QU MI CA ANAL TI CA I I I

CROMATOGRAFIA
GASEOSA
Desarrollo del tema
Introduccin
Las muestras para cromatografa de gases
Principios bsicos
Esquema de un cromatgrafo de gases
Fase mvil
Sistema de inyeccin
Columnas y Fases estacionarias
Detectores
Aplicaciones analticas
Bibliografa

Introduccin: Desarrollo histrico
M. TSWEET (1903): Separacin de mezclas de
pigmentos vegetales en columnas rellenas con
adsorbentes slidos y solventes varios.

ter de
petrleo
CaCO
3
mezcla de pigmentos
pigmentos
separados
1940
1950
1960
CGS rudimentaria
CGL propuesta por Martin y Synge)
Separacin de cidos orgni-
cos por CGL: primer cro-
matgrafo (Martin y James)
Primer equipo comercial
(Griffin & George)
Detector por Densidad de
Gases (Martin y James)
Detector de Ionizacin de
llama (McWillian y Dewar)
Detector por Captura de
Eletrones (Lovelock y Lipsky)
Columnas Capilares (Golay)
Introduccin:
Desarrollo
histrico
Modalidades y Clasificacin
FM = Lquido
Cromatografia
Lquida
FM = Gas
Cromatografia
Gaseosa (CG)
En CG la FE
puede ser:
Slida
Lquida
Cromatografa
Gas-Slido (CGS)
Cromatografa
Gas-Lquido (CGL)
Las muestras
para CG
Qu mezclas pueden
ser separadas por
CG ?
Mezclas cuyos constituyentes sean
VOLTILES
Para que una sustancia pueda ser
arrastrada por um flujo de gas, debe poder
disolverse al menos parcialmente en dicho
gas
DE FORMA GENERAL:
La CG es aplicable para la separacin y el
anlisis de mezclas cuyos componentes
tengan PUNTOS DE EBULLICIN de hasta
300
o
C y que sean trmicamente estables
Principios Bsicos
Separacin de
mezclas por
interaccin
diferencial de
sus
componentes
entre una FASE
ESTACIONARIA
(lquido o
slido) y una
FASE MVIL
(lquido o gas).

Instrumentacin: el
cromatgrafo de gases
1 Depsito de
gases y contro-
ladores de presin
y caudal.
2 - Inyector.
3 - Columna
Cromatogrfica y
horno.
4 - Detector.
5 Amplificador
de la seal.
6 - Registrador.
1
2
3
4
6
5
INFLUENCIA DE LA COMPRESIBILIDAD DE
LA FASE MVIL
Fluj o volumtr i co

Debe exi sti r una ca da de pr esi n a lo lar go de la
columna par a que la fase mvi l fluya


El fluj o msi co (gr amos de gas por uni dad de
ti empo) es constante, por lo tanto


El caudal volumtr i co a lo lar go de la columna
cr ece
min) /
3
F(cm
o
p
i
p >
o
V
i
V <
o
F
i
F <
Se i ntroduce el factor de correcci n de
compresi bi li dad de J ames y Marti n



j se puede relaci onar con parmetros
aerodi nmi cos de la columna
INFLUENCIA DE LA COMPRESIBILIDAD DE
LA FASE MVIL
=
3
2
(

)
2
1
(

)
3
1

=

VOLMENES DE RETENCIN EN
CROMATOGRAFA GASEOSA
Volumen de retenci n

Volumen de retenci n aj ustado


Volumen de retenci n corregi do

Volumen de retenci n neto

)
=

)
=

)

Volumen de r etenci n espec fi co
c
T
273
S

D
K
=
c
T
273
S
w
S
V
D
K
=
c
T
273
S
w
N
V
=
g
V
w
S
= masa de fase estaci onar i a
r
S
= densi dad de la fase estaci onar i a
T
c
= temper atur a de la columna
Fase Mvil: Gas Portador
Requisitos
INERTE No debe reaccionar com la muestra, la fase estacionaria ni
las superficies del instrumento.
PURO Debe estar exento de impurezas que puedan degradar la fase
estacionaria
I mpurezas t pi cas de los gases y sus efectos:
Oxida/hidroliza algunas FE
Son incompatibles com un DCE
H
2
O, O
2
hidrocarburos

