilizando vapor. El aparato consta de una cmara que en la parte inferior esta provista de un ventilador que permite tanto la circulacin de aire como un movimiento constante de la harina, previamente mezclada con cal; el calor y el agua son suministrados de tal forma que el vapor de agua resultante permite humedecer la mezcla harina-cal, llevndose a cabo de esta manera el cocimiento; posteriormente, la harina se transfiere a una cmara de enfriamiento y finalmente es molida.
Molina y col. (1977), reportaron la elaboracin de harinas instantneas cociendo y secando una mezcla de harina de maz con agua (relacin 1 a 3) y cal (0.3% p/p) en un tambor doble rotatorio. Las condiciones del proceso fueron: presin de 15, 20 y 25 psi, alcanzando con ello temperaturas de 93, 99 y 104C, respectivamente, a 2, 3 y 4 rpm. En dicho estudio la harina instantnea fue hidratada 17 y se elaboraron tortillas, encontrndose caractersticas fisicoqumicas y sensoriales similares a las tortillas obtenidas por el mtodo tradicional.
Johnson y col. (1980), propusieron un proceso de produccin de harina instantnea mediante la micronizacin, que es un mtodo de procesamiento en seco utilizando quemadores de gas infrarrojo. Este procedimiento consiste en mezclar los granos de maz pre-quebrados en solucin diluida de calcio y posteriormente la mezcla se somete a cocimiento por infrarrojo. El grano de maz es cocido rpidamente desde su parte ms interna hacia el exterior e inmediatamente los granos calientes son hojueleados en rodillos corrugados de acero, enfriados, y molidos hasta obtener la harina instantnea. Las pruebas de textura y rolabilidad efectuadas en dicho estudio en las tortillas preparadas por micronizacin fueron comparables a las tortillas elaboradas a partir de una harina instantnea comercial.
Khan y col. (1982) compararon tres mtodos: el tradicional, uno comercial y uno de coccin bajo presin en laboratorio. Aplicando cada uno de los procedimientos, se someti el maz a una sub-coccin, a una coccin ptima y a una sobre coccin, a fin de medir algunos de los cambios fsicos y qumicos que podan ocurrir. Aunque el mtodo tradicional caus la mayor prdida de materia seca del grano, produjo las mejores tortillas por lo que se refiere a su textura, color y aceptabilidad. El procedimiento de coccin bajo presin di una masa pegajosa y tortillas de aspecto desagradable. El mtodo comercial result ser el que dio tortillas de aspecto menos apetitoso.
El mtodo de extrusin para elaborar masa fresca o harinas instantneas de maz para preparacin de tortillas fue reportado por diversos autores (Gmez-Aldapa y col., 1999; Martnez-Flores y col., 1998; Martnez-Bustos y col., 1996; Johnson y Williams, 1992; Serna-Saldivar y col., 1988; Baza y col., 1979; Guerra, 1978).
Todas las metodologas mencionadas han tenido xito en lograr alguna o algunas ventajas tecnolgicas en relacin al proceso tradicional, tal como disminuir el 18 tiempo de procesamiento, los contenidos de agua y cal, disminuir el costo de energa o disminuir o eliminar por completo el agua de desecho, altamente contaminante.
Sin embargo, de los estudios anteriores, solamente los de extrusin hechos por Figueroa y col. (2003), Martnez Flores y col. (2002), Figueroa y col. (2001), Gmez-Aldapa y col. (1999), y Serna-Saldvar y col. (1988), realizaron estudios de composicin qumica y valor nutricional, mostrndose con ello poco inters en los aspectos nutricionales del producto. Por lo anterior, en el presente estudio se plantea realizar una extensa investigacin, desde el punto de vista nutricional, en tortillas elaboradas a partir de harinas instantneas de maz, elaboradas por un proceso alterno al mtodo tradicional de nixtamalizacin (Figura 2).
Figura 2. Elaboracin de harina por el proceso CICATA.
19 3.0 JUSTIFICACION
Existe una gran preocupacin por algunos sectores Industriales y de la comunidad cientfica Mexicana para mejorar desde el punto de vista tecnolgico, nutricional y ambiental, el proceso tradicional de nixtamalizacin para elaborar tortillas de maz.
El Centro de Investigacin en Ciencia Aplicada y Tecnologa Avanzada del Instituto Politcnico Nacional (CICATA-IPN), ha desarrollado una nueva metodologa, basada en modificaciones a algunas etapas del proceso tradicional de nixtamalizacin, con el cual se ha logrado reducir tiempos de cocimiento, de reposo, de adicin de concentracin de cal, lo que repercute en ahorro energtico, y de tiempo. Aunado a ello, se logr reducir al mnimo el uso de agua durante el proceso, por lo que no se genera ningn efluente contaminante. La planta procesadora de harina para la elaboracin de tortillas de tortillas fue diseada por investigadores del CICATA-IPN.
