REAES GERAIS DOS AMINOCIDOS

A) Formao de sais com cidos e bases devido a natureza de on dipolar dos

aminocidos

A glicina o mais simples dos aminocidos, constitudo por apenas um grupo
amina e um grupo carboxila ligados ao tomo de carbono. o principal
neurotransmissor de inibio do tronco cerebral e medula espinhal. Tambm pode exibir
comportamento excitatrio: ao se ligar ao receptor NDMA, a glicina aumenta a
sensibilidade do mesmo ao glutamato. A glicina, diferentemente dos outros
neurotransmissores aminocidos, no sintetizada no organismo, sendo obtida a partir
da dieta.
1
Quando liberada na sinapse, ela se liga a um receptor que torna canais da
membrana ps sinptica mais permeveis ao Cl-. Na medula espinhal, a glicina
liberada por interneurnios inibitrios chamados clulas de Renshaw, que limitam a
ativao de neurnios motores e possibilitam o relaxamento muscular. A estricnina
(substncia utilizada para matar ratos) um antagonista da glicina, ligando-se a seu
receptor sem que o canal de clcio seja aberto, gerando um estado de
hiperexcitabilidade no neurnio. Esse estado precisamente o que caracteriza a ao
txica da estricnina, gerando rigidez muscular seguida de convulses. A morte ocorre
por parada respiratria ou exausto. Os efeitos do ttano tambm se devem a esse
neurotransmissor, cuja secreo inibida por uma toxina produzida pela bactria
causadora da doena.
1
Um dficit de glicina provoca um aumento da rigidez muscular e morte por
paralisia dos msculos respiratrios. precisamente o que acontece na intoxicao por
estricnina (substncia utilizada para matar ratos e que inibe o receptor da glicina) e o
ttano (situao em que h infeco por uma bactria que produz uma toxina capaz de
inibir a secreo de glicina).
1
Pesquisas recentes mostram que o aminocido glicina capaz de produzir efeitos
anti-inflamatrios, imunomodulatrios e de proteo celular (1). A depleo de
neutrfilos ou o bloqueio de suas funes antes de uma agresso qumica ou hipxia
reduz o dano tecidual, indicando que essas clulas desempenham um papel importante
na patofisiologia associada a processos inflamatrios (2,3). Um dos principais
mecanismos pelo qual os neutrfilos induzem leso tissular o de liberao de
espcies reativas de oxignio.
2




Em 1 mL de uma soluo pronta de tirosina, que tinha algumas partculas em
suspenso, adicionou-se 2 gotas do indicador cido-base fenol. Em seguida, adicionou-
se 2 gotas de NaOH 1,996 molL
-1
, onde ocorreu total dissoluo da protena e observou-
se que a soluo ficou translcida e rsea.
Logo aps, adicionou-se 2 gotas de HCl 10% e notou-se a formao de um precipitado,
Figura 1. Estrutura da glicina, dentre todos, o aminocido mais simples e o nico
aminocido que tem carbono assimtrico.
3
um zwitterion. Apenas no momento que h presena desse sal, h precipitado na
soluo, que ocorre com pH igual a 5,65. Esse valor obtido atravs do clculo do
ponto isoeltrico (pI).
Ponto Isoeltrico (pI) o pH em que um aminocido, polipetdeo ou protena tem
uma carga lquida igual a zero (0), ou seja, o ponto onde a carga lquida total da
molcula de aminocido ou protena nula to importante, que recebeu uma
denominao especial. Assim, o valor de pH onde existe equivalncia entre as cargas
positivas e negativas da molcula.
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Para sistemas simples, o valor do pI pode ser calculado na seguinte forma:
a) Identificar as formas inicas da molcula que tem cargas lquidas 1, 0 e +1;
b) Identificar o pKa do equilbrio que descreve a interconverso entre as formas
com carga +1 e 0 e tambm o pKa do equilbrio que descreve a interconverso entre as
formas com carga 0 e 1;
c) Calcular a mdia dos dois valores do pKa. Esta mdia igual ao pI.

Por exemplo, para glicina que tem pKas de 2,35 e 9,78 e assim, pI = 6,06.
4

Zwitterion, do alemo "zwitter" (hbrido), "sal interno" ou "on dipolar" um
composto qumico eletricamente neutro, mas que possui cargas opostas em diferentes
tomos. O termo mais utilizado em compostos que apresentam essa cargas em tomos
no-adjacentes. Podem se comportar como cidos ou bases, portanto so anfteros.
5
Os aminocidos, por exemplo, se comportam como cido por causa do grupo
carboxila (-COOH) e como bases por causa do grupo amina (-NH
2
). Isso possibilita a
reao da parte cida com a parte bsica, gerando um sal. Como ela se d no mesmo
composto, o sal formado chamado de "sal interno".
5

Zwitterion
H
3
N COOH
H
OH
H
OH
H
H
3
N COO
H
H
3
N COO
H
OH
OH
H
H
2
N COO
H
O

O pI da tirosina prximo do pI da glicina, por terem os pontos de viragem (pKa)
com valores prximos. Porm cada aminocido tem seu pI, valendo-se assim como
maneira para identificao dos mesmos. Se repetisse-se o mesmo procedimento
utilizando um outro aminocido, dependo do tipo de mtodo utilizado para se saber o
pH, poder haver um resultado prximo, no entanto, se utilizar-se





pH= 2,2
pH= 9,11
pH= 10,07

REAS ESPECFICAS DE IDENTIFICAO DE AMINOCIDOS

A) Aminocidos com grupos guanidina: reao de Sakaguchi

um teste para compostos contendo o grupo guanidilo (arginina). Como a reao
ocorre em meio alcalino, o grupo guanidina forma um complexo verde com o -naftol e
este na presena de NaClO, torna-se avermelhado.
OH
C N H
2
N
NH
2
H
R




