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Fisiologa vegetal

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Ilustracin. Hoja fotosintetizadora: una fbrica integral de carbono y oxgeno. Micrografa
al microscopio de barrido de una seccin transversal de Euphorbi a, X650 (Fotografa original,
cortesa del Dr. Graham Walker, DSIR, Nueva Zelanda).
R.G.S. Bidwell,
4 ,< , ; .
Queen's University. Kingston. Ontario. CanadB
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\
Fisiologa vegetar
PRIMERA EDlCl6N EN ESPAOL
FlGT EDITOR, s.R.
Ttulo del original en ingls:
Plant Physiology
Copyright @ 1979 (2a. edicibn j R.(;.S. Bitlwell
Copyright @ 1979 (2a. edicionj Macmillan Publishing Co. , Inc
Primera reimpresin 1990
Segunda reimpresin 1995
@ A.G.T. Editor, S.A.
Progreso 202 - Planta Alta
Mxico, D.F.
Traduccibn: Guodal upe Gwoni rno (ano y Cano. Bilogo ( UNANI ,), Maestro en Botnica
Agricola ( UACH).
Profesor de planta a nivel de posgrado de: Parasitologa y Botnica (1.1).
Manuc,/ Rolas Gu,.ci dueri as Bilogo (I J NAM), M. en C. (Universidad de Min-
nesota).
Profesor de planta a nivel de posgrado de: Fisiologa Vegetal, Herbicidas y
Fitorreguladores (I TM) y ex director del Depto. de Biologa.
Reservados todos 10s derechos.
Ninguna parte de este libro puede ser re;broducida, almacenada en un sistema de informtica
o transmitido de cualquier forma o por ccalquier medio electr6nico, mecnico, de fotocopia-
do, de grabacibn u otrosmtodos, sin previo y expreso permiso del propietario del Copyright.
Impreso y hecho en Mxico
Printed and made in Mexico
ISBN: 968-463-0 15-8
Dedi co este l i bro a mi esposa Shi rl ey M.R. Bidwell,
sin cuyo est mul o, ayuda y
paci enci a reo hubi era podi do escribirlo.
R. G.S.B.
Prefacio
Este libro es un texto introductorio para estudiantes de fisiologa vegetal o de
botnica experimental a nivel profesional. Presenta los conceptos actuales sobre
el funcionamiento de la planta, desembaraznddos (hasta donde es posible) de
complejos procesos metablicos o mecanismos bioqumicos. gstos se ven en deta-
lle, separadamente, en los primeros captulos (Seccin 11) y se retoman en forma
simplificada, o por referencias, conforme se requiera, posteriormente. Siempre que
el material cubierto en los pargrafos o captulos sea tan complejo o controverti-
ble como para exigir una revisin, se ofrece un resumen de l. Esta segunda edi-
cin * ha sido reescrita en buena parte y puesta al d a; suprimindose cierto material
irrelevante, y se han clasificado y revisado un gran nmero de tpicos actualizn-
dolos conforme a los modernos descubrimientos en fisiologa vegetal.
He tratado de presentar el material en un estilo interesante para que el tex-
t o sea fcil y se obtenga una visin general de /as grandes reas de la fisiologa
vegetal, El campo integro de la fisiologa vegetal, junto con las necesidades bsicas
de bioqumica, se tratan con la profundidad suficiente a fin de que el libro sea
til tanto como un fundamento general as com.0 texto de referencia para estu-
diantes de posgrado. Puede utilizarse en cursos co,rtos de fisiologa vegetal, botni-
ca experimental, bioqumica vegetal o desarrollo del vegetal, y el material puede
ser adaptado conforme lo deseen los profesores.
La Seccin I es primordialmente una revisin, pero los estudiantes deben
estar seguros de su familiaridad con los fundamentos esenciales antes de seguir
adelante. Tambin sirve como una referencia con.cisa sobre la clasificacin y des-
cripcin de las sustancias quimicobiolgicas, de la estructura de la planta y de la
clula, de las relaciones con el agua y otros tpicos relacionados. La Seccin 11
cubre los procesos bsicos del metabolismo vegetal. La Seccin 111 est dedicada
a la nutricin y metabolismo del organismo vegetal integral y sus relaciones con
las fuentes de alimento internas y externas. Los procesos del desarrollo y deter-
minismo de la planta se resumen en la Seccin .IV y la fisiologa de organismos
especializados, de situaciones especiales y de interrelaciones de las plantas, se
describen en las Secciones V y VI.
*El autor se refiere a l a segunda edicin en ingls (N. del Eld.).
Este libro presenta tres divergencias con respecto a la estructura tradicional
de los textos de fisiologa vegetal. Primero, he incluido (Seccin 111, Cap. 15)
una visin de conjunto de la nutricin de las plantas por el carbono que coloca
los procesos integrales de fotosntesis, fotorrespiracin, respiracin oscura y
metabolismo del nitrgeno asociado, bajo una misma perspectiva: la de la propia
planta. Puede ser ledo y entendido por estudiantes que no se hayan empa-
pado de los detalles del metabolismo presentados en la Seccin II. La segunda
novedad est en la Seccin IV, que basa la descripcin del desarrollo del vegetal
en el propio ciclo de vida de la planta ms que en las sustancias qumicas y meca-
nismos que lo controlan. El punto de vista mecanicista se desarrolla en el Captu-
lo 23 en forma de resumen de la Seccin IV, La tercera divergencia es la inclusin,
en las Secciones V y VI, de discusiones sobre h fisiologa de organismos especiales
importantes y de asociaciones, tales como algas, patgenos, simbiontes, y los fac-
tores que afectan la distribucin de los vegetales. La plantas se vuelven cada d a
ms importantes para el hombre y sus relaciones, en particular cuando dependen
de factores fisiolgicos, son parte importante del estudio de la fisiologa vegetal.
En un texto con el nivel del presente es imposible documentar todos los
conceptos y los hechos que deben presentarse. Por otra parte, una lista de hechos,
aunque se liguen por una narracin aceptable, no es suficiente para un estudio
efectivo. Por lo tanto, he provisto apoyos experimentales describiendo tcnicas y
experimentos reales en relacin con algunas de las evidencias ms importantes que
se presentan. Espero que esto haga al texto interesante y legible y, al mismo tiempo,
estimule el inters del estudiante en la base experimental de la fisiologa vegetal.
No he usado referencias en el texlo. Cada captulo est seguido de una lista
bibliogrfica que incluye monografas, artculos y libros, ya que esto me parece
ms valioso que cualquier lista de referencias que pudiera dar. En el texto se men-
cionan varios cientficos prominentes relacionados con hechos o conceptos espe-
cficos. He enfatizado la importancia de investigar lecturas estimulantes en publi-
caciones tales como el Treatise on Plant Physiology de F.C. Steward y los Annual
Reviews of Plant Physiology. Estos y otros artculos recientes proveern una exce-
lente fuente de material de discusin en las clases o en seminarios.
Escribir un libro de fisiologa vegetal es una tarea considerable. Ningn
fitofisilogo puede esperar conocer todos los tpicos, as que he tomado muy
en cuenta las sugestiones y crticas de mis colegas y de los estudiantes para con-
servar el texto tan confiable como es posible. Deseo reconocer la ayuda de varios
revisores que leyeron el manuscrito de este libro, por cuyo trabajo estoy en deuda
con ellos, En particular soy dcvdor de A. T. Jagendorf, W. T. Jackson e I. A. Tamas
que revisaron exhaustivamente la edicin precedente. Muchas de las mejoras y
correcciones se deben a su crtica detallada. Por ltimo, por supuesto, la responsa-
bilidad por lo que se ha incluido y lo que se ha omitido, es ma.
El producir un libro de texto es tambin un gran trabajo. Estoy muy agrade-
cido a la Sra. Judy Bollen por mecanografiar parte del manuscrito y por su ayuda
en organizar el material para las ilustraciones. Tambin deseo expresar mi grati-
tud a los miembros de la editorial Macmillan Publishing Co., Inc., por su asistencia
y aliento, y particularmente a Woody Chapman y Pat Larson cuya ayuda y apoyo
fueron indispensables durante la escritura y produccin de este libro.
R.G.S. Bidwell
Sumario
SECCIN I
INTRODUCCIN Y GENERALIDADES
Captulos
1. Introduccin 3
2. Fundamentos de qumica 9
3. La clula 45
4. Estructura y crecimiento de plantas superiores comunes 75
5. Metabolismo energtico
6. Respiracin
7. Fotosntesis
8. Metabolismo del nitrgeno
9. Polmeros y grandes molculas
SECCIN 11
METABOLISMO VEGETAL
95
117
157
207
245
10. El suelo y la nutricin mineral
11. Absorcin y movimiento del agua
12. Absorcin y transferencia de solutos
13. Transporte
14. La hoja y la atmsfera
15. Nutricin por carbono - Una sntesis
SECCIN 111
SUELO, AGUA Y AIRE: LA NUTRICIN
DE LAS PLANTAS
265
293
309
327
349
375
16.
17.
18.
19.
20.
21.
22.
23.
SECCI ~N IV
LA PLANTA EN DESARROLLO - EL FUNCIONAMIENTO
DETERMINISTA DEL VEGETAL
Interpretacin del crecimento y desarrollo
Reproduccin sexual en las plantas superiores
Patrones de desarrollo
Organizacin en el espacio
Organizacin en el tiempo
Modelos de nutricin durante el desarrollo
Letargo, senescencia y muerte
Accin de las hormonas y reguladores del crecimiento
409
439
459
483
507
549
569
599
24. Fisiologa de los rboles
25. Fisiologa de algas marinas
26. Parsitos y enfermedad
27. Simbiosis
SECCI ~N v
FISIOLOGA DE ORGANISMOS ESPECIALES
629
641
657
673
SECCIN VI
FISIOLOGfA Y DISTRIBUCI6N DE LAS
COMUNIDADES VEGETALES
28. Fisiologa de las plantas bajo tensin 687
29. Factores fisiolgicos en la distribucin de las plantas 703
30. Las plantas y el hombre 723
fndice de autores 747
fndice de nombres de plantas 755
fndice temtico 762
Contenido general
SECCI ~N I
INTRODUCCIN Y GENERALIDADES
Capitulo 1 INTRODUCCI~N 3
La fisiologa vegetal 3
Las plantas y los animales 3
Caractersticas de las plantas y
de la vida vegetal que conducen
a la fisiologa especializada 5
Evolucin 6
La botnica aplicada y la
economa 6
Lecturas adicionales 8
Captulo 2 FUNDAMENTOS DE
9 -QUMICA
Soluciones
Soluciones de gas
Concentraciones
cidos y bases
Amortiguadores
Coloides
Enlaces qumicos
inicos
Enlaces electrovalentes o
Enlaces covalentes
Enlaces de hidrgeno
Fuerzas de atraccin
dbiles
Oxidacin y reduccin
Algunos compuestos orgnicos
Carbohidratos
Estereoismeros
9
10
I 1
12
13
14
16
16
1 7
18
18
18
19
25
26
Lactonas
Disacridos y polisacridos
Alcoholes azcares, cidos
ur6nicos y cidos azcares
Aminocidos, pptidos y
protenas
cidos nuc'leicos
Lecturas: adicionales
Capitulo 3 LA CBLULA
La teora celular
La clula y sus partes
Pared celular
Membranas
Ncleo
Retculo endoplsmico
Aparato de Golgi y
dictiosomas
Ribosomas
Mitocon.drias
Plastidios
Glioxisomas y peroxisomas
Otras estructuras
subcelulares
La vacuola
El agua y las clulas
Potencial de agua
Difusin
Membranas diferencialmente
smosis:
Potencial osmtico y
potencial de presin
Medicin de $n
Potencial de agua en las
permetables
clulas:
27
30
30
34
40
44
45
45
46
47
47
52
56
57
57
59
59
61
61
62
63
63
64
65
65
65
67
68
Movimiento de agua entre
clulas
Imbibicin
El mtodo antiguo para
explicar la smosis y el
movimiento del agua
Crecimiento de las clulas
Lecturas adicionales
Captulo 4 ESTRUCTURA Y
CRECIMIENTO DE
PLANTAS SUPERIORES
COMUNES
Germinacin
El tallo
Races
Estructura de la hoja
Flores y frutos
Meristemos: patrones de
crecimiento
Lecturas adicionales
70
71
71
72
73
75
78
83
86
87
91
91
Formacin de acetil-
Reacciones del ciclo
Balance de energa
Reacciones
Balance de energa
Fermentacin
Localizacin de los procesos
Movilizacin de los
Reacciones de carboxilacin
Ciclo del glioxilato
coenzima A
V a accesoria de las pentosas
substratos
75 Control de la respiracin
Efecto Pasteur
Control de retroaccin y
Control de cofactores
Reacciones laterales
Otros sistemas respiratorios
y oxidasas
Fenoloxidasas
Oxidasa del cido ascrbico
Catalasa y peroxidasas
Oxidasa del cido gliclico
alostrico
SECCIN 11 Participacin de otras
VEGETAL Respiracin <alternativa,,
oxidasas en la respiracin
Captulo 5 ,METABOLISMO
ENERGETIC0
Reacciones de oxidacin y
Reacciones de hidrlisis
Produccin de ATP
Una cadena de transporte de
Medicin de los cambios de
Compuestos de alta energa
Mecanismo de sntesis del
Reacciones de transferencia
El concepto de carga
reduccin
electrones
energa
ATP
de grupo
energtica y el control
metablico
Accin enzimtica
Lecturas adicionales
Captulo 6 RESPIRACIdN
Introduccin
Gliclisis
Reacciones
Balance de energa
Ciclo de Krebs
95
97
97
99
102
106
106
109
111
113
115
117
118
118
118
120
Factores que afectan la
respiracin de los tejidos
Cociente respiratorio y
substratos de la respiracin
Edad y tipo de tejido
Temperatura
Oxgeno
Dixido de carbono
Sales
Heridas y estmulos
95
mecnicos
El estudio y medicin de la
respiracin
Medicin de la tasa
Clarificacin de los procesos
Enzimologa
Lecturas adicionales
Capitulo 7 FOTOS~NTESIS
Introduccin
Antecedentes histricos
Reacciones del transporte de
electrones
Luz
Pigmentos
Transporte de electrones
Evidencia experimental
La trampa de l uz
Liberacin de oxgeno
Relaciones estructurales
117
120
120
124
125
125
127
127
128
129
132
134
135
135
136
136
137
138
138
139
139
140
140
141
141
141
142
146
147
148
149
149
149
149
151
154
156
157
157
159
162
162
164
168
1 70
171
1 73
1 73
Sntesis del ATP
Balance de energia
ciclo de Calvin
Introduccin
Radioactividad y
cromatografia
El ciclo de Calvin
Puntos de control
Balance de energia
Otras vas fotosintticas
RuBP oxigenasa
Va del glicolato
Fotorrespiracin
Fotosintesis C4
Resumen de la fotosintesis
C4 : significacin para las
plantas que la poseen
Metabolismo cido de las
Crasulceas
Fotosintesis de otros
compuestos
Formacin de sacarosa y
almidn
fotosntesis
Temperatura
Oxgeno
Dixido de carbono
L U t
Lecturas adicionales
Reacciones del carbono: el
Factores que afectan la
La evolucin de la fotosntesis
Captulo 8 METABOLISMO
DEL NITROGEN0
Fijacin del nitrgeno
Fijacin simbitica del
Fijacin no simbitica del
Mecanismo de la fijacin
nitrgeno
nitrgeno
nifrogenada
Reduccin del nitrato
Mecanismo de reduccin
La reduccin del nitrato
Absorcin de nitrgeno por
la planta
Nitrgeno inorgnico
Nilrgeno orgnico
Formacin de nitrgeno
Transaminacin
Transformaciones del
del nitrato
y el metabolismo
Aminocidos
orgnico
carbono
I 76
I 7 7
177
177
1 78
181
185
186
186
186
186
187
188
19.3
196
198
I98
200
200
201
203
203
204
205
207
20 7
21 1
21 I
214
214
21 5
216
21 7
21 S
219
21 9
220
221
Algunos esquemas
metablicos
Amidas,
Sntesis
Metabolismo
Destino de la glutamina
y la asparagina
Tipos de protenas
Formacin y desintegracin
de las proteinas
Produccin cclica de
protenas
Protenas
Pptidos
Purinas y pirimidinas
Alcaloides
Lecturas adicionales
Capitulo 9 POLMEROS Y
GRANDES MOLkCULAS
Polisaeridos
Almidn
Inulina
Celulosa
Otros polisucridos
Lpidos
Clorofila
Isoprenoides
Compuestos fenlicos y
aromticos
Aminocidos aromticos;
Fenoles simples y lignina
Flavonas y antocianinas
Lecturas adicionales
cido indolactico
207
224
225
227
228
229
232
232
233
234
235
235
242
244
24 5
245
245
246
246
24 7
247
250
253
255
255
256
261
262
SECCIN 111
SUELO, AGUA Y AIRE: LA NUTRI CI ~N
DE LAS PLANTAS
Captulo 10 EL SUELO Y LA
NI J TRI CI ~N MINERAL
El suelo
Textura y estructura del
Agua edfica
Nutrimentos
Nutricin mineral
Composicin qumica de
las plantas
M u r o y micronutrimentos
Nutrimentos esenciales
Medios de cultirw
suelo
Macronu trimentos
26 5
26 5
265
26 7
26 5
27 2
2 72
2 75
2 75
2 76
276
Calcio
Magnesio
Po tasio
Nitrgeno
Fsforo
Azufre
Micronutrimentos
Hierro
Manganeso
Boro
Cobre
Zinc
Molibdeno
Cloro
deficiencias nutricionales
txicos
Elementos benficos
Sustitucin
Elemen tos txicos
de importancia econmica
Las enfermedades
deficitarias y los efectos
txicos cn animales
Clave para sntomas de
Elementos benficos y
Elementos traza en plantas
Las plantas como indicadoras
Lecturas adicionales
Captulo 11 ABSORCI ~N Y
MOVIMIENTO DEL AGUA
Movimiento del agua
El problema de la prdida
Entrada del agua a las
Espacio libre aparente
Entrada del agua a las races
La presin de la r a h
Apoplasto y simplasto
Mecanismo de absorcin
Absorcin de agua en
plantas transpirantes
La ruta del agua a travs de los
El ascenso de la savia
de agua
clulas
tejidos
Las fuerzas necesarias
La cohesin y el agua
Tamao de los [lasos
Teoras alternativas
El flujo del agua
Resumen
Lecturas adicionales
Captulo 12 ABSORCI ~N Y
TRANSFERENCIA DE
SOLUTOS
2 78
2 79
2 79
280
281
28i
283
283
284
28 5
285
286
286
28 7
287
288
288
290
290
290
290
292
292
293
293
294
294
295
295
295
296
299
299
302
302
3 03
3 04
305
307
307
308
Mecanismos para el movimiento
Difusin
de solutos
Caractersticas de la
membrana y el soluto
Difusin y permeabilidad
Acumulacin por difusin
Problemas especiales
Antagonismo
Potencial electroqumico
Equilibrio de Donnan
El potencial de membrana
Transporte activo
Definicin
Apoyo experimental para
Demostracin y prueba del
Balance de cargas
Fuente de energa
Mecanismos posibles
Importancia del transporte
Lecturas adicionales
Movimiento de iones
el transporte activo
transporte activo
Mecanismos de transporte activo
activo
Capitulo 13 TRANSPORTE
Los problemas del transporte
293 Tejidos de transporte
Experimentos de anillado
Anlisis de tejidos
Experimentos de rastreo
Resumen
Estructura del xilema
Transporte en el xilema
Transporte en el floema
Estructura del floema
Mecanismos transportadores
del floema
Flujo de masas
Difusin y bombeo
Corriente citoplsmica
Difusin de interfuse
Electrosmosis
Resumen
Control del transporte
Circulacin
Transporte en el xilema
activados
Lecturas adicionales
Captulo,l4 LA HOJA Y LA
ATMOSFERA
Las hojas
309 I ntercambio de gases
309
309
309
31 1
31 1
312
312
312
3 1 3
3 I 3
314
314
314
31 7
31 8
321
321
321
322
324
325
327
327
328
3 28
328
330
333
335
335
33 5
336
336
336
338
339
34 1
341
342
344
344
347
348
349
349
353
Difusin a travs de los
poros
Intercambio de gas a
travs de los estomas
Movimiento estomtico
Factores que afectan el
moviqiento estomtico
Mediciones de los estomas
Mecanismos de actividad
estomtica
Control de los estomas
Prdida de agua
Gutacin
Transpiracin
Transpiracin
Factores que afectan la
transpiracin
Control de la transpiracin
Necesidad de la
transpiracin
Medida de la transpiracin
Intercambio de calor
Las plantas y las condiciones
del tiempo
Lecturas adicionales
Captulo 15 NUTRICIdN POR
CARBONO - UNA
SINTESIS
Introduccin
El ciclo fotosinttico C3
Esquema de reacciones
Autocatlisis
Regulacin
Localizacin de las
actividades
El ciclo C2 - Fotorrespiracin
Medicin del intercambio
de COZ
Caractersticas de la
fotorrespiracin
Reacciones del ciclo C2
Ubicacin de las actividades
Integracin de los ciclos
C2 y C3 - Oxgeno y
fotorrespiracin
en el ciclo del C2
Metabolismo del nitrgeno
353
3 54
357
359
361
361
366
366
366
36 7
367
367
3 70
3 70
3 71
37 2
373
3 74
375
375
376
3 76
377
3 77
3 78
378
3 78
3 79
382
282
3 83
384
Control de la foto-rrespiracin 384
Posibles funciones de la
fotorrespiracin 386
El ciclo fotosinttico del C4 386
Esquema de las reacciones 386
Localizacin de las
actividades -Anatoma
Kranz 388
Metabolismo del nitrgeno
en el ciclo C4 390
Integracin y regulacin
del ciclo C4
Productividad e importancia
ecolgica de plantas Cq
Ventajlus del ciclo Cq
Obtencin del COI y
consewacin del agua
Concentracin del C02
Fotorrespiracin en plantas
Efectos de la temperatura
Adaptacin ecolgica
Productividad
crasullceo
Esquema de las reacciones
Patrones del MA C
Control
c4
El metabolismo cido
391
392
392
393
3 93
3 93
394
395
395
3 96
396
3 98
399
Respiracin y fotorrespiracin
en el metabolismo
crasulceo 399
metabolismo crasulceo 400
Respiraci6n oscura 400
oscura 400
y fotosntesis 401
por l,a luz 403
Resumen 405
Lecturas adicionales 406
Importancia ecolgica del
Papel de la respiracin
Integracin de respiracin
Control de la respiracin
SECCI ~N IV
LA PLANTA EN DESARROLLO - EL
FUNCIONAMIENTO DETERMJNISTA
DELVEGETAL
Captulo 16 INTERPRETACIN
DEL CRECIMIENTO Y
DESARROLLO
Introduccin
El crecimiento y su medicin
Parm'etros del crecimiento
Crecimiento versus
Cintica del crecimiento
Medicin del desarrollo
desarrollo
Control gentico
Controles organsmicos
Aux hz s
Giberelinas
Citocininas
Etileno
desarrollo
Clases de control del
409
409
409
409
41 O
41 1
416
416
416
41 8
421
424
424
426
Acido abscsico
Sustancias hipotticas del
crecimiento
Controles ambientales
El nivel gentico
Nivel bioqumico
Nivel celular
Nicle1 de organizacin
Distribucin, formacin.
fraccionamiento y
compartimentalizacin de
los fitorreguladores
Iniciacibn de los eventos
Determinacin rtmica
Lecturas adicionales
Referencias generales para
Nivel de accin de los controles
la Seccin IV
Captulo 17 REPRODUCCIN
SEXUAL EN LAS
PLANTAS SUPERIORES
La generacin gametoftica
El carpelo y la oosfera
La antera y el polen
Determinacin se.xua1
Polinizacin y fertilizacin
Crecimiento del tubo
polinico
Fertilizacin
Capacidad de crecimiento
Crecimiento del embrin
Crecimiento del embrin
Embriognesis en cultivos
Totipotencialidad de las
Circulacin en un sentido
Desarrollo del embrin
in vitro
de clulas y tejidos
clulas de la planta
en el desarrollo
Formacin del fruto y semilla
Implantacin del fruto
Desarrollo del fruto y de
Maduracin del f rut o
Condiciones para la
Mouilizacin de las reseroas
Nutricirin de la plntula
I.ecturas adicionales
la semilla
Germinacin
germinacin
Captulo 18 PATRONES DE
DESARROLLO
Desarrollo de la plntula
426
426
427
428
428
429
4 3 o
433
43 5
43 7
43 7
438
438
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439
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44 1
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442
4 43
444
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451
451
451
45 I
454
455
456
457
458
459
Fotomorfognesis
de tejidos
El meristem0 terminal
Control del crecimiento
Diferenciacin de los tejidos
Races laterales
Desarrollo del tallo
El wzeristemo terminal
Desarrollo del tallo
Primordios de las hojas
Diferenciacin
Iniciacin de rganos en cultivo
Desarrollo de la raz
radical
Desarrollo de las hojas
Desarrollo floral
Lecturas adicionales
Captulo 19 ORGANI ZACI ~N
EN EL ESPACIO
439 Direccin del crecimiento
Respuestas trpicas
Geotropismo
Percepcin de la gralledad
Mecanismo de respuesta
a la gravedad
Fototropismo
Percepcin fototrpica de
Tigmotropismo
Otros tropismos
Efectos correlativos
Otros factores
Dominancia apical
Respuestas nsticas
Ep inas t ia
Termonastia
Nictinastia
Seismonaslia
Trampas
Motrimientos foliares
rpidos
Nutacin
Lecturas adicionales
la luz
La forma
Captulo 20 ORGANI ZACI ~N
EN EL TIEMPO
Introduccin
La importancia de regular
el tiempo
Maneras de medir el tiempo
459 Cmo funcionan los relojes
biolgicos
Acumulativo
459
461
463
463
465
466
46 7
468
468
468
4 71
4 73
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4 83
483
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4 93
493
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507
507
50 7
508
508
508
Oscilador
Interacciones
Ritmos extrnsecos
Medicin del tiempo para
floracin
Fotoperiodo y vernalizacin
Descubrimiento del
fotoperiodo
Interrupcin de la noche y
medicin de la oscuridad
Sitio de la percepcin
El fitocromo
Mecanismo de accin del
fitocromo
Reacciones mediadas por el
fitocromo
Localizacin celular del
fitocromo
Intentos de explicacin de
la accin del fitocromo
Fitocromo activo e inactivo
Algunas ideas recientes
Reacciones de alta energa
La relacin entre la
floracin y las respuestas
rpidas
Induccin floral
Induccin y desarrollo
Percepcin y transporte
Inhibidores
Sustancias de crecimiento
Antesina
Cambios en el pice del
tallo
Fitocromo como
cronmetro reloj de
arena
floral
del estmulo floral
Procesos rtmicos
Ritmos circadianos
Ritmos circadianos y
La naturaleza del cronmetro
fotoperiodo
oscilador
Vernalizacin
Induccin por fro
Interacciones con otros
Sitio de percepcin del
Vernalina y giberelinas
Naturaleza del proceso de
Resumen: floracin e induccin
factores
estmulo
termoperiodo
floral
Lecturas adicionales
508
51 O
51 1
511
51 1
51 2
51 5
51 6
51 6
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53 6
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541
54 1
54 2
543
543
544
546
54 7
Captulo 21 MODELOS DE
NUTRI CI ~N DURANTE EL
DESARROLLO
Fotosntesis y nutricibn
El establecimiento de la
fotosntesis en la planta
Modelos de nutricin en la
planta adulta
Modelos de asimilacin
Modelos de exportacin de
Formacin del f rut o
Formacin de la madera
Control del trfico de nutrientes
Control del transporte
Movimiento de los nutrientes
al sitio de demanda
Dominancia apical y
nutricin
Control hormonal del
transporte
Control hormonal de la
fotosintesis
Lecturas adicionales
las hojas
Captulo 22 LETARGO,
SENESCENCIA Y MUERTE
Letargo
Causas del letargo
Factores ambientales
cido abscsico
Interaccin del ABA con
otras sustancias del
crecimiento
Letargo de la semilla
Tipos de letargo de la semilla
Exigencia de l uz
Temperatura
Efectos de la testa de la
Otros factores
vegetativos
Longitud del da y letargo
Otros factores
Factores interactuantes
Kompimiento del letargo
Modelos del envejecimiento
Aspectos metablicos de
Competencia por nutrientes
Efectos de los factores del
semilla
Letargo de los rganos
Senescencia y muerte
y la muerte
la senescencia
en la senescencia
desarrollo
549
549
550
552
552
554
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55 7
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558
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5 70
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5 78
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585
587
58 7
588
590
59 1
A bscisin
Lecturas adicionales
Captulo 23ACCIN DE LAS
HORMONAS Y
REGULADORES DEL
CRECIMIENTO
Introduccin
Auxinas
Sinlesis. mouimiento e
1AA y formacin de etileno
Efecto de 1AA sobre enzimas
Akxinas y transporte
Efectos en la pared celular
Efectos sobre la sntesis de
RNA y de protena
Estructura y acticridad
Receptores y sitios de enlace
inactioacihn
especificas
Giberelinas
Sntesis y dislribucidn
Alargamiento
Flvracirin
Slntesis de enzimas
Mecanismo de accin
Citocininas
Distribucibn
E[ectos
Preuencin de la senescencia
Eormacln de enzimas
Las citocininas como
Accihn de la citocinina
constituyentes del RNA
cido abscsico
Isfecto del cido abscisico
Accin del cido absckico
Etileno
Efeclos del etileno
Mecanismo de accibn
Otras sustancias que influencian
el desarrollo
Interaccin hormonal
Resumen de las acciones
hormonales
Auxinas
Giberelinas
Citocininas
Hcido abscisicv
Efileno
Compuestos hipotticos
que causan la floracion
Lecturas adicionales
593
598
599
599
600
ti o0
602
602
6 03
6 03
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608
608
t i 1 I
611
61 I
612
612
61.2
6 I 3
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620
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622
624
624
624
624
62i i
625
625
62.5
SECCI ~N v
FISIOLOGA DE ORGANISMOS
ESPECIALES
Captulo 24 FISIOLOGA DE
LOS ARBOLES 629
Caractersticas especiales de
Asimilacin
Formacin de la madera
los rboles
Hormonas
Fotoperiodo
Agua
Temperatura
Asimilacin
Madera de reaccin y
movimiento de orientacin
Morfologa
Forma de la copa
Plagiotropismo
Consecuencias del crecimiento
perenne
Metabolismo de tejidos
Latencia
Recuperacihn de
nutrimentos antes de la
cada de la hoja
Comunidades arboladas
Lecturas adicionales
perennes
Captulo 25 FISIOLOG~A DE
ALGAS MARINAS
Introduccin
Productividad de las algas
marinas
Cadenas naturales de
liso econmico de las algas
las algas marinas
Fotosntesis
Crecimiento estaciona1
Absorcin de nutrimenlos
ambientales
Luz
Temperatura
Desecacirin
PH
Salinidad y potencial
Accin del oleaje
alimento
Adaptaciones fisiolgicas de
Reacciones a factores
o.SI71btiCo
629
6 29
632
63 2
632
63 2
633
633
633
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63 5
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636
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64 1
641
641
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648
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t149
660
650
651
Peculiaridades del metabolismo
y la bioqumica de las algas
Quimiotaxonoma
Pigmentos
Molculas pequeas
Compuestos de
almacenamiento
Algas calcreas
Eliminacin de impurezas
Feromonas
Lecturas adicionales
Captulo 26 PARSITOS Y
ENFERMEDAD
Introduccin
Infeccin
Organismos y enfermedad
Resistencia
Inmunidad
Estmulos para la infeccin
Invasin
Toxinas
Sustancias de crecimiento
Respuestas fisiolgicas al
parasitismo
Respiracin
Fotosntesis
Metabolismo del nitrgeno
Translocacin
Sustancias de crecimiento
y respuesta morfolgica
Respuestas ante el ambiente
Lesiones
Interaccin husped-parsito
Lecturas adicionales
Captulo 27 SIMBIOSIS
Tipos de simbiosis
Asociaciones
Micorrizas
Orqudeas
Lquenes
Asociaciones de lquenes
Interacciones metablicas
Relaciones con el agua
Pigmentos
Simbiosis algas-invertebrados
Simbiosis de la fijacin del
nitrgeno
Lecturas adicionales
651
651
651
653
653
654
654
654
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681
681
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683
684
SECCIN VI
FI SI OLOGfA Y DI STRI BUCI 6N
DE LAS COMUNI DADES VEGETALES
Captulo 28 FISIOLOG~A DE
LAS PLANTAS BAJO
TENSI ~N
Introduccin
Efectos de la tensin
Tipos de tensin
Resistencia a la tensin:
prevencin y tolerancia
Medida del fortalecimiento
Sequa
Prevencin y tolerancia a
Consecuencias de la
Mecanismos de tolerancia
la sequa
deshidratacin
a sequa
Calor
Lmites de tolerancia al
Mecanismos de tolerancia
Baja temperatura y congelacin
Enfriamiento y congelacin
Teoras sobre resistencia al
Fortale'cimiento a la
calor
al calor
enfriamiento
congelacin
Radiacin
Condiciones del suelo
Altitud
Contaminacin
Lecturas adicionales
Captulo 29 FACTORES
FISIOLGICOS EN LA
DISTRIBUCIN DE LAS
PLANTAS
Introduccin
Los factores fisiolgicos en
ecologa
Factores que afectan la
Vegetacin
Tipos de vegetacin
Factores histricos
Factores geogrficos
Lluvia
Humedad relativa
Temperatura
Viento
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687
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706
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71 1
Duraci n de la periodicidad
y la estacin
Factores que afectan la flora
Climticos
Fisiogrficos
Contaminacin
Compet enci a
Sucesin
competencia
Lecturas adicionales
Mecanismos fisiolgicos de la
Captulo 30 LAS PLANTAS Y
EL HOMBRE
Introduccin
Impacto del hombre sobre el
paisaje
Nic'eles de inleraccihn
Modi fi caci dn del amhi ent v
Modificncidn por la
agricultura
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723
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724
.4dmitzislracin del ambiente
Productividad y agricultura
E1 u s o de f act ores del
creci mi ent o
C.'ronometria
' ont rol del ambi ent e
"El trabajo del sol en un
campo de ma z "
Adaptacin y desarrollo de
plantas para necesidades
especiales
Las plantas y la contaminacin
El papel del fisilogo vegetal
1,ecturas adicionales
Indice de autores
Indice de nombres de plantas
ndice temtico
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73 9
739
744
744
74 5
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755
762
SECCIN I
INTRODUCCI~N
Y
GENERALIDADES
Captulo 1
INTRODUCCI~N
LA FISIOLOGfA VEGETAL
Las plantas germinan, crecen, se desarrollan, maduran, se reproducen y mueren. La
fisiologa vegetal es el estudio de esos procesos, del cmo y por qu cada planta
se comporta de una manera propia y peculiar; es el estudio de la organizacin y
operacin de los procesos que ordenan su desarrollo y comportamiento. Cada
planta es el producto de su informacin gentica modificada por su ambiente, y
cada parte u rgano vegetal se modifica adicionalmente por el estado fisiol6gic0,
o ambiente interno de la planta, del cual forma parte. La fisiologa vegetal trata
sobre la reciprocidad de todos estos factores en la vida de la planta.
LAS PLANTAS Y LOS ANIMALES
Por qu debemos estudiar la fisiologa vegetal separada de la fisiologa animal o
de la fisiologa celular? Las plantas y los animales han desarrollado un patrn
o hbito de vida bsicament6 diferente. Los animales tienen un desarrollo y fun-
ciones definidos, y obran de acuerdo c.on las leyes del movimiento y las fuerzas,
, es decir mecnicamente, mientras que'las plantas crecen y accionan sobre una
base estructuralfLos animales, en general, son mviles, deben buscar alimento y
deben ajustarse a una estrecha gama de lmites de tamao con el fin de funcionar
exitosamente; son (valga la comparacin) como automviles: si crecen dema-
siado o asimtricamente no logran accionar con xito. La mayora de las plantas
I on sedentarias y producen su propio alimento: atenindose a lo que puedan
obtener dentro de los lmites de su ambiente inmediato; no estn limitadas
por condiciones mecnicas o de tamao: estn construidas como las casas; pue-
den aadirse nuevas habitaciones continuamente (dentro de los lmites de resis-
tencia estructural) sin que surjan problemas. La planta puede crecer y desarro-
llarse durante toda su vida; algunas partes pueden degradarse y morir; otras pueden
agregarse aqu y all conforme se requiera. Los animales deben mantener su
integridad mecnica; la planta no est bajo tal restriccin. El animal puede mo-
verse en su ambiente para buscar y obtener cosas que necesita para vivir y crecer,
mientras que la planta puede crecer en su ambiente pero slo en forma lenta y en
grado restringido, atenindose a lo que est disponible en su cercana.
4 INTRODUCCI6N Y GENERALIDADES
Como resultado de este patrn estructural de crecimiento e inmvil hbito
de vida, las plantas enfrentan varios problemas especiales de consecucin de ali-
mento y sobrevivencia que han resuelto de diversas maneras. Deben soportar no
slo los cambios ambientales predecibles sino tambin variaciones impredecibles
del tiempo y el clima.Por ejemplo, las plantas que viven en un desierto y carecen
de un mecanismo especfico de almacenamiento de agua, slo pueden medrar
durante e inmediatamente despus de una lluvia. La nutricin orgnica, una im-
portante preocupacin de los animales, es un pequeo problema para la mayora
de las plantas porque son auttrofas del carbono, es decir, manufacturan todos
los compuestos de carbono que necesitan del dixido de carbono (COZ ). Sin em-
bargo, slo tienen acceso restringido a los suministros limitados de nutrimentos
inorgnicos presentes en el suelo pero han desarrollado un metabolismo especia-
lizado y altamente conservador de nitrgeno, fsforo, potasio y otros importan-
tes elementos inorgnicos. Los animales son conservadores del carbono y lo ciclan
en el interior de sus cuerpos, en tanto que despilfarran el nitrgeno. Las plantas
se comportan exactamente del modo contrario, conservan nitrgeno y usan car-
bono libremente.
Al estar arraigadas en un sitio, tienen un problema especial con el agua. Lo
mismo que los animales, ellas dependen del intercambio gaseoso para vivir. Nece-
sitan de este intercambio para su principal actividad nutricia, la fotosntesis, as
como para la respiracin. Una consecuencia inmediata del eficiente intercambio
gaseoso es la prdida de vapor de agua. Necesitan luz solar para vivir; el sol, al
calentarlas, incrementa la prdida de agua por evaporacin. Han desarrollado
ajustes muy finos que les permiten conservar agua y, al mismo tiempo, ejercer
un eficaz intercambio gaseoso de oxgeno y dixido de carbono.
Otra consecuencia del diseo no mecnico de las plantas consiste en que
carecen de bombas y de sistema circulatorio cerrado. Alcanzan a veces una gran
masa, crecen muy alto y, como los animales, deben transportar sustancias alimen-
ticias, sustancias reguladoras y materias de desecho por todo su cuerpo. Asimismo,
tienen que transportar enormes cantidades de agua, a menudo a grandes alturas.
Al carecer de bombas mecnicas, las plantas poseen una variedad de dispositivos
qumicos y fisicoqumicos para mover fluidos y un perfeccionado sistema de
caeras en forma de tejidos especializados que les permite dirigir el transporte
de nutrimentos.
Las plantas difieren fundamentalmente de los animales en el proceso de
desarrollo. stos efectan la mayor parte de su desarrollo de una manera alta-
mente coordinada durante un corto lapso de su existencia y, ya desarrollados, al-
canzan una fase de estabilidad ms o menos fija que puede durar largo tiempo.
Aqullas prosiguen su desarrollo durante el curso de toda su vida, y las diversas
partes crecen, maduran y mueren, en muchos casos independientemente unas
de otras. Obviamente, el sistema de controles que regula el desarrollo vegetal es
totalmente distinto al de los animales. stos producen y responden a numerosas
hormonas altamente especficas que afectan tejidos especficos en formas espe-
cficas. Las plantas reaccionan a unas cuantas hormonas generalizadas. Cada una
de stas afecta a todos o casi todos sus tejidos y pueden actuar en una u otra
direccin segn las diversas condiciones internas y ambientales de los tejidos
afectados. El control del desarrollo vegetal es, entonces, el resultado de un com-
plejo de factores hormonales, ambientales y nutricionales que interactan entre
s y hacen posible la expresin de las caractersticas genticas de la planta de
la manera ms efectiva bajo diversas circunstancias ambientales.
INTRODUCCIN 5
Finalmente, las plantas difieren de los animales en que carecen de sistema
nervioso. Los animales, al actuar mecnicamente, necesitan nervios para un cons-
tante y preciso control de movimientos. Esto, luego de un prolongado periodo,
ha permitido la evolucin de un cerebro. Las plantas no necesitan nervios. Su
comportamiento est principalmente expresado por sus patrones de crecimiento
y desarrollo, procesos que son controlados por integracin bioqumica y fisio-
lgica, ms que por la integracin de los nervios y el pensamiento.
CARACTERfSTICAS DE LAS PLANTAS Y DE LA VIDA VEGETAL
QUE CONDUCEN A LA FISIOLOGA ESPECIALIZADA
1. Las plantas son principalmente inmviles y slo pueden peeetrar y uti-
lizar un espacio limitado de su medio.
2. La autotrofia del carbono les permite un irrestricto metabolismo car-
bnico.
3. La dependencia del suministro de minerales del suelo trae como conse-
cuencia una nutricin mineral altamente conservadora, particularmente
del nitrgeno.
4. Conforme las plantas evolucionaron hacia un hbito terrestre, tambin
desarrollaron varios mecanismos que las protegen de la prdida de agua
y les permiten llevar a cabo el intercambio de gases, sin respirar.
5. El hbito terrestre requiri tambin la evolucin de finos mecanismos
para obtener y transportar agua.
6. El sistema de soporte estructural que se ha desarrollado en ellas "pare-
des celulares rgidas en vez de un esqueleto especializado- ha originado
numerosos problemas. A pesar de sus paredes macizas, las clulas vege-
tales poseen un mayor grado de interconexin que las animales. Los
contenidos celulares de las clulas adyacentes estn a menudo en con-
tacto intimo a travs de las conexiones citoplasmticas.
7. Las plantas enfrentan serios problemas estacionales y se han desarrolla-
do mecanismos medidores del tiempo, de modo que sus actividades se
ajustan al patrn de cambios estacionales de su medio, Reproduccin,
produccin de semillas, latencia, germinacibn, cada de hojas, etc., estn
determinadas por las estaciones.
8. Debido a su inmovilidad, no pueden ocultarse o buscar proteccin de
los elementos. Han desarrollado medios especiales de proteccin con-
tra los excesos del viento, la sequa, el fro, el calor y la luz.
9. Los requerimientos para la reproduccin en organismos inmviles han
trado como consecuencia la evolucin de una variedad de estructuras
y mecanismos reproductivos. El control y la operacin de &tos consti-
tuye uno de los ms fascinantes captulos del libro de la vida vegetal.
10. Los problemas de control y regulacin de un organismo en permanente
desarrollo requieren un conjunto de mecanismos fisiolgico-bioqumicos
que se han desarrollado en alto grado en las plantas.
11. La evolucin y la adaptacin de los organismos tienen lugar tanto en
sentido fisiolgico y bioqumico, como a travs de cambios en la anato-
ma y la morfologa. Las plantas dependen considerablemente de exi-
tosos mecanismos fisiolgicos o bioqumicos para sobrevivir y, en con-
secuencia, se ha desarrollado una fina y variada fisiologa.
6
I NTRODUCCI 6N Y GENERALI DADES
12. Las plantas no poseen sistema nevioso organizado pero cuentan, princi-
palmente, con medios bioqumicos de comunicacin entre sus partes.
Esto se traduce en mecanismos fisiolgicos ms finos an, que no tienen
contraparte en los animales.
Todos estos problemas de la vida vegetal se estudian convenientemente desde
el punto de vista fisiolgico o bioqumico como si fueran dispositivos mecanicistas.
Sin embargo, no se debe perder de vista el aspecto ms importante de ellos: la
organizacin fisiolgica de todos estos procesos dentro del todo funcional de
la planta y dentro de la relacin de ella con su ambiente y con la comunidad en
que vive. La base del xito de la planta es la capacidad de competir en su ambien-
te; dependiendo esta capacidad, principalmente, de su evolucin fisiolgica y de
su adaptacin al medio.
EVOLUCI ~N
Las plantas han evolucionado continuamente y an lo siguen haciendo. Los aspec-
tos obvios de la evolucin, aquellos que vemos y clasificamos, son la evolucin del
cuerpo y la forma, as como los hbitos de crecimiento y de vida. En ellas tambin
ocurre la evolucin de los procesos bioqumicos y fisiolgicos, y es probable que
gran parte de la evolucin de los procesos bioqumicos haya tenido lugar muy
tempranamente. Aun las plantas ms primitivas poseen sistemas altamente compe-
titivos de fotosntesis, respiracin, sntesis proteica y otros. Sin embargo, los me-
canismos fisiolgicos que controlan la forma y patrn de desarrollo debieron
evolucionar paralelamente a los que coordinan el funcionamiento de todas sus
partes. Tales procesos an estn evolucionando. Existen ciertos indicios recientes
de que, aunque los procesos bsicos de fotosntesis y respiracin no han cambiado
por un largo periodo, algunos de los procesos subsidiarios y las interrelaciones
bioqumicas entre ellos pueden estar sufriendo alteraciones considerables confor-
me las plantas modernas evolucionan, en respuesta a su medio en continuo cam-
bio. Las que consiguen el xito son aquellas que pueden operar ms eficazmente
bajo los ms amplios rangos de condiciones ambientales. Desde el advenimiento
del hombre, el xito en las plantas incluye una mxima produccin til para el
hombre, tanto bajo condiciones de cultivo como en el ambiente natural.
LA BOTNICA APLICADA Y LA ECONOM~A
Los conceptos fisiolgicos, y por tanto los fisiolgos, estn llamados a resolver
problemas de botnica econmica y agricultura. La biologa aplicada fue concep-
tuada en un tiempo como una materia de segunda clase por los llamados bilogos
puros, quienes despreciaban los esfuerzos de la investigacin encaminados hacia
la solucin de problemas econmicos. Sin embargo, el tremendo xito de tales
estudios aplicados, el nmero de principios bsicos que han surgido de estudios
que se iniciaron como proyectos estrictamente aplicados y el reciente incremento
en importancia social y econmica de los problemas biolgicos, particularmente
el espectro de los dficits y agotamiento de alimentos, que ronda en gran parte del
mundo actual, han elevado la biologa aplicada a su actual nivel de prominencia.
I NTRODUCCI ~N I
Muchos problemas de investigacin bsica en biologa aplicada estn siendo estu-
diados ahora y muchos otros necesitan ser abordados.
Uno de los aspectos ms importantes de la ciencia vegetal en el desarrollo
de la botnica econmica ha sido la gentica. La selqfcin y el mejoramiento han
repercutido en el desarrollo de casi todas las actuales plantas cultivadas que mues-
tran caractersticas deseables, tales como alta produccin, atraccin al gusto y la
vista, resistencia a enfer edades y adaptacin a un amplio rango de condiciones
climticas y ambientales. Sin embargo, estos rasgos generales y otros ms espec-
ficos, como prendimiento de frutos, maduracibn temprana, etc., son expresiones
de procesos fisiolgicos. Se condujeron experimentos previos de genotecnia bus-
cando rasgos deseables, intentando seleccionarlos y perfeccionarlos mediante
mejoramiento gentico. El xito de tales programas se bas en la feliz coinciden-
cia del experimentador que advirti una caracterstica valiosa, susceptible en
realidad de seleccionarse y desarrollarse. Muchos de los ms grandes triunfos fue-
ron casualidades afortunadas o el disparo certero y fortuito procedente de miles
de experimentos de prueba y observa. Pero a medida que avanza el estudio de
la fisiologa vegetal se est llegando gradualmente a posibilitar la seleccin de los
mecanismos fisiolgicos o bioqumicos especficos que darn sus resultados en
las mejoras deseadas y as determinar qu parte del complemento gentico de la
planta es la responsable. Cuando estas nuevas tdcnicas estn suficientemente
perfeccionadas ser posible dirigir programas de genotecnia sobre un plano total-
mente nuevo, seleccionando las mejores combinaciones posibles de rasgos gen-
ticos, con el fin de modelar un organismo casi perfecto, para cualquier conjunto
dado de condiciones y circunstancias. Los tpicos programas sobre plantas de
cultivo que hoy estn en marcha se encaminan a producir variedades con altas tasas
de fotosntesis, combinadas con bajas tasas de respiracin (no solamente elevados
indices metablicos), que produzcan frutos de mximo provecho, que conviertan
la proporcin ms grande de su carbono asimilado en fruto o semilla, en vez de
hojas y tallos, que sean fuertes, que crezcan rpido y que resistan enfermedades.
Adems de estos rasgos especficos, toda la estrategia de las plantas puede
modificarse para aumentar su utilidad. Su altura y forma, la orientacin de sus
hojas hacia el sol, la regulacin de su temporada de reproduccin y su dependen-
cia de la nutricin, son susceptibles de modificacin y perfeccionamiento. Las
modernas tcnicas de fisiologa celular permiten la produccin de plantas a partir
de clulas aisladas y aun (en grado limitado hasta ahora) la manipulacin de ma-
terial gentico en clulas somticzs. Un avance experimental como ste requiere la
mtis amplia aplicacin del profundo conocimiento bioqumico, fisiolgico y
gentico de las plantas.
Sin duda, la combinacin de la fisiologa vegetal con la gentica es de la
mayor importancia y, tal vez, vitalmente necesaria para el futuro del hombre. El
alimento del mundo, cuyo abastecimiento es ahora peligrosamente bajo, a pesar
de la revolucin verde, deriva de las plantas. La industria forestal ha evolucionado
recientemente, de un saqueo ciego de los recursos naturales, a un programa agra-
rio efectivo y autorregulado. Los programas de mejoramiento arbreo, en conti-
nua desventaja por el prolongado periodo de generacin de los Arboles, han sido
enormemente apoyados por la elucidacin de mecanismos fisiolgicos, que per-
miten al experimentador obligar a los rboles a madurar sexualmente en 2 a 4
aos, en vez de 10 a 15. La ag. icultura maritima llegar a ser una gran industria,
que requerir una comprensin enteramente nueva de 10s hbitos patrones de
crecimiento de las algas marinas.
8 INTRODUCCION Y GENERALIDADES
Las plantas son los principales agentes que purifican nuestro cada vez ms
contaminado mundo, en el aire, sobre la tierra y en el agua. Las plantas tambin
sufren a causa de la contaminacin. Los programas de renovacin urbana, de pla-
neamiento citadino y del ambiente total han de incluir plantas; ya que son esen-
ciales para cobertura y proteccin del suelo, concentracin de agua, alimento y
belleza, as como para la regeneracin de la atmsfera. Las plantas comprenden
cerca del 99% de la biomasa de nuestro planeta, reciclan una cantidad cercana al
0.1 % del carbono total disponible en la biosfera cada ao, son la fuente de muchas
de nuestras medicinas y drogas y ejercen un tremendo impacto sobre el estado del
tiempo y los sistemas meteorolgicos, cambiando temperaturas, evaporando el
agua y produciendo grandes cantidades de diversos productos qumicos voltiles.
Se cuentan entre los principales agentes alergnicos del mundo, como bien lo
saben quienes sufren la fiebre del heno. En casi cualquier forma, la humanidad
depende de ellas.
El conocimiento, la explotacin y el control de las plantas llegarn a ser
ms y ms importantes a medida que el tiempo transcurrra. Slo la cabal com-
prensin de su fisiologa, bioqumica y gentica, nos capacitar para dirigir con
xito el tremendo programa de biologa econmica necesario para el confort y
aun para la sobrevivencia del hombre.
LECTURAS ADICIONALES
Janick, J ., R.W. Schery, F.W. Woods y V.W. Ruttan. Plant science. W.H. Freeman & Co., San
Handler, P. (ed): Biology and the future of man. Oxford University Press, Nueva York. 1970.
Plant Agriculture (Selections from Scientific American). W.H. Freeman & Co. San Francisco.
Tippo, O. y W.L. Stern: Humani st i c bot any. W. W. Norton and Co., Inc. Nueva Ycr!:. 1977.
Francisco. 1974.
1970.
Captulo 2
FUNDAMENTOS DE QUMICA
La fisiologa se basa en conceptos fsicos, qumicos y biolgicos, y utiliza los tr-
minos y sistemas de medida de estas ciencias. La fisiologa vegetal es en s misma
una ciencia exacta y, por tanto, debe describirse y presentarse en trminos preci-
sos. Muchos estudiantes estarn familiarizados con los trminos que se presentan
en este captulo, sin embargo, jno se confunda familiaridad con conocimiento!
Se debe leer y cerciorar que se conoce exactamente lo que se lee y se debe medi-
tar acerca de ello.
SOLUCIONES
Toda la materia viva depende del agua. El protoplasma est disuelto o disperso en
ella. Casi todos los componentes de la clula se transportan en agua y casi todas
las reacciones biolgicas tienen lugar en solucin acuosa. Las peculiares propieda-
des fsicas, qumicas y elctricas de las soluciones y dispersiones de materia en
agua proveen la base para la qumica y fsica del material viviente. Es importante
entender claramente las propiedades de las soluciones.
Una solucin consiste en dos componentes por lo menos: el soluto, el cual
est disuelto en forma molecular por todo el solvente. La mayora de las solucio-
nes naturales son complejas en el sentido de que poseen ms de un soluto. Dentro
de amplios lmites, sin embargo, los diversos solutos en una solucin compleja
se comportan independientemente unos de otros; cada uno acta en la solucin
como si los dems no estuvieran all. Las excepciones a tal comportamiento se
advertirn posteriormente. Sin embargo, esta es una caracterstica muy impor-
tante del comportamiento de las soluciones gas-agua, como luego se ver.
Las soluciones de importancia biolgica incluyen gas en gas (las as llamadas
mezclas de gases son realmente soluciones y se comportan como tales), gas en
lquido, lquido en lquido y slido en lquido. Los solutos pueden ser casi inso-
lubles, ligeramente solubles, o muy solubles. Se dice que la solucin es saturada
a la concentracin cuando por encima de la cual puede disolverse ms soluto en
ese solvente, es decir, cuando se forman capas o pequeas gotas en una solucin
lquido-lquido o cuando ocurre cristalizacin o precipitacin en una solucin sli-
10 INTRODUCCION Y GENERALIDADES
do-lquido. Pueden presentarse a menudo soluciones supersaturadas inestables
como consecuencia de un enfriamiento moderado de la solucin saturada, pero
ellas son extremadamente susceptibles al choque y el exceso de soluto precipita
o cristaliza repentinamente.
Probablemente, el agua es lo ms cercano a un solvente universal y la mayora
de las sustancias qumicas se disuelven en ella en cierto grado. La solubilidad de
la mayora de los compuestos aumenta conforme se incrementa la temperatura
de la solucin; sin embargo, la solubilidad de algunos compuestos, como la sal,
es relativamente inafectada por la temperatura, mientras que la de otros, inclu-
yendo las sales de calcio de algunos cidos importantes, disminuye al aumentar
la temperatura.
SOLUCIONES DE GAS. Las soluciones de gas en agua son de gran importancia bio-
lgica. Casi todo intercambio gaseoso necesita que el gas se disuelva en la solucin
celular antes de que llegue a los sitios de reaccin, y el gas producido como conse-
cuencia de la reaccin generalmente se libera en una solucin antes de escapar de
la clula como gas.
Los gases de importancia biolgica son ligeramente solubles, como el ox -
geno (O,), hidrgeno (Hz) y nitrgeno (N,), o muy solubles, como el dixido de
carbono (CO,), amoniaco (NH,), dixido de azufre (SO,) y trixido de azufre
(SO,). Los gases como el oxgeno son solubles solamente en un grado cercano al
0.001% bajo condiciones normales, mientras que gases como el CO, pueden ser
100 veces ms solubles. La solubilidad de ambos tipos de gases es inversamente
proporcional a la temperatura, un hecho de suma importancia para oganismos
acuticos o sumergidos que dependen del O2 disuelto para respirar. La solubilidad
de un gas en agua es directamente proporcional a la presin de ese gas sobre el
agua. De ah se deduce que las solubilidades de varios gases en una mezcla son
proporcionales a sus presiones parciales. As, la cantidad de O, disuelto en una
cantidad dada de agua sera la misma del aire (21% O*) a presin atmosfrica y la
del O, puro a 21 % de presin atmosfrica. ;La cantidad de CO, del aire disuelto
en agua a la presin atmosfrica sera igual a la del CO, puro a cerca de 0.23 mm
Hg de presin (0.03 atm)!
La extrema solubilidad de gases como el COZ y el NH3 resulta de su com-
binacin con agua para formar un cido o una base en solucin, de acuerdo a las
reacciones
CO, + H,O + H2C03 + H' + HCO3-
NH, + H,O + NH,OH * NH,' + OH-
El estado de los productos disueltos es, por supuesto, afectado por la acidez
de la solucin. Esto es particularmente cierto para el CO, , el cual puede existir en
varios estados en solucin segn la concentracin de los cationes
coz + H,CO, + HC0,- + CO, ,- + Naco,- + NaHCO, =+ Nazco,
En una solucin cada forma existe como una entidad separada y $1 balance
entre ellas est determinado por la acidez. De esta manera la cantidad de COZ que en-
tra en solucin en un volumen dado de agua es proporcional no slo a la presin
FUNDAMENTOS DE QUMICA 11
parcial del C02 en la fase de gas y a la temperatura, sino tambin a la acidez o
alcalinidad del agua.
Una de las consecuencias de la extrema solubilidad del COZ en el agua es
que se difunde en Sta muy rpidamente. El COZ difunde tambin en un semis-
lido como el agar, el cual se compone principalmente de agua, como si se tratara
de sta. Este hecho pasa a menudo inadvertido, pero los intentos para impedir el
intercambio gaseoso taponando vasos con materiales similares al agar sern un
fracaso. iEl COZ los atraviesa como si no existiese ningn tapn!
CONCENTRACIONES. Los trminos usados para expresar las concentraciones de
soluciones son simples y poseen un significado exacto. Se deben usar con toda
exactitud. Esto es particularmente importante para especificar con claridad las
unidades que se utilizan y para indicar su significado si existiera alguna ambige-
dad; pngase atencin a las abreviaturas de los trminos: stas son frecuentemente
mal empleadas; una fuente de error comn en trabajos de precisin.
La forma ms comn de describir la concentracin de una solucin consiste
en el nmero de moles de una sustancia en exactamente 1 litro de la solucin a
20C (1 mol de cualquier sustancia =6.023 x l oz3 molculas; este es el nmero
de Avogadro y es importante recordarlo ya que reaparecer en el estudio de la
energtica y la fotosntesis). La molaridad de la solucin, por tanto, expresa el n-
mero de moles por litro de solucin (Nota: No moles por litro de solvente). Una
solucin que contenga 2 moles/ litro se llama 2 M. Es importante notar que la
abreviatura M significa molar, no moles. Se refiere a la concentracin, no a la can-
tidad. Este es un error frecuente que debe evitarse. Las soluciones que contienen
una fraccin de un mol por litro se expresan casi siempre como decimales (por
ejemplo, 0.1 0.05 M significa 0.1 0.05 moles/ litro) y no como fracciones co-
munes. Es importante advertir que las soluciones expresadas en trminos de mola-
ridad pueden ser aritmticamente diluidas. Si una solucin l M se diluye a dos o
diez veces su volumen, resulta una solucin 0.5 M o 0.1 M.
Una segunda y a menudo confusa descripcin de la concentracin de una
solucin, se hace expresando el nmero de moles del soluto por 1,000 g de solvente,
y esto se denomina la molalidad de la solucin. La molalidad se utiliza en situa-
ciones donde, por razones fsicas o qumicas, se desea expresar la razn de soluto
a molculas de solvente, por ejemplo, en la discusin de la presin osmtica. As,
2 moles de una sustancia disueltos en i kg de agua (1 litro a 20C) forman una
solucin 2 molal ( m) . Advirtase que 1 mol de un soluto en 1 kg de agua no ten-
dr un volumen de 1 litro; el volumen puede ser hasta 30% mayor o puede ser me-
nor, segn el soluto. Por esta razn no es posible formar una solucin 0.5 m de
una solucin 1 m diluyndola con un volumen igual de agua. Debe diluirse en un
volumen de agua igual al volumen de agua de la solucin.
El poder de la solucin puede expresarse como sigue:
l. Peso por peso unitario. Ejemplo: 20% (p/ p) de azcar en agua significa
20 g de azcar + 80 g de agua, o 20 g de azcar por 100 g de solucin.
2. Peso por volumen unitario. Ejemplo: 20% (p/ v) de azcar en agua signi-
fica 20 g de azcar por 100 m1de solucin (Nota: Esto tiene aproxima-
damente la misma concentracin que una solucin 19% p/ p porque el
azcar en solucin llena un espacio menor que los cristales de azcar
12 INTRODUCCION Y GENERALIDADES
seco. As, la solucin ocupa menos volumen que los volmenes combi-
nados de sus componentes.
3. Volumen por volumen unitario. (A menudo se usa para soluciones de
lquido en lquido). Ejemplo: 80% (v/ v) de alcohol en agua significa
80 m1de alcohol en 100 m1de solucin ( Not a: Esto sera totalmente dis-
tinto de 80 m1 de alcohol mezclado con 20 m1 de agua o de 80 g de al-
cohol mezclado con 20 g de agua, debido a la diferencia en gravedad
especfica de ambos lquidos y porque el volumen de la solucin es algo
inferior al de los dos lquidos por separado).
Las soluciones precisas de compuestos como el alcohol, se usan a menudo
en precipitacin diferencial de componentes de una mezcla para su aislamiento
o purificacin se puede ver la tremenda importancia de especificar correctamente
las unidades de las soluciones!
Las concentraciones de gas en solucin pueden expresarse en la forma con-
vencional, por la molaridad o por porcentajes de peso. Ellas a menudo se expresan
en unidades algo informales como volmenes de gas por volumen de solucin; por
ejemplo: 20 microlitros por litro ( p litro/ litro) o 20 ppm (partes por milln), o
como porcentajes de saturacin. Naturalmente, estos trminos se han de mencio-
nar de acuerdo a las condiciones de temperatura y presin baromtrica. Puesto
que aqullas pueden ser difciles de reproducir, tales trminos deberan evitarse.
Las mezclas (esto es, soluciones) de gases se expresan usualmente en funcin del
porcentaje de un componente del todo, sobre una base de volumen/ volumen.
Los electrolitos son sustancias que se disocian o forman iones en solucin.
Las soluciones de electrolitos se describen de la manera usual, pero debe recordar-
se que muchas de las propiedades importantes de las soluciones, tales como el
descenso del punto de congelacin y potencial osmtico (vase Captulo 3)
no dependen de la concentracin de molculas en solucin sino de la concentra-
cin de las partculas o iones. En consecuencia, el comportamiento de una solucin
depende no slo de la concentracin sino del poder electroltico, o tendencia a
ionizar , del soluto.
CIDOS Y BASES
Las soluciones de cidos y bases se expresan a menudo en funcin de la normali-
dad. Una solucin 1 normal (abreviada 1 N) de un cido contiene suficiente cido
para proveer un equivalente o 1 mol de ion hidrgeno (H +) por litro de solucin a
20C. Igualmente, una solucin bsica 1 N contiene suficiente base para proveer 1
equivalente o 1 mol de ion hidroxilo (OH- ) por litro de solucin a 20C. Ntese
que el cido o la base no necesitan estar completamente ionizados; por lo tanto,
el trmino normal se refiere a la concentracin de la totalidad (esto es, asociados
y disociados) de iones H + o OH- y no a su concentracin real en la solucin. Es
evidente que para un cido que posee un ion H + reemplazable, una solucin molar
es tambin una solucin normal. Sin embargo, una solucin 1 N de Ca(OH), (hi-
drxido de calcio), que contiene 2 iones OH- por molcula, ser solamente 0.5 M,
y una solucin 1 N de H3P03 (cido fosfrico), que contiene 3 iones H' por mo-
lcula, ser solamente 0.33 M.
La concentracin real de iones H + en solucin, contraria a la totalidad de
H + disponible se expresa casi siempre en funcin del pH. El pH es simplemente el
FUNDAMENTOS DE QUMICA 13
logaritmo negativo de la concentracin del ion H' , expresada como su normali-
dad. Se ha determinado que el producto de las normalidades de H' y OH-en agua
pura a 20C es Debido a que la concentracin de H' debe igualar la con-
centracin de OH- a neutralidad, la concentracin de cada ion a la neutralidad es
Jr lo-' N. El logaritmo negativo de lo-' es 7, as que el pH 7 representa
la neutralidad. El pH de una solucin 1 N de H + sera O (el log de 1 =O) y el pH de
una solucin 1 N de OH- sera 14 (puesto que la normalidad de H ' en la solucin
sera ). La mayor importancia de este sistema de medida es que cada unidad
que disminuye en pH indica un incremento de diez veces en contenido de ion H +.
As, un pH 6 es diez veces ms cido que un pH 7, y un pH 1 es 100,000 veces
ms cido que un pH 6. Y no slo eso, sino que el cambio de pH 3 a pH 2 repre-
senta un cambio 10,000 veces mayor en acidez que el cambio de pH 7 a pH 6.
AMORTIGUADORES
La accin de los amortiguadores se ilustra mejor con las siguientes reacciones de
cido clorhdrico (HC1) e hidrxido de sodio (NaOH.) en agua (H, O):
Para 9 m1de: pH Aadir 1 m1de: pH resultante
A. Los cambios normales de pH esperados:
1. Hz0 7 HC1N 1
2. HZ0 7 NaOH N 13
B. Solucin de acetato de sodio es amortiguada junto al cido y cido actico
es amortiguado en contacto con la base; el pH cambia slo ligeramente.
3. Acetato de sodio N 8 HCl N
4. hi d o actico N 3 NaOH N
7
4
C. Mezcla de acetato de sodio y cido actico es amortiguada en contacto
con la accin del cido y la base:
5. Acetato de sodio N 5 HC1N
6. Acetato de sodio N
+cido actico N 5 NaOH N
4.7
5.3
D. Solucin de cloruro de sodio carece de capacidad amortiguadora:
7. Cloruro de sodio N 7 HC1N 1
8. Cloruro de sodio N 7 NaOH N 13
La actividad de una sal amortiguadora depende del hecho de tratarse de la
s al fuertemente disociante de un cido dbilmente disociante; esto es, el cido
actico es un cido dbilmente disociante y el acetato sdico es una sal con gran
poder de disociacin. La accin amortiguante de la sal en contacto con el cido
(ejemplo 3) se explica por lo tanto por la siguiente reaccin:
Na' + acetato- + H' + C1- + Na' -t C1- + H-acetato
sal buffer cido fuerte s.al cido dbil
agregado
14 INTRODUCCI6N Y GENERALIDADES
La sal del cido dbil - el cido actico- se disocia en solucin. La adicin
de iones H + causa la inmediata produccin de cido actico, el cual no baja mu-
cho el pH porque es dbilmente disociante. De igual modo, una solucin del
cido dbil se amortigua en contacto con la base fuerte por la reaccin
H-acetato + Na' + OH- -+ Na' + acetato- + HOH
cido fuertc base fuerte sal
agregada
agua
Una mezcla del cido dbil y su sal se amortigua en presencia de cidos y
bases en accin. Los amortiguadores existen en forma natural, generalmente basa-
dos en bicarbonato, fosfato o cidos orgnicos dbilmente disociantes y poseen la
capacidad de mantener el pH dentro de lmites extremadamente estrechos. El pH
de un amortiguador depende del grado de ionizacin del componente cido y de
las cantidades relativas de ste y la sal. Los amortiguadores orgnicos modernos
tales como el TRI S [tris (hidroximetil) aminoetanol] o TES [N-tris (hidroximetil)
metil-2-aminoetano cido sulfnico~ poseen un amplio rango de control del pH
y son usados frecuentemente para estabilizar el pH de sistemas delicados, tales
como preparaciones de clulas libres y suspensiones de cloroplastos.