El proceso CICATA-IPN utiliza maz integral, por lo que las tortillas obtenidas presentaran, en teora, mayor contenido de nutrientes, especficamente mayores contenidos de protena, de lpidos, vitaminas, minerales y fibra diettica, que son eliminados parcialmente en las etapas de cocimiento y reposo del proceso tradicional de nixtamalizacin. El propsito del presente trabajo es realizar un estudio nutricional en las tortillas de maz elaboradas por el proceso CICATA-IPN, comparndolas con tortillas elaboradas por el proceso tradicional y con tortillas hechas de las marcas comerciales Maseca y Minsa.
20 4.0 OBJETIVOS
Realizar un estudio de la composicin nutricional de tortillas de maz elaboradas por el proceso CICATA-IPN, as como de ensayos biolgicos usando ratas como modelo experimental para la evaluacin de la relacin de eficiencia proteica (ganancia en peso en funcin de la calidad de la protena consumida en la dieta), conversin alimenticia, absorcin y cuantificacin de calcio y fsforo absorbidos en los huesos, y en funcin de ello determinar la cristalinidad y resistencia a la fractura de los huesos.
21 5.0 MATERIALES Y METODOS.
5.1 Materiales
5.1.1 Materia Prima
Para los experimentos del presente trabajo se utiliz el siguiente material:
1. Granos de maz Tabasco proveniente de la planta CICATA-IPN (Mxico, D.F.).
2. Harina instantnea de maz integral elaborada por el Proceso CICATA-IPN.
3. Harina de maz de las marcas comerciales Maseca y Minsa.
El maz en grano sin procesar se moli usando un molino elctrico Thomas-Wiley, modelo 3383-L10 para la obtencin de harina.
5.1.2 Obtencin de harina instantnea elaborada por el proceso CICATA-IPN.
La harina de maz instantnea elaborada por el proceso CICATA-IPN se obtuvo cociendo 1 parte de maz, con 1/2 parte de agua y cal (0.25 % p/p en relacin al maz) durante 5 min.; posteriormente, el agua fue escurrida y los granos fueron molidos en un molino de martillos; en seguida, los granos de maz molidos se secaron en un secador tipo flash con aire caliente; finalmente la harina se empaco; el tiempo aproximado de este proceso fue de 30 min.
5.1.3 Tortillas de maz (mtodo tradicional).
Para la elaboracin de las tortillas de maz nixtamalizado (proceso tradicional) se utilizaron granos de maz Tabasco procedentes de la planta CICATA-IPN 22 (Mxico, D.F.) y se proceso de la siguiente manera: se coci 1 parte de maz con 3 partes de agua y cal (1.5 % p/p en relacin al maz) a 98 o C por 20 min., dejando reposar 16 hr; despus se desecho el nejayote (que contena agua con fragmentos de pericarpio desprendidos y calcio) y los granos de maz nixtamalizados se lavaron 3 veces con agua corriente y se molieron con un molino de piedras para la obtencin de la masa.
5.1.4 Elaboracin de tortillas obtenidas con los diferentes procesos.
A partir de las harinas instantneas elaboradas por el proceso CICATA-IPN, y de las marcas comerciales Maseca y Minsa, as como de la masa nixtamalizada por el mtodo tradicional se elaboraron tortillas, usando una mquina tortilladora comercial.
Las tortillas elaboradas por los diferentes procesos fueron secadas y molidas para reducir su tamao de partcula. Las muestras fueron guardadas en refrigeracin a temperatura de 4C hasta la realizacin de los anlisis bromatolgicos, los cuales fueron hechos por triplicado.
5.2 Mtodos.
5.2.1 Humedad. 44-15A, AACC (1995).
A la humedad se le considera como la prdida de agua que sufre la muestra al ser calentada. Se utilizaron 2 g de muestra, los cuales fueron calentados en una estufa a 135 o C por 1 hr.
5.2.2 Protena. 46-13, AACC (1995).
Se hizo una digestin de la muestra con cido sulfrico en presencia de un catalizador. La solucin cida se alcaliniz con una solucin de hidrxido de sodio. El 23 amonaco fue destilado y recogido en una cantidad medida de cido brico, titulndose con una solucin valorada de cido clorhdrico. El factor de conversin utilizado fue de 6.25.
5.2.3 Cenizas 08-01 AACC (1995).
La cantidad de cenizas representa el contenido total de minerales en los alimentos. Las cenizas contienen los elementos inorgnicos, mucho de los cuales son de inters nutricional como es el caso del calcio y fsforo, entre otros. Para este mtodo se utilizaron 2 g de muestra que fueron incinerados en una mufla a 550 o C por 2 hr.
5.2.4 Extracto etreo 30-10 AACC (1995).
Para determinar el contenido de grasa de un alimento se lleva a cabo por un reflujo de solvente por calentamiento continuo; el solvente debe tener las siguientes caractersticas: un alto poder disolvente para lpidos, que se evapore fcilmente, que no deje residuos, tener un punto bajo de ebullicin y que penetre fcilmente en las partculas alimenticias. Las sustancias ms usadas son ter de petrleo y ter etlico.
