UNIVERSIDAD SEOR DE SIPAN

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA
Asignatura: Biologa Clular ! Mol"ular CICLO#
$%&' ( &
ACCI)N EN*IM+TICA

COMPETENCIAS
1. Reconoce el efecto de una enzima peroxidasa presente en tejidos animales
y vegetales
2. Reconoce el efecto de la enzima amilasa y ureasa
3. Determina el efecto de la temperatura y el pH en la intensidad de reaccin
enzimtica
. !alora el papel de las enzimas en el meta"olismo
INTRODUCCI)N
#as enzimas son prote$nas espec$ficas% &ue act'an como catalizadores de las
reacciones &u$micas en todos los seres vivos. #a actividad enzimtica puede
compro"arse experimentalmente mediante la identificacin y cuantificacin de los
productos formados en la reaccin &ue ellas regulan
#a accin de estos compuestos proteicos en una reaccin% se ve afectada por la
variacin de factores f$sicos y &u$micos como la temperatura% concentracin de la
enzima y del sustrato% el pH. (tc.
#a catalasa )perxido de *idrgeno+ perxido de *idrgeno oxidorreductasa% (,
1.11.1.-. es una de las enzimas ms a"undantes en la naturaleza y se encuentra
ampliamente distri"uida en el organismo *umano% aun&ue su actividad var$a en
dependencia del tejido/ 0sta resulta ms elevada en el *$gado y los ri1ones% ms
"aja en el tejido conectivo y los epitelios% y prcticamente nula en el tejido
nervioso. 2 nivel celular se localiza en las mitocondrias y los peroxisomas% excepto
en los eritrocitos% donde se encuentra en el citosol. (sta enzima es una
metaloprote$na tetram0rica% cuyo peso molecular se encuentra en el rango de 2134
253 6D. ,onsta de su"unidades id0nticas &ue se mantienen unidas por
interacciones no covalentes. ,ada su"unidad contiene un grupo prost0tico de
protoporfirina 78 y el contenido proto*0mico y el de *ierro representan un 1%1 9 y
3%3: 9 respectivamente del peso molecular total de la enzima.
(l perxido es un producto de la actividad celular y al acumularse en exceso
intoxica la c0lula por lo cual de"e ser degradado por la enzima espec$fica. #a
reaccin en la cual interviene la peroxidasa se presenta de la siguiente manera+
peroxidasa
$,$O$ $,$O - O$
(sta reaccin puede visualizarse por la formacin de "ur"ujas% las cuales se
producen de"ido al desprendimiento de ox$geno. #a cantidad de "ur"ujas es una
medida cualitativa proporcional a la intensidad de la reaccin y puede utilizarse
para evaluar la dinmica de la reaccin
#a a.ilasa% denominada tam"i0n /tialina o tialina% es un enzima *idrolasa &ue
tiene la funcin de digerir el glucgeno y el almidn para formar az'cares simples%
se produce principalmente en las glndulas salivares )so"re todo en las glndulas
partidas. y en el pncreas. ;iene un pH de <. ,uando uno de estas glndulas se
inflama aumenta la produccin de amilasa y aparece elevado su nivel en sangre.
#a urasa cataliza la *idrlisis de la urea a dixido de car"ono y amoniaco. =e
encuentra principalmente en semillas% microorganismos e inverte"rados. #a
enzima ureasa de la soja )>lycine max. descompone la urea en amon$aco y el
dixido de car"ono+
,?)@H2.2 A H2? B 2 @H3 A ,?2
#a disolucin de amon$aco )@H3. tiene un pH alto &ue puede ser detectado
mediante un papel indicador de pH. (l amon$aco producido por la reaccin
tam"i0n puede ser detectado por el olor. #a urea es un compuesto especialmente
"ueno para la eliminacin de nitrgeno de"ido a &ue es solu"le en agua y menos
txico &ue el amon$aco . #a orina *umana contiene 29 de urea.
MATERIALES 0 M1TODOS
MATERIALES
;u"os de ensayo
Cea6ers
solucin diluida de almidn 139
Dcido c$trico 139
Cicar"onato de =odio 139 )@aH,?3.
=olucin indicadora universal
H$gado de pollo y corazn de pollo
Erutas verduras+ Fapa% tomate% manzana% pera
(xtracto de soja )13 ml de agua por gramo de materia seca de soja.
Finzas de madera
Fipetas
#icuadora o mortero
;ermmetro
Ca1o mar$a
Hielo
Reactivo de Ee*ling
#ugol
2gua oxigenada
>radillas
M1TODOS
A""i2n 3 un "atali4a3or 3 orign ani.al so5r l ,$O$
1. Garcar tu"os de ensayo con los n'meros 1% 2 3% y
2. (n el tu"o 1 adicionar un pedazo de *$gado y 2 ml. de agua oxigenada.
