REBIOL 2012; 32(2):27-38 (julio-diciembre 2012)

Revista Cientfica de la Facultad de Ciencias Biolgicas

Universidad Nacional de Trujillo. Trujillo. Per

Pag. 27

Efecto del extracto acuoso de Syzygium
aromaticum a diferentes concentraciones sobre el
ciclo celular en meristemos radiculares de Allium
cepa

Effect of the aqueous extract of Syzygium aromaticum at different
concentrations on the cell cycle in root meristems of Allium cepa

Jos A. Saldaa Jimnez, Juan C. Muro Morey, Ftima Zavala de la Cruz,
Gina Zavaleta Espejo, Jhajaira Araujo Soria y Karen Fajardo Fernndez

RESUMEN

Se determino el efecto del extracto acuoso de Syzygium aromaticum clavo de olor a concentraciones de
1% y 2%, sobre el ciclo celular en meristemos radiculares de Allium cepa cebolla var. Roja Arequipea. Para
ello, se indujo el crecimiento de raicillas, establecindose tres tratamientos (T1, T2 y T3): T1 (agua), T2
(extracto acuoso de clavo de olor al 1%), T3 (extracto acuoso de clavo de olor al 2%) durante 16 horas de
exposicin a cada uno de ellos. Despus de la emergencia y exposicin de las raicillas a los tratamientos, se
realiz el montaje, coloracin y posterior lectura microscpica. Los resultados obtenidos muestran una
disminucin del ndice mittico en T2 y T3, alcanzando su mnimo (11.07%) en T3. En cuanto al ndice
profsico se observo un incremento en los diferentes tratamientos con respecto a T1, llegando hasta 54.22% en
T3. Estos resultados se explicaran debido a que probablemente se estara afectando la normal actividad de las
ciclinas mitticas; debido a los compuestos con capacidad oxidante como taninos, cidos, steres triterpnicos,
alcaloides, hetersidos de sitosterol y estigmasterol, entre otros presentes en el extracto acuoso. Lo cual tambin
explicara la presencia de figuras mitticas anormales como puentes anafsicos y clulas binucleadas presentes
en T2 y T3. Por otro lado, el anlisis de varianza mostr diferencias significativas entre los diferentes
tratamientos, lo cual fue confirmado mediante la prueba de comparacin mltiple de promedios.

Palabras Clave: Allium cepa, extracto acuoso de clavo de olor, puentes anafsicos, clulas binucleadas.

ABSTRACT

Effect of aqueous extract of Syzygium aromaticum "clove" at concentrations of 1% and 2%, on the cell cycle in
root meristems of Allium cepa "onion" var. Red Arequipea was determined. For this, was induced growth of
rootlets, establishing three treatments (T1, T2 and T3), of which T1 (water), T2 (aqueous extract of clove 1%), T3
(aqueous extract of clove odor 2%) for 16 hour exposure to each of them. After the emergence of rootlets and
exposure to treatment, was assembled, staining and subsequent microscopic reading. The results show a decrease in
mitotic index in T2 and T3, reaching its lowest (11.07%) in T3. As the prohasic index was observed an increase in
the different treatments with respect to T1, reaching 54.22% in T3. These results could be explained because it
would probably affecting the normal activity of mitotic cyclins, due to compounds with oxidizing capacity as
tannins, acids, esters triterpene alkaloids, glycosides of sitosterol and stigmasterol, among others present in the
aqueous extract. Which would also explain the presence of abnormal mitotic pictures as bridges anaphasic and
binucleated cells present in T2 and T3? Moreover, analysis of variance showed significant differences between the
different treatments, which was confirmed by the multiple comparison test averages.

Keywords: Allium cepa, aqueous extract of clove, anaphasic bridges, binucleate cells.