5.2.5 Fibra cruda 7.068 A.O.A.C. (1984).
Este mtodo fue desarrollado para determinar carbohidratos indigeribles en alimentos para animales y la fibra; la fibra cruda fue determinada por una digestin secuencial de la muestra con H 2 SO 4 al
1.25% y despus con NaOH al 1.25%. El residuo insoluble se obtuvo por filtracin, luego fue secado y pesado. All se obtiene el peso de la fibra junto al de los minerales. Para obtener el contenido de fibra es necesario incinerar esta muestra, quedando solamente el residuo de las cenizas constituido por los minerales. Por diferencia entre el peso anterior (antes de la incineracin) y el de las cenizas se obtuvo el de la fibra cruda; la cual es una medida del contenido de celulosa y lignina en la muestra. 24 5.2.6 Fibra detergente cida y fibra neutro detergente Van Soest (1963).
La tcnica para la determinacin de la fibra neutro detergente es usada para la determinacin de los constituyentes de la pared celular; es un mtodo rpido que permite separar la fraccin fibrosa de la fraccin soluble. Se fundamenta en la accin de un detergente sobre la muestra que al final deja todos los componentes de la pared celular: hemicelulosa, celulosa, lignina,
La fibra cido detergente (FAD) es el paso previo para la determinacin de lignina y celulosa ya que ella est formada por el complejo ligno-celulsico de la planta. Adems, contiene una pequea cantidad de protena que queda unida a la fibra y a los minerales insolubles como la slice. La tcnica se basa en la disolucin con un detergente en medio cido de las protenas, grasas, pigmentos y dems compuestos que no sean ligno-celulsicos. Para la determinacin, se pes la muestra y se coloc en una bolsita de papel, la cual es sellada para despus ponerla en la solucin neutro detergente (EDTA, sulfito sdico, amilasa y otros) a pH=7.0 y ebullicin durante 1 hr. El material fue secado y pesado. Con ello se obtuvo la fibra neutro detergente. El residuo se trato con: solucin cido detergente (cido sulfrico 0.5M y cetiltrimetil amonio) y ebullicin durante 1hr. El residuo fue secado y pesado. Con ello se obtuvo la fibra cido detergente
5.2.7 Determinacin de calcio por absorcin atmica. AOAC 975.03 (1996).
La cuantificacin del contenido de calcio en las muestras se realiz mediante espectroscopia de absorcin atmica utilizando un equipo Analyst 300 de Perking Elmer. Esto se llevo a cabo reduciendo a cenizas las muestras de harinas, calcinando en una mufla por 4hr a 550 0 C, para despus digerir dichas cenizas con cido clorhdrico. La espectroscopia atmica consiste en la medicin de absorcin de 25 radiacin electromagntica producida por los tomos de calcio. Esta cuantificacin de calcio se lleva a cabo de acuerdo con la ley de Beer, cuando disminuye la intensidad de la luz es por que se incrementa el contenido de tomos de calcio y aumenta la intensidad de la luz cuando disminuye la concentracin de tomos de calcio.
5.2.8 Determinacin de fsforo AOAC 965.17 (1998)
Este mtodo se utiliz para la determinacin de fsforo por espectrofotometra con azul de molibdeno. El fsforo reacciona con el cido molbdico para formar azul de molibdeno susceptible que puede determinarse espectrofotometricamente a 690 nm. Se prepar una solucin madre de fsforo de 400 m g/ml hasta un volumen final de 100 ml; se prepar una solucin hija de 100 m g/ml hasta un volumen final de 100 ml, que se utiliz para la preparacin de la curva de calibracin en el rango 50-400m g/l. Se incineraron 2 gr de muestra durante 4 horas, las cenizas fueron utilizadas para la elaboracin de la solucin prueba para determinar la cantidad de fsforo contenida en las muestras. Se adicion para el desarrollo del color, 4 ml de solucin cida de molibdato de amonio y 0.25 ml de solucin de cloruro estaoso.
5.3 EXPERIMENTO BIOLGICO
5.3.1 Metodologa
Se utilizaron 32 ratas wistar macho recin destetadas, de 21 das de nacidas. Se estudiaron dietas elaboradas con las tortillas elaboradas por los siguientes procesos: 1) Tortillas de maz elaboradas por el mtodo tradicional, 2) Tortillas de maz elaboradas por el proceso CICATA-IPN. 3) Tortillas de la marca Maseca y, 4) Tortillas de la marca Minsa. A partir de esas tortillas se prepararon 8 dietas. Todas las dietas fueron elaboradas de acuerdo con lo recomendado por Reeves (1993) para roedores en crecimiento. Las dietas se codificaron de la siguiente manera: 1) TNIX, 26 2) TCIC, 3) TMAS, 4) TMIN, 5) TNIX-Ca, 6) TCIC-Ca, 7) TMAS-CA, 8) TMIN-Ca. Las primeras 4 dietas se elaboraron sin adicin de calcio exgeno. Las otras 4 dietas fueron las mismas pero preparadas adicionndoles 0.6244g/100gr de fosfato de calcio.