Ruido en la seal de un FID
La Fase Mvil en CG NO interacta con la muestra
Slo la lleva a travs de la columna
Se la denomina GAS PORTADOR
Gas Portador
COMPATIBLE CON EL DETECTOR Cada detector demanda
un gas portador especfico para su mejor funcionamiento
Selecci n de Gases en Funci n del Detector :
He , H
2

DCT

FID

N
2
, H
2

DCE

N
2
, Ar + 5% CH
4

1 - Cilindro de Gas
2 - Regulador de Presin
3 - Trampa para eliminar impurezas
4 - Regulador de Lnea
5 - Regulador de Caudal
6 - Medidor de Caudal
Componentes
de una lnea
de gas
controladores
de presin y
caudal
dispositivos
para
purificacin
(trampas)
1
2
3
4
5
6
Sistemas para introduccin de la muestra
Los dispositivos para
inyeccin
(INYECTORES o
VAPORIZADORES)
deben permitir la
introduccin
I NSTANTNEA de
la muestra en la
columna
cromatogrfica
I nyecci n i nstantnea
I nyecci n lenta
t = 0
t = x
t = 0
t = x
Inyector on-column
Convencional
1 - Septum
(silicona)
2 - Entrada de
gas portador
3 Bloque
metlico
calefaccionado
4 - Punta de la
columna
cromatogrfica
1
2
3
4
Parmetros de inyeccin
TEMPERATURA DEL INYECTOR
Debe ser suficientemente elevada como para que la
muestra se vaporice inmediatamente, pero sin
descomponerse
Regla General
T
iny
= 50
o
C por encima de la temperatura de
ebullicin del componente menos voltil
VOLUMEN INYECTADO
Depende del tipo de columna y del estado fsico de
la muestra
COLUMNA
Muestras
Gaseosas
Muestras
L qui das
empaquetada
= 3,2 mm (
1
/
4
)
0,1 ml ... 50 mL 0,2 L ... 20 L
capilar
= 0,25 mm
0,001 ml ... 0,1 mL 0,01 L ... 3 L
Sli dos:
comnmente se di suelven en un
solvente adecuado y se i nyectan en
soluci n
Parmetros de inyeccin
Inyeccin manual de muestras

COLUMNAS
RELLENAS
la fase estacionaria
lquida est
retenida en un
slido inerte
(soporte)
CAPILARES
la fase estacionaria
se fija sobre las
paredes interiores
del capilar

