1 PRCTICA N04: ANLISIS CUALITATIVO Y CUANTITATIVO DEL FLUCONAZOL
INTRODUCCION
Como otros antihongos imidazol y triazol, el fluconazol inhibe el citocromo P450fngico de la enzima 14-demetilasa. La actividad de la demetilasa mamfera es mucho menos sensible al fluconazol que la demetilasa fngica. Esta inhibicin previene la conversin de lanosterol a ergosterol, componente esencial de la membrana citoplasmtica, y subsecuente acumulacin de esteroles 14-metil. 2 El fluconazol es principalmente fungisttico, pero puede funcionar como fungicida contra ciertos organismos en una dosis dependiente.
RESUMEN
FLUCONAZOL
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2 DEFINICION El fluconazol contiene no menos de 98,0% y no ms de 102,0% de C13H12F2N6O, calculado con respecto a la sustancia seca.
IDENTIFICACION A. ABSORCION EN EL INFRARROJO(197K) B. ABSORCION EN EL ULTRAVIOLETA(197U) Solucin muestra: 200ug/mL Medio: alcohol
VALORACION PROCEDIMIENTO Solucion muestra: Disolver 200mg. De fluconazol en 100mL de cido acetico glacial. Analisis: Valorar con cido perclrico 0,1 N SV, usando un sistema de electrodos anhidro adecuado. Realizar una determinacin con un blanco y hacer las correcciones necesarias. Cada mL de cido perclrico 0,1N equivale a 15,31 mg. De fluconazol (C13H12F2N6O). Criterios de aceptacin: 98,096-102,0% con respecto a la sustancia seca. IMPUREZAS (NOTABasandose en la informacin relacionada con el proceso de fabricacin, realizar cualquiera de las siguientes(a) impurezas organica, Procedimiento 1 o (b) Impurezas Orgnicas, procedimiento 2 e impurezas Organicas, Procemiento 3.) Impurezas Organicas, Procedimiento 1 Fase mvil: Acetonitrilo y agua(20:80) Solucion Estandar: 10ug/mL de ER Fluconazol USP, de ER Compuesto Relacionado B de Fluconazol USP y de ER, Compuesto Relacionado C de Fluconazol USP, disueltos en acetonitrilo y diluidos posteriormente en Fase mvil. Solucion muestra: 3 mg/mL de Fluconazol en Fase mvil
Sistema cromatografico (ver Cromatografia (621), Aptitud del sistema) Modo;HPLC Detector: UV 260nm UNIVERSIDAD PRIVADA NORBERT WIENER FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUIMICA
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3 Columna: 4,6 mm x 15 cm, relleno L1 de 3,5 um Temperatura de la columna:40 Velocidad de flujo: 0,5 mL/ min Volumen de inyeccin: 20uL Aptitud del sistema Muestra: solucin estndar (NOTALos tiempos de retencin de compuesto relacionado A de fluconazol, compuesto relacionado B de fluconazol, compuesto relacionado C, de fluconazol y fluconazol son aproximadamente 4,9,8,0,8,5 y 9,9 minutos, respectivamente). Requisitos de aptitud Resolucin: No menos de 1,5 entre compuesto relacionado B de fluconazol y compuesto relacionado C de fluconazol. Desviacin estndar relativa: No ms de 5,0 % para cada pico.
ANALISIS Muestras: Solucin estndar y Solucion muestra. Calcular el porcentaje de compuesto relacionado A de fluconazol, compuesto relacionado B de fluconazol y compuesto relacionado C de fluconazol en la porcin de Fluconazol tomada:
Resultado:
fu= respuesta del pico de compuesto relacionado A del fluconazol, compuesto relacionado B de fluconazol o compuesto relacionado C de fluconazol o compuesto relacionado C de fluconazol de la Solucin muestra. fu 3= respuesta promedio del pico de compuesto relacionado A de fluconazol, de compuesto relacionado a de fluconazo, de compuesto relacionado B de fluconazol o de compuesto relacionado C de fluconazol en inyecciones repetidas de la Solucin estndar. UNIVERSIDAD PRIVADA NORBERT WIENER FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUIMICA
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4 C5= concentracin de ER compuesto relacionado A de fluconazol USP, ER compuesto relacionado B de fluconazol USP o ER , compuesto relacionado C de fluconazol USP, respectivamente, en la solucin estndar(mg/mL).
Cu= concentracin de fluconazol en la solucin muestra(mg/mL). Calcular el porcentaje de cualquier otra impureza en la porcin de Fluconazol tomada:
f= respuesta del pico de cualquier otra impureza de la solucin muestra C5= concentracin de fluconazol USP en la solucin estandar(mg/mL). Cu= concentracin de fluconazol USP en la solucin muestra(mg/mL). Criterios de aceptacin: ver la tabla 1
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5 I. MARCO TEORICO.