COLOIDES
Las soluciones, en las que pequeas molculas estn distribuidas en forma homo-
gnea, cambian imperceptiblemente a coloides a medida que aumenta el tamao
molecular, o conforme conglomerados o agregados de molculas (micelas) aumen-
tan de tamao; y los coloides derivan gradualmente hacia suspensiones o mezclas
en las que la heterogeneidad es tan grande que las fases se separan espontnea-
mente. La$ lmites entre solucin, coloide y mezcla son artificiales. Las micelas
coloidales caen en general CA el rango de 0.001 a 0.1 p (micra) de dimetro y son
normalmente ultlamicroscpicas (es decir, invisibles al microscopio de luz, aun-
que pueden ser visibles con el microscopio de electrones). Las partculas son tan
pequeas que los coloides son estables y no sedimentan bajo condiciones normales,
si bien las micelas ms grandes pueden hacerlo a alta velocidad o ultracentrfuga-
das. Sin embargo, las partculas coloidales son mucho mayores que las partculas
de soluto en una solucin verdadera.
Los coloides se describen mejor por sus propiedades:
1. Las micelas son lo suficientemente grandes para dispersar la luz (el efecto
Tyndall, que dispersa un haz de luz visible en un coloide), mientras que
un haz luminoso es invisible en una solucin verdadera.
2. Las partculas coloidales no atraviesan un filtro de membrana natural,
como lo hacen las soluciones verdaderas.
3. Las partculas coloidales son mayores que las de una solucin verdadera
y por ello difunden ms lentamente.
4. Las partculas coloidales interactan con el solvente o unas con otras,
alterando con frecuencia drsticamente las propiedades de una solucin
a baja concentracin (por ejemplo, la solucin puede gelificar).
FUNDAMENTOS DE QUMICA 16
Los coloides poseen varias propiedades especiales que se originan en el hecho
de que el rea superficial total de las micelas es muy grande. Si una esfera de
material slido de slo 1 cm de dimetro se dispersara en un coloide al 1% con
un tamao micelar promedio, el rea superficial total de todas las micelas en slo
100 m1 del coloide resultante sera aproximadamente el de un campo de futbol.
Esto significa que un rea total enorme est disponible para generar fuerzas de
carga-superficie de atraccin o repulsin. Dado que la mayora de las reacciones
qumicas ocurren en interfases, la reactividad de los coloides puede ser muy grande.
Algunas de las propiedades importantes de los coloides son el resultado
de la adsorcin. Las superficies de las micelas coloidales pueden estar cargadas
elctricamente, positiva o negativamente. Ellas, por tanto, tienden a atraer nubes
de iones o molculas polares de carga opuesta. En los coloides hidrofbicos las par-
tculas carecen de afinidad con el agua y permanecen en el estado coloidal,
principalmente como resultado de la mutua repulsin electrosttica de sus cargas
iguales. Los coloides hidrofilicos, por otra parte, son fuertemente atrados por el
agua y estn rodeados por capas de molculas de agua orientadas. El agua, como
muestra su frmula estructural
- 0 /H +
H
es altamente polar, electropositiva en un extremo y electronegativa en el otro.
Las capas de molculas de agua polarizadas protegen ampliamente las micelas de
un coloide hidroflico contra la coalescencia y la precipitacin. La mayora de
los coloides biolgicos, como el protoplasma, parecen ser coloides hidroflicos
electronegativos; ellos tambin se caracterizan por una dbil atraccin qumica
entre las micelas, que coadyuva a estabilizarlos.
Dos consecuencias importantes de la naturaleza de los coloides son su
susceptibilidad para la precipitacin y la coagulacin, y su capacidad para formar
geles. La coagulacin es la destruccin irreversible de la estabilidad de un coloide.
Cualquier agente que sustraiga las micelas de sus cargas protectoras o de sus capas
de molculas polarizadas causar la coagulacin. Si las cargas se neutralizan por la
adicin de electrolitos, las partculas pueden entrar en coalescencia. El pH en el
cual no existe ninguna diferencia de carga entre la superficie micelar y su medio
circundante se llama punto isoelctrico. A este pH precipitan la mayora de las
soluciones hidrfobas o dbilmente hidrfilas. Las soluciones fuertemente hidr-
filas no coagulan tan fcilmente; se les debe remover su capa adsorbida de mol-
culas de agua polarizadas con un agente deshidratante, como el alcohol.
La formacin de un gel es un proceso totalmente distinto al de la coagula-
cin y no repercute en la destruccin del coloide. Un gel no es ms que un estado
diferente del coloide. En el gel las micelas se asocian de un modo suficientemente
estable como para dar al coloide cierto grado de solidez, pero no tan fuertemen-
te como para provocar la floculacin o la coagulacin. Muchos geles son reversi-
bles. El concepto usual de gel supone una masa ms o menos enmaraada de
micelas fibrilares que sostienen la fase lquida en sus intersticios. Las micelas indi-
viduales estaran ligeramente adheridas en los puntos de interseccin por fuerzas
qumicas dbiles. La cantidad de agua que una estructura as podria retener es
muy grande: un gel proteico como la gelatina retiene hasta 100 veces el peso de
16 INTRODUCCI6N Y GENERALIDADES
su fase slida y un gel de carbohidratos, como el agar, puede vincular hasta 700
veces su peso en agua.
La intensidad con la que un gel puede captar agua es sorprendente: el
protoplasma puede resistir la remocin de agua con una fuerza de varios cientos
de atmsferas (1 atm =1.033 kg/ cm2 ). La imbibicin de agua por una raz en
crecimiento es suficiente como para fisurar una roca o un adoqun (los pioneros
usaban un truco para romper rocas, hacindoles agujeros e insertando en ellos
tapones de madera, que luego se humedecan). La fuerza retentiva de agua de
los geles de polisacrido de las plantas marinas les permite soportar la exposicin
prolongada a condiciones secas entre las mareas, aunque estn expuestas a los
excesos del viento y el sol. Los coloides de ciertos suelos arcillosos retienen agua
con tal intensidad que stos llegan a anegarse; muchas plantas no pueden crecer
en esa arcilla empapada debido a que el oxgeno no puede entrar en cantidad sufi-
ciente para el normal metabolismo de la raz. El agua retenida en un gel acta
principalmente como agua libre, y un gel es, de hecho, slo un coloide ms o me-
nos rgido. Las sustancias que se disuelven en un suelo coloidal tambin se disuel-
ven y difunden en un gel. Sin embargo, algo del agua del gel, las molculas adsor-
bidas directamente en las micelas por fuerzas electrostticas, no son libres y no
pueden difundir o tomar parte en reacciones qumicas o actuar como molculas
del solvente.
ENLACES QUfMICOS
ENLACES ELECTROVALENTES O I ~NI COS. &tos se forman entre elementos de los
extremos opuestos de la tabla peridica. Usualmente un miembro del enlace posee
una capa externa de electrones casi completa y el otro posee slo uno o dos elec-
trones en su capa externa. Todo tomo alcanza un estado ms estable cuando el
tomo que posee unos cuantos electrones externos cede uno o ms al tomo po-
seedor de una capa casi completa. Por ejemplo, una reaccin entre sodio y cloro
puede esquematizarse
El sodio posee un electrn en su capa externa; el cloro posee siete. En el
enlace inico, el sodio ha cedido su electrn con lo cual se carga positivamente y
logra una configuracin estable, en tanto que el cloro ha aceptado el electrn,
alcanzando carga negativa y tambin estabilidad. El enlace qumico en s se debe
a la atraccin electrosttica entre los tomos de cargas opuestas de la molcula.
Los elementos monovalentes transfieren un electrn en una unin qumica de
este tipo; los elementos divalentes transfieren dos electrones, etctera.
Los enlaces inicos SOA no direccionales, es decir, no hay ngulo de liga-
mento fijo entre los dos miembros. Sin embargo, cada enlace posee una longitud
de enlace caracterstica que refleja la configuracin de mxima estabilidad. Los
enlaces inicos se ionizar, usual y prontamente como sigue
FUNDAMENTOS DE QUMICA 17
ENLACES COVALENTES. stos se forman compartiendo electrones para completar
capas electrnicas externas en ambos miembros sin que ningn tomo llegue a car-
garse. El ligamento de molculas orgnicas es principalmente covalente. La combi-
nacin de carbono e hidrgeno para formar metano ilustra este tipo de enlace:
o+
2 ( 3 3 -
Tales enlaces se ionizan fcilmente, y esta es la razn de la gran estabilidad de
los enlaces carbono-a-carbono o carbono-a-hidrgeno en las molculas orgnicas.
Los enlaces covalentes son altamente direccionales: Los tomos miembros
estn libres para rotar sobre el eje del enlace, pero el ngulo de &e es relativa-
mente fijo. En ciertas molculas complejas, particularmente estructuras en anillo,
los enlaces pueden acombarse u obligarse a salir de su ngulo natural. Tales com-
puestos estn en una configuracin forzada y son ms reactivos que los de una
configuracin similar no forzada.
Un tipo especial de enlace covalente denominado enlace coordinado, se for-
ma cuando una molcula dona dos electrones a otra para formar un par compar-
tido. Los protones o iones de hidrgeno raramente se presentan libres en solucin
pero tienden a combinarse coordinadamente con molculas de agua para formar
iones hidronio, como sigue
+
La flecha indica el tipo de enlace y el compuesto que provee el par electr-
nico apareado .
18 INTRODUCCIdN Y GENERALIDADES
ENLACES DE HIDR6GENO. Ciertos tomos como el oxgeno y el nitrgeno, y los
halgenos, son fuertemente electronegativos y poseen una fuerte atraccin elec-
trosttica para los protones. Tales tomos pueden formar enlaces de intensidad
baja o intermedia con tomos de hidrgeno sobre grupos o molculas adyacentes;
stos actan a una distancia considerable, como se muestra:
I
R
I
R
En este ejemplo, un tomo de oxgeno de un cido es vinculado por un
enlace de hidrgeno al tomo de nitrgeno de una amina. El agua es retenida fre-
cuentemente en molculas orgnicas por enlaces de hidrgeno, y muchos rasgos
del comportamiento del agua -por ejemplo sus altos puntos de congelacin y
ebullicin- se deben a ligaduras de hidrgeno entre molculas de agua. Este tipo
de enlace es de importancia crtica en la sntesis y mantenimiento de la estructura
en molculas tales como protenas y cidos nucleicos.
FUERZAS DE ATRACCIdN DgBILES. Varias fuerzas intermoleculares dbiles pueden
actuar para sostener las molculas en laxa asociacin. Bstas se conocen colectiva-
mente como fuerzas de van der Waals, su descubridor. Van der Waals encontr
necesario postular la existencia de fuerzas de atraccin entre molculas de gas para
explicar su comportamiento, distinto al que se pronostica para un gas ideal. Tales
fuerzas varan en intensidad, pero son relativamente dbiles cuando se comparan
con enlaces inicos, covalentes, y aun de hidrgeno. Ellas se producen por la ligera
polarizacin de grupos normalmente no polares, resultantes del movimiento irre-
gular o asimhtrico de los electrones.
OXIDACIdN Y REDUCCI6N
La oxidacin significa prdida de electrones; la reduccin, ganancia de electrones.
El electrn puede estar acompaado por un protn (H+), y el oxgeno puede aa-
dirse o removerse de un compuesto. Varias reacciones caractersticas se ilustran a
continuacin (en cada ejemplo la oxidacin es de izquierda a derecha; la reduc-
cin, de derecha a izquierda):
CH3-CH, + CH2=CH2 + H2 (2- 1 1
etano etileno
ion ferroso ion frrico
CHJ-CH2OH + 1 /2 O2 CH3-CHO + H2O (2-3 1
etanol acetaldehdo
CH3-CHO + 1/ 2 O2 + CH3-COOH (2-4)
acetaldehdo cido actico
FUNDAMENTOS DE QUMICA 19
En el ejemplo (2-3) el oxgeno es reducido por el agua mientras el compuesto
orgnico es oxidado, y viceversa.
Muchas reacciones biolgicas de xido-reduccin involucran pares de elec-
trones pero algunas se llevan a cabo por la transferencia de un solo electrn. La
mayora de las oxidaciones o reducciones biolgicas son catalizadas por enzimas
especficas.
ALGUNOS COMPUESTOS ORGANICOS
Las sustancias orgnicas son estructuras construidas esencialmente sobre un so-
porte de tomos de carbono, cuyo nmero flucta de uno a muchos y se clasifican
fcil y frecuentemente por el nmero de tomos de carbono que contienen. Los
tomos de carbono pueden unirse con uno, dos o tres enlaces covalentes denomi-
nados sencillos, dobles o triples, respectivamente. &stos se representan como
I I
-c-c-
I I
,c=c,
\ 0
Los compuestos saturados tienen un nmero mximo de hidrgenos, es de-
cir, poseen slo enlaces simples. Los compuestos insaturados contienen uno o ms
enlaces dobles o triples. Un compuesto insaturado ha sido oxidado; un saturado
ha sido reducido. Las propiedades especiales de las molculas orgnicas dependen
de su tamao, el nmero y tipo de tomos o grupos sustituidos que posean y el
grado de insaturacin de la molcula. Algunas estructuras bsicas importantes
se sumarizan en la Figura 2-1. Los grupos mayores de compuestos orgnicos se
sintetizan a continuacin:
Los alkanos son molculas orgnicas simples, completamente saturadas
Metano: CH,
Etano: CH3-CH3
Propano: CH3-CH2-CH3
Butano: CH,-CH,-CH,-CH, o CH3 (CH,), CH3
Existen ismeros de estos compuestos (es decir, compuestos que poseen la
misma frmula emprica pero diferente estructura).
n-Butano: CH3-CH2-CHZCH3
Isobutano: CH3-CH-CH3 o CH3 CH(CH3 )CH3
I
CH3
Los alcoholes poseen un grupo "OH sustituido por un hidrgeno con la fr-
mula general ROH, donde R representa cualquier radical orgnico. Los alcoholes
primarios poseen el grupo OH en el extremo de una cadena de carbono; los alcoho-
les secundarios o terciarios poseen el grupo OH unido a un carbono enlazado a
otros dos o tres tomos de carbono.
20
INTRODUCCION Y GENERALIDADES
Figura 2-1. Resumen de estructuras qumicas de importancia bio-
16gica: algunos importantes compuestos de carbono de bajo peso
molecular.
ci do orgdnico
(dcido carboxl i co)
Al dehl do
Cetona
Al cohol
Ami na
Ami no
Arni no6ci do
Ami da
PBptido
l rni na
Imino
Tiol (SH)
t er
R-Cfo , R-COOH
'O H
/ H
R-C=O. R-CHO
/O
R-C-R', R-CO-R'
H
I
I
R-C-OH, R-CH,OH
H
H
I
I
R-C-NH,, R-CH,NH,
H
" NH,
R-CHNH,-COOH
/O
R-C
'NH,. R-CONH,
I
R-C=NH, R-CHNH
=NH
H
I
R-C-SH, R-CH,SH
I
H
H H
I I
I I
R" C" O" C" R' , R" CH,-O" CH,-R'
H H
ster R-C-O--R'. R-COO-R'
Un carb6n, C1
Methane (methyl-)
CH, (-CH,)
Metano1
CH,OH
Formal dehf do
H,C=O
Contina
FUNDAMENTOS DE QUMICA
Figura 2-1 (continuacin)
21
cido frmico
Di6xido de carbono,
carbonato, bicarbonato
h
O
' OH
H C
Dos carbonos, C2
Glicol
Glicoaldehldo
cido glicblico
cido glioxlico
cido oaxlico, Oxalo-
cido adtico
Acetil, Aceto-
Etileno
Vinil-
Tres carbonos, C3
Glicerol
Gliceraldehdo
Dihidroxiacetona
cido glicdrico
cido hidroxipirvico
cido pirvico
cido lhctico
cido enolpirvico
cido mal6nico
Cuatro carbonos, C4
COOH
I
CH,
I
CH,
I
CH3
CH,OH-CH,OH
CH,OH-CHO
CH,OH-COOH
CHO-COOH
COOH-COOH, "c "COOH
CH,-COOH
lo
lo
CH,"C"O, CH3--C-
CH,=CH,
-CH=CH,
CH,OH-CHOH-CH,OH
CH,OH-CHOH-CHO
CH,OH-CO-CH,OH
CH,OH-CHOH-COOH
CH,OH-CO-COOH
CH,-CO-COOH
CH,-CHOH-COOH
CH,=COH-COOH
COOH-CH,-COOH
C1 o carboxilo
designar los
Cq o ycarbn
Bcido butrico
Acidos dicarboxflicos:
Fumrico COOH-CH=CH-COOH
Succnico COOH-CH~-CH,-COOH
(Advi6rtase la simetra
del &ido succnico)
Semialdehfdo succnico COOH-CH,-CH,-CHO
MBlico COOH-CHOH-CH,-COOH
Oxaloac6tico C~00H"CO"CH,"COOH
"~ "" ___ ." ." ________ _____ ".
Contina
22 INTRODUCCI6N Y GENERALIDADES
Figura 2-1 (continuacin)
Cinco carbonos, Cs: cido glutrico
COOH
I
CH2 C2 o a-carbn
I
I
CHZ C4 o y-carbn
I
CI o a-carboxilo
CH2 c3 o @-carbbn 1
COOH Cg o @-carboxilo
> designar los
Sistemas para
carbones
Derivados: bcido a-catoglutrico
cido a-aminoglutrico (bcido glutmico)
Seis carbonos, Q: cidos tricarboxlicos
HzC-COOH
H,C-COOH
HOC-COOH C-COOH
HzC-COOH HC-COOH
I
I
I
I
Ctrico Cisacon ltico
(Advihase la asimetria del Cido dtrico)
HzC-COOH H,C-COOH
HC-COOH
HOCH-COOH O=C-COOH
I I
I I
HC-COOH
lsocltrico Oxalosuccinico
*TambiBn llamado bcido 2-oxoglutBrico
Propanol primario o n-propanol
Propanol secundario o isopropanol
Butanol terciario
H
I
I
CH,--CH,--C--OH
H
H
CH,--C-OH
I
I
CH,
CH,
I
CH3--C-OH
I
CH3
Los tioles son alcoholes de sustitucin en los que el azufre reemplaza al
oxgeno. Los tioles, o compuestos "SH, se encuentran con frecuencia y son impor-
tantes en mol6culas biolgicas porque son fcilmente oxidados a la forma S-S
(puente de disulfuro):
RSH + R'SH e RS-SR'
FUNDAMENTOS DE QUMICA 23
Los teres son alcoholes en los que el H de un grupo OH es reemplazado
por otro radical orgnico
CH~y"H,-O"CH,-CH~,
ter dietllico
Los aldehdos son el resultado de la oxidacin de alcoholes o de la reduc-
cin de cidos. Contienen un tomo de oxgeno unido por un doble enlace, a un
carbono terminal
H
I
C H :,-C=O
acetaldehdo
cetonas son similares a los aldehdos, pero el =O esti ligado a un car-
bono secundario, es decir, que posee dos enlaces con. otros tomos de carbono
O
I I
CH,,"C"CH,,
dimetil cetona
Los cidos poseen un grupo carboxilo que puede resultar de la oxidacin
de un aldehdo. Este es el estado de ms alta oxidacin posible para un tomo de
carbono.
//O
C ti :i-C -O H
cido actico
El H adherido al tomo de oxgeno es el hidrgeno ionizable o acdico.
Los cidos orgnicos pueden formar sales exactamente de la misma manera
que los cidos minerales
Tambin forman numerosos compuestos de sustitucin, como steres y
Los steres se forman por la reaccin de un alcohol con un cido.
amidas.
'o ti
cido metano1
actico
met11 acetato
Debe advertirse que, no obstante su apariencia, sta no es una reaccin
cido-bsica para formar una sal. Los teres no iorlizan en forma apreciable y el
mecanismo de reaccin es distinto al de la formacin de una sal.
Las aminas poseen un grupo amino ("NH, ) que sustituye a un hidrgeno.
24 INTRODUCCIdN Y GENERALIDADES
H
I
CH,-C-NH,
I
t l
etilamina
Las aminas, como los alcoholes, pueden ser primarias, secundarias o ter-
Las midas se forman por la sustitucin de un grupo amino por el OH de
ciarias.
un grupo carboxilo
/
O
CH,--C-NH,
acetamida
Las grasas son un grupo importante de compuestos que poseen el triple
alcohol (trihidroxilo) glicerol como soporte bsico. Cada grupo alcohlico forma
un enlace estrico con un cido, usualmente una cadena recta cida no sustituida
llamada cido graso
H O
I I 1
H-C-O-C-C~~H,~
I
I R
H-C-O"C--C17H~~
I
H"C-O"C"C17H35
I
H
glicerol triestearato
una grasa
El triglicrido resultante debe su propiedad ms importante (su carcter
hidrfobo o lipfilo) a causa de las cadenas largas de residuos de cidos grasos
insustituidos. La longitud de la cadena y su grado de insaturacin (el nmero de
dobles ligaduras) afecta an ms el comportamiento qumico de los cidos grasos
y grasas individuales. Se conocen varios glicridos de posible sustitucin. El grupo
ms importante es el de los fosfolpidos, que poseen una molcula de fosfato que
esterifica uno de los grupos alcohlicos del glicerol, como se muestra:
O
H,C-O-C-C,H2,+l
I 1
I R
H
O
HC-O-C"C,,H~,+~
I
O=P-O-CH
o
H
FUNDAMENTOS DE QUMICA 25
Esto forma una moldcula con un extremo fuertemente polar. El grupo fos-
fato es fuertemente hidroflico, mientras que las cadenas de carbono de los cidos
grasos son fuertemente lipoflicos. Estas moldculas son de gran importancia en la
estructura de membranas, como se ver posteriormente.
Los compuestos cclicos pueden ser totalmente saturados, o insaturados en
diversos grados. El benceno, un anillo de seis carbones, es una molcula insaturada
de la mxima importancia que forma el soporte de muchos compuestos de impor-
tancia biolgica. Convencionalmente se representa as
H
H
Las sustituciones se pueden hacer en cualquiera de los carbones. Si se hacen
dos o ms sustituciones se numeran usualmente desde la posicin que ocupa el
ms reactivo de los grupos.
Los fenoles constituyen un grupo importante de compuestos que poseen
uno o ms grupos OH sustituidos en uno o mltiples anillos bencnicos.
OH
H
fenol
Los compuestos heterocclicos son estructuras anilladas que poseen uno o
ms tomos de nitrgeno u oxgeno en el anillo. Algunos anillos heterocclicos im-
portantes son
piridimidina purina indol pirrol
CARBOHIDRATOS
Los azcares poseen la frmula (CH2 0)n. Existen muchas estructuras posibles que
poseen esta frmula, pero slo un nmero reducido de ellas son de importancia
biolgica. Adems, hay varios azcares cuyas frmulas difieren por la prdida de
una molcula de oxgeno o una molcula de agua, o por la adicin de grupos
como sulfato o fosfato.
Los azcares ms simples, de importancia biolgica, son las triosas.
CH,OH"*CHOH"CHO CH,OH"CO"CH.,OH
gliceraldehdo dihidruxiacetona
*Carbono pt i cament e act i vo.
26 INTRODUCCI6N Y GENERALIDADES
Ambos poseen la misma frmula emprica; sin embargo, puede advertirse que
el gliceraldehdo es una aldosa, un azcar que posee un grupo aldehdo o =O ter-
minal, mientras que la dihidroxiacetona es una cetosa, que posee un grupo cetnico
o un = O secundario.
ESTEREOIS6MEROS. Muchas molculas orgnicas son pticamente activas, es de-
cir que causan la rotacin del plano de polaridad de la luz polarizada. Laactividad
ptica est dada por la existencia en la molcula de un tomo de carbono que
posee cuatro grupos diferentes ligados a ella. Puede verse que el gliceraldehdo po-
see uno de tales carbonos, el carbono medio o segundo, marcado con un aste-
risco. Es, por lo tanto, pticamente activo, mientras que la dihidroxiacetona
no lo es. Una consecuencia adicional de la posesin de ese carbono es que existen
dos configuraciones espaciales posibles del gliceraldehdo; ambas poseen la misma
frmula que se describi anteriormente, pero no son interconvertibles sin reaccin
qumica. Ello se debe a los enlaces covalentes que vinculan los tomos de esta
molcula, que aunque puedan rotar, no pueden doblarse mucho. La frmula co-
rrespondiente a la estructura del enlace de un tomo de carbono no se representa
correctamente mediante
1
3
lo cual sugiere que todos los enlaces estn en un plano a 90" unos de otros. De
hecho, los enlaces son tridimensionales y el ngulo entre dos enlaces cualquiera
es de 109". El resultado es que para la estructura representada anteriormente,
existen dos posibles configuraciones, y se ve que no pueden interconvertirse sin
ruptura y reconstruccin de enlaces.
El azcar ms simple que posee ismeros pticamente activos es el gliceral-
dehdo. Una forma, rota la luz polarizada hacia la izquierda y se llama levorrotato-
ria (el prefijo L- se agrega al nombre para identificar este compuesto). La otra
forma de gliceraldehdo, rota la luz hacia la derecha y se denomina dextrorrotatoria
(este compuesto se identifica mediante el prefijo D-).
Estos ismeros se escriben convencionalmente
CHO CHO
I * * I
I I
HCOH HOCH
CH,OH CH,OH
D-gliceraldehdo L-gliceraldehdo
FUNDAMENTOS DE QUMICA 27
El D-gliceraldehdo es la forma biolgicamente importante. El cid0 L-gli-
crico y los L-azcares son, en general, relativamente de poca importancia biol-
gica, rara vez se sintetizan, y usualmente no son metabolizados por los sistemas
biolgicos.
Los azcares de cuatro carbones, llamados tetrosas y con frecuencia abre-
viados azcares C4, poseen dos carbones asimtricos en la sene aldosa y uno en
la cetosa. Los carbones de una molcula orgnica se numeran usualmente, a partir
del extremo activo de la'molcula; as, una tetrosa, con los carbones numerados,
se representara como sigue:
CH,OH"CHOH-CHOH-CHO
4 3 2 I
Convencionalmente las D-tetrosas y todos los D-azcares poseen la misma
configuracin que el D-gliceraldehdo en el penltimo carbono; es decir, el OH
se escribe a la derecha
CHO CHO
I* *I
HCOH HOCH
""k ""_
"" i*"-7
""t""" L---t------
1 HCOH j ! HCOH I
CH,OH CH,OH
D-eritrosa D-treosa
Desafortunadamente, aunque los dos son azcares, ambos no son dextro-
rrotarios. La D-treosa rota la luz hacia la derecha (+ ), pero la D-eritrosa, debido a
su actividad ptica que resulta tambin de la configuracin estrica del C-2, es
levorrotatona (-). Aunque la mayora de los azcares biolgicamente importantes
poseen la forma D, muchos son levorrotatorios. Los smbolos D- y L-, por tanto,
aluden a la estructura ms que a la actividad ptica de un compuesto.
Mientras que hay dos D-tetrosas en la serie aldosa, hay cuatro D-pentosas,
ocho D-hexosas y dieciseis D-heptosas. La mayor parte de Bstas se encuentran
rara vez en la naturaleza. Las frmulas estructurales y relaciones de las aldosas
y cetosas biolgicamente importantes se muestran en las Figuras 2-2 y 2-3.
LACTONAS. Los azcares de las Figuras 2-2 y 2-3 se representan mediante frmu-
las de cadena recta. Sin embargo, los azcares que contienen cinco o ms carbones
normalmente existen en estructura d ad a. Dos estructuras bsicas comunes son
los anillos de furano (cinco miembros) y el pirano (seis miembros).
furano pirano
Las estructuras en anillo, o lactonas, se llaman furanosa o piranosa, respec-
tivamente. Las frmulas de la configuracin Haworth o estereoqumica para la
glucosa y fructosa se representan como se muestran en las siguientes frmulas
estructurales.
28 INTRODUCCI6N Y GENERALIDADES
6CH,OH
H )x-"\ ,H
I
Ho>c\TH
c3-c2
I I
H OH OH H
a-D-glucopiranosa B-D-fructofuranosa
Figura 2-2. Aldoazcares importantes. La rotaci6n de cada azcar se muestra
mediante (+) y (-) para compuestos dextrorrotatotios y levorrotatorios, res-
pectivamente.
CHO CHO CHO
a a I
I 9 ' I
1 1 HCOH
HOCH
o t I
I I o I
a o I I s a I S
t
u d HCoH a
I
o HOCH O
HOCH HOCH
HCOH HCOH HOCH
I I
HCOH
CH20H
(+) D-gl ucosa (+) D-manosa ( + I D-gal actosa
CHO
I
I
I
(Ser i e-L) I
HCOH
HCOH
HCOH
I
CH,OH
(-) D-ri bosa
CHO
I
I
I
I
HOCH
HCOH
HCOH
CH20H
I -) 0-arabi nosa
CHO
I
CHO
HCOH
I
I
I
I
HOCH
HCOH
CH,OH
(+) D-xi l osa
CHO
I
I
I
I
HOCH
HOCH
HCOH
CH20H
(-) D-lixosa
CHO
I
HCOH HOCH
I I
HCOH HCOH
I
CH,OH
I
CH,OH
( - ~) D-eri t rosa (+) D-treosa
( L-gl i ceral dehl do)
CHO
I
I
HCOH
CH,OH
(+) D-gl i ceral dehIdo
FUNDAMENTOS DE QUMICA
29
Figura 2-3. Cetoazcares importantes.
CH,OH
C=O
I
I
I
I
I
HOCH
HCOH
HCOH
HCOH
CH20H
D-sedoheptulosa
v
O-psicosa
t I
CH,OH
c=o
I
I
I
I
HOCH
HOCH
HCOH
t
I
I
HCOH
CH,OH
c-
D-manocetoheptul osa
CH20H
c=o
I
I
I
I
I
HOCH
HCOH
HCoH t t
CH,OH
D-fructosa
v
CH,OH CH,OH
I I
C=O
HCOIi
HCOH
I
I
c=o
I
HOCH
I
HCOH
I I
CH,,OH
CH,OH
D-ri bul osa
D-xi l ul osa
v
CH,OH
c=o
I
I
HCOH
D-eri trul osa
CH,OH
I
C=O
CH20H
DihidroxiaCetOna
I
30 INTRODUCC16N Y GENERALIDADES
DISACARIDOS Y POLISACARIDOS. La glucosa y la fructosa se unen mediante un en-
lace anhidro (por eliminacin de agua) para formar el importante disacrido saca-
rosa. La frmula se muestra a continuacin.
CH,OH
I
I 41
H OH
OH H
sacarosa
Advirtase que la estructura lactnica en anillo aade otro carbono asi-
mtrico que previamente no se presenta en la glucosa en C-1 y en la fructosa en
C-2. Las dos configuraciones posibles (en la glucosa, de los grupos H y OH; en la
fructosa de los grupos OH y CH,OH) se llaman (Y y p. En la sacarosa la glucosa
est en la forma (Y y en la fructosa, en la forma p. El enlace est entre el C-1 de la
glucosa y el C-2 de la fructosa, de manera que la molcula resultante puede des-
cribirse como a-D-glucopiranosa-l:2-p-D-fructofuransida.
Otros importantes disacridos son la maltosa (a -D-glucopiranosa-1 :4-D-glu-
copiransida) y la celobiosa (p-D-glucopiranosa-l:4-D-glucopiransida). astos
tienen relacin con los polisacridos vegetales ms importantes, almidn y celu-
losa, como se muestra en la Figura 2-4. La diferencia importante entre estos dos
polisacridos se presenta a continuacin. El almidn, un carbohidrato de reserva
metablicamente activo, est formado de largas cadenas de unidades de glucosa
unidas mediante enlaces a -1 :4 y cadenas laterales ocasionales unidas por enlaces
a-1:6. La celulosa, un carbohidrato estructural metablicamente inactivo est
formado de largas cadenas de unidades de glucosa articuladas por enlaces p-1:4.
Otros disacridos y oligosacridos de importancia biolgica se enlistan en la Ta-
bla 2-1 y los polisacridos se resumen en la Tabla 2-2.
ALCOHOLES AZOCARES, ACID- uR6NIcoS Y ACID- AZOCARES. El oxgeno al-
dehdico o cetnico de los azcares puede reducirse en un alcohol, y producir
alcoholes polihdricos como se muestra en la Figura 2-5. Los alcoholes polihdri-
cos estn con frecuencia en la naturaleza como azcares de reserva, particular-
mente en plantas primitivas y frutos de plantas superiores. Los cidos iunicos
se derivan de hexosas por la oxidacin del carbn sexto a un cido. Ciertos ci-
dos urnicos importantes, localizados en compuestos estructurales y mucilagi-
nosos de plantas se muestran en la Figura 2-5. La oxidacin del primer carbn
de la glucosa produce el cido azcar, el cido glucnico. El fosfato que deriva del
cido glucnico es importante en el metabolismo respiratorio. La relacin de la
glucosa en sus formas reducidas y oxidadas se muestran en la Figura 2-6.
FUNDAMENTOS DE QUMICA
31
Mal tosa
a -D-glucopiranosa-1, 4-D-glucopiran6sida
(enlace a-1.4)
Al mi d6n
H OH
H OH
Celobiosa 43
P-D-gl ucopi ranosa-l ,4-D-gl ucopi ran6si da
6
I
6
1
I
6
Celulosa
(enlace p- l , 4)
Figura 2-4. Estructuras de disacdridos importantes y su relaci6n con los poli-
sacaridos.
32 INTRODUCCIdN Y GENERALIDADES
Figura 2-5. Estructuras de alcoholes polihdricos y Bci-
dos urbnicos comunes.
Rel aci onados con Rel aci onados con Rel aci onados con
l a glucosa
lamanosa l a galactosa
CH,OH
I
I
I
I
I
HCOH
HOCH
HCOH
HCOH
CH,OH
Sor hi t ol
CHO
I
I
I
I
I
HCOH
HOCH
HCOH
HCOH
COO H
cido
glucurdnico
CH,OH
I
I
I
I
I
HOCH
HOCH
HCOH
HCOH
CH,OH
Mani t ol
CHO
I
I
I
HOCH
HOCH
HCOH
I
I
HCOH
COOH
ci do
manur6ni co
CH,OH
I
I
I
I
I
HCOH
HOCH
HOCH
HCOH
CH,OH
Gal act i t ol
CHO
HCOH
I
I
I
I
I
HOCH
HOCH
HCOH
COO H
cido
galacturdnico
Tabla 2-1. Lista de oligosacridos de importancia biolbgica.
DI SACAR IDOS Gencianosa (glucosa-1 :6-fructosa-2:1-
Glucosa + glucosa glucosa) genciobiosa + fructosa
Maltosa (-glucosa1 :4-glucosa) o sacarosa + glucosa
Celobiosa (-glucosa-1 :6-glacosa)
Rafinosa (galactosa-l:6glucosa-l:2-
Genciobiosa (glucosa-1 :6iglucosa) fructosa) melobiosa +fructosa
Trealosa i-glucosa-1 : 1 -glucosa)
o sacarosa +galactosa
Lactosa (-galactosa-1 :4-glucosa) TETRASACRI DO
Melobiosa (-galactosa-l:6-glucosa)
Galactosa +glucosa
Estaquiosa (ga1actosa:galactosa:glucosa:
fructosa) rafinosa + galactosa
Glucosa + fructosa
Sacarosa (-glucopiranosa-l:2- -fructo- PENTASACRI DO
Turanosa (-glucopiranosa-l:3- -fructo-
g1ucosa:fructosa)
furanosa) Verbascosa (ga1actosa:galactosa:galactosa:
piranosa) estaquiosa + glactosa
T R I SACR I DOS ANHlDRlDOS DE DI-, TRI - Y
Melezitosa (glucosa-1 :3-fructosa-2: 1 - POLI F R UCTOSA
glucosa) turanosa + glucosa
FUNDAMENTOS DE QUMICA
33
Tabla 2-2. Algunos polisacridos importantes.
Tipos y ejemplos Uso y fuente
Homopolisacdridos (un azcar)
Pentosana
arabana, xilana
Hexosanas
glucanas
almid6n (-1 :4-y -1 :6-glucosa)
celulosa (-1 :4-glucosa)
inulina (1 :2-fructofuranosa)
fructosanas
galactosanas
mananas
laminarina (-1 :3-glucosa)
Heteropolisacdridos (m& de un azcar)
Pentosanas, vgr., araboxilana
Hexosanas, vgr., galactomanana
Mixtos, vgr., galactoarabana
cidos urbnicos
Poliur6nicos
Acido pktico (1 :4-D-Bcido galactur6nico)
&ido alglnico (Acidos gulur6nico y manur6nico)
Azcares mds dcidos ur6nicos
Otros derivados de azcar
Gomas y mucilagos vegetales
Quitina (2-acetilaminoglucosa)
Fucoidina ( fucosa sulfatada)
Agar y carragenina (galactosa sulfatada)
Estructural
Reserva
Estructural
Reserva
Estructural
Reserva (nueces)
Reserva (algas marinas)
Estructural
Estructural y reserva (alga marina)
Estructural (hongos)
Estructural (alga marina)
Estructural y reserva (alga marina)
Figura 2-6. Productos de oxidaci6n
o reducci6n de la glucosa.
CH,OH
I
I
(HCOH),
CH,OH
Mani t ol
t Reduci do en C1
CHO
I
(HCOH),
CH,OH
Gl ucosa
Oxidado/ 1 c6 \ en C1 Y c6
Oxi dado en
COOH CHO
I I I
I I I
COOH
(HCOH), (HCOH), (HCOH),
CH,OH COOH . COOH
ci do gluc6nico ci do glucurnico ci do sacrico
34 INTRODUCCI6N Y GENERALIDADES
AMINOACIDOS, PBPTIDOS Y PROTE~NAS
Aunque los carbohidratos constituyen un grupo mayor de polimeros estructura-
les y de reserva, el grupo de mxima importancia de polimeros biolgicos es, sin
duda, el de las protenas. Estas molculas son responsables de casi todas las pro-
piedades de la vida, tal como la conocemos.
Existen unas cuantas clases de protenas fcilmente distinguibles, y cada
clase contiene un nmero enorme de compuestos individuales de alto peso mole-
cular y gran complejidad qumica. Todas las protenas poseen la misma estructura
bsica: son polimeros compuestos de gran cantidad de aminocidos individuales
ligados unos con otros mediante enlaces peptdicos, como se muestra
c""_
.
'.
H O
I / /
H/ /kH"\,
R-C-C
N I \OH
I
1, HO /
\,-,x
I
C-C-R'
n/ I
H O
I / /
R-C-C
N I \OH
H/ I /kH"\ !
I
i, HO /
\,-,x
n/ I
C-C-R'
dos aminocidos forman un
enlace peptidic0 por sustraccin
de agua
extremo N-terminal extremo C-terminal
tres aminocidos forman
un tripptido
Los grupos R pueden fluctuar desde H en el aminocido ms simple, la
glicina, a uno de los muchos radicales orgnicos ms o menos complejos. Se sabe
de la presencia de veinte o veintin aminocidos en las protenas, as como dos
amidas, glutamina y asparagina. Las plantas contienen muchos otros aminocidos
que se encuentran libres pero no se sabe si se integran a las protenas. Un sumario
de los aminocidos importantes en una relacin estructural aproximada se pre-
senta en la Figura 2-7. Los 23 aminocidos y amidas que comnmente se encuen-
tran en protenas vegetales estn marcados con un asterisco.
Todos los aminocidos se comportan como cidos y como bases, debido a
que el grupo amino es una base fuerte y el grupo carboxilo, un cido fuerte.
R
HOP + +H"N-C-C + H+
I /O
H/ ' OP
base cido
Ciertos aminocidos, como arginina o lisina son ms fuertemente bsicos
porque contienen grupos amino (NH,) extras; otros, tales como el cido asprtico
y el cido glutmico son ms fuertemente cidos debido a sus grupos carboxilos
(COOH) adicionales. El pH, al cual la carga positiva neutraliza exactamente a la
carga negativa, se llama punto isoelctrico, o pK del cido. Las protenas tambin
muestran un pronunciado punto isoelctrico. En el pK, las protenas son muy sen-
FUNDAMENTOS DE QUhICA 36
sibles a la precipitacin porque no poseen la proteccin contra la aglomeracin
que da la presencia de la carga elbctrica.
La individualidad de cada molcula proteica est dada por su estructura
primaria, que se define como los monmeros ( o residuos) de aminocidos especi-
ficos de los cuales se compone la protena y el orden en que se disponen estos
aminocidos. Un polmero como la molcula proteica tiende a enrollarse y ple-
garse sobre s mismo. Puesto que las protenas poseen grupos NH2 y grupos
COOH que se repiten regularmente, tienden a formar enlaces de hidrgeno inter-
nos. Debido a la configuracin de los enlaces y a la forma y tamao de los mon-
meros, existe la tendencia a que se formen enlaces de hidrgeno entre el oxgeno
de un residuo y el nitrgeno del cuarto residuo siguiente, a lo largo de la cadena.
El resultado es que la cadena tiende hacia la formacin de una hlice a , altamente
estabilizada por enlaces de hidrgeno, como se muestra en la Figura 2-8. Esta
configuracin se denomina estructura secundaria de la protena.
Figura 2-7. Estructura de aminohcidos comtlnrnente encontrados
en plantas. Los que se sabe que Ocurren en protenas se indican
con un asterisco ( *l .
*Gl i ci na
' Al ani na
'Serina
NHZ
I
CH,-COOH
NH2
I
CH,-CH-COOH
NH,
I
CH,OH"CH-COOH
' Feni l al ani na
' Ti rosi na
NH2
Di hi droxi feni l al ani na (dopa)
HO
*Tri pt of ano
NH,
I
CH,-CH-COOH
I
H
Con tin,
36 INTRODUCCI6N Y GENERALIDADES
Figura 2-7 (continuacin)
NHZ
I
'Histidina CH,"CH-COOH
(AdviBrtase la relacin con la arginina) I
*Cistelna
'Cistina
rz
cido a-amino butlrico
'Metionina
Etionina
Homoserina
"Treonina
" ci do asphrtico
'Asparagina
p-alanina
C- N
H- C, , , C- H
N
I I I I
I
H
NH,
I
HS-CH,"CH-"COOH
CH,-CH-COOH
S
I
I
s NH2
I /
CH,"CH-COOH
NH2
CH, - CH2 - CH"C0OH
!
NH,
I
CH~"CH2"CH-COOH
S-CH,
I
NH,
~
CH,~-CH,"CH-COOH
S-CH,-CH,
I
NH,
I
NH2
I
NH,
I
CH20H-CH,-CH-"COOH
CH,"CHOH-CH-COOH
COOH"C~2"CH-COOH
NHZ
I
NHZ
I
CONH2-CH,-CH-COOH
COOH--CH2-CH,
Contina
FUNDAMENTOS DE QUfMICA
Figura 2-7 (continuacin)
37
cido azet i dn car boxl i co
*ci d0 gl ut ami co
(Var i os deri vados
y-hi dr oxi , y-met i l ,
y-met i l i na)
*Gl ut ami na
ci do y-ami no but i r i co
*Pr ol i na
*Hi dr oxi pr ol i na
(Advi Brtase l a rel aci n con
or ni t i na, argi ni na y ci t r ul i na)
* Val i na
* Leuci na
Norval i na
Or ni t i na
NH2
I
COOH-CH,-CH,-CH-COOH
NH2
I
NH2
I
CONH,-CH,-CH,--CH-COOH
COOH"CH,-CH,--CH2
CH2-CH,
I 1
CTZ ,CH-COOH
NH
HO-CH-CH,
I 1
\ 2/
CH CH-COOH
NH
CH-CH-COOH
NH2
CH3)CH--CH2-CH-COOH I
CH,'
CH3-CH2-CH2-CH-COOH
NH2
i
CH2"CH2-CH2-CH-COOH
I
Contina
38 INTRODUCCI6N Y GENERALIDADES
Figura 2-7 fcontinuacibn)
*Arginine
Citrulina
*Isoleucina
Norleucina
Lisina
cido pipeclico
CH,"CH,"CH~-CH"COOH
I
I
I
NHZ
NH
C=NH
NH,
I
CHz-CHz-CH,"CH-COOH
I
I
I
NHZ
NH
c=o
NHZ
I
CH,-CH,-CH-CH-COOH
I
CH3
NHZ
I
CH~-CH,-CHz-CHz-CH-COOH
NHZ
I
CH,-CH,-CH,-CH,-CH-COOH
I
NHZ
CH
' 2
CHZ CH,
I I
CH: ,CH"COOH
NH
La forma helicoidal tiende a ser relativamente inelQtica y rgida, as que las
protenas que poseen extensas hlices asumen usualmente una forma fibrosa.
Adems, la cadena de polipptido puede plegarse y comprimirse en forma muy
semejante a un filamento enmaraado. Con todo, estas estructuras comprimidas
no son fortuitas; se forman con toda precisin y se mantienen unidas mediante
numerosos y diferentes tipos de fuerzas de atraccin, desde las dbiles van der
Waals y los enlaces de hidrgeno y enlaces covalentes como los puentes de di-
sulfur0 (-S-S-). La mayora de tales ligamentos involucran las cadenas laterales
de aminocidos y constituyen lo que se llama estructura terciaria de la mol6cula de
protena. Se conoce la estructura primaria de numerosas protenas. Las estructu-
ras secundaria y terciaria son ms difciles de determinar y se han dilucidado en
slo unas pocas protenas. Un ejemplo de una protena cuya estructura completa
es conocida, es la mioglobina, que se muestra en la Figura 2-9.
FUNDAMENTOS DE QUWICA
H H
1 I
Extremo N-terminal H- N-
I
? N
O
I
R6
O
Extremo C-terminal
39
Figura 2-8. Diagrama de una hB-
lice proteica, que muestra los
enlaces de hidr6geno (Ilneas
punteadas). Esto es en realidad
un octopdptido (que contiene
ocho aminodcidos). Una mol&
cula de proteina contendrla mu-
chos mas.
Figura 2-9. Estructura de l a mioglobina, una mol kul a proteica que contiene
153 amino4cidos y un grupo hem.
40 INTRODUCCION Y GENERALIDADES
ACIDOS NUCLEICOS
Los cidos nucleicos son los ltimos grupos mayores de compuestos biolgicos
que se examinarn. Estos son polmeros de nucletidos, de la misma manera que
las protenas son polmeros de aminocidos. Cada nucletido consiste en una base
y un azcar esterificado con una molcula de cido fosfrico. La combinacin
base-azcar, sin el cido fosfrico, se llama nuclesido. Existen dos azcares, ribo-
sa y desoxirribosa (carente de un tomo de oxgeno), y los nucletidos que los
contienen se denominan ribonucletidos y desoxirribonucletidos, respectivamen-
te. El cido ribonucleico (RNA) es un polmero de ribonucletidos (poseedores del
azcar ribosa), mientras que el cido desoxirribonucleico (DNA) es un polimero
de desoxirribonucletidos (poseedores del azcar desoxirribosa). Las bases orgni-
cas son adenina, uracilo, citosina y guanina en el RNA; mientras que la adenina,
timina, citosina y guanina ocurren en el DNA. Los monmeros se unen entre s
mediante enlaces estricos con los grupos fosfatos del C-5 de un azcar al C-3 del
siguiente. La estructurz. de los ribonucletidos y los desoxirribonucletidos, as
como el enlace de sus polmeros se muestran en la Figura 2-10.
Los ribonucletidos son importantes en las principales reacciones de trans-
ferencia de energa del metabolismo celular. Un segundo y tercer grupo fosfato,
pueden esterificarse sobre el primer grupo fosfato que se:une , a l C-5 de la mitad
ribsica del nucletido. Una cantidad mayor de energa se requiere para la snte-
sis de estos steres fosfato, particularmente el tercero. Inversamente, se libera
mucha energa en la hidrlisis de estos enlaces. As pues, la energa de las reaccio-
nes de oxidaci6n celular puede almacenarse en estos compuestos y transportarse
a otras partes de la clula y ser liberada ms tarde para las reacciones de sntesis
o para desempear trabajos (ver Captulo 5). Los ms importantes ribonucletidos
son los de la serie adenosina: monofosfato de adenosina (AMP), difosfato de
adenosina (ADP) y trifosfato de adenosina (ATP), que se muestran en la Figura
2-11. Los otros ribonucletidos y desoxirribonucletidos tambidn producen ste-
res di- o trifosfato. La formacin del RNA y el DNA tiene lugar por la unin de
los Bsteres triples de los nucletidos; eliminndose dos grupos fosfatos en la con-
densacin de cada nucletido.
El DNA es el portador de la informacin gentica de la clula. Los cordones
paralelos del DNA estn fuertemente unidos entre s mediante enlaces de hidr-
geno entre los grupos amino y carbonilo (C=O) de bases adyacentes de tal manera
que una purina siempre se une con una pirimidina. La adenina siempre se enlaza a la
timina y la citosina a la guanina. Estos pares de bases se llaman complementarios;
se eslabonan solamente una a otra porque su tamao y estructura molecular per-
miten un ajuste exacto slo entre bases complementarias. La estructura as forma-
da se arrolla iuqgo en una doble hlice debido a la formacin de enlaces de hidr-
geno, como se muestra en la Figura 2-12. La doble hlice puede autoduplicarse
con toda precisin porque las bases siempre se aparean del mismo modo, puesto
que slo las bases complementarias pueden hacerlo. As es que cuando se forman
dos nuevos cordones, usando cada uno de ellos la mitad de una doble hlice ori-
ginal como modelo, se forman dos copias exactas de la misma, como se muestra
en la Figura 2-13. Este proceso ocurre durante la divisin celular.
La informacin contenida en el DNA es leda mediante la sntesis de un
cordn de RNA, que es complementario respecto a la parte del cordn de DNA
que forma su modelo (excepto que la adenina del DNA se complementa con el
uracilo del RNA, en vez de la timina). Este proceso de ilustra en la Figura 2-14.
FUNDAMENTOS DE Q U ~ I C A 41
Figura 2-1 O. Estructura de componentes de 6cidos nucleicos.
OH
I
Bases pricas
H
Adenina
H
Guanina
OH
I
N
I I 1
//c\cH
Ho/C\N/CH
Uracil0
I
N 4c\ C-CH3
I I
HO
Timina
OH
I
c-c
OH OH
I 1
fosfato - azcar - base
azocar ___ base
I
HO-P-O- azcar -- base
I
I
O
HO-P-O-azcar - .- base
I
I
O
HOP-O- azcar - base
!
Citosina
Nuclebtido
Nuclebsido
Acido nucleic0
El RNA as formado se llama RNA mensajero (RNAm). La informacin gentica
est contenida en tripletes de nucletidos, o codones, cada uno de los cuales codi-
fica un aminocido especfico, como se muestra en la Figura 2-15.
Los detalles son los siguientes: Los codones son ledos por el RNA soluble
(RNAs) de bajo peso molecular tambin conocido como RNA de transferencia
(RNAt). Cada RNAt posee un triplete de bases que complementa exactamente
a un codn. Cada RNAt especfico, poseedor de un codn especfico, es capaz de
combinarse con el aminocido especfico requerido por e' codn. As es que los
42 INTRODUCCI6N Y GENERALIDADES
OH OH OH H
/ I l l
HO- P " O" P " O~P " ~" C
11 11 11 I 'c
I I
H H Figura 2-1 1. Adenosln trifosfato.
aminocidos requeridos se alinean en la secuencia ordenada por el RNAm, donde
en forma sucesiva se eslabonan qumicamente y se liberan de los cidos ribonu-
cleicos de transferencia. El pptido resultante posee precisamente la secuencia de
aminocidos requeridos por la informacin gentica del DNA original, conforme
se trasmite por el RNAm y se lee por el RNAt. Aunque los aminocidos, los
cidos ribonucleicos de transferencia y las enzimas que forman los complejos
Figura 2-12. La doble helice del DNA.
FUNDAMENTOS DE QUMICA
Dobl e cor dn ori gi nal
c % A A
43
Figura 2-13. Duplicacin del DNA.
Dobl es cordones
nuevos
DNA Nuevo RNAr n
Figura 2-14. Transcripcin del DNA.
\
RNA m en f or maci n
44
INTRODUCCIdN Y GENERALIDADES
Ami no-
ci do
Ami no-
ci do
Ami no-
ci do
I l l I l l 1 1 1 1 1 1 I l l mRNA
A A U C G U U A G C U G A U A
Fi gura 2-15. Los aminocidos se alinean para articularse en protenas rnedian-
'te mol6culas de RNAt que "leen" los codones del RNAm.
aminocidos-RNAt estn libres en el citoplasma, las enzimas y el dispositivo para
el verdadero montaje de las protenas estn contenidos en partculas diminutas
llamadas ribosomas (ver pgina 57). Se sostiene que los ribosomas se mueven a
lo largo de los cordones de RNAm, leyendo la informacin (esto es, alineando los
complejos aminocidos-RNAt conforme se necesiten) y formando el polipptido
o la protefna, que luego se liberan. Los RNAt, habiendo entregado sus aminoci-
dos a la cadena peptdica, salen nuevamente para constituir otros complejos con
molculas de sus aminocidos especficos, y estn listos para entrar otra vez y entre-
gar otro aminocido a la cadena peptdica, conforme a las directivas del RNAm.
Este bosquejo de la sntesis proteica ha sido muy breve y slo se intent
a manera de base para el estudio posterior de los mecanismos genticos que con-
trolan el metabolismo y el desarrollo. Si se tiene dificultad para comprender este
aspecto de la bioqumica se pueden leer uno de los tantos excelentes textos intro-
ductorios sobre biologa celular o molecular.
LECTURAS ADICIONALES
El material cubierto en este capitulo est tratado con mayor profundidad en textos actualizados
de qumica orgnica o bioqutmica.
Bronk, J.R.: Chemical Bi ol ogy. Macmillan Publishing Co. Inc., Nueva York, 1973.
The Molecular Basis of Li fe (Readings from Scientific American). W.H. Freeman & Co., San
Watson, J.D.: The Molecular Biology of the Gene. Benjamin. Menlo Park, Calif., 1970.
White, E.H.: Chemical Background for the Biological Sci ences. Prentice-Hall. Englewood Cliffs,
Francisco, 1968.
N.J., 1970. Foundati ons of Modern Biology Series.
Captulo 3
LA CLULA
LA TEORA CELULAR
La mayora de los sistemas biolgicos estn formados por unidades llamadas clu-
las. Cada clula es una entidad viva completa; la biounidad ms pequea capaz
de mantener una existencia independiente. Este concepto (una de las doctrinas b-
sicas unificadoras de la biologa) fue elaborado por Schleiden y Schwan en 1839,
ms de 150 aos despus del primer reconocimiento evidente de la naturaleza celular
de las plantas superiores, por Robert Hooke. La nica excepcin a este concepto
son los virus, que no tienen capacidad de vida independiente, debido en gran parte
a su lapso de vida, pues deben asociarse y vivir dentro de clulas a fin de repro-
ducirse, as que no son, en el sentido ms amplio, verdaderos organismos vivos.
Las clulas de los organismos ms simples son capaces de realizar todas las
actividades y manifestaciones vitales. En organismos ms complejos las clulas
pueden alcanzar un alto grado de especializacin, para realizar solamente activi-
dades especficas. Necesitan, por lo tanto, de la capacidad para comunicarse unas
con otras, de manera que las actividades de grupos de clulas especializadas pue-
dan coordinarse y los productos de un proceso metablico de un grupo de ellas
puedan transferirse a otro grupo para promover el metabolismo. Cada una de
las clulas de un organismo multicelular porta inicialmente, y quiz por toda su
vida, la totalidad de la informacin del organismo. Obviamente, no es posible
extraer o utilizar toda esta informacin inmediatamente, por lo tanto, la clula
debe tener algn sistema de seleccin y ciertas instrucciones externas que la habi-
liten para seleccionar la informacin apropiada.
Es evidente que el organismo influye sobre el patrn de desarrollo de las
clulas individuales o, en otras palabras, el comportamiento de una de ellas es
influenciado por las otras. Este es un hecho importante y bsico en el estudio y
comprensin de la fisiologa vegetal. Para comprender el comportamiento de un
organismo, deben conocerse ntimamente los detalles del comportamiento y capa-
cidades de las clulas que lo constituyen. Inversamente, el estudio de las activida-
des y reacciones de una sola clula o de sus partes es una pretensin estril, a
menos que se la estudie en la perspectiva de todo el organismo del que es una
parte y el cual controla y dirige su comportamiento y desarrollo.
Las clulas, y los organismos formados con ellas, pueden dividirse en dos
tipos: las procariticas (pro, antes; haryotic, que posee ncleo; por 10 tanto, C &l -
46 INTRODUCCIdN Y GENERALIDADES
las que carecen de ncleo organizado o membrana nuclear) y las eucariticas ( eu,
bueno; por lo tanto, clulas que poseen un ncleo bien definido separado del
citoplasma por una membrana). Las bacterias y las algas verde-azules son proca-
riotes y todos los organismos superiores son eucariotes. Las clulas procariti-
cas son pequeas, cercanas a 1 p de dimetro y muestran comparativamente
escasa organizacin estructural. Las c8ulas eucariticas son por lo regular mucho
ms grandes (10-100 p o mayores) y poseen una compleja estructura int,erna,
inclusive numerosos organelos de funcin especfica. Aunque las clulas pueden
llegar a ser ms y ms complejas con el transcurso del tiempo, es probable que
sean tan simples y sencillas como la complejidad de su comportamiento lo re-
quiera. Los sistemas biolgicos tienden a menudo a seguir ei principio de la
navaja de Occam: la manera ms simple y directa de hacer algo es l a ms idb-
nea. Las formas costosas (en trminos de energia y material) y complicadas de
hacer las cosas, no tienen la probabilidad de sobrevivir a la evolucin como las
ms simples, para el mismo fin. Este razonamiento (realmente no merece ser
calificado de principio) ha sido til en el estudio y comprensin de los corn-
plejos sistemas de control intercelular e jntracelular de organismos pluricelulares.
LA CBLULA Y SUS PARTES
En la Figura 3-1 se muestra una micrografa electrnica de una clula, junto a
diagramas de una tpica clula vegetal que muestra sus diversas partes. A estos dia-
gramas se referir toda la subsecuente discusin. Las clulas vegetales contie-
nen plastidios de manera caracterstica (aunque no siempre), y generalmente
poseen una pared celular bien definida, que puede estar diversamente engrosada.
Con excepcin de esto y de la ausencia de un centrosoma en las clulas de las
espermatofitas, las clulas vegetales no difieren sensiblemente de las animales.
E,l tamao relativo de las partes celulares se muestra en la Tabla 3-1. Las
cifras dadas all son solamente aproximadas, pero sirven para dar una idea de
las relaciones de tamao de una clula y sus partes. Las unidades de medida que
se usan se muestran en la Tabla 3-2.
Tabla 3-1. Relacin del tamao aproximado
de las clulas y sus partes.
Rango de tamao
usual aprox.
-~ ~ ~~~~
Cdlula
Ncleo
Cloroplasto
Mitocondria
Peroxisoma
Ribosoma
Retculo endoplsmico
Unidad de membrana
Molcula proteica
10 p-10 mm
5-30 p
2-6
0.5-5 1-1
1 P
250 a
200 A
75 A
20-100 A
Tabla 3-2. Unidades con l as que se miden el
tamao de clulas y partculas subcelulares.
1 milmetro (mm) = io3 micras ( p)
=lo6 mihmicras (mp)
o nanmetros (nm)
= I O7 unidades
Angstrom (a)
1 y =I O3 my (nm)
=104
1 mp (nm) = I O A
LA CLULA 47
PARED CELULAR. La pared celular no funciona como barrera fisiolgica, su fun-
cin principal es mecnica; es soporte de la clula y estructuras pluricelulares e
impide la ruptura de las membranas externas como resultado de las presiones
hidrostticas que se producen dentro de la clula. Adems, las plantas carecen de
mecanismos directos, tales como la fagocitosis, para hacer frente a organismos
patgenos invasores que podran penetrar a travs de heridas y aberturas natura-
les. Es probable que la fuerte resistencia de las plantas a la infeccin de tales inva-
sores se deba en gran parte a sus paredes celulares relativamente impenetrables.
La pared celular ms delgada y simple de las plantas es la que encierra el
protoplasma de las clulas meristemticas, la pared primaria. Luego de la divisin
celular se forma una pared primaria entre las dos clulas resultantes, la cual se
desarrolla de la placa celular (que se muestra en la Figura 3-2), fina estructura
formada por la coalescencia de muchas vesculas citoplsmicas que derivan del
aparato de Golgi (ver pgina 57). El contenido de estas vesculas, que forman
la lmina media de la nueva pared en formacin, consiste, principalmente, de
pectina y pectato de calcio, sustancias fundamentades de la lmina media. Cordo-
nes de citoplasma llamados plasmodesmos penetran usualmente la pared celular
va numerosos orificios o aberturas, de modo que los contenidos celulares de
clulas adyacentes pueden, de hecho, estar en intimo contacto. Se ha sugerido,
asimismo, que elementos del retculo endoplsmico penetran la pared celular o
se prolongan con la plasmalema, pero esto no se sab'e en definitiva.
Tan pronto se forma la placa celular, la celulosa comienza a depositarse
como largas y finas varillas, o microfibrillas, para formar la pared primaria, la cual
est construida principalmente de celulosa. Al principio estas microfibrillas son
usualmente isotrpicas (sin orientacin preferente u ordenada) como se muestra
en la Figura 3-3A. Sin embargo, las paredes continan creciendo, tanto en rea
como en grosor, a medida que las clulas se alargan o dividen. El crecimiento de
la pared celular determina que las microfibrillas se deslicen unas sobre otras y
adquieran una orientacin acorde con la direccin del crecimiento. Las fibrillas
que se forman despus se depositan usualmente bajo un patrn de alta orientacin,
como se ilustra en la Figura 3-3B.
Indudablemente, las microfibrillas de celulclsa constituyen los principales
elementos de fuerza y rigidez de las clulas, impidiendo que se hinchen, estallen
o revienten a causa de la presin de sus contenidos, aunque ellas no son las ni-
cas constituyentes de las paredes celulares. Las microfibrillas de celulosa estn
embebidas en un gel amorfo consistente en gran parte de polmeros distintos al
almidn y la celulosa, principalmente pectinas JT hemicelulosa junto con una
pequea cantidad de protena. Conforme la clula madura, la pared engruesa y
se depositan capas adicionales de microfibrillas celulsicas orientadas hasta que
la clula llega a ser rgida. En muchas clulas se deposita masivamente celulosa
casi pura (como en el algodn) o celulosa mezcladia con otros componentes tales
como ligninas y hemicelulosas (como en traqueidas y vasos).
MEMBRANAS. Todas las propiedades de las clulas vivas dependen en algn grado
de las cualidades de sus membranas. Una clula est rodeada por una membrana
que la separa de su ambiente y la capacita para controlar selectivamente la entrada
y salida de sustancias. Asimismo, virtualmente toldos los organelos subcelulares
estn formados de o circundados por membranas 1 0 partes de membranas y gran
parte de la maquinaria enzimtica celular est montada o asociada de una forma
48 INTRODUCCI6N Y GENERALIDADES
A
LA CLULA
49
Idario
Figura 3-1. La c6lula vegetal.
A. Micrografa electrnica de una c6lula radical de Vicia.
B. Diagrama que muestra la ultraestructura de una cdlula. C6digo:
CP, cloroplasto; SER, retculo endoplismico liso; RER, retcu-
lo endoplsmico rugoso; G, aparato de Golgi; M, mitocondria.
C. Representacih tridimensional de las partes de dos clulas ve-
getales. (Comprese con la Figura 3-1A, de la cual se dibuj
este diagrama.) El retculo endoplsmico forma lminas fenes-
tradas, muy ramificadas en todas las c6lulas y atraviesa de una
c6lula a otra va los plasmodesmos. Se muestran secciones a
travs de las mitocondrias (M), plastidios (P) y cuerpos de
Golgi (G) y vistas transversales y superficiales de la membrana
nuclear (NM).
(A y C de F.A.L. Clowes y B.E. J uniper: Plant Cells. Blackwell
Scientific Publications Ltd., Oxford, 1968. Utilizadas con per-
miso.)
50 INTRODUCCION Y GENERALIDADES
u otra con membranas. En consecuencia? la fisiologa de las membranas es de im-
portancia central en la fisiologa de las plantas.
La estructura de las membranas ha sido durante mucho tiempo un asunto de
controversia debido a que es difcil imaginarse una barrera que permita el paso
de ciertas sustancias e impida el de otras y, ademas, que permita el paso de ciertos
materiales en un solo sentido. Se han hecho varias proposiciones, inclusive cribas
de distintos tipos y mosaicos de compuestos Zipofllicos e hidrofilicos. Parece pro-
bable ahora, que ciertas propiedades de las membranas resultan de su naturaleza
qumica, otras de la existencia de poros que acaso actan como cribas diferencia-
les y aun otras propiedades resultan de la existencia de mecanismos de transporte
altamente especializados que mueven activamente ciertas sustancias en forma
direccional a travks de barreras celulares.
Figura 3-2. Micrografa electrnica de una placa celular en formacin, de una hoja joven de tri-
go (Tri ti cum). Se cree que numerosas y pequeias vesculas formadas por el aparato de Golgi
se fusionan para constituir las vesculas mayores (cp), y Bstas finalmente se integran para fou-
mar la propia placa celular. 6sta se est desarrollando hacia la izquierda de la fotografa. Sobre
el extremo izquierdo numerosos microtbulos (t) parecen estar guiando las pequeas vesculas
de Golgi hacia su sitio (flecha), Estos microtbulos son relativamente rectos, en tanto que os
ya embebidos en la pared se han tornado sinuosos (S), y no existe ninguna seal de microtbu-
los en la seccin ms antigua de la pared hacia la derecha.
(De F.A.L. Clowes y B.E. J uniper: Planr Cells. Blackwell Scientific Publications Ltd., Oxford,
1968. Utilizado con permiso. La micrografa fue suministrada originalmente por el Dr. J .D.
Pickett-Heaps y el Dr. D.H. Ncrthcote.1
LA CLULA
A
Figura 3-3. Disposicin de las microfibrillas en las paredes celulares de Valonia, 12,000 X.
A. Microfibrillas de la pared primaria istropas o dispuestas al azar.
B. Microfibrillas de la pared secundaria paralelas (anistropas).
(De J . Bonner y J .E. Varner: Plant Biochemistry. Academic Press, Nueva York, 1965. Ut i l i -
zadas con permiso. Fotografas cortesa del Dr. K. Mhlethaler, Zurich, Suiza.)
Se ha descubierto que la apariencia bsica de las membranas es tan constante
de organismo a organismo y de organelo a organelo que el concepto de unidad de
membrana ha sido propuesto por J .D. Robertson y col. Las membranas dan
la apariencia de una estructura de tres capas en las micrografas electrnicas (ver
Figura 3-4); las dos capas externas son principalmente de protena, y la capa in-
terna de lpido. Los diagramas para ilustrar los conceptos actuales sobre la dispo-
sicin molecular de las unidades de membrana, tal y como fue descrita por H.
Davson y J.F. Danielli, se muestran en la Figura 3-5. Tal estructura sera extrema-
damente estable, soportada por fuerzas polares y por fuerzas de atraccin como
enlaces de hidrgeno y fuerzas de van der Waals; sin embargo, suficientemente
flexible si se toma en cuenta el hecho de que tales membranas no son estructuras
estticas: son capaces de moverse, reventar o romperse, y reconstruirse para pro-
ducir vesculas mediante pliegues que se remueven a presin.
Investigaciones ms recientes han demostrado que la hiptesis de la unidad
de membrana no es de validez universal. Ciertas membranas parecen estar com-
puestas por glbulos de fosfolpidos revestidos de protena en vez de dobles capas
de lpido revestidas de protena. Ciertas membranas son claramente asimtricas;
poseen en un lado una capa proteica ms gruesa que en el otro o parecen tener,
en vez de capas, glbulos de protena. Se ha sugerido que las molculas de pro-
tena pueden penetrar la doble capa lipdica a intervalos, formando esencialmente
poros hidrfilos, o que las protenas, o cadenas de polipptidos, pueden entre-
mezclarse en el interior de la capa de lpidos.