Pag. 28

INTRODUCCIN

Hoy en da, el uso de extractos vegetales en lugar de drogas sintticas se ha incrementado
progresivamente en el tratamiento de algunas enfermedades
1,2
, entre estos extractos se encuentran los
de Eugenia caryophyllus (Mirtaceae), rbol tropical de entre 3 y 15 m de altura, comnmente llamado
clavo de olor; estos componentes, que son los botones florales sin abrir, contienen de un 14-21% de
un aceite esencial muy voltil, de un 10-13% de taninos, de varios cidos y steres triterpnicos, as
como de hetersidos de sitosterol y estigmasterol
3,4,5
.
Las propiedades medicinales del clavo de olor fueron valoradas por griegos, romanos y chinos:
estos ltimos lo masticaban para aliviar los dolores de muelas y combatir el mal aliento y en la
prevencin de enfermedades infecciosas. Conforme evolucion el conocimiento de las propiedades
farmacolgicas, su uso se comn, especfico y selectivo hasta la actualidad, en que es utilizado en
diferentes reas odontolgicas con propsitos, principalmente para la supresin del dolor.
8,9.
El aceite
esencial del clavo es un lquido incoloro o ligeramente amarillo que en contacto con el aire se
oscurece, es ms denso que el agua y tiene un olor fuerte, aromtico y picante. Se compone de
aproximadamente 84-95% de fenoles (eugenol con cerca del 70-95%, de acetileugenol 3%),
sesquiterpenos (- y -cariofilenos) y una pequea cantidad de steres, cetonas y alcoholes.
6,7

Se estn realizando diversos estudios para poder establecer parmetros y el modo de administracin
no solamente del clavo, sino de diversas especies herbarias, a pesar de ello se recomienda no usar el
aceite de clavo en concentraciones mayores al 0.06% y que la dosis del eugenol no sobrepase los 2.5
mg/ kg de peso. Este compuesto es un derivado fenlico con frmula C
10
H
12
O
2,
que aparece en los
clavos en una proporcin de 60 a 90%, es un bloqueador irreversible de la conduccin nerviosa y en
concentraciones bajas, es capaz de reducir la transmisin sinptica de la zona neuromuscular. Varios
estudios han concluido que inhibe la ciclooxigenasa, favoreciendo el efecto analgsico y anestsico al
lograr la inhibicin de la biosntesis de las prostaglandinas.
10, 11

A bajas concentraciones el Eugenol inhibe la actividad nerviosa de forma reversible, como un
anestsico local. Despus de la exposicin a altas concentraciones la conduccin nerviosa es
bloqueada irreversiblemente, indicando un efecto neurotxico. A pesar de que su aplicacin es comn,
pueda llegar a provocar lesiones custicas o quemaduras superficiales cuando es colocado en forma
directa y en altas concentraciones en los tejidos blandos. La severidad del dao es proporcional al
tiempo de exposicin, a la dosis y a la concentracin. Se ha visto que puede llegar a mostrar tanto in
vivo como in vitro diferentes tipos de toxicidad, tales como dao directo al tejido, dermatitis,
reacciones alrgicas, disfunciones hepticas, coagulacin intravascular diseminada, hipoglicemia
severa, e incluso la muerte por falla orgnica mltiple. Se ha demostrado tambin que puro en
concentraciones mayores de 10-4 mol/L produce la inhibicin de la migracin celular y modifica la
sntesis de las prostaglandinas, lo que afecta la respiracin celular, la actividad mitocondrial y produce
severos cambios en la actividad enzimtica de la membrana celular .
12

En otros estudios se ha profundizado en los efectos de la aplicacin tpica del aceite de clavo sobre
la mucosa labial, y se ha observado una desnaturalizacin progresiva y fijacin del citoplasma en la
superficie del epitelio, seguida de licuefaccin tisular, edema, prdida de los puentes intercelulares y
disolucin de algunas fibras musculares superficiales. Actualmente, se utiliza el infuso de clavo de
olor en aplicacin tpica para el tratamiento de neuralgias, odontalgias y otras afecciones de la pulpa
dentaria (como antisptico-analgsico). Siendo las novedades de la medicina el uso de productos
naturales contra el cncer, el clavo de olor es uno de los productos que, combinado con otros
compuestos, podra representar una potencial cura para esta enfermedad, concretamente leucemia,
cncer cervical de cuello uterino o neuroblastoma.
13, 14