COLUMNAS

COLUMNAS RELLENAS
Dimetro interior entre 2 y 4 mm
Longitud de hasta 2 3 m
Eficiencia de 1000 2000 platos tericos/m
Para muestras poco complejas, 10 componentes.
La columna est rellena de un material slido (soporte), finamente
dividido y homogneo, recubierto por una capa de F. E. lquida.
Enrollada en forma helicoidal, para poder ser instalada en el horno
termostatizado.
COLUMNAS CAPILARES
Dimetro interior < 1 mm
Longitud de 5 50 m.
Eficiencia hasta 4.000 platos tericos/m
Para muestras complejas.
La fase estacionaria se depositada sobre las paredes
interiores del capilar
FASES ESTACIONARIAS
Conceptos Generales
FE
lquida
SUPORTE
Slido
inerte
poroso
Tubo capilar
de material
inerte
Para minimizar la prdida de FE lquida por
volatilizacin, se puede:
Entrecruzada: las
cadenas
polimricas son
qumicamente
ligadas entre s
Qumicamente
ligadas: las cadenas
polimricas se hacen
reaccionar sobre el
soporte
FASE ESTACIONARIA
Baja volatilidad.
Punto de ebullicin debe de ser por lo menos 100C
mayor que la temperatura mxima de la columna.
Estabilidad trmica.
Inercia qumica.
Los valores de factor de capacidad ( k ) y factor de
selectividad () de los analitos deben estar dentro
de los intervalos aconsejados.
FASE ESTACIONARIA
La separacin se debe a los diferentes
kdel analito entre la fase mvil y la
fase estacionaria.
Tiene que haber un cierto grado de
solubilidad de los compuestos con la
fase estacionaria.
Por ello, una caracterstica muy
importante de la fase estacionaria es la
POLARIDAD.
Los solutos se retienen ms en las
fases lquidas de polaridad parecida.
Cuatro grandes grupos estructurales:
PARAFINAS No polares; alta inercia qumica; son las menos
usadas. Principales: escualano (C
30
H
62
), Apiezon (grasas
para vaco).
POLISTERES steres de dialcoholes con dicidos. Polares;
altamente sensibles a la humedad y la oxidacin.
Principales: DEGS, EGA, EGS.
STERES METLICOS DE CIDOS
GRASOS
Columna:5%DEGS-PS s/ Supelcoport
100/120 mesh; 6 x 1/8
T
COL
: 200
o
C (isotrmico)
Gas Portador: N
2
@ 20 ml.min
-1
Detector: FID
Muestra: 0,5 L de solucin en cloroformo
conteniendo 0,5 g de cada ster
Familias de FE Lquidas
SILICONAS (polisiloxanos) Las FE ms empleadas en CG. Cubren un amplio
rango de polaridades y tienen propriedades qumicas diversas.
Si
CH
3
H
3
C
CH
3
O Si
R
1
R
2
O Si
CH
3
CH
3
CH
3
n
R
1
, R
2
= cualquier
radical orgnico
- Enlaces Si -O altamente estables = elevada estabi li dad trmi ca y qu mi ca
de las FE.
- Si li conas se fabri can en gran escala para di versas apli caci ones =
mi ni mi zaci n del costo del producto + tecnolog a de producci n y
puri fi caci n bi en estudi ada y conoci da.
- Prcti camente cualqui er radi cal orgni co o i norgni co puede li garse
a la cadena poli mri ca = FE aj ustables a separaci ones espec fi cas +
faci li dad de i nmovi li zaci n por entrecruzami ento y li gazn qu mi ca a
soportes
Familias de FE Lquidas
FE deri vadas de poli di meti lsi loxano (PDMS) por susti tuci n de
CH
3
por radi cales orgni cos, en orden creci ente de polari dad:
Diferencias entre FE de composicin similar provenientes
de proveedores diferentes: pureza, viscosidad
Familias de FE Lquidas
Sustituyentes Nombres comerciales Observaciones
------ ----- SE-30, OV-1, OV-101, SP-
2100
Las ms apolares de la
serie. Poco selectivas
Carboranos ----- Dexsil 300GC Similares PDMS. Estables
hasta > 400C
Fenil 5% ----- SE-52, OV-5, OV-73 Poco polar
Cianopropil
7%
Fenil 7% OV-1701, SPB-7, CP-Sil Moderadamente polar
Cianopropil
50%
Fenil 50% OV-255, SP-2300, CP Polar. Retiene dadores de
electrones.
Separaci n de pi ri di nas FE = 100 % ci anopropi lsi li cona
1 - piridina
2 - 2-metilpiridina
3 - 2,6-dimetilpiridina
4 - 2-etilpiridina
5 - 3-metilpiridina
6 - 4-metilpiridina
3 min
Columna: CP-Sil 43CB (10 m x 0,10
mm x 0,2 m)
T
COL
:110
o
C (isotrmico)
Gas Portador: N
2
@ 16 cm.min
-1

Detector: FID
Muestra: 0,1L de solucin 1-2% de
las piridinas en 3-metilpiridina
Familias de FE Lquidas
Separaci n de fenoles - FE = feni lmeti lsi li conas
50% Ph
50% Me
5% Ph
95% Me
Familias de FE Lquidas
FASE ESTACIONARIA: ORDEN DE
ELUCIN
En una fase
lquida
cualquiera, una
serie homloga
eluye segn
orden creciente
de NMERO DE
TOMOS DE
CARBONO.
Si la fase es NO
POLAR, los solutos no
polares eluyen segn
orden creciente de
punto de ebullicin.
En una fase
POLAR se
retendrn ms
los solutos
polares que
los no polares
a igualdad de
puntos de
ebullicin.