Fluconazol 150mg
Nombre Qumico: 2-(2,4-difluorophenyl)-1,3-bis(1H-1,2,4-triazol-1-yl)propan-2-ol Formula Molecular: C13H12N6F2O Peso Molecular: 306,271 g/mol
Est indicado en el tratamiento de candidiasis vaginal (infecciones vaginales por levaduras debida a Candida), candidiasis orofarngea y esofgica. En estudios abiertos no comparativos de un nmero reducido de pacientes, FLUCONAZOL result tambin ser efectivo en el tratamiento de infecciones por Candida de las vas urinarias, peritonitis y en infecciones sistmicas por Candida, incluyendo candidemia, candidiasis diseminada y neumona. Meningitis por criptococo.
Biodisponibilidad: > 90 % Metabolismo: Heptico 11% Tiempo de vida media: 30 horas (rango 20-50 horas) Excrecin: Renal 61 - 88 % Va de administracin: Oral, intravenosa, tpico UNIVERSIDAD PRIVADA NORBERT WIENER FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUIMICA
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6 COMPETENCIAS:
Identificar los grupos funcionales en los medicamentos relacionando la estructura qumica con la actividad teraputica Aplicar correctamente las pruebas analticas que se encuentran en las farmacopeas debidamente validadas Elaborar protocolos de anlisis qumico cualitativo y cuantitativo de los medicamentos
II. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
ANALISIS:
Cualitativo Norma tcnica: Tcnica regular
Cuantitativo Procedencia:-----.
Nombre comercial: flumil Nombre genrico: fluconazol
Forma farmacutica: capsula Concentracin del frmaco: 150mg
Lote: R.S:
F.V:... F.F:.
Cantidad de muestra recibida: 200 mg Cantidad de muestra analizada: 2
Lugar de anlisis: U. Wiener - LAB. 708
DESCRIPCIN:
Fluconazol: Blster x 2 und. plateado con base de platino, con una descripcin que dice Fluconazol 150 mg Cap. del Laboratorio Farmindustria F.V: 10/15, Lote: 11088223, R.S: NG-2098 no designa fecha de fabricacin y se encontr sellado.
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7 Flumil: Blster x 2 und. envueltos con papel platino plateado con una descripcin que dice Flumil 150mg Cap. del Laboratorio D.A. Carrin S.A F.V: 09/15, Lote: 1017930, R.S: NG 24139 no designa fecha de fabricacin y se encontr sellado
ANLISIS ORGANOLPTICO:
Forma farmacutica: Capsula regular
La envoltura primaria o inmediata es de color metlico (aluminio), y la envoltura secundaria es un blster.
GENERICO
A.PRESENTACION: fluconazol de 150 mg capsula
Laboratorio: farmaindustria Color: Rojo Olor: inspido Sabor: Inspido Forma: capsula Lote: 11088223 Registro sanitario: NG-2098 Fecha de vencimiento: 10/2015 Peso de la tableta: 0.3278 g
COMERCIAL
B.PRESENTACION: FLUMIL de 150 mg capsula
Laboratorio: D.A Carrin Color: blanco con verde Olor: inspido Sabor: amargo Forma: capsula Lote: 1017930 Registro sanitario: NG- 24139 Fecha de vencimiento: 09/15 Pesado de la tableta: 0.2651 g
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ANLISIS ORGANOLPTICO:
ANLISIS QUMICO CUALITATIVO:
1. SOLUBILIDAD:
2. OBSERVACIN MICROSCPICA:
Unos mg de estndar se solubilizan luego se coloca en un portaobjeto y se observa en el microscopio a 100X de aumento Fluconazol: Presencia de cristales pero no muy definidos.
GENERICO COMERCIAL AGUA DESTILADA Ligeramente soluble
Ligeramente soluble
ACETONA Poco soluble Presencia de partculas Poco soluble, observamos mayor cantidad de partculas dispersas CLOROFORMO Soluble ++ Soluble +++ ETANOL Soluble ++
Soluble ++
METANOL Soluble ++++
soluble ++++
ETERETILICO Poco soluble Presencia de partculas sedimentadas Presenta mayor solubilidad se observa presencia de partculas sedimentadas UNIVERSIDAD PRIVADA NORBERT WIENER FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUIMICA
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Flumil : se observa la formacin de los cristales pero ms definidos a diferencia del fluconazol genrico.