En estudios realizados en ratas, se ha demostrado que el infuso de los brotes cerrados secos del
clavo es efectivo para la prevencin del cncer de pulmn al provocar una disminucin en la expresin
de clulas antiapoptticas y de protenas promotoras de crecimiento adems de aumentar la expresin
de clulas apoptticas. Se han aislado dos compuestos qumicos importantes: el deshidrodieugenol y el
trans-coniferil aldehdo, que al igual que sus derivados son potencialmente eficaces contra algunos
agentes mutgenos que participan en el desarrollo del cncer. Los sesquiterpenos, compuestos que
contienen al menos un grupo carbonilo conjugado, son tambin los responsables de las propiedades
anti cancergenas del clavo. Se cree que la actividad citotxica de ellos radica en la capacidad de
formar enlaces covalentes entre los grupos O=C-C=CH
2
de los sesquiterpenos y los grupo surfidrilos
de algunas enzimas como la DNA polimerasa, timidilasa, fosfofructoquinasa y glicgeno sintetasa

Pag. 29

ocasionando la inhibicin de la sntesis de DNA en la clulas cancergenas. Es as que esta
investigacin destaca al clavo de olor como un potencial agente contra el cncer. Sin embargo, as
como existen diversas ventajas del uso del clavo de olor, el uso inadecuado de este, debido al aceite
que lo compone, se convierte en un potente veneno cuando se utiliza en cantidades superiores a las
permitidas. El efecto que pueden ocasionar estas exposiciones son: quemaduras o dermatitis, cuando
se aplican sobre la piel; efecto neurotxico, al alterar el sistema nervioso; graves dolores de estomago;
problemas pulmonares graves y esputos sanguinolentos, cuando se pretende fumar cigarrillos de clavo
de olor, con el objetivo de abandonar el habito de fumar; entro otros.
15,16
El ciclo celular no siempre termina en la divisin celular ya que su regulacin gentica condiciona
a cada una de las fases que lo conforman. Esto exige una transcripcin y sntesis de protenas
especficas. Estas protenas determinan el inicio del ciclo celular, la replicacin, la finalizacin del
perodo S, el paso de G2 hacia la mitosis y el flujo de cada fase de esta ltima. De esta manera el ciclo
puede ser afectado por sustancias antimitticas, citotxicas y genotxicas, tales como los compuestos
fenlicos; que alteren su normal desarrollo e induzcan la aparicin de figuras mitticas anormales e
incluso ocasionen daos a nivel cromosmico.
17,18,19

Ante esto, existen diversos bioensayos que nos permiten evaluar el riesgo toxicognico de una
sustancia o una mezcla de sustancias. En tal sentido, los meristemos de Liliceas como la cebolla, son
frecuentemente utilizados para estudios de la dinmica celular porque su cultivo in vitro constituye un
sistema ideal para estudiar los mecanismos regulatorios que puedan afectar el ciclo celular.
20,21

En 1938 el uso de Allium cepa se introdujo como un sistema de prueba biolgico para evaluar los
efectos citogenticos de la colchicina. Desde entonces ha sido un material biolgico de amplio uso en
pruebas de laboratorio, debido al crecimiento rpido de sus races y la respuesta de su material
gentico a la presencia de citotxicos potenciales en los lquidos de prueba. Es por ello que, al ensayar
el efecto de algunos agentes fsicos y qumicos que puedan causar dao a nivel de su ciclo celular, se
podra pensar que dichos agentes tendran el potencial de generar un efecto txico en los procesos de
divisin celular de otro tipo de clulas eucariotas, esto debido a la universalidad del cdigo gentico.
22
En ese sentido, el presente trabajo se determino el efecto de diferentes concentraciones del extracto
acuoso de Syzygium aromaticum clavo de olor a diferentes concentraciones, sobre el ciclo celular
en meristemos radiculares de Allium cepa L. Var. Roja Arequipea cebolla.