?"servar la intensidad de la reaccin. Hu0 papel desempe1a el *$gado en
ellaI ,ul es la naturaleza &u$mica de la sustancia &ue cataliza la reaccinI
Hu"o desprendimiento de calorI
3. ;omar un pedazo de *$gado similar al anterior% agregar al tu"o 2 y colocar
al "a1o de mar$a durante 13 minutos. Retirar% dejar enfriar y adicionar 2 ml
de agua oxigenada. =e presenta reaccinI ,mo explica este resultado.
. ;omar el tu"o 3 y agregar otro pedazo de *$gado en la misma cantidad &ue
en la anterior y col&uelo en un recipiente con *ielo durante 13 minutos.
Ret$relo e inmediatamente adicionar 2 ml de agua oxigenada. ?curre
reaccinI ,mo es su intensidad en relacin con las anteriores
reaccionesI. ,ree usted &ue si el agua oxigenada se agrega despu0s de
dejar &ue el *$gado vuelva a la temperatura am"iente% la intensidad de la
reaccin ser$a como la del tu"o 1I (xpli&ue
J. ;omar el tu"o y agregar media cuc*aradita de macerado de *$gado y
luego 2 ml de agua oxigenada. (s esta reaccin mayor o menor en
intensidad a la del *$gado sin *omogenizarI For&u0I
A""i2n 3 una "atali4a3or 3 orign 6gtal so5r l ,$O$
1. ;omar tu"os de ensayo% y agregar en & trocitos de papa% en el $ trocitos
de tomate% en el 7 trocitos de manzana en el ' trocitos de pera/ luego
agregar en cada tu"o 2 ml de agua oxigenada. ?"servar la intensidad de la
reaccin. Hu0 papel desempe1a el sustrato en ellaI ,ul es la naturaleza
&u$mica de la sustancia &ue cataliza esta reaccinI. Hu"o desprendimiento
de calorI (xpli&ue.
2. Hacer un macerado de los materiales anteriores% colocar por separado de 2
a 3 ml en tu"os de ensayo y agregar en cada tu"o 2 ml. De agua
oxigenada. ?"servar
3. ;omar trocitos de papa similar al punto 1 y agregar a un tu"o de ensayo.
,olocar al "a1o mar$a durante 13 minutos. Retirar% dejar enfriar y adicionar
2 ml de agua oxigenada. =e presenta reaccinI (ste resultado se explica
igual &ue al de la experiencia 1I For&u0I
. (n otro tu"o% agregar otro pedazo de papa en cantidad similar al anterior y
colocar en un recipiente con *ielo durante 13 minutos. Retirar e
inmediatamente adicionar 2 ml de agua oxigenada. ?curre reaccinI ,mo
es su intensidad en relacin a los tu"os anterioresI Hu0 efecto tiene la
disminucin de la temperatura so"re el catalizadorI
A""i2n 3 la Ptialina o A.ilasa
1. Foner en una gradilla cuatro tu"os de ensayo% numerados del 1 al
2. 21adir en cada uno de los tu"os J ml de una solucin diluida de almidn
3. 2 los tu"os 3 y a1adir una pe&ue1a cantidad de saliva
. (n los tu"os 1 y 2 *acer la reaccin de Ee*ling y lugol respectivamente
J. ,olocar los tu"os 3 y a "a1o mar$a 3<K por espacio de 1J minutos/ luego
*acer la reaccin de Ee*ling y lugol.
Pr/ara"i2n 3 la Ptialina:
Despu0s de enjuagarse la "oca% masticar un trozo de papel filtro para
estimular la salivacin. #os l$&uidos segregados se van pasando a un em"udo
&ue tenga un papel filtro% el filtrado se coloca en un tu"o de ensayo *asta
o"tener 1 ml.
#a saliva as$ o"tenida se diluye empleando 1ml de saliva y 13 ml de agua
destilada% as$ se o"tiene la preparacin de la enzima "ase.
A""i2n 3 la Urasa
1. ,olocar 5 ml de cada una de las siguientes soluciones en tres tu"os de
ensayo+ cido c$trico% "icar"onato y agua destilada/ agregar J gotas del
reactivo universal de pH
2. Gedir el pH de la 'rea y de la suspensin de la soya
3. 21adir a los tres tu"os 2 ml de solucin de urea% mezclar y o"servar el
color
. 21adir a los tres tu"os 2 ml de la suspensin de soja.
J. ,omparar los colores y los olores de las mezclas en todos los tu"os. Repita
esta o"servacin a los 3 min.
RESULTADOS
CONCLUSIONES
REFERENCIAS BIBLIO8R+FICAS