En 10s Captlos 5 y 12 se examinar cmo se involucran las membranas
en reacciones de transferencia de electrones y de prlotones conducentes a la snte-
52 INTRODUCCI6N Y GENERALIDADES
Figura 3-4. Micrografa electrbnica de una pared celular (Al l i um) en secci6n transversal que
muestra la capa doble de l a membrana plasmtica (nota: no una doble membrana), y microt-
bulos alineados a l o largo de la membrana. (Micrografa electr6nica cortesa del Dr . A.K. Bal,
Departamento de Biologa, Memorial University, Terranova.)
sis de ATP y al transporte inico. Estas reacciones exigen que numerosas prote-
nas-enzimas de la cadena de transporte de electrones y otras estn especficamente
orientadas en las membranas y en sus superficies internas y externas. El bioqu-
mico norteamericano E. Racker describi un modelo de estructura de membrana,
mostrado en la Figura 3-6, que satisface estos requisitos. Esta estructura puede
relacionarse, en general, al arreglo que se presenta en la Figura 3-5, pero difiere
de ella en que muestra la localizacin interna de ciertas molculas de protena.
Sin embargo, la estructura exacta de varias membranas puede diferir en detalles
que probablemente se relacionan con su funcin.
La mayora de las estructuras subcelulares, tales como ncleo, mitocon-
drias o cloroplastos, estn rodeadas por membranas dobles; sin embargo, la capa
viva ms externa del citoplasma -membrana celular o plasmalema-, as como
la membrana interna que limita la vacuola -tonoplasto- se componen de unida-
des de membranas sencillas. Estas dos membranas controlan principalmente el
intercambio de compuestos entre el citoplasma y el espacio extracitoplsmico
fuera de la clula, y el interior de la vacuola. Ellas marcan los lmites del material
vivo de la clula. Esto no significa que el citoplasma no pueda ejercer su influen-
cia ms all de los lmites de sus membranas. Lo ejerce, evidentemente, puesto
que es capaz de modificar los contenidos vacuolares y dirigir la sntesis de pare-
des celulares que se emplazan por fuera y encima de la plasmalema.
NSTCLEO. La estructura organizada ms grande y notable en la mayora de las
clulas es el ncleo. Esta estructura contiene gran parte del material gentico de
LA CBLULA 53
Figura 3-5. Dos interpretaciones de la estructura de las membranas celulares.
2019
9 5.108,
{Y
CLAVE
Cadena peptdica
extendida
Protena
Hlice a-peptdica
E
- cido graso
Trioleato graso
(triglicrido)
Fosftido
Fosfolpido
Unidad de mem-
brana tal y como
se ve en micro-
grafas electrni-
cas (el material
opaco a los elec-
trones separado
mediante espa-
cios claros)
P
Galactolpido
(incluye el
azcar galactosa
que es altamente
polar)
8 Catin libre
"b Grupo polar (no inico)
Grupo polar aninico
4 Grupo polar catinico
"" Fuerzas cohesivas no
Dolares
54 I NT~RODUCCP~N Y GENERALIDADES
Fosfol pinos y protenas
superficiales
Fosfolipido
biestratificado
Figura 3-6. Modelo de estructura de
membrana. (De E. Racker: A New
Linok at Mechanisms in Bioenerge-
Sistemas de enziroas que superficial r i m. Academic Press, Nueva Yoric,
penetran Is membrana 1976.)
la c6lula: los cordones de DXA, presentes en complejos de protena que forman
las nucleoproteinas. stas se presentan usualmente como filamentos de croma-
tina (Figura 3-71> pero durante la divisin celular se transforman claramente
en cromosomas, o mejor dicho: en pares de cromosomas puesto que se duplican
antes de que se inicie la divisibn (ver Figdra 3-8). El nlicleo contiene usualmente
de uno a cuatro nucleolos (Figura 3-71? cuerpos esfricos que se tien densa-
mente y que parecen ser reservas de RNA, las cuales se supone sor, utilizadas
durante la transcripcin del mensaje del DNA de la cromatina. El ncleo est
circundado por una doble membrana que posee numerosos poros pequeos
Figura 3-7. Micrografia electrnica de una cBlula del rneristetno apical del trigo ( Tr i f i c~r n)
10,000 X, El ncleo, que ocupa casi toda \ a c8lula, contiene crornatina y una Gran nucleolo.
(Preparacin por el Dr. J . Mahor; micrografia cortesa de la Sra. E. Paton.)
Fase rnetab6l i ca Profase t emprana Profase t arda Met af ase
Anafase Clulas nuevas-fase met abl i ca
Figura 3-8. Diagrama de la mitosis en una c6lula vegetal. (De W.H. Muller: Botany: A Funtional
Approach, 3a. edicin. Macmillan Publishing Co., Inc., Nueva York, 1974.)
Figura 3-9. Micrografa electrnica
de parte de una cdlula de hoja de
espinaca. La membrana nuclear con
poros (P) est anastornosada al re-
tculo endoplhnico rugoso (J ).
La c6lula tambidn contiene rnito-
condrias (M) y un cloroplasto en
desarrollo (C). (De F.A.L. Clowes
y B.E. J uniper: Plant Cells. Black-
well Scientific Publjcations Ltd.,
Oxford, 1968. Utilizada con per-
miso.)
56 INTRODUCCI6N Y GENERALIDADES
(Figura 3-1A). Se ha sugerido, aunque sin pruebas inequvocas, que grandes mo-
lculas como las ribonucleoprotenas pueden atravesar los poros de la membrana
nuclear, permitiendo con ello la salida del material informativo desde el ncleo
al citoplasma. Aparentemente la membrana nuclear contina en el retculo endo-
plsmico, el cual se conecta a su vez con la plasmalema (Figura 3-9), propor-
cionndose as una ruta entre el ncleo y el entorno de la clula. La significacin
de tales rutas no ha sido investigada exhaustivamente.
RETCULO ENDOPLSMICO. El retculo endoplsmico (RE) es una red de mem-
branas que se ramifica por todo el citoplasma de la mayora de las clulas en
metabolismo activo. Consiste de dobles unidades de membranas, que a veces
se separan para formar vesculas. Gran parte del retculo endoplsmico posee
numerosos ribosomas (ver pgina 57), ya sea adheridos a 1o unidos a su lado
externo. ste se llama retculo endoplsmico rugoso y cuando carece de riboso-
mas se llama retculo endoplsmico liso. Dado que los ribosomas son los sitios
de sntesis proteica de la clula, es probable que esta asociacin de ribosomas y
retculo endoplsmico est directamente comprometida con la sntesis de prote-
nas. El retculo endoplsmico desempeara el papel de conjuntar las subunidades
para la sntesis proteica y distribuir los productos.
Se ha sugerido que el retculo endoplsmico se comunica con y probable-
mente a travs de la plasmalema y la envoltura nuclear. Si ello fuera cierto, to-
das las partes de la clula, el ncleo incluido, pueden estar en intimo contacto
con un sistema de cavidades continuo con el exterior y con otras clulas. Las
conexiones entre el retculo endoplsmico y la envoltura nuclear estn ahora bien
probadas (ver Figura 3-9), pero la asociacin de la membrana nuclear con la plas-
malema y con los contenidos de clulas adyacentes se apoya en evidencias me-
nos claras. Las posibilidades de un sistema tal son enormes, pero no se sabe en
qu medida el retculo endoplsmico funciona como un sistema para transfe-
rencia de material -o informacin- entre clulas. Una interpretacin ms reciente
sugiere que el retculo endoplsmico realmente no se comunica con la plasma-
lema sino que desprende vesculas que se asocian a la membrana celular y en
esa forma pasan a su travs sus contenidos. Parece entonces que, eventualmente,
habra continuidad entre el retculo endoplsmico y el exterior de la clula, pero
no necesariamente una va directa desde la envoltura nuclear hasta el exterior
de la misma.
La formacin de nuevas paredes celulares durante la divisin celular prin-
cipia con la alineacin de los microtbulos (pgina 62) y contina con la puesta
en formacin de las vesculas, derivadas aparentemente de los dictiosomas o del
retculo endoplsmico. Estas vesculas contienen material de carbohidratos que
se usan para formar la lmina media de la pared. Por lo tanto, el retculo toma
parte activa en la formacin de la pared celular.
Una consecuencia de la ramificacin del retculo endoplsmico y su conti-
nuidad con la envoltura nuclear es que el citoplasma de la clula puede dividirse
en pequeos compartimientos. Las divisiones no son absolutas porque el retculo
es una membrana viva que puede reventar o romperse y,reconstruirse, y porque
puede haber orificios y grietas en los compartimientos. Estos, sin embargo, pue-
den ser de gran importancia en el mantenimiento de diversos sistemas metabli-
cos dentro de una clula. Las divisiones impiden que los metabolitos de un sistema
interfieran con los de otro; ya sea mediante un suministro excesivo de un meta-
bolito indeseable o por el drenaje de algunos intermediarios que se necesiten.
LA CBLULA
Figura 3-10. Interpretacin diagramtica de un dictiosoma vegetal o aparato de Golgi. El recua-
dro muestra una vescula secretora en formacin, (De H.H. Mollenhauer y D.J. Morr: Golgi
apparatus and plant secretion. Ann. Rev. Plant Physiol. 17:27-46 (1966). Utilizada con permi-
so. Fotografa cortesa del Dr. H.H. Mollenhauer.)
APARATO DE GOLGI Y DICTIOSOMAS. Los dictiosocnas son cuerpos en forma de
plato constituido por varias capas de vesculas planas, o cisternas compuestas de uni-
dades de membrana (ver Figuras 3-1 y 3-10). Uno o muchos dictiosomas cons-
tituyen el aparato de Golgi de la clula. Los bordes de estas cisternas se ven
frecuentemente globosos o hinchados y, evidentemente, dan origen a las vesculas
que se separan de los bordes por una especie de estrangulacin. El aparato de
Golgi est fundamentalmente relacionado con la formacin de la pared celular
y es extremadamente importante como sistema principal de transporte de mate-
riales hacia el exterior de la clula, va las vesculas que se forman de las cisternas
de los dictiosomas. La sntesis de los polisacridos de la pared celular se inicia en
el retculo endoplsmico pero se completa en los dktiosomas y luego se transpor-
ta al lugar de sntesis de la pared, mediante vesculas formadas por los dictioso-
mas. As pues, el principal papel del aparato de Golgi parece ser la secrecin y
sntesis de polisacridos.
RIBOSOMAS. Los ribosomas son pequeos cuerpos (150-250 A de dimetro) que
contienen la maquinaria para la sntesis proteica de la clula (ver pgina 39). Pue-
den estar libremente dispersos por todo el citoplasma pero a menudo se hallan
asociados con el retculo endoplsmico, dndole una apariencia rugosa (ver Figu-
ras 3-1, 3-4 y 3-9). La sntesis proteica ocurre en los ribosomas, y las nuevas pro-
tenas formadas pueden liberarse al citoplasma o atravesar de algn modo la
membrana del retculo endoplsmico.
Figura 3-1 1. La mitocondria.
A. Diagrama de una mitocondria.
B. Diagrama de la estructura de
la membrana mitocondrial.
C. Micrograf a electrnica de una
mitocondria.
(Fotografa original cortesa del
Dr. G.P. Morris. Queens Univer-
sity, Kingston, Ontario, Canad.)
/-
Membrana
interna
Membrana
externa
B
LA Cf3LULA 59
Se ha encontrado que organelos ms grandes, tales como cloroplastos,
mitocondrias y ncleos poseen ribosomas en su interior asociados a sus mem-
branas internas.
MITOCONDRIAS. Estas estructuras grandes, generalmente ovales (alrededor de 4-7 p
de largo y 0.5-1 p de dimetro) contienen gran parte de la maquinaria metablica
celular. Se presentan en gran nmero en clulas metablicamente activas, pero
no abundan en las seniles o en reposo. La mitocondria est formada por lo que
parece ser una doble unidad de membrana normal. La capa interna de esta mem-
brana est profundamente plegada hacia el interior para formar las crestas,
membranas transversales que se emplazan ms o menos oblicuamente en la mito-
condria (ver Figura 3-11). Las membranas parecen tener pequeas protuberancias
de alrededor de 70 A de dimetro, denominadas F,-ATPasa, adheridas a su super-
ficie interna mediante pednculos de 30 A de largo aproximadamente, llamados
partculas F,. Estas estructuras estn relacionadas con la sntesis de ATP, el com-
puesto de movilizacin energtica de la clula. Las mitocondrias suministran la
energa mediante la ruptura controlada de substratos respiratorios para la sntesis
de gran parte del ATP celular, el cual se usa a su vez para llevar energa hacia las
sntesis y reacciones que requieren de ella. Estos procesos se expondrn en deta-
lle en el Captulo 5.
Las mitocondrias poseen un cierto grado de autonoma, ya que contie-
nen DNA. Las mitocondrias de las plantas tienen c'ordones de doble hlice bas-
tante largos y es lo que explica la programacin de la informacin de una porcin
considerable de su estructura. Sin embargo, se ha sugerido que el DNA mitocon-
drial puede estar solamente relacionado con la sntesis de ciertas protenas (posi-
blemente estructurales) y que la mayora de las protenas enzimticas probable-
mente est programada por el DNA nuclear.
PLASTIDIOS. Estas estructuras estn presentes en muchas clulas vegetales. Los
ms conocidos son los cloroplastos, que contienen los pigmentos fotosintticos,
principalmente clorofilas, y llevan a cabo la fotosntesis. Los leucoplastos son
incoloros, a menudo el lugar donde se desarrollan grnulos de almidn, denomi-
nndose en tales casos, amiloplastos. Los leucoplastos y cloroplastos son inter-
cambiables y la naturaleza exacta del plastidio depende de la presencia o ausencia
de luz. Los cromoplastos son plastidios especializados, a menudo de forma' angular
o irregular, que contienen pigmentos distintos a la clorofila y no estn involucra-
dos en la fotosntesis. El caracterstico color rojo de las bayas del fresno monta-
s y de los tomates se debe a cromoplastos que contienen caroteno.
Los cloroplastos son usualmente de 3-6 p de dimetro y pueden ser muy
numerosos en clulas fotosintticas; sin embargo, se conocen algunos de forma
esfrica o discoide. Ciertas clulas algales contienen slo uno o dos cloroplastos
gigantes que casi la llenan, los cuales asumen muchas formas, desde la oval y la
estrellada a la cinta en espiral de Spirogyra.
La estructura interna de los cloroplastos es altamente compleja, como se
muestra en la Figura 3-12. Gran nmero de estructuras planas, saculiformes
llamadas tilacoides (thylahos, bolsa) se esparcen en el estroma o sustancia funda-
mental. Cada tilacoide est limitado por una sola membrana, pero debido a lo
aplanado de estas estructuras se ven como capas de doble membrana 0 lamelas.
A intervalos ms o menos frecuentes se localizan pilas de tilacoides densamente
empaquetados, llamadas grana. Los tilacoides de los grana se conectan 0 conti-
60 I NTRODUCCI 6N Y GENERALI DADES
A
Figura 3-12. El cloroplasto.
A. Fotornicrografa electrnica de un cloroplasto de espinaca. (Cortesa del Dr. B.F. Grant.
B. Diagrama de los grana y de la estructura en calado de un cloroplasto.
Micrografa cortesa de la Sra. E. Paton.)
LA CBLULA 61
nan con tilacoides intergranales, o del estroma, en uno o ms puntos de sus mr-
genes. Las molculas de clorofila y la maquinaria clue atrapa la energa luminosa
se localizan en los tilacoides, principalmente en los grana. Las enzimas que cata-
lizan las reacciones del carbono de la fotosntesis estn presentes principalmente
en el estroma.
Los cloroplastos se originan de cuerpos ameboides diminutos llamados
proplastidios, que comienzan a desarrollar su estructura interna por invaginacin
de la capa interna de su doble membrana perifrica, para formar vesculas. stas
se unen y constituyen una estructura llamada cuerpo prolamelar. A la luz, el
desarrollo del plastidio prosigue hacia la formacin de tilacoides a partir del cuer-
po prolamelar.
stos se fusionan para formar los grana y se tornan verdes. En la oscuridad,
sin embargo, el sistema lamelar no se desarrolla, ni se forma clorofila. La luz es
necesaria no slo para la sntesis de clorofila sino tambin para la elaboracin de
la estructura interna de los cloroplastos.
stos contienen una importante cantidad de DNA y, evidentemente, son
capaces de programar la sntesis a partir de sus propios componentes estructurales.
La divisin de los cloroplastos parece ser un fenmeno comn y los de clulas
fotosintticas probablemente se originan en la divisin de los ya existentes, as
como de proplastidios. La cuestin de si los cloroplastos podrn surgir de nouo
no ha sido establecida en definitiva. Sin embargo, el consenso de la opinin actual
es que los plastidios slo se pueden formar de proplastidios o de otros plastidios.
Si se eliminan los cloroplastos de un cultivo de clulas de Euglena por medios
qumicos, el cultivo nunca recobra sus cloroplastos o su capacidad de fotosntesis.
GLIOXISOMAS Y PEROXISOMAS. stos son cuerpos microscpicos recientemente
//-descubiertos, que ahora se han encontrado en muchas clulas vegetales. Son de
alta densidad electrnica, habitualmente casi esfricos, de cerca de 1 p de dime-
tro y limitados por una sola membranaLParecen ser esencialmente unidades em-
paquetadas de enzimas relacionadas con una secuencia especfica de reacciones,
del mismo modo en que las mitocondrias tienen relacin con la oxidacin en el
ciclo de Krebs y sntesis del ATP, y los cloroplastos con la fotosntesis.&os glio-
xisomas contienen la maquinaria enzimtica de la va del glioxilato del metabolis-
mo graso, el cual es importante en la conversin de las grasas a azcares (ver
Captulo 6, pp. 131 y 135). Este proceso se desarrolla principalmente durante la
germinacin de semillas almacenadoras de grasas. Los glioxisomas se localizan
en gran cantidad en clulas de semillas como las de la higuerilla y parecen for-
marse a partir de vesculas derivadas del RE celular.
Los peroxisomas son esencialmente similares; a los glioxisomas, pero contie-
nen principalmente la maquinaria enzimtica para la oxidacin del glicolato produ-
cido en la fotosntesis as como por otras reacciones que son parte del proceso
de fotorrespiracin (ver Captulos 7 y 15, pp. 187 y 378). Ellos tambin contienen
la enzima catalasa que desdobla la sustancia venenosa, perxido de hidrgeno,
formada durante la oxidacin del glicolato. Los peroxisomas, localizados prin-
cipalmente en las hojas de plantas superiores, se forman de los glioxisomas proba-
blemente durante el desarrollo de la planta.
OTRAS ESTRUCTURAS SUBCELULARES. Adems de los organelos descritos ante-
riormente, otras estructuras internas pueden a veces distinguirse en las-clulas. Un
62 INTRODUCCI6N Y GENERALIDADES
centrmero est presente en las clulas de plantas primitivas; est asociado al me-
canismo de divisin celular y probablemente tambin a flagelos o cilios que estn
presentes en las clulas generatrices de esas plantas. La mayora de las clulas con-
tienen microtbulos, cuyo dimetro es de alrededor de 200-300 A , los cuales estn
vinculados a la sntesis de la pared celular y al transporte de materiales (ver Figuras
3-2 y 3-4). Los microtbulos estn involucrados en el movimiento o alineacin de
componentes celulares, como los cromosomas durante la divisin celular y las
vesculas que contienen polisacridos derivados del aparato de Golgi, destinados a
la sntesis de la pared celular.
El microscopio electrnico tambin revela numersos cuerpos ultramicros-
cpicos o grnulos cuya funcin se desconoce. Algunos de stos pueden ser agre-
gados de protenas y enzimas que dirigen secuencias organizadas de reacciones
metablicas, similares a glioxisomas y peroxisomas.
LA VACWOLA. La vacuola es fisiolgicamente importante para la clula por dos
razones. Primera, provee un sitio de almacenamiento para materiales que no se
requieren de inmediato y suministra un vertedero para desechos celulares Y otras
sustancias nocivas que las plantas carentes de sistema excretor deben almacenar
internamente. Enzimas hidrolticas o destructivas son segregadas al interior de la
vacuola; all degadan el material de desecho a sustancias simples que pueden
reabsorberse por el citoplasma para su reutilizacin. Segunda, la vacuola funciona
como la reserva de agua de la clula; mantiene su estructura y rigidez al actuar co-
mo un globo interno que, ejerciendo presin sobre la pared celular, impide que
sta se deforme o colapse. El mecanismo de ello se ver posteriormente, al prin-
cipio de la pgina 68.
La membrana vacuolar, el tonoplasto, es obviamente de mxima impor-
tancia en el sistema de membranas de la planta. Esta tpica unidad de membrana
puede estar involucrada en la secrecin de sustancias en el interior de la vacuola.
Adems, las vesculas del retculo endoplsmico o del aparato de Golgi son aparen-
temente Lapaces de unirse al tonoplasto e inyectar as sus contenidos directamente
a la vacuola.
sta puede contener numerosas sustancias en solucin; azcares, sales, ci-
dos, compuestos de nitrgeno, compuestos complejos como alcaloides, glucsidos
y pigmentos antocinicos. Pueden encontrarse tambin pequeas gotas o emulsio-
nes de grasas, aceites y otras sustancias inmiscibles en agua, as como taninos,
polisacridos diversos y protenas. Depsitos de cristales son tambin frecuentes
en vacuolas de clulas maduras, siendo los de oxalato de calcio los ms comu-
nes. La presencia de este comp!ejo y altamente venenoso vertedero qumico en
las clulas vegetales, es una de las principales razones que explican el retraso de la
bioqumica vegetal respecto a la animal. El aislamiento de protenas, enzimas y
organelos, o partculas subcelulares, se complica por el hecho de que, al reventarse
la clula, las protenas y organelos altamente sensibles se contaminan a causa
de la vacuola, la cual contiene numerosos elementos con poder precipitante o
desnaturalizante. El pH en las vacuolas es a menudo muy distinto al del citoplas-
ma (el cual usualmente es de 6.8-8.0) y puede fluctuar desde un valor tan bajo
como 0.9 hasta uno tan elevado como 9 10, si bien los valores alcalinos son
raros. El jugo celular cido es comn, generalmente como resultado de concen-
traciones moderadas de cidos orgnicos como el ctrico, oxlico o tartrico.
;Ciertas algas microscpicas tienen cido sulfrico 1 N en sus vacuolas, pero este
es un caso extremo!
LA CLULA 63
Las clulas inmaduras o en activa divisin no tienen la vacuola sencilla,
grande y prominente, tpica de las clulas maduras; contienen, en lugar de eso,
varias vacuolas muy pequeas dispersas por todo el citoplasma. Conforme la
clula se desarrolla y madura, las pequeas vacuolas se fusionan y expanden
hasta que - en la mayora de las clulas completamente desarrolladas- la gran
vacuola central ocupa del 80 al 90% del volumen celular total.
EL AGUA Y LAS C~LULAS
Este tema cubrir los mecanismos bsicos del movimiento del agua en las clulas
y establecer la base para el estudio del metabolismo y fisiologa del agua de la
Seccin 111.
POTENCIAL DE AGUA. El movimiento requiere energa. El agua, como todas las
dems sustancias, no se mueve en contra de un gradiente de energa; debe moverse
a favor de l, cediendo energa a medida que se mueve. Mientras que la energa
pueda perderse como resultado del movimiento del agua, ste continuar. El
equilibrio slo se puede alcanzar cuando al acrecentarse el movimiento no reper-
cuta en una prdida adicional de energa. Esto significa que el agua siempre se
desplaza hacia la regin de ms baja energa, en un sistema. Es necesario com-
prender la naturaleza de la energa y los gradientes energticos involucrados con
el fin de calcular las fuerzas mediante las cuales se mueve el agua.
La energa libre se define como la energa disponible (sin cambio de tem-
peratura) para realizar trabajo. El potencial qumico de una sustancia bajo cualquier
condicin (esto es, pura, en solucin, o como integrante de un sistema complejo)
es la energa libre por mol de esa sustancia. &1 potencial qumico, por lo tanto,
mide la energa con la cual reaccionar o se mover una sustancia.
El potencial de agua es el potencial qumico de sta y es una medida de
la energa disponible para reaccin o movimiento. Bajo condiciones biolgicas
normales el potencial de agua es usualmente bastante alto sin que limite las ta-
sas de reaccin que involucran agua (por ejemplo, en reacciones hidrolticas).
Sin embargo, el movimiento del agua depende de su potencial, debido a que el
movimiento neto de sta es siempre de una regi6n de potencial alto a otra de
potencial bajo. El smbolo para el potencial hdrico es $ ,* y tradicionalmente se
ha medido en atmsferas (atm), bars, o dinas por centmetro cuadrado (dinas/ cm2 ):
1 bar =l o6 dinas/ cm2 =29.53 pulgadas Hg =0.985 atm; 1 atm =14.69 lb/ pulga-
da2 = 1.01 bars.
Un diferencial de potencial de agua (A$) entre dos regiones, A y B, que
posean potenciales de agua $A y GB se expresara A$ = - $B. Si $A es mayor
que GB, A $ es positiva y el agua se mover de A a B. Si el valor A $ de la ecua-
cin es negativo, el agua se mover de B a A. Esto reafirma el principio expresado
anteriormente: el agua se mueve de una regin de alto potencial a otra de bajo
potencial.
El potencial del agua pura es, por definicin, cero.** La presencia de cual-
quier sustancia disuelta en agua disminuye su potencial, de manera que el poten-
*Es la letra griega psi. Una buena manera de recordar este smbolo es acordarse que psi
tambin significa libras por pulgada cuadrada, una medida de presin.
**Esto se aplica solamente al agua libre, esto es, las moleculas de agua que no estn liga-
das o asociadas mediante fuerzas ffsicas o qumicas son otras sustancias (como el agua de hidra-
tacin o agua coloidal). Ver Imbibicin (pgina 71).
64 I NTRODUCCI 6N Y GENERALI DADES
Membrana diferencialmente permeable
A B
Figura 3-13. El movimiento de agua como resultado de la smosis. El agua
difunde en un gradiente de potencial de una regin de alto potencial (agua
pura, = O) hacia una solucin donde el potencial es ms bajo (posee un
valor negativo).
cia1 de agua de una solucin es inferior a cero. Esta definicin slo es vlida a
presin atmosfrica. La elevacin o disminucin de la presin alrededor de un
sistema, automticamente asciende o desciende el potencial de agua en exacta-
mente la misma cantidad.
DIFUSION. Las molculas de gas, o de un soluto en solucin, estn en movimiento
continuo y tienden a asumir una distribucin uniforme por todo el espacio dispo-
nible. En consecuencia las molculas se mueven de una regin de potencial alto
a otra de potencial bajo; el proceso se llama difusin. As, por ejemplo, en una
solucin imperfectamente mezclada, las molculas de agua difunden en gradiente,
de la regin de la solucin ms diluida (donde las molculas de agua son de J, ms
alto) a las regiones de solucin ms concentrada (donde poseen I) bajo). Igual-
mente, las molculas del soluto tambin difunden hacia abajo de los gradientes
de concentracin (esto es, de un rea de alta concentracin a otra ms diluida)
hasta que toda la solucin sea perfectamente uniforme.
Figura 3-14. El agua se mueve por smosis hacia el interior de una "c6lula"
artificial que contiene solucin de azdcar (A) hasta que la c6lula se hincha
de manera que sus paredes ejerzan presi6n sobre sus contenidos, expulsando
el agua hacia afuera. En equilibrio (B) la presin del agua que ingresa por
smosis es igual a la presin del agua que sale.
\ f
c -
~
- ~~
" -
-/Agua
Membrana
diferencialmente permeable
1 Solucin de azcar
L - -
-
~~
~- - . .
A B
LA CELULA 65
Las tasas de difusin son proporcionales a la energa cintica de las mol-
culas (su temperatura), su tamao (la tasa de difusin es proporcional a la raz
cuadrada del peso molecular), la densidad del medio que atraviesan y el gradiente
de concentracin sobre el cual difunden. Cuando ocurre la distribucin uniforme de
las molculas, se establece un -equilibrio dinmico y cesa su movimiento neto
(aunque existe movimiento continuo al azar o difusin de molculas dentro del
sistema en equilibrio).
MEMBRANAS DIFERENCIALMENTE PERMEABLES. Muchas membranas biolgicas,
en particular la plasmalema, el tonoplast0 y las que! rodean los organelos subcelu-
lares, muestran la propiedad de permeabilidad diferencial, es decir, debido a su
naturaleza fsica o qumica, las molculas de agua las atraviesan fcilmente, en
tanto que las molculas de sustancias disueltas en agua no logran penetrar o lo
hacen ms leutamente que las molculas de agua. Una membrana que es casi total-
mente impermeable a las molculas de soluto pero permeable ante el solvente se
llama membrana semipermeable. La mayora de las membranas biolgicas, sin
embargo, son diferencialmente permeables, ms que semipermeables.
6sMos1s. Supngase que un vaso de precipitado o recipiente se separe en dos
partes por una membrana diferencialmente permeable, como se muestra en la
Figura 3-13A. Si se pone agua pura en un lado de la membrana y una solucin
de azcar en el otro, el potencial de agua ( J / ) en el lado que contiene agua pura
ser mayor que el del otro lado. El azcar no puede difundir a travs de la mem-
brana, pero el agua s. El agua difundir desde el sitio de mayor J/ (agua pura) al
de menor I) (solucin de azcar) como muestra la Figura 3-13B. Esta difusin de
agua a travs de una membrana diferencialmente permeable de una regin de alto
potencial (agua pura o solucin dbil) a otra de bajo potencial (solucin concen-
trada) se llama smosis.
POTENCIAL OSM6TICO Y POTENCIAL DE PRESI6N. Puesto que al difundir el agua
hacia abajo de un gradiente potencial pierde energa, con ello se puede hacer un
trabajo. Tal se sugiere en la Figura 3-13B por el hecho de que la smosis resulta
en transferencia del agua a la solucin concentrada, cuyo nivel sube en ese com-
partimiento del recipiente.
Supngase ahora que una solucin de azcar est en el interior de un saco
o clula hecho de una membrana artificial diferencialmente permeable (puede
hacerse de una fina pelcula de substancias tales como el celofn, colodin, etc.).
La clula artificial se sita entonces en un recipiente con agua pura, como se
muestra en la Figura 3-14A. El agua difunde al interior de la clula por smosis
hasta que la clula llega a su condicin de hinchamiento (trgida) y sus paredes?
distendidas ejercen una presin sobre los contenidos celulares, como se muestra?
en la Figura 3-14B. La presin ejercida sobre el :lquido por las paredes de una ,
clula turgente se llama presin de turgencia. El agua penetra ahora a la clula por
smosis contra un gradiente de presin, as que est haciendo un trabajo. (El
potencial con que el agua pura difunde hacia una solucin es el potencial osm-
tico de esa solucir$ y se llama J/, . Puesto que el agua difunde de alto poten-
cial (cero en el agua pura) a bajo potencial, el potencial osmtico de una solucin
es siempre negativo. El potencial osmtico es, entonces, una medida de la presin ,
real que puede generarse en una clula mediante difusin del agua por smosis.
66 I NTRODUCCI 6N Y GENERALI DADES
La consecuencia de la presin de turgencia (Figura 3-14B) es que el agua
est siendo literalmente exprimida de la clula. Esta es otra manera de decir que
el agua difunde al exterior de la clula hacia abajo de un gradiente de presin. As
pues, el agua de la clula posee un potencial de presin positivo y mayor que el
potencial de presin del exterior. El smbolo para el potencial de presin es $p.
El potencial de presin del agua a presin atmosfrica es, por definicin, cero. Por
tanto, los valores de $ p pueden fluctuar desde negativos a altamente positivos.
Cuando el sistema de la Figura 3-14B est en equilibrio, el potencial de agua
es igual en todas las partes del sistema, por tanto
ji, (fuera) = $ (dentro)
Pero el potencial del agua tiene dos componentes, potencial osmtico ( $T )
y potencial de presin ( $ I , ), de manera que, en equilibrio
$, (fuera) + $p (fuera) = $n (dentro) + $p (dentro)
La solucin externa en la Figura 3-14 es agua pura a presin atmosfrica;
por lo tanto, ambas $J , y I), son cero. As que, en equilibrio
$, (dentro) = $p (dentro)
Esta es otra manera de reafirmar el hecho de que la presin de turgencia que
se desarrolla en la clula bajo estas condiciones es numricamente igual, pero de
signo contrario, al potencial osmtico del fluido contenido en ella. Si el fluido
externo no es agua sino una solucin (con una $, inferior a cero), entonces la
presin de turgencia se medir por la diferencia entre el potencial osmtico dentro
y fuera de la clula:
j i p = A jin (= $, fuera - $, dentro)
Ahora podemos ver cmo se miden estas propiedades y de qu manera se
pueden aplicar estos conceptos al estudio del agua en las clulas.
Figura 3-15. Aparato sencillo para me-
dir el potencial osmtico ($,) de la
solucin (S). Consiste en un cilindro,
que posee un pistn deslizante herm6-
tico y una membrana diferencialmente
permeable (o semipermeable) en el
extremo, sumergido en agua pura
Agua
( d J 7 r =O).
LA CfiLULA 67
MEDICION DE $n. El potencial osmtico de una solucin puede ser medido con
un osmmetro (un dispositivo que mide la presin que se produce por smosis)
como se muestra en la Figura 3-15. Pfeffer, usand'o este sistema determin tem-
pranamente que la presin que se produce (P) es proporcional a la concentracin
del soluto. La concentracin puede expresarse como 1/ V donde Ves el volumen de
la solucin que contiene una cantidad dada de soluto.
k ,
V
P = - k , = una constante
Van't Hoff observ que el sistema es sensible a la temperatura T (expre-
sada en grados absolutos) porque la energa cintica de las molculas es propor-
cional a la temperatura.
P = k, T k, = una const;ante
Dado que estas ecuaciones describen las molculas de soluto en libertad
para difundir como si fueran un gas, las constantes h l y h, pueden ser reempla-
zadas por la constante de gases R, y las frmulas pueden combinarse
RT
p =-
V
P es la presin que se produce en un osmbmetro. Debido a que esto es
igual y opuesto al potencial osmtico en equilibrio
RT
V
= "
Esta relacin describe la Gn de una solucin como si las molculas del
soluto fueran gases. Un mol de gas ocupa 22.4 litros en condiciones estndar
de temperatura y presin (STP =1 atm, O'C). Pero en una solucin 1 M, un mol de
soluto ocupa 1.0 litro. Entonces, si fuera un gas, la presin del soluto sera 22.4 a.tm.
De hecho, esta relacin slo es vlida en solucionels diluidas porque otros factores
complejos afectan el potencial osmtico de soluciones concentradas. Adems, el
potencial osmtico no es proporcional a la molari'dad porque, conforme se incre-
menta la concentracin del soluto, la concentracin del solvente disminuye. Tal
es la razn de que la molalidad (m) que describe ]!as proporciones relativas de so-
luto y solvente se usa a menudo para describir soluciones osmticas. Finalmente,
nosotros hemos supuesto que el soluto no est ialnizado, es decir, que hay sola-
mente una partcula por molcula. La relacin establecida anteriormente se
refiere al nmero de partculas en solucin, no al nmero de molculas. As que,
una sustancia que se ioniza completamente en dos iones tiene un potencial osm-
tic0 doble que el de una sustancia no ionizada, y una sal que posee tres iones, tal
como el sulfato de sodio (Na, SO,) tendra un potencial osmtico triple si se ioni-
zara completamente.
El potencial osmtico real de una solucin puede medirse en un osmmetro,
pero tambin es posible medirlo por medios indirectos. Si una solucin descono-
cida se coloca en una cmara cerrada bajo condiciones controladas, su potencial
68 INTRODUCCIdN Y GENERALIDADES
de agua entrar en equilibrio con el potencial de agua del aire que est sobre la
cmara. La humedad relativa (HR) del aire se mide con un higrmetro extrema-
damente sensible. El potencial de agua de la solucin puede entonces determi-
narse mediante la frmula
$ bars = - 10.7 log 100/HR
Si el experimento se hace a presin atmosfrica, $p = O y $ = Un
segundo mtodo es determinar el descenso del punto de congelacin de una so-
lucin. Una solucin l m de una sustancia no ionizada posee un potencial osm-
tico terico de 22.4 atm, y su punto de congelacin es 1-86C por abajo del agua
pura. Por lo tanto
descenso del punto de congelacin observado
+n = -22.4 X
1.86
POTENCIAL DE AGUA EN LAS CgLULAS. Los conceptos que hemos desarrollado
con una clula artificial que contiene una solucin de azcar pueden transferirse
directamente a una clula real, como se muestra en la Figura 3-16. Las membra-
nas que rodean la clula son diferencialmente permeables, y la smosis tiene lugar
a travs de ellas. Si la clula se sita en una solucin diluida o agua pura, cuyo
$, es muy alto (esto es, cercano a cero) el agua difunde al interior y la clula se
pone trgida como muestra la Figura 3-16A. La solucin externa, cuya concentra-
cin de solutos es menor que la del jugo celular, se dice que es hipotnica (hypo,
menor que). Si la clula se coloca en una solucin cuya I ) ~ es igual a la del jugo
celular, la solucin es isotnica (i so, lo mismo), no tiene lugar la difusin neta de
agua y la clula es flcida o carece de turgencia (Figura 3-16B). Si la solucin
externa es ms concentrada que el jugo celular, o hipertnica (hyper, ms que) su
+bn es menor que la del jugo celular y el agua difundir al exterior. Puesto que la
pared celular es relativamente rgida, el protoplasma se retrae de la pared a medida
que se encoge y la clula llega a plasmolizarse, como se muestra en la Figura 3-16C.
La plasmlisis no necesariamente daa en forma permanente a la clula. Si sta
se coloca de nuevo en una solucin hipotnica recupera rpidamente el agua per-
dida y su turgencia mediante la smosis. Si el periodo y la severidad de la plasm-
lisis no son demasiado grandes, la clula probablemente no se dae.
Figura 3-16. A. Cilula en soluci6n hipotnica: $, afuera > dentro; el agua difunde al interior.
B. CBlula en soluci6n isot6nica: Qn afuera =$, adentro; no hay movimiento de agua. C. CB-
lula en solucin hipertnica; la clula se plasmoliza: J/, afuera < adentro; el agua difunde al
exterior.
LA CI~LULA 69
Hemos visto que el potencial de agua de la clula tiene dos componentes,
potencial de presin y de smosis, es decir
Cuando una clula se coloca en agua o una solucin y llega a un equilibrio,
el potencial de agua de la clula (J / dentro) es igual al potencial de agua del exte-
rior ($ fuera).
$, (dentro) + $p (dentro) = $ (dentro) = $ (fuera)
$ (fuera) es tambin la suma de I), (fuera), y $ p (fuera). A presin atms-
frica, puesto que $p = O, entonces $ (fuera) =: $, (fuera). De aqu que en
equilibrio
$, (dentro) + $p (dentro) = $, (fuera)
Esto puede expresarse como
$, (dentro) = $, (fuera) - $1. (dentro)
lo cual da la presin osmtica en trminos mensurables.
El potencial osmtico del jugo celular puede medirse por la depresin del
punto de congelacin o mtodo de la humedad relativa. Sin embargo, son posibles
los mtodos simples directos, usando la relacin anterior. Un mtodo empleado
a menudo es hacer una serie graduada de soluciones de concentracin y potencial
osmtico conocidos (la sacarosa o el manitol se usan a menudo para este prop-
Figura 3-17. El potencial de agua cambia en una cblula inicialmente flcida conforme alcanza
el equilibrio luego de colocarse en agua pura. Advirtase que los potenciales osmbtico y del agua
son valores negativos, en tanto que el potencial de presin es positivo.
C6lula flcida;
presin de turgencia =O
Volumen celular
70 INTRODUCCI6N Y GENERALIDADES
sito). Pequeas piezas de tejido se sitan en cada solucin y se examina micros-
cpicamente luego que han tenido tiempo para alcanzar el equilibrio. A medida
que las soluciones se hacen ms fuertes las clulas se hacen menos y menos tr-
@das hasta que algunas de ellas muestran signos de plasmlisis (esto es, plasmli-
sis incipiente). La solucin a la que el 50% de las clulas* muestra ciertos indices
de plasmlisis tiene aproximadamente el mismo potencial osmtico que el jugo
celular, ya que a plasmlisis $ p (dentro) =O, y
La presin de turgencia ($I~) de las clulas puede medirse ahora usando
tcnicas similares. Como en el caso anterior, se colocan en soluciones graduadas,
piezas de tejido de longitud o peso cuidadosamente medidos, y el cambio de
tamao o peso se mide luego que el tejido alcanca el equilibrio. En la solucin
donde ningn cambio tiene lugar, el potencial de agua de la clula es igual al de
la solucin (puesto que nada de agua entra o sale), as que
$ (fuera) = $, (dentro) + $p (dentro)
Puesto que $, (dentro) se conoce (habiendo sido determinado previamente),
la $p (dentro) puede calcularse de la relacin
$p (dentro) = $, (fuera) - $T (dentro)
El razonamiento anterior no considera el hecho de que la pared celular no
sea totalmente rgida, sino elstica, de manera que el volumen de las clulas
aumenta conforme aumenta la turgencia. La relacin resultante $, $T, $ p y el
volumen celular se ilustran en la Figura 3-17. Puede verse que el potencial osm-
t.ico del volumen celular del jugo celular, -12 bars en la clula flcida, aumenta
por la dilusin con agua alrededor de -8 bars conforme la clula se expande
hasta cerca de 1.5 veces su tamao en flacidez. En la clula completamente tr-
gida la presin de turgencia (o potencial de presin) es igual al valor negativo del
potencial osmtico, 8 bars, y el potencial de agua del jugo celular se eleva de
-12 bars (igual al potencial osmtico) en la clula flcida a O en la clula trgida.
MOVIMIENTO DE AGUA ENTRE CLULAS. El agua entra y sale de una clula debido
a diferencias en potencial de agua (A$) entre la clula y su solucin circundante.
Igualmente, el agua puede moverse de clula a clula difundiendo hacia abajo de
un gradiente de potencial de agua entre ambas clulas. As pues, la direccin
del movimiento de agua y la fuerza con la que se mueve dependen del potencial de
agua en cada clula y, en consecuencia, de la diferencia en potencial de agua
entre ellas.
Esto puede ilustrarse mejor con un ejemplo: La clula A posee un potencial
de presin (presin de turgencia) de 5 bars y contiene jugo con un potencial os-
mtico de -12 bars. La clula B tiene un potencial de presin de 3 bars y una
solucin interna cuyo potencial osmtico es -6 bars. Si estas dos clulas estn
LA CELULA 71
en contacto directo hacia dnde se mover el agua y con qu fuerza? El poten-
cial de agua en cada clula puede describirse como sigue
A:
+ = 5-12
= -7 bars
B:
$ = 3- 6
=-3 bars
A- B: A + = -7 - (-13) =-4 bars
El agua se mover de la clula B a la clula IL (hacia el potencial de agua
inferior o ms negativo) con una fuerza de 4 bars.
El valor de AJ/ es importante porque es directamente proporcional a la tasa
de movimiento de agua entre las delulas. sta se mueve en proporcin direc-
ta a la fuerza que la impulsa, A+, y al rea de la membrana a travs de la cual
se mueve; y se mueve en proporcin inversa a la resistencia de la membrana. Los
factores rea de membrana y resistencia son aproximadamente constantes para
una clula dada; en consecuencia, la tasa (y, por tanto, tambin la cantidad en un
tiempo dado) el movimiento de agua depende de la diferencia en potencial de
agua, A+, entre uno y otro lado de la membrana.
IMBIBICI~N. El proceso de imbibicin est activamente implicado en la absorcin
del agua bajo ciertas circunstancias. Se trata del movi:miento de agua de un rea de
alto potencial a otra de bajo potencial, pero sin la ayuda de una membrana dife-
rencialmente permeable. Asimismo, fuerzas de atraccin, por lo regular qumicas
o electrostticas, estn implicadas en la imbibicin. Los solventes se imbiben '
usualmente slo en materiales con los que tienen afinidad; por ejemplo, agua en
protenas, y acetona en caucho. Las presiones que se generan por imbibicin;'
causadas por el hinchamiento del imbibente, pueden ser muy grandes: la pre-
sin de imbibicin de una semilla en germinacin rompe la testa, y una semilla
insertada a modo de cua en una fisura de roca pu.ede resquebrajar la roca con
la presin de su imbibicin de agua. La imbibicin de agua por los materiales coloi-
dales de las clulas, coadyuvan a que stas soporten (condiciones severas de sequa
debido a la tenacidad con que se retiene el agua imbibida.
Puesto que el agua se mueve bajo la influencia de la imbibicin, el potencial
de agua (+ ) debe estar afectado por tales fuerzas. E3trmino potencial mtuico,
representado por J I M , se usa para calcular todas las :fuerzas que causan la imbibi-
cin o retienen el agua en cualquier tipo de matriz. As, el potencial de agua en
una matriz (por ejemplo, un coloide, suelo, o retenida de cualquier manera por
fuerzas de efecto superficial o imbibicin) puede definirse como
EL MTODO ANTIGUO PARA EXPLICAR LA SMOSIS Y EL MOVIMIENTO DEL AGUA.
Hasta recientemente la smosis se explicaba a menudo en base a la difusin del
agua de una regin de alta concentracin acuosa (por ejemplo, agua pura) a otra
de baja concentracin (por ejemplo, una solucin). Sin embargo, esto no es co-
rrecto porque ciertas soluciones ocupan un volumen ms pequeo que las del
mismo peso de agua pura. Adems, segn el anterior concepto, una solucin en
una clula o en un osmmetro se consideraba comlo si fuera agua succionada al
interior de la clula por una fuerza considerada corno una presin negativa. Nu-
merosos trminos, comunes en la vieja literatura se produjeron para describir
72 INTRODUCCI6N Y GENERALIDADES
estos conceptos, los que se han abandonado ahora en favor de la actual termino-
loga, que se basa en conceptos termodinmicos ms satisfactorios. Los trminos
antiguos se dan a continuacin de manera que se puedan comprender si se en-
cuentran en una lectura:
Trmino usado en Trmino antiguo equivalente
este libro
Potencial de agua ($ ) Dficit de presin de difusin; presin de
succin.
Potencial de presin ($p) Presin de turgencia; presin de la pared.
Potencial osmtico (Gm ) Presin osmtica; concentracin osmtica
(estos son trminos positivos, iguales pero
de signo contrario a Gm).
CRECIMIENTO DE LAS CQLULAS
El crecimiento de las plantas se considerar despus en la Seccin I V, pero los
mecanismos bsicos del crecimiento celular se analizarn brevemente aqu. El
crecimiento de las plantas tiene lugar mediante tres eventos que pueden ocurrir
simultneamente: divisin celular, agrandamiento celular y diferenciacin celular,
como se ilustra en la Figura 3-18.
La divisin celular (Figura 3-18A) comprende la duplicacin del DNA nu-
clear, el apareamiento y duplicacin de cromosomas y la separacin de los dos
ncleos hermanos. Durante la telofase, numerosas vesculas, derivadas probable-
mente del retculo endoplsmico y del aparato de Golgi, se alinean transversalmen-
te en la clula, en el rea del huso, y se unen para formar la placa celular, que es
el principio de la nueva pared comn. Los contenidos de esas vesculas se utilizan
para producir las sutancias pcticas de la lmina media, la que eventualmente llega
a atravesar la clula, completndose la separacin de las dos nuevas clulas. La
celulosa se deposita ahora en patrones regulares de microfibrillas, en cuya sntesis
y disposicin quiz intervengan vesculas del aparato de Golgi y microtbulos.
Durante y despus de este proceso las clulas hermanas usualmente se agrandan, de
manera que cada una alcanza el tamao de la clula original por estiramiento
de la pared celular existente y el depsito de nuevo material.
Una clula puede agrandarse de manera general (Figura 3-18B) sin cambios
mayores en su forma y caractersticas, excepto que conforme madura desarrolla
por lo regular una gran vacuola y la proporcin de citoplasma disminuye grande-
mente. A este tipo de clula se le llama usualmente parenquimtica, y es relati-
vamente indiferenciada. La complejidad de la ultraestructura tambin puede
disminuir. A medida que la clula se vuelve inactiva con la edad, puede perder la
mayora de sus mitocondrias y muchos otros componentes. Puede alcanzar un
alto nivel de especializacin, como las clulas fotosintticas de la capa en pali-
zada de la hoja (ver Captulo 4), y su ultraestructura refleja su especializacin; en
el caso de la clula en palizada: una gran proliferacin de cloroplastos.
LA CELULA 73
Figura 3-18. Diagramas que ilustran el crecimiento de la c6lula vegetal.
A. Por divisin celular.
B. Por agrandamiento celular.
C. Por diferenciacin celular.
La clula puede crecer, opcionalmente, con o sin divisin celular, de una
manera altamente especializada. La ilustracin de la Figura 3-18C representa en
forma diagramtica el Crecimiento de un elemento de vaso. Aqu el crecimiento
es en una sola direccin y entraa la modificacln y diferenciacin de la clula
en una entidad morfolgica enteramente distinta. Los procesos bsicos son simi-
lares: estiramiento de la pared celular, depsito de numerosas capas de microfi-
brillas de celulosa orientadas, prdida de gran parte de la complejidad subcelular,
y desarrollo de una gran vacuola.
Un hecho sorprendente acerca de las clulas es que todas ellas parecen tener
inicialmente ilimitada capacidad de crecimiento y diferenciacin. Todas son al
principio capaces de crecer en todas las formas caractersticas de la planta. No
obstante sus distintas posiciones en sta, y aunque estn dotadas con idntica
informacin a causa de su comn origen gentico, las clulas usan esta informa-
cin de diferentes maneras para producir la gran cantidad de distintos tipos de
clulas de una planta madura. Evidentemente las clulas se diferencian como resul-
tado de su posicin en la planta, ya que &te es el nico rasgo que las distingue de
sus hermanas, en su formacin. Esta capacidad para reconocer y reaccionar a su
ubicacin en la planta es la base de la organizacin, propiedad de los organismos
vivos que ms impresiona. El concepto de organizacin es un tema central en el
estudio sobre el crecimiento y diferenciacin, en la Seccin I V.
LECTURAS ADICIONALES
Los modernos textos de citologa cubren el material de este captulo con mayores detalles.
Artculos sobre la estnuctura y funcin de varios organelos subcelulares aparecen con frecuencia
en Sci enti fi c Ameri can, los Annual Keui ews of Plant Physi ol ogy and Bi ochemi stry, y como
monografas.
74 INTRODUCCI6N Y GENERALIDADES
Clowes, F.A.L., y R.E. J uniper: Plant Cells. Blackwell Scientific Publications. Oxford. 1968.
Ledbetter, M.C. y K.C. Porter: Int roduct i on t o the Fine Structure ofplant Cells. Springer-Verlag.
The Iiuing Cell (Lecturas del Scientific American). W.H. Freeman & Co. 1965.
Mwkham, R., R.W. Horne y R.M. Hicks (eds.): The electron microscopy and composition of bio-
logical membranes and envelopes. Phi l . Trans. Royal Soc. London, B268:l - 159 (1974). Ver
particularmente W.W. Franke: Estructura y bioqumica de la envoltura nuclear (pp. 67-93);
L.F. LaCour y R. Wells: Poros nucleares en la profase de la meiosis en plantas (pp. 95-100); y
D.H. Northcote: Sistemas de membrana de clulas vegetales (pp. 119-28).
Preston, R.D.: The Physical Biology of Plant Cell Walls. Chapman & Hall. Londres. 1974.
Pridham, J .B. (ed.): Plant Cell Organelles. Academic Press. Nueva York, 1968.
Racker, E.: A Mew Look at Mechani sms in Bioenergetics. Academic Press. Nueva York. 1976.
Nueva York, 1970.
Captulo 4
ESTRUCTURA Y CRECIMIENTO
DE PLANTAS
SUPERIORES COMUNES
Con el fin de que el estudio posterior sobre crecimiento, bioqumica y procesos fi-
siolgicos de las plantas no adolezca a causa del uso de trminos y conceptos des-
conocidos, se presenta aqu una breve descripcin del crecimiento y la forma de
las plantas tpicas y sus partes sin ninguna consideracin sobre la causalidad de las
cosas. El anlisis del crecimiento y desarrollo vegetal as como los factores que los
controlan se considera con mayores detalles en la Seccin I V.
La semilla es una estructura en reposo. Por lo regular est sumamente deshidrata-
da, compuesta principalmente de tejido de reserva y rodeada por una cubierta
esencialmente impermeable. Los procesos metablicos estn suspendidos o tienen
lugar muy lentamente; la semilla est en una condicin de vida interrumpida, debi-
do principalmente a su carencia de agua y oxgeno. El proceso de germinacin
consiste en la absorcin de agua, la reactivacin del metabolismo y la iniciacin
del crecimiento, Unas cuantas cubiertas seminales son tan impermeables al agua
que necesitan condiciones extremas para germinar. A la semilla del cafeto de Ken-
tucky* (Gymnocladus .dioica) se le deben hacer profundas muescas con una lima o
tratarse con cido sulfrico antes de que germinen, y requieren de una exposicin
prolongada a la intemperie, la accin de hongos o bacterias del suelo, o aun me-
diante medidas tan drsticas como la exposicin a un incendio forestal antes de
que germinen en forma natural. Sin embargo, la m,ayora de las semillas comien-
zan a germinar tan pronto como se humedecen, con tal que las condiciones de
temperatura, luz y pretratamiento fro, sean las adecuadas (ver Captulo 22).
La semilla contiene un embrin; uno de cuyo,s extremos, la radcula, forma-
r la raz de la planta; el otro extremo, la plmula, formar el tallo y las hojas. El
embrin tambin posee cotiledones u hojas seminales (uno en monocotiledneas,
dos en dicotiledneas y muchos en gimnospermas), que pueden ser pequeos y
ocupar slo una pequea parte de la semilla como en la mayora de las monoco-
.,
*Sucedneo del caf (N. del T.).
Figura 4-1. Germinacin de una semi-
lla de maz (monocotilednea). (De
R.H. Arnett, Jr . y D.C. Braungart: An
Introduction to Plant Biology, 3a. edi-
cin. The C.V. Mosby Co., St. Louis,
1970. Utilizada con permiso.)
ESTRUCTURA Y CRECIMIENTO DE PLANTAS SUPERIORES COMUNES 77
tiledneas, o ser bastante grandes y llenarla casi por completo como en el frijol y
muchas otras dicotiledneas. Al principio la semilla contiene mucho endospermo,
el tejido nutritivo para el embrin., En algunas gran parte del endospermo puede
permanecer despus de la germinacin, cuando se encarga de la nutricin del em-
brin en desarrollo. En este caso los cotiledones permanecen en la semilla y fun-
cionan principalmente como rganos absorbentes, como en la mayora de las mo-
nocotiledneas. En otras semillas, particularmente ].as de gimnospermas y muchas
dicotiledneas, el proceso de absorcin del endospermo termina antes de que la
semilla se libere del fruto y todas las reservas nutritivas estn presentes en los coti-
ledones. stos, en ese caso, pueden permanecer en la semilla durante la germina-
cin y ser impulsados hacia arriba por el crecimiento del embrin y desarrollarse
posteriormente en hojas ms o menos normales y fumcionales. $
La germinacin de una plntula monocotilednea, el maz ( Zea mays), se
muestra en la Figura 4-1. La radcula crece hacia abajo a travs de la hendida cu-
bierta seminal para producir la raz primaria; mientras que el vstago, encerrado
en su vaina protectora, el coleptilo, crece hacia arriba. Cuando el coleptilo al-
canza la superficie del suelo, cesa de crecer y las hlojas de la plmula de reciente
formacin atraviesan su pice y continan creciendo. El sistema radical se desa-
rrolla con la ocasional formacin de ramas o races secundarias de la raz primaria,
y en muchas monocotiledneas puede formarse un vigoroso sistema de races
adventicias de la porcin inferior del tallo. La parte del embrin y la plntula
situada entre los cotiledones y la radcula se llama hipoctilo (hypo, bajo los
cotiledones), y la plmula y el tallo por encima de los cotiledones se llama epic-
tilo (epi, encima).
Figura 4-2. Germinacin de una semilla de frijol (dicotilednea). (De R.H.
Arnett, Jr. y D.C. Braungart: An Introduction to Plant Biology.' 3a. edi-
cion. The C.V. Mosby Co., St. Louis 1970. Utilizada con permiso.)
INTRODUCCI6N Y GENERALIDADES
Figura 4-3. Germinacin de una semilla de durazno (dicotilednea). (De R.H. Arnett, J r. y D.C.
Braungart: An Introduction to Plant Biology, 3a. edicin. The C.V. Mosby Co., St. Louis, 1970.
Utilizada con permiso.)
La germinacin de una dicotilednea tpica, el frijol cultivado (Phaseolus
uulgaris), se muestra en la Figura 4-2. El proceso es similar, excepto que los cotile-
dones se elevan por encima del suelo debido a una considerable prolongacin del
hipoctilo, y en vez de permanecer dentro de la semilla se tornan verdes y algo fo-
liceos. Sin embargo, conforme sus reservas se agotan, se marchitan y finalmente
se caen, generalmente cerca del momento en que las primeras hojas de la planta
llegan a una fase en que el mecanismo fotosinttico se desarrolla por completo y
la plntula ha llegado a su autosuficiencia. En algunas semillas, por ejemplo, boca
de dragn (Antirrhinum), los cotiledones llegan a ser hojas normales en completo
desarrollo que realizan fotosntesis y funcionan durante gran parte de la vida de la
planta. En otras, como la semilla de durazno (Prunus persica), cuya germinacin
se muestra en la Figura 4-3, los cotiledones permanecen en la semilla durante y
despus de la germinacin. La plmula de las dicotiledneas no est protegida
por un coleptilo. En vez de ello la plmula se abre paso a travs del suelo en
forma de garfio, denominndose plmula en gancho (Figuras 4-2 y 4-3). De esta
manera las delicadas hojas recin formadas, no se daiian.
EL TALLO
El pice del vstago es una estructura en forma de domo, el meristemo, general-
mente rodeado de hojas, escamas o ramas. El meristemo apical contiene un n-
mero de clulas relativamente pequeo, que da origen, por divisin, a todas las
dems clulas de la porcin area de la planta. Puede diferenciarse en reas de
ESTRUCTURA Y CRECIMIENTO DE PLANTAS SUPERIORES COMUNES I 9
ms o menos intensa divisin celular; sin embargo este tipo de diferenciacin
es ms pronunciado en las races y se discute en la seccin correspondiente.
La mayora de los meristemos apicales contienen dos zonas principales: la
tnica, con una o varias capas de clulas organizadas en hileras normales en
la superficie del meristemo, y el cuerpo, una masa de clulas, dispuestas con
menos orden, por abajo de la tnica. Las clulas de la tnica se dividen usualmen-
te en planos perpendiculares a la superficie del meristemo, mientras que las clulas
del cuerpo lo hacen en muchos planos diferentes;. La tnica por lo regular da
origen al tejido epidrmico; y el cuerpo, a la masa de tejido interno de tallos
y hojas.
Las zonas de divisin celular, alargamiento y maduracin se encuentran en
la punta del tallo, pero no estn claramente separadas. Ello se debe a que el meris-
temo produce no slo el tallo, sino tambin hojas y ramas de vstago mediante
excrecencias de tejido del margen del meristemo apical. Estas hojas crecen rpida-
mente hacia adelante del pice y lo envuelven. La diferenciacin del tejido vascu-
lar ocurre primero en las yemas foliares, formando rastros foliares. Por abajo de
ellos, en la zona de alargamiento del tallo, se forma dentro de 1 un anillo de cor-
Figura 4-4. Secci6n longitudinal de un pice de tallo. (De R.H. Ar-
nett, J r. y D.C. Braungart: An Introduction to Plan Biology. 3a. edi-
cin. The C.V. Mosby Co., St. Louis. 1970. Modificada de C.L.
Wilson y W.E. Loomis: Botany, ed. rev.: 1957. The Dryden Press.
Utilizada con permiso.)
Teiido
, ~~
Zona de alargamiento
Zona de diferenciacih
1 C L z a
Epidermis
I - u
Xilema primario 1 Floema primario
Cambium
80 INTRODUCCI6N Y GENERALIDADES
dones provasculares. Los rastros foliares se diferencian hacia abajo; los cordones
vasculares, hacia arriba, y finalmente, se establecen conexiones. Conforme el tallo
madura, los cordones provasculares se transforman en haces vasculares, compues-
tos de los principales elementos de conduccin del tallo (Figura 4-4).
Los tallos de dicotiledneas y monocotiledneas poseen en comn numero-
sas estructuras y tipos celulares, pero tienen ciertas diferencias en la disposicin de
sus tejidos (Figura 4-5). Ambas tienen una capa externa de epidermis, usualmente
cubierta en su lado externo con una cutcula cerosa. El tipo principal de clula
del material fundamental es el de parnquima; sta es una clula grande, de pared
delgada y relativamente indiferenciada. Por fuera de los haces vasculares est la
corteza, compuesta usualmente de elementos parenquimatosos mis pequeos y di-
ferenciados, y en el interior se localiza la mdula compuesta de clulas algo mayo-
res y paredes ms delgadas. Los haces vasculares de monocotiledneas estn dis-
persos (Figura 4-5). Cada haz vascular contiene clulas de xilema hacia el centro
y de floema hacia afuera. El xilema est compuesto principalmente de clulas
conductoras muertas, de pared gruesa, ya sean vasos (clulas grandes sin paredes
transversas que forman estructuras tubulosas que corren a lo largo del tallo) o
traqueidas (mucho menores en dimetro, con paredes terminales, y por lo regu-
lar con engrosamientos secundarios ms acentuados). El xilema tambin puede
contener fibras (parecidas a las traqueidas pero con extremos ms largos y estre-
chos) que sirven principalmente de soporte estructural, y cordones o lminas de
clulas parenquimatosas que penetran el tejido xilemtico.
El floema est compuesto principalmente de clulas de dimetro grande y
pared delgada con placas terminales caractersticas a manera de cribas, llamadas
elementos cribosos, alineados extremo con extremo para formar tubos cribosos;
stos se asocian con pequeas clulas parenquimatosas llamadas clulas acom-
paantes. Los vasos y las traquedias mueren conforme maduran y pierden sus
contenidos celulares, pero las clulas floemticas, as como las de parnquima no
especializadas de la corteza y la mdula permanecen vivas y conservan algo de su
integridad estructural. Los elementos cribosos pueden perder sus ncleos y sufrir
amplias modificaciones en estructura (ver Capitulo 13), pero permanecen vivos y
aparentemente son capaces de metabolizar.
Los haces vasculares estn tambin frecuentemente rodeados parcial o total-
mente de elementos fibrosos y todo el tallo puede tener cordones o un anillo de
clulas parenquimatosas modificadas, con paredes fuertemente engrosadas en el
floema.
La principal diferencia entre tallos monocotiledneos y dicotiledneos est
en la organizacin de los haces y en la existencia de tejido meristemtico en los
haces de dicotiledneas (Figura 4-5). Las monocotiledneas poseen haces disper-
sos por todo el parnquima, cada uno de los cuales posee xilema hacia dentro y
floema hacia afuera. El xilema que se forma primero, o protoxilema, est ms cer-
ca del centro y el xilema formado despus, o metaxilema, est ms prximo al
floema. No se produce ninguna divisin celular una vez que los haces se forman.
El engrosamiento secundario de tallos monocotiledneos es raro y, cuando se pre-
senta, se forman nuevos haces. Una gran parte de la maduracin y diferenciacin
del tejido se presenta antes del alargamiento, en tallos de monocotiledneas.
*Algunos prefieren traducir leaf traces como trazas foliares (N. del T.),
MONOCOTILED~NEA
(Maz)
DI COTI L ED~NEA
(Girasol)
Figura 4-5. Seccin transversa de un tallo de monocotilednea y ot ro de dico-
tilednea. (De R.H. Arnet t , Jr. y D.C. Elraungart: An Int roduct i on t o Pl ant
Biology. 3a. edicin. The C.V. Mosby Co., St. Louis. 1970. Utilizada con per-
miso.)
Los tallos de dicotiledneas son ms complejos y son capaces de crecimien-
to secundario casi invariablemente. Inicialmente los haces se disponen en crculo
alrededor de un ncleo central de mdula.
El xilema y el floema estn separados por una capa de clulas capaces de
dividirse llamada cambium. El crecimiento secundario tiene lugar a causa de este
cambium mediante divisiones tangenciales a la circunferencia del tallo, dando ori-
gen a clulas nuevas de floema hacia el exterior y clulas xilemticas nuevas hacia
el interior. Posteriormente se produce cambium interfascicular (entre fascculo,
entre haces) por rejuvenecimiento de clulas parenquimatosas entre los haces. As
se forma un crculo completo de cambium el que origina un anillo de xilema hacia
dentro y otro de floema hacia afuera (Figura 4-5). Toda la seccin central del tallo,
inclusive el floema y todo lo existente en su interior se llama estela. La corteza
externa y ms tarde las capas exteriores de floema, dan origen peridicamente a
cambium de corcho o felgeno, el cual produce (clulas de corcho (felema) que
constituyen principalmente la cscara. Conforme el tallo aumenta en dimetro, la
cscara ms antigua se desprende y se forma una cscara nueva de corcho y capas
aplastadas de floema viejo.
Las dicotiledneas perennes (leosas) pueden continuar engrosando durante
largos periodos de tiempo mediante el crecimiento secundario (Figura 4-6). El
xilema secundario se deposita en anillos anuales que contienen madera de prima-
vera con clulas grandes, esta madera posee a menudo la mayor parte de los vasos
en angiospermas leosas, o especies de madera dura y madera de verano con clu-
las pequeas. El tallo dicotiledneo perenne rara vez conserva el tejido producido
ESTRUCTURA Y CRECI MI ENTO DE PLANTAS SUPERI ORES COMUNES 83
por el floema por ms de uno o dos aos: el floema viejo muere y se desprende
conforme el tallo se agranda. Las bases de las ramas estn rodeadas de xilema nue-
vo, formndose nudos en la madera.
RACES
Una raz en crecimiento, primaria, secundaria o adventicia, puede dividirse, en ge-
neral, en tres regiones: la regin meristemtica, donde tiene lugar la multiplicacin
celular, la regin de alargamiento y diferenciacin donde prosigue en menor grado
la divisin celular y la regin de maduracin (Figura 4-7). El extremo de la raz es-
t protegido por la caliptra. El meristem0 contiene frecuentemente una reserva de
clulas embrionarias que se dividen con lentitud, el centro quiescente. La mayor
parte de la divisin celular se traduce en crecimiento radical, y la regeneracin de
"la L. caliptra tiene lugar alrededor de la periferia del centro quiescente, el que puede
involucrarse en la formacin del tejido organizador de la raz en crecimiento. Co-
lumnas de clulas producidas por la regin embrio.naria se extienden longitudinal-
mente para producir la estructura caracterstica de la raz. Algunas clulas (por
"" .~.
c,
it .
Figura 4-7. Diagrama de una raz y su i
caliptra. (De R.H. Arnett, Jr. y D.C.
Braungart: An lntroduction to Plant
Biology, 3a. edicin. The C.V. Mosby
Co., St . Louis, 1970. Utilizada con
permiso.)
-".....x . . ... , . . . . . . . . . . .
MONOCOTILED~NEA DICOTILED~NEA
Figura 4-8. Diagrama de secciones transversas de races de monocotilednea y
dicotilednea. (De R.H. Arnett, Jr. y D.C. Braungart: An Introduction t o
Plant Biology, 3a. edici6n. The C.V. Mosby Co., St. Louis, 1970. Utilizada
con permiso.)
Figura 4-9. Origen de una raz rameal (raz lateral). (De R.H. Arnett, Jr. y D.C.
Braungart: An Introduction to Plant Biology, 3a. edicin. The C.V. Mosby Co., St.
Louis, 1970. Utilizada con permiso.)
' z l at eral
Corcho
Radi o medula ej i do de f l oema
secundario
Radi o medula
Xi l ema secundario
Xi l ema pri mari o
Figura 4-10. Crecimiento secundario en una raz de dicotilednea. Diagrama de un corte trans-
versal de una raz vi ej a de Tilia europea. (De A.C. Shaw, S.K. Lazell y G. N. Foster: Photomi-
crographs of the Flowering Plant. Longmans, Green and Co. Ltd., Londres, 1965. Utilizada con
permiso.)
ejemplo, elementos de vaso) se alargan mucho ms que otras (por ejemplo, clulas
de corteza o epidermis) las que, por lo tanto, deben crecer por divisiones adiciona-
les. Las regiones de divisin, alargamiento y maduracin tienden a superponerse.