MATERIAL Y MTODOS

Material Biolgico
Botones florales de Syzygium aromaticum clavo de olor, en excelente estado de
conservacin fitosanitaria, obtenidos del mercado la Hermelinda. Distrito de Trujillo.
Bulbos de Allium cepa cebolla, con forma de perilla y excelente estado de conservacin
fitosanitaria, obtenidos del mercado la Hermelinda. Distrito de Trujillo.
Obtencin de los extractos acuosos mediante infusin
Previamente los botones florales del S. aromaticum fueron secados en una estufa a 50C por 3 das,
luego se cortaron en pedazos pequeos, hasta completar 100g de clavo de olor. Los cuales fueron
colocados en un matraz conteniendo 1L de agua en estado de ebullicin durante 10 minutos para
obtener un infuso al 1%. Posteriormente se procedi a filtrar el extracto acuoso con papel filtro
Whatman N1. Similar metodologa se realiz para preparar el infuso al 2%.
Obtencin de las raicillas de A. cepa
Se utilizaron 3 bulbos de cebolla, a los cuales se les quitaron las catfilas y raicillas secas , se
colocaron 3 mondadientes equidistantemente para sostener el bulbo en la boca del vaso de tecnopor,
esto permiti que el lquido se ponga en contacto con el disco germinativo para la emisin de nuevas
raicillas. El vaso se llenara con 100mL. de agua de cao previamente filtrada con aireacin constante
para lo cual se utilizo un sistema de manguerillas conectadas a un motor de pecera, estos se
mantendrn en un sistema de soporte diseado especialmente hecho de triplay. El agua se renov cada
24 horas durante 3 das (72 horas) y en oscuridad hasta que se obtuvieron raicillas de 2 a 3 cm.de
longitud.
Exposicin de las raicillas
Para evaluar el efecto de las concentraciones de los infusos de S. aromaticum sobre el ciclo celular
de A. cepa. Se expusieron las raicillas obtenidas a concentraciones de 1% y 2% durante 16 horas.

Pag. 30

Obtencin de preparados citolgicos
Finalizado los tratamientos, las raicillas fueron disectadas y lavadas tres veces seguidas con agua
destilada y colocadas en la solucin fijadora de Carnoy`s. Posteriormente se sacaron del fijador y se
lavaron tres veces en agua destilada para retirar de esta manera los restos del fijador. Luego se
procedi a secarlas con papel toalla para eliminar los restos de agua en la superficie. En seguida,
fueron depositadas sobre una luna de reloj para su respectiva coloracin de acuerdo a la tcnica rpida
de Tjio y Levan.
Anlisis citolgico y estadstico
Los pices coloreados se colocaron entre porta y cubre objetos para su aplastamiento. Los
preparados citolgicos se observaron al microscopio compuesto con el objetivo de inmersin
Posteriormente, se conto un total de 2000 clulas meristemticas por cada uno de los diferentes
tratamientos ensayados., utilizando la tcnica de barrido se evalu la presencia de puentes anafsicos
(Ap), clulas binucleadas (Cb); as como los valores del ndice mittico y de fases. El bioensayo se
realizo en tres repeticiones y los datos obtenidos se expresaron en porcentaje, analizndolos
estadsticamente utilizando el programa Statgraphics Centurin versin de prueba 5.1.para
windows.
24,25


RESULTADOS

En el presente trabajo, se determin el efecto del extracto acuoso de Syzygium aromaticum clavo
de olor a concentraciones de 1% y 2% sobre el ciclo celular en meristemos radiculares de Allium
cepa, obtenindose los siguientes resultados:
En la tabla 1, se observan los promedios de los porcentajes de los ndices mittico y de fases. La
figura 1, muestra el grfico de barras del ndice mittico, en el cual se observa una mayor disminucin
del mismo a la concentracin de 2%. En la Fig 2, el grfico de barras del ndice profsico (IP) muestra
un incremento, alcanzando su mximo valor en T3. La figura 3, muestra el grfico de barras del
ndice metafsico (Imet), en el cual se nota una menor disminucin en T3. Las figuras 4 y 5, muestran
los grficos de barras de los ndices anafsico (IA) y telofsico (IT), los cuales alcanzan su mxima
disminucin en T3. Las figuras 6 y 7 muestran los grficos de barras de los puentes anafsicos (Ap)
y las clulas binucleadas (Cbn) presentes en T3. Las Figura 8 muestra las fases del ciclo celular en el
tratamiento control. En las Figs. 9 y 10 se muestran anormalidades cromosmicas en T3 como
puentes anafsicos y clulas binucleadas respectivamente.





Las letras (a-c) representan los 3 grupos estadsticamente homogneos segn el test de comparacin mltiple de medias. Los promedios
relacionados con la misma letra no presentan diferencias significativas entre ellos para un valor de p<0,05.