El experimento se realiz en la Escuela de Nutricin de la Universidad Autnoma de Quertaro. Los animales fueron colocados en un local acondicionado propio para este tipo de estudios. Para el experimento, se utilizaron 4 animales por cada tipo de dieta. Al inicio del experimento los animales fueron pesados y distribuidos al azar, colocndose posteriormente en jaulas de acero inoxidable. El peso inicial promedio de los animales por lote fue de 43.35-43.7 g. La duracin del experimento fue de 4 semanas. Cada tercer da se repuso el alimento y se les cambi el agua (el agua utilizada fue desionizada) y se recolectaba el alimento tirado, el cual era pesado para poder as determinar el alimento consumido; el animal tambin fue pesado cada semana. A la cuarta semana los animales fueron sacrificados y se les extrajeron los fmures.
5.3.2 Medidas fsicas de los fmures
Los fmures fueron perfectamente limpiados de todo excedente de carne y se pusieron a secar en una estufa a 45 o C por 24 hr. Una vez secos se procedi a medirlos con un vernier. Las mediciones fueron: peso, longitud, dimetro medio, dimetro de la articulacin femoral con la pelvis, dimetro de la articulacin femoral con la rodilla.
5.3.3 Resistencia a la fractura
La fuerza al rompimiento del fmur es una medida de la resistencia que tiene el hueso a la fractura; esto se encuentra directamente relacionado con la cantidad de calcio presente en el hueso y fue evaluado utilizando el Texture Analyzer TA-XT2. La resistencia a la fractura se determin usando la fuerza de deformacin en una curva 27 durante la compresin de cada uno de los fmures. La sonda y las condiciones utilizadas fueron: un cilindro con 0.203 cm de dimetro a una velocidad de 10 mm/s y una distancia de 10 mm.
5.3.4 Grado de cristalinidad por difraccin de rayos-X
La cristalinidad de los huesos va a estar dada por la formacin de hidroxiapatita (Ca 10 (PO 4 ) 6 (OH) 2 . Las mediciones de rayos-X se efectuaron usando un difractmetro Rigaku, operando a 35 kV, 15 mA con la radiacin incidente = 1.5406 de CuK. Los difractogramas se obtuvieron en un rango de 2 a 30 en una escala de 2. Los datos se reportaron en valores de distancias interplanares expresadas en , utilizando la ley de Bragg. El mismo equipo tena el software necesario para poder distinguir los picos de difraccin y la radiacin no coherente, de tal forma que permiti realizar estimaciones de los porcentajes de cristalinidad a travs de un patrn de referencia.
5.3.5 Conversin alimenticia.
Esta medida indica cuanto alimento requiere comer un animal para aumentar 1 g de peso y esto va a estar relacionado directamente con la calidad de la protena contenida en la dieta
5.3.6 Anlisis estadstico.
El anlisis estadstico fue realizado usando el Software SAS (Statistical Analysis System, 1995). Los datos fueron analizados usando el modelo lineal general y las comparaciones entre las medias sern realizadas a travs de la prueba de Duncan, con nivel de significancia de 5%.
28 6.0 DISCUSIN Y RESULTADOS
Como la industria de las tortillas en Mxico ha tenido un considerable incremento en sus ventas, se han buscado alternativas en como reducir la cantidad de agua usada en el proceso y por lo tanto eliminar al mximo el agua de desecho (nejayote) del proceso de nixtamalizacin; adems de no perder tantos nutrientes en el nejayote para que las tortillas obtenidas sean de mejor calidad nutricional, ya que como es sabido la tortilla es un elemento insustituible en la dieta de todos los estratos sociales de la poblacin mexicana (Figueroa, 1994).
En el presente trabajo se realiz primero el anlisis proximal a las harinas nixtamalizadas y a las tortillas. Posteriormente, se hizo un estudio biolgico usando ratas wistar como modelo experimental para conocer la calidad nutricional de las diferentes tortillas.
En la Tabla 2 se observa el anlisis proximal de las siguientes harinas: CICATA-IPN (HCIC), harina maseca (HMAS), harina minsa (HMIN) y harina de maz sin procesar (HM), as como de las siguientes tortillas: Tortillas CICATA-IPN, (TCIC), Tortillas maseca (TMAS), tortillas minsa (TMIN) y tortillas elaboradas por el mtodo tradicional (TNIX). La cantidad de humedad contenida en las diferentes harinas se encuentra dentro de lo reportado en la bibliografa (FAO, 1993); la HM fue la que present mayor porcentaje de humedad (11.35 %) debido a que es un material fresco que no ha pasado por ningn proceso de secado y todava tiene agua retenida. En las tortillas, el contenido de humedad disminuyo debido al mismo proceso de elaboracin, en donde se aplicaron diferentes procesos de secado, como fue el tratamiento trmico aplicado para cocerlas y despus secadas para poder procesarlas y obtener la harina de tortilla correspondiente.