SOPORTE SLIDO
Carctersticas
Elevada
superficie
especfica
(m2/g)
Superficie
homognea
Estabilidad
trmica
Tipos de
soporte
Silceo
(tierras de
diatomeas)
Sintticos
(vidrio,
tefln).
Ladrillo
refractario
SOPORTE SLIDO: Tierra de diatomeas
Esqueletos fsiles
de algas
microscpicas
(SiO
2
+ xidos
metlicos)
Chromosorb
Anachrom
Supelcoport
...
Fusin com
NaOH
Lavado cido
secado
calcinacin
silanizacin
Etapas del anlisis cromatogrfico
1. Eleccin de la columna y fase estacionaria
2. Ajuste las temperaturas.
3. Ajuste del caudal de gas portador.
4. Se inyecta la muestra (1 l cuando son lquidas y 1
ml si son gaseosas).
5. Se vaporizan y son arrastradas hasta la columna.
6. Los componentes se fijan al inicio de la columna.
7. Se desplazan por la columna a velocidad diferente
8. Los solutos que salen de la columna, pasan al
detector y se obtiene el CROMATOGRAMA .
Parmetros
Tipo de gas
portador y
caudal
Columna y
dimensiones
Fase
estacionaria
Tipo de
detector
Temperaturas
Bloque de
inyeccin
Columna Detector
TEMPERATURA DE LA COLUMNA
En muestras de puntos de ebullicin parecidos la
temperatura ptima es ligeramente superior al punto de
ebullicin medio de los componentes de la muestra.
Con puntos de ebullicin muy diferentes se emplea una
programacin de temperatura, que aumenta segn
avanza la separacin.
El aumento de la temperatura reduce los tiempos de
retencin.
Los componentes ms
voltiles son separados
Los componentes menos
voltiles tardan en
eluir, saliendo como
picos mal definidos
Los componentes ms
voltiles no son
separados.
Los componentes menos
voltiles eluyen ms
rpidamente
TEMPERATURA DE LA COLUMNA
Programacin de temperatura
T
FIN
Temperatura Final
t
INI
Tiempo Isotrmico Inicial
t
FIN
Tiempo Final del
Programa
R Velocidad de calentamiento
Se consiguen buenas
separaciones de los
componentes de la
muestra en menor
tiempo


DETECTOR
Mide la variacin
de alguna
propiedad fsica
del gas portador
originada por la
elucin de los
compuestos.
Su temperatura
ha de ser mayor o
igual que la de
columna para
evitar la
condensacin de
algn compuesto.
Conectado a un
registro grfico
de la seal.
Detectores
CARACTERSTICAS
Alta sensibilidad
(relacin entre
respuesta del
detector y la
magnitud fsica
detectada)
Buena
estabilidad.
Respuesta
continua y
reproducible a
los cambios de
concentracin
del compuesto
Respuesta
adecuada al
mayor nmero
posible de
muestras
Tiempo de
respuesta corto
Reactividad nula
DETECTORES:
Definiciones Generales
Di sposi ti vos
que generan
una seal
elctri ca
proporci onal
a la canti dad
de anali to
elu do
4 utilizados en la mayor parte de las
aplicaciones
TCD
Detector de
Condutividad
Trmica
FID
Detector de
Ionizacin
en Llama
ECD
Detector de
Captura
Electrnica
MS
Detector Es-
pectromtrico
de Masas
DETECTORES: Clasificacin
UNIVERSALES
Generan seal para
cualquier sustancia
eluida
SELECTIVOS
Detectan
solamente
sustancias con
determinada
propiedad
fisicoqumica
ESPECFICOS
Detectan sustancias que
poseen determinado
elemento o grupo
funcional en sus
estructuras
DE TECTOR DE CONDUCTIVIDAD TRMICA
(TCD)
Se basa en los cambios en la conductividad trmica de la
corriente de gas portador debido a la presencia de molculas
del analito.
Responde a la concentracin del soluto en el gas portador
No es destructivo.
La conductividad trmica del gas portador ha de ser elevada
(He, H2) 6 a 10 veces mayor que la mayora de los compuestos
orgnicos.
Sencillez
Amplio rango lineal
Respuesta a todo tipo de compuestos
No destructivo
Baja sensibilidad (10 10
-8
g soluto/ml) que impide su empleo con
columnas capilares, debido al pequeo tamao de las muestras.

DE TECTOR DE CONDUCTIVIDAD TRMICA
(TCD)
PRINCIPIO
Variacin de la conductividad trmica del gas
cuando eluye un analito

DE TECTOR DE CONDUCTIVIDAD TRMICA
(TCD)
La canti dad de tr ansfer enci a de calor
entr e un cuer po cali ente y un cuer po fr i o
depende de la conduti vi dad tr mi ca del
gas en el espaci o que separ a los cuer pos
Si la conduti vi dad tr mi ca del gas
di smi nuye, la canti dad de calor
tr ansfer i do tambi n di smi nuye y el
cuer po cali ente se enfr a.
DE TECTOR DE CONDUCTIVIDAD TRMICA
(TCD)
Celda del TCD:
1
2
3
5
4
i
1 Bloque metlico (acero)
2 Entrada de gas portador
3 Salida de gas portador
4 Filamento metlico (aleacin W-Re)
calefaccionado
5 Alimentacin de corriente elctrica
para calentar el filamento
DE TECTOR DE CONDUCTIVIDAD TRMICA
(TCD)
Los filamentos del TCD estn montados sobre un puente de
Wheatstone que transforma la diferencia de resistencia
cuando la elucin de la muestra produce una diferencia de
voltaje