Fig. 1. Promedio de los porcentajes DE del ndice mittico en..meristemos radiculares de Allium cepa var.
Roja Arequipea, expuestos a los distintos tratamientos.





Pag. 31

Tabla 1. Promedios de los porcentajes Desviacin Estndar de los valores obtenidos de los distintos
parmetros evaluados en meristemos radiculares de Allium cepa var. Roja Arequipea expuestos al extracto
acuoso de Syzygium aromaticum clavo de olor con un tiempo de exposicin de diecisis horas.

Parmet
ro




ndice
Mittico
ndice
Profsico
ndice
Metafsico
ndice
Anafsico
ndice
Telofsico
Puentes
Anafsicos
(Ap)
Clulas
Binucleadas
(Cbn)

T1
13.83
0.450925
45.53
0.541479
15.16
0.854888
9.89
0.38553
29.42
1.03436
0 0.0 0 0.0

T2
12.88
0.351188
51.21
1.14352
14.75
0.0360555
9.79
0.420991
25.5
0.8937
5.26
0.25006
0.25
0.00577

T3
11.07
0.125831
54.22
1.03992
12.19
0.657597
8.54
0.230651
23.8
0.355293
14.29
4.4255
0.36
0.00577

T= Tratamientos, T1 Control : agua potable 16 horas de exposicin, T1: extracto acuoso de Syzygium aromaticum clavo de olor al 1%
durante16 horas de exposicin, T2: extracto acuoso de Syzygium aromaticum clavo de olor al 2% durante16 horas de exposicin.

















Las letras (a-c) representan los 3 grupos estadsticamente homogneos segn el test de comparacin mltiple de medias. Los promedios
relacionados con la misma letra no presentan diferencias significativas entre ellos para un valor de p<0,05.

Fig. 2. Promedio de los porcentajes DE del ndice Profsico en..meristemos radiculares de Allium cepa var.
Roja Arequipea,.expuestos a los distintos tratamientos.

DISCUSIN

Al analizar los resultados obtenidos a partir de los diferentes tratamientos del extracto acuoso de
Sizigium aromaticum clavo de olor, se observ que los valores del ndice mittico (IM) disminuyen,
hasta alcanzar valores de 11.07% (T2), con respecto al control (T1). (Tabla 1, Figs: 1 y 8). Esto se
debera probablemente, a que las concentraciones ensayadas del extracto acuoso del clavo de olor,
contiene sustancias como taninos, cidos, steres triterpnicos, alcaloides, hetersidos de sitosterol y
estigmasterol.
26
Estaran ejerciendo un efecto oxidativo que estara afectando la formacin del
complejo CdK1-ciclina B; el cul forma a su vez forma el Factor Promotor de la Mitosis (FPM); lo
que traera como consecuencia que las clulas no transiten normalmente de la fase G2 (segundo punto
de control del ciclo celular) hacia la mitosis; disminuyendo consecuentemente el nmero de clulas en
division.
27
Similares resultados se obtuvieron en ensayos con extractos acuosos de Cyperus rotundus
coquito y Minthostachys molliss mua y etanlicos de Glycine max soja.
28,29



a
b
c
0
10
20
30
40
50
60
T1 T2 T3
P
o
r
c
e
n
t
a
j
e

(
%
)

Tratamientos
Indice Profsico

Pag. 32





















Las letras (a-b) representan los 2 grupos estadsticamente homogneos segn el test de comparacin mltiple de medias. Los promedios
relacionados con la misma letra no presentan diferencias significativas entre ellos para un valor de p<0,05.

Fig. 3. Promedio de los porcentajes DE del ndice Metafsico en meristemos radiculares de Allium cepa var.
Roja Arequipea, expuestos a los distintos tratamientos.























Las letras (a-b) representan los 2 grupos estadsticamente homogneos segn el test de comparacin mltiple de medias. Los promedios
relacionados con la misma letra no presentan diferencias significativas entre ellos para un valor de p<0,05.