La maduracin de las clulas implica la formacim de pelos radicales en ciertas
clulas epidrmicas, la diferenciacin de las clulas de la estela, el engrosamiento
de las paredes de vasos conductores, y la diferenciacin de la corteza en varas
regiones.
Las estructuras generalizadas de una raz de monocotilednea y una dicoti-
lednea se muestran en la Figura 4-8. La parte central de la raz es la estela, que
contiene los tejidos conductores, xilema y floemaL, y ocasionalmente un ncleo
Cintr-al de m.dula, Las clulas del xilema y el floem;; son esencialmente idnticas a
las que se encuentran en los correspondientes tejidos del tallo. &tejidos por
fuera de la estela son, principalmente, la corteza, formada por clulas parenqullna-
tosas, y la epidermis,.
En races de monocotiledneas, cordones alternos de xilema y floema for-
man un ani110 de tejido conductor alrededor del ncleo central de la mdula
(Figura 4-8). A diferencia de los tallos monocotiledneos, el protoxilema es exter-
no; la maduracin avanza hacia 6i"'interior (metaxilema). Fuera de la estela, la
corteza est limitada externamente por la epidermis e internamente por la en-
dodermis.
La endodermis es importante en el proceso' de absorcin y transporte de
agua debido a que sus paredes transversas estn fuertemente suberizadas, de ma-
nera que el agua no puede atravesar la endodermis por los espacios intercelulares
sino a travs de las clulas (ver Captulo 11). En a].gunas races viejas de mohoco-
--- - ~ _ _
-~
- .
c.
86 I NTRODUCCI 6N Y GENERALI DADES
tiledneas se presenta un engrosamiento considerable de la pared en las capas ex-
ternas corticales para formar parnquima lignificado: un tejido de sostn; sin
embargo, en general se produce escaso -crecimiento de dimetro en races de
monocotiledneas. Algunas races permanentes de monocotiledneas pueden
desarrollar tejido secundario mediante la formacin de nuevos haces de tejidos
conductores en la corteza, pero no por la adicin de clulas nuevas al ya existente
xilema o floema primario.
El arreglo es similar en races de dicotiledneas, excepto que no existe
mdula y el xilema primario forma un ncleo slido, en forma de estrella en
seccin transversa (Figura 4-8). El floema primario se emplaza entre los extre-
mos de la estrella de xilema. Fuera del floema hay una capa de clulas, el peri-
ciclo, que retiene su actividad meristemtica. El periciclo es importante porque
sus clulas dan origen a races laterales, como se muestra en la Figura 4-9, un
proceso que ocurre con mayor frecuencia en dicotiledneas que en monocoti-
ledneas. La divisin celular en el periciclo forma un nuevo primordio radical
que crece a travs de la corteza, ya sea mecnicamente, abrindose paso por
la fuerza, ya sea enzimticamente, por digestin de las clulas corticales frente
a l. Los tejidos en la base de la raz lateral forman conexiones vasculares con la
estela de la raz principal. El crecimiento secundario en dicotiledneas-se inicia
con la formacin de un cambium alrededor de la estrella de xilema, el cual pro-
duce nuevo floema hacia afuera y xilema hacia adentro (Figura 4-10). En muchas
races, particularmente las reservantes y voluminosas de betabeles y nabos, pueden
formarse capas adicionales de cambium en el floema o en la corteza dando origen
a un engrosamiento secundario masivo. Las capas externas corticales se despren-
den y se produce corcho o cscara mediante un cambium de corcho que se origina
en el floema. En races viejas, pueden originarse races rameales o secundarias de
meristemos que desarrolla el floema.
_ _ .
- _
ESTRUCTURA DE LA HOJA
Las hojas son bsicamente tallos con extensiones laterales. Estn usualmente
preformadas en las yemas y una parte considerable del crecimiento visible es ex-
pansin celular ms que multiplicacin de clulas. Las hojas de dicotiledneas
normalmente crecen en longitud como resultado de la actividad de un meristemo
terminal, y la extensi h lateral del limbo se lleva a cabo por meristemos margina-
les a cada lado de la hoja.
En monocotiledneas el meristemo original est en la base de la hoja, justo
encima de la ligula o punto de insercin de la hoja, Esta es la razn de que las
gramneas puedan ( iy deban!) cortarse frecuentemente ya que las hojas continan
creciendo desde la base. La red de nervaduras foliar, generalmente paralela en mo-
nocotiledneas y pinnatirramificada o palmatirramificada en dicotiledneas, puede
ser cerrada o abierta (es decir, que encierran o no zonas de tejido parenquimatoso).
Las nervaduras continan con la estructura vascular del tallo va rastro foliar;
estn por lo general rodeadas por una vaina fascicular ms o menos desarrollada,
que puede ser muy importante en la fotosintesis de ciertas plantas (ver Captulos
7 y 14) y con frecuencia contiene masas de fibras lignificadas de esclernquima
que dan rigidez (Figura 4-11).
La lmina o limbo de la hoja est compuesta principalmente de parnquima,
ESTRUCTURA Y CRECIMIENTO DE PLANTAS SUPERIORES COMUNES 87
/ Espacio areo
Estorna
Espacio areo \
Estorna
MONOCOTI LEDNEA DI COTI LED~NEA
Figura 4-11. Diagrama de la seccin transversa de una hoja de monocotilednea y ot ra de di cot i -
Idonea. (De R.H. Arnet t , Jr. y D.C. Braungart: An Introduction to Plant Biology, 3a. edicin.
The C.V. Mosby Co., St. Louis, 1970. Utilizada con permiso.)
que es el mayor tejido fotosinttico y contiene muchos cloroplastos, junto con
una epidermis superior e inferior. Las clulas epidr~micas estn protegidas por una
cutcula suberizada o cerosa y usualmente carecen de cloroplastos. El parnquima
de hojas de dicotiledneas est arreglado en dos tejidos: una capa en palizada, con
un grosor de una o dos clulas en ordenacin compacta, y una capa de parnqui-
ma esponjoso con grandes espacios areos que lo atraviesan en todas direcciones
(Figura 4-11). La hoja de monocotiledneas carece de una capa en palizada bien
definida; est formada principalmente de parnquima esponjoso con amplios es-
pacios de aire.
Los espacios areos interiores de la hoja estn directamente conectados con
el aire externo a travs de pequeos poros o estom,as. Rodeando cada estoma hay
dos clulas, las clulas oclusivas que abren y cierran el estoma mediante su expan-
sin y contraccin. A diferencia de las clulas epidrmicas, las clulas oclusivas
contienen cloroplastos. El funcionamiento y la operacin de los estomas se con-
siderad en detalle en el Captulo 14.
Las hojas muestran una diversidad impresionante de formas y pueden estar
muy influenciadas en su desarrollo por factores ambientales como luz, contenido
de dixido de carbono, disponibilidad de agua, sumersin, edad de la planta, etc.
Adems, las hojas pueden modificarse de muchas maneras para formar zarcillos,
,aguijones, trampas para insectos, espinas, etctera.
FLORES Y FRUTO
La floracin marca el final del crecimiento del pednculo o tallo sobre el que nace
la flor, puesto que la floracin resulta de una modificacin del meristem0 termi-
nal. Una flor es esencialmente un extremo caulinar con apndices aglomerados,
donde el eje longitudinal se ha reducido y los apndices se han modificado de
manera caracterstica para producir spalos, pktalos, estambres y carpelos. Existe
un gran nmero de variaciones sobre la estructura. bsica, pero el plan bsico es
simple, como se muestra en la Figura 4-12. Todas llas estructuras que se muestran
88 INTRODUCCI6N Y GENERALIDADES
Estambre
Antera __._____
Filamento ..
F
Lculo ................ j\ ....... 1
Pistilo
Placenta
Figura 4-12. Anatoma de una flor. (De R.H. Arnett, Jr. y D.C. Braungart: An In-
troduction to Plant Biology, 3a. edicin. The C.V. Mosby Co., St. Louis, 1970. Uti-
lizada con permiso.)
en la Figura 4-12 son partes de la generacin diploide o esporofito (2 N) de la
planta.
Dentro del vulo* una clula madre de la megaspma sufre una divisin
reductora para producir un ncleo ovocelular, generalmente dos ncleos pola-
res y por lo regular otros cinco ncleos que pueden migrar hacia el extremo
opuesto del vu10 (ncleos antipodales) o permanecen junto al extremo micro-
pilar (sinrgidas), como se observa en la Figura 4-13. Estos ocho ncleos represen-
tan la generacin haploide considerablemente disminuida o gametofito femenino
de las angiospermas.
Mientras tanto en la antera la clula madre de la microspora ha sufrido
divisin reduccional para producir cuatro granos de polen que se transforman
en gametofitos masculinos. En la germinacin, tienen lugar divisiones nucleares
que generarn la produccin de un ncleo del tubo vegetativo, el que puede estar
relacionado con el crecimiento del tubo polnico por el estilo hacia el ovario, y
un ncleo generatriz que ms tarde se divide para producir dos ncleos esperm-
ticos (Figura 4-1 4).
Cuando el tubo de polen llega y penetra al ovario, los ncleos espermticos
se descargan en el interior del gametofito femenino. Uno de los cuales se une al
ncleo ovocelular para producir el cigoto diploide que se transforma en el em-
brin, la nueva generacin esporoftica. El otro se une a los dos ncleos polares
*Primordio seminal (N. del T.).
ESTRUCTURA Y CRECIMIENTO DE PLANTAS SUPERIORES COMUNES 89
B
Figura 4-13. Seccin transversa de
un ovario de lirio que muestra la
cblula madre de la megaspora ( A) y
el estadio tardo octonucleado (B).
(De R.H. Arnett, Jr. y D.C. Braun-
gart: A n I ntroduction to Plant
Bi ol ogy, ~ 3 a . edici6n. The C.V.
Mosby Co., St. Louis, 1970. Por
cortesa de George H. Conant,
Triarch Inc., Ripon, Wis. Utilizada
con permiso.)
90 INTRODUCCION Y GENERALI DADES
ANTERA J OVEN
Seccin transversal
Haz vascular
Gral
I
Antera
Bandas higroscpicas
Clulas labiales
Saco de polen
g::Yot:ecio
Ttra
micro
ANTE RA MADURA
Ncleo
generatriz
Ncleo del
Ncleos El polen se
espermticos descarga a
travs de las
dos aberturas
tubo
c vyer'eratriz
laterales de
la antera
Figura 4-14. Microspora (grano de polen) y desarrollo del gameto-
fito masculino. (De R.H. Arnett, J r. y D.C. Braungart: An Intro-
duction to Plant Biology, 3a. edicin. The C.V. Mosby Co., St .
Louis, 1970. Utilizada con permiso.)
para producir un tejido usualmente triploide que produce el endospermo. Los n-
cleos de las clulas sinrgidas y antpodas usualmente degeneran.
El desarrollo de diversos tejidos florales y del tallo de soporte (receptculo)
que sigue a la fertilizacin se traduce en la formacin de un fruto que contiene
una o muchas semillas. Los carpelos pueden producir, como en el tomate, una
baya, y varias capas de la pared ovrica o sus tejidos circundantes pueden llegar
a ser epidermoides o ptreos, como en el durazno o la pera. Asimismo, el extre-
mo del pednculo o la base de las partes florales pueden involucrarse en la forma-
cin del fruto, como en la fresa (que posee frutos secos numerosos, pequeos
y verdaderos, ocultos bajo la superficie de un fruto accesorio formado a partir del
extremo del pednculo), la manzana (el ovario est rodeado por una produccin
carnosa del receptculo) o el pltano (cuya cscara se desarrolla a partir del tubo
floral).
ESTRUCTURA Y CRECIMIENTO DE PLANTAS SUPERIORES COMUNES 91
MERISTEMOS: PATRONES DE CRECIMIENTO
Los principales meristemos de la planta son las puntas de tallos, races y todos los
rganos rameales en crecimiento, y &te es continuo durante toda la vida de la
planta o sus rganos. Igualmente importantes son los cmbiumes de la raz y el
tallo, particularmente en plantas perennes, que llevan a cabo el crecimiento en
grosor mediante los incrementos anuales de floema y xilema. Nuevas reas de acti-
vidad meristemtica, o cmbiumes, se forman a intervalos, usualmente en el
floema, para producir y regenerar la cobertura epidkrmica o cscara del tallo y la
raz. Los nuevos meristemos que inician las races rameales se forman en el peri-
ciclo o en el floema de la raz. Muchos rganos formados de las estructuras bsicas
del tallo, tales como hojas, ptalos, frutos y otros, (desarrollan meristemos secun-
darios que funcionan independientemente del meriskemo primario. As, el limbo
de una hoja se forma de meristemos laterales que llevan a cabo el crecimiento late-
ral de la hoja mucho despus de terminarse la divisin celular que conduce a su
crecimiento longitudinal.
Gran parte del crecimiento formal de una planta se realiza por la regulacin
de las actividades relativas de sus distintos meristemos. Es esta regulacin, junto
con la determinacin del tipo de tejido que han de producir los meristemos indi-
viduales, lo que determina el patrn del desarrollo vegetal. Tal es la razn de la
gran importancia que se atribuye a las actividades bioqumicas y fisiolgicas de
los tejidos meristemticos y el por qu de tanta investigacin dirigida hacia la
comprensin del patrn metablico y los mecanismos de control de los tejidos
meristemticos.
LECTURAS ADICIONALES
Textos generales sobre anatoma vegetal cubren este tema con mayor detalle.
Emu, K.: Vascular Differentiation in Plants. Holt, Rinehart & Winston. Nueva York, 1965.
Salisbury, F. B. y R. V. Parke: Vascular Plants: Form and Function. Wadsworth, Belmont,
Steward, F. C.: About Plants. Addison-Welsey Publishing Co. Inc., Reading, Mass. 1966.
Calif. 1965.
SECCIN 11
METABOLISMO
VEGETAL
Cap A
METABOLISMO ENERGTICO
REACCIONES DE OXI DACI ~N Y REDUCCI ~N
Es de mxima importancia entender las reacciones qumicas no slo porque
todos los organismos estn hechos de sustancias que deben sintetizarse y meta-
bolizarse por reacciones qumicas, sino tambin porque toda la energa utilizada
en hacer dichas sustancias y en efectuar trabajos en la clula es adquirida, alma-
cenada, metabolizada y utilizada por la adquisicin de sustancias y la operacin
de reacciones qumicas. Las reacciones ms comunes para la metabolizacin de la
energa son las de oxidacin y reducci:?. La oxidacin de un compuesto (o de
una ligadura en un compuesto) se efecta por la liberacin de uno o, por lo
general, dos electrones. La reduccin se lleva a calbo adicionando electrones. En
efecto, oxidacin y reduccin son la prdida o ganancia de electrones respecti-
vamente. Es evidente, dado que los electrones y otras partculas con carga no
pueden existir independientemente, que cuando una sustancia se oxida otra debe
reducirse. Una reaccin en la que los electrones se transfieren de una molcula
a otra, durante lo cual un compuesto se oxida y el otro se reduce se denomina
una reaccin redox.
Los compuestos orgnicos tienden a perder o ganar electrones. Un com-
puesto que tiende a perder electrones (transfirindolos a otro compuesto) es un
agente reductor; uno que tiende a atraerlos es un agente oxidante. El oxgeno es
un poderoso oxidante. En la reaccin
,
H - C : O + 0, + COZ + H,O
H
formaldehido
los electrones se transfieren del formaldehdo al oxgeno; el formaldehdo se oxi-
da a dixido de carbono y el oxgeno se reduce a agua. En esta reaccin los iones
hidrgeno (H') acompaan a los electrones (e-)l y la neutralidad elctrica se
mantiene. En la reaccin
CHJ -CHO + 1/2 0 2 + CH,-COOH
acetaldehdo cido acetic0
la molcula de oxgeno se reduce al incorporarse a la molcula orgnica oxidada.
METABOLISMO VEGETAL
Las reacciones redox no necesitan que participe el oxgeno y en la mayora
de las reacciones redox biolgicas no sucede as. Los sistemas con enlaces cova-
lentes son capaces de ganar o perder electrones y iones hidrgeno, como en la
reaccin
CH,-CH, + R---S-S--R + CH,=CH, + 2 RSH
ctano disulfito etileno ti01
en la cual el etano se oxida y el disulfito se reduce. Este tipo de reaccin puede
generalizarse as:
AH, + B 7 A + BH,
2
A rcducido B ovidado A oxidado H reducido
donde A y B son metabolitos. De nuevo los iones hidrgeno acompaan a los
electrones. Si una molcula contiene un tomo que puede sufrir un cambio de
Valencia (o sea una oxidacin o reduccin) esto puede llevarse a cabo por la adi-
cin o prdida de un electrn sin el transporte de iones hidrgeno consiguiente en
esta forma
compuesto fkrrico compuesto ferroso
orginico oxidado orgnico reducido
Un oxidante tiene cierta afinidad por electrones (sta se llama poder oxi-
dante), en tanto que un reductor tiene una afinidad por ellos muchos ms baja (su
tendencia a perder electrones es su poder reductor). Por tanto, los electrones
pierden energa potencial al pasar de un reductante a un oxidante. Si se hacen
reaccionar un oxidante enrgico y un reductor enrgico la reaccin redox se
efecta velozmente con gran liberacin de energa.
AH, + B + A + BH, + energa
reductor ovidantc
y la reaccin se denomina exergnica. Una reaccin que requiere o absorbe ener-
ga (por ejemplo lo opuesto de la reaccin precedente) se denomina endergnica
y no procede espontneamente.
Si dos oxidantes (o dos reductores) de igual potencial se mezclan, no hay
reaccin porque ningn compuesto puede oxidar o reducir al otro. Para que pro-
ceda una reaccin debe tenerse un potencial reductor u oxidante ms alto que el
otro. Posteriormente en este captulo se ver la cuantificacin y medida de los
potenciales redox, el efecto de la concentracin de los reactantes y la tasa y el
punto al que llegan las reacciones bajo la influencia de tales potenciales y gradien-
tes de concentracin.
METABOLISMO ENERGRTICO 97
REACCIONES DE HI DR~LI SI S
La rotura de un enlace covalente por introduccin de agua, llamada hidrlisis,
libera una gran cantidad de energa de este modo.
sacarosa + H 2 0 + glucosa + fructosa + energa
Inversamente, la remocin de agua para for:mar un enlace anhidro por lo
general requiere energa
O O
/I 1
energa + CHzOH + HO-C-CH, +. CH:2 -O-C-CH, + H,O
metano1 cido actico acetato de metilo
Subsiguientemente los enlaces anhdrido pueden contener buena cantidad
de energa, y un compuesto con uno de estos enlaces puede tener una energa
potencial mucho mayor que los productos de su hidrlisis. Esta caracterstica, jun-
to con el amplio rango de potenciales de energa existente en los compuestos
reductores y oxidantes proveen los medios qumicos por medio de los cuales los
organismos son capaces de extraer energa de su ambiente, almacenarla y usarla
para efectuar sntesis y trabajos.
PRODUCCI ~N DE ATP
Un sistema biolgico requiere energa para su construccin y mantenimiento.
Todos los compuestos contienen energa potencial almacenada en los enlaces de
su estructura que puede liberarse cuando aqullos se rompen. Los sistemas bio-
lgicos obtienen energa por un rompimiento oxidativo controlado de los enlaces
en molculas energticas y utilizacin de la energa resultante para hacer nue-
vos enlaces qumicos o para efectuar trabajo til. Laoxidacin incontrolada de un
enlace carbono-carbono con transferencia directa de electrones al oxgeno (dando
formacin de agua) libera toda la energa del enlace como calor, que normalmente
es intil para los sistemas biolgicos. Adems, la cantidad de energa liberada es
demasiado grande para que pueda manipularla un sistema biolgico.
Los sistemas biolgicos evaden esta dificultad transfiriendo los electrones
en una serie de pasos cortos; cada paso es una reaccin redox que libera una can-
tidad de energa suficientemente pequea que puede ser empleada con xito para
la sntesis de nuevos enlaces o usada para efectuar trabajo. As es que los electro-
nes pasan de la molcula combustible original, que va a oxidarse, a una molcula
transportadora de electrones, en estado de oxidaci'n, la cual va a reducirse. A su
vez este transportador pasa los electrones a otra molcula, que los pasa a otra,
hasta que finalmente son pasados al oxgeno con formacin de agua. Esta serie de
transportadores de electrones se llama una cadena de transporte de electrones.
Cada miembro de la cadena de transporte de electrones se reduce cuando
acepta electrones y se oxida cuando los pasa adelante. Cada miembro de la cadena
es un reductor ms dbil que el anterior, o sea que puede ser reducido por 10s
98 METABOLI SMO VEGETAL
miembros de la cadena precedentes pero reduce a los que le siguen. As, conforme
un electrbn pasa de uno a otro miembro de la cadena de transporte de electrones
se va perdiendo energa en cada etapa de la transferencia. Parte de esta energa se
conserva al usarse para hacer nuevos enlaces en compuestos especializados que
pueden usarse suhsecuentemente para dirigir otras reacciones. Estos enlaces se
denominan enlaces de alta energa. Uno de los mLis importantes de ellos es el
enlace anhdrido fosfato-fosfato en el trifosfato de adenosina (ATP) mostrado en
la Figura 5-1. Este compuesto se forma por la siguiente reaccin endergnica:
donde Pi significa fosfato inorgnico. Los enlaces de alta energa a menudo se
escriben con el signo (-). As, -P significa un enlace fosfato de alta energa,
como, por ejemplo, en el enlace del fosfato terminal del ATP (A--P-P - P).
Fi gura 5-1. Estructura del trifosfato de adenosina
(ATP).
O ti OH
Una reaccin de transporte de electrones procede por una reaccin exer-
gnica como la siguiente:
Estas reacciones pueden juntarse acoplndose
de modo que la reaccin exergnica empuja o dirige a la indergnica. En las
reacciones de transporte de electrones la sntesis de ATP generalmente ocurre
en reacciones acopladas, o sea en las que una reaccin no puede proceder sin la
otra. Si no hay difosfato de adenosina (ADP) o Pi utilizable, la oxidacin de A
no puede tener lugar, ya que se requiere ATP para posibilitar muchas reacciones
de sntesis en la clula, convirtindose en ADP + Pi en el proceso, la oxidacin
celular puede estar controlada por la exigencia de sntesis de ATP. Si no estn
ocurriendo reacciones de sntesis no se utiliza ATP, no se forma ADP + Pi y
las reacciones de oxidacin no pueden efectuarse. Este mecanismo impide una
METABOLISMO ENERGfiTICO 99
oxidacin sin sentido de las reservas. Los mecanismos de acoplamiento se con-
siderarn adelante (vase Reacciones de Sntesis y Transferencia de grupo, p-
ginas 106 y 109).
UNA CADENA DE TRANSPORTE DE ELECTRONES
La mayora de las reacciones de oxidacin que producen energa en la clula,
estn acopladas a un sistema de transporte de electrones bien definido que, segn
se ha descubierto, opera en la mayora de los tejidos animales y vegetales en una
u otra forma. Existe cierta variacin en la naturaleza de algunos de sus miembros
entre los grupos de organismos, pero el esquema general est tan extendido entre
los sistemas vivos que puede ser considerado una de las secuencias de reacciones
bsicas de los organismos vivientes. Un esquema generalizado se muestra en la
Figura 5-2.
La sustancia que va a oxidarse (el substrato) AH, reacciona primero con un
nucletido de piridina, generalmente el dinucletido de nicotinamida adenina
(NAD') pero a veces con el fosfato de dinucletido de nicotinamida adeni-
na (NADP')". La estructura de estos nucletidos se muestra en la Figura 5- 3. Dos
electrones y dos iones H' son transferidos al NAD ' reducindolo a NADH + H',
a veces escrito como NADH2" o NADH,. Luego el NADH,' transfiere dos electro-
nes y dos iones H + a una enzima flavina, sea el mo~~onucletido de flavina (FMN)
o el dinocletido de flavina adenina (FAD), reducindolo (Figura 5-4). La energa
requerida para reducir al FAD es algo menor a la energa liberada por oxidacin
del NADH2', y el exceso es utilizado para sintetiz,ar una molcula de ATP. A su
vez el FADH, reduce una enzima que no ha sido bien caracterizada pero que
contiene un hierro no-heme acoplado con grupos --SH (no mostrados en la Figura
5-4). ste, a su vez, reduce dos molculas de citocromo b enzima porfirnica con
hierro, que es una transferasa de electrones (ver Figura 5-5, diagrama de un cito-
cromo tpico).
Figura 5-2. Esquema de una cadena de transporte de electrones. Dos electrones son transferi-
dos en cada paso. AH es el substrato que se oxida a A. 1/ 2 O2 es el aceptor final de electrones
que se reduce a HzO. NAD' (NADH) y FAD ( FADH2) son el dinucletido de nicotinamida
adenina y el dinucletido de flavina adenina (oxidados y reducidos). UQ es la ubiquinona. Cyta,
b, etc., son los pigmentos citocromo (Fe3') y (Fe") es una enzima con hierro, desconocida
en forma oxidada y reducida.
i red) I Fe3* Fe2* I Fe"
ADP t PI 2H' ADP t PI ADP t PJ
*NAD a veces se denomina nucletido de difosfopiridina (DPN) o coenzima I . NADP
se denomina a veces nucletido de trifosfopiridina (TPN) o coenzima 11.
100 METABOLISMO VEGETAL
Figura 5-3. Estructura del dinucletido de nicotinamida adenina (NAD+) y
del dinucletido de nicotinamida adenina fosfatado (NADP+). La reduccin
a NADH + H+ o NADPH + H+ tiene lugar en la parte de la molcula que se
indica.
O
I /
HO-P-O-
I
I / \H (oxi dado) (reduci do)
"c
I (nucl e6ti do de ni coti nami da)
? OH OH
Grupo fosfato
extra en el NADP
OH
La reduccin y oxidacin de citocromo se lleva a cabo por la adicin 0 re-
mocin de un electrn en la parte con hierro de la molcula, que pasa de Valencia
+2 a +3 y viceversa. El citocromo b reduce un compuesto fenlico a su corres-
pondiente quinona, la ubiquinona (Figura 5-6); en este punto deben adicionarse
iones hidrgeno as como electrones. Los iones hidrgeno no son, necesariamente,
los mismos que se liberaron en la cadena al oxidarse el FADHz, el sistema es acuo-
so y siempre est presente un cierto nmero de H+. Los electrones de la ubiquinona
van a reducir al citocromo c; de nuevo dos iones hidrgeno se liberan de la cadena
de transporte de electrones. En este punto se libera energa suficiente, para sinteti-
zar una segunda molcula de ATP por cada dos electrones transferidos. El citocro-
mo c reduce al citocromo a que a su vez reduce al citocromo a3 , generndose en
este punto un tercer ATP por cada dos electrones transferidos.
El citocromo a3 es el nico miembro de la cadena de transporte de electro-
nes del que se sabe que puede reaccionar con el oxgeno molecular. Los citocro-
mos a y a3 forman una asociacin molecular llamada citocromo oxidasa que an
no ha sido separada qumicamente. Las dos enzimas parecen operar indepen-
dientemente, pero los experimentos han demostrado que pueden modificar mu-
tuamente su accin qumica. Adems del hierro presente en cada uno, estos dos
citocromos se caracterizan por la presencia, en ambos, de un tomo de cobre.
Los tomos de cobre tambin estn involucrados aparentemente en el proceso de
METABOLISMO ENERGBTICO
101
Figura 5-4. Estructura del monoculetido de flavina (FMN) y del dinu-
cletido de flavina adenina (FAD). La recluccibn a FMNH2 o FADH2 tiene
lugar en la parte de la molbcula que se indica.
H-C-OH
I NH2
I
H-C-OH
I
H-C-OH0 O
I It I /
I 1
H,C-O-P-O-P-O
\
OH OH
v
FMN
\
FAD
Figura 5-5. Estructura del anillo porfi- SH
rnico del citocromo c. un citocromo
tpico. La porfirina se adhiere a SU pro-
tena probablemente por grupos SH y
por interaccin del tomo de hierro con
los grupos reactivos de la protena.
I
H3C-CH
CH2 CH2
I I
CH2
I
CH2
I
COOH COOH
transporte de electrones. El exacto mecanismo de reaccin del complejo cito-
cromo a-a3 con el oxgeno no se conoce todava. Dos electrones son transferidos
a un tomo de oxgeno (1/ 2 O2 ) junto con 2H' para hacer H2 O. Esto completa
la transferencia de dos electrones desde el alto nivel energtico que tenan en la
molcula combustible AH2 hasta el bajo nivel energtico que tienen en el agua.
Gran parte de la energa liberada por la oxidacin de la molcula combustible
102 METABOLISMO VEGETAL
se conserva en las tres molculas de ATP que se sintetizan durante el proceso de
transferencia de electrones.
El sistema de transporte de electrones esquematizado opera en las mito-
condrias. En las reacciones de fotosntesis que atrapan y almacenan energa
ocurren, bsicamente, reacciones similares. Las modificaciones de estos sistemas,
su control y operacin, y sus relaciones con los procesos generales del metabolis-
mo, as corno la evidencia experimental en que se basan estas ideas, se consideran
en el captulo siguiente. Es necesario enfatizar que hay muchas vas alternativas
por las que pueden pasar los electrones de los substratos al oxgeno, pero la cade-
na de transporte de electrones por los citocromos es la mica capaz de sintetizar
ATP. Todos los otros sistemas desperdician la energid derivada de la oxidacin
del substrato o la usan directamente para la reduccin acoplada de otros substra-
t,os. La cadena citocrmica es pues de mxima importancia en el metabolismo
energktico integral de la clula.
Fi gura 5-6. Ubiquinona. La quinona se convierte en fenol
cuando se reduce. La cadena lateral (R) se compone de 6-10
unidades isoprenoides (ver Captulo 9).
U
/ I
CH,
I
CH3-O-- - ( ~ C H , ~ C H ==C H - - C H , ~~) , - H
(oxidado)
I 1
O
-2 H.,
I
OH
MEDICIN DE LOS CAMBIOS DE ENERGA
El mtodo ms conveniente de medir la energa de enlace utilizable es medir la
energa libre estndar (o sea la cantidad de energa utilizable para efectuar un
trabajo) al hidrolizar el enlace.
La reaccin qumica
puede efectuar trabajo til. ste se mide por el cambio de energa libre estndar
en la reaccin, A Go, derivado de
AGO = ~~ RTl n K
METABOLISMO ENERGBTICO 103
donde R =constante de los gases (1.99 cal/ C/ moll); T =temperatura absoluta,
y K =constante de equilibrio de la reaccin cuando los reactantes estn en acti-
vidad unitaria (esencialmente concentracin molar). El valor A Go es til para
comparar las reacciones pero la energa utilizable real depende de la concentra-
cin (indicada por cuadratines) de los reactantes y puede determinarse por la
ecuacin
AG = AGO + RT In -____
I C 1 [ O1
[ A l [ U 1
AG mide pues la energa libre til bajo unas condiciones dadas, diferentes a las
estndar (o sea rectantes a concentracin molar). La energa libre estndar
de la hidrlisis de varios compuestos importantes se muestra en la Tabla 5-1. La
relacin entre la constante de equilibrio de una reaccin y la energa libre utili-
zable o requerida se muestra en la Tabla 5-2.
Para calcular los cambios de energa libre en :las reacciones de oxidorreduc-
cin, es necesario medir la tendencia de las sustancias a dar o aceptar electrones.
Esto se encuentra midiendo el potencial elctrico del compuesto respecto a un
electrodo de hidrgeno o actividad unitaria (pH O). El potencial de oxirreduc-
cin estndar E, se mide con el potencimetro usando la ecuacin
donde E = el potencial observado en voltios; R ==constante de 10s gases; T =
temperatura absoluta; n =nmero de electrones transferidos y F = constante
Faraday (23,000 cal/ v). Por tanto E =E, cuando los reactantes estn a la unidad
o a igual concentracin. El valor usado ms comnmente es el potencial de
oxirreduccin estndar a pH 7 (en lugar de pH O), denominado E,. Los valores
E, de varios compuestos biolgicos importantes se dan en la Tabla 5-3.
El trabajo que puede efectuarse por una reaccin de oxirreduccin en tr-
minos de cambio en energa libre A G puede calcular,se por la relacin
A G =-n FAE,,
donde n = nmero de electrones transferidos y F =constante faraday. Puede ver-
se que la sntesis de una molcula de ATP por medio de una reaccin de oxirre-
duccin con transferencia de dos electrones tal como la del citocromo b a citocro-
mo c requerira una AEo de 0.161 v:
7,400 = --2 X 23,000 X AL o
AE, = 0.161 v
De hecho, puede verse en la Tabla 5-3 que la AE o de la transferencia del
electrn citromo b-citocromo c es aproximadamente 0.2 v. Esta energa es ms
que suficiente para hacer una molcula de ATP. El residuo de energa no se con-
serva sino que se utiliza para desbalancear el equilibrio hacia la sntesis de ATP.
En otras palabras, es utilizada para hacer marchar la reaccin para acelerarla
y llevarla hasta el final.
104 METABOLISMO VEGETAL
Tabla 5-1. Energa libre estndar de la hidro- Tabla 5-2. Relaciones entre la constante de
lisis a pH 7 (--AGO) de algunos compuestos equilibrio de una reaccin (K) y el cambio
importantes biolgicamente. en energa libre estndar en la reaccin.
Compuesto - AG" K AGO Tipo de
callmol callmol reacci6n
Acetilcoenzima A 10,500
ATP 7,400
Fosfatos (ligamento Bster) 3,000
Azcar (aldosa)-1-fosfato 5,000
Fosfoenol piruvato 13,000
Glutamina (amida) 3,400
Glicsido 3,000
Sacarosa 6,570
Difosfato de uridina glucosa 7,600
Fuente: H.R. Mahl er y E.H. Cordes: Biological
Chemi stry. 2a. ed. Copyri ght 1966-1967 por Henry
R. Mahl er y Eugene H. Cordes. Con permiso de
Harper & Row Publishers Inc.
0.001 4089 Enderghica
0.01 2726 Endergnica
0.1 1363 Endergdnica
1 O
10 " 1 363 Exergnica
1 O0 -2726
Exergnica
1,000
-4089
Exergnica
Tabla 5-3. Potenciales de oxirreduccin estndar ( F 0 ) de varios compuestos importantes
biolgicamente.
Reaccin ' o, v Reaccin ' o, v
0 2 / Hz O
Fe3 +/ Fe +
Cyt a, Fe3 +/ Fe2+
Cyt bs, Fe3 +/ Fe2+
Ubiquinona oxlred
Acido deshidro ascdrbicol cido ascdrbico
Fumaratolsuccinato
FMN/ FMNHz
0.815
0.77
0.29
0.02
0.10
0.08
0.03
-0.02
Oxaloacetato/ malato
Acetaldeh do/ etanol
Ribofiavina oxlred
Acido lipico oxlred
NAD+/ NADH+2
H+/ H2
Succinatolcetoglitarato
Acetato 4- COZ Ipiruvato
-0.17
-0.20
0.23
-0.29
-0.32
-0.42
-0.67
-0.70
Fuente: H. R. Mahl er y E.H. Cordes: Biological Chemistry. 2a. ed. Copyri ght 1966-1967 por Herny R. Mahl er
y Eugene H. Cordes. Con premiso de Harper & Row Publishers Inc.
Este concepto es muy importante en bioqumica. Como se dijo antes, la
energa libre utilizable de una reaccin depende de la concentracin de los reac-
tantes y de los productos, as como de la constante de la reaccin. Cuanto mayor
la concentracin de los reactantes ms rpida proceder la reaccin; cuanto ma-
yor la concentracin de los productos, ms lenta proceder la reaccin. Una reac-
cin que tiene una constante de equilibrio grande (ver Tabla 5-2) proceder casi
hasta completarse a pesar de que la concentracin de los productos sea alta y la
de los reactantes baja. Una serie de reacciones puede formar una secuencia en
la que uno o ms de los productos de una reaccin sirvan como reactantes de la
siguiente. En una secuencia as, si una de las reacciones tiene una constante
de equilibrio grande, es decir una reaccin fuertemente exergnica, tender
a dirigir toda la secuencia de reacciones. As que la energa de la reaccin fuerte-
mente exergnica que en apariencia desperdicia realmente se utiliza para dirigir
toda la secuencia de reacciones.
METABOLISMO ENERGBTICO 105
Muchas reacciones biolgicas secuenciales contienen una reaccin exerg-
nica as, a menudo la hidrlisis de un enlace fosfat,o de alta o media energa por
una fosfatasa. Esta reaccin en la que se libera en.erga sirve para mantener a la
secuencia de reacciones procediendo hacia adelante y le impide llegar a equilibrio
cuando an est presente una gran cantidad de substrato sin reaccionar. Estas
consideraciones pondrn de manifiesto que la direccin en la que procede una
reaccin no est gobernada solamente por su constante de equilibrio sino tam-
bin por la concentracin de los reactantes y los productos. Es pues posible que
una reaccin aparentemente desfavorable se use en un proceso biosinttico, a
pesar de su gran requerimiento de energa, acoplndola con otra reaccin libera-
dora de energa.
Un modelo energtico del sistema de transporte de electrones que ya se
describii, en este captulo, se presenta en la Figura 5-7. Ah se ven en perspectiva
los componentes del sistema, mostrndose los puntos donde se utiliza la energa
para hacer ATP y donde la energa se desperdicia o se utiliza para hacer que una
reaccin ocurra contra gradientes de concentracin no favorables. Se hace eviden-
te que la representacin exacta de potenciales de oxidoreduccin o de cambios
en la energa libre es imposible, pues la concentracin de los reactantes en los
sistemas biolgicos vara de una a otra situacin. Por tanto el modelo en la Figura
5-7 es solamente una aproximacin.
Figura 5-7. Niveles de energa aproxi mados de los i ntermedi a-
rios en la cadena de transporte de electrones. El cambi o i nte-
gral de energa l i bre de E,-, - 0.42 v a $0.81 v, es de casi
56 kcal /mol para la transferencia de dos electrones. La sn-
tesis de ATP requiere cerca de 7.5 kcal /mol .
Ed. v Ed, v
AH, - A
I
1 A G =4.6 kcal
-0.4
2Ht +2e- -0.42
1 NAD
I
-0.32
-0.2 1
t
4
FAD
o
1
Cyt b
I
-0.1 c
t
4
FAD
O
Cyt b
I
> A G = 10.1 kcal
O ] A G =4.6 kcal
O
I
I
( 1 ATP) > A G = 10.1 kcal
Cyt c +0.22
+0.3 I
A G =3 kcal
Cyt a 1-0.29
7
1 A G = -20 kcal
+o6 t I
I J
+0.7
Cyf a3
+0.8 L
+0.81
106 METABOLISMO VEGETAL
COMPUESTOS DE ALTA ENERGA
Ciertas molculas como ATP son importantes para dirigir muchas de las reacciones
metablicas o de sntesis en los sistemas biolgicos. Dado que estas molculas
esencialmente proveen la energa para que sucedan las reacciones, han sido clasifi-
cadas por F. Lipmann como compuestos de alta energa. Estos compuestos se
caracterizan por una energa libre negativa de hidrlisis grande; o sea que al
hidrolizarse rinden gran cantidad de energa. Los compuestos que solamente rin-
den una cantidad pequea de energa se conocen como compuestos de baja
energa. Como regla general los compuestos de alta energa rinden por lo menos
7,000 cal/mol o tienen un valor E, de +0.3 v o menos.
Hay varios tipos importantes de compuestos de alta energa, y los ms
comunes de ellos contienen enlaces fosfato de alta energa, a menudo abreviado
-P. De stos los ms importantes son anhdridos del cido fosfrico (P-P) tales
como ATP, anhdridos carboxlicos fosfricos tales como acetil fosfato (acetil-P)
y enolfosfatos tales como el fosfoenol piruvato (PEP). Estos enlaces son esencial-
rwnte inestables; su hidrlisis por introduccin de una molcula de agua, da por
resultado la formacin de uno o varios productos mucho ms estables con una
prdida de energa. Otros enlaces importantes de alta energa son los tiolsteres
de los cuales el de mayor importancia es la acetil-coenzima A (acetil-COA). Ciertos
steres de aminocido pueden ser clasificados como compuestos de alta energa,
tales como la S-adenosilmetionina (un donador del grupo/metilo) o la glucosa-
uridina difosfato (un donador de glucosilo). La AGO de cada uno de estos com-
puestos se enlista en la Tabla 5-1. Muchos donadores de electrones tales como
el NADH2+, el NADPH2+y el cido lipoico, que tienen valores E,, bajos (Tabla
5-3) pueden clasificarse claramente como compuestos de alta energa. Todos estos
compuestos son importantes en el metabolismo energtico de la planta.
MECANISMO DE SNTESIS DEL ATP
Cmo se acopla la energa metahlica liberada en la cadena de transporte de
electrones con la formacin de ATP? Este interrogante ha desafiado a los cien-
tficos por dcadas y an no est clara la respuesta. Se han adelantado varias
teoras y una de ellas, la teora quimiosmtica, ha tenido general aceptacin.
Sin embargo, debe enfatizarse que no se conocen los detalles, algunos datos
inconsistentes no se entienden an y no se ha probado ninguna teora sobre la
sntesis del ATP.
La hiptesis qumica de la sntesis del ATP involucra la formacin de
un enlace de alta energa con una hipottica protena intermediaria al reducirse un
miembro de la cadena respiratoria.
AH2 + enzi ma + protena + A - protena + enzima-Hz
La energa del enlace protena-substrato es luego usada para sintetizar
ATP
A protena + ADP + Pi + A + protena + ATP
METABOLISMO ENERGBTICO 107
L a hiptesis quimiosmtica, adelantada por el bioqumico britnico P.
Mitchell (residente en los Estados Unidos) es una modificacin de sta. La cadena
respiratoria se usa para separar las cargas en la reacci6n
H + H' + electrn-
hidrgeno ion hidrgeno
Las dos partculas cargadas se separan por lados opuestos de la membrana
de la mitocondria mediante las enzimas transportadoras de electrones que, de
acuerdo con la hiptesis, estn arregladas de tal modo en la membrana interna
de la mitocondria que transportan hidrgeno al exterior y electrones al interior.
Como consecuencia los iones hidrgeno, separados de los electrones en las reaccio-
nes de transferencia de electrones, son pasados al exterior de la membrana interna
de la mitocondria. Adems, los tomos de hidr6gen.o transportados a travs de la
membrana deben derivarse del agua por las reacciones.
H,O + OH- + H'
H' + e-(del transportador de electrones) -+ H
Como resultado de esto en el interior de la membrana interna se acumulan
iones hidroxilo. Esta situacin, y la manera segn se cree, en que participan los
diversos componentes transportadores de electrones se muestra en la parte supe-
rior de la Figura 5-8.
Debe recordarse que las reacciones que forman ATP a partir del ADP y Pi
incluyen la remocin de una molcula de agua. La situacin creada por las reaccio-
nes de transferencia de elect,rones y iones hidrgeno al organizarse en el espacio,
en las ecuaciones anteriores genera un poderoso gradiente qumico y potencial
ya que los iones hidrgeno estn en el exterior de la membrana interna de la mi-
tocondria en tanto que los iones hidroxilo estn en, el interior. El exterior de esta
membrana se carga positivamente en tanto que el interior se carga negativamente.
Este potencial tiende a juntar fuertemente entre s a los componentes del agua.
Sin embargo, el gradiente no puede desplomarse por la simple formacin de
agua y liberacin de calor porque la membrana interna de la mitocondria es esen-
cialmente impermeable a los iones hidrgeno o hidiroxilo. Sin embargo, hay vas
por las que los iones hidrgeno pueden penetrar las membranas y es por las sa-
lientes de la membrana interna de la mitocondria que llevan la enzima ATPasa.
Como la mayora de las enzimas la ATPasa es capaz de catalizar la reaccin
hacia adelante o hacia atrs de acuerdo con las condiciones existentes, y por tanto
puede no slo hidrolizar al ATP sino tambin sintetizarlo. Existe la hiptesis de
que las particdas F1-ATPasa (ver pgina 58) se arreglan de forma que los iones
hidrgeno puedan entrar por va de las partculas F,, o salientes slo cuando
estn presentes ADP y Pi. Bajo la influencia de un alto gradiente de potencial,
dos intermediarios hipotticos, X e I (uno de los cuales, al menos, se supone ser
un sitio activo en la ATPasa) forman un enlace anhdrido que acta removiendo
el oxgeno de los grupos hidroxilo del Pi. El oxgeno se usa para hacer agua con
los iones hidrgeno que vienen del exterior. Bajo la influencia del mismo gradien-
te, los iones hidrgeno del ADP y de los grupos hidroxilo del Pi dejan la F1 -ATPasa
en el interior, donde forman agua, combinndose c:on los grupos hidroxilo deriva-
108
EXTERI OR
(espacio entre
las membranas DE LA
MEMBRANA
I NTERNA
METABOLISMO VEGETAL
I NTERI OR
(matriz)
ATP
Figura 58. Diagrama esquemtico de la membrana de la mitocondria mostrando cmo es que
el sistema de transferencia de electrones, por el transporte alternado de protones +electrones o
solamente de electrones, puede generar un gradiente protn-hidroxilo a travs de la membrana
(parte superior del diagrama). La parte inferior del diagrama muestra una via hipotetica por la
que el gradiente puede utilizarse por medio de la ATPasa para hacer ATP. Existen otros posi-
bles mecanismos.
METABOLISMO ENERGfiTICO 109
dos del proceso de transporte de electrones descrito previamente. Los radicales
ADP y Pi as formados se unen para generar ATP. Esta secuencia se muestra en el
diagrama de la mitad inferior de la Figura 5-8.
Es evidente que la accin de agentes desacopladores, compuestos que per-
miten proceder al transporte de electrones (a menudo a tasas muy aceleradas)
sin la consiguiente formacin de ATP, puede explicarse fcilmente con la hip-
tesis quimiosmtica. Se supone que su accin se deriva de su efecto sobre las
membranas ya que las vuelven ms permeables a los iones hidrgeno que pueden
atravesarlas y entonces el gradiente colapsa con la formacin directa y la prdida
de energa resultante. De modo similar, el acoplamiento del transporte de electro-
nes al transporte de partculas cargadas (por ejemplo K + Ca2 +) a travs de mem-
branas se explica fcilmente con esta hiptesis. En tanto el ion pueda permear
la membrana, difundir hacia abajo del gradiente electroqumico generado por el
gradiente del ion hidrgeno, a travs de la membrana. Este acoplamiento se
se examinar con mayor detalle en el Captulo 12 donde se considera el transpor-
te de iones.
Es conveniente recordar que este esquema es an hipottico. Sin embargo,
parece concordar mejor con los datos experimentales que otras hiptesis alterna-
tivas y muchos bioqumicos creen que ste, o un esquema similar, provee la mejor
explicacin posible de la sntesis del ATP. Otros conceptos incluyen al intermediario
de alta energa o hiptesis del acoplamiento qumico y la hiptesis de las cargas
apareadas mviles. La hiptesis del acoplamiento qumico requiere interme-
diarios de alta energa que nunca se han aislado, y es difcil de explicar la accin
de los desacopladores con esta hiptesis. La hiptesis de las cargas apareadas
mviles requiere que los electrones se muevan a travs de las membranas siguiendo
canales especficos bajo la influencia del gradiente electroqumico formado por
los transportadores de electrones y que iones cargados positivamente, encapsu-
lados en molculas proteicas especiales llamadas ionforos, se muevan en canales
o tneles paralelos, bajo la influencia de interacciones coulmbicas entre los
electrones cargados negativamente y los ionforos cargados positivamente. Una
vez ms, las estructuras requeridas son hipotticas y la evidencia que da base a esta
hiptesis no es muy fuerte.
Una de las evidencias ms claras en que se basa la hiptesis quimiosmtica
es el hecho de que el gradiente de pH necesario puede demostrarse e inversamente,
si se aplica un gradiente de pH a mitocondrias o cloroplastos aislados, tiene lugar
la sntesis de ATP. Esta hiptesis requiere tambin membranas intactas y el com-
pleto aislamiento de los espacios interno y externo que rodean la membrana
quimiosmticamente activa, exigencias que deben cumplirse para que ocurra la
fosforilacin en la mitocondria o en el cloroplasto. El peso de la evidencia bio-
qumica parece estar hoy da en favor de la elegante y relativamente simple
hiptesis quimiosmtica.
REACCIONES DE TRANSFERENCIA DE GRUPO
Es obvio que los compuestos de alta energa pueden reaccionar enrgicamente con
un componente comn de su ambiente, generalmente el agua. La formacin de
muchos enlaces qumicos en la sntesis de molculas biolgicas y elementos
estructurales requiere la eliminacin de agua, colmo por ejemplo en la sintesis
de sacarosa.
110 METABOLISMO VEGETAL
glucosa f fructosa .+ sacarosa + H,O - 6,600 cal
Tal como est escrita esta reaccin no puede llevarse a cabo en los sistemas
biolgicos. Solamente ciertas reacciones pueden eliminar agua y formar enlaces
anhdridos; la ms comn de ellas es la sntesis de ATP.
ADP + Pi -+ ATP + H,O - 7,200 cal
siendo suministrada la energa por las reacciones de transporte de electrones.
Una vez que se presenta la energa en un enlace anhdrido, puede ser con-
servada transfiriendo el grupo sin intervencin del agua. As la energa puede ser
transferida a otra molcula al transferir el grupo.
En este caso se transfiere el grupo fosfato. El ster de la glucosa-1-fosfato
contiene ahora la mayor parte de la energa del enlace de alta energa del ATP
(no toda la energa, 1,200 cal, se ha perdido, pero es suficiente para hacer que
ocurra la reaccin).
Una enzima del organismo Pseudomonas, la sacarosa fosforilasa, puede
catalizar la siguiente transferencia de grupo (en este caso el transferido es el gru-
po glicosil).
glucosa-I-fosfato + fructosa -+ sacarosa + Pi - 600 cal
y an queda almacenada mucha de la energa original, pero ahora se ha transfe-
rido al enlace anhdrido presente en la sacarosa. En esta forma la hidrlisis del
ATP se ha acoplado a la sntesis de sacarosa.
Realmente la sntesis de la sacarosa en las plantas superiores ocurre por una
secuencia an ms interesante de transferencia de grupo que incluye a los nucle-
tidos UDP, UTP, y un nucletido glicosil-sustituido, el difosfato de uridina
glucosa (UDPG) en la secuencia siguiente
UDP + ATP -+ UTP + ADP
El ATP es resintetizado por las reacciones de transporte de electrones en
otra parte cualquiera de la clula. El UTP reacciona entonces con la glucosa-l-fos-
fato (G-1-P) para generar la molcula donde se transfiere el glucosil UDPG y piro-
fosfato que es una molcula que consiste en dos fosfatos unidos por un enlace
anhidrilo (P - P), escrito PPI.
UTP + G-1-P -j UDPG + PPI
PPi +H 2 0 + 2 Pi + X.000 cal
El pirofosfato se hidroliza a fosfato inorgnico con la liberacin de una
gran cantidad de energa. Esta reaccin tiende a dirigir toda la secuencia hacia
adelante. Luego el UDPG transfiere la porcin glucosa a una molcula de fructosa
para generar sacarosa.
METEBOLISMO ENERGRTICO 111
UDPG + F -+ sacarosa t UDP
Alternativamente, UDPG puede reaccionar con la fructosa-6-fosfato (F-6-P)
para dar sacarosa-fosfato.
UDPG + F-6-P + sacarosa-fosfato
sacarosa-fosfato + H 2 0 -+ sacarosa -t Pi + 3,000 cal
La hidrlisis de la sacarosa-fosfato rinde a.n ms energa, lo que hace
posible la acumulacin de altas concentraciones de sacarosa. Esta secuencia de
reacciones, involucrando tanto reacciones de tranlsferencia de grupo como reac-
ciones exergnicas, permite efectivamente la sntesis y concentracin de cantida-
des muy grandes de sacarosa, como las que se encuentran en la caa de azcar y la
remolacha y en las clulas de las plantas fotosintticas. Nuevamente, a travs de
estados intermedios, la hidrlisis del ATP (y de G-11-P) se ha acoplado a la sntesis
de la sacarosa.
El principio de conservacin de la energa a travs de las reacciones de
transferencia de grupo es muy importante. Una vez que se hidroliza un enlace
de alta energa, ste se degrada. Sin embargo, a veces es necesario hidrolizar dichos
enlaces directamente para forzar a que las reacciones se presenten. As que la
energa de hidrlisis de un enlace de alta energa puede utilizarse para efectuar
una reaccin, a pesar de una concentracin alta del producto. Las clulas contie-
nen varias enzimas hidrolticas que efectan esto. Sin embargo, las clulas deben
tener medios efectivos para impedir la accin indiscriminada de enzimas tales
como fosfatasa (que hidroliza los fosfatos) o ATPasa (que ataca al ATP) que
podran destruir todo el substrato utilizable desperdicindolo. Tales enzimas
generalmente son secretadas en cuerpecillos o compartimientos celulares y sola-
mente se liberan cuando se necesitan. La mayora de las fosfatasas son altamente
especficas; solamente estn presentes en aquellos organelos donde se requieren
con propsitos metablicos pero quedan excluidas de los organelos donde las
reacciones de sntesis requieren la presencia continuada de substratos fosforilados.
EL CONCEPTO DE CARGA ENERGTICA
Y EL CONTROL METAB~LICO
Las clulas contienen una cantidad finita de compuestos que almacenan energa,
particularmente los fosfatos de adenosina (AMP, ADP, ATP) que pueden estar
presentes como compuestos de alta o de baja energa. As puede decirse que
una clula est totalmente cargada cuando todos sus adenilatos estn presen-
tes como ATP. Similarmente, cuando todos los ATP estn hidrolizados hasta AMP
la clula est totalmente descargada. Estos estados de energa son anlogos a
los estados de una batera electroltica que puede estar cargada o descargada.
El nivel de carga de una clula puede calcularse por la expresin
[ATPI + 1/2 [ AI W x o.
porcentaje de carga =
[ATP] + [ADP] + [AMP]
112 METABOLISMO VEGETAL
Esto da un valor que representa el estado de energa de una clula compara-
da con su estado completamente cargado. La relacin aproximada de las cantida-
des de ATP, ADP y AMP con el porcentaje de carga de una clula se muestra en la
Figura 5-9.
Normalmente las clulas tienen cerca de un 80% de su carga total. Este nivel
se mantiene por un mecanismo llamado control de retroaccin. Retroaccin signi-
fica que algn producto de una secuencia de reacciones influye en alguna de las
reacciones que llevan a su produccin, de modo que se puede mantener un nivel
constante del producto. Un termostato casero es un control de retroaccin. La
cantidad de calor producido (por el horno) est influenciado por la cantidad de
calor presente (indicada por la temperatura); segn sea necesario se aade ms o
menos.
Los mecanismos de retroaccin que mantienen el balance energa-carga en
las clulas son los siguientes: ciertas reacciones que sintetizan ATP estn influen-
ciadas positivamente por la concentracin de AMP, es decir la formacin de ATP
crece al aumentar la concentracin de AMP. Algunas reacciones que utilizan
ATP son influenciadas positivamente por la cantidad de ATP y negativamente
por la cantidad de AMP presente (es decir, el aumento de ATP acelera su uti-
lizacin y el aumento de AMP frena su produccin). As, el control es ejecutado
no slo por las cantidades absolutas de ATP y AMP presentes sino por sus concen-
traciones relativas. Otros controles de este tipo se exponen con mayor detalle en
el Captulo 6.
La operacin del sistema de retroaccin puede verse en la grfica de la
Figura 5-10. Cuando la relacin ATP/ AMP es muy baja, el gasto de energa celu-
lar es bajo y la clula est descargada. Las reacciones de sntesis de ATP tienen
entonces una tasa alta, las reacciones que utilizan ATP son frenadas y la clula
se va cargando. Cuando el nivel de carga se aproxima al SO%, las reacciones de
sntesis de ATP disminuyen y las reacciones que utilizan ATP aumentan hasta que
se llega a un balance cuando falta ms o menos 20% para la carga total.
Pero adems, las reacciones que generan o usan ATP pueden tener otras
funciones. Una de las ms importantes es la de proveer intermediarios para la
sntesis de los componentes celulares. Es importante que se incorporen en este
mecanismo de carga-balance algunos controles secundarios, o bien las reacciones
de sntesis podran suspenderse por completo en una clula totalmente cargada,
Por lo tanto, muchas de esas reacciones son sensitivas tambin a las concentra-
ciones de intermediarios resultantes de su operacin (a menudo a varios pasos
+
O 20 40 60 80 1 O0 O 20 40 60 80 1 O0
Figura 59. Relaciones entre las con-
centraciones de ATP, ADP y AMP
(como porcentaje del adeniiato to-
tal) y el porcentaje de carga de una
c6lula.
METABOLISMO ENERGGTICO 113
Figura 5-10. Mantenimiento de la carga a un 80% por reacciones
de control de retroaccin. Las lineas punteadas muestran los
sitios donde las reacciones llevan tambi6n a intermediarios nece-
sarios, lo que se traduce en una tendencia a sobrecargarse o
a quedar bajo en carga.
Rpido I Reacciones que
sintetizan ATP
I I
O 20 40 60 80 1
Carga, 01%
de distancia). El efecto de esta sensibilidad es modificar la marcha de las reac-
ciones de carga o descarga como lo muestran las lneas punteadas en la
Figura 5-10, llevando a una tendencia de sobrecarga o subcarga. Proba-
blemente esta es la razn por la cual el balance de carga se mantiene normal-
mente cerca del 80%, esto es suficiente para una emergencia pero no tan alto
como para impedir cierta flexibilidad de operacin.
La importancia del concepto del control de retroaccin en el mantenimien-
to de condiciones especficas en un sistema dinmico no puede exagerarse. Es el
medio ms importante para la regulacin y control de las actividades de las c-
lulas y organismos, y para el mantenimiento de condiciones apropiadas constantes
dentro del organismo, en presencia de factores del medio ambiente externos en
cambio continuo. Es el medio primordial con el que las plantas se protegen de
estar enteramente a merced de las constantes de equilibrio de sus reacciones y
de la concentracin de sus metabolitos. Los controles de retroaccin impiden el
desperdicio en la oxidacin de todos los substratos utilizables o la sobreproduc-
cin accidental de metabolitos indesables. Son esenciales para el mantenimiento
y balance de todas las actividades metablicas de los organismos.
ACCIN ENZIMTICA
Las reacciones qumicas corren en la direccin en que se libera energa. Sin
embargo, la mayora de las reacciones no proceden espontneamente, aun en esa
direccin, sin algn ingreso inicial de energa. Por ejemplo, aunque la madera arde
con liberacin de gran cantidad de energa, no lo hace espontneamente sino que
114 METABOLISMO VEGETAL
debe ser encendida. Antes que las molculas puedan reaccionar entre s se debe
introducir una cierta cantidad de energa para activarlas; este requerimiento ener-
gtico se denomina energa de activacin. El ingreso de energa es necesario para
hacer a las molculas ms reactivas, quiz por llevarlas a una asociacin ms cena-
da o por llevarlas a cierto tipo de esfuerzo o stress. Ciertas sustancias llamadas
catalizadores que no son consumidas en las reacciones, tienen el efecto de reducir
la energa de activacin, haciendo as ms reactivas a las molculas. Ya hemos
mencionado las enzimas; son molculas proteicas especiales de las clulas y orga-
nismos que actan como catalizadores biolgicos. Las enzimas funcionan redu-
ciendo la energa de activacin de las molculas, facilitando as la ocurrencia de
reacciones termodinmicamente posibles.
El mecanismo de accin enzimtico se ilustra diagramticamente en la
Figura 5-11. La estructura de cada enzima est arreglada de modo que pueda enla-
zarse (por enlaces de hidrgeno, fuerzas inicas y dbiles fuerzas intermoleculares)
con el substrato. Al hacerlo as, el substrato se activa quiz por mantenerse muy
junto a otro substrato o por estar bajo tin esfuerzo (o sea distorsin molecular).
Figura 5-1 1. Representacin diagramtica de la accin e inhibicin enzimtica. De
hecho, el "enganche" entre enzima y substrato no es geomtrico, como se mues-
tra, sino el resultado de muchos puntos de interaccin de fuerzas dbiles de atrac-
cin, ligaduras de hidrgeno, etc. Debe recordarse que los tamaos relativos de
las molculas de enzima, de substrato y de inhibidor no son, probablemente, como
se muestran; la enzima puede ser cientos de veces m5s grande.
E +S==== ES
n a
- E + P
A. Acci 6n de enzimas. E =enzi ma, S =substrato, P =product o
E + I =E l
B . l nhi bi ci bn por competencia por el sitio acti vo. Cuanto ms
fuertemente se liga E con I , tanto ms di f ci l ser disociar El
y ms potente ser el inhibidor I (o t xi co). I =i nhi bi dor.
II D
c . E + I s E l D. E + I e E
C y D. 1nhib;cin por inactivacin de la enzima sin involucrar
al sitio acti vo. En C el sitio activo de la reaccin est encubierto
y en D este distorsionado por un inhibidor alost6rico.
METABOLISMO ENERGETIC0 115
El substrato reacciona y el producto es liberado de la superficie de la enzima
como se muestra en la Figura 5-11A. La enzima (queda sin cambio y libre para
mediar la reaccin de ms molculas de substrato. Muchas enzimas son reversibles,
o sea que pueden mediar una reaccin, bien hacia (adelante o hacia atrs, con tal
que ello sea termodinmicamente posible. Debe reconocerse que una enzima no
cambia la direccin de una reaccin sino solamente :;u tasa.
Las enzimas pueden ser inhibidas por un veneno que se combine con el
sitio reactivo de la enzima y compita as con el substrato (Figura 5-llB). En
este caso, si el complejo enzima-inhibidor se disoci.a, la inhibicin puede superar-
se aumentando la concentracin del substrato. Por otra parte, el inhibidor puede
formar un complejo en algn otro sitio de la moltjcula de enzima de modo que
impida a sta que se combine con el substrato (Figuras 5-l l C y D). Como el in-
hibidor y el substrato no estn compitiendo por el mismo sitio de reaccin, este
tipo de inhibicin no puede ser suprimido aadiendo ms substrato. Hay tam-
bin ciertas sustancias que activan a las enzimas hacindolas ms efectivas. Esta
es la base del efecto alostrico, en el que una molcula diferente al substrato
reacciona en un sitio especial de la enzima diferente al sitio de reaccin y causa
un cambio conformaciond (es decir, en la forma o estructura terciaria de la en-
zima) que activa o inhibe a sta. En el control de retroaccin del metabolismo
se involucran muchos efectos alostricos. Por ejemplo, el producto final de una
secuencia de reacciones que incluye varios pasos y varias enzimas puede inhibir
alostricamente un paso precedente en su propia ]produccin, as que la tasa de
sntesis del producto final est controlada por la cantidad presente. Algunos
ejemplos de este importante mecanismo se expondrn en el captulo siguiente.
LECTURAS ADICIONALES
Lehninger, A. L. Biochemistry Worth Publisher Znc. New Yark. 1970. Chaps. 8, 13, 14, 17.
Lehninger, A. L. Bioenergetics. W. A. Benajamin Inc. Menlo :Park Calif. 1971.
Peunsner, L. Concepts in Bioenergetics. Prentice-Hall Inc. En.glewood Califfs, N. J. 1974.
Westley, J. Enzyme Catalysts. Harper & Raw. New York. 19169.
Ca-ptulo 6
Hasta ahora solamente se vio el flujo de energa. Pero los organismos tambin tie-
nen masa, la que adquieren en las reacciones de sntesis y pierden en la respiracin.
Adems, las reacciones por las que se transforma y utiliza la energa son qumi-
cas. El flujo de materiales en las sntesis y en la respiracin es tan importante
como el flujo de energa. En este captulo se estudia el proceso integral de la res-
piracin tal como ocurre en las clulas y rganos de las plantas. Se profundiza
en las fuentes del carbono, el metabolismo intermediario y los sistemas de control
que regulan la respiracin. Ms adelante (particularmente en los Captulos 15 y 21)
se examinarn con ms detalle las relaciones entre la respiracin y otros sistemas
metablicos y los esquemas respiratorios de la planta en desarrollo.
El proceso primario de la respiracin es la movilizacin de compuestos
orgnicos y su oxidacin controlada para liberar energa para el mantenimiento
y desarrollo de la planta. Considrense primero las reacciones del carbono resumi-
das en la ecuacin
C6H,206 + 6 O, --f 6 C02 + 6 H,O + energa
que representa la oxidacin de una molcula de hexosa. Las reacciones del carbono
en la respiracin involucran dos procesos distintos. El primero, la gliclisis, es una
serie de reacciones que constituyen la va Embden-Meyerhoff-Panass (EMP) (as
llamada por tres de los principales cientficos cuyo trabajo llev a ponerlas en
claro), que tambin es la base de la respiracin anaerobia o fermentacin. La va
EMP convierte una molcula de hexosa en dos moliculas de cido pirvico. fistas
son luego descarboxiladas, y e fragmento remanente de dos carbonos se oxida
totalmente en el segundo de los dos procesos principales, el ciclo de cidos tri-
caboxlicos O ciclo del cido ctrico, tambin llam,ado ciclo de Krebs por el fa-
moso bioqumico britnico Sir Hans Krebs, quien fue el primero en demostrar las
reacciones. Tambin se examina una importante via del catabolism0 de las hexosas
que circunvala la va EMP, la va accesoria de la hexosa-monofosfato 0 va acceso-
ria de las pentosas.
118 METABOLISMO VEGETAL
REACCIONES. Las reacciones de la va EMP de la gliclisis se esquematizan en la
Figura 6-1, junto con las enzimas que catalizan cada reaccin. El primer paso uti-
liza ATP para fosforilar la hexosa, una reaccin por la hexokinasa (las kinasas son
enzimas que adicionan un grupo fosfato; la hexokinasa fosforila a una hexosa).
La glucosa-6-fosfato (6-6-P) resultante se convierte en su ismero fructosa-6-fos-
fato (F-6-P) por la fosfoglucoisomerasa (una isomerasa altera la estructura de un
compuesto sin cambiar su frmula). Una segunda molcula de fosfato de otro
ATP es introducida subsiguientemente por la enzima fosfohexokinasa.
La fructosa difosfato (FDP) as formada sufre ahora una rotura catalizada
por la aldolasa (una enzima que cataliza las reacciones entre, o produce compues-
tos aldehdo-alcohol) fraccionndose en cetotriosa, fosfodihidroxicetona (DHAP)
que contiene C, , C2 y C, de la hexosa original, y en aldotriosa 3-fosfogliceral-
dehido (GAP) que contiene los C, , C5 y C6 . Estos y los subsecuentes pasos de la
gliclisis se ilustran con ms detalle en la Figura 6-1 mostrando las relaciones ent.re
los carbonos individuales de los intermediarios.
Las dos triosas son interconvertibles y hay un equilibrio a travs de la accin
de la enzima fosfotriosaisomerasa. La DHAP se convierte en GAP y este compues-
to es hego oxidado por la fosfogliceraldehdo deshidrogenasa formando cido
1,3-difosfogliceraldehdo (las deshidrogenasas remueven hidrgeno de los com-
puestos, oxidndolos). En esta reaccin parte de la energia de oxidacin se utiliza
para reducir NAD+ a NADH + H + (en adelante las formas oxidadas y reducidas
del NAD y NADP se escribirn NAD-NADH y NADP-NADPH). El resto de la ener-
ga de oxidacin se conserva por esterificacin del fosfato inorgnico en el C1 de
la molcula de GAP formando un acilfosfato de alta energa.
En la reaccin siguiente este grupo fosfato es transferido al ADP pars gene-
rar ATP catalizado por la fosfoglicerilkinasa. El cido 3-fosfoglicrico (PGA)
resultante se convierte en cido 2-fosfoglicrico por la fosfogliceromutasa (una
mutasa cambia la posicin del fosfato esterificado) y ste se convierte, por la
remocin de una molcula de agua, en fosfoenolpiruvato (PEP) por la enolasa,
una enzima que cataliza la conversin a la forma enlica y viceversa. Los enoles
tienen una doble ligadura (-ene) y un grupo alcohol adyacente (-01). La conver-
sin de PEP a piruvato por la piruvatokinasa involucra la transferencia del grupo
fosfato al ADP formando ATP. La energa para esta transferencia se deriva de la
conversin del PEP, altamente reactivo e inestable, al cido pirvico ms estable.