En cuanto a la cantidad de cenizas contenidas en las muestras, se observ un incremento en las tortillas, comparadas con las harinas. La HM tuvo 1.67% de cenizas, mientras que para TNIX el contenido aumento hasta 1.75%, y esto fue 29 debido al procedimiento de nixtamalizacin tradicional, en donde le fue agregada mayor cantidad de hidrxido de calcio, lo que repercuti en un mayor contenido de cenizas obtenidas. Estos resultados fueron comparables a los obtenidos por Bressani y col. (1958b) y Saldaa y Brown (1984).
La fibra neutro detergente (FND) y la fibra cido detergente (FAD) representan los componentes de la pared celular de la capa externa del maz. Los componentes de la FND y de la FAD son hemicelulosa, celulosa y lignina. En general, los valores de FND y FAD fueron menores en las tortillas con respecto a las harinas nixtamalizadas. La HM tuvo valores de FND y FAD de 9.50 % y 2.54% y no fueron significativamente diferentes (P < 0.05) con respecto a los valores de FND y FAD de la HCIC, los cuales fueron de 9.32% y 2.45%, respectivamente. En relacin a la HCIC, sta se proceso con el maz integral y con la cantidad de agua necesaria para hidratarse y producir los cambios texturales requeridos, por lo que no se perdi el pericarpio; a diferencia de las harinas comerciales HMAS (5.10% y 2.73%, valores de FND y FAD, respectivamente) y HMIN (5.43% y 2.28%, valores de FND y FAD, respectivamente), donde el proceso de elaboracin que ellos utilizan si se pierde parcialmente el pericarpio. En relacin a las TNIX, estas perdieron una gran cantidad de pericarpio debido a que presentaron bajos valores de FND y FAD, los cuales fueron de 1.75% y 4.32%, respectivamente. Esta disminucin en los valores de FAD y en la FND, fue debida a la prdida de pericarpio durante el tiempo de cocimiento, el tiempo de reposo y el lavado del maz, tal como lo menciona en su estudio Serna- Saldivar y col. (1990).
La cantidad de lpidos (extracto etreo) en la HM y en la HCIC, fue mayor (5.22% y 5.11%, respectivamente) en relacin a las harinas de las marcas comerciales. El contenido de lpidos entre la HM y la HCIC no fue diferente estadsticamente (P < 0.05), y si lo fueron en relacin a las tortillas de las marcas comerciales Maseca y Minsa. Cabe mencionar que en el proceso CICATA-IPN no existen prdidas en el contenido del germen, que es en donde se encuentran principalmente los lpidos, en comparacin con los procesos usados por Maseca y 30 Minsa; en relacin a las tortillas, se observo una clara disminucin de los lpidos, aunque esto se puede atribuir a la prdida parcial del germen y partes del grano que contienen sustancias extrables con ter, no dejando de considerar tambin la saponificacin de stas sustancias con el hidrxido de calcio adicionado durante la coccin de los granos de maz, y en la aplicacin del calor usado en el cocimiento de las tortillas.
En cuanto a la cantidad de fibra cruda presente se vio que el maz crudo present casi el doble de estos componentes, en comparacin con las diferentes harinas instantneas. Existi variacin significativa (P < 0.05) en la HM comparada con las HCIC, HMAS y HMIN. Entre estas ltimas no hubo diferencias estadsticas. La fibra cruda es una medicin que cuantifica principalmente celulosa y algunos tipos de hemicelulosas. En relacin a las tortillas, las TCIC tuvieron el mayor valor (2.44%) y las TMIN (2.19%) el menor valor.
La protena presente en todas las muestras depende del tipo de maz utilizado, adems del proceso a que fueron sometidos (FAO, 1973; Khan y col., 1982). El contenido de protena del maz utilizado en la presente investigacin fue de 8.54% y es similar al reportado por Martinez-Flores y col. (2002), Paredes-Lopez y Saharpulos-Paredes (1983) y Bressani y col. (1958). El contenido de protenas fue mayor en las tortillas comparadas con las harinas nixtamalizadas. Durante las etapas de cocimiento y reposo de los granos de maz se perdieron algunos componentes como el pericarpio que representan alrededor del 5% del total del grano y contiene los diferentes componentes de la fibra dietaria y de la prdida parcial del germen que contiene lpidos y algunos azcares, lo que probablemente contribuyo a concentrar y aumentar el porcentaje de protena en las tortillas comparadas con las harinas nixtamalizadas.