TCD: Aplicaciones
Separaci n y cuanti fi caci n de compuestos que no generan
seal em otros detectores (gases nobles, gases fi j os)
Columna: CP Sil 5CB (50 m x 0.32 m
x 5 m)
Gas Portador: He @ 3 ml.min
-1
T
COL
: 40C
1 N
2
2 CH
4
3 CO
2
4 n-C
2

5 NH
3
6 n-C
3
7 i-C
4
8 n-C
4

Separacin de Gases Fijos e
Hidrocarburos

DETECTOR DE IONIZACIN DE LLAMA
(FID)
Es uno de los ms empleados.
Forma una llama que quema y ioniza los
compuestos separados en la columna.
Insensible a grupos funcionales como C=O, OH,
NH que originan en la llama pocos iones.
Elevada sensibilidad (10
-13
g soluto/mL)
Destructivo
FI D: PRI NCI PI O DE FUNCI ONAMI ENTO
Formaci n de i ones cuando un compuesto se
quema en una llama de hi drgeno y ox geno
El efluente de la columna se
mezcla con H2 y O2 y se
quema. Como en una llama
de H2+ O2 no exi sten i ones,
no ci rcula corri ente
elctri ca.
Cuando un compuesto
orgni co eluye, l tambi n
se quema. Como en su
combusti n se forman
i ones, la llama pasa a
conduci r la corri ente
elctri ca
FI D: SELECTI VI DAD
SELECTI VO
Para sustanci as
que conti enen
uni ones C-H en
su estructura
qu mi ca.
UNIVERSAL
Virtualmente
todas las
sustancias
analizables por
CG son orgnicas
Compuestos que
NO producen
respuesta
Gases nobles, H
2
,
O
2
, N
2
, CO, CO
2
,
CS
2
, CCl
4
,
perhalogenados,
NH
3
, H
2
O,
HCOOH, HCHO

DETECTOR DE CAPTURA ELECTRNICA
(ECD)
Se basa en la captura de los electrones libres
procedentes de la ionizacin del gas portador,
disminuyendo la intensidad de corriente.
El ms sensible (10
-14
g soluto/mL).
No destructivo.
Su aplicacin principal es para compuestos
organoclorados (pesticidas, herbicidas)
herbicidas)
ECD: PRINCIPIO DE FUNCIONAMIENTO
Supresin de un flujo de electrones lentos causada
por la absorcin de stos por especies electroflicas
Un flujo continuo de
electrones lentos se establece
entre un nodo (fuente
radioactiva -emisora) y un
ctodo
Al pasar una sustancia
electroflica algunos
electrones son absorbidos,
disminuyendo la corriente
elctrica.
APLICACIONES DEL ECD
PESTICIDAS
1 tetracloro-m-xileno
2 - BHC
3 Lindano
4 Heptachlor
5 Endosulfan
6 Dieldrin
7 Endrin
8 DDD
9 DDT
10 Metoxychlor
10 decaclorobifenilo
~250 fg de cada
anali to
EL DCE ES EL DETECTOR DE ELECCIN PARA ANLISIS DE
TRAZAS DE ORGANOHALOGENADOS Y SIMILARES


ACOPLAMIENTO CON OTRAS TCNICAS
Proporciona una herramienta muy potente en la
identificacin de los componentes de una mezcla
compleja
La tendencia actual es utilizar como detectores
selectivos, tcnicas instrumentales como
Espectrometra de Masas y Espectroscopa Infrarroja
Todo ello ayudado de una computadora para el
almacenamiento de los datos espectrales, y posterior
presentacin como espectros y cromatogramas
ANLISIS CUALITATIVO