BALANCE DE ENERGA. El balance de energa de la gliclisis se determina fcil-
mente. En la conversin inicial de glucosa a FDP se consumen dos molculas de
ATP; pero en forma subsecuente se generan directamente dos en la oxidacin
de dos molculas de fosfogliceraldehdo y dos ms se generan en la conversin de
dos molculas de PEP a piruvato. Esta sntesis directa del ATP es denominada
fosforilacin del substrato. Por tanto, el balance neto es de dos molculas de ATP
sintetizadas por fosforilacin del substrato, por cada molcula de glucosa que se
convierte en piruvato. Adicionalmente, durante la oxidacin de dos molculas
de GAP a PAG, dos molculas de NAD son reducidas a NADH. La reoxidacin de
cada molcula de NADH por el oxgeno a travs de la cadena de transporte
de electrones genera tres molculas de ATP, lo que hace un total de seis molcu-
las de ATP ms por molcula de glucosa. As pues, la produccin total neta de la
119
Figura 6-1. Reacciones y enzi mas de l a va de glic6lisis EImbden-Meyerhoff-Parnass (EMP).
almidn
1
glucosa-1-fosfato
1 1 glucosa
t
b ADP
glucosa-6-fosfato
1
fructosa-6-fosfato
ATP -+* ADP
fructosa-1,6-difosfato
CH,OP-CO-CHOH-CHOH-CHOH-CH,O-P
hexokinasa
fosfoglucoisomarasa
fosfohexokinasa
aldolasa
fosfato de dihidroxi-
acetona
gliceraldehfdo-3-
fosfato
CHZOP-CO"CH,OH "-c CHO-CHOH-CH,OP fosfotriosa isomerasa
o 0 o
pi
gliceraldehldo-1.3,difosfato
CHOP-CHOH-CH,OP
gliceraldeh(do fosfato
deshidrogenasa
NAD' NADH +H+
COOP"CHOH-CH201'
cido 1.3-difosfoglic61rico
0 0 0
ADP t - ATP fosfogliceril kinasa
cido 3-fosfoglic6rico
COOH-CHOH-CH,OP
1
t- Hz0 enolasa
fosfogliceril mutasa
COOH-CHOP-CH,OH
cido 5-fosfogiicrico
cido fosfoenolpirvico
COOH-COP-CH,
ADP +- ATP
cido pirvico
COOH-CO-CH,
o 0 0
kinasa pirvica
120 METABOLISMO VEGETAL
gliclisis en trminos de intermediarios de alta energa por mol de glucosa catali-
zado es de 2 moles ATP + 2 moles NADH, u 8 moles ATP. Esto representa sola-
mente unas 60 kcal/ mol de glucosa, o cerca del 10% de la energa total utilizable
de aqulla. En el proceso de conversin de la glucosa al piruvato algo de la ener-
ga liberada se pierde como calor, pero una proporcin mayor de la energa de
la glucosa queda todava encerrada en las molculas de piruvato y es liberada
en las reacciones de oxidacin del ciclo de Krebs.
CICLO DE KREBS
FORMACIdN DE ACETIL-COENZIMA A. Las dos molculas de piruvato que resultan
de la gliclisis de una molcula de hexosa sufren a continuacin una serie de re-
acciones que las convierten en un derivado del cido actico, la acetil-coenzima A
(aceta-COA), en cuya forma entran al ciclo de Krebs. El agente para la transferen-
cia de grupo, la coenzima A (COA) participa en varias reacciones importantes in-
cluyendo la descarboxilacin del piruvato y el a-cetaglutarato en el metabolismo
oxidativo y la oxidacin de las grasas hasta acetato. La COA est constituida por
una molcula de la vitamina cido pantotnico y una molcula de ATP. Su grupo
activo -la ligadura que sirve para transferir grupos tales como los radicales aceti-
lo- es el grupo SH que puede ser oxidado y reducido. La estructura de la COA se
muestra en la Figura 6-2.
La secuencia de reacciones que lleva a la formacin de acetil-COA se esque-
matiza en la Figura 6-3. En el primer paso el piruvato reacciona con la tiamina
pirofosfato (TPP o cocarboxilasa) para formar un complejo acetaldehdo-TPP y
CO,. El complejo reacciona con el cofactor cido a-lipoic0 en estado oxidado
para formar un complejo acetil-cido lipoico liberando al TPP. El complejo acetil-
cido lipoico racciona con la COA formando acetil-COA y el cido lipoico se ha
reducido en esta reaccin. El cido lipoico es reoxidado por el NAD y el NADH
as formado es reoxidado por el sistema de transporte de electrones por los cito-
cromos, generando tres molculas de ATP por molcula de piruvato oxidado. Las
estructuras del TPP y del cido a-lipoic0 se muestran a continuacin. Los com-
plejos se forman en los puntos marcados con flechas. El cido (Y -1ipoico oxidado
tiene un enlace S-S (lnea punteada); en la forma reducida se adicionan hidrge-
nos a los tomos de azufre.
/
I P P CH,-CH,--CH-(CH,),-COOH I I
S _"""" S
H H
I I \
ci do a-l i poi co
REACCIONES DEL CICLO. La acetil COA es el combustible del ciclo de Krebs, el
sistema oxidativo que completa la conversin del carbono de los substratos respira-
torios a CO, . La necesidad de un ciclo en lugar de una oxidacin directa es doble.
RESPIRACION 121
C H 3 H O H H H O H H H
CH,---C-C-C-N-C-C-C-N-C-C-SH
I I I I I I I I I I I I
I I I / I I
H H H H
O
Figura 6-2. Estructura de la coenzima A o-cFyH
(COA). Las dos partes bsicas de la mol6cu-
la se derivan del cido pantothico (por-
cin superior) y ATP. "3
H
O OH
I
Primero, la oxidacin directa de acetato a COZ tendra que proceder por com-
puestos con un carbono y stos son extremadamente reactivos y, por as decirlo,
difciles de manejar. As que el acetato, en lugar de ser oxidado directamente, es
adherido a un "mango". La molcula mayor resultante es oxidada paso a paso
hasta el tamao del "mango" original, que entonces puede aceptar una nueva mo-
lcula de acetato para ser oxidada, y as sucesivamente. La segunda ventaja de un
ciclo es que durante su operacin se hacen muchos intermediarios ms complejos,
los cuales sirven como puntos de partida para la ,sntesis de otros componentes
celulares. Esta funcion del sistema respiratorio se describe con ciertos detalles en
la pgina 130.
Las reacciones del ciclo de Krebs se esquernatizan en la Figura 6-4. Los
detalles en las relaciones de los tomos de carbono se muestran en la Figura 6-20,
Piruvato
co, Pirofosfato de tiarnina
Complejo TPP-acetaldehdo
" 1
cido a-lipoico
r""""" (oxidado)
t t
cido acetil-lipoico NAD'--+--rNADP! t H'
I
cido u-lipoic0
(reducido)
f"--"
COA
Acetil-COA
I
Figura 6-3. Conversin del
piruvato a acetil-COA (deshi-
drogenasa pirvica). Ciclo de Krebs
I
122
METABOLISMO VEGETAL
O
I 1 1 t
COA-S-C-CH, acetil - COA COA
I -
I enzima condensadora del citrato
cido oxaloac6tico
L. I
cido ctrico
O-=C-COOH
I
H,C--COOH
H,C-COOH HOC--COOH
H,C-COOH
deshidrogenasa mlica I
NADH24+ NAD
H 2 0 e ; C t
Acido mdlico &ido cis-acon tic0
H
HOC-COOH
H,C-COOH
fumarasa 1 f+ H, O
H,C"COOH
C-COOH
HC-COOH
I
1
II
Acido fumrico H2 0 -11
HC-COOH Acido isoctrico
I I
HC-COOH
H,C--COOH
HC-COOH
HOC-COOH
I
I
deshidrogenasa succinica
FADH, 4+, FAD
>aconirasa
cido succnico deshidrogenasa isocltrica
H,C--COOH NAD+ NADH,
I
Acido oxalosuccnico
Hz '\COO H H,C-COOH
HC-COOH
I
deshidrogenasa
u-cetoglutrica y
tiokinasa cido H, C
SUCCniCa a-lipoico reducido
I
carboxilasa
L i c o oxidado
O=C-COOH
coz
'llamado tambidn
NADH, 2-oxoglutrico
&ido
Figura 64. Ciclo de Krebs. Las reacciones reversibles se muestran por dobles flechas; las flechas
gruesas indican la direcci6n en laoperacin normal del ciclo.
en la discusin sobre las investigaciones con indicadores l 4 C. E1 primer paso en
el ciclo es la adicin del acetato de la acetil-COA al oxaloacetato formndose ci-
trato, el primer cido tricarboxlico del ciclo. La siguiente serie de reacciones
cambia al grupo OH del carbono intermedio del citrato al carbono siguiente,
formndose isocitrato que puede ser oxidado luego a oxalosuccinato. Este cam-
bio es necesario porque el grupo carbonilo debe estar junto a un carboxilo para
las reacciones siguientes. A continuacin, el grupo carboxilo central es removido
dejando el CY-cetoglutarato de cinco carbonos que es descarboxilado de modo
RESPIRACION 123
oxidativo dando succinato de cuatro carbonos. Las, reacciones de los cidos di-
carboxlicos de cuatro carbonos completan los pasos oxidativos del ciclo y re-
generan al cido de cuatro carbonos con el que se empez, el oxaloacetato.
Las reacciones individuales son las siguientes. La adicin de acetato al
carbonilo del oxalo acetato es efectuada por la enzima condensadora del citrato.
Esta es una reaccin tpica importante y puede utilizarse para crear compuestos
de cadena larga y de cadena ramificada por la reaccin de la acetil-COA con una
variedad de compuestos carbonilo. El citrato as formado sufre ahora la remo-
cin y reposicin de una molcula de agua que cambia al OH del C3 , al C4 de la
molcula. Ambas reacciones, la remocin de agua para hacer cido cis-aconitic0
y su reposicin para hacer cido isoctrico estn catalizadas por la aconitasa.
Este paso es el sitio de inhibicin por el cido fluoractico, un compuesto que
se encuentra libre en grandes cantidades en la planta sudafricana Gibflaar
(Dichapetalurn eyrnosum). Por s mismo el fluoroacetato no es inhibitorio pero
forma fluoroacetil-COA que reacciona con el oxaloacetato para dar fluorocitra-
to. Este anlogo del citrato es un inhibidor competitivo de la aconitasa y bloquea
el ciclo en este punto. Otro hecho importante de elsta reaccin es que el citrato
se conduce como una molcula asimtrica al reaccionar con la aconitasa por
adherirse en tres puntos a la enzima (los tres carboxilos forman un diseo asim-
trico como se ve en la Figura 6-5). Por tanto, la oxidacin siguiente est en el
extremo de la molcula, opuesto al formado por los carbonos del acetato recin
adicionados. Esto tiene importantes consecuencias en la investigacin del ciclo
y sus vas metablicas asociadas por medio de indicadores radiactivos como se
ver posteriormente (pgina 151).
El isocitratg es oxidado dando el cetocido oxalosuccinato por la isoc-
trico deshidrogenasa que transfiere dos electrones y dos H + al NAD; el NADH
formado es reoxidado por la va del sistema de transporte de electrones. El oxalo-
Figura 6-5. Estereoespecificidad de la aconitasa. El C, y C2 del cido ctrico se derivan de l a
acetil-COA y el C3-D3 del oxaloacetato.
A. Muestra una moldcula de citrato orientada correctamente para un enlace en tres puntos, a
B. Las flechas muestran el sitio activo.
C. Muestra una molecula de citrato orientada incorrectamente.
traves de los tres grupos carboxilo, a la superficie de la enzima.
H
HO
H
A
H
o
o
/
o
B
C
124 METABOLI SMO VEGETAL
succinato es descarboxilado por una carboxilasa (una enzima que adiciona o
remueve grupos carboxilo) dando cido (Y -cetoglutrico* y COZ . Luego el cido
a-cetoglutrico es descarboxilado de modo oxidativo por una reaccin irrever-
sible dando cido succnico y CO, . Esta reaccin es similar esencialmente a la
descarboxilacin del piruvato. Requiere TPP y cido lipoico oxidado formando
succinil-COA; la reaccin est catalizada por la deshidrogenasa del cido cr-ceto-
glutrico. El cido lipoico reducido as formado, reduce al NAD y se reoxida en
el proceso. La succinil-COA es convertida por la tiokinasa succnica en cido
Succnico y COA. En la reaccin con tiokinasa la energa del enlace tioster de
la succinil-COA se utiliza para convertir ai ADP + Pi en ATP.
La oxidacin de succinato a fumarato por la deshidrogenasa succnica
difiere de otras oxidaciones en el ciclo en que dos H' y dos electrones son trans-
feridos directamente al dinucletido de flavina adenina (FAD) -la coenzima de
la deshidrogenasa succnica- ms que al NAD (ver tambin Figura 6-21). El
FADH, as formado reacciona con el sistema del citocromo de la manera usual;
sin embargo, produce solamente dos molculas de ATP en la transferencia de
electrones al oxgeno. Este paso en el ciclo est fuertemente inhibido por el cido
malnico, un anlogo de tres carbonos del cido succnico, que inhibe a la enzima
deshidrogenasa succnica ligndose a ella pero sin reaccionar.
El fumarato es convertido a malato por la adicin de agua cerca de la doble
ligadura, catalizada por la fumarasa. Este paso en el ciclo de Krebs no libera ener-
ga, pero prepara al cido de cuatro carbonos para una oxidacin con liberacin
de energa subsecuente (cido mlico a cido oxaloactico). Las reacciones del
succinato y fumarato, a diferencia de las del citrato y de los otros miembros asi-
mtricos del ciclo, son simtricas; o sea que las enzimas involucradas no pueden
distinguir entre los dos extremos de la molcula. Los carbonos derivados de cual-
quier extremo de la estructura original de la succinil-COA se vuelven indistingui-
bles o se entremezclan en las reacciones siguientes. En el paso final del ciclo, el
cido mlico es oxidado por la deshidrogenasa mlica a cido oxaloactico, redu-
cindose el NAD en el proceso. Esto completa las reacciones del ciclo de Krebs.
BALANCE DE ENERGA. Por cada molcula de piruvato oxidada a acetil-CoA y
por las tres oxidaciones ligadas al NAD en el ciclo, se llevan al oxgeno un par de
electrones y un par de iones H + por la va de la cadena de transporte de electro-
nes, producindose tres molculas de ATP en el proceso, haciendo un total de
12 ATP. Adems, la oxidacin del succinato ligada al FAD genera dos ATP ms y
la regeneracin de COA a partir de succinil-COA genera un ATP. Por tanto, la sn-
tesis total de ATP por cada vuelta de ciclo (la oxidacin de una molcula de
piruvato a CO, y H,O) es de 15 ATP, o 30 ATP por molcula de glucosa. Se
recordar que la gliclisis genera adicionalmente ocho molculas de ATP por
molcula de glucosa, llevando a 38 el total de molkculas de ATP que pueden gene-
rarse en la combustin completa de una molcula de glucosa a CO, y HzO. El
balance de la energa total es pues sumamente favorable al catabolismo, la energa
recobrada como ATP representa solamente cerca de la mitad de la energa total
de combustin de la glucosa. El resto se pierde como calor y se utiliza para operar
el sistema, es decir, para mantener un balance de intermediarios favorables para
que las reacciones puedan proceder con tasas eficientes.
*Tambin llamado ci do 2-oxoglutrico.
RESPIRACION 125
VA ACCESORIA DE LAS PENTOSAS
REACCIONES. Esta va, conocida tambin como la va accesoria hexosamonofos-
fato a la va de oxidacin directa del catabolismo tie la glucosa, es una secuencia
de reacciones que esencialmente convierten la glucosa en fosfato de triosa y COZ .
Solamente se produce una molcula de COZ por cada molcula de glucosa; el
resto de los carbonos sufren una complicada reorganizacin. El ciclo se muestra
en la Figura 6-6 junto con las enzimas responsables de las reacciones. Algunas
de stas son similares o idnticas a las enzimas de la secuencia glicoltica.
Dos enzimas extremadamente importantes que se presentan tanto aqu
como en la va de reduccin del carbono en la flotosntesis (el ciclo de Calvin,
descrito en el Captulo 7), son la transcetolasa y la transaldolasa. La transcetolasa
transfiere los primeros dos carbonos de una P-cetosa a una P-aldosa produciendo
una nueva P-cetosa, que tiene dos carbonos ms (que la aldosa receptora, y una
nueva aldosa que tiene dos carbonos menos que la cetosa donadora.
c=oJ H ~O H
I
H,COH
c-o
HYOH
I
I I
H,COP H,COP
H(?oH H,COP
I
I
H,COP
cetopentosa-P aldopentosa-P cetoheptosa-P aldotriosa-P
Hay dos reacciones transcetolasa en el ciclo. La primera convierte la xilulo-
sa-5-fosfato (Xu-5-P) y la ribosa-5-fosfato (R-5-P) en la sedoheptelosa-7-fosfato
(S-7-P) y 3-fosfogliceraldehdo (GAP), y la segunda convierte la Xu-5-P y entrosa-
4-fosfato (E-4-P) en fructosa-6-fosfato (F-6-P) y GAP.
La transaldolasa transfiere los tres carbonols superiores de una cetosa-P a
una aldosa-P produciendo una nueva cetosa y una nueva aldosa ms corta.
H,COH
c=o
I
I
o
HCOH
HCOH + H T transddolasa HAOH + HCOH
HCOH HCOH HCOH HCOH
H,COP H,COP H,COP H,COP
cetoheptosa-P aldotriosa-P cetohexosa-P aldotetrosa-P
I L O reaccin I
HCOH HCH
I I I
I I I
La reaccin transaldolasa en la va accesoria de las pentosas convierte la
S-7-P y la Xu-5-P en F-6-P y E-4-P. El resultado neto de las reacciones transceto-
lasa y transaldolasa es la conversi6n de tres azcares C5 en dos azcares C6 y una
126 METABOLISMO VEGETAL
glucosa
ATP +-ADP hexokinasa
G-6--P G"6-P G---6-P
3 NADP
g l ~ ~ ~ ~ a - e i - f ~ ~ f a t ~ dsshidrogenasa
* 3 NADPH,
1 I I
6-PG 6-PG 6" PG
6-fosfogluconato deshidrogenasa
3 NADP
i
* 3 NADPH,
c I
Ru-5-P +COZ
I I
1
Ru-5-P +CO, Ru-5-P t COZ
epirnerasa isornerasa epirnerasa
xu-5-P R--5--P xu-+"
o O
!I I1
O
!I
17-
c-c"c-c -c -P
-
c-c-c-c-c"P
I - " I
transcetolasa
I
t t S-7-P
"
n
GAP
O
1,
E-4-P
O O
It
p- C"C"C"C. .c.-c
n
p"c-c"c"c"c"c
isornerasa
J
isornerasa
G " -6 "p G-6-P
\ / .J
"
c
Figura 6-6. Va accesoria de las pentosas. Todas las reacciones son reversibles excepto la fosfo-
rilacin de la glucosa por la hexokinasa. Como se describe aqu, cada vuelta del ciclo convierte
una molcula de glucosa en gliceraldehdo fosfato ms 3 COZ.
C3 . Estas intrincadas reacciones se han diseado de modo claro en la porcin
central de la Figura 6-6.
Otra enzima nueva es la ribulosa-fosfato epimerasa (las epimerasas cam-
bian la configuracin, es decir el plano de simetra de los compuestos) que altera
la ribulosa-5-fosfato (Ru-5-P) en el C3 convirtindola en xilulosa-5-fosfato (Xu-5-P).
La fosforriboisomerasa convierte la Ru-5-P en su ismero ribosa-5-fosfato (R-5-P).
Tienen lugar dos pasos oxidativos: la oxidacin de G-6-P a 6-fosfogluconato por
la G-6-P deshidrogenasa y la descarboxilacin oxidativa del fosfogluconato a
RESPIRACIdN 127
Ru-5-P por la deshidrogenasa del cido 6-fosfogluc6nico. Ambas deshidrogenasas
estn ligadas a la coenzima NADP que, a su vez, puede reducir al NAD por una
transhidrogenasa. El NADH puede luego reducir la cadena de transporte de electro-
nes y producir ATP. O bien el NADH puede utilizarse como agente reductor en
varias reacciones de sntesis tales como sntesis de grasas.
Los productos de la oxidacin son COZ y triosafosfato. Es posible que dos
molculas de triosafosfato se combinen por la accin con aldolasa (Figura 6-1)
despus de la isomerizacin de una molcula de GAP, el producto del ciclo, a
DHAP. La FDP resultante puede convertirse en G-6-P que puede entonces volver
a entrar al ciclo, as que la oxidacin completa de hexosa a COZ puede produ-
cirse. De otro modo, probablemente mucho ms comn, el GAP producido
puede entrar a la provisin de triosafosfatos de la clula y oxidarse a piruvato, y
de aqu oxidarse en el ciclo de Krebs.
BALANCE DE ENERGfA. Por cada molcula de COZ producida a partir de glucosa
se reducen dos molculas de NADP formndose seis molculas de ATP, o 36 ATP
por cada molcula de glucosa oxidada. Se necesita un ATP para fosforilar la glu-
cosa inicialmente; por tanto, la ganancia neta es de 35 ATP por glucosa, lo que
hace a esta va de oxidacin un poco menos eficiente que la gliclisis y el ciclo de
Krebs (38 ATP por glucosa). Si el triosafosfato producido en la va accesoria
entra al proceso glicoltico, la energa recobrada es algo ms alta: se producen
18 ATP en la produccin de tres COZ, menos uno para la fosforilacin inicial de
la glucosa; la siguiente oxidacin del piruvato produce 15 ATP ms, dando un
total de 37 molculas de ATP por molcula de glucosa oxidada.
En ausencia de oxgeno, las reacciones de oxidaci:n del ciclo de Krebs no pueden
ocurrir, y los organismos que derivan su energa del catabolismo de la glucosa tie-
nen que descansar en la energa liberada en la gliclisis exclusivamente. Pero se
presenta otro problema. El NADH que se forma durante la oxidacin del GAP no
puede reoxidarse por el oxgeno, de aqu que se necesite otro sistema para produ-
cir la continua provisin de NAD requerida para la operacin de la gliclisis. Este
problema se ha solucionado en varios organismos de! dos modos importantes.
Una solucin es la reduccin de piruvato a lactato, catalizada por la des-
hidrogenasa del cido lctico que convierte el NADH a NAD en el proceso. Este
es el paso terminal en los sistemas animales, que a menudo lleva a cabo gliclisis
y metabolismo oxidativo en sitios bastante distantes. La reaccin es caracters-
tica de algunos sistemas vegetales y de ciertas bacterias, por ejemplo Lactobacillus,
que agra la leche por la produccin de cido lctico.
La segunda solucin es la descarboxilacim del piruvato a acetaldehdo,
catalizada por la alcohol-deshidrogenasa con la reoxidacin del NADH. Estas re-
acciones se esquematizan en la Figura 6-7. Esta es la va encontrada comnmente
en las levaduras, la fermentacin alcohlica de los azcares es una reaccin muy
importante (tanto sociolgica como fisiolgicamente). Es probable que los orga-
nismos masivos como los tubrculos de papa, que pueden estar faltos de oxgeno
en SU centro, dado el largo camino de difusin, pueldan llevar a cabo fermentacin
alcohlica como tambin las semillas en germinacih antes que se rompa la testa
y permita la entrada de oxgeno.
128
NAD++- NADH +H+
glucosa
gliclisis
O 0
\\ I I
/
C-C-CH,
HO
METABOLISMO VEGETAL
cido pirvico
cido I jctico
- co,
deshidrogenasa piruvato carboxilasa
C-CH,
NAD+
acetaldeh ido
H
0 0
\ I
/ I I
C"C"CH, HO--C-CH,
Ho H H
cido lctico etanol
Figura 6-7. Vas de fermentacin que llevan a la reoxida-
cin del NADH.
Como resultado de la necesidad de reoxidar el NADH, la produccin de
energa de la conversin de una molcula de glucosa a dos molculas de lactato o
de etanol + C02 es muy pequea: solamente dos molculas de ATP (cerca de
15 kcal/mol) se producen, y esto es tan slo un 2.5% de la energa total presen-
te en la molcula de glucosa. As es que la recuperacin de energa de aqulla por
fermentacin es extremadamente baja, y los organismos que descansan en la fer-
mentacin para la produccin de energa deben consumir grandes cantidades de
azcar en el proceso.
LOCALIZACI6N DE LOS PROCESOS
Las clulas pueden ser fraccionadas para separar los organelos subcelulares, gene-
ralmente rompiendo las c6lulas o tejidos seguido de una centrifugacin cuidadosa.
Como los organelos varan un tanto en sus densidades, pueden separarse solos o
en grupo, los ms pesados primero, controlando cuidadosamente la velocidad de
la centrfuga o la densidad del lquido de suspensin. De otro modo, los organelos
pueden ser separados en un gradiente de densidades. Se colocan con cuidado capas
de lquidos de densidades crecientes a partir del fondo de un tubo de centrfuga
RESPIRACION 129
y los restos celulares se dispersan en la superficie. Todo el gradiente se centri-
fuga cuidadosamente de modo que no se mezclen las capas. Los diversos compo-
nentes de la clula giran a travs de las capas de delnsidad ligera en el gradiente,
hasta que alcanzan la capa de densidad igual a la suya propia y ah se detienen.
Es posible determinar enzimas especficas en las diversas capas del gradiente. As es
posible encontrar cules enzimas se asocian con miles partculas especficas u
organelos celulares y cules estn libres o solubles en el citoplasma.
Se ha demostrado que las enzimas de la secuencia glicoltica y de la va
accesoria de las pentosas estn solubilizadas en su mayora; es decir, no se asocian
con ninguna partcula sino que estn o bien libres en el citoplasma o tan slo
asociadas sin firmeza a las membranas citoplsmicas como el retculo endopls-
mico. Las enzimas del ciclo de Krebs, por otra parte, estn mayormente en la mi-
tocondria, como tambin las enzimas de la fosforilacin oxidativa. Esto significa
que los productos de la gliclisis deben poder entrar y salir segn se necesite. Por
otra parte, no es probable que la membrana de la mitocondria sea totalmente
permeable para los intermediarios del ciclo, pues de otro modo sera imposible man-
tenerlos en el interior a la concentracin necesaria para la operacin del ciclo.
Por tanto, se necesita un cierto nmero de enzima!; transportadoras para mover
los compuestos hacia dentro y fuera de la mitocondria segn se requiera. Estas
enzimas pueden necesitar ATP para funcionar. Se estudian en el Captulo 12.
As, la mitocondria constituye un sistema totalmente autosuficiente que
efectua, entre otras cosas, las reacciones energticas bsicas celulares. Muchos
de los sistemas enzimticos dentro de la mitocondria se asocian ntimamente de
manera estructural. Como se vio en el Captulo 5, las enzimas del sistema de trans-
porte de electrones estn firmemente empacadas y altamente estructuradas dentro
de los pliegues de la membrana interna de la mitocondria, y en estrecha asociacin
fsica con las enzimas que sintetizan ATP. Tal asociacin y estrecho ligamento es
necesario para la eficiente transmisin de intermediarios, electrones y energa.
Se conocen otros grupos de enzimas que estn tambin ligados estructuralmente,
formando complejos multienzimticos. El grupo de enzimas que lleva a cabo la
descarboxilacin del cido pirvico constituye, seg.n se ha demostrado, un com-
plejo as en las bacterias, y tambin las enzimas similares que descarboxilan al
a -cetoglutarato en las plantas y las enzimas asociadias con la sntesis de las grasas
(Captulo 9). Algunos otros grupos de enzimas estn tambin estrechamente liga-
dos en organelos (por ejemplo, las enzimas del ciclo del glioxilato que se encuen-
tran en los glioxisomos de las semillas).
Hubo una tendencia a tomar este hecho como principio, y algunos fisi-
logos han supuesto errneamente que todos los mecanismos de reaccin estn
asociados con organelos o con estructuras celulares organizadas. Por ejemplo, se
pens que las reacciones de fijacin del nitrgeno estaban organizadas en nitro-
somas Y las reacciones primarias de la fotosntesis en cumtosomas, ninguno de
10s cuales resultaron ser entidades reales. La generalizacin es un proceso impor-
tante en el desarrollo de la ciencia, pero estos ejemplos muestran que es en extre-
mo peligroso y debe aplicarse con gran cuidado.
MOVILIZACX6N DE LOS SUBSTRATOS
Los substratos ms generales de la respiracin celular (ver Figura 6- 8) son el almi-
dn y polisacridos relacionados con l, azcares s'olubles como sacarosa, grasas
130 METABOLISMO VEGETAL
y protenas. Bajo ciertas circunstancias, compuestos de bajo peso molecular ta-
les como cidos orgnicos o azcares simples pueden llegar a acumularse. Pueden
servir como substratos respiratorios, pero simplemente entran al metabolismo res-
piratorio en los sitios apropiados y no se considerarn de aqu en adelante (ver
Figura 6-8). El almidn es con frecuencia el mayor substrato respiratorio y gene-
ralmente es degradado por reaccin con la fosforilasa dando glucosa-1-fosfato
(G-1 -P) .
"-G-G-G-G + Pi - -G-G--G + G-1-P
fo sf0 ri la sa
almida
La G-1-P puede ser convertida en G-6-P por la enzima fosfoglucomutasa y
entrar a la secuencia glucoltica. Pero la amilofosforilasa puede atacar solamente
dos enlaces a-l:4-glicsido, y los enlaces 1:6 de la amilopectina deben ser rotos
por la llamada enzima-R (amilo-1,6-glucosidasa) que rinde molculas de glucosa
libre. Otros sistemas para la degradacin del almidn son la a-amilasa y pamila-
sa, ambas rinden el disacrido maltosa. La maltosa es hidrolizada a glucosa por
la enzima maltosa, de amplia distribucin. La cY-amilasa ataca enlaces internos 1 : 4
en la molcula de almidn, rompiendo la cadena en fragmentos pequeos. La
(3-amilasa slo ataca los ligamentos subterminales de la cadena liberando las dos
hexosas terminales como maltosa.
Figura 6-8. Relaciones entre los intermediarios del metabolismo respiratorio y otras
secuencias metab6licas.
almidn
1 1 1 maltosa
G-1-P 1
glucosa
intermediarios G-6-P I' d l nucletidos
fotosintticos ,, gliclisis 1 ~+ va accesoria , - aminocidos
de las -
pentosas
amino- 1 1
4 cidos Bcido pirvico I
protelnas \I -7 1 ~ terpenos, esteroides
a c e t i l - ~o ~ =--- cidos grasos
amino-
cidos
11 cido 1 1 &ido / Bcido glioxllico
cido oxaloactico ctrico
asprtico f CICLO DE \
1 t
KREBS
/cid0
pirimidinas
purinas bide. a-cetoglutrico
succl ni cox / acid
aromticas
porfirinas glutmico
Bcido
1
-
-protenas
protelnas
amino-
&idos
RESPIRACI6N
131
Naturalmente, despus del ataque de la amilasa quedan grupos restantes de
glucosa impares; stos contienen siempre tres residuos de hexosa, nunca uno. Si
estn presentes enlaces 1 : 6 ramificados, pueden quedar restantes varias dextrinas
conteniendo hasta siete unidades de glucosa (arriba de dos a cada lado del enlace
1 :6 residual). stas se llaman dextrinas lmite y pueden servir como iniciadoras
para la sntesis de nuevas molculas del almidn (ver Captulo 9). La degradacin
de almidn por la amilasa parece ser el sistema ms comnmente usado por las
semillas para movilizar sus reservas; las hojas y las estructuras almacenadoras de
almidn como los tubrculos de papa movilizan el almidn mayormente por
reaccin con la fosforilasa.
La entrada de sacarosa en el metabolismo respiratorio se produce probable-
mente sobre todo por medio de la enzima hidroltdca invertasa que est casi uni-
versalmente distribuida en los tejidos vegetales. L,a invertasa hidroliza a la saca-
rosa directamente dando una mezcla equimolar de glucosa + fructosa llamada de
azcares invertidos (la sacarosa es dextrorrotatoria, pero la mezcla de glucosa
+ fructosa es levorrotatoria, as que al hidrolizarse la direccin de la rotacin
queda invertida). El enlace glicosdico, que es el enlace energtico de la sacarosa,
se gasta para esta reaccin. La enzima sacarosa fosforilasa, que convierte a la saca-
rosa en G-1-P y {ructosa en Pseudomonas (ver pc&$na 110), no se encuentra en
las plantas superiores.
Se ha trabajado poco sobre la degradacin in vitro de otros polisacri-
dos en las plantas, pero se ha informado de enzi.mas hidrolticas que degradan
compuestos tales como inulina (polifructosana) a dsacridos y monosacridos;
stos pueden convertirse en G-6-P o F-6-P, entrando as al proceso glicoltico.
Otros substratos de la respiracin son grasas y protenas, aunque su uso no
es tan general como el de la sacarosa o el almidn. Las grasas se degradan por el
proceso conocido como 0-oxidacin, que corta ].as molculas de cido actico
del extremo acdico de los cidos grasos en forma de acetil-COA, la que puede
entrar al ciclo de Krebs directamente. El mecanismo de reaccin es complejo y
no se han demostrado todos sus pasos en las plantas; sin embargo, su operacin
probable es la que se esquematiza en la Figura 6-9. El ATP se produce en la re-
oxidacin del FADH y NADH que se reducen por la oxidacin de los cidos
grasos. El glicerol que queda despus de la oxidacin de los residuos de cido gra-
so de la grasa, se fosforila por una kinasa apropiada para formar glicero fosfato;
ste se puede oxidar luego a DHAP bajo cuya forma los carbonos pueden entrar
directamente al proceso glicoltico. La degradacin respiratoria de las grasas pro-
bablemente no es un fenmeno general sino que ocurre durante la germinacin
de ciertos tipos de semillas oleaginosas (ver Captulo 17).
Las protenas se usan frecuentemente como substratos de la respiracin
en las plantas. Esto puede ocurrir bajo condiciones de falta de alimento o durante
la germinacin de las semillas cuya reserva principal es protena. Adems, algunos
tejidos y rganos sufren una continua destruccin y resntesis de protena. Esto
puede ocurrir durante el crecimiento cuando hay un continuo cambio en 10s jue-
gos de enzimas, desde las que dirigen las reacciones de crecimiento y desarrollo a
las que dirigen reacciones caractersticas de tejidos maduros. El recambio de pro-
tenas es caracterstico tambin de ciertos tejidos y de cultivos de tejido. Este
proceso y sus relaciones metablicas se consideran ms detalladamente en 10s
Captulos 8 y 15. En esta discusin es importante enfatizar que diversos interme-
diarios en el proceso respiratorio, particularmente en el ciclo de Krebs, forman
los esqueletos de carbono de aminocidos importantes y por reacciones inversas
132
triglicerido
METABOLISMO VEGETAL
Bcidos grasos
ATP ---f-" AMP
acil-COA-grasa
COA y
O
I 1
R-CH,-CH,-C-COA
0-cetotiolasa
O
I /
R-C-CH,-C-COA
R-CH=CH-C-COA
deshidrogenasa enolhidrolasa
R"CH--CH,-C-COA
NADH +H'
Figura 6-9. Ciclo de la oxidacin de los cidos grasos ( p oxida-
cin) con produccin de acetil-COA.
son puntos de entrada del carbono de las protenas al metabolismo respiratorio.
Los ms importantes de ellos son los a-cetocidos pirvico, a-cetoglutrico y
oxaloactico. Estos compuestos a-ceto pueden, por el proceso de transaminacin
(ver Captulo 8), formar los aminocidos alanina, glutnico y asprtico, todos
ellos importantes en la sntesis proteica y como precursores de otros aminocidos.
Estas relaciones se muestran en la Figura 6-8.
REACCIONES DE CARBOXILACIdN
En una secuencia cclica de reacciones como el ciclo de Krebs, una de las conse-
cuencias es que por cada molcula de acetato oxidada se requiere una molcula
de aceptor y solamente se regenera una, La tasa de las reacciones depende en
parte de la concentracin de los intermediarios; debe haber una reserva de oxa-
loacetato para iniciar las reacciones del ciclo. Si la concentracin de intermedia-
rios del ciclo cae a un nivel bajo, el ciclo se retarda o se detiene. Cada vez que sale
del ciclo una molcula de oxaloacetato, de a-cetoglutarato o de cualquier otro
intermediario hay una molcula menos de oxaloacetato utilizable para la subse-
cuente operacin del ciclo.
As pues ciertas reacciones son necesarias para recuperar a los intermedia-
rios del ciclo, cuando son gastados en reacciones de sntesis. En estas reacciones
los miembros del ciclo, o los compuestos que lo alimentan, son convertidos en
nuevas molculas de un determinado miembro del ciclo. Tales reacciones, llama-
das anaplerticas, no contribuyen a la reserva energtica de la clula sino que sir-
ven para regenerar a los intermediarios del ciclo que puedan haber sido agotados.
RESPIRACION 133
Las reacciones de carboxilacin que convierten un cido de tres carbonos del
proceso glicoltico en un cido de cuatro carbonos del ciclo de Krebs, son impor-
tantes reacciones anaplerticas. Sin embargo, estas carboxilaciones tienen varias
otras funciones en las plantas, incluso la sntesis de intermediarios en tejidos em-
brionarios o en tejidos que no tienen un mecanismo de fijacin fotosinttica del
COZ . Esto se estudiar en el Captulo 15.
La reaccin de carboxilacin ms importantle est catalizada por la PEP-
carboxilasa y forma oxaloacetato.
PEP carbosilasa
(o PEP carboxikinasa)
PEP + COZ (+ ADP) - -. oxaloacetato + Pi (o + ATP)
Esta reaccin puede ser catalizada tambin por la enzima fosforilante PEP-
carboxikinasa, en cuyo caso produce - P en formal de ATP y procede ms lenta-
mente.
Se conocen por lo menos dos enzimas que pueden carboxilar al piruvato,
formando un cido de cuatro carbonos. Una de ellas es la enzima mlica que
cataliza la reaccin entre piruvato y COZ para formar malato
piruvato + COZ + NADPH - malato + NADP
Pero sta no es una reaccin anaplertica nnuy importante porque corre
ms fcilmente hacia atrs (descarboxilacin). Igualmente, esta reaccin es espe-
cfica para el NADP y por tanto probablemente no es mitocondrial. En la mito-
condria est presente una enzima mlica especfica para el NAD pero su funcin
casi exclusiva es descarboxilar el malato.
Una enzima encontrada en el tejido animal y tambin en Pseudomonas
usa la energa de hidrIisis del ATP para acelerar una reaccin que tambin car-
boxila al piruvato pero que produce oxaloacetato.
piruvato + CO, + ATP + oxaloacetato + ADP + Pi
Todas estas reacciones regeneran intermediarios del ciclo de Krebs por
carboxilacin del piruvato (o del PEP) en lugar de descarboxilarlo, y en esta for-
ma circunvalan las reacciones oxidativas del ciclo. Estas reacciones pueden ser
importantes tambin en el metabolismo de snter;is bajo ciertas circunstancias,
particularmente durante los principios del crecimiento de las plntulas y en el me-
tabolismo de las races y aun de los tejidos verdes en ausencia de luz.
Una secuencia de reacciones un tanto especializada que lleva la carboxi-
lacin del fosfoenolpiruvato (PEP) se encuentra en los tejidos fotosintticos de
ciertas plantas. En esta secuencia de reacciones la energa de la hidrlisis del ATP
y del pirofosfato se usa para dirigir la carboxilacin por formacin del substrato
PEP, por una reaccin fuertemente exergnica.
piruvatofosfato
dikinasa
Piruvato + Pi + ATP * PEP + AMP + PPI
PPI - 2 Pi
pirofosfatasa
134 METABOLISMO VEGETAL
AMP + ATP
adenilatokinasa
t 2ADP
(suma: piruvato + Pi + 2 ATP -+ PEP + 2 ADP + 2 Pi)
PEP + HCOB-
PEP carboxilasa
t
oxaloacetato + Pi
Esta secuencia de reacciones, en la que la formacin del substrato para la
carboxilacin es catalizada por la enzima piruvato, fosfato-dikinasa, se ve con ms
detalle en el Captulo 7, pgina 192.
CICLO DEL GLIOXILATO
Otra va anaplertica importante es el ciclo del glioxilato, un ciclo interno que
capacita para que una molcula de citrato y una moldcula de acetil-COA se con-
viertan, finalmente, en dos molculas de oxaloacetato por las reacciones esquema-
tizadas en la Figura 6-10. En este ciclo el paso importante es el rompimiento
del isocitrato (formado por la operacin normal de la enzima condensadora del
citrato) en una molcula de succinato y una molcula de glioxilato por la enzima
isocitratasa. El succinato se convierte en oxaloacetato por el proceso normal
del ciclo de Krebs. El glioxilato forma el substrato de una reaccin de conden-
sacin con acetil-COA, similar esencialmente a la reaccin entre el oxaloacetato y
la acetil-COA. Esta reaccin est catalizada por la enzima malato-sintetasa. Por
esta reaccin se forma una molcula de malato que puede luego oxidarse para dar
una segunda molcula de oxaloacetato.
Aunque este ciclo es capaz de aumentar la concentracin de oxaloacetato,
hay poca evidencia de que opere ampliamente en tal sentido. Parece ser mucho
ms importante como un medio por el que la grasa que almacenan muchas semi-
Figura 6-10. Ciclo del glioxilato: 2 acetil-COA -+1 C4 cido.
1
acetil-COA
enzima condensadora
del ci t rat o i
Bcido oxaloac4tico c Bcido cl t ri co
i
aconitasa
&i do i socl tri co
deshidrogenasa
succnica
cido ml i co c cido J
isocitrasa
succnico
deshidrogenasa
mlica
v
dcido oxal oaceti co 4 Bcido
- l acetil-COA -
k i d 0 gl i oxl l i co
RESPIRACION 136
llas, como las de higuerilla o ricino, puede movilizarse y convertirse en azcares,
apropiados para transportarse a la porcin en crecimiento del embrin. La acetil-
COA se forma por la 0-oxidacin de las grasas y es convertida a cido oxaloactico
por el ciclo del glioxilato en los glioxisomas. El cido oxaloacdtico se descarbo-
xila por la operacin inversa de una PEP-carboxilasa producindose COZ y PEP.
El PEP es luego reducido para formar PGA y yendo a la inversa del proceso
EMP, se forma fructosa-l,6-difosfato. h a pasa a f1ructosa-6-fosfato por una fos-
forilasa (no por la accin inversa de una fosfohexokinasa), que a su vez puede
convertirse en glucosa-1-fosfato que, con la fructosa-6-fosfato, forma el substrato
para la sntesis de la sacarosa. As, el carbono que estaba almacenado como
grasa en las semillas puede ser movilizado y convertido en azcares, que es la
forma normal de transporte del carbono en las plantas. La produccin de azcares
a partir del PEP se denomina frecuentemente gluconeognesis. Al considerar
las reacciones de gluconeognesis salta un hecho curioso. Es de la mxima impor-
tancia que la fosfohexokinasa que fosforila a la fn~ctosa-6-fosfato y la fosfatasa
que la desfosforila estn siempre separadas o reguladas cuidadosamente en la c-
lula; de otro modo estas enzimas se acoplaran para efectuar una reaccin cclica
que funcionara esencialmente como una ATPasa efectiva, una situacin sin
duda desventajosa para la clula.
CONTROL DE LA RESPIRACIdN
EFECTO PASTEUR. Hace mucho tiempo que Pasteur advirti que el proceso me-
tablico de las levaduras puede ser afectado por el oxgeno: bajo oxgeno favorece
la fermentacin en tanto que alto oxgeno inhibe la fermentacin y estimula la
respiracin oxidativa y tambin promueve el uso del carbono de los azcares
para reacciones de sntesis. Este fue el primer reconocimiento de un sistema de
control en el metabolismo; los fisilogos y bioqu~micos todava discuten cmo
funciona. Un probable mecanismo es la regulacin de la relacin ATP/ ADP por
el oxgeno. En ausencia del oxgeno el metabolismo oxidativo no puede ocurrir y
la principal comente de sntesis de ATP queda cortada. El metabolismo conti-
nuado de la clula utiliza todo el ATP y se produce una gran cantidad de ADP
y Pi, lo cual estimula la fermentacin. A causa de :la limitada energa liberada (y
ATP formado) en la fermentacin, se utilizan cantidades mucho mayores de
substrato para sostener la misma tasa de reacciones de sntesis.
Los experimentos con dinitrofenol (DNP), un compuesto que desacopla
la fosforilacin oxidativa, confirman este punto de vista (desacoplar significa se-
parar las reacciones del sistema del citocromo de lais que hacen ATP de modo que
no se sintetiza ATP durante la transferencia de electrones). Aunque el DNP no
afecta directamente las reacciones glicolticas estimula fuertemente la gliclisis
reduciendo las cantidades de ATP y permitiendo una acumulacin de ADP. El
fisilogo americano H. Beevers mostr que el DNP puede causar un cambio no-
table de la respiracin hacia la fermentacin, aun en presencia de oxgeno.
En ausencia de oxgeno el ciclo de Krebs ]no puede operar, as que sus
intermediarios no estn disponibles para las reacciones de sntesis. Tampoco hay
piruvato disponible porque se requiere que se reduzca a lactato o etanol para
reoxidar al NADH producido en la oxidacin de los triosafosfatos. Adems,
muchas reacciones de sntesis que usan a estos intermediarios requieren meta-
bolismo oxidativo. De aqu que bajo condiciones anaerbips muy poco, o nada,
136 METABOLISMO VEGETAL
del carbono del azcar pueda utilizarse en sntesis celulares, en tanto que la pre-
sencia de oxgeno permite que esas reacciones ocurran.
CONTROL DE RETROACCIdN Y ALOSTERICO. La respiracin es un proceso exer-
gnico (O exotrmico), es decir, libera energa. Por tanto, si no se ejerciera algn
control la respiracin procedera acelerada y continuamente hasta que todo el
abastecimiento de substrato se agotara. De hecho, funcionan diversos contro-
les, encadenando o integrando las diversas fases del metabolismo celular. Con-
sideraremos dos tipos principales de control: efectos alostricos y control de re-
troaccin. Los efectos alostricos se ejercen cuando una molcula pequea, a
menudo no relacionada directamente con la reaccin, puede promover o inhibir
una reaccin enzimtica especfica al combinarse en un sitio secundario, o alost-
rico, de la enzima. Los mecanismos de auto control involucran la inhibicin o,
con menor frecuencia, la estimulacin de una reaccin por uno de sus productos
finales, a menudo como resultado de un efecto alostrico. Tambin puede ocurrir
en el control que un reactante afecte un paso metablico posterior en el proceso.
Esta situacin no es tan comn.
Los puntos de control en las vas metablicas no son fortuitos. Por lo gene-
ral una reaccin temprana y otra tarda en la secuencia metablica son fuertemente
exotrmicas (es decir, tienen un fuerte cambio negativo en la energa libre) y son
por tanto casi irreversibles. Esto impide la acumulacin de substratos o de inter-
mediarios y las enzimas involucradas se denominan reguladoras y actan en los
sitios que requieren la regulacin ms obvia; del mismo tipo son las enzimas que
median las reacciones en los sitios de la cadena metablica de donde parte una
ramificacin. Algunos puntos de control se resumen en la Figura 6-11.
El primer regulador en la gliclisis es la fosfofructokinasa que fosforila a
la F-6-P pasndola a FDP, utilizando al ATP como su donador. Esta enzima es
inhibida alostricamente por altas concentraciones de ATP y activada por el
ADP y Pi. La inhibicin por ATP impide que la reaccin se desboque en pre-
sencia ae altas concentraciones del substrato, F-6-P, cuando la demanda de ATP
es baja (o sea cuando est presente un exceso de ATP). La enzima tambin es
inhibida por el citrato, el cual tiende a acumularse en presencia de exceso de ATP.
Las enzimas del ciclo de Krebs estn bajo un control similar. La enzima
aconitasa es inhibida por el ATP y elNADHy estimulada por el ADP; una preparacin
de Neurospora es inhibida por el a-cetoglutarato y estimulada por el citrato. Las re-
acciones anaplerticas estn, como podra esperarse, bajo control alostrico. La
piruvato-carboxilasa y la PEP-carboxilasa son activadas a veces (no siempre) por
la acetil-COA, un compuesto que se acumulara si se retardara el ciclo de Krebs,
por la remocin de intermediarios que requieren reemplazo. La PEP-carboxilasa
est bajo el control de un producto de su propia reaccin: la carboxilacin es in-
hibida por el malato que se forma fcilmente a partir del oxaloacetato resultante
de la carboxilacin del PEP.
CONTROL DE COFACTORES. Las reacciones respiratorias importantes estn suje-
tas a un control precursor-producto a travs de las relaciones entre NADH/ NAD y
ATP/ ADP. La gliclisis y la fermentacin se regulan bsicamente por l a s exigen-
cias de ATP y NADH de la clula, las reacciones de reduccin de la fermentacin
(piruvato -+ lactato o acetaldehdo -+ etanol) se dictan por la exigencia absoluta
de NAD, que no puede provenir del NADH a travs de la cadena de transporte de
RESPIRACION
G-6-P
137
Figura 6-11. Esquema generalizado de la respiracibn mostrando algunos sitios de control por
retroaccin. Los niveles de ATP, ADP, NADH y NAD afectan, todos ellos, cualquier reac-
cin en que dichos compuestos tomen parte (no se muestran todos para evitar confusiones).
+-+estimula;+oinhibe.
electrones en ausencia de oxgeno. Dado que la oxidacin del NADH en la mito-
condria por la cadena de transporte de electrones est acoplada intimamente a
la formacin de ATP (es decir que ADP y Pi son requeridos como substratos),
todas las reacciones de oxidacin del ciclo de Krebs estn controladas por las
necesidades celulares de ADP o NADH que abastecen de fuerza motriz a las reac-
ciones de sntesis, crecimiento, absorcin de sales, etc. En efecto, la tasa respira-
toria est controlada por el nivel de carga energtica de la clula, como se describe
en el Captulo 5 (pgina 111). La adicin de DN:P que desacopla la fosforilacin
oxidativa a menudo causa un sbito aumento en la produccin de COZ porque
todo el proceso oxidativo se libera de las restricc:iones impuestas por la exigencia
de ADP y Pi como substratos obligados de las reacciones. La falla "bastante fre-
cuente- del DNP en estimular la produccin de COZ puede deberse a que la respi-
racin est tambin bajo el control de otros sistemas, como ya se discuti.
REACCIONES LATERALES. La tasa de respiracin est afectada inevitablemente
por las necesidades de intermediarios para la sntesis de la clula. Por tanto, la
138 METABOLISMO VEGETAL
utilizacin de los intermediarios afectar a las reacciones que se generan por accin
de masas, aumentando la tasa total de la respiracin. Ya que el metabolismo pos-
terior de los intermediarios utilizados (por ejemplo de aminocido a protena)
tambin requiere ATP o cofactores reducidos, ocurrir un aumento posterior en
la tasa respiratoria. Se puede ver as que la respiracin est estrechamente inte-
grada con las actividades que requieren energa y substratos en la clula. Todas las
actividades metablicas de las clulas y organismos se integran as. Sin tal integra-
cin prevalecera un caos metablico en la compleja red de reacciones interme-
diarias de la clula.
OTROS SISTEMAS RESPIRATORIOS Y OXIDASAS
FENOLOXIDASAS. Se conocen varias enzimas que oxidan a los fenoles dando qui-
nonas. Dos de las ms importantes son la monofenol oxidasa (tirosinasa) y la
polifenol oxidasa (catecol oxidasa). Estas enzimas participan en la caracterstica
reaccin traumtica de las plantas y contribuyen a la respiracin traumtica
convirtiendo los fenoles liberados en la herida a quinonas, que son txicas a los
microorganismos, ayudando as a impedir la infeccin. El color cafd que se desa-
rrolla a menudo rpidamente en la herida (por ejemplo cuando a un tubrculo
de papa o una manzana se le hace un corte o se golpea) es un resultado de dicha
reaccin. Es evidente, por la rpida reaccin que ocurre al herir, que tanto la
enzima como su substrato, los cuales parecen ser solubles, deben haber estado
apartados uno del otro en la clula normal, aprisionados en diferentes compar-
timientos celulares.
La fenoloxidasa puede acoplarse a la oxidacin de los componentes de la
clula en la forma siguiente
A H zxqui nona>c : o :
A fenol
fenol
oxidasa
Aunque esta reaccin puede ser activa en la senectud, normalmente no es
importante en la respiracin. Es posible que la oxidorreduccin del fenol se aco-
ple a la oxidacin del substrato por el NADP.
NADP fenol
A
Las fenoloxidasas estn involucradas en los cambios qumicos de los pre-
cursores de la lignina y otros componentes qumicos celulares. Las quinonas tales
como la coenzima Q (ubiquinona) son importantes en la cadena de transporte de
electrones de la respiracin y fotosntesis (Captulo 7). Pero en esas circunstancias
no reaccionan directamente con el oxgeno como en la reaccin con la fenol oxi-
dasa, pues esto hara un cortocircuito en la cadena de transporte de electrones
impidiendo su buena operacin como sistema de sntesis de ATP.
RESPIRACION 139
OXIDASA DEL ACID0 ASC6RBICO. La oxidasa del lcido ascrbico o vitamina C es
un componente comn de las plantas. Puede oxidarse a cido deshidroascrbico
por la oxidasa del cido ascrbico como se muestra en la Figura 6-12. La oxidasa
del cido ascrbico parece existir tanto como una enzima libre o como adherida
a la pared celular. Esta oxidasa se asocia con diversals enzimas redox (es decir, que
reducen un substrato al tiempo de oxidar otro) como la oxidasa terminal, o sea la
que transfiere los electrones al oxgeno. Est ligada a ciertas deshidrogenasas por
el compuesto con SH glutatin en la secuencia siguiente
A
NADP x GrG xeshidrr;;rbico ci do
NADPH x
ascrbico
deshidrogenasa glutatin reductasa del oxidasa del
reductasa cido ascrbico cido ascrbico
donde GSH es el glutatin reducido y GSSG el glutatin oxidado. Esta puede ser
una reaccin importante en la produccin de intermediarios reducidos para las
sntesis celulares, por ejemplo para la oxidacin de azcares a cidos o la descar-
boxilacin de aminocidos.
CATALASA Y PEROXIDASAS. Estas enzimas usan perxido de hidrgeno, o sea
agua oxigenada (H202 ) como substrato. La catalasa normalmente acta slo des-
truyendo al H202 en tanto que la peroxidasa oxida tambin otros substratos
H,O + H,O, - 2 H,O + O,
catalasa
H,A + H,O, "-+2 H,O + A
peroxidasa
Antiguamente se pensaba que la catalasa actu.aba slo como agente desinto-
xicante de enzimas tales como la oxidasa del ki do gliclico que produce H202
(ver Figura 6-12), pero se ha demostrado que tambin tiene actividad como pero-
xidasa. Se cree que la peroxidacin de la hormona cido indolactico es catalizada
por la catalasa, por lo que puede tener un efecto rlegulador al controlar el conte-
nido de IAA. Adems, el NAD o el NADPH pueden ser oxidadas por la peroxidasa,
que puede ser muy importante en el control del ;metabolismo celular. Como la
fenoloxidasa, estas enzimas pueden tener que ver con la biosntesis de la lignina.
O O
HOC '1 - o=c '1
HOC! 4
\\ \\
+:o, P
I
I
I I
Oxidasa
del I +H20
HC
HCOH HCOH
ci do HC
,asc6rbico I
Figura 6-12. Accin de la oxidasa
del &ido ascrbico. ci do asc6rbico Aci d0 deshidroasccjrbico
CH20H CH20H
140 METABOLISMO VEGETAL
OXIDASA DEL CIDO GLICLICO. Esta enzima, de extrema importancia, cataliza
la conversin de cido gliclico en glioxilato. El producto de la oxidacin no es
Hz O sino H2 O2 , lo que requiere la presencia de catalasa para convertirse en H2 O.
La oxidasa del cido gliclico puede ligarse a la oxidacin de ciertos substratos,
como el etanol, por medio de la glioxilato-reductasa en la forma siguiente:
etanol NAD glicolato
\f
etanol glioxilato oxidasa del
deshidrogenasa reductasa icido gliclico
La oxidasa del cido gliclico puede ser importante en la sntesis de la gli-
cina, la cual puede derivarse del glioxilato. Probablemente es importante en la
fotorrespiracin, el proceso de liberacin de COZ por los tejidos fotosintticos
iluminados. La fotorrespiracin no rinde energa til como la respiracin en la
oscuridad y es un proceso totalmente diferente. Se ver en los Captulos 7 y 15.
PARTICIPACI6N DE OTRAS OXIDASAS EN LA RESPIRACIN. Las oxidasas ya des-
critas probablemente no participan en la respiracin excepto en reacciones auxi-
liares. En primer lugar, no se ha visto que ninguna de ellas est acoplada al sistema
de transporte de electrones, que es el nico modo efectivo por el que la clula
puede generar ATP. En segundo lugar, la citocromo oxidasa tiene gran afinidad
por el oxgeno (es decir, reacciona muy fcilmente), en tanto que las otras oxi-
dasas no la tienen. En tercer lugar, los estudios hechos con sustancias txicas por
lo general dan bases para pensar que la respiracin se da generalmente a travs
de la citocromo oxidasa, que sufre toxicidad por el cianuro (CN) o por el mon-
xido de carbono (CO), siendo revertida por la luz la intoxicacin por CO. Las
oxidasas terminales posibles se muestran en la Tabla 6-1 que indica algunas de
sus propiedades relevantes.
Las plantas viven en una atmsfera que contiene abundante O2 as como di-
versos compuestos reductores poderosos. Ahora se sabe que la interaccin quimica
de estos compuestos puede producir radicales de oxgeno, o formas excitadas,
que seran extremadamente txicas por su gran capacidad de oxidacin. Es posi-
Tabla 6-1. Algunas propiedades de las oxidasas terminales.
Enzima Afinidad Acoplamiento Sensibilidad Sensibilidad Inversi6n
por el 0 2 con s h t es i s al CN al CO del efecto
de ATP por la luz
Fenoloxidasa Media - + + _.
Oxidasa del cido
Oxidasa del cido
Citocromo oxidasa Muy alta ++ + + +
Va accesoria del
ascrbico Baj a - +
I
glic6lico Muy baja - - -
citocromo Alta +
- -
RESPIRACION 141
ble que algunas de las oxidasas mencionadas anteriormente tengan importancia
haciendo que la clula se deshaga del exceso del atxgeno, particularmente en la
forma excitada. De hecho, es muy probable que e,stas enzimas efecten diversas
funciones en las clulas.
RESPIRACIdN ALTERNATIVA
Aunque en la planta pueda tener lugar respiracin insensible al CN o al CO hasta
cierto punto (en algunos tejidos la respiracin es insensitiva al CN casi por com-
pleto) el proceso de fosforilacin oxidativa se afecta mucho. La eficiencia de una
preparacin o de un tejido en hacer ATP por medio de reacciones de oxidacin,
puede expresarse como la relacin de molculas de fosfato esterificado por tomo
de oxgeno consumido denominndose la relacin P/ O. Cuando un tejido con
respiracin insensible al CN, como el espdice de Arum, se expone al CN, la tasa
integral de la respiracin no se afecta mucho, en tanto que la fosforilacin declina
notablemente; por tanto, la relacin P/ O decrece. ]Los datos del estudio espectro-
mtrico de los citocromos (ver pgina 154) muestran que existe una va alternati-
va. Los electrones son derivados directamente del citocromo al oxgeno por un
citocromo b autooxidable (citocromo b, ) o bien por un citocromo a autooxida-
ble especial. En cualquier caso los electrones pasan por circuito corto al oxgeno
y evitan el sitio de fosforilacin del citocromo a3 (citocromo oxidasa) que es
sensible al CN. La hiptesis alternativa es que la omidasa del cido gliclico parti-
cipa en la respiracin insensible al CN, pero no es atrayente a causa de la baja
afinidad de la enzima por el oxgeno y porque no est acoplada con la sntesis
de ATP.
Hay datos recientes que sugieren que la respiracin alternativa, insensible
al CN, es comn en las semillas en germinacin y tejidos de almacenaje, tales
como las papas, y tambin durante el climaterio en los frutos en maduracin y
en las hojas en senescencia. La significacin de esta va respiratoria no est clara.
Se ha sugerido que el cianuro es un subproducto normal del metabolismo y ya que
no puede escapar de los tejidos con una cubierta impermeable, tales como las
semillas, o de tejidos muy masivos, tales como los tubrculos de papa, su concen-
tracin aumentara hasta un nivel inhibitorio de la cadena de transporte de electro-
nes normal. La va alternativa insensible al cianuro1 solucionara el problema. Sin
embargo la evidencia no es concluyente en modo alguno.
FACTORES QUE AFECTAN LA RESPIRACIdN DE LOS TEJIDOS
La fisiologa de la respiracin en cuanto proceso, est muy afectada por su rela-
cin con los otros procesos metablicos, los requerimientos generales respecto al
crecimiento y desarrollo, la disponibilidad de substratos apropiados y la situacin
fsica y fisiolgica de la planta. Muchas de estas interrelaciones se tratarn en de-
talle en captulos posteriores. No es apropiado examinar ahora todas las interre-
laciones fisiolgicas de la respiracin; en lugar de ello se tratarn brevemente las
respuestas bsicas del mecanismo respiratorio a las condiciones ambientales ex-
ternas e internas.
COCIENTE RESPIRATORIO Y SUBSTRATOS DE LA RESPIRACI6N. En 10s Comienzos
del estudio de la respiracin se reconoci que pod:an servir como substrato com-
142 METABOLISMO VEGETAL
puestos con diferente grado de oxidacin. Se crea que midiendo la cantidad de
CO, producido por cada molcula de O, consumido, podra obtenerse alguna
indicacin sobre qu clase de substrato se estaba oxidando. Esta relacin expre-
sada como
moles de COZ producido
moles de O, absorbido
se denomina el cociente respiratorio o CR. Cuando el carbohidrato se oxida com-
pletamente por la relacin general
el CR es 6 COZ / 6 O2 o sea 1.0. Cuando se oxidan grasas, protenas u otros com-
puestos altamente reducidos el CR es menor que 1. Por ejemplo, en la oxidacin
del trioleato de glicerol
C,-J HIO, 0 6 83 0 2 + 57 COZ + 52 Hz0
trioleato de glicerol
el CR es 57/83 =0.69. Cuando sirven como substratos de la respiracin com-
puestos que estn parcialmente oxidados, el CR es mayor que 1, como en la
oxidacin del cido ctrico.
CgHSO7 + 4 1/2 O2 + 6 COZ + 4 Hz0
cido ctrico
en la cual el CR es 6/ 4 1/ 2 =1.33. As pues, el CR puede dar cierta indicacin
sobre qu clase de compuestos se oxidan o, al menos, sobre el estado de oxida-
cin del substrato.
Pero muchas otras condiciones pueden producir grandes cambios en el CR.
Por ejemplo, si ocurre fermentacin en un tejido se causa un CR anormalmente
alto, en tanto que la oxidacin parcial de un substrato puede dar absorcin de
O, y liberar cantidades altas de energa pero no CO, , lo que causar un CR anor-
malmente bajo. Igualmente, la retencin de 0, o de C02 en un tejido masivo
puede dar valores experimentales que lleven al error. Inversamente, la inhabili-
dad del tejido para absorber O, (como en una semilla en germinacin) puede
producir fermentacin con su alto CR caracterstico.
Por tanto, aunque la composicin qumica del substrato puede a veces de-
terminar al CR, este valor puede ser sntoma del proceso ms que indicacin
del substrato. Por esta razn el CR no tiene ya gran importancia en estudios de
fisiologa de la respiracin excepto en situaciones bien entendidas y cuidadosa-
mente controladas.
EDAD Y TIPO DE TEJIDO. De modo general, los tejidos jvenes respiran ms que
los viejos, los tejidos en desarrollo ms que los maduros y los tejidos que efectan
otras actividades metablicas (como absorcin de sales o de agua) ms que los
t,ejidos en descanso. Esto es consecuencia natural del hecho de que la respiracin
es el proceso que libera energa para todas las otras actividades celulares. Sin em-
RESPIRACIdN 143
bargo, ciertas condiciones modifican este concepto. La primera es que los substra-
tos respiratorios cambian al madurar los tejidos, y el proceso general as como la
eficiencia de la respiracin cambian el desarrollo. Por ejemplo, la tasa respirato-
ria de las plntulas generalmente asciende rpidamente durante la germinacin
hasta una mxima durante un periodo de mayor crecimiento, luego cae conforme
maduran los tejidos formados inicialm-ente (Figura E;-13).
Figura 6-13. Respiracicin de semillas de cebada en germinacicin
(De B.F. Folkes, A.J. Willis 11 E.W. Yemm: The respiration of
barley plants VIII, the metabolism of nitrogen and respiration
of seedlings. New Phytol. 51 :317-41 (1952). Usado con permiso.)
1
METABOLISMO VEGETAL
144
1. 5
L
.
S
N
E
1.0
O
U
o
-
E
r
E
.- 0.5
[r
.O
O
.-
P
O
-
Amarillamiento
de las hojas
4
Expansin
foliar
Edad de las hojas
A
o 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22
2
m
In
m
O
S
.-
ul
-
al
1 0
lu
a
O
verde
O
O 10 20 30 40 50 60
Das
B
Figura 6-14. Respiracin de las hojas.
A. Respiracin de hojas de fresa1 adheridas a la planta. La producci6n de COZ se midi6 en una
corriente de airea 24.5C. Las hojas fueron encerradas peridicamente en una cmara respi-
ratoria durante 3 meses (De S.E. Arney: The respirarion of strawberry leaves. New Phytol.
46:68-96 (1967). Con permiso.)
B. Pendientes de la respiracin de Tropaeolum majus (I nea superior seguida y escala del tiempo)
y Prunus laurocerasus (curva inferior seguida y escala del tiempo). La lnea punteada da el
peso de la hoja del Tropaeolum con la ordenada a la derecha.(De W. O. James: Plant Respi-
ration. The Clarendon Press. Oxford, 1953. Con permiso.)
Adems, cuando se mide la tasa de respiracin de un solo rgano, como
una hoja, hay una curva caracterstica durante su desarrollo (Figura 6-14). La
respiracin est a su mximo durante el crecimiento de la hoja, luego cae a un
estado estable durante el periodo de maduracin de la hoja. A menudo hay un breve
ascenso, o climaterio, a un nivel ms alto, lo que seala la implantacin de proce-
sos de degeneracin irreversibles que marcan la senescencia y muerte del rgano.
Generalmente la relacin P/O (tomo de fsforo esterificados por tomo de
RESPIRACI~N 145
oxgeno absorbido) declina marcadamente durante y despus del ascenso clima-
t4rico. En la hoja madura esto indica un rompimi'ento del sistema integrado de
transferencia de energa.
Ms tarde, en el proceso de senescencia l a s protenas empiezan a romperse
y forman el substrato de la respiracin. Puede haber un breve periodo final de alta
produccin de dixido de carbono al colapsarse la organizacin y morir las c6lu-
las aunque esto se puede deber en parte a la rpida multiplicacin de microorga-
nismos endgenos o invasores.
Los diferentes tipos de tejido tienen diferent,es tasas de respiracin depen-
diendo de su actividad metablica, la masa relativa de sus componentes no meta-
blicos o estructurales y su accesibilidad al oxgeno. En la Tabla 6-2 se da un
resumen de las tasas respiratorias de varios tejidos. Las tasas de respiracin de los
tejidos metablicamente inactivos, tales como esca.mas, tallos, hojas viejas y ra-
ces, o tejidos masivos como frutos en estado de descanso, son menores que las
tasas de tejidos en metabolizacin o crecimiento activo. Las tasas de los tejidos
900
600
10,000
Tabla 6-2. Tasas de respiracin de algunos tejidos.