El contenido de calcio no fue detectado en la HM, debido a que la sensibilidad del equipo no era muy alta, y solamente detectaba valores mayores a 5 mg/100 g. Por lo que se asume que el contenido de calcio en la HM fue menor a 5 mg/100g. 31 Sin embargo, se observa que el equipo si detecto valores en las harinas instantneas HCIC, HMAS y MIN, los cuales fueron de 93 mg/100g, 60 mg/100 g y 17 mg/100 g, respectivamente. Por lo que se observa el contenido de calcio en la HCIC fue superior al de las harinas de las marcas comerciales Maseca y Minsa. Para las tortillas, el contenido de calcio en las TNIX fue estadsticamente mayor (P < 0.05) al de las dems tortillas, presentando un valor de 240 mg/100 g de muestra. El contenido de calcio en las muestras HCIC, HMAS y HMIN se mantuvo constante al transformarse a tortillas. Estos datos, de incremento de calcio en las tortillas, al ser procesado el maz por el tratamiento trmico alcalino, son de gran importancia debido al alto consumo de tortilla en Mxico, que es la fuente principal de calcio para la clase social mas pobre de la poblacin (Gonzlez-Hernndez y col., 1997). Adems, la presencia de calcio en el proceso de nixtamalizacin hidroliza la pared del pericarpio, lo cual facilita la penetracin del calcio al interior del grano de maz y es as como se incrementa este compuesto en las tortillas. La cantidad de calcio presente en las tortillas va a estar determinado por la concentracin utilizada en el proceso trmico- alcalino, adems del tiempo de reposo y de las caractersticas del maz, particularmente en cuanto a dureza del grano (Niewohnner, 1988; Deschamps, 1985; Bressani y Scrimshaw, 1958a). La absorcin de calcio en los huesos de las ratas va a estar determinada por varios factores entre ellos, la calidad de la protena de las tortillas, adems de la cantidad de fsforo; como es conocido, los huesos contienen la mayor cantidad de calcio, fsforo y magnesio del organismo. El fsforo tuvo un comportamiento similar al del calcio cuando las harinas fueron transformadas a tortillas. Los valores de fsforo en la HM, TCIC, TMAS, TMIN y TNIX fue de 0.27 mg/100 g, 0.19 mg/100 g, 0.17 mg/100g, 0.16 mg/100 g y 0.18 mg/100 g, respectivamente.
32
Tabla 2. Composicin qumica de las harinas de maz.
Harinas
Componentes Maz sin procesar CICATA Maseca Minsa F
Medias con la misma letra en la misma fila no son significativamente diferentes (P < 0.05)
ENSAYO BIOLGIC0
En el ensayo biolgico, se evalu la ganancia en peso y la conversin alimenticia (cantidad requerida de alimento para aumentar 1 g de peso) que va estar directamente relacionada con la calidad de la protena presente en la dieta. Las dietas utilizadas fueron basadas en las siguientes tortillas: elaboradas por el mtodo tradicional (DTNIX), por el mtodo CICATA (DTCIC), usando las harinas Maseca (DTMAS) y Minsa (DTMIN). Estos mismos tratamientos, pero con la adicin de fosfato de calcio (0.6244g/100g de muestra de acuerdo con la formulacin de dietas AIN-93G para roedores en crecimiento) fueron preparados. Las dietas adicionadas con calcio fueron las siguientes: tortillas de maz nixtamalizado con calcio (DTNIX- ca), tortillas de maz CICATA-IPN con calcio (DTCIC-ca), tortilla Maseca con calcio (DTMAS-ca) y tortillas de maz Minsa con calcio (DTMIN-ca). 34
En la Tabla 4 se observa que el consumo de alimento por los diferentes grupos de ratas no fue estadsticamente diferente (P < 0.05). Sin embargo, se puede observar que las ratas que mas alimento consumieron fueron las que se alimentaron con la DTMAS (71.53 g) y la DTMIN (70.85 g) y las que menos consumieron fueron las que se alimentaron con las DTNIXT (54.21 g) y la DTMIN-ca (56.34 g). Otro dato importante es el de ganancia de peso en funcin del consumo de la dieta, y para este parmetro medido, se tuvo que tambin las ratas alimentadas con las DMAS fueron las que ganaron ms peso (37.90 g), siendo estadsticamente diferente (P < 0.05) a todas las dems. Entre los dems valores de ganancia en peso no existieron diferencias significativas (P < 0.05). El trmino conversin alimenticia esta directamente relacionada con la eficiencia del alimento consumido con la ganancia de un gramo de peso. Este valor nos indica la cantidad de alimento que el animal necesita consumir para ganar un gramo de peso. Entre menor sea el valor mas eficaz es para realizar la conversin. Las ratas que presentaron mejor valor de conversin alimenticia fueron las que se alimentaron con la DTMAS, siendo el valor de 1.93, aunque la diferencia estadstica fue solamente parcial cuando fueron comparadas con las dietas TMIN-ca (2.30), TNIX (2.45), TMAS-ca (2.51) TMIN (2.66) y TCIC-ca (2.74). Cabe mencionar que el promedio de eficiencia en la conversin alimenticia de las ratas alimentadas con las dietas sin adicin de calcio exgeno fue de 2.48 y el de las ratas alimentadas con las dietas adicionadas con calcio fue de 2.65, es decir, se observo una diferencia mejor (del 6.41%) en la conversin alimenticia de las primeras comparadas contra las segundas.
