TINCIONES UTILIZADAS PARA RECONOCER DIFERENTES ORGANISMOS

El termino tincin significa simplemente colorear las muestras a observar con un colorante que
destaque ciertas estructuras, sin embargo antes de teirlos se los debe fijar al portaobjetos. A
continuacin en la mayor parte de los procedimientos de tincin el portaobjetos se fija pasndolo
varias veces a travs de la llama de un mechero bunsen con el lado con el lado del extendido hacia
arriba o cubrindolo con alcohol metlico durante un minuto. Si no se realizara la fijacin el
colorante podra arrastrar la muestra del portaobjetos.
Los colorantes son sales compuestos por un ion positivo y un ion negativo, uno de los cuales est
coloreado y se conoce como cromforo. El color de los denominados colorantes bsicos est en el
ion positivo, los colorantes cidos, estn en el ion negativo.
Los colorantes bsicos son el violeta de genciana, el azul de metileno, el verde de malaquita y la
safranina, se utilizan con ms frecuencia que los colorantes cidos. Para aplicar los colorantes
cidos y bsicos, se emplean tres clases de tcnicas de tincin: simple, diferencial y especial.
TINCIONES SIMPLES
Una tincin simple es una solucin acuosa o alcohlica de un colorante bsico nico. Aunque los
colorantes se unen de forma especfica a las distintas partes de las clulas, el propsito principal
de la tincin simple es destacar la muestra completa para que se vea la forma y las estructuras
celulares bsicas. En ocasiones se agrega una sustancia qumica a la solucin para intensificar la
coloracin; este adictivo se denomina mordiente. Algunas de las tinciones simples que son
utilizadas en el laboratorio son: el azul del metileno, la carbolfucsina, el violeta de genciana y la
safranina.
TINCIONES DIFERENCIALES
Las tinciones diferenciales reaccionan de modo diferente con distintas clases de muestras,
utilizadas con ms frecuencia para las bacterias, como la tincin de Gram y la tincin de alcohol
resistencia.
La tincin de Gram es uno de los procedimientos de tincin ms tiles porque permite clasificar las
bacterias en dos grandes grupos: grampositivas y gramnegatvas.
Si se usara un colorante violeta de genciana (colorante primario) en un extendido, se lava el
extendido y se lo cubre con yodo, as se podr observar a las bacterias grampositivas y
gramnegativos de color violeta oscuro o prpura. El colorante violeta y el yodo se combinan en el
citoplasma de cada bacteria, si conservan ese color despus de haber agregado el alcohol para
decolorarlas se clasifican como grampositivas, las bacterias que pierden el color violeta oscuro
despus de la decoloracin se clasifica como gramnegativo. Como las bacterias gramnegativas son
incoloras despus del lavado con alcohol, dejan de ser visibles, por ese motivo se aplica el
colorante safranina, que las convierte en rosadas. Los colorantes como la safranina se denominan
colorantes de contraste.
Otra tincin diferencial importante es la tincin de cido-alcohol resistencia, que se fija de modo
firme slo a las bacterias que poseen ceras en las paredes de sus clulas.[] En el procedimiento
de tincin de cido- alcohol resistencia se aplica el colorante rojo carbolfucsina a un extendido
fijado y se calienta suavemente el portaobjetos durante varios minutos. Luego se enfra el
portaobjetos y se lo lava con agua. A continuacin el extendido se trata con cido- alcohol, un
decolorante que elimina el color rojo de las bacterias que no son cido-alcohol resistentes.

FUENTE: Introduccin a la microbiologa
TINCIONES ESPECIALES
Las tinciones especiales se utilizan para colorear y aislar partes especficas de microorganismos,
como endosporas (es una estructura especial, resistente y latente que se forma dentro de una
clula y que protege a una bacteria de las condiciones ambientales adversas) y flagelos, y para
detectar la presencia de cpsulas.
Dentro de este grupo estn las tinciones negativas las cuales se utilizan para demostrar la
presencia de cpsulas, tinciones para colorear endosporas cuando se aplica verde de malaquita
sobre un extendido de clulas bacterianas fijadas con calor, el colorante penetra en el interior de
las endosporas y las tie de verde. Cuando a continuacin se aplica safranina (roja), tie el resto
de las clulas de rojo o rosado.
Y por ltimo las tinciones para colorear flagelos, se usa un mordiente para aumentas los dimetros
de los flagelos hasta que puedan visualizarse por microscopa cuando se tian con carbolfucsina.

BILIOGRAFA:
Tortora G., Funke B. y Case, Introduccin a la micrbiologa, Editorial Panamericana, Buenos Aires,
2007.