Tubos
Amostra/Concentrao
(mmol.L
-1
)
1 gua
2 Arginina 0,5
3 Glicina 0,5
4 Triptofano
5 Clara de ovo

Em todos os testes foram usados aproximadamente 1 mL de cada amostra. Os
reagentes utilizados para realizar os testes foram: B NaOH 2,5 mol.L
-1
(3 gotas); C -
-naftol. (3 gotas); NaClO 0,5% (1 mL);
Ao misturar os reagentes na ordem acima, observou-se os seguintes alteraes:
Tubo 1: A: ocorre uma desnaturao reversvel (precipitao de protena)
C: Verde-amarronzado
D: Marrom
Tubo 2: C: soluo turva a esbranquiada
Tubo 3: C: verde claro
D: cinza-amarronzado
Tubo 4: C: verde musgo
Tubo 5: C: verde claro
O indicador -naftol deu positivo para o teste de Sakagushi (presena do
agrupamento guanidina) no tubo 3 aps a adio do hipoclorito de sdio.

Figura 2. Complexo formado pelo grupo guanidina na presena de -naftol.
-naftol:

Incolor
Verde
B) REAO XANTOPROTEICA

O benzeno reage lentamente com o cido ntrico (HNO
3
) concentrado para dar o
nitrobenzeno. Essa reao pode ser acelerada mediante aquecimento. Assim,
aminocidos que apresentem anel benznico em sua cadeia lateral (assim como
protenas ou peptdeos que possuam esses aminocidos em sua constituio) podem
reagir com o cido ntrico originando um composto amarelo. A colorao amarela existe
em meio cido. Se deixarmos o meio mais alcalino, ser observada uma colorao
vermelho-alaranjada.
8
.



um teste para a tirosina e triptofano, ou protenas que contenham estes
aminocidos baseado na reao de nitrao dos anis aromticos pelo cido ntrico
concentrado.
6

N
CH
CH
2
C H H
3
N
COO
OH
CH
2
C H H
3
N
COO





Na presena de cido ntrico ocorre a formao de um nitrocomposto. Tal reao
comprovada quando a soluo se torna amarelada, como ocorre em triptofano (tubo 3) e
em tirosina (tubo 4), que tem nas suas estruturas um anel aromtico.

Tubos Amostra/Concentrao (mmol.L
-1
)
1 gua
2 Glicina 0,5
3 Triptofano 0,5
4 Tirosina 0,5
5 Clara de ovo



Figura 3. Molcula dipolar de tirosina e triptofano, respectivamente.
C) REAO PARA AMINOACIDO CONTENDO ENXOFRE
Aminocidos que contm enxofre, em meio alcalino e, liberam o enxofre que
aparece na forma de sulfeto de sdio (Na
2
S). Este reage com acetato de chumbo
(CH
3
COO)
2
Pb, formando o PbS, que escurece a reao.



Dentre os produtos utilizados para realizar o teste (cistena, glicina, clara e a
gema), o teste apenas daria positivo na presena do enxofre em soluo, dessa forma, os
resultados obtidos para esse teste foram descritos abaixo.
Na reao com a gema, observou-se uma colorao amarela clara e ao adicionar a
base, o precipitado foi solubilizado. Em seguida fez-se o teste com acetato de chumbo,
tornando a soluo marrom escura.
Na reao com a csteina, ao adicionar NaOH 2 mol.L
-1
notou-se que a soluo se
tornou amarelada. Em seguida, adicionou-se 2 gotas de acetato de chumbo, tornando a
soluo com cor amarronzada bem intensa.
A clara no possui enxofre e sua estrutura, mas ao adicionar NaOH 2 mol.L
-1
,
formou-se um gel (gel um dos tipos de soluo coloidal, onde as molculas no so
grandes o suficiente para precipitarem, mas tambm no so pequenas o suficiente para
formar uma soluo homognea).















Figura 4. Estrutura de um aminocido sulfurado (cistena).
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1
Disponvel em:
<http://medicina.med.up.pt/farmacologia/pdf/GABA_glicina_purinas_glutamato.pdf>.
Acessado em 21 de novembro de 2013.
2
Disponvel em:
<https://uspdigital.usp.br/siicusp/cdOnlineTrabalhoVisualizarResumo?numeroInscricao
Trabalho=5825&numeroEdicao=17>. Acessado em 21 de novembro de 2013.
3
Disponvel em:
<http://upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/thumb/5/5d/Amminoacido_glicina_f
ormula.svg/800px-Amminoacido_glicina_formula.svg.png&imgrefurl>. Acessado em
21 de novembro de 2013.
4
Disponvel em:
<http://www.fcfar.unesp.br/alimentos/bioquimica/praticas_proteinas/ponto_isoeletrico.h
tm>. Acessado em 21 de novembro de 2013.
5
Disponvel em: <http://pt.wikipedia.org/wiki/Zwitterion>. Acessado em 21 de
novembro de 2013. >. Acessado em 21 de novembro de 2013.
6
Disponvel em: <https://dspace.ist.utl.pt/bitstream/2295/48566/1/III-Testes-
aminoacidos.pdf>. Acessado em 21 de novembro de 2013.
7
Disponvel em: <http://upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/thumb/1/1a/L-
Cystein_-_L-Cysteine.svg/250px-L-Cystein_-_L-Cysteine.svg.png>. Acessado em 21
de novembro de 2013.
8
Disponvel em:
<http://www.fcfar.unesp.br/alimentos/bioquimica/praticas_proteinas/reacoes_coradastre
s.htm>. Acessado em 21 de novembro de 2013.