35 Tabla 4. Efecto de crecimiento de ratas de 21 das alimentadas con diferentes dietas a base de tortillas.
Dietas Alimento Peso Peso Ganancia Conversin consumido Inicial final en peso alimenticia (g) (g) (g) (g) (g)
DTNIX 54.21a 43.35a 66.15b 22.80b 2.45ab DTCIC 66.95a 43.62a 66.82b 23.20b 2.90a DTMAS 71.53a 43.70a 81.60a 37.90a 1.93b DTMIN 70.85a 43.67a 70.02b 26.35b 2.66ab DTNIX-ca 69.36a 43.60a 66.60b 23.00b 3.08a DTCIC-ca 64.39a 43.55a 68.00b 24.45b 2.74ab DTMAS-ca 65.09a 43.47a 69.32b 25.85b 2.51ab DTMIN-ca 56.34a 43.75a 68.30b 24.55b 2.30ab F Medias con la misma letra en la misma columna no son significativamente diferentes (P < 0.05).
Las mediciones fsicas de los fmures extrados a las ratas as como el valor de resistencia en la fractura del fmur, que va a estar dada por la fuerza requerida para romper el hueso se pueden observar en la Tabla 5. No existieron diferencias significativas (P < 0.05) entre los valores requeridos en gramos para fracturar los fmures en los 8 tratamientos. Sin embargo, se puede apreciar que las ratas alimentadas con el calcio exgeno adicionado a las dietas presentaron mayores valores de fuerza requerida para fracturar los huesos. La dieta que mejor sustancialmente el valor de resistencia a la fractura del fmur, una vez que le fue adicionado el calcio, fue la DTMIN-ca presentando un valor de 4,396.8 kg requeridos para fracturar el fmur, comparado contra el valor de 3731.8 pero sin la adicin de calcio (DTMIN). En promedio, el valor requerido para fractura los huesos de las ratas alimentadas con las dietas con adicin de calcio fue de 3,958.8 kg, mientras que el valor para las que se alimentaron con dietas sin adicin de calcio exgeno fue de 3,682.25 kg. Es decir, el calcio exgeno aumento en un 7% la resistencia a la fractura 36 de los fmures de ratas alimentadas con dietas adicionadas con calcio exgeno, hacindolo mas resistente a los impactos. Las ratas alimentadas con la dieta DTMAS presentaron los mayores valores y fueron estadsticamente diferentes (P<0.05) de los dems tratamientos en las medidas de largo (Lar), ancho de la unin del fmur con la rodilla (Ancr) y Peso de los huesos. En los datos de ancho de la unin del fmur con la cadera (Ancc) y del dimetro del fmur en su parte frontal (Diam1) no existieron diferencias significativas (P < 0.05) entre los 8 tratamientos. El peso del hueso esta directamente relacionado con la cantidad que creci en animal que fue con la dieta Mas. Tabla 5. Medidas fsicas de huesos.
TMIC 4396.8a 2.31b 0.54a 0.572abc 0.28ab 0.16b 0.24 F 0.60 1.79 1.44 2.14 1.16 2.37 1.28 Medias con la misma letra en la misma columna no son significativamente diferentes (P < 0.05). Frac. Kilogramos requeridos para fracturar el fmur. 37 Lar. Longitud del fmur. Ancc. Ancho de la conexin de la cabeza del fmur con la pelvis. Ancr. Ancho de la conexin de la cabeza del fmur con la rotula. Diam1. Dimetro medio de la parte frontal del fmur. Peso. Peso de fmur. Diam2. Dimetro medio de la parte lateral del fmur.
Los huesos contienen la mayor cantidad de calcio, fsforo y magnesio del organismo. En la Tabla 6 se observa el contenido de esos minerales presentes en los huesos de las ratas alimentadas con las diferentes dietas. En las dietas con adicin de calcio hubo ms absorcin de calcio en el fmur; el poco calcio que se consuma ser utilizado por el organismo para cubrir los requerimientos celulares del mismo y por lo tanto habr poca presencia de calcio en la matriz sea y por consiguiente se puede presentar osteoporosis (NAS, 1999, Desantiago y col., 1999). Sin embargo, la dieta preparada con el mtodo tradicional (DTNIX) an sin adicin de calcio tuvo una buena asimilacin del calcio en el hueso. Como se sabe la relacin calcio:fsforo es importante para la formacin de hueso; esta debe de ser de 1:1 o de 1:1.2 (Wyatt y col., 2000). En el anlisis biolgico la relacin calcio:fsforo es mejor con el mtodo tradicional, ya sea con o sin adicin de calcio exgeno. Esto ltimo es debido a que el tiempo de reposo que se lleva a cabo en el proceso tradicional es importante para lograr una mayor difusin y absorcin del calcio al interior del grano de maz y por lo tanto esto se vera reflejado en una mayor biodisponibilidad del mismo.
38 Tabla 6. Minerales (mg/g) presentes en hueso. _________________________________________________________
Dietas Calcio Fsforo Magnesio ____________________________________________________ TMNS 23.69ab 11.54a 0.61a TCIS 12.72c 2.86b 0.28cd TMAS 14.28bc 3.73b 0.26d TMIS 2.17d 1.14b 0.62a TMNC 29.04a 11.68a 0.48ab TCIC 23.06ab 10.65a 0.51ab TMAC 18.69bc 9.15a 0.50ab TMIC 22.03abc 9.41a 0.42c F 9.63 29.15 8.33 _________________________________________________ Medias con la misma letra en la misma columna no son significativamente diferentes (P < 0.05).