Fig. 4. Promedio de los porcentajes DE del ndice Anafsico en meristemos radiculares de Allium cepa var.
Roja Arequipea, expuestos a los distintos tratamientos.




b
b
a
0
5
10
15
20
T1 T2 T3
P
o
r
c
e
n
t
a
j
e

(
%
)

Tratamientos
Indice Metafsico
b
b
a
0
2
4
6
8
10
12
T1 T2 T3
P
o
r
c
e
n
t
a
j
e

(
%
)

Tratamientos
Indice Anafsico

Pag. 33
























Las letras (a-c) representan los 3 grupos estadsticamente homogneos segn el test de comparacin mltiple de medias. Los promedios
relacionados con la misma letra no presentan diferencias significativas entre ellos para un valor de p<0,05.

Fig. 5. Promedio de los porcentajes DE del ndice Telofsico en.meristemos radiculares de Allium cepa var.
Roja Arequipea, expuestos a los distintos tratamientos.





















Las letras (a-b) representan los 2 grupos estadsticamente homogneos segn el test de comparacin mltiple de medias. Los
promedios relacionados con la misma letra no presentan diferencias significativas entre ellos para un valor de p<0,05.

Fig. 6. Promedio de los porcentajes DE de los Puentes Anafsicos (Ap) en meristemos radiculares de Allium
cepa var. Roja Arequipea, .expuestos a los distintos tratamientos.



c
b
a
0
5
10
15
20
25
30
35
T1 T2 T3
P
o
r
c
e
n
t
a
j
e

(
%
)

Tratamientos
Indice Telofsico
a
a
b
0
2
4
6
8
10
12
14
16
18
20
T1 T2 T3
P
o
r
c
e
n
t
a
j
e

(
%
)

Tratamientos
Puentes Anafsicos

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Las letras (a-c) representan los 3 grupos estadsticamente homogneos segn el test de comparacin mltiple de medias. Los promedios
relacionados con la misma letra no presentan diferencias significativas entre ellos para un valor de p<0,05.

Fig 7. Promedio de los porcentajes DE de las Clulas binucleadas (Cb) en meristemos radiculares de Allium
cepa var. Roja Arequipea, .expuestos a los distintos tratamientos.



























Fig. 8. Fases del ciclo celular en clulas meristemticas de Allium cepa, en el tratamiento control, observadas a
40x. Interfase (I), Profase (P), Metafase (M), Anafase (A) y Telofase (T).


a
b
c
0.00
0.05
0.10
0.15
0.20
0.25
0.30
0.35
0.40
T1 T2 T3
P
o
r
c
e
n
t
a
j
e

(
%
)

Tratamientos
Clulas Binucleadas
I
)
P
M
)
A
)
T
)

Pag. 35





Fig. 9. Puente anafsico (Ap) en meristemos radiculares de Allium cepa, expuestas al infuso de clavo de olor al 2%
durante 16 horas. observado a 100 x.




























Fig. 10. Clula binucleada (Cb) en meristemos radiculares de Allium cepa, expuestas al infuso de clavo de olor al 2%
durante 16 horas. observada a 40 x.


(Ap)
Cb

Pag. 36

En relacin al IP (Tabla 1 y Fig. 2), se observ que este se incrementa, alcanzando su valor
mximo de 54.22% en (T3), con respecto a T1. Lo cual denotara en principio el efecto oxidativo de
los compuestos mencionados anteriormente afectaran la formacin del complejo Ciclina B- cdk1, que
entre otras funciones es responsable de activar a las protenas del mantenimiento estructural
cromosmico (SMC) conocidas como condensinas, de llevar a cabo la polimerizacin de microtbulos
para la formacin del huso mittico, traera como consecuencia que los procesos de condensacin del
ADN y formacin del huso acromtico, se vean seriamente afectados, no transitando entonces las
clulas normalmente desde la profase haca la metaphase.
30,31,32
. Similares resultados se obtuvieron en ensayos con sorbato de potasio 1g/L y extracto acuoso de de
Annona muricata guanbana.
33,34
. La disminucin del ndice metafsico (IMet) (Tabla 1 y Fig. 3),
hasta alcanzar valores de 12.19 % (T3), se debera a la inhibicin del FPM, disminuyendo el
ensamblaje del huso mittico y dejando de inducir la polimerizacin de microtbulos que se elaboran
perpendicularmente al eje mayor del cromosoma y que se anclan por una de sus extremidades en el
cinetocoro; logrando alcanzar un menor nmero de clulas la metafase con respecto a T1.
35
Adems el
IMet disminuye como una consecuencia de la interferencia del ciclo celular desde el aumento de la
profase.
36