Tejido Tasa de respiracith, pnoles O2/hr
Por g Por g
peso fresco peso seco
Hombre
en descanso 10
corriendo 200
en descanso 1 O0
corriendo 900
Ratn
Rin
Cerebro
Bacterias
Semilla de cebada 0.003
Plntula de trigo 65
Hoja de trigo
5 das 22
13 das 8
Hoja de laurel sano 9
Hoja de laurel sin reservas 1.3
Raz de cebada 50
Raiz de zanahoria 1
Tubdrculo de papa 0.3
Manzana en desarrollo 10
Manzana madura 0.5
Planta entera de papa 5
Semilla de chcharo
0.005
Plntula de avena
70
hi ce de ra lz de tomatero 300
Rodajas de betabel
50
Planta de girasol 60
Espddice de aroidea
2,000
146 METABOLISMO VEGETAL
que tienen una masa de clulas, material muerto no-metablico, tales como ta-
llos leosos, pueden ser muy bajas. Sin embargo, la tasa por clula o por unidad
de protena de algunos componentes de tejidos, como tallos (es decir, las clulas de
compaa de floema, del cambium o del parnquima), puede ser muy alta.
La respiracin de rganos masivos como las papas puede ser muy afectada
por la tasa de difusin del oxgeno. Las semillas en letargo pueden tener un inter-
cambio de gases muy lento pero es improbable que esto sea realmente una respi-
racin lenta; es ms probable que represente un proceso de autooxidacin y
decadencia ms que de metabolismo organizado.
TEMPERATURA. La respiracin, como otros procesos enzimticos, se ve afectada
por la temperatura. Dentro de ciertos lmites la tasa de las reacciones enzimti-
cas se duplica, aproximadamente por cada 10C de elevacin de la temperatura.
Esto se expresa cuantitativamente por el valor Ql o dado por la expresin
- tasa a ( t + lo)" C
u10 =
tasa a to C
Los valores de Qlo para la respiracin estn por lo general entre 2 y 3 a
temperatura de O a 20C. Por encima de esta temperatura a menudo el Ql0 decre-
ce, probablemente a causa de la limitacin de oxgeno debido a la reducida solu-
bilidad y lenta difusin de este gas. Al ir aumentando la temperatura por encima
de 35C puede haber una cada progresiva ms y ms rpida de la respiracin de-
bido a la destruccin de las enzimas por el calor y el rompimiento del mecanismo
respiratorio (Figura 6-15). Cuando se aumenta de golpe la temperatura de la hoja,
la tasa respiratoria aumenta rpidamente hasta que una elevacin breve y brusca
(el climaterio) marca el rompimiento de la organizacin celular y el desborda-
15
10
5
O 1 2 3 4 5 6 7 8
Tiempo, horas
Figura 6.15. Efecto de la tempe-
ratura sobre la tasa de respira-
ci6n de plantulas de chicharo
(Pisum sarivum) de 4 dias. En
el tiempo O la temperatura se
cambi6 de 25OC a l a demostrada
en l a figura (De R.M. Devlin:
Planr Physiology. Publicada por
Van Nostrand Reinhold Co.
Copyright 1966-1969 por Litton
Educational Publishing Inc.
Nueva York, 1966. Usado con
permiso.)
RESPIRACIdN 147
miento de las enzimas oxidativas con substratos. 13ntonces, aqullas son inacti-
vadas por el calor (Figura 6-16). Si la temperatura se eleva ms lentamente, la
inactivacin por el calor precede al rompimiento de los tejidos y se presenta una
falta de substratos que impide el brusco climaterio (Figura 6-16).
Este breve resumen indica las complejas interrelaciones que existen entre
los diversos factores internos que afectan la respuesta de la respiracin a la tem-
peratura.
OXGENO. Se consideraron los efectos del oxgeno ten la respiracin y la fermenta-
cin y, claramente, la presencia del oxgeno es esencial para el metabolismo
oxidativo. Sin embargo, el sistema oxidativo del c:itocromo tiene una alta afini-
dad por el oxgeno, y por lo tanto se satura aun a muy bajas presiones parciales
de &te. En la Figura 6-17 se presentan datos de la hoja de soja que ilustran este
hecho as como aquel en que, contrariamente a l;a respiracin oscura, la foto-
rrespiracin se afecta mucho por la concentracin de oxgeno. Por otra parte
el oxgeno debe difundir a los sitios de oxidacin. Las tasas respiratorias, parti-
cularmente en tejidos masivos, pueden estar limitadas frecuentemente por el
abastecimiento de oxgeno por ser un tanto insol.ubles y difundir lentamente.
Esto se muestra claramente en la Figura 6-18 en :la que la tasa respiratoria de
semillas intactas de chcharo en germinacin es proporcional a la concentracin
de oxgeno (o sea a su tasa de difusin) en toda la escala de O-l OO% , en tanto
que la respiracin de semillas con la testa (cscara de la semilla) retirada se sa-
satura al 20% de oxgeno.
Figura 6-16. Efecto del incremento de temperatura sobre la tasa
de respiracin de hojas de trigo. (Datos del Laboratorio de Fisio-
logia de no graduados. Universidad de Toronto 1962.)
I I I I I I
10 20 30 40 50 60
Temperatura, 'C
METABOLISMO VEGETAL
20 40 60 80 1 O0
Concentracin de oxgeno, Ol e
Figura 6-17. Efecto del oxgeno sobre la tasa de fotorrespiraci6n
(PR) y respiracin en la oscuridad ( RD) en hojas desprendidas
de soya. (De M.L. Fowester, G. Krofkov y C.D. Nelson: Plant
Physiul. 41:42-27 (1966). Usado con permiso)
DIdXIDo DE CARBONO. Podra esperarse que el dixido de carbono, siendo un
producto final de la .reaccin, inhibiera la respiracin en altas concentraciones.
De hecho, la inhibe un poco pero slo en concentraciones que exceden en mucho
a las que normalmente se encuentran en el aire. No est claro el mecanismo de
esta inhibicin; de hecho pueden estar involucrados varios mecanismos diferen-
tes. La respiracin anaerbica (o sea la produccin de dixido de carbono por
fermentacin) de las semillas de chcharo en germinacin se inhibe cerca de 50%
80 - "testa
+testa
1
I
-1 Figura 6-18. Efecto de la concentracin
' de oxgeno en la respiracin de semillas
de chcharo. El quitar la testa permite
! al oxgeno difundir libremente en el inte-
rior de la semilla lo que no es posible con
la testa intacta. (De E.W. Yemm: En
F.C. Steward (ed.): Plant Physiology: A
A Treatise. Vol. I VA. Academic Press,
O 20 40 60 80 100
Nueva York, 1965, pp. 231-310. Usado
I . ,
A
Ox geno, * lo con permiso.)
RESPIRACION
149
por 50% de dixido de carbono en el aire. Esto puede relacionarse con un meca-
nismo para mantener el letargo en las semillas, pero su modo de accin no est
claro. El dixido de carbono tiene un efecto inhibitorio sobre la succinooxidasa,
pero ste afectara solamente a la respiracin aerob:ia que puede ser poco impor-
tante al iniciarse la germinacin. Todos los pasos de descarboxilacin en la res-
piracin son reacciones que liberan una cantidad razonable de energa, as que
no es probable que incluso una concentracin relativamente alta del producto
final (dixido de carbono) tenga mucho efecto en las tasas de reaccin. El dixido
de carbono tiene, sin embargo, un fuerte efecto sobre los estomas (ver Captulo
14). Las altas concentraciones de dixido de carbono generalmente causan el
cierre de los estomas y el efecto inhibitorio que se lnaobservado en la respiracin
de la hoja bien puede deberse a este efecto.
SALES. Cuando las races absorben sales la tasa de respiracin aumenta. Se ha
ligado este aumento al hecho de que la energa se gasta en absorber sales o iones
y este requerimiento se enfrenta aumentando la respiracin. Este fenmeno lla-
mado respiracin salina, se discutir en el Captulo 12.
HERIDAS Y ESTIMULOS MECANICOS. Se sabe, desde hace mucho tiempo, que la
estimulacin mecnica de los tejidos de la hoja causa un aumento en la respiracibn
por un tiempo corto, generalmente de unos pocos minutos a una hora. La clase de
estmulo parece ser importante. La compresin o tensin parecen tener poco efec-
to, doblar la hoja lo tiene ms y el cortarla o fracturarla parece estimular al m-
ximo la respiracin. Los mecanismos son desconocidos. Se ha dicho que las ondas
de sonido estimulan la respiracin, entre otros procesos, pero no se ha dado una
prueba rigurosa. El herir o romper los tejidos estimula mucho la respiracin por
tres razones. La primera es la rpida oxidacin de los compuestos fenlicos que tie-
oxidasas, se rompe. La segunda, son los procesos normales de gliclisis y catabo-
lismo oxidativo que aumentan conforme la disrupcin de la clula o clulas
causa una mucho mayor accesibilidad de los substrattos a la maquinaria enzimtica
de la respiracin. Tercero, la consecuencia general de la herida es la reversin de
ciertas clulas al estado meristemtico, seguido por la formacin de callo y la
curacin o reparacin de la herida. Tales clulas y tejidos en activo crecimiento
tienen tasas respiratorias muy superiores a las de los tejidos maduros o en descanso.
l ne lugar cuando la organizacin, que mantiene a estos substratos separados de sus
EL ESTUDIO Y MEDICIdN DE LA RESPIRACIdN
La respiracin se ha estudiado de muchas maneras, usando diversas tcnicas. El
estudio de la respiracin es bsico para el conocimiento de la bioqumica y meta-
bolismo de tejidos. Quedara fuera del propsito de este libro tratar de exponer,
aun esquemticamente, todos los experimentos que fundamentan el conocimiento
de la respiracin dado aqu, pero s es posible examinar brevemente algunos de
los puntos de vista experimentales importantes y las tcnicas que se han usado.
MEDICI6N DE LA TASA. El mtodo ms fcil y efectivo de medir la respiracin es
medir el producto gaseoso o el substrato, dixido de carbono u oxgeno. La me-
dicin cuantitativa de los volGmenes gaseosos por manometra ha sido una tc-
150 METABOLISMO VEGETAL
nica estndar desde el desarrollo del aparato de Warburg de Otto Warburg. Este
aparato consiste en un conjunto de cmaras termoestabilizadas cuidadosamente
en las cuales se colocan muestras del material vegetal. Estas cmaras estn provis-
tas de manmetros sensibles y todo el aparato se agita constantemente. El cam-
bio de presin que resulta del intercambio neto de gases puede medirse durante
un periodo de tiempo en cada manmetro, y luego se pone un lcali en el brazo
lateral para que el dixido de carbono producido en la respiracin se absorba. El
cambio de presin resultante se debe al dixido de carbono producido, y la dife-
rencia entre el cambio de presin debido al intercambio neto de gases y el que
se debe a la absorcin de dixido de carbono es el resultado de la toma de ox-
geno del aire.
Este sensible aparato y el desarrollado ms recientemente respirmetro,
que trabaja bajo el mismo principio pero tiene una presin constante ajustada por
un instrumento cambiador de volmenes operado micromtricamente en lugar
de un manmetro, han producido muchos datos cuantitativos sobre la respiracin
tisular. Obviamente, la limitacin de este aparato es que la necesidad de tener
pequeas cmaras selladas impide la utilizacin de muestras grandes u rganos
adheridos como hojas y de plantas integras. Para mediciones menos sensibles, el
dixido de carbono puede ser absorbido en una solucin alcalina y determinado
gravimtricamente o por titulacin.
Algunos instrumentos desarrollados recientemente permite una medicin
continua y sensible de las tasas de toma del oxgeno o produccin del dixido
de carbono. El dixido de carbono puede medirse con gran sensibilidad en una
corriente gaseosa por medio del analizador de gases infrarrojo, que detecta al
dixido de carbono por su capacidad de absorber dichos rayos. La grfica que
muestra los cambios en la respiracin de la hoja al elevarse rpidamente la tem-
peratura, que se presenta en la Figura 6-16, se hizo utilizando un analizador
infrarrojo de dixido de carbono con una muestra de dos o tres hojas de trigo,
lo que indica la sensibilidad y adaptabilidad de esta tcnica.
Tanto la concentracin de dixido de carbono como la de oxgeno, sea
en aire o en lquido, pueden medirse usando instrumentos polarogrficos con
electrodos que se parecen bsicamente a los de pH. Este mtodo permite medi-
ciones continuas y sensibles del intercambio de gases por todos los tipos de tejidos
bajo casi cualquier situacin experimental y ha probado ser extremadamente
valioso en la fisiologa vegetal moderna. Un ejemplo especfico del valor de este
mtodo polarogrfico de medicin de oxgeno, tan sensible, se m.uestra en la
Figura 6-19. Es un trabajo de W.D. Bonner Jr.
Las mitocondrias del frijol mung (Phuseolus aureus) se suspenden en el
medio apropiado siendo su tasa de absorcin de oxgeno muy pequea. Se aade
un substrato con carbono (cido mlico) y la tasa de oxidacin aumenta. Enton-
ces se aade ADP (en el medio est presente Pi) e inmediatamente la tasa de
oxidacin aumenta ms hasta que todo el ADP es convertido en ATP. Puede repe-
tirse la adicin de ADP, y cada vez se estimula la respiracin hasta que el ADP se
agota. El examen cuidadoso de los datos indica que por cada microtomo* de ox-
geno consumido se utilizan cerca de 3 moles de ADN. Esto significa que la rela-
cin P/ O de esta preparacin es 3, que es el valor terico esperando 3 ATP produ-
*Un micro6tomo es el ntmero de microgramos equivalentes al peso at6mico de la INS-
tancia, asf como un micromol es el ntlmero de microgmmos equivalentes a su peso molecular:
2 dtomos de O =1 mol 02.
RESPIRACI6N
151
30 m mol malato
-- t
0. 43~ mol 02/ 50g
[ 02] =260p mol 0.901 mol 02/ se1)
- M,
-
-
0. 15~ mol 0 2 h g
-
-
O. 1 5p mol O2 /seg
150p mol ADP
150p mol ADP
-
o, =o
-
- 60 -
- =g
150p mol ADP
150p mol ADP
I I I I I
Figura 6-19. Traza polarogr4fica (electrodo de oxFgeno) de la utilizaci6n del oxgeno por
mitocondrias de frijol mung. La utilizacin de oxgeno en1 estado de equilibrio por las mito-
condrias se muestra despuC de aadir malato y ADP a la suspensi6n. El control de la tasa de
oxidacin por el ADP es claramente evidente. La relaci6n ADP/ O equivalente a la relaci6n P/ O,
calculada de la traza es cerca de 3 (Dato de W. Bonner J r. J . Bonner y J .D. Varner: Plant
Biochemistry. Academic Press. Nueva York, 1965. Con permiso.)
cidos por cada par de electrones transportados por el sistema de transporte de
electrones del malato al oxgeno.
Para los fisilogos siempre fue un problema1 la presentacin de los datos
cuantitativos de la respiracin. En muchos casos, como en los experimentos pre-
sentados en las Figuras 6-16 a 6-19, la comparac:in de tasas bajo condiciones
diferentes (por ejemplo de tensin de oxgeno) o en tiempos diferentes es im-
portante. En tanto se use la misma muestra para todas las mediciones en una
serie no se precisa medir con cuidado la cantidad absoluta de tejido requerida.
Sin embargo, debe hacerse alguna medicin para propsitos de compara-
cin. A menudo se usa el peso fresco, pero puede estar muy influenciado por el
contenido en agua. El peso seco obvia esta dificultad pero el tejido se destruye
y no siempre es posible medirlo. Adems, el peso seco representa tan slo la
materia seca total, no la materia metabolizante total. Dos tejidos que tengan
el mismo nmero de clulas metabolizantes igualmente activas pueden diferir
ampliamente en el contenido de tejido fibroso o esclerenquimatoso, lo que reva-
lidara una comparacin por peso seco. Se han hecho comparaciones sobre la
base del nitrgeno total, protena total o contenido en cidos nucleicos tratando
de sortear el problema, pero es evidente que tales prcticas estn expuestas a
la misma crtica.
Ms an, dado que presuponen que bien podra no haber relacin entre la
respiracin y dichas cantidades, pueden llevar a error. Para estimar la actividad
de sistemas especficos, han sido tiles las expresiones de la tasa de reaccin en
base a la concentracin de la enzima especfica o de los reactantes, pero el formi-
dable anlisis secundario que ello requiere impide el uso frecuente de este m-
todo. Probablemente la convencin ms simple es la ms til: por unidad de peso
fresco o por unidad de peso seco (por ejemplo, por hoja) cuando es posible la
medicin en secuencia de la misma muestra.
CLARIFICACI6N DE LOS PROCESOS. Antes del descubrimiento de los indicadores
radioactivos se usaron muchas tcnicas bioqumicas para determinar l a s vas de
152 METABOLI SMO VEGETAL
las reacciones del carbono, incluso: 1) determinacin de que las enzimas reque-
ridas estaban presentes y operando a ha velocidad requerida; 2) estudio de los sis-
temas parciales o reconstituidos, y 3) uso de inhibidores para bloquear puntos
especficos en la secuencia de las reacciones. Pero estas tcnicas rara vez dan una
respuesta definida. Las enzimas pueden ser difciles de aislar y sus actividades pue-
den cambiar o perderse en el proceso. Los sistemas reconstituidos pueden ser
idnticos a los naturales o no serlo; el grado de asociacin o de acoplamiento
de las enzimas puede ser muy diferente in uivo e in vitro. Pueden emplearse di-
versos inhibidores especficos para determinar si estn operando reacciones
especficas. Por ejemplo, la oxidacin del fosfato gliceraldehdo a PGA se bloquea
por la yodoacetamida, los arsenitos y los grupos tiol (SH). La conversin de PGA
a PEP se inhibe fuertemente por el fluoruro. El ciclo de Krebs se bloquea por el
fluoroacet.ato en el paso de la aconitasa, y por el malonato en la deshidrogenasa
succnica. Pero los inhibidores rara vez son completamente especficos y la inter-
pretacin de los resultados obtenidos al usarlos es muy difcil. As pues, aun con
estas thcnicas no era fcil probar que la va que se investigaba era, necesariamente,
la nica o la normal.
El descubrimiento de los indicadores radioactivos y su utilizacin han posi-
bilitado el estudio de las reacciones con mucha mayor precisin por: 1) estudios
cinticos de las formas por las que pasa un carbono marcado radioactivo a travs
de la secuencia de reacciones; 2) el uso de intermediarios marcados especfica-
mente para determinar la conformacin exacta y la distribucin cuantitativa del
carbono en el metabolismo, y 3) el uso de istopos para clarificar el mecanismo
de las reacciones individuales en una secuencia.
Un ejemplo del uso de intermediarios marcados es el uso del cido pir-
vics radioactivo para estudiar las reacciones, que van del cido ctrico al a-ceto-
glutarato, en el ciclo de Krebs. El mecanismo de la reaccin y la distribucin
del carbono marcado puede verse en la Figura 6-20. Se advierte que el piruvato
marcado en su primer carbono (pir~vato-l-'~C) no puede pasar este carbono al
cido ctrico ni al a-cetoglutarato cuando entra al ciclo descarboxilndose porque
el C-1 del piruvato pasa a CO, en la sntesis de la acetil-COA. Pero el carbono del
piruvato puede entrar al ciclo de Krebs despus de su carboxilacin, lo que lle-
vara a tener cido ctrico marcado con I4C a partir del pi r~vato-l -'~C en el C, o
C, del piruvato entrara al ciclo como resultado tanto de la descarboxilacin
como de la carboxilacin del piruvato. Por tanto, comparando la cantidad de
radioactividad que entra al ciclo del pi r~vato-l -'~C y del piruvat0-2-'~C se eviden-
ciarn las cantidades relativas de carbono del piruvato que entran al ciclo por
estas dos vas, es decir, la importancia relativa de la carboxilacin anaplertica.
Se obtuvo an ms informacin con este sistema. La evidencia experimen-
tal demuestra que cuando se utiliza el piruvato-2-14C toda la radioactividad se
encuentra en el pcarboxilo (C-5) del a-cetoglutarato. Esto demuestra claramente
la especificidad estrica de la enzima aconitasa que acta sobre el cido ctrico
(ver Figura 6-5). Si no fuera estereo especfica, la radioactividad del C-2 del piru-
vat0 ira a parar a ambos carboxilos terminales del cido ctrico y, consecuente-
mente, a ambos carboxilos del cido a-cetoglutrico.
En experimentos con tejidos intactos se redistribuye una cierta cantidad
de radioactividad. La radioactividad en el p-carboxilo del a-cetoglutarato se dis-
tribuye entre los dos carboxilos del cido succnico (que es simtrico) y los si-
guientes cidos de cuatro carbonos. De ah vuelve a entrar al ciclo a marcar los
carboxilos medio e inferior del cido ctrico, introduciendo as una pequea
RESPIRACION
153
CH, -CO-COOH
0
C- COO ti
I d
H,C-COOH
CH,---COO
c t b
acet i l
\
y \ H,i-~OOH - 2 carbonos del
acet at o
C-COOH
c b. d oxal oacet at o
I
I
I
- HOC-COOH
} 4car bonosdel
H,C-.COOH acci 6n de l a
H,C-COOH
Punt o de --+
aconi tasa
ci do oxal oacdt i co ci do cf t r i co (asi m6t r i co)
H,C-COOH
c b
I
c b
H,C-COOH
ci do succni co
(si m6t ri co)
H,C-COOH
HC-COOH
c b
I
O=C-COOH \
I d
ci do COZ
oxal osuccl ni co
/
Hz c3
I d
2 1
O=C--C00H
ci do a-cet ogl ut 8r i co.
Figura 6-20. Ciclo de Krebs Ilalgunos reactantes se han omitido
en las flechas punteadas) mostrando la distribucih de 14C en
varios intermediarios despus de suministrar piruvato 14C en a, b
o c o 14C0, en d. Aqu se muestra el marcaje en solamente una
vuelta del ciclo. AI seguir el metabolismo se dispersa el carbono
radiactivo. Los dtomos de carbono de algunos compuestos se
numeran as C1, C2, etdtera.
cantidad de radioactiviad en el p-carboxilo del a-cetoglutarato formado en las
siguientes vueltas del ciclo. Pueden surgir ciertas dificultades en la interpretacin
de los datos porque las reacciones de los cidos de cuatro carbonos del ciclo de
Krebs son reversibles. Por lo tanto, las molculas de cido oxalo actico marca-
das de modo asimtrico pueden quedar marcadas simtricamente por una reac-
cin inversa, formando cido fumrico o succnico y una reconversin subsecuen-
te a cido oxaloactico.
La derivacin de cido glutmico a partir del cido a-cetoglutrico en el
ciclo de Krebs, se ha demostrado in vi vo por experimentos similares en los que
la distribucin de las marcas en el cido glutmico concuerda con lo predicho
por el a-cetoglutarato, despus de suministrarse intermediarios como piruvato o
acetato marcados especficamente. La cantidad de redistribucin del 14C encon-
154 METABOLISMO VEGETAL
trado en el cido glutmico provee datos con los que se puede calcular cunto
carbono est siendo reciclado y qu porcentaje se destina a la sntesis del cido
glutmico .
Una modificacin muy interesante de esta tcnica es la determinacin de la
va del catabolismo de la glucosa usando glucosa marcada especficamente. Se
suministra glucosa marcada en C-1 o en C-6 a dos muestras idnticas de tejido y
se mide la radioactividad del C02 exhalada por cada muestra. Si la glucosa se
est catabolizando por la va EMP, se producir la misma cantidad de COZ tanto
de la glucosa C-1 como de la C-6, porque ambos extremos de la molcula se trata-
ron igual y la relacin C-6/ C-1 ser 1. Pero si la glu.cosa se est catabolizando por
la va accesoria de las pentosas la relacin C-6/ C-1 ser inicialmente mucho me-
nor que l. Esto sucede porque el C-1 de la glucosa se libera en la primera reaccin
en tanto que el C-6 se oxida mucho ms tarde, despus de la reaccin cclica de
los productos de la primera oxidacin. Si estn operando ambas vas se obten-
drn valores intermedios.
ENZIMOLOGfA. No importa que los experimentos sean ingeniosos para dilucidar
las vas de reaccin efectuados con indicadores radioactivos; la prueba final de la
existencia de una reaccin yace en el aislamiento, o en la prueba de operacin,
de la maquinaria enzimtica necesaria en los tejidos. Se aislaron o demostraron, ms
all de la duda, muchas enzimas del metabolismo respiratorio en las plantas, usando
los mtodos estndar en bioqumica y se determinaron sus requerimientos espec-
ficos y sus cofactores. Muchas de ellas fueron localizadas en organelos especficos
y se demostr que varias de las enzimas responsables del metabolismo respiratorio
u oxidativo existen en diferentes formas, a veces con diversos cofactores, en dife-
rentes lugares de la clula. Los estudios sobre la estructura primaria de las protei-
nas enzimticas empiezan a indicar que algunas de sus similaridades pueden ser el
resultado de evolucin paralela o convergente, es decir que las enzimas han evolu-
cionado a partir de fuentes diferentes, pero hoy realizan funciones similares. Otras
enzimas representan sin duda el resultado de divergencia evolutiva bioqumica; es
decir, dos enzimas distintas pueden haber evolucionado de un prototipo comn,
pero ahora cada una efecta funciones similares o diferentes, bajo diferentes cir-
cunstancias o en diferentes lugares de la clula.
Una herramienta en extremo importante para estudiar la transferencia de
electrones es el espectroscopio. Cada enzima capaz de oxidarse y reducirse tiene
un espectro de absorcin lumnica caracterstico, que sufre un notable cambio
cuando la enzima pasa de la forma oxidada a la reducida o viceversa. Por tanto
las enzimas pueden ser reconocidas e identificadas por su espectro de absorcin.
Ms an, puede demostrarse que estn tomando parte en reacciones especficas
porque pueden reconocerse por su espectro diferencial, este es el cambio espectral
que ocurre cuar; o un transportador de electrones pasa del estado de oxidacin
al de reduccin, o viceversa. El espectro diferencial se obtiene sustrayendo el es-
pectro de la enzima en estado de oxidacin del que presenta en estado de reduc-
cin. Adems de esto, algunas enzimas sufren un cambio de espectro caracters-
tico cuando sufren una intoxicacin (por ejemplo, por monxido de carbono) y
este cambio en el espectro puede correlacionarse con la actividad de la enzima.
Es pues posible demostrar la participacin de enzimas especficas en la cadena de
transporte de electrones, y determinar sus posiciones en ella obteniendo los espec-
tros diferenciales en: 1) la presencia o ausencia de substratos; 2) la presencia o
165
550
h
l ~ l ~ l ~ l ~ ~ ~ l ~ l
520 540 560 580 600 620 W
Longitud de onda
A
(Oxidasa insenritiva
al cianuro)
B
Figura 6-21. La cadena respiratoria de la mitocondria.
A. Espectro diferencial de mitocondrias aisladas de la raz de trigo. Estos espectros muestran
c6mo los citocromos a, b y c pueden separarse 6pticamente. Curva 1 reducido menos oxi-
dado.. Curva 2 substrato + antimicina A + aereacin menos oxidado. En este espectro
los componentes a y c es th oxidados; solamente los componentes b esten reducidos. Cur-
va 3: succinato + antimicina A + CN - menos substrato + antimicina A + aireacin.
Aqu los citocromos b reducidos se cancelan mutuamente y solo los componentes a y c
aparecen en el espectro (De J . Bonner y J .E. Varner: Plant Biochemistry Academic Press
Nueva York, 1965. Usado con permiso.)
B. Diagrama de la cadena de transporte de electrones en la rnitocondria mostrando los sitios de
la fosforilaci6n (-P) y la accin de los inhibidores. La oxidasa terminal inactiva al CN no se
intoxica por la antimicina por lo que debe desviar los electrones antes que lleguen al cito-
cromo c.
156 METABOLISMO VEGETAL
ausencia de oxgeno, o 3) la presencia o ausencia de inhibidores especficos cuyo
sitio de accin se desconoce.
La Figura 6-21A, tomada del trabajo de W.D. Bonner Jr., presenta un ejem-
plo de cmo se us esta tcnica para examinar el sistema de transporte de electro-
nes en las mitocondrias de la raz de trigo. La curva 1 da un espectro diferencial
compuesto (reducido menos oxidado) de los tres citocromos: a, b y c. El espectro
del citocromo b se separa en la curva 2. Esto se obtiene poniendo el citocromo
oxidado o reducido, aadiendo u omitiendo el substrato y usando la antimicina
a que bloquea la transferencia de electrones del citocromo b al citocromo c. Los
espectros del citocromo a y c se cancelan porque se mantienen continuamente
en estado de oxidacin por la presencia de oxgeno. En la curva 3 el citocromo
b es cancelado, mantenindolo en estado de reduccin usando antimicina A du-
rante ambas partes de la medicin del espectro diferencial. El espectro diferencial
de los citocromos a y c se obtiene por el contraste del espectro inhibido con
cianuro con el espectro en presencia de oxgeno.
La Figura 6-21B es una representacin esquemtica del sistema de trans-
porte de electrones de la mitocondria con la posicin marcada de algunos inhi-
bidores bien conocidos. Tambin se muestran la derivacin insensible al cianuro
y los sitios de sntesis del ATP (- P). Los datos en la Figura 6-21A deben exami-
narse con referencia a la Figura 6-21B
LECTURAS ADICIONALES
Artfculos en el Annual Review of Plant Physiology sobre energtica celular, funcin de las mi-
tocondrias y respiracin.
Para mayores detalles sobre las vas respiratorias y mecanismos enzimticos pueden consultarse
textos modernos de bioquimica.
Beevers, H.: Respiratory Metabolism in Plants. Row, Peterson & Co. Evanston, Ill., 1961.
Forward, D.F. The respiration of Bulky organs. En F.C. Steward (ed.): Plant Physiology: A
Steward, F.C. (ea.). Plant Physiology: A Treatise. Vol. 1-A. Academic Press. Nueva York, 1960.
Yemm, E.W.: The respiration of plants and their organs. En F.C. Steward (ed.): Plant Physiol-
Treatise. Vol. IV-A. Academic Press. Nueva York, 1965.
ogy: A Treatise. Vol. IV-A. Academic Press, Nueva York, 1965.
Captulo 7
FOTOSNTESIS
La manera de emprender el estudio de la fotos:ntesis depende de cmo se la
defina. Algunos de sus investigadores consideraron solamente las reacciones
que realmente exigen quanta de luz, en tanto que otros examinaron todo el
espectro de reacciones que resultan del estmulo' inicial provisto por la luz. Se
tomar la visin amplia y se considerarn todos los procesos del metabolismo
que ocurren como resultado directo de la absorcin de luz por el aparato foto-
sinttico. Es evidente que debe haber interaccio:nes entre el proceso anablico
de fotosntesis y todos los dems procesos catablicos y anablicos celulares;
stos se considerarn en detalle en el Captulo 15.
Elsicamente, la fotosntesis es la absorcih de energa lumnica y con-
versin en potencial qumico estable por la sntesis de compuestos orgnicos.
Puede considerarse como un proceso de tres fases:
l. La absorcin de la luz y retencin de energa lumnica.
2. La conversin de energa lumnica en potencial qumico.
3. La estabilizacin y almacenaje del potencial qumico.
Al describir estas tres fases tambin se examinar la mecnica de la foto-
sntesis, la naturaleza fsica del aparato subcelular en el que tiene lugar el proce-
so y la maquinaria qumica que se requiere.
La fotosntesis es importante por muchas razones. Desde el punto de vista
del hombre, su mayor importancia es su papel en la produccin de alimento y
oxgeno; por lo tanto se estudia a menudo en funcin de sus productos finales.
Sin embargo, stos son secundarios en el proceso integral.
Lo importante es el hecho de atrapar y transformar energa.
Vale la pena considerar una analoga sencilla. Cuando un quantum de luz
golpea a un objeto -digamos una piedra negra- 'una molcula de la roca absorbe
la energa del quantum. Esta molcula queda momentneamente ms energtica;
es decir que un electrn de la molhcula toma una energa orbital ms alta y ste es
elevado a un nivel de energa ms alto,
El electrn no queda largo tiempo en este nivel; casi inmediatamente cae
de nuevo a su nivel primitivo ( o estado basal) y la energa extra absorbida por la
158 METABOLISMO VEGETAL
molcula de roca es remitida de golpe como calor. Este proceso se ilustra en
la Figura 7-1A.
Cuando un quantum de luz golpea y es absorbido por una molcula de clo-
rofila en una planta, la molcula se energiza y un electrn se eleva a un nivel de
energa ms alto, igual que en la roca. Pero en lugar de retornar al estado basal
inmediatamente, el electrn permanece en el nivel energtico alto, perdiendo
como calor toda la energa absorbida al ser transferido a un compuesto aceptor de
electrones apropiado. En el proceso, el compuesto que recibe el electrn se reduce
y la energa que entra a la molcula de clorofila queda as atrapada y se convierte
en potencial qumico en un enlace reducido. El enlace inicial as formado puede
ser muy inestable, pero se estabiliza por una serie de transformaciones qumicas,
de modo que la energa es almacenada y puede ser liberada ms tarde en las reac-
ciones de la respiracin, como se ilustra en la Figura 7-1B. As que la vida puede
ser vista como una corriente elctrica, la analoga se ilustra en la Figura 7-1C. El
aparato fotosinttico, los agentes de transferencia de electrones y la qumica del
Figura 7-1. Proceso de la fotosntesis y una analoga elhtrica (hv es el smbolo para
un quanto de luz o fotn).
A. La luz golpea una piedra y se convierte en calor.
B. La luz golpea una rnol6cula de clorofila, su energa se convierte en potencial
C. Analoga elbctrica de la fotosntesis.
qumico y se usa mis tarde.
converribn de energfa Estabilizacin.
Trampa de luz y
e-
e- t
I
I
I
I
I
I
alrnacdn de energla
Calor
hv
trabajo,
ATP, etc.
hu
""_"" ""
Ni vel basal de energla
Cl orofi l a
A B
e-
Baterl a -
Trampa de l uz,
Estabiliracibn.
conversin de energfa
almacn de energla
C
FOTOSINTESIS 159
carbono son los alambres, bateras y motores elctricos del sistema viviente. Exis-
ten, como los alambres y componentes de un circu:ito elctrico, como un medio
para transformar y conducir energa. Sin embargo debe recordarse que los organis-
mos no estn hechos slo de energa. La razn de almacenar energa es que se use
para llevar a cabo reacciones de sntesis de las sustancias que constituyen a las
plantas y animales.
ANTECEDENTES HISTRICOS
Las investigaciones en fotosntesis presentan un desarrollo histrico ordenado que
lleva a la comprensin actual del proceso. Aristteles pensaba que la luz era nece-
saria para el crecimiento de las plantas, pero fue Stephen Hales, en 1727, el pri-
mero que reconoci con claridad que la luz es necesaria para el proceso por el
cual las plantas adquieren nutrientes del aire (previamente se haba pensado que
las plantas obtienen sus sustancias solamente del agua y del suelo). Durante el
periodo de 1790 a 1815 los experimentos de Priestley, Ingen-Housz, Senebier y
De Saussure, establecieron que las partes verdes de las plantas absorben COZ de
la atmsfera y producen Oz cuando se iluminan, revertindose el proceso en la
oscuridad. Pronto se reconoci que tambin absorben el agua y convierten la luz
en materia orgnica. A mediados del siglo diecinueve, el filsofo alemn Mayer
haba reconocido la verdadera importancia de la luz en la fotosntesis, y su indu-
dable importancia para el mundo vivo como proveedora de la energa para todos
los procesos biolgicos. En el ao 1900 la fotosntesis se haba estudiado extensa-
mente y se conoca su base cuantitativa segn la ecuacin
6 COZ + 6 Hz0
energa lumnica
C6HlZ o6
+ 6 0,
Muchas investigaciones de aquella poca se dirigieron a entender la reaccin
en trminos de una reaccin, mediada por la clo~rofila (quiz junto con otros
pigmentos) del COZ con Hz O que condujera a for:mar carbono reducido que se
polimerizara en los azcares, que como se sabe se forman en la fotosntesis. Desa-
fortunadamente ese concepto era errneo. Se estaban haciendo preguntas no vale-
deras y por tanto muchos de los experimentos no produjeron ms que resultados
intrigantes que no podan interpretarse.
El basamento para una concepcin correcta 110 expuso el fisilogo ingls F.
Blackman en 1905, en su trabajo sobre las interrelaciones de los efectos de la luz y
la temperatura en la fotosntesis. Encontr que a altas intensidades lumnicas la
tasa de la fotosntesis vara con la temperatura (siendo Ql o = 2 3) pero a bajas
intensidades de luz no es afectada por aqulla ( Ql 0 ==l), indicando que la tasa del
proceso integral est limitada por una reaccin que requiere luz (probablemente
no enzimtica) y no es termosensible. Por otra parte, cuando est saturada de luz,
la tasa del proceso se limita por una reaccin termosensible (por lo tanto, proba-
blemente enzimtica).
Experimentos posteriores indicaron que la porcin de la fotosintesis que es
sensible a la temperatura tambin puede limitarse reduciendo la concentracin de
COZ, en tanto que la porcin insensible a la temperatura no requiere COZ. Se
concluye que la fotosntesis consiste por lo menos de dos secuencias de reaccio-
nes, una no quimica que requiere de la luz por 10 que se ha llamado reaccin
160 METABOLISMO VEGETAL
lumnica y la otra qumica, enzimtica, que requiere COZ y no requiere luz, lla-
mada reaccin oscura o reaccin de Blackman.
Los estudios con inhibidores o txicos del cientfico alemn O. Warburg y
muchos otros, establecieron que estas dos reacciones son muy independientes. Los
experimentos de muchos cientficos particularmente Warburg y posteriormente
los americanos R. Emerson y W. Arnold mostraron que la eficiencia de la fotosn-
tesis (la cantidad de fotosntesis por unidad de luz) poda aumentarse mucho
interrumpiendo la luz con periodos cortos de oscuridad. Esto mostr que el proce-
so lumnico es muy rpido en tanto que el oscuro es ms lento. Con un breve
fogonazo la reaccin lumnica forma su producto final en exceso, y puede usarse
durante los intervalos oscuros siguientes para la fijacin del COZ por las reaccio-
nes oscuras. Como estos intervalos no se podan alargar ms que unos pocos
segundos sin que se perdiera la habilidad de fijar COZ, se concluy que los produc-
tos de la reaccin lumnica son extremadamente lbiles y se descomponen rpida-
mente si no seusan de inmediato en la reaccin oscura.
En 1924 el microbilogo americano C.B. van Niel, propuso un mecanismo
explicativo de la naturaleza dual de la reaccin fotosintktica, basado en sus obser-
vaciones sobre fotosntesis bacteriana. Demostr que en ciertas bacterias el proce-
so poda representarse por
COZ + 2 H,A -+ [CH20] + Hz0 + A2
donde H,A representa una sustancia reducida (el HzO en las plantas) que dona
electrones y iones H + para la reduccin del C02 dando carbohidrato y H20. La
frmula CH20 representa un solo tomo de carbono en forma de carbohidrato, no
un compuesto especfico. La reaccin puede ser dividida en dos partes
2 HzA -+ A2 + 4 [HI
luz
(1)
4 [HI + COZ -+ [CH20] + Hz0 (2)
Van Niel sugiri que en lugar de reaccionar con el COZ como se postulaba
anteriormente, el agua era un substrato del que se podan derivar iones H+ y elec-
trones para reducir al COZ como se muestra en estas dos ecuaciones;
2 H2O - O2 + 4 [HI
luz
No se conoca la naturaleza del reductante y era claro que la segunda reac-
cin era compleja y probablemente involucraba varios pasos. Pero las implica-
ciones eran extremadamente importantes: la reaccin lumnica es el rompimiento
fotoinducido del agua, o fotlisis, para producir O2 y poder reductor, y la reac-
cin oscura es la utilizacin de este poder para reducir al COZ dando carbohidra-
tos y agua.
La validez de esta concepcin se estableci recin en 1941, cuando los cien-
tficos americanos S. Ruben y M.D. Kamen y sus colaboradores pudieron usar
FOTOSfNTESIS 161
oxgeno enriquecido isotpicamente, 02, para establecer que todo el O2 pro-
ducido en la fotosntesis se deriva del agua y nada de 61viene del COZ. Las tres
reacciones posibles se muestran a continuacin:
C16 O2 + H2 O -, [CH2 l 6 O] + 16* O2 (1)
Se encontr que el O2 producido en la fotosntesis con HZ O tena esen-
cialmente el mismo contenido de O que el agua usada, indicando que el oxgeno
se deriva del rompimiento del agua como en la reaccin (3) y no de una reaccin
del agua con el COZ.
Esta hiptesis se relacion con el sistema biolgico en 1937, por el trabajo
del qumico ingls R. Hill quien fue el primero en lograr tener una reaccin par-
cial de la fotosntesis en el cloroplasto in vitro. Sus preparaciones eran capaces de
producir O2 y simultneamente reducir a los aceptores de electrones adicionados
al iluminarse, un proceso que se ha llamado la reaccin de Hill. Aunque Hill fue
incapaz de acoplar esta reaccin con la reduccin del COZ, claramente representa
el primer paso de la fotosntesis o sea la reacin luminica.
Mucho despus, el grupo de M. Calvin en Berkeley, California, pudo al fin
demostrar, usando l4 COZ, que las reacciones oscuras de la fotosntesis pueden
ocurrir verdaderamente en la oscuridad. Se demostr que una suspensin de algas
era capaz de fijar al COZ durante un breve lapso en la oscuridad, despus de haber
sido iluminada, aunque la duracin total del poder reductor en la oscuridad no era
grande. En el periodo de 1955 a 1960 el fisilogo americano D. I . Arnon y sus co-
laboradores encontraron que hay dos productos de la reaccin a la luz, ATP y
un agente reductor que despus se demostr que era el NADPH, y que estos dos
compuestos de alta energa se consumen en la reaccin oscura causando la reduc-
cin del COZ .;Amon pudo demostrar que los componentes de la reaccin a la luz,
que llevan a la reduccin del NADP y la producci6n de ATP (por fotofosforila-
cin), estn estrechamente ligados en el cloroplasto, pero que las enzimas de la
reaccin oscura son solubles y se escurren durante el aislamiento de los cloroplas-
tos. Cuando estas enzimas se readicionan todo el proceso se lleva a cabo, aunque
las tasas de reaccin sean muy bajas. Durante la dcada pasada el grupo de Calvin,
trabajando con l 4 COZ, elucid las reacciones del ciclo de reduccin del carbono
(ciclo de Calvin), en el cual el COZ es fijado y reducido a carbohidrato, usando
NADPH y ATP generados en la reaccin lumnica.
El paso ms importante para dilucidar la natraleza de la reaccin lumni-
ca fue dado por R. Hill y F. Bendall en 1960. Sugirieron que este proceso podra
considerarse como un sistema de transporte d electrones en dos pasos, corno se
esquematiza en la Figura 7-2. En el primer paso los electrones del HZ 0 son ele-
vados de su nivel estable a un nivel intermedio (causando la produccin de O2 )
y en el segundo paso se elevan al nivel reductor del HZ, con la formacin de
NADP. La transferencia de electrones del nivel del primer paso al nivel inferior
del segundo, un descenso en su potencial, podra tener lugar por la va de un
sistema de transporte de electrones convencional que incluyera dos citocromos
162 METABOLISMO VEGETAL
Figura 7-2. Esquema del sistema de transporte de electrones en dos pasos de la fotosntesis.
Valores o v
aDroxirnados
0.4 -
0 -
+0.4 -
NADPH +Hf
clorofila
LUZ,
Podar
reductor
Luz,
de electrones
Electrones
t , H i
+0.8 -
Agua
l o 2
conocidos localizados en el cloroplasto, el citocromo b, (Eo =0.0 v) y el ci-
tocromo f (Eo = +0.37 v). La transferencia de electrones a travs de estos
componentes puede generar ATP de la manera usual (ms que considerando la
fosforilacin oxidativa en la respiracin). Los potenciales aproximados de los
electrones en los diferentes estados del sistema se muestran en la Figura 7-2. .
Se puede resumir lo expuesto hasta este punto, del modo siguiente: la
energa de la luz, absorbida por la clorofila, se usa para sacar electrones del agua
(causando la liberacin de oxgeno) y para elevarlos por un proceso de transporte
en dos pasos al nivel reductor requerido para reducir el dixido de carbono. En
el proceso el Pi se esterifica al ADP haciendo ATP que se usa, junto con el poder
reductor generado, para llevar a cabo un ciclo de reacciones en las que el dixido
de carbono es fijado hasta carbohidrato. Se examinarn ahora con ms cuidado
los componentes del sistema, para desarrollar en detalle el modelo hoy aceptado.
Debe advertirse que los trminos reaccin lumnica y oscura no son
realmente muy satisfactorios. La nica reaccin lumnica verdadera es la absor-
cin de fotones. Todas las reacciones de transporte de electrones que siguen, y
que se incluan en el concepto primitivo de reaccin lumnica, son realmente
oscuras ya que pueden ser energizadas qumicamente y hacerlas ocurrir en la oscu-
ridad. La reaccin oscura es en realidad un gran nmero de ellas que no requieren
luz. Algunas se activan por la luz; la mayora, o ninguna, ocurre en las condiciones
normales de oscuridad. Por estas razones deberamos abandonar los trminos de
reaccin lumnica y oscura y llamarlas reacciones del transporte de electrones
y reacciones del carbono de la fotosntesis.
REACCIONES DEL TRANSPORTE DE ELECTRONES
LUZ. Ya que las reacciones primarias de la fotosntesis exigen la absorci6n de luz
por los pigmentos, es necesario examinar algunas de sus propiedades bsicas. La
luz es energa electromagntica propagada en corpsculos discretos llamados
quanta o fotones. Como la energtica de las reacciones qumicas se describe por lo
general en trminos de kilocaloras por mol de los compuestos (1 mol =6.02 X
FOTOSfNTESIS
163
Figura 7-3. Energa qudntica de l a luz a diferentes lon-
gitudes de onda.
Longitud de
onda de l a
luz, mp
350
450
550
650
750
Color de Energa quntica
kcal/mol E v
l a luz
Ultravioleta 80 3.5
Azul
Amarillo visible 2.6
Rojo
Infrarrojo 40 1.7
I 6o
loz3 molculas), la energa de la luz generalmente se describe en trminos de kilo-
caloras por mol quantum o por einstein (1 mol quantum o 1 einstein =6.02 X
1 O2 quanta).
Su color se determina por la longitud de onda (X) de la radiacin lumnica.
A cualquier longitud de onda dada, todos los quanta tienen la misma energa. La
energa (E) de un quantum es inversamente proporcional a la longitud de onda.
As, la energa de la luz azul (X = 420 mp) es del orden de 70 kcal/ einstein y la de
la roja (X = 690 mp) cerca de 40 kcal/ einstein. El smbolo comnmente usado
para el quantum, hv, se deriva de esta relacin. En cualquier onda de propagacin
la frecuencia (v) es inversamente proporcional a la longitud de onda. Dado que
E (Y 1/A, por tanto E a! v. La constante de Planck (h) convierte esto en una ecua-
cin: E =hv. As, hv, usado para designar un quantum, se refiere a su contenido
energtico.
La relacin entre la energa de la luz, tanto como caloras por mol quanta
(por einstein) y como valores E', , y la energa requerida para efectuar ciertas
reacciones se muestra en la Figura 7-3. Puede verse que la energa de un quantum
rojo es justamente la precisa para elevar un electrn de OH- al nivel reductor del
Hz; un quantum de ultravioleta (UV) contiene casi el doble de esta cantidad de
energa. A s que en un quantum de luz hay energa suficiente (apenas la suficiente
en un quantum rojo) para escindir el agua. Esto no quiere decir que tenga lugar
dicha reaccin, sino slo que es termodinmicament,e posible. De hecho la conver-
sin de energa de una forma a otra invariablemente se traduce en la prdida de
parte de sta al ambiente durante el proceso de conversin, ninguna mquina
puede ser 100% eficiente.
La proporcin de luz utilizable en la fotosntesis ha sido un tema contro-
vertido desde hace mucho tiempo y an lo es. En el periodo de 1930 a 1950 se
puso especial atencin al requerimiento cuntico de la fotosntesis, una medida
de la eficiencia del proceso. Al principio se pens que dado que 1 quantum lleva
a cabo solamente una reaccin molecular, el nmero de ellos absorbidos por mol-
cula de O2 producida indicara el nmero de pasos en la reacci h.
Por complejos experimentos, que requieren condiciones controladas muy
cuidadosamente, Warburg encontr un requerimiento cuntic0 de 4 quanta por
molcula de oxgeno producida. Esto implica 1 quantum por [HI derivado del
agua, para la reduccin del COZ. Se ve en la Figura 7-3 que la energa requerida
para derivar del agua un equivalente de reduccin es de cerca de 30 kcal/ mol,
y la energa utilizable que Warburg us en sus experimentos es slo de unos
40 kcal/ einstein. Esta es una eficiencia del 75%, l o que es extremadamente alto
para cualquier mquina capaz de interconvertir energa.
164 METABOLISMO VEGETAL
Los experimentos de Warburg no pudieron repetirse en otros laboratorios
y hoy se acepta que se requieren por lo menos 8-12 quanta para reducir una
molcula de COZ y producir una molcula de 02. El esquema representado en la
Figura 7-2 satisface el requerimiento de un mnimo de 8 quanta por cada Oz
producido o COP reducido, porque exige 4 ( e- +H') para reducir un COZ al
nivel de carbohidrato y cada electrn transferido requiere 2 quanta. Esta formu-
lacin es la nica que funciona y adems, como se ver ms adelante, est acorde
con la evidencia.
PIGMENTOS. Hasta ahora el nico pigmento mencionado que absorbe luz ha sido
la clorofila. Inicialmente se reconoci al pigmento verde de las plantas como la
sustancia responsable de la absorcin lumnica en la fotosntesis, capaz de absor-
ber la luz roja y la azul, no la verde. Pero hace mucho que se sabe que hay otros
pigmentos diferentes en las plantas, de diversos colores y que incluso la clorofila
no es una sustancia simple sino un grupo de pigmentos interrelacionados. Se
descubri que algunas sustancias coloridas de las plantas estn fuera de los cloro-
plastos, difundidas en el citoplasma o bien presentes en cuerpecillos especiales, a
veces como plastos y a menudo de forma irregular o muy angular, llamados cro-
matforos.
Los cloroplastos son el sitio de la fotosntesis; por lo tanto los pigmentos
fuera de los cloroplastos (notoriamente las antocianinas azules y rojas, las xanto-
filas amarillas y algunos carotenos rojo y naranja) no tienen que ver con la foto-
sntesis. Adems de la clorofila se encuentran en los cloroplastos varios pigmentos
incluyendo algunas xantofilas y carotenos, y se han realizado muchos experi-
mentos para determinar si toman parte en la fotosntesis. Algunos de estos pigmen-
tos se encuentran en grupos especiales de plantas, en tanto que otros tienen una'
distribucin casi universal. Una lista de los pigmentos fotosintticos ms importan-
tes con una informacin bsica sobre ellos se presenta en la Tabla 7-1. La estruc-
tura qumica de algunos de esos pigmentos se resume en las Figuras 7-4 y 7-5.
La clorofila a est presente en todas las plantas fotosintticas. La clorofila
b est presente en la mayora de las plantas verdes, en las algas verde-azul en su
lugar hay ficocianina, en las algas pardas fucoxantina y en las algas rojas ficoeri-
trina. Las bacterias fotosintticas tienen una clorofila que absorbe al rojo-lejano,
Tabla 7-1. Lista de los pigmentos fotosintkticos.
Pigmento D6nde se encuentra Luz absorbida
Clorofila a
b
C
d
Protoclorofila
Bacterioclorofila
Bacterioviridina
Ficocianina
Ficoeritrina
Carotenoides
(carotenos y xantofilas)
Todas las plantas verdes
Plantas verdes, ni algas rojas
o verde-azul ni diatomeas
Algas morenas. Diatomeas
Algas rojas
Plantas etioladas
Bacterias prpura
Bacterias verdes sulfurosas
Algas verde-azul, algas rojas
Algas rojas y verde-azul
La mayor a de plantas, bacterias
Roja y azul-violeta
Roja y azul-violeta
Roja y azul-violeta
Roja y azul-violeta
Rojo cercano y azul-violeta
Rojo cercano y azul-violeta
Rojo cercano y azul-violeta
Rojo naranja
Verde
Azul, verde-azul
FOTOSfNTESIS 165
Figura 7-4. F6rmula grhfica de la clorofila a. Son posibles varios taut6me-
ros (con diferente arreglo de los enlaces dobles). Los anillos numerales i a
IV son anillos pirr6licos; el V es la ciclopentanona.
CHZ
I I
~ La cl orof i l a t i ene
La prot ocl orof i l a t i ene
aqul C=C
I
CH,
I O
I
I
CzoH39
HC -- C
I N O
4C"O-CH3
c=o
O
f i t ol
Tabla 7-5. F6rmulas de un caroteno y un pigmento de ficobilina. Comperese el ncleo
de tetrapirrol ciclico de la clorofila con el ncleo de tetrapirrol linear de la ficobilina.
la bacterioclorofila. Hay varios pigmentos carotenoides, uno o ms de ellos est
presente en casi todo rgano fotosinttico.
En la Figura 7-4 se puede ver que la clorofila es un tetrapirrol y tiene un
gran parecido con la estructura del heme y de los citocromos. La clorofila difiere
de esas enzimas ferrosas en que contiene un torno de magnesio que no parece
166 METABOLISMO VEGETAL
participar directamente en las reacciones de transferencia de electrones como lo
hace el hierro del citocromo. La clorofila se caracteriza por un anillo de ciclo
pentanona (v) con grupos laterales caractersticos en varios puntos. La identidad
de dichos grupos da la identidad a las diversas clorofilas. El ms importante de
ellos es el ster de fitol adherido al anillo I V. ste provee a la molcula de una lar-
ga cadena (cola) lipoflica muy importante en la orientacin y anclaje de las
molculas de clorofila en lamelas o laminillas del cloroplasto.
La clorofila tiene el potencial para diversos mecanismos de reaccin en
la absorcin lumnica. Puede cambiar su contenido energtico por resonancia de la
estructura de sus enlaces coordinados (los enlaces alternos sencillos y dobles pue-
den resonar cambiando lugares una y otra vez), por reduccin de uno de sus
enlaces dobles, por reduccin de la quinona ( =O) en el anillo V, o por prdida de
un electrn en la estructura con dobles enlaces. Los experimentos con los istopos
del hidrgeno deuterio o tritio han indicado claramente que la clorofila no parti-
cipa en las reacciones de transferencia de H o en xido reducciones que involucren
H. Al parecer la clorofila participa en las reacciones de transferencia de energa
tanto por transporte de electrones (o sea oxidorreduccin por ganancia y prdida
de un electrn), como por resonancia (una transferencia directa de energayver
La trampa de luz, pgina 171).
La estructura qumica de los pigmentos accesorios ficobilina, ficocianina
y ficoeritrina es similar a la de la clorofila en tanto que son tetrapirroles; difieren,
sin embargo, por ser de estructura linear en lugar de cclica y no llevan un metal
(Figura 7-5). Los carotenos, incluso la fucoxantina estn muy relacionados con la
vitamina A y bsicamente son molculas de cadena!&poflica larga con un grupo
terminal ms activo en cada extremo. Los procesos de sntesis de estos compues-
tos se consideran brevemente en el Captulo 9. .Los pigmentos porfirnicos requie-
ren luz para su sntesis en la mayora de las plantas; de ah la apariencia descolorida
o amarillo plido de las hojas desarrolladas en la oscuridad, ahiladas o etioladas. El
ltimo paso en la sntesis de clorofila, la reduccin de la protoclorofila a clorofi-
la, se lleva a cabo a expensas de energa lumnica absorbida por la propia molcula
de protoclorofila. La sntesis de la clorofila tambin se describe en el Captulo 9.
La contribucin de los diversos pigmentos a la fotosntesis ha sido sujeto
de intensa experimentacin durante muchos aos. Con el desarrollo de los m-
todos modernos de espectroscopa ha sido posible comparar el espectro de absor-
cin de un organismo (o sea el espectro de la luz absorbida por el organismo
total, que depender de la presencia y concentracin de todos los pigmentos del
organismo), con el espectro de accin de la fotosntesis en el organismo. El espec-
tro de accin de la fotosntesis mide la efectividad para llevar a cabo la fotosntesis
de la luz de diversas longitudes de onda, Por un anlisis del espectro de absorcin
se puede determinar qu pigmentos estn presentes y su contribucin relativa a la
fotosntesis comparndolos con el espectro de accin.
En la Figura 7-6 se muestran algunas curvas para el alga marina Ulva (espe-
cialmente apropiada para este estudio porque crece en capas uniformemente
delgadas), junto con el espectro de absorcin de los pigmentos principales. Puede
verse que las curvas de accin y de absorcin son bastante parecidas en buena
parte del espectro, mostrando la contribucin de las clorofilas y las ficobilinas a
la fotosntesis; sin embargo hay una clara discrepancia en el rea del caroteno
mostrando que stos no son pigmentos fotosintticos eficientes, como s lo son
las clorofilas y ficobilinas en este organismo. Way evidencias de que los carotenos
FOTOSfNTESIS 167
pueden ser eficientes en algunas plantas pero no u~niversalmente:,Qtras evidencias
confirman su papel en la estabilizacin de la clorofila en los plastos y que impi-
den que la clorofila se destruya por autooxidacin y por la luz.
Los pigmentos involucrados en la fotosntesis son capaces de efectuar
ciertas reacciones aunque se hayan extrado del clmoplasto. Pueden absorber luz
y fluorescen, es decir, reemiten la energa lumnica absorbida como luz pero,
necesariamente, de longitud de onda ms larga (es decir de menor energa). Las
soluciones de clorofila fluorescen dando rojo oscuro. Si las reacciones de la foto-
sntesis se bloquean por sustancias txicas la flumorescencia ocurre in uiuo por-
que la energa absorbida no puede utilizarse;, El espectro de fluorescencia es
caracterstico del pigmento, as que es posible decir cul pigmento es el que fluo-
resce y, de aqu, cul ha sido activado. Adems, los aceptores de energa (o sea
substratos oxidados capaces de ser reducidos) pueden extinguir la fluorescencia
demostrando la capacidad del pigmento para transferir la energa a dichos acepto-
res en lugar de remitirla como luz. Se puede hacer que las soluciones de clorofila
catalicen reacciones al ser iluminadas, por ejemplo en la formacin de polmeros
a partir de un monmero, demostrando que la energa lumnica puede utilizarse
para formar radicales libres. La transferencia de energa molcula a molcula se
demuestra en una mezcla de clorofila a y clorofila b. El anlisis del espectro de
accin cuando la mezcla se ilumina con luz, que solamente puede ser absorbida
por la clorofila a, muestra que la clorofila b ha sido obligada a fluorescer, lo que
indica que La energa fue transferida de la clorofila. a que la absorbi, a las mol-
culas de la clorofila b.
Hasta aqu no se consider la eficiencia de las diferentes longitudes de on-
da de la luz en la ocurrencia de fotorreacciones. Parece que la luz azul de alta
energa absorbida por la clorofila no se utiliza con eficiencia. El requerimiento
bsico es de un nmero especfico de quanta, y la energa de los quanta (con tal
que puedan ser absorbidos por la clorofila) no es importante. Los quanta rojos
(40 kcal/ einstein) son tan efectivos como los azules (70 kcal/ einstein); la energa
extra de los quanta azules se desperdicia. Aparentemente, si un quantum tiene
la longitud de onda apropiada para ser absorbido, ser efectivo. Pero una impor-
tante excepcin a esto es la llamada cada del roja, - un decidido descenso en la
eficiencia encontrado en el extremo del rojo- lejano en el espectro de absor-
cin, generalmente sobre 685 nm, encontrado en muchos organismos.
Emerson encontr que la eficiencia de la luz roja de longitud de onda de
cerca de 700 nm poda aumentarse por la adicin de luz con longitud de onda
ms corta (650 nm). En otras palabras, la tasa de la fotosntesis en luz de dos
longitudes de onda juntas era mayor que la suma de las tasas, en cada una de
l a s longitudes de onda separadamente, Este es el llamado efecto Emerson, en ho-
nor a su descubridor, y ha tenido importancia en la conformacin de las ideas
sobre las que se ha desarrollado el concepto moderno del mecanismo fotosint-
tico. Evidentemente, la luz se absorbe separadamente por dos diferentes sistemas
de pigmentos, uno de ellos se longitud de onda ms larga que el otro, y el funcio-
namiento a satisfaccin de la fotosntesis requiere que ambos sistemas se activen.
Por medio de un cuidadoso adi si s espectral de dicho efecto, se ha encontrado
que el sistema de longitud de onda ms corta (llamado ahora fotosistema I I ), con-
tiene adems de algo de clorofila a, una buena cantidad de clorofila b y de pigmen-
tos accesorios como ficobilinas. El sistema de 1ongiI;ud de onda larga (fotosi&ema
I) tiene una mayor proporcin de clorofila a y merlos de 10s otros pigmentos. Es-
168 METABOLISMO VEGETAL
Figura 7-6. Comparaci6n de los espectros de acci6n y de absorci6n de
un organismo y del espectro de absorci6n de pigmentos fotosintdticos
importantes.
A. Espectro de acci6n y espectro de absorci6n del alga verde Ulva. Ntese
la discrepancia entre los espectros a 460 y 500 mp (De F.T. Haxo y L.
R. Blinks: J. Gen. Physiol. 43:404 (1950). Usado con permiso.)
B. Espectros de absorci6n de algunos pigmentos fotosint6ticos.
.
:o
c'
e
P
9
A
CI b
I!
Longi tud de onda, mp
B Longi t ud de onda, mp
tos dos sistemas de absorcin lumnica se correlacionan con las dos absorciones
de luz postuladas por Hill y Bendall (Figura 7-2). Ahora se considerar la explica-
cin actual y algunas de las evidencias en que se basa.
TRANSPORTE DE ELECTRONES. La actual explicacin de la fotosntesis como un
proceso de transporte de electrones se resume en la Figura 7-7. Cada uno de los
FOTOSfNTESIS 169
fotosistemas I y I1 son capaces de absorber quanta de luz. Cada uno contiene mo-
lculas de clorofila especializadas, capacitadas para perder electrones y recuperar-
los a partir de otra fuente diferente. Estos centros reactivos que se describirn en
una seccin posterior (La trampa de luz) contienen molculas especializadas de
clorofila a, que absorben a una longitud de onda ms larga que la usual. El centro
reactivo del fotosistema I1 absorbe luz de 680 nm y el pigmento se denomina
P680. El centro de reaccin correspondiente del fotosistema I es P700, y tiene una
absorcin mxima de, aproximadamente, 700 nm.
Los electrones son expulsados de los radicales hidrxilo y transferidos
va el o en el fotosistema I1 a un aceptor de electrones Q an no conocido,
que tiene un potencial (Eo) de O a 0.1 v. De hecho Q puede representar
varios factores o un conjunto de quinonas o compuestos tipo quinona interactuan-
tes. Los electrones son pasados luego a la plastoquinona, que transfiere tanto los
iones hidrgeno como los electrones, del modo como lo hace la ubiquinona en
la cadena de transporte de electrones de la respiracin. La plastoquinona pasa los
electrones al citocromo bSs9 y al citocromo f que a su vez los pasa a la plastocia-
nina, una enzima con cobre que tiene una E0 de cerca 0.4 v. Por cada par de
electrones que desciende por esta cadena de transporte de electrones se genera
una molcula de ATP a partir de ADP y Pi, de manera muy parecida a la fosfori-
lacin oxidativa. El proceso de fosforilacin fotosinttica se describir en la
pgina 162.
El fotosistema I transfiere su energa al P7,10 que tiene una E0 de cerca de
0.4 v. Como resultado el P700 transfiere un electrn a un aceptor no identificado
llamado x que tiene un fuerte potencial negativo (Eo =-0.5 a -0.6 v). El
P700 recupera su electrn de la plastocianina reoxidndola en el proceso. El fuerte
reductor factor x reduce la ferredoxina =-0.45 v), una enzima con hierro
no heme de amplia distribucin en las plantas, que toma parte en las reacciones
de reduccin de las plantas sean fotosintticas o no (ver Captulo 8, Fijacin del
E,,, v H+
-0.4 -
0 -
t 0. 4 -
\r
-P Y NADPH +H+
I cyt b,
f
e-
Mn, CI-
t0.8 - H,O--OH-
-H,O +O,
Figura 7-7. Modelo de l a fotosntesis. La lnea punteada muestra el camino de los elec-
trones en la fosforilacih cclica.
170 METABOLISMO VEGETAL
nitrgeno). La ferredoxina reduce el NADP a NADPH por medio de la NADP
reductasa, una enzima flavoproteinica.
Es posible tambin que los electrones pasen de x o de la ferredoxina
a la plastocianina y de ah hacia atrs al PTo0, yendo por una cadena de trans-
porte de electrones que probablemente incluye un agente transportador de hidr-
geno, as como el conocido citocromo b6. A esta transferencia de electrones se
acopla una fosforilacin. Como en este sistema los electrones siguen una va c-
clica del P,oo y regresando a 61 a travs de la ferredoxina, el proceso, que es
capaz de generar ATP a expensas de la energa lumnica sin reducir al NADP
se llama fosforilacin cclica. La generacin de ATP durante la transferencia
de electrones del fotosistema I1 al fotosistema I se llama fosforilacin acclica.
Una tercera posibilidad es que los electrones puedan ser transferidos de regreso
de la ferrodoxina al oxgeno, reducindolo a HzO. Es posible que este proceso
pueda tambin involucrar a la cadena de transporte de electrones y hacer ATP. La
base experimental para esta fosforilacin pseudocclica, como se denomina, no
es tan firme como la de las fosforilaciones cclica y acclica.
EVIDENCIA EXPERIMENTAL. Una gran parte de la concepcin expuesta no se ha
comprobado y han surgido muchos tpicos de discusin. Posteriormente se con-
siderarn algunas posibles alternativas. Sin embargo, dicho proceso ha tenido
amplia aceptacin y se sustenta en varios tipos de evidencias. Aunque los espec-
tros de absorcin de los fotosistemas I y I1 se sobreponen, el fotosistema I tiene
su mximo mucho ms dentro del rojo (aproximadamente a 690 nm) que el foto-
sistema I1 que tiene su mximo hacia 650-670 nm (o an ms bajo en las algas
verde-azul). En consecuencia hasta cierto punto se puede energizar indepen-
dientemente al fotosistema I o al 11, usando un haz de luz monocromtica de la
longitud de onda apropiada. Esto se acopla con el anlisis del estado de los com-
ponentes de la cadena de transporte de electrones por espectroscopa diferencial,
para determinar si estn reducidos u oxidados. As, la iluminacin de los cloro-
plastos con longitudes de onda cortas tiende a reducir la plastoquinona y los
citocromos en tanto que las longitudes de onda largas tienden a oxidarlos.
Existen varios inhibidores especficos que bloquean la cadena en diferentes
puntos. El uso combinado de estos inhibidores de luz activadora (luz actnica), de
longitud de onda selecta, y de la espectroscopa diferencial ha clarificado mucho
el proceso. El inhibidor 3( 3,4-diclorofenol)-l,ldimetilurea (DCMU), un herbicida
selectivo, inhibe el fotosistema 11. Cuando se ilumina el fotosistema I en presencia
de DCMU, los citocromos se oxidan y no pueden ser reducidos por la luz que acti-
va principalmente al sistema, como sucede en ausencia del DCMU. Esto demuestra
que los citocromos normalmente se reducen por el fotosistema I1 y se oxidan por
el fotosistema I , y as se ligan del modo que se muestra en la Figura 7-7. Otro
mtodo posible de estudio es porque el fotosistema I1 es capaz de flourescer, y la
extincin de la fluorescencia por compuestos oxidados (es decir, aceptores de
electrones) se ha utilizado para estudiar al sistema.