Conceptos Generales
Identificacin individual de las especies
presentes en la muestra
Determinacin de la identidad de la
muestra como un todo
Apli caci ones
Cuali tati vas de
la
cromatograf a
Fuentes de I nformaci ones Cuali tati vas
RETENCIN Uso de datos de retencin de un analito para su
identificacin
DETECCIN Empleo de detectores que proveen informacin
estructural sobre las sustancias eluidas
ANLISIS CUALITATIVO
Datos de Retencin
Naturaleza de la fase estacionaria y su %
en el relleno
Longitud de la columna
Naturaleza del gas portador y su caudal
Temperatura de la columna
Tamao de la muestra
El tiempo de
retencin, tR es
funcin de:
A condi ci ones experi mentales constantes,
el t
R
y el V
R
son caracter sti cos de cada
sustanci a
ANLISIS CUALITATIVO
Tiempos de Retencin
t
R
= f
I nteracci ones anali to/ FE
Presi n de vapor del anali to
Condi ci ones de operaci n (T
COL
, F
C
...)
Una vez fi j adas las condi ci ones operatori as, el ti empo de
retenci n aj ustado de un anali to es una constante
La i denti fi caci n por t
R
es muy poco confi able, debi do a:
Dependencia con F
C
y T
COL
Variaciones en estas condiciones
afectan sensiblemente los t
R

VARIACIN DE
1% EN t
R

T
COL
= 0,1%
F
C
= 1%
Sobrecarga de la columna Un aumento excesivo en la masa de
material eluido deforma el pico cromatogrfico y altera su t
R

Se comparan datos sobre la misma columna
Se miden datos de retencin relativa


D(std)
K
D(i)
K
=
R(std)
t
R(i)
t
=
std i,
r
i= sustancia incgnita
std= sustancia standard
r
i,std
slo depende de la temperatura de la columna y de la fase
estacionaria
Recopilacin de datos de retencin relativa Compilation of Gas
Chromatographic Data , ASTM Data Series Publication
ANLISIS CUALITATIVO
Datos de Retencin Relativa
MUESTRA
PATRN
Comparacin de
los
cromatogramas de
la muestra y de
una solucin
patrn del analito
supuesto
Los datos de t
R
son adecuados para identificaciones simples, por ejemplo,
controles de calidad
En ese caso, ya se sabe qu componentes tiene la mezcla y generalmente
hay pocos componentes presentes
ANLISIS CUALITATIVO
Tiempos de Retencin
Comparacin de t
R
usando dopaje de la muestra con el analito
supuesto: aumenta la confiabilidad de identificacin.
En una muestra compleja la
incerteza en la medida de los tR
puede llevar a una identificacin
errnea
La comparacin con el
cromatograma de la muestra
dopada permite una
identificacin ms confiable de
la sustancia desconocida
OTRAS APROXIMACIONES AL ANLISIS
CUALITATIVO
Las series homlogas presentan caractersticas retentivas que
facilitan la identificacin de las sustancias
Graficando log t
R
vs. nmero de tomos de C (sobre una dada
columna y a una temperatura dada) se obtiene una recta
La ubi caci n sobre una recta dada, permi te determi nar a qu
fami li a pertenece
La ubi caci n sobre la recta permi te deci di r qu componente de la
seri e es

0
1
2
3
4
5
6
7
4 5 6 7 8 9 10
N tomos de C
l
o
g

t

R
OTRAS APROXIMACIONES AL ANLISIS
CUALITATIVO: Grficos de Retencin
FUNDAMENTO Los t
R
(en condi ci ones i sotr mi cas) par a una ser i e homloga de
compuestos dependen logar tmi camente del nmer o de tomos de car bono de la
cadena.
Separacin isotrmica de
una mezcla de n-alcanos (n-
C
4
, n-C
5
, ... n-C
16
)
Grfico de log(t
R
) en funcin
del nmero de tomos de
carbono del analito n
C
es
LINEAL
ANLISIS CUALITATIVO
ndice de Retencin de Kovts
El ndi ce de retenci n de Kovts I para un anali to vi ene defi ni do por:
t
R
(A) Tiempo de retencin ajustado del
analito A
t
R
(N) Tiempo de retencin ajustado del
n-alcano con N carbonos
t
R
(n) Tiempo de retencin ajustado del
n-alcano con n carbonos (n = N + 1)
Ej .: un anali to con I = 874 tendr un ti empo de r etenci n aj ustado
equi valente al de un n-alcano hi potti co con 8,74 tomos de car bono
Puede calcularse con
la siguiente expresin

ANLISIS CUALITATIVO
ndice de Retencin de Kovts
= 100 +100
log
()
log
()
log
()
log
()