Los ndices anafsicos (IA) y telofsicos (IT) (Tabla 1, Figs. 4 y 5) de los tratamientos expuestos al
extracto acuoso de clavo de olor tambin disminuyen con respecto a T1. La disminucin en estos
ndices, estara ocurriendo debido a que el aumento del nmero de clulas en profase genera una
disminucin en metafase y por ende una disminucin en anafase. Adems la disminucin del IA, se
originara debido a que la accin oxidativa de los compuestos presentes en el lquido de ensayo
estaran inhibiendo la actividad cataltica de las cohesinas, las cuales a su vez se encargan de llevar a
cabo el proceso de segregacin de cromtidas hermanas; no permitiendo entonces, que las clulas
transiten normalmente hacia anafase y consecuentemente hacia telofase. Similares resultados, se
obtuvieron en ensayos con extracto acuoso de Cyperus rotundus coquito.
37

La presencia de puentes anafsicos (Ap) en T2 y T3 (Tabla 1, Figs. 6 y 9), se estara generando
debido a los efectos cleistognicos a nivel de las regiones telomricas del DNA, por la interaccin
entre los compuestos oxidativos presentes en los extractos acuosos ensayados a las diferentes
concentraciones y el DNA, lo cual volvera pegajosos a los cromosomas, haciendo posible la
formacin de estas figuras cromosmicas anmalas. Similares resultados se obtuvieron con dicromato
de potasio en meristemos radiculares y meiocitos de Vicia faba haba.
38

Se observ tambin, la presencia de clulas binucleadas (Cbn) (Tabla 1, Figs. 7 y 10 ); las cuales
no han llevado a cabo un normal proceso de citocinesis; puesto que probablemente el efecto oxidativo
de los componentes presentes en el extracto acuoso del clavo de olor originara una inhibicin de la
fusin de vesculas del Aparato de Golgi , que van desde el centro hacia la periferia de la clula,
obstaculizando la formacin del fragmoplasto, responsable de la nueva pared celular durante la
telofase, ocasionando la formacin de Cbn.
39,40
. Similares resultados se obtuvo al evaluar la accin del
sorbato de potasio 1g/L y el efecto antirreparador de la cafena sobre el dao cromosmico inducido
por el herbicida 2,4 D sal amina (U46), obteniendo clulas binucleadas, ambos en clulas
meristemticas de A. cepa.
33,41

El anlisis de varianza realizado para los ndices mitticos, de fases, puentes anafsicos y clulas
binucleadas, evidenci la existencia de diferencias significativas entre los diferentes tratamientos
ensayados; lo cual fue confirmado mediante la prueba de comparacin mltiple de promedios.
Establecindose la conformacin de distintos grupos estadsticamente homogneos en funcin a su
efecto.

CONCLUSIONES

El extracto acuoso al 2% de Syzygium aromaticum, ocasiona una disminucin del ndice
mittico, alcanzando valores de 11.07% y un aumento en el ndice profsico, alcanzando
valores de 54.22% en meristemos radiculares de Allium. cepa Var. Roja Arequipea con
respecto al resto de tratamientos.
El extracto acuoso al 2% de Syzygium aromaticum, ocasiona una disminucin del ndice
metafsico (12.19%), anafsico (8.54%) y telofsico (23.8%), en meristemos radiculares de
Allium. cepa Var. Roja Arequipea con respecto al resto de tratamientos.

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Los extractos acuosos al 1% y 2% de Syzygium aromaticum generan efectos deletreos en los
extremos telomricos de los cromosomas de Allium. cepa Var. Roja Arequipea, formando
puentes anafsicos.
Los extractos acuosos al 1% y 2% de Syzygium aromaticum interfieren con la formacin del
fragmoplasto, alterando de esta manera el proceso de citocinesis y consecuentemente formando
clulas binucleadas en meristemos radiculares de Allium. cepa Var. Roja Arequipea.

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