Un tercer modo de enfocar el problema es por adicin de donadores arti-
ficiales de electrones para reactivar sistemas con un intoxicante, o por la adicin
de componentes con un potencial conocido que pueden aceptar o donar electrones
en puntos especficos de la cadena de transporte de electrones. Por ejemplo, la
hipottica separacin del sitio de fosforilacin cclica y del de fosforilacin accli-
ca se basa en gran parte en la observacin de que los donadores de electrones,
FOTOSfNTESIS 171
como fenazina metosulfato (PMS), 2,6-diclorofenolindo fenol (DPIP) o la propia
ferredoxina, pueden catalizar la fosforilacin con luz para el fotosistema I , en pre-
sencia de DCMU y en ausencia de oxgeno. Por otro lado, la fosforilacin acclica
requiere de luz para ambos sistemas, presencia de oxgenos, y es inhibida por
el DCMU.
Un cuarto modo de investigacin sumamente importante, ha sido desarro-
llado por el fisilogo americano R. P. Levine y sus asociados. Usaron mutantes del
alga Chlamydomonas carentes de uno u otro de los componentes de la cadena de
transporte de electrones. As por ejemplo, un mutante carente del citocromo f
puede reducir a la plastoquinona y al citocromo b con luz del fotosistema 11,
pero no puede reducir a la plastocianina ni al PTo0. La luz del fotosistema I oxida
a la plastocianina y al P,oo pero no a la plastoquinona ni al citocromo b. Un mu-
tante carente del citocromo f retiene la fosforilac:in cclica, pero un mutante
carente de plastocianina no la retiene; esto indica que la fosforilacin cclica
transfiere electrones del nivel superior del fotosistema I hacia atrs a la plasto-
cianina (Figura 7-7).
Una quinta tcnica de estudio del sistema de transporte de electrones se basa
en el descubrimiento de que cuando las membranas del cloroplasto se rompen con
cuidado y se fragmentan, pueden separarse por centrifugacin en partculas ms
o menos pesadas y ligeras. Las partculas pesadas contienen una proporcin
ms alta de clorofila b, pueden liberar oxgeno y se intoxican con DCMU. Las
partculas ligeras contienen una proporcin mayor de clorofila a, pueden redu-
cir al NADP y generar ATP, pero no liberan oxgeno. Se supone que las partculas
pesadas representan al fotosistema I1 y las ligeras al fotosistema I. Los datos de
este tipo de experimentos no son por completo cl.aros y los resultados parecen
depender considerablemente de la tcnica exacta con la que se rompen los cloro-
plastos. Esto puede efectuarse forzando una suspensin de cloroplastos a travs
de un orificio diminuto ejerciendo una gran presin (la clula francesa de presin)
o por ondas de sonido; pueden usarse varios productos humectantes o tensioacti-
vos que ayudan a solubilizar las materias lpidas parma coadyuvar en el rompimien-
to. Los fragmentos de cloroplasto no pueden llevar a cabo todas las reacciones
fotosintticas. A menudo requieren la adicin de colfactores (a causa de la rotura
o para reemplazar los cofactores lavados durante la preparacin) y por lo general
son incapaces de hacer ATP. Sin embargo, se ha progresado mucho en la identi-
ficacin de las unidades funcionales con las estructuras visibles al microscopio
electrnico (vase Relaciones estructurales, pgina 173).
Aunque se ha reunido una gran cantidad de evidencias experimentales sobre
el funcionamiento del sistema de transporte de electrones en la fotosntesis, mu-
chas de ellas son difciles de interpretar o conflictivas y es posible que an no ha-
yamos llegado a la definicin final del sistema. El esquema presentado en la Figura
7-7 parece ser una hiptesis de trabajo til.
LA TRAMPA DE LUZ. Para entender la naturaleza de la reaccin fsica que atrapa
la energa lumnica se requiere considerar la estructura del aparato fotosinttico.
Se ha empleado un gran esfuerzo en la bsqueda de una unidad fotosinttica, es
decir, una unidad bioqumica o biofsica capaz de completar las reacciones de la
fotosntesis. Se han hecho varios ensayos tratando de identificar alguno de los
componentes estructurales del cloroplasto como dicha unidad completa en s
misma.
Pero actualmente se ha comprendido que stme era un propsito irrealiza-
172 METABOLISMO VEGETAL
ble porque la fotosntesis completa requiere la coordinacin de una serie de
procesos que se distribuyen por toda la estructura organizada de la membrana
del cloroplasto. Unas partculas pequeas que podan verse en las micrografas
electrnicas se denominaron cuantosomas, reflejando la hiptesis de que seran
las unidades fotosinGticas. Pero ahora se sabe que son parte del sistema de snte-
sis del ATP y que el proceso completo del transporte de electrones en la foto-
sntesis requiere la coordinacin de algunas reas de la laminilla o lamela sub-
yacente.
Desde el comienzo se reconoci que si se rompen los cloroplastos en frag-
mentos pequeos, los pedazos mnimos capaces de efectuar la reaccin de Hill
contienen al menos varios cientos de molculas de clorofila, y ahora parece ser
que la reaccin lumnica completa no ocurre en fragmentos que tengan menos
de mil molculas de clorofila. Ms an, los estudios con el inhibidor DCMU su-
gieren que se requiere una molcula de DCMU por 2,000 de clorofila para una
completa inhibicin. La inferencia es que con cada centro de reaccin (el sitio
donde se utiliza la energa lumnica para transportar electrones), se asocia un gran
nmero de molculas de clorofila. Por anlisis cuidadosos se ha demostrado que el
P700, el citocromo f y el citocromo b estn presentes en relacin de una molcula
de cada uno, por varios cientos de molculas de clorofila a, lo que da base a la idea
antedicha. Ya que el P700 es el pigmento transportador de electrones, parece que
las otras molculas de clorofila sirven como agentes que colectan la luz y la
transfieren al P,,,. Sera muy poco econmico tener un sistema de transferencia
de electrones completo asociado con cada molcula de clorofila, porque sta que-
dara tan oscurecida por la masa de todos los asociados del sistema que sera in-
capaz de funcionar absorbiendo la luz.
La trampa de luz del fotosistema I parece que consiste en un gran conjunto
de molculas de clorofila arregladas de modo que cada una pueda absorber luz y
pasar la energa de excitacin resultante de una molcula a otra hasta el centro de
reaccin (ver Figura 7-8). Los pigmentos accesorios tambin deben estar tomando
parte. La energa es pasada por resonancia entre las molculas adyacentes, no por
una transferencia de electrones real. En alguna parte del conjunto hay un grupo
f-- del s i s t ema I I
c l o r o f i l a
u-
Figura 7-8. Posible estructura y funcin de la trampa de luz del fotosistema I . "+indica
transporte de electrones; - - + indica transferencia de la energa de excitacin.
FOTOSINTESIS 173
de molculas de clorofila que, a causa de su orientacin, absorben luz de longi-
tud de onda ms larga y permiten que se pierda como calor una pequea cantidad
de energa de excitacin. Esto sirve para atrapar la energa de excitacin que ya
no puede escapar a los niveles ms altos de energa de las molculas de alrededor.
En el centro de este complejo hay una molcula de P700 (probablemente
una molcula de clorofila en asociacin especial con su componente de protena)
que se asocia con el citocromo f y con la plastolcianina, as como el aceptor de
electrones x. La excitacin pasa al P,oo que lanza un electrn a x, reducin-
dolo y recuperando su electrn de la plastocianina, oxidndola.
La trampa de luz del fotosistema I1 es esencialmente similar, excepto que
contiene un nmero de molculas de clorofila b considerablemente mayor, as
como una mayor proporcin de pigmentos accesorios. El centro de reaccin del
fotosistema 11, P680, tiene un mximo de absorcin ligeramente ms corto que
el del fotosistema I. El fotosistema I1 absorbe electrones del agua y los pasa a Q
y a la plastoquinona.
La cintica de la fotosntesis se ha estudiado tambin midiendo la resonan-
cia de spin del electrn ( ESR) , una tcnica que detecta los cambios en el paramag-
netismo de los intermediarios fotoqumicos cuando se forman electrones no
pareados durante los eventos fotoqumicos. Esta tcnica se ha usado tratando de
identificar donadores y aceptores primarios de electrones en ambos fotosistemas.
Hay ciertas indicaciones de que un complejo de ubiquinona y un compuesto con
hierro, fuertemente ligados, sirven como el aceptor de electrones primario en la
fotosntesis bacteriana. La identidad de los aceptores primarios de los fotosiste-
mas I y I1 en las plantas no est clara an. Experimentos recientes sugieren que el
donador de electrones en el fotosistema 11, el mecanismo que transfiere electrones
del agua al P680, pueda involucrar un complejo de quinonas o derivados quinni-
cos junto con manganeso. Pero se necesita an mucha ms experimentacin.
LIBERACIdN DEL OXfGENO. El sistema de la fotosntesis del que se sabe menos en
el presente, es el mecanismo que produce oxgeno. Deben ocurrir cuatro reaccio-
nes de transporte de electrones, incluyendo cuatro molculas de agua, para generar
una molcula de oxgeno. Cmo se lleva esto a cabo no est claro, en vista de que
los electrones se transportan separadamente. Se ha sugerido que una enzima rom-
pedora de agua pueda contener una asociacin de cuatro molculas transporta-
doras de electrones (quiz clorofilas) orientadas de modo que la remocin de
cuatro electrones del agua pueda dar la reaccin total.
2 4 H+
4 H,O
4 OH-+ 4 e- + 2 H20 + O2
Parece que se requieren iones de manganeso y de cloro para la evolucin
del oxgeno, y la oxidorreduccin reversible del manganeso podra estar relacio-
nada con la liberacin de oxgeno. Para la produccin de oxgeno tambin se
requiere COZ o bicarbonato (aparte de su papel como substrato de la carboxila-
cin fotosinttica). Los intermediarios y cofactores en esta reaccin an se des-
conocen.
RELACIONES ESTRUCTURALES. La estructura integral del sistema laminar del
cloroplasto (ver pgina 59) est bien definida ahora. La microscopa electrnica
174 METABOLISMO VEGETAL
de grabado por congelacin ha provisto nuevos detalles sobre las membranas ti-
lacoides. En este proceso las preparaciones son congeladas y luego astilladas con
una cuchilla de microtomo. El tejido tiende a rajarse o hendirse a lo largo de
lneas naturales de separacin generalmente a lo largo de la superficie de las
membranas. El sombre0 de la preparacin con metal provee entonces un retrato
en relieve de la superficie interna o externa de la membrana. Una micrografia
electrnica as preparada se muestra en la Figura 7-9A junto con un diagrama de
interpretacin (Figura 7-9B). Se ven muchas partculas de diferentes tamaos en
las diversas superficies de la membrana. Algunas de ellas parecen estar relacionadas
con agregados de enzimas o de transportadores de electrones asociados con los fo-
tosistemas I y 11, o con el factor acoplador de la ATPasa (ver el prrafo siguiente).
La Figura 7-9C muestra un modelo hipottico basado en evidencia de microscopia
electrnica y en los resultados de experimentos de subfraccionamiento, que mues-
tra la localizacin de las partculas o de los agregados capaces de efectuar solamen-
te la fosforilacin cclica, y de los agregados del fotosistema I y del 11, capaces del
transporte de electrones acclico.
Figura 7-9. Estructura del cloroplasto.
A. Micrografa electrnica de las fases y superficies de las laminillas (lamelas) de
los grana sujeta a fractura bajo congelacin X 100,000.
B. Interpretacin diagramdtica de A. Los nmeros se refieren a: 1 ) superficie
exterior del tilacoide; 2) fractura plana inmediatamente por debajo de la
superficie exterior; 3) fractura plana por debajo de la superficie interior del
tilacoide, y 4) superficie interior del tilacoide. La magnificacin muestra un
posible arreglo de las molbculas de clorofila en las partculas (visibles en A)
embebidas en la membrana del tilacoide.
c. Representacin diagramdtica de la estructura de los grana Y de la distribucin
de los fotosistemas I y I I (De Park, R.B. y P.V. Sane: Ann. Rev. Plant Physiol.
22:395-430 (1971), y Anderson, J .M.: Nature. 253:536-537. Usados con
permiso. Fotografa cedida gentilmente por el Dr. Park.)
FOTOSfNTESIS 175
f
Mol6cula de clorofila
B
y///& Fotosistema I - tilacoide intergrana
176 METABOLISMO VEGETAL
SNTESIS DEL ATP. La hiptesis quimioosmtica de Mitchell est acorde con la
evidencia que se tiene sobre la sntesis de ATP. Esencialmente, la formacin de
ATP por transporte de electrones cclico o acclico es similar a la sntesis del ATP
en la mitocondria que resulta del transporte oxidativo de electrones (ver pgina
106). La transferencia de electrones y iones hidrgeno (protones) a travs de la
membrana tilacoide provee una separacin de las cargas, stas son conjuntadas de
nuevo por la ATPasa y un factor acoplador (CF) que es identificable como una
partcula que aparece en la superficie externa de la membrana (ver Figura 7-9). La
Figura 7-10 muestra un modelo del sistema, dibujado segn el trabajo del Dr. A.
T. J agendorf (Universidad de Cornell) y del Dr. N.E. Good (Universidad del Estado
de Michigan). La exigencia crtica de este modelo, adems de la organizacin espa-
cial de los citocromos, es la movilidad de la plastoquinona, que verdaderamente
transporta electrones y protones a travs de la membrana del exterior al interior.
Los fotosistemas I y I1 activan la separacin de las cargas transportando los elec-
trones al exterior. El factor acoplador opera de la misma manera que el F, y la
F1 -ATPasa de la mitocondria (ver Figura 5-8).
La evidencia en que se fundamenta esta concepcin incluye el descubri-
miento original de J agendorf, de que elevando el pH externo de cloroplasto in
vitro se induce la fosforilacin en la oscuridad, y la observacin de que existen
gradientes de pH a travs de los tilacoides en la luz requerida. Se ha encontrado
que la fotooxidacin de los donadores de hidrgeno (agua, catecol) induce la
fosforilacin, en tanto que la oxidacin de los donadores de electrones, como
el ferrocianuro, no lo hace. Por ltimo, hay agentes desacopladores que permi-
ten que pasen protones a travs de la membrana, por una va diferente a la del
factor acoplador, aunque no afectan el transporte de electrones, e impiden la
fosforilacin por el transporte de electrones simultneo.
Este modelo sugiere que pueden haber dos sitios de fosforilacin -uno
para cada fotosistema- ya que cada fotosistema causa la liberacin de un par de
protones por cada par de electrones transferido. Los experimentos recientes con
el inhibidor dibromo-timo-quinona han permitido la separacin de tilacoides in-
tactos con las actividades de los fotosistemas I y 11, y ha sido posible demostrar
TI LACOI DE
2H'
I NTERI OR H,O
2H' NADP
t i l acoi de
\
Figura 7-10. Modelo de la interpretacin quimioosmtica de la fosforilacin fotosint6tica en
los cloroplastos, basada en ideas del Dr. N.E. Good y del Dr. A.T. Jagendorf. Este diagrama
debe compararse con las Figuras 5-8 y 7-7.
FOTOSfNTESIS 177
que cada fotosistema es capaz de fosforilacin. En cloroplastos preparados cuida-
dosamente, la produccin de ATP se aproxima a los valores tericos predichos
para este modelo. Esto trae a discusin la necesidad de fosforilacin cclica. Sin
embargo, es improbable que la fosforilacin ocurra siempre con una eficiencia del
100% y es probable que tambin el ATP fotosinttico sea utilizable por el cito-
plasma (ver Captulo 15). De ser as, probablemente, la fosforilacin cclica tiene
importancia, ya que las reacciones del carbono en la fotosntesis requieren por lo
menos 1.5 ATP por cada reductor equivalente (NADPH) utilizado. Este requeri-
miento es suficiente solo para producir monosacridos y se requiere ATP extra para
la formacin de sacarosa, almidn y otros compuestos hechos por el cloroplasto.
Una interesante confirmacin experimental de la localizacin y participa-
cin del factor acoplador se tiene por tcnica inmunolgica. Se ha podido aislar
el factor acoplador e inyectarlo a un conejo, causando la formacin de un anti-
cuerpo; cuando ste se adiciona a cloroplastos en suspensin el transporte de elec-
trones contina sin obstculos pero se impide la sintesis de ATP. Esto demuestra
dos cosas: que el factor acoplador inactivado por el anticuerpo toma parte, sin
duda, en la fosforilacin, y que debe localizarse en el exterior del tilacoide para
que el antgeno pueda llegar a l.
BALANCE DE ENERGfA. Hemos visto que el modelo generalmente aceptado re-
quiere cuatro quanta de luz roja (40 kcal/ einstein) para producir una molcula de
NADPH y uno o dos ATP. As que el ingreso de energa es 4 X 40 =160 kcal/
mol, y la recuperacin es de 51 kcal tiles por oxidacin de 1 mol NADPH
ms 7-15 kcal por los ATP, lo que suma 35 a 40% del ingreso de energa. Las pr-
didas de energa ocurren en la conversin de energa lumnica a potencial qumica
y en la estabilizacin de los pigmentos y de los intermediarios con alta energa
(excitados); es decir, al atrapar la energa o el electrn migrante para que no
recaiga al nivel de posicin de que parti. Considerando la complejidad de la
conversin ste es un nivel de energa notablemente alto.
REACCIONES DEL CARBONO: EL CICLO DE CALVIN
INTRODUCCI~N. Las reacciones lumnicas dan por resultado la produccin de
poder reductor, que reduce al NADP, y la produccin de ATP. En las reacciones
oscuras estos productos se utilizan para reducir el COZ. Hasta el descubrimiento
del carbono radioactivo slo se poda tratar de adivinar los intermediarios y las
transformaciones de la sntesis de azcares. Cuando Calvin y sus colaboradores
suministraron 14C02 a algas Chorella en suspensin, encontraron que el producto
inicial ms importante era el cido 3-fosfoglicrico (PGA), de tres carbonos. Este
producto fue aislado y degradado qumicamente y se encontr que la mayora del
l 4 C estaba en la posicin carboxilos.
P-O-CH2 -CHOH-14 COOH
Un examen posterior de los productos de la fotosntesis con 14C02 por
breve tiempo revel que la fructuosa-l,6difosfat~o (FDP) formada al principio
era radioactiva y al degradarla se encontr que contena la mayora de su radio-
actividad en los dos carbonos intermedios
178 METABOLISMO VEGETAL
P-O--CH, -CHOH-14 CHOH-14 CHOH-CO-CH, -O-P
Estas observaciones sugirieron: 1) que la sntesis de hexosa ocurre a la
inversa de las reacciones de la gliclisis, y 2) que se requiere un modelo cclico
para la regeneracin de un aceptor del COZ. Con el desarrollo de la cromatografa
en papel y la combinacin de este medio analtico y el uso del carbono radioactivo,
todo el complejo proceso de reduccin del carbono y regeneracin del aceptor de
CO, fue rpidamente esclarecido.
RADIOACTIVIDAD Y CROMATOGRAFfA. Estas herramientas han tenido tal impacto
en fisiologa vegetal que merecen ser examinadas brevemente. Los elementos
radioactivos son idnticos qumicamente a sus istopos estables y difieren sola-
mente en la masa de sus ncleos. Decaen proporcionalmente a su inestabilidad
desintegrndose y emitiendo radiaciones, por lo general y, o partculas p. Como
estas radiaciones son ionizantes, pueden detectarse con los detectores de ionizacin,
particularmente los contadores Geiger-Mueller o los contadores de cintilacin o
centelleo. El contador Geiger-Mueller detecta la produccin de ionizacin en una
cmara de iones especial, el tubo Geiger-Mueller, que tiene una ventana delgada
a travs de la cual penetran las radiaciones ionizantes. El contador de cintilacin 0
centelleo detecta y cuenta los flashes de luz emitidos por un cristal o un lquido
especial al absorber una radiacin. La tasa de decaimiento de un istopo se mide
por su vida-media, que es el tiempo requerido para que decaiga la mitad de la sus-
tancia cualquiera sea su cantidad (N.T.: este valor es diferente a la media vida que
es el promedio de tiempo de decaimiento; en ingls se dice igual). Para istopos
de vida corta (por ejemplo "P con media-vida =14 das) deben hacerse correccio-
nes diarias para tomar en cuenta este decaimiento. El 4C tiene una vida media de
unos 6,000 aos, as que no se necesitan hacer correcciones.
Dado que los tomos radioactivos son qumicamente iguales a sus con-
trapartes estables, sufren las mismas reacciones qumicas. Excepto por ciertos li-
geros efectos que pueden ocurrir porque el I 4C es algo ms pesado que el "C; los
tomos de carbono radioactivo se conducen precisamente de la misma manera que
los no radioactivos, as que entran en todas las secuencias de reacciones y marcan
a todos los compuestos que toman parte en el metabolismo normal del carbono.
Si se suministra 14C a una planta iluminada durante 5 segundos, los compuestos
sintetizados durante esos 5 segundos, y solamente esos compuestos, sern radio-
activcs. Ms an, si se adiciona un nuevo tomo de carbono radioactivo a un
compuesto no radioactivo preexistente, solamente dicho tomo ser radioac-
tivo. La presencia y posicin del carbono radioactivo en la molcula puede
determinarse degradando qumicamente el compuesto, carbono por carbono, y
probando la radioactividad de cada carbono independientemente. Usando esta
tcnica es posible detectar las transformaciones del carbono en el metabolismo.
A su vez stas deben correlacionarse con los tipos de reacciones involucradas y
la naturaleza de las enzimas presentes, para lograr una comprensin completa
del sistema metablico.
La cromatografa en papel es una tcnica de separacin de los componen-
tes de una mezcla compleja de sustancias qumicas, tal como los constituyentes
solubles de una planta. Generalmente los tejidos vegetales se extraen con un sol-
vente que mata todas las clulas y desnaturaliza las enzimas (comnmente se
usa etanol o metano1 caliente) y el extracto se concentra. Luego se aplican unas
FOTOSfNTESIS 179
pocas gotas del extracto en la esquina de una hoja de papel filtro, por lo general
de 20-50 cm por lado y una orilla se sumerge en un solvente orgnico apropiado.
El solvente se mueve a travs del papel por movimiento capilar. En el papel est
presente una cierta cantidad de agua firmemente adherida e inmvil. Las diversas
sustancias se mueven con el solvente orgnico ;mvil a diferentes velocidades,
dependiendo de su solubilidad relativa en la fase acuosa estacionaria, en la fase
orgnica mvil del solvente, y hasta cierto punto de su absorcin al papel. El
resultado es que los componentes de la mezcla se separan en una hilera de man-
chas definidas.
En las mezclas complejas la separacin de todos los componentes puede
quedar incompleta; entonces puede usarse un segundo sistema de solventes
aplicado en ngulo recto con el primero, para resolver las manchas que haban
quedado sin separarse. Los componentes pueden. hacerse visibles aspeeando el
Figura 7-11. Cromatograf a en papel.
A. Fotografa de una cuba cromatogrhfica en uso en el laboratorio del autor, y un bastidor
B. Cmo se corre el cromatograma en dos solventes y se desarrolla. Los solventes pueden tarn-
de cromatogramas en papel a punto de utilizarse.
bien correr hacia abajo en lugar de hacia arriba.
B
Aplicacin del ma-
terial que se va a
Cromatografia en Cmmsatografia en
el solvente 1 el !solvente 2
Aspersin del
separar al papel de
cromatograma para
cromatograma
(primera direccibn) (segun'da direccin)
cin de las manchas
revelar la localiza-
180 METABOLISMO VEGETAL
A
Figura 7-12. Cromatograma y radio-
autograf a.
A. Fotografa de un cromatograma
de extracto de hoja de trigo as-
perjado con el reactivo ninhidrina
para revelar los aminocidos.
B. Radioautografla de un cromato-
grama de hidrolzado de prote-
nas de hoja de trigo despues de
suministrar I4CO2 durante 1 hr a
la luz. Todos los productos que
recibieron carbono de los de la
fotosintesis son radioactivos y
pueden verse como manchas os-
curas en la pelcula de rayos X.
Los cromatogramas se corrieron
primero en una mezcla fenol-
agua ( l ) , luego en una mezcla
propanol-acetato de etilo-agua (2).
Los extractos se aplicaron en el
origen. C6digo: ala, alanina; 0
ala, 0-alanina; arg, arginina; asp,
cido asprtico; asN, asparagina;
GABA, cido y-aminobutrico;glu,
cido glutmico; glN, glutamina;
gly, glicina; leu, leucina; phe, feni-
lalanina; pro, prolina; ser, serina;
thr, treonina; tyr, tirosina; U, des-
conocido; val, valina.
FOTOSfNTESIS 181
cromatograma con un reactivo que produzca derivados coloridos (por ejemplo,
la ninhidrina reacciona con los aminocidos dando un color azul o prpura), y las
manchas radioactivas pueden localizarse por radioautografa (llamada tambin
autorradiografa). El cromatograma se coloca junto a una hoja de pelcula para
rayos X en un bastidor durante varias horas o das, dependiendo de la intensidad
de la radioactividad. Las manchas radioactivas causarn un oscurecimiento en la
pelcula en el lugar sobre el que queden, de modo que la pelcula registra, como
en una fotografa, la posicin y radioactividad de las manchas del cromatograma.
En las Figuras 7-11 y 7-12 se muestran ilustraciones de aparatos tpicos usados
en la cromatografa en papel as como un cromatograma y una autorradiografa
del extracto de una planta.
Por medio de estas tcnicas es posible identificar a los compuestos presen-
tes en una planta y, en experimentos con substratos marcados, determinar cules
provienen de dicho substrato y en qu proporcin. Las manchas individuales pue-
den recortarse y degradarse por tcnicas microqumicas para obtener ms informa-
cin sobre las transformaciones metablicas.
EL CICLO DE CALVIN. Las reacciones del ciclo reductivo del carbono en la foto-
sntesis y las enzimas que las catalizan se muestran en la Figura 7-13. Como se
esquematiza, las reacciones dan por resultado la sntesis de una molcula de triosa
por la fijacin de tres molculas de COZ. La reaccin puede resumirse
3 CO, + 9 ATP + 6 NADPH + GAP + 9 ADP + 8 Pi + 6 NADP
Para hacer hexosafosfato se requieren dos vueltas del ciclo. Una de las mo-
lculas de GAP as formadas pasa a DHAP y las dos triosafosfato se unen por
reaccin con la aldolasa. La fructosa difosfato resultante se convierte en fruc-
tosa-6-fosfato por la fosfatasa. El resumen para la produccin de una molcula
de hexosafosfato sera entonces
6 CO, + 18 ATP + 12 NADPH -+ F-6-P + 18 ADP + 17 Pi + 12 NADP
Vale la pena seguir la secuencia de reacciones a travs del ciclo en la Figura
7-13 para entender claramente las transformaciones sufridas por cada tomo de
carbono. Por conveniencia, las molculas de CO, adicionadas de nouo estn
marcadas en la Figura 7-13 con un asterisco, as que se puede ver en cada vuelta
del ciclo que sigue a la adicin de l4 CO, tanto los lugares marcados como el sitio
radioactivo. La peculiar manera en que queda marcada la RuBP* se debe a la mez-
cla de tres molculas de Ru-5-P, dos de las cuales se marcan de modo diferente a
la tercera.
El estudiante debe determinar la distribucin de los puntos marcados en los
compuestos clave despus de que se introduce un segundo tro de l 4 COZ y com-
parar sus resultados con los obtenidos en un experimento real, que se anotan en
*RuBP (ribulosa bifosfato) es la forma de nomenclatura bioquimica que ha reemplaza-
do al antiguo thrmino RuDP (ribulosa difosfato). Es una distincin correcta (pero parece tonta).
Un difosfato (como el ADP) tiene el segundo fosfato esterificado sobre el primero. Un bifosfato
tiene dos fosfatos en dos carbonos separados, La RuBP se denomina a veces RuPz . Asi debe-
rian llamarse otros bifosfatos (FDP, SDP). Como la antigua y mas familiar nomenclatura de estos
compuestos todavia se utiliza ampliamente en la literatura, se ha mantenido en este captulo.
182 METABOLISMO VEGETAL
Tabla 7-2. Distribucin de la radioactividad en los intermediarios
del ciclo de Calvin, segn un experimento en el que se suministr
I 4CO2 durante 5.4 seg a un cultivo de Scenedesmus obliquus.
Atomo de Radioactividad en tomos individuales (%)
carbono PGA Fructosa Sedoheptulosa Ribulosa
1 82 3 2 1 1
2 9 3 2 10
3 9 43 28 69
4
- 42 24 5
5 3 27 3
6 3 2 -
7 2
-
-
- - -
Fuent e: J.A. Bassham y M. Cal vi n: The Path of Carbon i n Photosynthesis.
Prent i ce-Hal l Inc., Nueva Jersey, 1957. Ut i l i zada con per mi so.
la Tabla 7-2. La distribucin de los puntos radioactivos no siempre es igual a la
prevista. Se han encontrado ciertas asimetras que se pueden explicar por rearre-
glos causados por reacciones reversibles con la transcetolasa y la aldolasa, las que
redistribuyen el l4 C en otros sitios. Debe notarse que aunque en el ciclo se produ-
ce una molcula de triosa por cada tres de COZ adicionadas, segn se describe en
la Figura 7-13, sera igualmente fcil arreglarlo para producir PGA, una pentosa,
una hexosa o compuestos C2, todos los cuales son productos finales de la foto-
sntesis.
Las enzimas y reacciones individuales son las siguientes: en la primera reac-
cin una molcula del azcar de cinco carbonos, ribulosa bifosfato (RuBP), se
carboxila. Se forma un intermediario de seis carbonos que se hidroliza espont-
neamente dando dos molculas de cido fosfoglicrico (PGA) as
CH,OP CH,OP
I
C=O CHOH
I
I +
*CO, + CHOH L!&, *COOH
CHOH COOH
CH,OP CHOH
CH,OP
RuBP 2 PGA
Esta reaccin fue una de las aclaradas primero por los estudios cinticos de
Calvin con l 4 COZ y cromatografa en papel. Se dej que las clulas efectuaran
la fotosntesis hasta un estado estable usando l4 COZ, de modo que todos los inter-
mediarios se saturaran con l4 C. Entonces se interrumpi el proceso oscureciendo
las clulas, as se suspendieron los productos de la reaccin lumnica y se de-
tuvieron las reacciones de reduccin. Sin embargo, la carboxilacin pudo con-
tinuar dando como efecto la desaparicin simultnea del aceptor de COZ y la
aparicin del producto de carboxilacin. La grfica de la Figura 7-14 muestra los
r
CO, +RuBP CO, +RuBP C02 +RuBP
J
J
ribulosa bifosfato carboxilara
2 PGA P-C-C-COOH 2 PGA
J
2 PGA
x.
6 NADPH
+6 ATP
triosa fosfato
deshidrogenasa
6 NADP
+ +6ADP
+6 Pi
+
GAP DHAP GAP DHAP GAP
xu -5 -
-
I
P-c-c-c-c-c-c--P
F-6-P
+ Pi
O
I I
P-c-c-c-c-c-c
I /
c-c-c-c-c-P
U
I I
P-c-c-c-c-c-c-c-P
* X *
fosfatasa
* Pi
I S-7-P
3 ATP
ribulosa fosfato
I o "--i
kinasa
R&P R&P P-c-c-c-c-C-P R
t t *
*
*
.
P
GAP
I
1
epimerasa
almidn
- 3 ADP
Figura 7-13. El ciclo de Calvin. Los grupos OH y H se han omitido para mayor claridad y sola-
mente se muestran los grupos -0 y -P. Si el dixido de carbono radioactivo ( * C02) pasa por
una vuelta del ciclo aparecer el marcaje en l a distribuci6n mostrada.
ABREVI ATURAS
RuBP = ribulosa bifosfatot E-4-P = eritrosa-4-fosfato
PGA = cido fosfoglicrico
GAP =fosfogliceraldehdo
DHAP = fosfato de dihidroxiacetona R-5-P = ribosa-5-fosfato
FDP =fructosa difosfatot
F-6-P = fructosa-6-fosfato
+Ver nota al pie de pgina 181.
SDP = sedoheptulosa difosfatot
S-7-P = sedoheptulosa-7-fosfato
Xu-5-P = xilulosa-5-fosfato
Ru-5-P = ribulosa-5-fosfato
184 METABOLISMO VEGETAL
O
Figura 7-14. Cambios de l a luz a la oscuridad en las concentraciones de PGA y RuBP (De J.A.
Bassham y M. Calvin: The Path of Carbon in Photosynthesis. Copyright 1957. Con permiso de
Prentice-Hall, Inc., Englewood Cliffs, N.J. Figura original cortesa del Dr. J.A. Bassham.)
resultados del experimento, de los que se concluye que la RuBP es el aceptor de
COZ y el PGA es el producto de la carboxilacin.
La enzima responsable de esta carboxilacin, RuBP carboxilasa (RuBPcasa,
conocida taqbin como carboxidismutasa) ha sido objeto de mucho estudio y
muchas de sus caractersticas in vivo son bien conocidas. La enzima se asla
de las hojas fcilmente y parece ser fa fraccin proteica mayor en los tejidos foto-
sintticos. Es posible aislar una protena aparentemente pura (llamada fraccin I)
que tiene actividad como RuBPasa, pero que tambin tiene enzimas activas en
otras reacciones del ciclo que pueden separarse solamente con gran dificultad.
Se ha sugerido que la RuBPasa y algunas otras enzimas del ciclo estn estrecha-
mente asociadas entre s, lo que explicara la gran eficiencia de operacin de este
sistema enzimtico. Las medidas hechas in vitro con bicarbonato dieron tasas
de reaccin muy bajas y sugirieron que la enzima requiere una concentracin de
substrato extremadamente alta. Experimentos recientes del grupo del fisilogo
britnico D.A. Walker indican que la afinidad de la enzima por su substrato na-
tural, COZ, es lo suficientemente alta para explicar la tasa de fotosntesis in vi vo.
Hay cierta evidencia de que esta enzima se activa in vi vo por la luz. Adems, su
sntesis requiere de sta y no aparece en las ligas desarrolladas en la oscuridad sino
hasta que se iluminan de tres a cinco horas.
El PGA producido en la reaccin por la RuBPcasa se fosforila (se prepara
para la reaccin de reduccin) por la fosfoglicerokinasa, si es el ATP el donador. El
,ido 1,3-difosfoglicrico resultante se reduce por medio de una triosafosfato-
deshidrogenasa especfica para el NADPH dando 3 fosfogliceraldehdo (GAP).
Parte del GAP se convierte luego en dihidroxiacetonafosfato (DHAP) por la
triosafosfato isomerasa y de las dos triosas se sintetiza fructosadifosfato (FDP)
por la aldolasa (ver pgina 118). Las reacciones de PGA a FDP son similares a la
inversa de la secuencia glicoltica de FDP a PGA, excepto porque la triosafosfato
deshidrogenasa se asocia en los cloroplastos al NADPH en tanto que la del cito-
FOTOSNTESIS 185
plasma se asocia con el NAD. Pueden existir otras diferencias. Las dificultades que
se tienen para conciliar la baja actividad in vitro de algunas de las enzimas con
la alta actividad que se requiere in vivo para llevar la fotosntesis, ha llevado a
pensar que las enzimas puedan activarse en el cloroplasto, lo que las diferenciara
an ms de sus contrapartes en la gliclisis.
La conversin de FDP a fructosa-6-fosfato (F-6-P) se lleva a cabo por una
fosfatasa que da fosfato inorgnico. La fosfatasa parece ser especfica para los
difosfatos de hidratos de carbono. Este es uno de los tres pasos gastadores de
energa del ciclo, que aseguran que las reacciones seguirn adelante y no se
detendrn temporal o totalmente por la produccin masiva de intermediarios. La
F-6-P sufre a continuacin una reaccin por la transcetolasa (ver pgina 125) que
remueve los dos carbonos superiores como un derivado de glicol aldehdo: el tia-
mina pirofosfato (TPP), dejando una tetrosa: la eritrosa-4-fosfato (E-4-P). La
E-4-P se condensa con la DHAP por reaccin con la aldolasa para formar la sedo-
heptulosa difosfato (SDP), que se convierte, por un segundo paso con liberacin
de energa, en seduheptulosa-7-fosfato (S-7-P) y Pi catalizando una fosfatasa. La
S-7-P sufre una reaccin por la transcetolasa en la que los dos carbonos superiores
se separan como TPP-glicoaldehdo, dejando la pentosa ribosa-5-fosfato (R-5-P).
Sta se convierte en ribulosa-5-fosfato (Ru-5-P) por la fotopentosaisomerasa. El
TPP-glicoaldehdo derivado de la F-6-P y F-7-P en la reaccin catalizada por la
transcetolasa se transfiere al GAP formando xilulosa-5-fosfato (Xu-5-P), que se
convierte en R-5-P por la fosfopentosa epimerasa.. La R-5-P pasa a Ru-5-P por una
isomerasa y es fosforilada por la fosforribokinasa, con el ATP como donador, pro-
duciendo ribulosa bifosfato (RuBP) y ADP (una segunda reaccin preparadora
que dispone a la pentosa para su carboxilacin). La utilizacin del ATP para hacer
un enlace ter-fosfato de baja energa representa el tercer punto del ciclo en el que
la energa se gasta para constituir un paso irreversible que mantiene la velocidad
y la direccin en el ciclo.
PUNTOS DE CONTROL. Se han sugerido diversos mecanismos de control que pue-
den regular la operacin del ciclo. En primer lugar, el ciclo es un sistema autoca-
taltico muy eficiente. Dado que el producto final (sea una triosa o una hexosa)
es tambin un intermediario, es posible rearreglar el ciclo de modo que produzca
un gran nmero de molculas iniciadoras (RuBP) de nuevas vueltas del ciclo (a
expensas del producto normal). En esta forma el. ciclo puede utilizarse para for-
mar sus propios intermediarios e incrementar su propia velocidad de operacin.
Tal hecho podra ser necesario porque algunos intermediarios (por ejemplo, PGA,
triosafosfato y glicolato) podran salir del cloroplasto durante los periodos de
oscuridad, y la concentracin de los intermediarios se tornara muy baja. Bajo
estas circunstancias slo podra operar con lentitud hasta que el nivel de los in-
termediarios subiera de nuevo. Puede impedirse el agotamiento del ciclo por otras
reacciones de regulacin, principalmente la activacin de ciertas enzimas por la
luz. Cuando la hoja est en la oscuridad algunos de los reactantes se inactivan
(particularmente la carboxilasa, las dos fosfatasas y la Ru-5-P-kinasa). Finalmente,
el balance en las sntesis de los diversos productos del ciclo (hexosas, pentosas,
triosas, PGA, compuestos C) se mantiene por la regulacin de varias reacciones
del ciclo o por cofactores tales como ATP o ADP. En esta forma se mantienen el
balance y la alta velocidad de las operaciones y e l ciclo puede reaccionar rpida
y fcilmente a la demanda de una variedad de productos que pueden necesitarse
para el metabolismo, por otras partes de la clula.
186 METABOLISMO VEGETAL
BALANCE DE ENERGA. Las reacciones del ciclo pueden resumirse
6 CO, + 18 ATP + 12 NADPH +
C,H,, O, t 18 (ADP + Pi) + 12 NADP + 6 H,O
Los 18 ATP representan un total de cerca de 140 kcal y los 12 NADPH un
total de cerca de 615 kcal. Por lo tanto, el ingreso de energa es de unas 755 kcal.
La energa recuperada en la hexosa es de unas 670 kcal/mol, lo que representa
una eficiencia de casi 90%. El 10% restante se utiliza en mantener el ciclo en movi-
miento. La secuencia de reacciones por las que las plantas estabilizan y almacenan
el potencial qumico derivado de la energa de la luz, es por lo tanto de una
notable eficiencia. En buena parte, sta es el resultante del efectivo sistema de
autocontrol del ciclo de Calvin en el que las reacciones estn alimentadas conti-
nuamente por sus propios productos, por lo que las concentraciones de inter-
mediarios pueden aumentar rpidamente por medio de reacciones internas y
mantenerse al nivel apropiado para la mxima operacin del ciclo.
OTRAS VAS FOTOSINTTICAS
RUBP OXIGENASA. Recientemente se ha sugerido que la RuBPcasa puede reaccio-
nar tanto con el oxgeno como con el dixido de carbono. Esta actividad de la
RuBPcasa convierte a la RuBP en una molcula de cido fosfogliclico y una
molcula de PGA, en lugw de formar dos molculas de PCA cuando se fija el COZ.
CH20P
CH,OP
I COOH
C-o
I
I icido fosfogliclico
O, + CHOH +
I
CHOH
CH,OP
COOH
CHOH
I
CH,OP
KUBI PG.4
Los.experimentos demuestran que el O, es un inhibidor competitivo de la
actividad de la carboxilasa. Adems, usando O2 en reaccin in vi vo se forma
glicolato marcado en el carboxilo final. Una activa fosfatasa convierte al P-glicola-
to en glicolato y Pi en la superficie del cloroplasto.
Se han sugerido otras transformaciones para llegar a glicolato, pero no se
han aportado tantas pruebas. Es posible que la timina pirofosfato-glicol-aldehdo
(el fragmento Cz de la reaccin por la transcetolasa) pueda oxidarse y dar glicola-
to o que el producto de la carboxilacin de la RuBPcasa pudiera oxidarse dando
COZ y glicolato. Sin embargo hasta ahora el peso de la evidencia se inclina por la
oxigenacin de la RuBP como la fuente principal de glicolato en el tejido foto-
sinttico.
VfA DEL GLICOLATO. Es claro que una oxidacin en una secuencia de reduccin
como la fotosntesis es un proceso inirtil. La reaccin por la oxigenasa puede ser
FOTOSfNTESIS 187
la consecuencia inevitable del hecho de que la RuHPcasa no hace clara distincin
entre el COZ y el 02. Pero no se pierde todo el carbono que se desva en esta
reaccin. El trabajo de muchos investigadores, particularmente N.E. Tolbert y
sus colegas en la Universidad del Estado de Michigan, ha llevado a formular la
va metablica del glicolato que se muestra en la Figura 7-15. Este es un mecanis-
mo que permite rescatar carbono que, de otro modo, se perdera como glicolato
reintroduciendo al cloroplasto tres cuartas partes de I en forma de cido glicrico.
Deben advertirse cuatro puntos principales. E1primero es que la va del gli-
colato involucra tres lugares metablicos distintos: cloroplastos, peroxisomas y
mitocondrias. Probablemente estos organelos se asocian estrechamente, de otro
modo el espacio de difusin del carbono sera demasiado grande para que el pro-
ceso funcionara con efectividad. La evidencia experimental que llev a entender
que varios organelos deben estar involucrados fue obtenida principalmente en el
laboratorio de Tolbert. Se centrifugaron cuidadosamente homogeneizados celu-
lares a travs de gradientes de densidad para separar sus constituyentes, y se
localizaron las diversas enzimas del proceso en capas especficas en los tubos de
centrfuga, que coincidan con la posicin de los organelos especficos.
El segundo punto es que la reaccin con la oxidasa del cido gliclico
produce Hz 02, que es intoxicante por ser un poderoso oxidante, y es destruida
por la catalasa en los peroxisomas. La mayor parte de la catalasa est confinada
en los peroxisomas, en las hojas que fotosintetizan y forman una enzima muy
conveniente como seal, cuando se separan los peroxisomas por centrifugacin.
La oxidasa del cido gliclico tiene una afinidad par el oxgeno ms bien baja. Es
inhibida selectivamente por el cido a-hidroxipiridn-metano-sulfnico (HPMS)
en cuya presencia se bloquea la oxidacin del glicolato y el cido gliclico aumen-
ta en las hojas.
El tercer punto es la produccin de glicina y serina por la va del glicolato.
Se ha encontrado que estos compuestos a menudo son productos iniciales de l:,
fijacin fotosinttica del COZ ; a los pocos minutos de la fijacin de l4 CO los
radiocromatogramas de extractos de las plantas muestran a menudo una fuerte ra-
dioactividad en la serina y la glicina. Sin embargo, en ausencia de 02, que impi-
de el metabolismo del glicolato al imposibilitar tanto su formacin como su oxi-
dacin, no se forman glicina ni serina radioactivas. EHPMS tambin impide la
formacin de stas.
:,FOTORRESPI RACI ~ El cuarto punto que se deduce de la va del glicolato es que
por cada dos molculas de glicolato que se oxidan se produce una molcula de
COZ y se absorbe una de 02. La absorcin de O2 y produccin de COZ a la luz
por el tejido fotosinttico se denomina fotorrespiracin. La fotorrespiracin es
inhibida caractersticamente cuando se reduce la concentracin de 02. Tal hecho
es previsible, pues la funcin oxidativa de la carborrilasa no puede operar en au-
sencia de O2 y la oxidacin del glicolato requiere una concentracin bastante
alta de 02. El pH alto promueve la funcin de oxigenasa de la RuBPcasa, y la
elevacin del pH in vitro tambin aumenta la fotorrespiracin. Adems el COZ
producido en la fotorrespiracin por una hoja que est fijando l 4 COZ se torna
radioactivo rpidamente al difundirse el l 4 C a travs de los intermediarios del
ciclo de Calvin y entrar a la va del glicolato. Finalmente, 10s inhibidores es-
pecficos de la oxidacin del glicolato, como el HPMS, tambin inhiben la foto-
rrespiracin. Toda esta evidencia experimental fundamenta la hiptesis de que la
METABOLISMO VEGETAL 188
CLOROPLASTO:
I
azcares, almidn
t r i o r '':y/ 0 2
PGA
t
P-glicolato
u
glicerato
I glicolato
PEROXISOMAS
glic6lisis,-'
gluconeoghesis?
MITOCONDRIA
1 I
+
serins (2) glicina
(9)
c
CO,
Figura 7-15. Reacciones de la via del
glicolato.
c) Fosfatasa
d) Oxidasa del Bcido glic6lico
e) Catalasa
f) Transaminasa
g) Glicina descarboxilasa e hidroxi-
h) Regreso del carbono al cloroplasto
Ntese que se requieren dos mol6culas
de glicina para hacer una serina en (9).
El grupo amino sobrante probablemente
vuelve a los peroxisomas para hacer m&
glicina en (f).
metil transferasa
fotorrespiracin proviene de la operacin de las transformaciones de la va del
glicolato .
Es importante advertir, sin embargo, que la va del glicolato no es un ver-
dadero metabolismo respiratorio, pues no se asocia con transporte de electrones
ni con produccin de energa. Adems, se conocen otras fuentes posibles de CO,
por respiracin a la luz. Igualmente, el oxgeno puede ser absorbido por diversas
reacciones oxidativas a la luz. As que los procesos conocidos colectivamente
como fotorrespiracin son complejos e involucran las interrelaciones de varios
sistemas metablicos, as como de varios organelos que se muestran en la Figura
7-15. El problemi integral de las interrelaciones de la fotosntesis, la respiracin
y la fotorrespiracin se analizar en el Captulo 15.
FOTOS~NTESIS C,. Los experimentos cinticos con hojas, algas o cloroplastos
aislados generalmente dan evidencias de reacciones secundarias de carboxilacin.
A menudo se encuentran pequeas cantidades de cido mlico marcado en el
1
FOTOSfNTESIS 189
COOH
COP
I
Pi ?OoH 21H1
COOH (a-carboxilo)
I
I I
CH, +1 4 ~ 0 , L I
"
-/ - I
I
C=O -i HCOH
i
PEP carboxilasa CH, deshidrogenasa CH
I
rnlica
1 ,
I I
CH, +1 4 ~ 0 , - I L I
"
-/ C=O -i HCOH
I i
PEP carboxilasa CH, deshidrogenasa CH
I
rnlica
1 ,
14i00~ l4COOH (0-carboxilo)
PEP OAA malato
Figura 7-16. Reacci6n de pcarlaoxilacin y reducci6n que conduce
a malato marcado en el C-4 o p-carboxilo. La deshidrogenasa rnilica
puede estar ligada al NADH o al NADHP.
p-carboxilo (C-4) lo que sugiere que la fosforilacibn del fosfoenol piruvato (PEP)
para formar cido oxlico (OAA) puede ligarse con una reduccin dependiente de
la luz. Un ejemplo de este tipo de pcarboxilacin se muestra en la Figura 7-16.
A mediados de la dcada del sesenta, los fisilogos H.P. Kortschack y C.E.
Hartt, trabajando en Hawai, advirtieron que en ciertas plantas el producto inicial
ms abundante de la fijacin de l4 COZ no era PGA, sino cidos C4 dicarboxlicos,
los cuales se marcaban inicialmente en el p-carboxilo. Como resultado de una am-
plia experimentacin de los fisilogos australianos M.D. Hatch, C.R. Slack y otros,
se propuso una va cclica de carboxilacin basada en la reaccin de p-carboxila-
cin. Un esquema de esta va se muestra en la Figura 7-17.
Las reacciones bsicas de la fotosntesis C4 son las siguientes. Primero, hay
una p-carboxilacin en un lugar de la hoja, las clulas del mesfilo. Los cidos C3
formados por la p-carboxilacin del PEP son transferidos a las clulas que en-
vuelven a los haces vasculares de las hojas llamadas clulas de la vaina del haz. .
Ah es descarboxilado y el COZ formado se fija por el ciclo de Calvin (fotosnte-
sis C3). El cido C3 que se forma por la descarboxilacin vuelve a las clulas del
mesfilo y se reconvierte en PEP.
La caracterstica especial de este ciclo fotosintdtico, es la separacin de dos
carboxilaciones. La mayora de las plantas que tienen fotosntesis C4 tienen una
anatoma especial de la hoja llamada tipo Kranz, mostrada en la Figura 7-18. En
las plantas C3 las clulas del parnquima se organizan en dos tejidos distintos,
la capa empalizada y el parnquima esponjoso, y hay espacios areos conspicuos.
En las hojas C4 las venas estn ms juntas y cada una se rodea de una capa de
clulas de la vaina del haz, que contienen gran nmero de cloroplastos. stas
estn rodeadas por las clulas del mesfilo que llenan los espacios areos casi por
Figura 7-17. Esquema del ciclo de Hatch y Slack en la carboxilaci6n
de la fotosntesis C4.
coz- * CIDO c 4 ~ - C02-
PEP 7 ) r-
ciclo c4 c3R"< Ciclo c3 j I p
1
0-carboxilacin
Transferencia del Descarboxi- Fotosntesis C3
en las clulas carbono a las lacion en las clulas
de rnesfilo c6lulas de la vaina
del haz
de la vaina
del haz
190 METABOLISMO VEGETAL
completo hacindolos mucho ms reducidos, as que la distancia necesaria para
que el C02 se difunda a los sitios de carboxilacin es corta. Adems, las clulas
de mesfilo rara vez estn a una distancia mayor de dos o tres clulas de las de la
vaina del haz, as que la transferencia de los cidos de uno a otro lugar no necesita
atravesar gran distancia.
El relato completo de la fotosntesis C,, que se muestra en la Figura 7-19,
es bastante complicado porque se han encontrado diferentes variaciones en diver-
sas plantas. El primer cido estable que se forma es quiz el malato (el cido oxalo
actico +AA- es inestable y se rompe al aislarlo, as que rara vez puede identifi-
carse, a menos que se tomen precauciones especiales para protegerlo de la degra-
dacin). El malato requiere para formarse una reduccin utilizando NADPH
generado en la fotosntesis, o aspartato que requiere transaminacin (reaccin e).
El malato o el aspartato pueden ser transferidos a las clulas de la vaina del haz.
FOTOS~NTESIS 191
Figura 7-18. Micrografas al microscopio electrnico de barrido del tejido fotosintbtico de (A)
una hoja C3 (frijol, Phaseolus vulgaris x 420) y (B) una hoja C4 (coquillos, Cyperus rotundus
x 600). Ntense las conspicuas cblulas de la vaina del haz, los pequeos espacios abreos y la or-
ganizacin general que caracteriza a la anatoma de Kranz en la hoja C4 (Fuentes: A, de J.A.
Troughton y LA. Donaldson: Probing Plant Structure. McGraw-Hill Book Co. Nueva York.
1972, usada con permiso. B, fotografa cedida gentilmente por el Prof. C.C. Black, Universidad
de Georgia.)
192 METABOLISMO VEGETAL
Luego el malato es descarboxilado por la enzima mlica, regenerando el NADPH
requerido para su sntesis. El piruvato que queda despus de la carboxilacin es
devuelto a las clulas de la vaina del haz.
Si el cido C, es el aspartato, es reconvertido a OAA en las clulas de la
vaina del haz. En algunas plantas es descarboxilado luego para formar PEP, el
que es convertido en piruvato, una serie de reacciones que incluye la hidrlisis
y sntesis, en secuencia, de ATP. En otras plantas el OAA es reducido a malato
en las mitocondrias de las clulas de la vaina del haz utilizando NADH. El mala-
to es descarboxilado por la enzima mlica en las mitocondrias, regenerando
NADH. Cuando el cido C, mvil es el aspartato y la alanina es el cido C3 que
retorna en lugar de piruvato. Esto impide que se concentre NH3 en las clulas
de la vaina del haz. Las plantas C4 son clasificadas con frecuencia de acuerdo a
la enzima que descarboxila el cido C, como se veen la Figura 7-19.
La regeneracin del PEP es una reaccin curiosa e interesante. La enzima
piruvato-fosfato-dikinasa requiere ATP y Pi produciendo PEP, .AMP y pirofosfato
(PPi). El PPi se hidroliza dando 2 Pi por cada pirofosfato y el AMP reacciona con
otra molcula de ATP para formar dos molculas de ADP. En suma, dos moleculas
de ATP pasan a ADP por cada molcula de PEP sintetizada. Esta reaccin unitaria
es fuertemente exotrmica y tiende a desplazarse con energa en direccin de la
sntesis de PEP (ver tambin el Captulo 6, pgina 133).
Por este examen y por la observacin de la Figura 7-19 se advertir que la
fotosntesis C4 puede involucrar enzimas citoplsmicas (notablemente las propias
enzimas de la carboxilacin) as como enzimas de la mitocondria y del cloroplas-
to. En este sentido se parece a la va del glicolato. As es que la antigua idea de
que la fotosntesis se llevaba a cabo exclusivamente en los cloroplastos no puede
seguir considerndose una verdad estricta. En esta va, como en la del glicolato,
las secuencias metablicas exigen la colaboracin de todas las partes de varias
clulas localizadas en diversos lugares de la planta. La identificacin de las distin-
tas actividades enzimticas en los organelos de las clulas de la vaina del haz o del
mesfilo ha sido posible por el aislamiento selectivo de los tejidos, por la separa-
cin de los cloroplastos (los cloroplastos de la vaina del haz hacen almidn en
tanto que los cloroplatos del mesfilo no lo hacen; por tanto los primeros son
ms densos y pueden separarse por centrifugacin diferencial) y por el aislamien-
to de los organelos de clulas de diferentes tejidos que han sido separadas cuida-
dosamente por medios mecnicos.
P.W. Hattersley desarroll en Australia una tcnica interesante para demostrar
la distribucin de la RuBPcasa. Primeramente aisl RuBPcasa del cloroplasto,
luego la inyect a conejos para hacer suero anti RuBPcasa. El antisuero del conejo
se aplic a cortes de hoja y luego se adicion un antisuero de oveja (contra el sue-
ro de conejo) con un marcador fluorescente que marc in situ a la RuBPcasa.
En la Figura 7-20 se pude ver que en una hoja C3 la RuBPcasa est distribuida en
todas las clulas fotosintticas, pero en una hoja C, est presente en las clulas
de la vaina del haz casi exclusivamente.
Al parecer, los cloroplastos de las clulas de la vaina del haz en las plantas
C, , particularmente en las que el cido C, transferido es malato, carecen de grana
organizados o tienen una estructura en los grana muy sencilla como se ve en la
Figura 7-21, Esto puede relacionarse con el hecho de que las plantas en las que se
transfiere malato tienen un requerimiento de sntesis de NADPH ms bajo en los
cloroplastos de la vaina del haz, porque la descarbovilacin del malato genera
FOTOSfNTESIS 193
Clulas de mesfilo Clulas de la vaina del haz
Figura 7-19. El ciclo Hatch y Slack y vas de fotosintesis Ci propuestas.
Reaccin sitio Notas
(a) PEP carboxilasa
(b) malato deshidrogenasa
(c) transaminasa
(d) enzima mlica
(e) transaminasa
(f) deshidrogenasa mlica
(g) PEP carboxikinasa
(h) kinasa pirvica
(i) piruvato fosfato dikinasa
(k) pirofosfatasa
(1) adenilato kinasa
citoplasma (probablemente)
cloroplastos
citoplasma
(i) cloroplastos
(ii) mitocondrias
mitocondria o citoplasma
mitocondria
mitocondria (probablemente)
citoplasma
cloroplastos
cloroplastos
cloroplastos
Luz
activada
el substrato es
NADPH + NADP +
NADP + NADPH ++
NAD + NADH
NADH + NAD
NADH +. NAD
En plantas que tienen
reaccin (did
ATP +ADP
ADP +ATP
2ATP + 2ADP +
bicarbonato
Nota: Las plantas C4 a menudo se identifican en los tipos enzima NADP-mlica, enzima NAD-mlica o PEP
carboxikinasa (PCK) dependiendo de su mecanismo de descarboxilacin de los cidos C4.
NADPH. As, una porcin considerable de los requerimientos de NADPH, por el
ciclo de Calvin, puede cubrirse con esta fuente. Se recordar que la operacin
de todo el sistema de electrones en la fotosntesis, que es necesario para generar
NADPH, parece requerir la aposicin de dos o ms tilacoides, es decir, la forma-
cin de grana. Por otra parte, la sntesis de ATP asociada al fotosistema I procede
perfectamente bien en las membranas intergranales. Sin embargo, esta diferencia-
cin entre los tipos de cloroplastos, no es enteramente clara. Es probable que las
clulas de la vaina del haz de la mayora de las plantas C, de hecho sean capaces
de completar fotosntesis del tipo C3. El ciclo C4 es en principio un artificio para
aumentar la tasa de fotosntesis.
RESUMEN DE LA FOTOSfNTESIS c,: SIGNIFICACIdN PARA LAS PLANTAS QUE LA
POSEEN. El conocimiento de la fotosntesis C4 estd lejos de ser completo. Queda
mucho por clarificar sobre la evolucin del proceso y su significacin para las
plantas. La taxonoma de la fotosntesis C, es interesante: las plantas C4 se en-
194 METABOLISMO VEGETAL
A
B
Figura 7-20. Tincin con colorante fluorescente para localizar la RuBPcasa en el tejido totosin-
t6tico.
A. Un pasto C4, Digitaria Brown;;, en el que solamente las c6lulas de la vaina del haz son fluo-
rescentes, x 380.
B. Un pasto C3, Danthonia bipartita, en el cual fluorescen todas las c6lulas fotosint6ticas x 240
(dase P.W. Hattersley, L. Watson y C.B. Osmond, Aust. J. Plant Physiol. 4:523-539 (1977)
para los detalles de la t6cnica. Fotografas cedidas gentilmente por el Dr. Hattersley.)
FOTOSfNTESIS
195
cuentran en varios grupos de pastos y ciperceas tropicales, y en varias familias
de dicotiledneas tambin se encuentran representantes. Un hecho curioso es que
varias familias (y aun ciertos gneros) contienen individuos de tipo C3 y C, . La
inferencia es que la fotosntesis C, ha surgido de manera independiente en varios
grupos diferentes de plantas superiores, as que es un desarrollo evolutivo reciente.
196 METABOLISMO VEGETAL
Su significacin tiene varios aspectos. Las plantas que poseen fotosntesis
C4 son capaces de alcanzar tasas fotosintticas muy altas y, a causa de la alta afini-
dad de la PEP carboxilasa por el COZ y de las reacciones en extremo exotrmicas
de sntesis de PEP, son mucho ms capaces que las plantas C3 de absorber COZ a
partir de concentraciones bajas. Esto quiere decir que pueden mantener altas tasas
fotosintticas cuando sus estomas se encuentran casi cerrados, lo que es una ven-
taja para las plantas que viven en climas secos y calientes.
Las plantas C, no pierden COZ por fotorrespiracin, o bien carecen del
metabolismo fotorrespiratorio o bien el COZ producido as (en las clulas de la
vaina de los haces que es el sitio primario de la RuBPcasa) es fijado de nuevo por
las clulas del mesfilo, as que no puede escapar.
La mayora de las malezas agresivas y algunos de los cultivos ms producti-
vos son plantas C4. Se pueden encontrar varias listas de plantas C4 en: R.H. Burris
y C.C. Black (ed.), COZ Metabolism and Plant Productivity, citado al fin de este
captulo (pigina 205). No obstante, algunas plantas C3 igualan a las C4 en pro-
ductividad y muchas plantas C, no son competitivas en todas las situaciones. As
es que el sndrome C4 no confiere ventajas especiales automticamente, ni es
tampoco siempre ms eficiente o mejor que la fotosntesis C3, como se dice
a menudo. De hecho, el punto quizs ms importante de la fotosntesis C4 es que
es menos eficiente; es decir, usa ms energa lumnica para fijar COZ que la
fotosntesis C3 . Esto quiere decir que las plantas C4, la mayora tropicales o de
origen tropical, usan algo del exceso de luz que reciben para operar el ciclo
C, concentrando COZ en las clulas de la vaina del haz, donde puede ser fijado
por el ciclo C, ms rpidamente. En cierto sentido el ciclo C4 es una bomba de
presin de COZ. Quema mucho Combustible (la energa utilizada para generar
ATP para que actGe la piruvato fosfato dikinasa), pero si hay combustible dispo-
nible y es gratuito (luz), su uso dar una ventaja definitiva.
La fotosntesis C4 no es necesariamente una reaccin secuencia1 absoluta
o invariable. Las plantas se han caracterizado como formadoras de aspartato o
formadoras de malato de acuerdo a su cido C4, pero algunas de ellas pueden
producir cualquiera o ambos de ellos en diferentes grados. Tampoco es preciso
que el ciclo C, opere siempre ni es necesario que sea el nico proceso primario de
carboxilacin; el ciclo C3 puede seguir fijando COZ e incluso ser el principal sis-
tema de carboxilacin bajo las condiciones necesarias (alto COZ, baja iluminacin,
agua abundante). Las reacciones C, pueden utilizarse bajo ciertas condiciones
para almacenar grandes cantidades de cidos C, , que podran usarse como fuentes
de COZ para la fotosntesis cuando, debido tal vez al cierre de los estomas por de-
ficiencia severa de agua, el COZ de la atmsfera no es utilizable.
Se acostumbraba considerar a la fotosntesis como un mecanismo absoluto,
invariable; ahora est claro que no es as. La fotosntesis C, es simplemente otro
ejemplo de la gran variabilidad y adaptabilidad de las plantas a su ambiente. La
mayora de las plantas son capaces de efectuar cierta 0-carboxilacin. Las plantas
C4 han incrementado este proceso y lo han acoplado con una estructura anat-
mica que le confiere ventajas definitivas (aunque tal cosa no es invariable) para
lograr una utilizacin de la energa lumnica ms eficiente en la concentracin de
COZ en el lugar donde se necesita: el sitio de reduccin del COZ.
METABOLISMO ACIDO DE LAS CRASULACEAS. Los primeros fisiolgos notaron que
en ciertas suculentas de la familia Crassulaceae aumentaba marcadamente el conte-
FOTOSfNTESIS 197
nido cido durante la noche, decreciendo durante el da, Ms tarde se encontr
que estas plantas absorben C 02 en la oscuridad, plero frecuentemente no a la luz.
Este esquema general de metabolismo fotosinttico se llama metabolismo cido de
las crasulceas (CAM); involucra la sntesis de cido mlico por carboxilacin du-
rante la noche y el rompimiento de dicho cido durante el da con liberacin de
COZ para la fotosntesis. Las plantas CAM son generalmente suculentas, poseen
caractersticas xeromrficas (hojas reducidas, cutcula gruesa, estomas hundidos,
etc.) y viven en climas ridos. Este tipo de metabolismo les permite efectuar foto-
sntesis aun cuando sus estomas estn firmemente cerrados durante el da por el
calor y la sequedad, usando C02 que absorbieron durante la noche, ms fresca y
hmeda.
Las transformaciones metablicas del CAM se esquematizan en la Figura
7-22. Una lista de plantas CAM se encuentra en R.H. Burris y C.C. Black (ed.),
COZ Metabolism and Plant Productivity que se cita al final de este captulo.
En la oscuridad, los carbohidratos almacenados se convierten en PEP por la
gliclisis, que se carboxila (PEP carboxilasa) dando cido mlico que se almace-
na en la vacuola. A la luz, el malato se descarboxila (por lo general por la enzima
midica, en algunas plantas por la PEP carboxikinasa) para dar cido pirvico y
COZ. El COZ se utiliza para la fotosntesis C3 normal. El cido pirvico se puede
oxidar hasta COZ aumentando la provisin para la fotosntesis, puede ser re-
convertido a PEP o PGA y usarse para sntesis de azcar o se puede reintroducir
al ciclo fotosinttico. El destino del cido pirvico no se conoce con certeza y
probablemente sufre todas las reacciones posibles que sufre este metabolito
central.
El CAM no es una va obligatoria. Si los estomas se abren en el da, puede
absorberse COZ y fijarse del modo usual. Por otra parte parece que el CAM est
firmemente regulado por ritmos diurnos o por autocontrol alostrico de la PEP
carboxilasa por el malato, se almacena en la vacuola, no ocurrir una regulacin
sino hasta que la concentracin del malato se torne tan alta que no pueda en-
trar ms.
El CAM es similar a la fotosntesis C4 en muchos aspectos, excepto por-
que la p-carboxilacin y la fotosntesis C3 estn separadas en el tiempo, en lugar
de estarlo en el espacio. A diferencia de la fotosntesis C4, el CAM no les confiere
altas tasas fotosintticas a las plantas que lo poseen. De hecho, el CAM es muy
LUZ
Almid6n
4
cido mlico
I I
cido pirvico
.?E?""
Figura 7-22. Esquema CAM. La
reaccin de carboxilacin en la os-
curidad es catalizada por la PEP
carboxilasa. El malato es descar-
boxilado por la enzima mhlica o
PEP carboxikinasa. Las vas no
comprobadas se muestran con l-
neas punteadas.
198 METABOLISMO VEGETAL
ineficiente, pero permite que contine la fotosntesis bajo condiciones xricas
extremas.
FOTOS~NTESIS DE OTROS COMPUESTOS. En el funcionamiento de los procesos
metablicos celulares (tales como el ciclo de Krebs o la gliclisis) se producen mu-
chos compuestos al utilizar como substratos los productos de la fotosntesis que
salen del cloroplasto al estar a la luz. Una proporcin considerable de la sntesis
proteica, que ocurre en las hojas, se efecta en el cloroplasto y muchos de los
aminocidos que constituyen las protenas de aqullas se sintetizan ms o menos
directamente a partir de carbono recin fijado por la fotosntesis. Al parecer estos
aminocidos se hacen tanto en el cloroplasto como en el citoplasma a partir
de carbono que sale del cloroplasto. Parece probable que la mayor proporcin de
los lpidos de la hoja se forman a partir de glicerol y acetil-COA, derivados ms o
menos directamente de la fotosntesis. El glicerol viene probablemente de la re-
duccin de gliceraldehdo fosfato, pero la fuente de acetil-COA no se conoce.
Puede venir directamente por reduccin del TPP-gliceraldehdo o por gliclisis
del PGA que ha salido del cloroplasto.
FORMACI ~N DE SACAROSA Y ALMIDN. No todos los productos de la fotosntesis
son utilizables de inmediato por las clulas. Una buena parte se almacena como
almidn en los cloroplastos o en los amiloplastos y por mucho tiempo se recono-
ci que la formacin de almidn era el punto final de la fotosntesis.
Otra alternativa de muchas plantas (principalmente monocotiledneas) es
almacenar los carbohidratos como sacarosa., ya sea en las clulas fotosinterizado-
ras o, como en la caa de azcar, en las vacuolas de clulas especiales de alma-
cenaje del tallo. Al principio se crea que tanto la sacarosa como el almidn se
sintetizaban por reaccin teniendo a la G-1-P como substrato de una fosforilasa.
G-1-P + F GF + Pi
fructosa sacarosa
G-1-P + -G-G-G + -G-G-G-G + Pi
almidn
La sntesis de almidn por esta reaccin requiere la existencia de una
molcula precursora o iniciadora que sera maltosa o bien un polmero de la
glucosa. En realidad es una reaccin de alargamiento de la molcula. En las plantas
superiores no se encuentra la sacarosa fosforilasa y el equilibrio de estas reacciones
con fosforilasas es tal que se espera que la reaccin vaya en direccin de su sn-
tesis. El descubrimiento del sistema de transferencia uridn difosfato glucosa
(UDPG) de los bioqumicos argentinos L.F. Leloir y C.E. Cardini seal el camino
para llegar a entender la sntesis de los oligosacridos y polisacridos por reaccio-
ne de transferencia de glucosa.
