CURSO DE BIOLOGA GENERAL BIO-031 GUA LABORATORIO N 4 DIVISIN CELULAR
CICLO CELULAR Corresponde a la secuencia cclica de procesos en la vida de una clula eucariota que conserva la capacidad de dividirse. Consiste en interfase, mitosis y citocinesis. El ciclo celular est conformado por etapas de crecimiento celular y divisin de la clula en dos clulas hijas idnticas (Fi. !". Este ciclo ocurre slo en clulas en divisin y est conformado de las siuientes etapas# Inter!"e. Es el periodo comprendido entre divisiones celulares y consta a su ve$ de varias fases# % F!"e # $nter%!&# G1 'G!( 1). Es la primera fase del ciclo celular en el que e&iste crecimiento de la clula con sntesis de protenas y de '(). En esta fase la clula humana es diploide *n *+. *iene una duracin de entre + y !, horas y durante este tiempo, la clula do-la su tama.o y masa de-ido a la continua sntesis de todos sus componentes como resultado de la e&presin de los enes que codifican las protenas responsa-les de su fenotipo particular. % Inter%!&# S # !"e S. Es la seunda fase del ciclo en la que se produce la replicacin o sntesis del '/). Con la duplicacin del '/), el n0cleo contiene el do-le de protenas nucleares y de '/) que al principio. *iene una duracin entre + y 1 horas. % F!"e # $nter%!&# G* 'G!( *). Es la seunda fase de crecimiento del ciclo celular en la que contin0a la sntesis de protenas y '(). En esta fase la clula humana es diploide *n 4+. 'l final de este perodo se o-serva al microscopio cam-ios en la estructura celular, y que indican el principio de la divisin celular. *iene una duracin entre 2 y 3 horas. 1 * F$,-r! 1. Ciclo celular y sus etapas. El esquema muestra el ciclo celular con divisin mittica Per.#/# /e /$%$"$0n # !"e 1. 4a 5itosis y 5eiosis son las partes del ciclo celular y tienen por o-jetivo la divisin del material entico. 6ara poder diferenciar am-os procesos de-emos comprender el conte&to eneral, considerando en que tipo de clulas ocurre las dos formas de divisin. CELULAS Clulas Somticas (Del cuerpo) Clulas Sexuales (Gametos) MITOSIS MEIOSIS 7curre 7curre F$,-r! *. 5uestra las etapas de la mitosis y la meiosis. # 1$t#"$". Es la divisin celular en la que una clula proenitora (clulas eucariotas, clulas somticas" se divide en dos clulas hijas idnticas. Esta fase incluye la profase, metafase, anafase y telofase. En mitosis es donde se visuali$an los cromosomas al microscopio al ser detenida la divisin celular mittica con colchicina. *iene una duracin apro&imada de una hora. 4a mitosis presenta cinco etapas (Fi. ,"# Pr#!"e. 8mplica condensacin de la cromatina, hacia el final de la profase desaparece la envoltura nuclear. 1et!!"e. 9e caracteri$a por la formacin de la placa ecuatorial de la clula, en donde las parejas de cromtidas unidas por el centrmero se colocan ordenadamente y con precisin. An!!"e. 9eparacin de las cromtidas de cada pareja para formar los cromosomas hijos, los que son atrados hacia los respectivos polos celulares. Te&#!"e. 9e caracteri$a por la reorani$acin de los nuevos n0cleos, lo que implica que se reconstruye la mem-rana nuclear, rodeando la dotacin cromosmica. # C$t#+$ne"$". Corresponde a la divisin del citoplasma. En la mayora de los casos este proceso siue a la divisin nuclear, pero no siempre se lleva a ca-o dando orien a clulas multinucleadas. # 1e$#"$". En el caso de la divisin de las onias o clulas del epitelio erminativo, stas se dividen dos veces en forma sucesiva, mientras que los cromosomas se duplican slo una ve$. /e esta manera, las clulas hijas slo tienen la mitad de los cromosomas (clulas haploides : n". Este proceso es conocido como 5eiosis (Fi. ,", el cual se produce en la ametonesis masculina (Espermatonesis Fi. 2" y femenina (7vonesis Fi. 2". 4as consecuencias fundamentales de la 5eiosis son# '!) o-tencin de clulas especiali$adas para intervenir en la reproduccin se&ual, '2) reduccin a la mitad del n0mero de cromosomas, y as al unirse las dos clulas se&uales en la fecundacin vuelve a resta-lecerse el n0mero cromosmico de la especie, '+) recom-inacin de la informacin entica y '/) se oriina una ran variacin de ametos, de-ido al entrecru$amiento de sementos de los cromosomas homloos. D$%$"$0n +e&-&!r 4a divisin celular es la parte del ciclo celular en la que una clula inicial se divide en dos para formar dos clulas hijas. ;racias a la divisin celular se produce el crecimiento y renovacin de las clulas en oranismos pluricelulares, lo que implica el crecimiento de los tejidos. En oranismos unicelulares, la divisin celular se transforma en un proceso clave para su propia reproduccin de tipo ase&ual, enerando hijos idnticos. 6or estas ra$ones, en cualquier tipo de divisin celular, las clulas madres de-en duplicar su material entico as como sus oranelos citoplasmticos con el o-jeto de repartirlos en sus futuras clulas hijas. 4a finali$acin de este proceso requiere de citocinesis. E&isten tres tipos de divisin celular# F$"$0n 2$n!r$!. Forma de divisin celular de las clulas procariotas. F$,-r! 3. ;ametonesis# Espermatonesis y 7vonesis.
