PRETRATAMIENTO DE BAGAZO DE CAA DE AZUCAR:

El bagazo de la caa de azcar sufre una serie de cambios para su uso final en la produccin de
una protena unicelular, para ello necesita de equipos que faciliten dichos cambios. Estos equipos
pueden ser tamices de diferentes nmeros de malla (10, 20, 30, 40) marca FIIC, S.A. de C.V, estufa
marca Thermolyne, parrilla con agitador magntico, modelo Nuova, marca Thermolyne, mufla, y
espectrofotmetro UVVis.
Preparacin del bagazo de caa de azcar: Para iniciar el pretratamiento se debe moler y
tamizar el bagazo de caa durante 20 minutos y seleccionar el tamao de fibra malla 30. El bagazo
se debe lavar con agua a temperatura ambiente, para eliminar impurezas adheridas a la fibra de
origen.
Se debe filtrar y secar en una estufa a 70C durante 24 h.
Determinacin porcentual de celulosa: A un gramo de muestra seca se le aaden 15 mL de cido
actico al 80% y 1.5 mL de cido ntrico concentrado y se lleva a reflujo por 20 minutos. La
muestra tratada se debe filtrar y el residuo se debe lavar con etanol, se seca en un horno a 100
105C y se debe pesar (material A).Luego se debe incinerar a 540C (material B) dejando que se
enfre a temperatura ambiente en un desecador y despus se pesa.
La determinacin del porcentaje de celulosa se calcula mediante la ecuacin:
% Celulosa = [(material A) (material B) / Peso de la muestra utilizada] x 100
Determinacin porcentual de lignina: A un gramo de muestra seca se le aaden 70 mL de
cido sulfrico al 1,25%. La mezcla se lleva a reflujo, con agitacin constante, por 120 minutos, se
filtra y lava con agua. A este material se le aaden 30 mL de cido sulfrico al 72% y se le
permite permanecer durante 4 horas con agitacin constante. Posteriormente los slidos se
filtran, lavan, secan (100105C) y pesan (material C). Despus el material se incinera a
540C. Despus se enfria a temperatura ambiente en una desecador y se pesa (material D).
El contenido de bagazo de lignina en la muestra de bagazo se obtendr utilizando la ecuacin:
% Lignina= [(material C) (material D) / Peso de la muestra utilizada] x 100
Pretratamiento con cido fosfrico: Cuatro gramos de muestra seca de bagazo de
caa se colocan en un matraz de tres bocas. Se aadien 32 mL de cido fosfrico y se
mezclan por medio de un agitador magntico, a reflujo y temperatura constante en un bao de
agua. Se aaden 120 mL de acetona para precipitar el compuesto acuoso lignocelulsico. La
mezcla se coloca en tubos de plstico y se centrifugan a 3.600 rpm a temperatura ambiente por 20
minutos. El precipitado se re suspende aadiendo acetona y se centrifuga dos veces. El
sobrenadante combinado del lavado con acetona contiene en mayor parte cido fosfrico,
acetona y lignina disuelta. Despus el precipitado, que contiene celulosa, hemicelulosa y alguna
cantidad de lignina, se re suspende con agua destilada y centrifuga a 3.600 rpm durante 20
minutos. Despus de que el sobrenadante se decanta, el precipitado se re suspende en agua y se
centrifuga cuatro veces ms. El residuo se seca en un horno (100 105C). Una vez efectuado el
pretratamiento, se determina el porcentaje de celulosa y lignina para cada experimento de
acuerdo a las formulas mencionadas anteriormente.