ANLISIS CUALITATIVO
ndice de Retencin de Kovts
Para las n-parafi nas, I es 100 veces el nmero de tomos de C en
cualqui er columna y a cualqui er temperatura
t
R,
columna 1
t
R,
columna 2
h
e
p
t
a
n
o

t
o
l
u
e
n
o

h
e
x
a
n
o

p
e
n
t
a
n
o

Fi j ando 2 fases se pueden establecer i ncrementos i ndi vi duales
correspondi entes a ci ertos grupos funci onales (Kovts)
Rohrschnei der : I consta de contri buci ones de 2 ti pos:
Dependi ente del soluto y que
no var a al cambi ar de FE
Espec fi co de la FE y que
puede calcularse a parti r
de un grupo bi en
selecci onado de solutos
McReynolds: cambi las sustanci as de prueba que empleaba
Rohrschnei der
Variacin del ndice al pasar de una fase
estacionaria no polar a una polar
Exper i mentalmente se encuentr a que I puede
expr esar se como:
donde:
j = fase estaci onari a
i = soluto
SQ = escualano (C
30
H
62
), fase estaci onari a no polar, en base
a la cual se construye la escala
a
i
, b
i
, c
i
, d
i
, e
i
= parmetros caracter sti cos del soluto i ,
i ndependi entes de la fase estaci onari a
x
j
, y
j
,z
j
, u
j
, s
j
= parmetros caracter sti cos de la fase
estaci onari a j
j
s
i
e +
j
u
i
d +
j
z
i
c +
j
y
i
b +
j
x
i
=a
SQ
i
I
j
i
I =
j
i
I
Variacin del ndice al pasar de una fase
estacionaria no polar a una polar
Sobr e la fase estaci onar i a j y sobr e escualano se mi den
los ndi ces de estos solutos
Grupo Sustancia Smbolo
Aromticos,
olefnicos
benceno x
Alcoholes,
fenoles, cidos
1-butanol y
Cetonas, teres,
steres,
aldehdos
Metil-n-propilcetona


z
Nitrocompuestos,
nitrilos
nitropropano u
Bases,
heterociclos
aromticos
piridina s

ANLISIS CUALITATIVO
ndices de McReynolds
Se definen las siguientes relaciones:
ANLISIS CUALITATIVO
ndices de McReynolds
Se usa par a car acter i zar fases estaci onar i as
Muy ti l con el fi n de deci di r si dos fases
estaci onar i as tendr n un compor tami ento separ ati vo
equi valente o cul ser la mej or fase par a un
deter mi nado gr upo funci onal
ANLISIS CUALITATIVO
ndices de McReynolds
Fase
estacionaria
Tmxima x y z u s
Escualano 150 0 0 0 0 0
SE-30 350 15 53 44 64 41
OV-7 350 69 113 111 171 128
Carbowax
20M
250 322 536 368 572 59

Mtodos de detecci n que proveen i nformaci ones cuali tati vas
sobre los anali tos elu dos:
Cromatografa Gaseosa con Deteccin Espectromtrica por Absorcin
Infra-Rojo (CG-IR)
Cromatografa Gaseosa con Deteccin Espectromtrica de Masas (CG-
EM)
Cromatografa Gaseosa con Deteccin Espectromtrica por Emisin
Atmica (CG-EA)
ANLISIS CUALITATIVO
Mtodos de Deteccin Cualitativos
Combinacin de mtodos cromatogrficos y espectroscpicos



Tcni cas acopladas
ANLISIS CUALITATIVO
Mtodos de Deteccin Cualitativos
El cromatgrafo separa la muestra
en sus componentes

El mtodo espectrocpico brinda
informacin cualitativa de cada uno
de los componentes
La combinacin de los datos en tres dimensiones
brinda informacin cuali-cuantitativa
ANLISIS CUALITATIVO
Mtodos de Deteccin Cualitativos
r
e
s
p
u
e
s
t
a

tiempo
PRINCIPIO La muestra es fragmentada y i oni zada segn un
patrn caracter sti co de la especi e qu mi ca.
1 Molculas de la muestra
son bombardeadas por
electrones (electron i mpact
= EI) o iones (chemi cal
i oni zati on = CI):
ABCDE + e
-
ABCDE
.
+
+ 2 e
-
2 El in formado se fragmenta:
ABCDE
.
+
AB
.
+ CDE
+
ABCDE
.
+
AB
+
+ CDE
.
ABCDE
.
+
A
+
+ BCDE
.
ANLISIS CUALITATIVO
Espectrometra de Masas
3 Los fragmentos inicos formados son separados magnticamente de
acuerdo con sus masas moleculares y contados:
A
B
U
N
D
A
N
C
I
A