1$t#"$". Forma ms com0n de la divisin celular en las clulas eucariotas somticas. <na clula que ha adquirido determinados parmetros o condiciones de tama.o, volumen, almacenamiento de enera, factores medioam-ientales, puede replicar totalmente su dotacin de '/) y dividirse en dos clulas hijas, normalmente iuales. 'm-as clulas sern iuales a la clula madre, diploides o haploides, dependiendo de la clula madre. 1e$#"$". /ivisin de una clula diploide en cuatro clulas haploides. Esta divisin celular se produce en oranismos multicelulares para enerar ametos haploides, que pueden fusionarse despus para formar una clula diploide llamada cioto en la fecundacin. O23et$%# ,ener!& Comprender y conocer el proceso de divisin mittica y meitica. O23et$%#" e"(e+.$+#" 8dentificar etapas fundamentales de la divisin celular. (econocer los estadios -sicos que se producen durante la formacin de los ametos masculinos y femeninos. ACTIVIDADES A+t$%$/!/ 1 9e reconocern las diferentes etapas de la mitosis. 1.1. 1$t#"$". 7-serve una preparacin permanente de un corte lonitudinal de ra$ de ce-olla (Allium cepa". (econo$ca y esquematice clulas en diferentes estados de la divisin mittica. A+t$%$/!/ * 9e reconocern estructuras amticas. *.1 G!4et#,5ne"$" 6 E"(er4!t#,5ne"$". 7-serve una preparacin permanente de corte de testculo de rata. /istina t0-ulos seminferos, espermatoonias, espermatocitos primarios y espermato$oides (Fi. 3". *.* G!4et# 4!"+-&$n#. 7-serve una preparacin permanente de espermios de toro o de humanos. /istina y esquematice ca-e$a, semento intermedio y cola. *.3 G!4et#,5ne"$" 6 O%#,5ne"$". 7-serve una preparacin de un corte de ovario de rata y distina epitelio del ovario. /istina y esquematice# A folculo primario o secundario y B folculo de ;raaf (Fi. 3". F$,-r! 4. Corte de testculo, corte de ovario (folculo primordial y de ;raaf" y vulo. A+t$%$/!/ 3 Fecundacin in vitro del equinodermo Tetrapygus niger (5olina" (eri$o nero" o de Choromytilus chorus (choro zapato o choro maltn). 9e escoieron ejemplares vivos y se mantuvieron en un acuario con aua de mar filtrada o&ienada. Tetrapygus niger. 9e reali$arn preparaciones frescas de ametos masculinos y femeninos de especmenes de eri$o nero. <na forma de detectar el se&o de los individuos es mediante A *0-ulo seminfero
*estculo
B Folculo primordial 7vario C Folculo de ;raaf 7vario D %-&# el color de las nadas (rojas en las hem-ras y amarillas en los machos", ya que estos animales no presentan dimorfismo se&ual e&terno. 6ara tener acceso a las nadas hay que reali$ar cortes de las placas crneas mediante un -istur o una tijera fina en el e&tremo a-oral, teniendo especial cuidado en no romper las estructuras internas. <na ve$ identificadas las nadas se toma una muestra de ametos masculinos de los ejemplares con nadas amarillas, presionado suavemente so-re la nada hasta poder aspirar con una pipeta 6asteur la solucin lquida que se li-era. Este procedimiento permite o-tener espermato$oides maduros, los cuales una ve$ o-tenidos de-en ser depositados en un vaso precipitado. (epitiendo el mismo procedimiento con los ejemplares de nadas rojas (hem-ras", se o-tienen vulos maduros, los que al iual que en el caso anterior, de-en ser depositados en vasos precipitados para su posterior o-servacin al microscopio. <na ve$ o-tenidos los ametos, se de-e adicionar a cada vaso precipitado aua de mar filtrada, con el o-jeto de resuspender las clulas y evitar que se resequen. <na ota de la solucin que contiene a los ametos de am-os se&os de-e ser depositada, utili$ando un otario, en am-os e&tremos de un portao-jetos rotulado, identificando claramente cul e&tremo es el que contiene cada muestra. En el centro del portao-jetos de-e ser depositada una ota de la solucin que contiene ametos femeninos y so-re sta una de ametos masculinos, procurndose as el contacto entre ellos y la posterior fecundacin. Choromytilus chorus. 