Difraccin de rayos X
En la Figura 3 se ilustra el difractograma de las dietas que no tienen calcio adicionado y se observa que el pico de la hidroxiapatita se encuentra en el mismo ngulo que en el control (que proviene de un hueso con los requerimientos necesarios de calcio en la dieta). El grado de intensidad fue diferente en las distintas dietas evaluadas en este experimento, en relacin a los huesos de ratas que fueron alimentadas con las dietas sin adicin de calcio y como se observ anteriormente poseen diferente cantidad de calcio. El mayor porcentaje de cristalinidad lo presentaron los huesos de las ratas alimentadas con la dieta DTMAS con un valor de 60.85% de cristalinidad y el menor lo present la dieta DTMIN, con un valor de 55.00% de cristalinidad. Valores intermedios fueron presentados en los huesos de las ratas alimentadas con las dietas DTNIX y DTCIC, presentando los siguientes porcentajes de cristalinidad, 57.52% y 56.66%, respectivamente. Por otro lado, existi menor variacin en la intensidad de 39 los picos de hidroxiapatita en los huesos de ratas alimentadas con dietas con adicin de calcio (Figura 4); la mayor intensidad se encontr en la dieta DTNIX-ca con un valor de 62.63% de cristalinidad, siguindole en intensidad la dieta DTMIN-ca con un valor de 58.44% y los menores valores los presentaron los huesos de las ratas alimentadas con las dietas DTMAS-ca y DTCIC-ca con los siguientes valores de cristalinidad, 55.45% y 52.95%, respectivamente
Figura 3. Patrn de difraccin de rayos X de huesos de ratas alimentadas con dietas de tortillas sin adicin de calcio exgeno.
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 0 100 200 300 400 500 600 700 57.52% Dieta maiz nixtamalizado sin calcio (DTNIX) I n t e n s i d a d
( U . R ) ngulo theta
40 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 0 100 200 300 400 500 600 700 56.66% Dieta proceso CICATA sin calcio (DTCIC) I n t e n s i d a d
( U . R ) ngulo Theta
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 0 100 200 300 400 500 60.85% Dieta de tortilla maseca sin calcio (DTMAS) I n t e n s i d a d
( U . R ) ngulo theta
41 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 0 100 200 300 400 500 600 700 55.00% Dieta de tortilla minsa sin calcio (DTMIN) I n t e n s i d a d
( U . R ) ngulo theta
Figura 4. Patrn de difraccin de rayos X de huesos de ratas alimentadas con dietas de tortillas con adicin de calcio exgeno.
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 0 100 200 300 400 500 600 700 62.63% Dieta de tortillas maz nixtamalizado +ca (DTNIX-ca) I n t e n s i d a d
( U . R ) ngulo theta
42 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 0 100 200 300 400 500 600 52.95% Dieta de tortilla proceso CICATA +ca (DTCIC-ca) I n t e n s i d a d
( U . R ) ngulo theta
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 0 100 200 300 400 500 600 55.45% Dieta de tortilla maseca +ca (DTMAS-ca) I n t e n s i d a d ( U . R ) ngulo theta
1.- A pesar del transcurso del tiempo, la tcnica precolombina de nixtamalizacin sigue siendo hoy en da el proceso mas efectivo para tener una tortilla de mejor calidad nutricional y en cuanto a biodisponibilidad de calcio; esto ltimo es de gran importancia para la poblacin de Mxico, ya que la tortilla forma parte de la dieta de todos los estratos sociales de la poblacin, aunque el proceso presente desventajas tecnolgicas y ecolgicas.
2.- El proceso trmico alcalino y el reposo que se lleva a cabo en la nixtamalizacin tradicional es lo que ayuda a la hidrlisis de la pared celular y permite la difusin del calcio, y de ello va a depender la cantidad de calcio presente en la tortilla. La falta de este reposo en el proceso CICATA-IPN, as como la cantidad menor de calcio adicionada se ve reflejado en la cantidad de calcio presente en la tortilla y por lo tanto la biodisponibilidad de calcio no es tan alta como en el caso de la tortilla elaborada por el mtodo tradicional.
3.- El consumo de las tortillas obtenidas por el proceso CICATA-IPN, permite que los fmures de las ratas alimentadas con ellas presenten un contenido de calcio mayor al de las alimentadas con la dieta basada en las tortillas de la marca comercial Minsa y similar al de las tortillas elaboradas con la harina comercial Maseca. Sin embargo, cuando se les adiciona el calcio exgeno, esa asimilacin aumenta con la dieta elaborada con las tortillas hechas en el CICATA-IPN, comparadas contra las de las marcas comerciales.
4.- Por las diferentes ventajas tecnolgicas, ecolgicas, y de disminucin en el tiempo de procesamiento que presenta el proceso CICATA-IPN, es importante tomar en cuenta que si se le adiciona mayor cantidad de calcio durante el proceso de obtencin de la harina instantnea, se puede llegar a mejorar no solo la cantidad sino tambin la biodisponibilidad del calcio.
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