Universidade Estadual do Rio Grande do Sul Disciplina: Laboratrio de Biologia Molecular Professora: Roberta Bussamara

EXTRAO DE DNA DO MORANGO

Grupo Luana Reichert Vanessa Schmidt

Novo Hamburgo, 21 de maro de 2014.

Extrao de DNA do morango

21 de maro de 2014

Introduo

O DNA uma macro molcula orgnica que contm as informaes genticas e est presente em todos os seres vivos, com exceo apenas de alguns RNA-vrus. formado por uma base nitrogenada, uma pentose e um grupo fosfato. DNA formado por unidades menores chamadas nucleotdeos. Existem quatro tipos de nucleotdeos,

representados pelas letras Adenina, Citosina, Guanina e Timina. As formas como esses nucleotdeos se arrumam que faz com que os seres vivos sejam diferentes um dos outros.

Toda a informao necessria para criar um organismo encontra-se no DNA. Esta molcula usada durante o perodo de vida de um organismo para fornecer instrues para milhes de processos celulares que ocorrem constantemente. Para estudar o modo como essas informaes so comunicadas clula os cientista isolaram o DNA e estudaram o modo de interao do DNA com as protenas e RNAs. Esta prtica laboratorial usa um processo semelhante ao utilizado pelos cientistas quando comearam as primeiras investigaes sobre DNA. Para isolar o DNA os cientistas separaram-no dos outros componentes celulares. As clulas foram fragmentadas e o DNA separado do contedo lipdico das membranas da clula e dos organitos. Em seguida o DNA foi separado das protenas. (Acho que temos que colocar mais algum complemento para a finalizao) Objetivo

O objetivo especfico dessa prtica laboratorial entender os conceitos de gentica bsica e demonstrar como podemos identificar e extrair o DNA do morango como um bom modelo para esse tipo de estudo e atividade prtica.

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Metodologia

1. Materiais Utilizados

Funil de vidro Papel filtro Basto de vidro Copo de Becker de 500mL Cloreto de sdio (sal de cozinha) Detergente lquido 4 morangos Esptula lcool 96 GL Pipeta de vidro Plstico filme

2. Procedimento

Triturou-se os morangos em um Becker com o auxlio de uma esptula, adicionou-se o cloreto de sdio (NaCl) junto aos morangos triturados. Mexeu-se bem at o homogeneizar todo o sal.

Aps a primeira etapa adicionou-se ao copo de Becker uma soluo composta por 80mL de gua quente e 20mL de detergente lquido. Colocou-se o copo de Becker com o material em um banho de gelo. Aguardou-se aproximadamente 5 minutos para que houvesse a precipitao do material. Aps O termino do tempo, tampou-se o copo de Becker com um plstico filme e colocou-se de cinco a dez minutos na geladeira (para que forme grumos).

Na segunda etapa, utilizou-se um funil de vidro e um filtro de caf posto, dando incio ao processo de filtrao. Onde o filtrado depositado em um copo de Becker limpo (figura 1).

Ao final do experimento, acrescentou-se o lcool, pois desidrata o DNA, de forma que este no fica mais dissolvido no meio aquoso (figura 2).

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Figura 1:

Figura 2:

Figura 3: Fragmento de DNA do morango.

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Resultados e Discusso

Os morangos foram triturados para que a parede celular seja rompida e tambm para que os produtos qumicos utilizados para a extrao cheguem mais facilmente em todas as suas clulas, o sal (NaCl) foi adicionado, pois depois de dissolvidos em gua h uma dissociao que contribui com ons positivos que neutralizam a carga negativa do grupo fosfato do DNA. As molculas de DNA passam a no sofrer repulso de cargas entre si, o que favorece sua aglomerao. Alterando a densidade e impedindo que as protenas dissolvidas no lquido precipitem com o DNA.

O detergente normalmente empregado para dissolver gorduras ou lipdios. Como a membrana celular tem em sua composio qumica uma grande quantidade de lipdios, sob a ao do detergente, estes se tornam solveis e so extrados junto com as protenas que tambm fazem parte das membranas. Todo o contedo celular, com a destruio dessa camada pelo detergente, o citoplasma liberado e permanece no suco diludo.

O DNA extrado das clulas do morango encontra-se na fase aquosa da mistura, ou seja, dissolvido na gua. Na presena de lcool e de concentraes relativamente altas de Na+ (fornecidas pelo sal de cozinha) o DNA sai de soluo, isto , ele precipitado. Ocorre a formao fitas finas de DNA, com aspecto gelatinoso, na interface entre as camadas de morango e lcool, isso porque o DNA tende a no ser solvel em lcool e, deste modo, suas molculas se agrupam. Como o DNA tem menor densidade que os outros constituintes celulares, ele surge na superfcie do liquido.

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Concluses

Com o procedimento feito, foi possvel extrair o DNA do morango atravs de um mtodo simples, para isso, trs etapas contriburam na extrao dessa molcula. Na primeira, foi possvel destruir a parede celulsica que envolve a clula vegetal. Na segunda etapa, o detergente foi responsvel pelo rompimento da membrana citoplasmtica e da liberao do DNA do suco. E assim, a partir da adio de lcool, foi possvel separar essa molcula do resto do suco. Com esse experimento, provamos a existncia do DNA atravs dos resultados obtidos. O procedimento realizado com o morango foi satisfatrio, j que foi possvel a visualizao da molcula de DNA.

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Referncias

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