9e reali$arn preparaciones frescas de ametos masculinos y femeninos del molusco Choro maltn. El color del manto de los choros es caracterstico de cada se&o, lo que nos permite seleccionar ejemplares adecuados para la e&traccin de los ametos. 4as hem-ras son de color caf oscuro y los machos caf anaranjado. 6ara o-servar el color del manto, es necesario levantar de forma cuidadosa una de las valvas tratando de no da.ar las estructuras internas del molusco. <na ve$ identificados los aparatos reproductores, que se encuentran en posicin ventral, procederemos a tomar una muestra de ametos masculinos de los ejemplares de color caf anaranjado, aspirando con una pipeta 6asteur la solucin -lanquecina que se encuentra so-re el manto y la nada. Esta solucin corresponde a los espermato$oides maduros. (epetiremos el procedimiento con los ejemplares femeninos, con el manto de color caf oscuro, pero esta ve$ tomaremos una muestra de la solucin de color caf oscuro que se encuentra so-re el manto y la nada, y que corresponde a los vulos maduros. Colocamos cuidadosamente am-as muestras en una placa multipocillo7 rotulada en forma adecuada, areando apro&imadamente , m4 de aua de mar filtrada a cada uno de los pocillos con el o-jeto de resuspender los ametos en la solucin. 6roceda entonces a adicionar a un tercer pocillo de la placa una alcuota de apro&imadamente ! m4 de cada una de las soluciones de ametos, aitando suavemente la me$cla con el o-jeto de que los ametos masculinos y femeninos entren en contacto. /e esta forma, hemos reali$ado una fecundacin in vitro. 3.1 G!4et#" 4!"+-&$n#". Coloque una ota de solucin o-tenida de ametos masculinos de eri$o o choro maltn en un portao-jeto y c0-ralo con un cu-reo-jeto. /escri-a y esquematice sus o-servaciones, caracteri$ando la estructura de los ametos y su comportamiento. 3.* G!4et#" e4en$n#". Coloque una ota de solucin o-tenida de ametos femeninos de eri$o o choro maltn en un portao-jeto y c0-ralo con un cu-reo-jeto. /escri-a y esquematice sus o-servaciones, caracteri$ando la estructura de los ametos y su comportamiento. 3.3 Fe+-n/!+$0n. Coloque una ota de solucin o-tenida de la me$cla entre ametos masculinos y femeninos de eri$o o choro maltn en un portao-jeto y c0-ralo con un cu-reo-jeto. /escri-a y esquematice sus o-servaciones caracteri$ando la estructura de los ametos y su comportamiento. REFERENCIAS 'l-erts =, ' >ohnson, > 4e?is, 5 (aff, @ (o-erts A 6 Balter (,CC3" =ioloa 5olecular de la Clula. 3ta Edicin. Editorial 7mea. Espa.a, !3+2 pp. 'udesirD *, ; 'udesirD A =E =yers (,CC1" =ioloa# la vida en la *ierra. 1va edicin. Editorial 6earson Educacin. 5&ico, !C,3 pp. Curtis E (,CC+" 8nvitacin a la =ioloa. +ta edicin. Editorial 5dica 6anamricana. =uenos 'ires, +FG pp.
/e (o-ertis E/6, > Ei- A ( 6on$io (,CC!" =ioloa celular y molecular /e (o-ertis. !Ga edicin. Editorial El 'teneo. =uenos 'ires, 3+H pp.