MASA / CARGA
El gr fi co del nmer o de
i ones for mados en funci n
de la r elaci n Masa / Car ga
de los i ones es el
ESPECTRO DE MASAS del
anali to
ANLISIS CUALITATIVO
Espectrometra de Masas
ANLISIS CUALITATIVO
Espectro de Masas
20
40
60 80
100
120
0
m / Z
I nterfase cromatgrafo - espectrmetro:
CG EM
Vaco
Separador Molecular
El gas portador liviano (He)
difunde ms rpidamente
que el analito y tiende a ser
drenado por el vaco.
Cmara
de Ionizacin
Columna
Capilar
Interfase Capilar Directa
Con columnas capilares la
baja cantidad de gas portador
puede ser drenada por el
sistema de vaco.
ACOPLAMIENTO GC-EM
1
2
3
4
1 Cmara de Ionizacin Los electrones generados por un filamento
bombardean la muestra. Los fragmentos ionizados (carga +1) son repelidos por
el electrodo positivo y conducidos al separador magntico.
2 Salida de Vaco Todo el interior del EM debe estar con alto vaco (natm).
3 Separador Magntico Por accin del campo magntico slo algunos
iones con determinada relacin Masa/Carga pueden atravesar esta zona del
equipo.
4 Detector Una vlvula fotomultiplicadora o un fotodiodo genera una seal
elctrica proporcional al nmero de iones que inciden sobre este elemento.
ANLISIS CUALITATIVO
Espectrmetro de Masas
Los espectros de masas completos son colectados y
archivados a intervalos regulares de tiempo
La generaci n del cromatograma a parti r de los espectros
puede hacerse segn:
CROMATOGRAMA DE IONES TOTALES (TIC = Total Ion
Chromatogram)
Para cada espectro, el nmero total de i ones detectados en el rango
de masas barri do es sumado y grafi cado en funci n del ti empo,
generando el cromatograma.
MONITOREO DE UN ION SELECCIONADO (SIM = Single
Ion Monitoring)
Se selecci ona un fragmento resultante de la especi e de i nters. Se
genera el cromatograma grafi cando el nmero de i ones con la masa
de ese fragmento detectados en funci n del ti empo.
TIC
Universal

SIM
Selectivo
Mayor Sensibilidad
CG-EM: GENERACIN DEL
CROMATOGRAMA
Ej emplo de una muestra anali zada por CG-EM
TIC
Aparecen los picos
correspondientes a todas
las sustancias eludas
SIM (m/z = 149)
Cromatograma construdo a
partir de los mismos datos
anteriores, pero usando slo
fragmentos con masa = 149
CG-EM: GENERACIN DEL
CROMATOGRAMA
TIEMPO
C
U
E
N
T
A
S

MASA / CARGA
C
U
E
N
T
A
S

1 Se regi stra el espectro de masa que corresponde a un anali to
(usualmente se selecci ona el mxi mo).
2 I nterpretaci n manual del espectro y/ o comparaci n
automti ca con la bi bli oteca de espectros del equi po.
ANLISIS CUALITATIVO
Identificacin de Analitos
Bsqueda automti ca en la bi bli oteca de espectros: comparaci n
estad sti ca ( Probability Based Matching )
BIBLIOTECA DE
ESPECTROS
ESPECTRO
DESCONOCIDO
PBM
Lista com posibles
candidatos + porcentaje
de confiabilidad
PBM de un anali to
desconoci do (1-
dodeceno)
ANLISIS CUALITATIVO
Identificacin de Analitos
# NOMBRE FRM. %
1 1-dodeceno C
12
H
24
99
2 1-dodecanol C
12
H
26
O 91
3 ciclododecano C
12
H
24
91
4 2-dodeceno C
12
H
24
66
5 1-undeceno C
11
H
22
35
6 8-metil-3-undeceno C
12
H
24
32

LIMITACIONES:
La identificacin es poco confiable en el caso de
espectros muy simples
Est limitada por el tamao de la base de datos
(NIST = 66.000 espectros)
Existen diferencias entre los espectros generados por
diversos EM
ANLISIS CUALITATIVO
Identificacin de Analitos