3. CROMATOGRAFA EN CAPA FINA:
La muestra se disolvi en Metanol por ser el Flumil y Fluconazol ms soluble en este medio. El sistema de solvente que se utilizo es: acetato de etilo- metanol -agua -cido actico glacial ( 8.0;5.0;0.4;0.2 ) revelador: Vapores de Iodo/ Luz UV
1 = 4,6 6,3 = 0,73 Fluconazol en Metanol 2 = 4.7 6,3 = 0,74 Flumil en Metanol 6,3 4.6 6,3 4,7 UNIVERSIDAD PRIVADA NORBERT WIENER FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUIMICA
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10 Se observaron manchas de color amarillo claro, caracterstico del revelador (vapor de I2). El Rf del Fluconazol fue de 0.73, Segn el acta Farmacia Bonaerense el Rf debe ser aproximadamente de 0,72, lo que se puede decir que la muestra tena una alta concentracin.
4. REACCIONES QUMICAS:
a. RX. CON DRAGENDORFF
En un tubo de ensayo agregar:
mg de Fluconazol II gotas Rv. Dragendorff
CONCLUSIONES: El reactivo de Dragendorff reaccion ms con Fluconazol genrico ya que este supero en proporcin al de marca.
Principio activo Resultado Especificaciones Fluconazol (marca) positivo Se aprecia un precipitado de color anaranjado Fluconazol (genrico) positivo Fue un poquito ms intenso que el de marca UNIVERSIDAD PRIVADA NORBERT WIENER FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUIMICA
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11 Reaccin Qumica:
FUNDAMENTO: Bsicamente el reactivo de Dragendorff es una mezcla de yoduro de potasio y bismuto; se utiliza en la identificacin de alcaloides, la prueba se considera positiva por un precipitado color anaranjado marrn.
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12 b. RX. CON MAYER
En un tubo de ensayo agregar:
mg de Fluconazol + II gts Rv. Mayer
CONCLUSIONES: este reactivo reacciona con Fluconazol genrico y de marca ya que los dos estn casi en la misma proporcin. FUNDAMENTO: El reactivo de Mayer es una mezcla de Cloruro mercrico y Cloruro de potasio; se utiliza en la identificacin de alcaloides, la prueba se considera positiva por un precipitado color blanco amarillento, amorfo o cristalino.
La intensidad del anillo resulto como se esperaba color rojo violceo Fluconazol (genrico) positivo
Se apreci la formacin del anillo igual que el de marca
Reaccin Qumica:
Fundamento: los cristales de cido ctrico y anhdrido actico en calor genera un color violeta que indica positiva la reaccin con cido ctrico disuelto en anhdrido actico en caliente da color rojo purpura, resultado positivo para amina terciaria.
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ANLISIS QUMICO CUANTITATIVO:
Ac. Perclrico 0.1N
METODO UTILIZADO:
Volumetra
VALORANTE:
Ac. Perclrico 0.1 N
RESULTADO:
El resultado de color verde indica el punto de equivalencia del frmaco, se observar que aparentemente los dos (genrico y marca) presenta la misma cantidad de principio activo por tornar en la misma intensidad de coloracin.
Vg. Genrico: 3,5mL. Vg. Marca: 3,3mL 100 mg M.P 10 mL Ac. Actico anh. V gts naftol
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16 Frmula para hallar el porcentaje de pureza (marca)
%P = (.) .() . ()
%P = . , , . = 101.06%
Frmula para hallar el porcentaje de pureza (genrico)
%P = (.) .() . ()
%P = . . , . = 107.19%
CONCLUSIN: El anlisis realizado en prctica demuestra que el frmaco genrico tiene un mayor grado de porcentaje de pureza a diferencia que el de marca, lo que demuestra que tambin los genricos son de buena calidad. Y de acuerdo a lo investigado en artculos de investigacin ambos se encuentran en el porcentaje aceptable por la farmacopea.
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17 CUESTIONARIO
1. EL REACTIVO DE ACIDO CTRICO CON QUE GRUPOS FUNCIONALES REACCIONA?
2. CUL ES LA DIFERENCIA ENTRE LA REACCIN DE MAYER Y LA DE DRAGUENDORFF Y CON QUE GRUPOS FUNCIONALES REACCIONA?
REFERENCIA BIBLIOGRFICA
Harris,DanielC.Anlisisqumicocuantitativo.2 da edicin.Ed.Revert.Barcelona.20 01 Skoog A, Douglas. Principios de anlisis instrumental. 5 ed. Sevilla: Revert; 2002 Harvey David. Qumica Analtica Moderna. Ed. Mac Graw / Interamericana. Espaa 2002. Riao Cabrera Nestor. Principios de qumica analtica bsica. 2 ed.Bogot.Editorial Universidad de Caldas.2007
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CARRERA: FARMACIA Y BIOQUIMICA ASIGNATURA: FARMACOQUIMICA SECCIN: FB6M1 PRACTICA N4
TEMA: ANALISIS CUALITATIVO Y CUANTITATIVO DEL FLUCONAZOL