Hay dos vas probables para la sntesis de sacarosa
UDPG + F -+GF + UDP ( 1)
sacarosa uridn difosfato
FOTOSfNTESIS
UDPG + F-6-P -+ GF-6-P + UDP
sacarosa fosfato
199
(2)
GF-6-P -+ GF +Pi
La segunda reaccin forma sacarosa fosfato que por hidrlisis da sacarosa.
Esta hidrlisis es en extremo exotrmica y por tanto esencialmente irreversible,
probablemente es el recurso que permite la acumulacin de grandes cantidades
de sacarosa en ciertas hojas (por ejemplo, remolacha y muchas monocotiledneas
que no hacen almidn normalmente). La UDPG se hace as
UDP +ATP -+ UTP + ADP
uridn trifosfato
UTP + GIP --f UDPG + PPI
pirofosfato
La hidrlisis del PPi rinde 8 kcal/ mol, as que puede acoplarse para hacer
que la reaccin se dirija con mayor energa hacia la sntesis de sacarosa. La sntesis
de almidn se lleva a cabo esencialmente por la misma secuencia de reacciones
-G-G-G + UDPG -+ -G-G-G-G + UDP
almidn
o por una similar en la que el agente que transfiere al glucosil es la adenosn difos-
fato de glucosa (ADPG) en lugar de UDPG. Nuevamente, como para la fosforilasa,
se requiere una molcula precursora o iniciadora. Probablemente el ATP
requerido para sintetizar UDPG o ADPG se deriva de la fosforilacin cclica de la
fotosntesis.
La fcil interconversin de F-6-P G-6-P + G-1-P permite la rpida sntesis
de sacarosa y almidn sin que aparezcan hexosas libres. Esto explica el descubri-
miento inicial, de que suministrando glucosa 14C a las hojas se obtiene rpidamente
almidn y sacarosa marcados igualmente en ambas hexosas, pero la obtencin
de fructosa marcada libre es lenta. Igualmente, esto soluciona el problema que
encararon los fisilogos que iniciaron estos estudios al tratar de contestar la
pregunta qu azcar (o almidn) es el primer producto de la fotosntesis?.
Ahora lo ms probable parece ser que las hexosas libres encontradas en pe-
quea cantidad en la mayora de los tejidos fotosintticos provengan de la hidr-
lisis del almidn o de la sacarosa y no sean sus precursores.
Una reflexin interesante sobre las dificultades de la bioqumica vegetal es
que aunque se sabe bien que el cloroplasto es el sitio donde se forma el almidn,
el sitio donde se sintetiza la sacarosa no se conoce con certeza. Esto es particular-
mente sorprendente porque la sacarosa es un producto bioqumico (caa de
azcar, remolacha) de mxima importancia y es la forma en que el carbono se
transporta en las plantas. Aunque los cloroplastos de las plantas superiores pueden
fotosintetizar aislados, con tanta efectividad como en las hojas, si se preparan
cuidadosamente, parece que son incapaces de hacer sacarosa. Los experimentos,
en los que se les suministra l4 COZ a las hojas y los cloroplastos se aislan en sol-
200 METABOLISMO VEGETAL
ventes no acuosos (para impedir que salga la sacarosa que es muy soluble en
agua), sugieren que la sacarosa se elabora en la membrana del cloroplasto o en su
exterior. Las hexosas y la sacarosa parecen no ser capaces de pasar la membrana
del cloroplasto con facilidad, pero las triosas y otros compuestos de bajo peso
molecular penetran sin dificultad.
Existen dos posibilidades principales: o bien la sacarosa o sacarosafosfato
se elabora en los cloroplastos y se exporta rpidamente por un mecanismo de
transporte activo (que podra desfosforilar a la sacarosa fosfato en la membrana
del cloroplasto), o bien se elabora en el citoplasma adyacente a los cloroplastos
a partir de triosafosfatos, para quienes la membrana del cloroplasto es muy per-
meable. Las triosafosfatos pueden reconvertirse fcilmente por gliclisis inversa
a las hexosafosfatos, precursores en la sntesis de la sacarosa. La respuesta a este
problema tan interesante e importante tendr que aguardar a que se descubran
mejores tcnicas biolgicas o bioqumicas.
FACTORES QUE AFECTAN LA FOTOSNTESIS
La fotosntesis no requiere tener riguroso control interno de la tasa de las reaccio-
nes, como sucede con la respiracin. De hecho, es una ventaja obvia para la planta
que la fotosntesis sea intensa cuando las condiciones son las correctas. Evidente-
mente las plantas deben ajustar su eficiencia integral a la mxima intensidad lum-
nica con que generalmente cuentan. Las plantas que viven a la sombra necesitan un
sistema colector de luz de alta eficiencia porque deben desarrollar tasas de fijacin
de COZ mximas con bajas intensidades lumnicas. Las hojas situadas en lugares
descubiertos requieren trampas de luz mucho menos eficientes, de otro modo
absorberan excesiva energa lumnica y, consecuentemente, se calentaran mu-
cho. Este control no est dado por ajustes bioqumicos sino por el esquema inte-
gral de desarrollo de la planta. La tasa de fotosntesis tambin se relaciona con su
condicin fisolgica, la situacin bajo la cual creci, su estatus nutricional, facto-
res genticos, el estado de sus estomas, etctera.
Finalmente, diversos procesos secundarios -la carboxilacin, el ciclo Cq,
el CAM, la va glicoltica, as como la respiracin en la oscuridad- inciden en el
proceso fotosinttico. La fotosntesis neta o asimilacin neta del COZ es una
resultante de la tasa de fijacin fotosinttica de C02 integral o total y la prdida
de COZ por fotorrespiracin y otras vas respiratorias. Cada uno de estos sistemas
metablicos puede reaccionar con todos los otros factores internos o externos de
diferentes maneras. Por esta razn en el Captulo 15 se considerar la fotosntesis
en el contexto del metabolismo nutricional de la planta como un todo, y en sus
relaciones con otras transformaciones metablicas del carbono. Ciertos factores
especficos que afectan al proceso fotosinttico se mencionarn aqu brevemente.
TEMPERATURA. Se mencionaron anteriormente las observaciones de Blackman
sobre las interrelaciones de la intensidad lumnica y la temperatura. Este encontr
que aunque la absorcin y la reaccin lumnica no se afectan demasiado, las
reacciones enzimticas u oscuras dependen estrechamente de la temperatura. En
FOTOSfNTESIS 201
o" 100-
o)
U
.
O
.- : 80-
Lo
E
C
O
.-
Lo
w
,O 6 0 -
m
U
m
Lo
c,
40-
U
C
.O
o
.-
s
C b) Mai z, pl ant a C4
I
O 20 40 60 80 1 O0
Figura 7-23. Efectos inhibitorios
\ , , / ., 1 del oxgeno sobre la fotosntesis
0 2 en el ai re,
V
Inhi bi ci n Rango (Datos de W.B. Levin y R.G.S.
reversi bl e i rreversi bl e Bidwell.)
el ramo fisiolgico entre 5 y 25-30C la fotosntesis tiene generalmente un Qlo
aproximado de 2, como sera de esperarse.
Ciertos organismos pueden continuar fijando COZ en temperaturas muy
extremas: algunas conferas a -2OOC y las algas que viven en manantiales calien-
tes a ms de 5OOC; pero en la mayora de las plantas la fotosntesis cesa o declina
rpidamente ms all de los lmites fisiolgicos mencionados anteriormente.
Muchos de los primeros experimentos sobre fotosntesis se dirigieron a
determinar las condiciones ptimas para tener tasas mximas, pero los resultados
obtenidos eran conflictivos y difciles de evaluar. Ello se debe a que, como se es-
tudi, la fotosntesis es un proceso en extremo complejo y el ptimo para un
factor cualquiera es muy afectado por los niveles de los otros factores. As, los
efectos de la concentracin de COZ, temperatura y luz sobre la fotosntesis se
relacionan todos entre s y a su vez todos ellos dependen en mayor o menor
grado de diversas caractersticas fisiolgicas y anatmicas de la planta. De hecho,
bajo condiciones de campo la temperatura no influye mucho en la tasa fotosint-
tica, en un rango de 16 a 29'C a menos que la intensidad lumnica sea suficien-
temente alta como para que las reacciones oscuras sean limitantes.
OX~GENO. El oxgeno influye mucho en la fotosntesis de diversos modos. Algu-
nos transportadores de electrones de la fotosntesis pueden transferir electrones
al oxgeno, en particular la ferredoxina parece ser sensitiva al Oz . Con luz brillan-
te, mucho oxgeno causa un dao irreversible al sistema fotosinttico probable-
mente por oxidacin de los pigmentos. Los carotenos en los cloroplastos protegen
a las clorofilas del dao por solarizacin, como se denomina.
La reaccin de la RuBPcasa (oxigenasa) provee el sitio ms importante para
el efecto del O2 sobre la fotosntesis. Todas las concentraciones de oxgeno in-
202
METABOLISMO VEGETAL
O- / / Maz,200 ft- c v..:-, ?an &*
rr,,ut, L"" 8I-b
I I I 1 -
100 200 300 400 500 600 700 800
CO, punt os de CO Concent r aci on. ppm
compensaci n
Figura 7-24. Efecto de la concentraci6n de COZ en la fotosn-
tesis de una hoja C3 (frijol, Phaseolus vulgaris) y de una hoja
C4 (maz, Zea mays). (Datos de R.G.S. Bidwell.)
I I I
2000 3000 4000
Punt o de compensaci n Int ensi dad l umi ni ca, f t -c
de la luz
Figura 7-25. Efecto de la intensidad lumnica en la fotosin-
tesis de una hoja C3 (frijol, Phaseoh vulgaris) y de una hoja
C4 (malz, Zea mays). (Datos de R.G.S. Bidwell.)
FOTOSfNTESIS 203
hiben la fotosntesis de las plantas C3 de manera competitiva y reversible; con
alto O2 (80% o ms) ocurre tambin una inhibicin irreversible. Las plantas C4 no
liberan COZ en la fotorrespiracin (ya sea porque no fotorrespiran o porque el
COZ fotorrespirado es reabsorbido por el ciclo C4) y su fotosntesis no se afecta
por el O2 sino hasta alcanzar concentraciones muy altas que causan dao irrever-
sible al sistema fotosinttico. Una comparacin entre los efectos del oxgeno en
plantas C3 y C4 se muestra en la Figura 7-23.
DIdxIDo DE CARBONO. Bajo condiciones de campo, la Concentracin del dixido
de carbono es con frecuencia el factor limitante de la fotosntesis. La concentra-
cin de 0.033% (330 ppm) en la atmsfera est muy por debajo de la saturacin
con COZ para la mayora de las plantas; algunas recin se saturan cuando alcan-
zan concentraciones de 10 a 100 veces mayores. Las curvas caractersticas de satu-
racin con dixido de carbono se ven en la Figura 7-24. Evidentemente la fotosnte-
sis es muy afectada por las bajas concentraciones de dixido de carbono pero se
relaciona ms estrechamente con la intensidad lumnica en altas concentraciones.
En concentraciones reducidas de dixido de carbono las transformaciones del car-
bono pueden cambiar notablemente: se ha notado una produccin de glicolato
mucho ms alta en bajas concentraciones de dixido de carbono debido al aumen-
to relativo del nivel de 02.
Conforme se reduce la concentracin de COZ desciende la tasa fotosinttica
hasta que iguala exactamente a la tasa de fotorrespiracin, En las plantas C, esto
ocurre en una concentracin de COZ de 50 ppm. La concentracin de COZ a la
que se iguala la absorcin y liberacin de dicho compuesto se denomina el punto
de compensacin de C02 (abreviado r). El punto de compensacin de C02 en las
plantas C4 que no liberan COZ en la fotorrespiracin es generalmente muy bajo,
de 2 a 5 ppm de COZ. Las curvas caractersticas de COZ para las plantas C, y C4
se muestran en la Figura 7-24.
Luz. Como se podra esperar de un proceso que depende de la luz, la intensidad
de ella afecta directamente la tasa de la fotosntesis. Las grficas de la Figura 7-25
muestran las curvas lumnicas caractersticas para hojas C3 y C4. En ellas se ve que
la fotosntesis se satura bruscamente a la intensidad en la que las reacciones oscu-
ras se tornan limitantes, como se advierte por el hecho de que una concentracin
alta de COZ permite un nivel de saturacin lumnica superior al que se tiene con
poco COZ. El punto, en el otro extremo en la grfica, donde se igualan fotosnte-
sis y respiracin y ya no hay intercambio neto de gases, se llama el punto de com-
pensacin lumnico. En general este punto es mucho ms bajo en las plantas de
sombra que en las de sol; por lo general cae en el rango de 20-100 bujas-pie.
La calidad de la luz tambin afecta a la fotosntesis. Hemos dicho que la
luz rojo lejano es ineficiente por s misma en la fotosntesis y requiere luz adi-
cional de longitud de onda ms corta para utilizarse con eficiencia. Tambin se dijo
que si la luz roja se suplementa con una fuente relativamente dbil de luz azul, la
tasa fotosinttica puede aumentarse notablemente y los productos de fotosntesis
pueden ser afectados. El fisilogo ruso A. Nichiporovitch observ que la produc-
cin de protena se estimula con la luz azul y la de carbohidrato con la roja. Se ha
sugerido que las enzimas ligadas a la flavina pueden activarse con la absorcin de
luz azul por medio de sus cofactores flavnicos de color amarillo, activndose
entonces la sntesis de ciertos aminocidos.
204 METABOLISMO VEGETAL
LA EVOLUCI ~N DE LA FOTOSNTESIS
No se puede decir con certeza cmo evolucion la fotosntesis, pero es posible
deducirlo siguiendo las ideas expuestas por Oparin y por Haldane. El resultado de
tal especulacin es til porque sita los procesos bsicos de la fotosntesis en una
nueva perspectiva. Se puede imaginar a los primeros organismos, viviendo en
una sopa qumica orgnica, constituida por compuestos formados anteriormente
como resultado de la irradiacin con luz ultravioleta y descargas elctricas sobre
una atmsfera rica en carbono y nitrgeno, ambos en estado de reduccin. Estos
organismos primitivos vivan en un medio acuoso con una atmsfera en estado de
intensa reduccin, rodeados por todas las sustancias necesarias para su desarrollo.
Las reacciones sintticas requeriran tan slo la absorcin de los substratos necesa-
rios, y la energa para la sntesis podra derivarse del rompimiento de compuestos
muy reducidos en reacciones acopladas. Sin embargo, la provisin de los interme-
diarios requeridos pudo llegar a agotarse al poco tiempo, formndose entonces
sistemas enzimticos que utilizaban una parte de la energa presente en substratos
no requeridos para la sntesis de intermediarios necesarios. En el proceso habra
evolucionado un mecanismo de transporte de electrones para extraer la energa
de los substratos y sintetizar los intermediarios de alta energa.
Eventualmente la provisin de electrones de alta energa se tomara muy
baja y se hara necesaria alguna manera de usar electrones de baja energa; en
otras palabras, de adicionar sta al sistema. Las enzimas del transporte de elec-
trones, por su propia naturaleza, deben absorber luz y es de suponerse que el paso
siguiente fuese el desarrollo de una de ellas capaz no solamente de transferir elec-
trones, sino de utilizar la luz para promoverlos a un nivel energtico superior.
Esto dara como resultado un sistema fotosinttico similar al de algunas
bacterias fotosintticas que utilizan electrones de donadores de energa interme-
dia elevndolos a un alto nivel energtico por la absorcin de la luz, para las
reacciones de sntesis. La evolucin desde la fotosntesis bacteriana hasta la foto-
sntesis de las plantas superiores requiri solamente un paso ms: la cooperacin
de dos reacciones de absorcin de luz, acopladas por medio de la cadena de trans-
porte de electrones de modo que los electrones de un donador universal, el agua,
pudieran ser utilizados. En esta forma el sistema fotosinttico queda liberado de
cualquier necesidad de electrones reducidos del medio externo.
Por lo tanto, es probable que las reacciones de carboxlacin y la sntesis
de productos orgnicos a partir del dixido de carbono hayan aparecido muy al
principio de la evolucin de los organismos, y la utilizacin de la energa lumnica
para alguna manera de sntesis primitiva puede muy bien ser un desarrollo muy
antiguo. Sin embargo, es probable que la evolucin de la fotosntesis tal como
ocurre en las plantas superiores sea comparativamente reciente, por lo que es
probable que la adicin de oxgeno a la atmsfera tambin lo sea.
Se ha sugerido que durante el carbonfero, cuando el desarrollo de las
plantas excedi al de cualquier otra poca, la atmsfera terrestre contena 5%
de dixido de carbono y solamente 5% de oxgeno. Esto, junto con el calor y la
alta humedad prevalecientes en ese periodo, representan las condiciones ideales
para el desarrollo vegetal. Las plantas de esa poca nos proveen de carbn, de pie-
dra y petrleo: Pero quizs nos dan tambin una leccin: utilizaron sus recursos
naturales (COZ ) para una proliferacin y desarrollo de salvaje extravagancia y
FOTOSfNTESIS 205
contaminaron el ambiente con los desechos de su metabolismo (O, ).
recobrarse de ello!
Ni la ecologa ambiental de la Tierra ni el Reino Vegetal llegaron jams a
LECTURAS ADICIONALES
Artfculos sobre fotosintesis, fotorrespiracin y estructura y funcin del cloroplasto en Annual
Bassham, J .A. y M. Calvin: The Path of Carbon in Photosynthesis. Prentice-Hall Inc. Engle-
Burris, R.H. y C.C. Black (ed.): COZ Metabolism and Plant Productivity. University Park Press,
Calvin, M. y J .A. Bassham: The Photosynthesis of Carbon Compounds. W.A. Benjamin, Inc.
Energy Conversion by the Photosynthetic Apparatus. Brookhaven Symposia in Biology, No.
Gibbs, M. (ed.): Structura and Function of Chloroplasts. Springer-Verlag, Nueva York. 1971.
Govindjee (ed.): Bioenergetics of Photosynthesis. Academic Press, Nueva York. 1975.
Gregory, R.R.P.F.: Biochemistry of Photosynthesis. J ohn Wiley & Sons Ltd. Londres, 1971.
Hatch, M.D., C.B. Osmond y R.O. Slatyer (ed.): Photosynthesis and Photorespiration. J ohn
Reviews of Plant Physiology y Annual Review of Biochemistry.
wood Cliffs, N.J . 1957.
Baltimore, Md. 1976.
Nueva York. 1962.
19, 1967.
Wdey & Sons Ltd. Londres. 1971.
Captulo 8
METABOLISMO DEL NITRGENO
FIJACIdN DEL NITRdGENO
!Aunque la atmsfera de la tierra tiene un 80% de nitrgeno, este elemento se en-
cuentra a menudo en cantidades reducidas en los organismos, particularmente
en las plantas, porque slo ciertos microorganismos son capaces de asimilar el
nitrgeno molecular convirtindolo en formas utilizables por ellas: fie estos micro-
organismos hay cuatro tipos principales: microorganismos simbiticos, que viven
en las races de ciertas plantas; ciertas' bacterias del suelo de vida libre hetero-
trfica; bacterias fotosintticas, y algunas algas fotosintticas verde-azul, f'La
importancia de la fijacin de nitrgeno no puede ser sobrestimada: la mayor
parte del nitrgeno orgnico que hay sobre la tierra proviene de este proceso. Se
ha sugerido una cifra de 100,000,000 de toneladas por ao. En Norteambrica el
nitrgeno fijado probablemente excede por un factor de 3 6 4 a la cantidad apli-
cada como fertilizante. Adems de que el valor en el mercado del nitrgeno fijado
(como leguminosa) es de 3 mil millones de dlares por ao, en Estados Unidos este
proceso (a diferencia de la fabricacin comercial de fertilizante) no es contami-
nante. Es tan importante la fijacin del nitrgeno que en la actualidad se dedica
mucho esfuerzo en investigar cmo aumentar la eficiencia y las tasas de dicho
proceso en cultivos que tienen esa capacidad, como las leguminosas. Adems,
algunos cientficos estn experimentando para producir, por seleccin y modifi-
cacin gentica, nuevas asociaciones simbiticas para que los cultivos importantes
como cereales, que ahora no fijan nitrgeno, sean capaces de hacerlo. Si se tuviera
maz o trigo fijador de nitrgeno, el ahorro que se tendra en costo y esfuerzo al
no fertilizar con el elemento sera inestimable.
FIJACIdN SIMBIdTrCA DEL NITR6GENO. La primera indicacin de que las plantas
pueden fijar el nitrgeno del aire se obtuvo en 1833 por Boussingault, quien de-
mostr que' las leguminosas pueden aumentar el contenido de nitrgeno del suelo
En 1886 los fisilogos alemanes H. Hellriegel y H. Wilfarth demostraron quglas
bactepas que viven en los ndulos de las leguminosas eran las responsables del pro-
ceso: fas plantas sin ndulos o que crecan en suelo esterilizado eran incapaces de
fijar nitrgeno y no podan desarrollarse en un suelo deficiente de este elemento:
%as leguminosas son el grupo principal de plantas que fijan nitrgeno simbitica-
mente siendo el simbionte una bacteria del gnero Rhizobiourn":iertas plantas
\ I
208 METABOLISMO VEGETAL
no leguminosas tambin tienen ndulos con microorganismos que pueden fijar
nitrgeno. Por ejemplo: el aliso (Alnus spp.), el mirto de pantano (Myrica gale) y
el Hi ppophae rhamnoides. Los simbiontes que se encuentran en 10s ndulos de
estas plantas probablemente no son bacterias sino Actinomycetes.
con las plantas superiores incluyendo al helecho acutico Azolla, algunas herb-
ceas tropicales y algunas especies de cicadceas (una confera primitiva). En esta
ltima, una especie de Anabaena invade las races de la planta que entonces in-
vierte su polaridad geotrpica y crece para arriba, hacia la superficie del suelo
donde el simbionte fijador de nitrgeno puede llevar a cabo su fotosntesis (ver
tambin el Captulo 27, pgina 683).
El proceso de nodulacin es muy interesante y se ha estudiado mucho. Al
parecer, el primer paso es la produccin por la raz de una sustancia que parece
contener hormonas induciendo a los pelos radicales a encorvarse tomando una
forma retorcida. Es muy posible que en la invaginacin y destruccin parcial de la
pared celular del pelo radical tomen parte enzimas extracelulares producidas por
la bacteria. sta invade al pelo radical y se mueve en el interior de la corteza for-
mando una estructura filamentosa consistente en un material mucilaginoso del
que va embebida la bacteria. Las clulas corticales se dividen estimuladas por
el filamento infeccioso y de estas divisiones se forman clulas poliploides. Por lo
general hay tambin algunas clulas tetraploides en la corteza de cualquier raz
diploide normal. La estructura del ndulo se forma por divisiones repetidas de las
clulas poliploides. Las bacterias que infectan a las clulas del ndulo aumentan
mucho en tamao y en diversidad de forma y cesan de dividirse. Los bacteroides,
como ahora se denominan, casi llegan a llenar las clulas infectadas. El nhdulo
crece por divisin de las clulas hospederas y llega a estar bien provisto de tejido
vascular. En la Figura 8-1 se muestran diagramas que ilustran el proceso de in-
feccin; la apariencia tpica de una leguminosa bien nodulada se presenta en la
Figura 8-2.
El Rhizobium es especfico, al menos, para el gnero de la leguminosa (se
reconocen seis grupos diferentes). Para que la nodulacin tenga xito se necesita
una fuerte inoculacin de la bacteria. Los granjeros que practican la rotacin
de cultivos generalmente incluyen una leguminosa para mantener la fertilidad del
suelo, y es prctica comn inocular a la semilla o al suelo, al sembrar o poco
despus, con un cultivo del Rhizobium apropiado para asegurar el mximo bene-
ficio de un cultivo fijador de nitrgeno. La nodulacin y la fijacin del nitrgeno
son afectadas por el estatus de la planta respecto al elemento: es necesario que
haya un nivel mnimo de nitrgeno en el suelo en la germinacin para asegurar
que las plantas sean vigorosas; de ah en adelante la cantidad de nitrgeno fijado
es inversamente proporcional a la cantidad de nitrgeno fijado utilizable. Un nivel
apropiado de nutricibn de carbohidratos, y por lo tanto de fotosntesis, se nece-
sita tambin para una fijacin efectiva de nitrgeno ya que la energa para hacerlo
se deriva de la respiracin de los carbohidratos. El nitrgeno fijado en los ndu-
los se convierte en aminocido rpidamente, proceso que requiere esqueletos de
carbono que vienen de la actividad respiratoria. El nitrgeno orgnico se transfiere
a la planta hospedera por el xilema, en principio en forma de asparagina en las
leguminosas o de citrulina en el aliso.
Desde hace mucho tiempo se encontr que los ndulos efectivos contenan
un pigmento rojizo llamado leghemoglobina, que es similar a la hemoglobina de
los mamferos. Este pigmento parece funcionar como un transportador de oxge-
Algunas algas verde-azul que fijan nitrgeno se asocian simbiticamente
..
.-
.-
..
209
E
Figura 8-1. Iniciaci6n y estructura de los n6dulos en el chcharo.
A. Aglomeraci6n de Rhizobia alrededor del pelo radical.
B. El pelo radical se encorva.
C. Rhizobia infecta al pelo radical y se mueve a travds de 61 y de la corteza interna hasta que
D. Se distingue una regi6n central infectada y un meristem0 apical.
E. Corte longitudinal a traves del m6dulo mostrando la regi6n central infectada, el meristemo
Clave: ma. , meristemo apical; c., corteza; ep. epidermis; r.i., regin infectada; f.., filamento
de infeccin; e.n., endodermis del nduio; r.p., raz primaria; p.r., pelo radical; t., clula tetra-
ploide; xi., xilema.
(De W.D.P. Stewart: Nitrogen Fixation in Plants. Atholone Press. Londres, 1966. Con permiso.)
penetra en una dlula tetraploide. Esto estimula la actividad meristemltica.
apical y la endodermis del ndulo.
B
Figura 8-2. Apariencia tpica de races noduladas de (A) soja y (B) trebol. (De W.D.P. Stewart:
Ni t rogen Fi xat i on i n Plants. Athlone Press, Londres. 1966. Usado con permiso.)
METABOLISMO DEL NITROGEN0 211
no en el proceso de fijacin del nitrgeno en los ndulos. Probablemente es im-
portante en el metabolismo oxidativo que provee la energa necesaria para la
fijacin del nitrgeno, pero tambin podra funcionar protegiendo de los efectos
del oxgeno atmosfrico a la enzima fijadora de nitrgeno que es sensible al ox-
geno. No se encuentra en los fijadores de nitrgeno libres y parece ser un factor
ventajoso ms que esencial para la actividad de los ndulos.
FIJACIdN NO SIMBIdTICA DEL NITRGENO. El nitrgeno se fija en los microora-
nismos de vida libre de dos maneras importantes: como una reduccin fotosinttica
del nitrgeno por las bacterias fotosintticas o las algas verde-azul, y como un
proceso no fotosinttico que ocurre en ciertos microorganismos del suelo. Las
algas fotosintticas Anabaena y Nostoc pueden fijar el nitrgeno por una reaccin
esencialmente similar a la utilizada para fijar el dixido de carbono.?
'rDiversas bacterias sulfurosas verde o prpura, as como bacterias fotsint-
ticas no sulfurosas (por ejemploRhodospirilZum,Rhodopseudomonas, Chlorobium,
Chromatiurn), tambin pueden fijar nitrgeno usando energa lumnica. Estos
organismos no derivan electrones del agua como las algas verde-azul, sino de un
donador de electrones reducido como los sulfitos, los sulfuros, el hidrgeno o
compuestos orgnicos (ver Captulo 7, pgina 203). Muchos de estos organismos
parecen ser adems capaces de fijar nitrgeno en la oscuridadcuando se les provee
de donadores de electrones apropiados en estado de reduccin, de modo semejante
a la fijacin del nitrgeno pur bacterias no fotosintticas como Azotobacter o
Clostridium pasteuriunum. La fijacin de nitrgeno en las formas fotosintticas
responde a la luz, mientras que en las no fotosintticas se necesita un suministro de
carbohidratos u otros compuestos orgnicos que provean el poder reductor para
generar el ATP requerido'w La fijacin del nitrgeno se inhibe por el oxgeno, el
hidrgeno y ciertos intoxicantes como el CO. En general la presencia de compues-
tos orgnicos nitrogenados o de NH3 reduce fuertemente la fijacin de nitrgeno
molecular. 6
MECANISMO DE LA FIJACIdN NITROGENADA. Durante mucho tiempo no hubo
progreso en el conocimiento del mecanismo de la fijacin del nitrgeno o de los
intermediarios del proceso, porque result muy difcil obtener extractos libres de
clulas que fijaran nitrgeno. Entre las dcadas de 1950 a 1960, J.E. Carnahan y
su grupo, en los laboratorios de la Du Pont, aislaron los dos sistemas enzimticos
de C. pasteuriunum y recin entonces se lleg a entender con claridad el proceso.
Ha sido difcil encontrar los intermediarios nitrogenados porque estn totalmente
adheridos a las enzimas sin que se encuentren libres en las clulas y porque no
existe un istopo radioactivo satisfactorio del nitrgeno. El istopo estable 15N ha
dado cierta informacin valiosa pero las tcnicas de ensayo son complejas y me-
nos sensitivas que las de otros istopos radioactivos.
Las transformaciones y mecanismos de la fijacin del nitrgeno n no
estn totalmente entendidas. El amonaco parece ser el producto final. 9 Puede
verse en la Figura 8-3 qu2 los cultivos de Azotobacter utilizan el NH3 de inme-
diato cuando se les suministra, pero tardan bastante tiempo en utilizar el nitrato
(NO3-). %to sugiere que el NH3 es un compuesto nitrogenado que ocurre natural-
mente, en tanto que el organismo tiene que adaptarse para poder utilizar nitratos.
Cuando se suministra "Nz, el 15NH3 tiene el contenido ms alto del istopo, ma-
yor que en la glutamina, la asparagina o los aminocidos.+'
212 METABOLISMO VEGETAL
Nitrgeno amni co
0 6 -
Figura 8-3. Absorci6n de nitr6geno
marcado l 5 N, am6nico o ntrico por
Azotobacter vinelandii. (De W.D.P.
Stewart: Nitrogen Fixation in Plants.
/ A"
20 40 60 80 100 120 Athlone Press. Londres. 1966. Con
Tiempo, min permiso.)
La conversin de Nz a NH3 requiere la adicin de seis electrones y seis iones
hidrgeno por molcula de Nz reducido. Esto se lleva a cabo por la transferencia
del poder de reduccin en la enzima nitrogenasa que cataliza la reaccin. La fuen-
te de electrones puede ser la transferencia respiratoria de stos o la fotosntesis
en los fijadores de nitrgeno auttrofos o el fraccionamiento fosforoclstico
(insercin de una molcula de fosfato) del piruvato.
piruvato + Pi + Acetil-P + COZ + 2H' + 2e-
La transferencia de electrones a la nitrogenasa en las plantas superiores no
se entiende claramente, pero se piensa que es por medio del NADH y la ferrodo-
xina, una enzima con hierro no-heme que tambin funciona en el transporte de
electrones de la fotosntesis'(ver Captulo 7). En varios microorganismos se co-
nocen otros donadores de electrones, y se puede hacer funcionar a las preparacio-
nes de enzimas aisladas con varios sistemas artificiales de donadores. El NADPH
podra estar involucrado en la fijacin fotosinttica del nitrgeno.
La conversin, propiamente dicha, del N, al NH3 tiene lugar en la super-
ficie de la nitrogenasa, un complejo enzimtico que parece contener molibdeno
y hierro en su sitio activo. Parece que el N, se liga a ambos metales en el sitio
activo y luego se reduce a NH3 segn la secuencia.
diimida hidrazina
METABOLISMO DEL NITROGEN0 213
H+
\
1 I
H+
N- N
/
" M 0
vFe
Figura 8-4. Sitio hipot6tico de reaccin de la nitrogenasa. El sitio activo
est en una hendidura de la superficie de la enzima, as que solamente
pequeas mol6culas pueden tener acceso a 61. El espacio entre los tomos
de Mo y Fe es variable y acomoda al enlace de longitud cambiante entre
los dos tomos de nitrgeno cuando se reducen. Los electrones pueden adi-
cionarse simples o en pares. (Adaptado de R.C. Burns y R.W.F. Hardy:
Nitrogen Fi xat i on in Bacteria and Higher Plants. Springer-Verlag, Nueva
York, 1975.)
Figura 8-5. Esquema del metabolismo asociado con la fija-
cin del nitrbgeno.
Fotoslntesis ~Car bohi dr at os
/
Glic6lisis
Amino-
cidos
214 METABOLISMO VEGETAL
Fotoslntesis Carbohidratos
Respiraci6n
t
I NADH or NADPH
J
NO~--"-NO~-NH~-
Nitrato Nitrito
reductasa reductasa
f
Siroheme de>
a ferredoxiiia
,Amino-
cidos
Figura 8-6. Un esquema general del
metabolismo asociado con la reduc-
cibn del nitrgeno.
Estos intermediarios no se encuentran libres, pues son lbiles y extremada-
mente txicos, sino adheridos al complejo enzimtico. Por razones que no estn
claras, la reaccin de reduccin requiere la hidrlisis del ATP; el ATP requerido
es generado por el metabolismo oxidativo (por ejemplo, por oxidacin del piru-
vato en el ciclo de Krebs). Esto ocurre en los tejidos de los ndulos. La transferen-
cia de O2 puede ser facilitada por la leghemoglobina. Un modelo hipottico del
sitio activo se presenta en la Figura 8-4 y un esquema generalizado de las reaccio-
nes de fijacin del nitrgeno se da en la Figura 8-5.
La nitrogenasa es capaz de utilizar otros substratos que contengan enlaces
trip S adems del N2 (N-N), incluyendo al N20, nitrilos tales como HC=N o
C 8 3-C-N, y alkinos como acetileno (CH-CH) que se reduce a etileno (CH2 =CH2 ).
Esta ltima reaccin provee de una magnfica prueba de campo y laboratorio de
la reduccin del N2 . La medicin directa de la reduccin del N2 es imposible. La
utilizacin de "N (que es la prueba final de que el N2 se ha reducido) es una tc-
nica cara y dificultosa que requiere el uso de un espectrmetro de masa y no se
adapta con facilidad para usarse en el campo. Pero la reduccin del acetileno
se mide fcilmente y con gran sensibilidad porque el etileno puede detectarse por
bioensayos (Captulo 23) o por la cromatografa de gases. Esto permite un rpido
anlisis tanto en el campo como en el laboratorio lo que es un desarrollo impor-
tante en la inacabable bsqueda de sistemas de cultivo ms productivos.
Un punto importante que se pone de manifiesto en la Figura 8-6 es la rela-
cin entre la demanda de fotosintetizado y la fijacin del nitrgeno. Si la planta
fija mucho nitrgeno le faltar carbohidrato para su crecimiento y el resultado
ser igual que si le faltase nitrgeno: quedar desmedrada. Esto enfatiza la impor-
tancia de un balance bien regulado entre fotosntesis, crecimiento y fijacin de
nitrgeno.
REDUCCIN DEL NITRATO
MECANISMO DE REDUCCIdN DEL NITRATO. El NH3 producido por la fijacin del
nitrgeno o por la fertilizacin se convierte rpidamente en nitrato por la accin
METABOLISMO DEL NITROGEN0 215
de las bacterias del suelo, as que la mayor parte del nitrgeno til para la planta
est en forma muy oxidada de ion nitrato (NO,-). Dado que casi todos los com-
puestos orgnicos nitrogenados contienen o se constituyen por nitrgeno comple-
tamente reducido (NH,), la planta debe reducir los nitratos para poderlos utilizar
en las sntesis orgnicas. Como sucede en la fijacion del nitrgeno, el estudio de
los intermediarios de la reduccin del mismo ha sido difcil por la dificultad en
aislar las enzimas de las hojas y por la naturaleza txica de los estados intermedios.
Para convertir NO3- a NH3- se deben adicionar ocho electrones por mol-
cula. Se sugirieron muchos compuestos intermediarios posibles y la serie ms pro-
bable es la siguiente
NO,-
+ NO2-
-f N20z * - + NH20H + NH,
nitrato nitrito
hiponitrito
hidroxilamina amonaco
en la que cada paso se lleva a cabo transfirindose dos electrones. No obstante,
solamente se requieren dos enzimas para efectuar esta reduccin. La primera es
la nitrato reductasa, que cataliza la conversin de nitrato a nitrito (NO,-). Luego
el nitrito se reduce hasta dar amonaco por la nitrito reductasa sin que aparezca
(o se libere) ningn intermediario identificable.
Sobre la nitrato reductasa se tienen muchos datos. La reduccin de nitrato
se efectfia a expensas de la oxidacin del NADH y del NADPH, acoplados a la
reductasa por el FAD, una enzima con molibdeno.
Sobre la nitrito reductasa se conoce menos. La enzima parece ligarse con la
ferredoxina en ciertos tejidos pero en las races algo de la reduccin se produce
a expensas del FMN. El metal funcional es probablemente hierro. Recientemente
se aisl a partir de plantas y de bacterias una porfirina con hierro denominada
siroheme. Este agente transportador de electrones es capaz de mediar toda la re-
accin de la nitrito reductasa desde NO2- hasta NH, .
Adems de la nitrito reductasa que convierte al NO2- hasta NH3 , se han
descrito en algunas plantas reductasas que reducen el xido ntrico (NO) o a la
hidroxilamina (NH20H). Pero la asociacin de estas enzimas con las transformacio-
nes normales de la reduccin de los nitratos no ha sido demostrada. Estos inter-
mediarios son tan txicos que no es probable que se encuentren libres en la clula
como componentes de una va metablica importante.
LA REDUCCrdN DEL NITRATO Y EL METABOLISMO. (Ver Figura 8-6). La energa y
el poder reductor para la reduccin de los nitratos debe derivarse del metabolismo
fotosinttico o del oxidativo, frecuentemente por respiracin de los carbohidra-
tos. Adems, cuando se reducen grandes cantidades de nitratos el amonaco re-
sultante debe combinarse rpidamente con esqueletos de carbono para formar
compuestos orgnicos nitrogenados, de otro modo se acumularan cantidades
txicas de amonaco. As, la acumulacin masiva de nitrato puede sobrecargar
216 METABOLISMO VEGETAL
demasiado la capacidad fotosinttica y las reservas de carbohidratos de la planta,
dando como resultado un crecimiento vegetativo excesivo o desmedrado.
La reduccin del nitrato es fuertemente estimulada por la luz. Las enzimas
reductoras a menudo se han encontrado ligadas al NADPH. Pero, aunque se cree
que la nitrito reductasa se localiza en los cloroplastos, se sabe que la nitrato re-
ductasa est presente en el citoplasma. En muchas plantas el COZ y el nitrato
compiten por el poder reductor, particularmente a intensidades lumnicas limi-
tantes. En altas intensidades lumnicas es muy probable que la adicin de nitrato
a una clula u hoja en fotosntesis aumente la evolucin de oxgeno. Todas estas
evidencias indican que la energa de reduccin generada en la fotosntesis se uti-
liza directamente para reducir los nitratos y nitritos. Esto no siempre es preciso
pues muchas plantas reducen nitratos en la raz y muchos organismos no foto-
sintticos pueden reducir nitratos y nitritos. Adems, esas reducciones pueden
ocurrir en la oscuridad en los organismos fotosintticos.
En algunos organismos se encontr que la reduccin fotosinttica del ni-
trato no se lleva a cabo en ausencia de COZ. Esto sugiere la necesidad de un
metabolismo de los carbohidratos concomitante, aun cuando todo o parte del
poder reductor se derive directamente del NADPH o de la ferredoxina reducidos
en la fotosntesis. Es posible que la reduccin de los nitratos y nitritos requiera
ATP, que podra derivarse de la respiracin, adems de requerir nucletidos de
piridina reducidos. Hay evidencias que indican que la reduccin de los nitratos
puede ser muy estimulada por la luz azul. Los pigmentos de flavina absorben
luz azul y es posible que las flavinas se reduzcan fotoqumicamente, o que las
enzimas flavoprotenas necesiten activarse por la luz para su mxima eficiencia
operativa.
La nitrato reductasa es fuertemente inducida por la luz, por la presencia
de nitrato y, en algunas plantas, por ciertas hormonas como el cido giberlico y
las citocininas. A diferencia de muchas enzimas, las que median la reduccin de
nitratos y nitritos no parecen inhibirse por su producto final, el NH3 . Por otra
parte el aumento de NH3 en las clulas reduce la actividad de la nitrato reduc-
tasa porque inhibe la produccin de NADPH o NADH.
Un esquema que resume el proceso de reduccin del nitrato se presenta
en la Figura 8-6, remarcando las posibles relaciones entre la fotosntesis, la res-
piracin y la reduccin del nitrato.
ABSORCIdN DE NITRdGENO POR LA PLANTA
Las plantas absorben nitrgeno en cuatro formas importantes: como nitrato, en
forma amnica, como compuesto orgnico (por ejemplo, aminocido) y como
urea. El nitrato es la forma ms abundante de nitrgeno utilizable y la fuente
ms importante para ellas. El amonaco es a veces relativamente abundante, por
ejemplo, donde est ocurriendo fijacin de nitrgeno o en suelos hmedos ana-
erobios. Sin embargo, el amonaco es txico, y su absorcin en grandes cantidades
puede imponer un esfuerzo severo al metabolismo de los carbohidratos que pro-
veen los esqueletos de carbono para desintoxicarse. El nitrgeno orgnico, gene-
ralmente en la forma de aminocidos, puede tornarse til para las plantas debido
a la muerte y putrefaccin de la materia vegetal o animal. Bajo estas circunstan-
cias las plantas compiten con las bacterias por el nitrgeno, que normalmente es
convertido por stas en nitrgeno molecular (N2 ) o en nitrato en el curso de su
METABOLISMO DEL NITROGEN0 217
metabolismo. Normalmente el nitrgeno orgnico no constituye una fuente im-
portante del elemento para las plantas. Igualmente, por lo general la urea no es
importante, pero se ha encontrado que es un efectivo fertilizante que puede apli-
carse en aspersin foliar. La urea se absorbe por las hojas y as puede aplicarse a
bajo costo a los cultivos junto con los plaguicidas. En esta forma el desperdicio
de fertilizante absorbido por malezas o que se lava en el suelo, problema impor-
tante hoy da en la fertilizacin nitrogenada (ver Captulo 30), se reduce mucho.
NI TR~GENO INORGANICO. Las races absorben los nitratos y ah son reducidos, o
bien son llevados a reducirse en las hojas. Muchas plantas, como el tomatero, nor-
malmente reducen los nitratos en la raz, a menos que el suelo est muy fro,
entonces los transportan a la parte area de la planta. En otras plantas, como en
los pastos, normalmente el nitrato es llevado a las hojas donde puede acumularse
en grandes cantidades, y se reduce conforme se necesita. La reduccin de los ni-
tratos generalmente es ms rpida durante el da que de noche a causa de la dispo-
nibilidad de substrato con carbono y del poder reductor de la fotosntesis.
El amonaco es usado por muchas plantas y en forma preferente por unas
pocas. Las que son capaces de absorberlo en grandes cantidades incluyen muchas
de suelos cidos como Rumex, que pueden desintoxicarse del amonaco formando
sales amoniacales de cidos orgnicos. Algunas otras, conocidas como plantas
mi da (remolachas, espinacas y calabacitas) son capaces de formar cantidades gran-
des de las amidas glutamina o asparagina. Estos compuestos se forman a partir de
los aminocidos dicarboxlicos correspondientes como se muestra a continuacin.
COOH COOH
ATP I
HCNH, HCNH, + H,O
I asparagma I
CH,
I I
I
sintetasa CH,
COOH + NH, C==O
cido asprtico
NH,
asparagina
COOH
I
C" 2
I I
I I
I
COOH
ATP I
glutamina 1
sintetasa CH,
CH, CH,
HCNH, HCNlH, + H,O
COOH + NH, c=o
NH,
cido ghtmico glutamina
Los detalles de estas reacciones se describirn ms adelante (pgina 227).
La escarola o la remolacha, por ejemplo, pueden soportar concentraciones bastan-
te altas de sales de amonio desintoxicndose del amonaco por la elaboracin de
grandes cantidades de glutamina. Bajo circunstancias similares las hojas de trigo
21 8 METABOLISMO VEGETAL
usan el carbono de los azcares disponibles para elaborar asparagina. Las plantas
que no acumulan glutamina pueden, no obstante, utilizar esta reaccin para acu-
mular nitrgeno orgnico transfiriendo directamente el nitrgeno de la amida al
cido cetoglutrico para hacer cido glutmico. Esta reaccin se describe en la
pgina 220).
Cuando se suministran iones amonio (NH,) y nitrato (NO3-) en solucin
nutritiva, algunas plantas toman el anin o el catin dependiendo del pH. Si la
solucin nutritiva es bsica tomarn NH4+ eliminando H+ al intercambiarlo, por
lo que bajar el pH al formarse cido ntrico (HN03) con el nitrato restante. ln-
versamente, si el pH es cido, absorbern NO,- eliminando OH -al intercambiarlo,
por lo que subir el pH al formarse hidrxido de amonio (NH40H). Las plntulas
y plantas muy jvenes tienden a absorber NH4+ en forma diferente, en tanto que
las maduras absorben NO,-. Esto puede estar relacionado con la mayor abundan-
cia de carbohidratos y poder reductor en la planta madura con activa fotosntesis.
Ciertas plantas como el arroz, que viven en suelos pantanosos anaerobios, requie-
ren NH3 o fertilizantes con nitrgeno orgnico reducido y no pueden vivir sola-
mente con nitratos.
NITRdGENo ORGANICO. En la dcada de 1940 se descubri que la urea poda ser
absorbida por las plantas directamente por la hoja tanto como por la raz. Parece
probable que la urea se hidrolice directamente hasta NH3 y COZ por la reaccin
medida por la ureasa.
o
I 1 ureasa
C-HN, + H,O - 2 NH, + CO,
urea amonaco
Las plantas a que se aplic urea marcada con C o CO, mostraron la mis-
ma distribucin al incorporar el carbono. La urea puede incorporarse directamente
(por ejemplo condensndose con la ornitina para formar arginina). Tambin se ha
sugerido que la urea puede convertirse directamente en carbamil fosfato, un pre-
cursor de las pirimidinas y del aminocido citrulina.
O
I I
O
I I
NH,-C-NH, + Pi - NH,-C-O-P + NH,
urea carbamil fosfato
El nitrgeno orgnico en la forma de aminas o aminocidos puede ser ab-
sorbido y utilizado y muchas plantas se benefician con su aplicacin. Sin embargo,
ciertos aminocidos pueden ser txicos en cantidades grandes. Los cultivos de
clulas o de embriones vegetales a menudo requieren fuentes de nitrgeno espe-
cficas, tales como asparagina, glutamina, glicina u otros aminocidos. Las plan-
tas carnvoras como la pingiicola, la atrapamoscas o las jarritas indudablemente
utilizan los productos de degradacin de las protenas de los insectos que atrapan.
En 1829 se advirti que nutriendo diariamente a una planta atrapamoscas con
tirillas de carne de res, se desarrollaba mucho mejor.
METABOLISMO DEL NITRdGENO 219
AMINOACIDOS
Los aminocidos son los ladrillos con que se construyen las protenas, y en las
plantas tienen diversas funciones adicionales en la regulacin del metabolismo y
el transporte y almacenaje de nitrgeno (ver Captulo 2, pginas 34-38 y Figura
2-7). Los aminocidos pueden formarse: 1) directamente de amonio y los esque-
letos de carbono apropiados; 2) por transaminacin a partir de aminocidos ya
existentes, o 3) por modificaciones o cambios en el esqueleto de carbono de ami-
nocidos ya formados. Algunos aminocidos comunes se forman por ms de un
camino y muchas de estas transformaciones an no se conocen. Parece probable
que se asocian vas metablicas especficas con actividades o condiciones fisio-
lgicas particulares de la planta, como el estado nutricional, el crecimiento o el
desarrollo. Este punto se explicar ms adelante en este captulo (pgina 229).
Se requieren muchas reacciones bioqumicas complejas para la biosntesis y el
metabolismo de los aminocidos; consideramos aqu los principales.
FORMACI~N DE NITROGEN0 ORGANICO. Hay dos vas principales de entrada del
NH3 a las uniones orgnicas. La primera es la va de aminacin reductiva; la se-
gunda, la de la desaminacin oxidativa. En esta va la reaccin importante es la
formacin de cido glutmico a partir del cetocido correspondiente, el a-ceto-
glutrico.* La reaccin est catalizada por la deshidrogenasa del cido glutmico
El primer paso es la aparente reaccin espontnea del ceto cido con el NH3 para
formar cido a-iminoglutrico que luego es reducido al cido a-amino bajo la
influencia de la enzima.
COOH COOH
c=o
CH, + NH, "+CH,
HZ0
I I /
COOH
I
I I
I I deshidrogenasa del I
CH,
I I I
CH, cido glutmico CH,
COOH COOH COOH
cido &ido
wetoglutrico cY"iminog1utrico
cido glutmico
Esta es la nica reaccin de esta clase que ha sido bien comprobada. Se
han sugerido reacciones paralelas que llevaran a la formacin de alanina a par-
tir de piruvato y de aspartato a partir del oxaloacetato. El fisilogo ruso V.L.
Kretovitch ha encontrado que ciertos tejidos y homogenados vegetales respon-
den enrgicamente a la adicin de piruvato y NH3 sintetizando alanina, pero no
puede desecharse la posibilidad de la aminacin del a-cetoglutrico y su transa-
minacin con piruvato.
La va de sntesis del grupo amino por la deshidrogenasa glutmica no es
muy satisfactoria porque tiene una afinidad por el NH3 ms bien baja, y su tasa
de reaccin es lenta para un paso metablico tan importante. Una enzima des-
*Tambin llamado cido 2-oxoglutrico.
220 METABOLISMO VEGETAL
cubierta recientemente, la sintetasa del cido glutmico, resuelve estos proble-
mas ya que tiene una alta afinidad por el NH3 y reacciona con la velocidad reque-
rida. Se acopla con la glutamina sintetasa para hacer cido glutmico por la re-
accin siguiente:
ADP + Pi NADH:
y cido
glutamina cido a-cetoglutmico
NH, glutmico cido glutmico
ATP NADf
glutamina
sintetasa del
sintetasa
cido glutmico
La fuente del poder reductor para la sintetasa del cido glutmico puede
ser el NADH como se ve, o ferredoxina en tejidos fotosintticos. La reaccin
neta es la conversin de cido a-cetoglutrico y NH3 en cido glutmico; se ne-
cesitan solamente pequeas cantidades de glutamina.
NH, + cid0 a-cetoglutrico + ATP + NADH2+
glutamina
+
cido glutmico + ADP + Pi + NAD'
Esta secuencia se asocia con la fijacin del nitrgeno y estas enzimas, ms
que la glutamato deshidrogenasa, se encuentran comnmente en los organismos
fijadores de nitrgeno.
El cido asprtico puede sintetizarse por reaccin de la aspartasa que adi-
ciona NH3 a la doble ligadura del cido fumrico de manera anloga a la sntesis
de malato por adicin de agua a la doble ligadura del cido fumrico.
COOH
CH
CH
COOH COOH
cido fumrico cido asprtico
I
/ I +NH,- 1
I
COOH
aspartasa HC-N Hz
CH,
La reaccin fue descubierta en las bacterias; se ha encontrado en las plntu-
las y hojas de las plantas verdes pero no parece probable que sea una va impor-
tante de entrada del NH, en unin orgnica.
TRANSAMINACI6N. En esta importante reaccin, el grupo amino de un aminocido
es transferido a un cetocido para formar un nuevo aminocido. Las enzimas que
catalizan esta reaccin se llaman transaminasas o aminotransferasas. La coenzi-
ma de esta reaccin es el piridoxal fosfato que participa en la reaccin del modo
siguiente:
METABOLISMO DEL NITROGEN0
221
aminocido 1
y b
I
aminocido 2
R,-C-COOH
H
piridoxal (=O) R,-C-COOH
fosfato
I
enzima I
(transaminasa)
I A B
8 A
I I J \
R,"C"COOH piridoxamina (-NH,)'
\ R,-C-COOH
cwetocido 1 fosfato a-cetocido 2
Como ejemplo especfico
COOH COOH
Hh-NH, CooH alanina c=o COOH
I - 1 aminotransferasa I I
CH, + C=O - CH,
+ HC-NH,
I I
CH, CH, CH2
CH,
COOH COOH
cido
cido glutmico pirvico cido a-cetoglutrico alanina
El resultado final es la transferencia del grupo amino del aminocido 1 al
cetocido 2 con la formacin de aminocido 2. El donador del amino ms gene-
ralizado es el cido glutmico. Las transaminasas ms activas de las plantas son las
cido glutmico-cido actico (asprtico sintetasa) y la cido glutmico-piruvato
(alanina sintetasa, recin ilustrada). Algunas transaminasas son completamente
especficas respecto al donador o aceptor de nitrgeno.
Dado que muchas de las enzimas no se han aislado en forma pura, no est
claro cul es exactamente su especificidad o si las enzimas no especficas de hecho
son mezclas de enzimas. Se sabe que hay actividad de la transaminasa entre el
cido glutmico y al menos 17 18 a-cetocidos y se sospecha de varios otros
incluyendo a-, p- y y-cetocidos. Por tanto es posible que todo un rango de ami-
nocidos pueda elaborarse por transaminacin del cido glutmico. El cido as-
prtico y la alanina tambin son efectivos amino donadores y es probable que
otros participen en menor grado. Se ha encontrado que el aminocido no-proteico
7-aminobutirato es un activo donador en la transaminacin.
TRANSFORMACIONES DEL CARBONO. Muchos aminocidos se forman de los ami-
nocidos preexistentes por modificacin de su esqueleto de carbono bsico o por
la sustitucin de varios grupos en su cadena de carbonos. La formacin de ciertos
aminocidos requiere la sntesis de los a-cetocidos apropiados, a menudo por
reacciones similares o paralelas, antes que de la sintesis de aminocidos por tran-
saminacin.
Los tipos caractersticos de las reacciones se enumeran a continuacin.
222 METABOLISMO VEGETAL
l. Descarboxilacin: ejemplo
COOH
I
HCNH,
I
-3 I + co,
H,CNH,
( p , ( p 2
COOH COOH
cido glutmico cido y-aminobutrico
2. Reduccin : ejemplo
COOH COOH
I
COOH COOH
CH,
I
I
I I I I
CH,
I
I
HCNH, --+ HCNH, -+HCNH, -+HCNH,
I ?HZ ?Hz
c c c
,CH,
O OH o OP O H OH
cido asprtico p-aspartil semialdehdo homoserina
fosfato asprtico
3. Oxidacin: ejemplo
OH
I
+ I I
CH,-CH,
C\H2 ,CH,COOH C\H2 ,CH-COOH
I
CH-CH,
N
H
>N
H
prolina hidroxiprolina
4. Sustitucin: ejemplo
COOH COOH
HCNH, 4 HCNH,
I I
I I
CH, CH,
I
OH SH
serina cistena
5. Transferencia interna de grupo: ejemplo
COOH COOH
HCNH, - HCNH,
CH, HCOH
I
H,COH CH,
homoserina treonina
METABOLISMO DEL NITROGEN0
223
6. Condensacin: ejemplo
COOH
H
COOH
I
H,CNH, + -C=O 4 HCNH,
I
H,COH
glicina derivado serina
formaldehdo
Las condensaciones que involucran donadores tales como la acetil-COA
son importantes en la sntesis de varios aminocidos de cadena larga o de cadena
ramificada.
7. Formacin de anillo: ejemplo
CH,-CH, CH,-CH,
I I I
CH,---CH,
HOOC H/C-COOH -+O=CH HC-COOH *
H,N H,N
H
cido glutmico semialdehdo
glutmico
prolina
Estas son reacciones generalizadas y se conocen muchas secuencias parale-
las que llevan a otros aminocidos a sus precursores a-ceto.
La extensa investigacin que se hizo ya hace tiempo en Eschericha coli
por el bacterilogo americano P.H. Abelson y sus colaboradores, mostr que en
ese organismo hay grupos o familias de aminocidos derivados de un precursor
o jefe de familia; por diversas reacciones en ese organismo y subsecuentes expe-
rimentos mostraron que sucede lo mismo en las plantas superiores. Los experi-
mentos tpicos se han efectuado suministrando un aminocido marcado con 14C y
determinando los compuestos que resultan marcados. Todos deben haber deri-
vado del precursor suministrado. Los compuestos con actividades especficas
superiores se derivan ms directamente que los compuestos con actividades
especficas inferiores.
Los puntos de ramificacin en las cadenas se pueden detectar por experi-
mentos de competencia interna. En esta tcnica se suministra un precursor mar-
cado en experimentos paralelos, sea solo o junto con el compuesto no marcado
que se sospecha que est en el punto de ramificacin o justamente antes. Todos
los compuestos derivados de la ramificacin que incluye el que se suministr sin
marcar tendrn sus actividades especficas reducidas (es decir, estarn diluidos)
en l a s muestras que recibieron del competidor no radioactivo. Esta tcnica se
ilustra en la Figura 8-7.
Las vas de sntesis de muchos grupos de aminocidos se trabajaron en
detalle y se conocen las reacciones con precisin. Otras se conocen slo parcial-
mente o bien se conocen las transformaciones del carbono sin que se hayan estu-
diado in vitro las reacciones especficas. Ya que se pueden hacer los mismos
aminocidos por ms de una va por medio de diferentes intermediarios, la rela-
224 METABOLISMO VEGETAL
cin familiar a veces es ligeramente confusa. Las principales relaciones se presen-
tan en la Figura 8-8. Debe reconocerse que bajo ciertas circunstancias y en ciertos
organismos pueden tenerse esquemas algo diferentes. Sin embargo, los que aqu
se muestran pueden considerarse generales. La importancia del concepto de fa-
milia es porque deben existir mecanismos bioqumicos de regulacin que contro-
len el flujo del carbono hacia cada una de las diversas vas. La prdida de balance
de este sistema de regulacin bioqumica trae consigo serios problemas en el meta-
bolismo.
Las posibles secuencias de reacciones con los compues-
tos A, B y C son:
o bien ( 1 ) A + B + C
I
B
o bien (2) A ir
Y C
Pregunta: Cul es la va operativa?
Solucin: Suministrar A radioactivo, con o sin sumi-
nistro adicional de B no marcado.
Si ( 1) es cierto: la adicin de B no marcado va a diluir
la marcacin que entra a C. y C tendr una actividad
especfica ms baja cuando se adiciona B no marcado.
Si (2) es cierto: la adicin de B no marcado no afecta-
~i~~~~ 8-7. Experimento de competen-
r la radioactividad de C.
ci a de idtopos para determinar una
v a metabblica.
ALGUNOS ESQUEMAS METAB6LICOS. Por lo general los aminocidos no toman
parte en actividades metablicas tan importantes como el ciclo de Krebs o la gli-
clisis, como es el caso de los cidos orgnicos, porque la funcin especial de los
aminocidos en la clula es la transformacin y metabolismo del nitrgeno, no
de la energa. Sin embargo hay varias cadenas biosintticas o metablieas que
incluyen compuestos nitrogenados, adems de las vas de sntesis y degradasin
de aminocidos. Ya se mencion la sntesis de azcar por la va del glicolato, donde
toman parte glicina y serina (ver pgina 186 y Figura 7-15). Se ha sugerido tam-
bin que tanto el aspartato como el malato o el oxaloacetato pueden actuar como
los cidos C, transportadores de carboxilo en la va fotosinttica de Hatch y
Slack (ver Figura 7-19). Otro sistema metablico que incluye aminocidos es el
ciclo de la ornitina que fabrica urea en los animales (Figura 8-9). En las plantas
tambin se conocen todas estas reacciones pero no est claro si en ellas funciona
realmente el ciclo.
La metionina tiene relacin con las reacciones de transmetilacin en la sn-
tesis de compuestos metilados (por ejemplo timina, fenoles metilados, alcaloides,
lignina, etc.). El triptfano es un precursor de la hormona del crecimiento, el
cido indolactico, por prdida de su grupo amino por transaminacin y descar-
boxilacin de la cadena lateral que pasa de piruvato a acetato. La prolina y la
hidroxiprolina tienen una relacin interesante. La hidroxiprolina no se forma
en estado soluble en las plantas y es, de hecho, bastante txica. La prolina se in-
corpora primero en las protenas y luego es convertida en hidroxiprolina tomando
parte en las ligaduras internas por enlaces dbiles que coadyuvan a establecer la
estructura terciaria de las protenas.
METABOLISMO DEL NITRdGENO 225
AMIDAS
Las dos amidas, glutamina y asparagina, juegan un papel central en el metabolismo
del nitrgeno de las plantas. Tanto los grupos amino como los amido de la gluta-
mina y asparagina se involucran en muchas reacciones especficas y generales del
nitrgeno. Las amidas son compuestos importantes de almacenaje y transporte
de nitrgeno pueden alcanzar concentraciones extremadamente altas bajo cir-
cunstancias apropiadas. La glutamina y la asparagina son homlogos que al parecer
difieren solamente por un carbono en la cadena; sin embargo, no se comportan
como tales. Se ha sugerido que la estructura qumica de la asparagina no est
representada correctamente por la frmula estructural usada comnmente pero
no hay datos experimentales que fundamenten otras alternativas.
Figura 8-8. Relaciones metablicas de los aminocidos. Las "familias" ms importantes estn
encerradas por lneas punteadas y los compuestos principales de la familia estn en negritas.
Los aminocidos estn en maysculas y los otros compuestos en tipo comn.
r-- -
"
/
-"""" I
226
METABOLISMO VEGETAL
Figura 8-9. Ciclo de la ornitina.
cido glutmico
YOOH
HCNH,
I
COZ +NH, +ATP
COOH
i
I
I
CHNH,
HzO,P-O-C-NH2 CH,
I I I
O CH,
I
CH,
I
I
Carbamil-fosfato
L
NH
c=o
*
ADP
c=o
Ornitina
I
NH2
I
Urea I
COOH
I
I
HCNH,
Guanidina C=NH
I
COOH I
HCNH, I
I H,NCH
I COOH
CH,
cido asprtico
Fumarato CH2 'OoH
I t
NH CH,
/ H I
C--N-CH
1 I
I I
NH2 NH COOH
Arginina Argininosuccinato
Sin embargo, la glutamina y la asparagina difieren ampliamente bioqumica
y fisiolgicamente, sin que est clara la razn para ello. La asparagina es ms bien
insoluble en agua; la glutamina es muy soluble. La asparagina es estable y requiere
calentarse en solucin moderadamente cida para hidrolizarse; la glutamina es
muy inestable, se hidroliza lentamente a la temperatura del laboratorio y sufre
total hidrlisis hasta cido glutmico en agua hirviente o en soluciones cidas di-
luidas. La relacin de la ninhidrina, utilizada para visualizar los aminocidos en
los cromatogramas y en los anlisis cuantitativos por colorimetra, es muy dife-
rente entre la asparagina y la glutamina. La glutamina libera dixido de carbono
y da color prpura como la mayora de los aminocidos, en tanto que la asparagi-
na no libera dixido de carbono de inmediato y da color caf similar al de la
prolina y otros aminocidos cclicos. No hay una explicacin satisfactoria para
estas diferencias qumicas pero podran estar relacionadas con las diferencias
biolgicas entre las dos amidas.
METABOLISMO DEL NITR6GENO 227
SINTESIS. La glutamina proviene del cido glutmico con NH3 por la enzima glu-
tamina sintetasa (como se colige del nombre, las sintetasas median las reacciones
de sntesis). La energa para la sntesis se deriva de la hidrlisis del ATP y se re-
quiere h4g2+, Coz+ o Mn2+. La reaccin puede representarse como sigue.
COOH
I
COOH
I
HCNH, HCNH,
I MgZ+
CH, + NH, + ATP .
I
I
CH, + ADP + Pi
glutamina I
sintetasa
cido glutmico glutamha
No se conoce el mecanismo exacto de la reaccin, se ha sugerido un deri-
vado enzimaglutamil sintetizado a travs de un intermediario enzima-fosfato,
pero la nica evidencia que hay es la de la participacin en la reaccin del glu-
tamil fosfato. La conversin enzimtica de glutamina a cido glutmico requiere
ADP y Pi al igual que la reaccin de transferencia del glutamil que reemplaza al
grupo amida en la glutamina.
COOH COOH
HCNH, HCNH,
I
M%+, ADP, Pi I
CH, + l5NH, .
I
CH,
I
CH,
I
c
OH NH,
COOH COOH
HCNH, HCNH,
CH, + NH,OH . .- CH,
ME. ADP, Pi
I
I
y 2
hidroxilamina
y 2
c
oH \NH,
\ /
C H
N\
O H
lo cual indica que la reaccin ATP * ADP est fuertemente ligada a la sntesis
del enlace amida.
La enzima correspondiente que hace asparagina a partir del cido asprtico
ha sido difcil de encontrar e investigar. Los extractos libres de clulas, prepara-
dos a partir de plntulas de trbol o embrin de trigo catalizan la reaccin,
228 METABOLISMO VEGETAL
COOH
I
COOH
HCNH, asparagina HCNH,
Mg2+ I
(:HZ + NH, + xrP ~
sintetasa
A
CH, + ADP + Pi
C C
ON OH o/ NH,
cido asprtico asparagina
pero la actividad enzimtica es mucho menor que para la glutamina sintetasa. Hay
suficiente evidencia, tanto por experimentos con istopos utilizando como substra-
to aspartato marcado especficamente, como estudiando el balance entre la prdida
de cido asprtico y la aparicin concomitante de asparagina, de que mucha aspa-
ragina se forma por otras transformaciones. Ahora se han demostrado otras vas
adicionales.
Varias plantas, particularmente las que tienen un activo metabolismo de cia-
nuro (CN) y alto contenido en cianoglicsidos, como el lino (Linurn usitutissimurn),
sorgo (Sorghum uulgure), trbol (Trifolium rapens) y chcharo de olor (Luthyrus
odoratus), son capaces de incorporar al HCN en la asparagina por la reaccin
COOH
I
I
CH, CH, CH,
COOH COOH
HqNH, + HCN - HCNH, > HCNH,
i I l 2 0
S ti C GN
oJ-
cistena p-cianoaianina asparagina
Se ha sugerido (sin verificacin experimental) que la formacin de aspara-
gina por condensacin C, + C3 puede ser general.
METABOLISMO. En ciertas plantas, por ejemplo en semillas de trbol lupino en
germinacin, la asparagina se deriva en grandes cantidades directamente de las pro-
tenas y de la amidacin del cido asprtico que viene de la hidrlisis proteica.
Algo de ella puede provenir del cido asprtico recin sintetizado a partir de los
cidos del ciclo de Krebs. Hay evidencia de que en las races del chcharo la aspa-
ragina se puede sintetizar a partir de los cidos de cuatro carbonos que vienen de
la carboxilacin del piruvato o fosfoenol piruvato y, raramente, en circunstancias
especiales (por ejemplo en hojas de trigo faltas de nutrientes) se puede derivar en
grandes cantidades a partir de los productos metablicos de los azcares endge-
nos. Pero la mayor parte que se encuentra en las plantas parece venir de los pro-
ductos de desintegracin de las protenas. Normalmente no se metaboliza con
rapidez; cuando se introduce a la planta o a las clulas asparagina 14C por lo ge-
neral se metaboliza lentamente en comparacin con los azcares, aminocidos y
glutamina.
METABOLISMO DEL NITROGEN0 229
Como la asparagina, la glutamina puede derivarse tambin del cido glu-
tmico liberado en la desintegracin de la protena pero, a diferencia de aqulla,
ocurre frecuentemente una sntesis masiva de glutamina a partir del carbono de-
rivado de los carbohidratos almacenados o directamente de la fotosntesis. El
estmulo ms comn para la sntesis de glutamina es el suministro de nitrgeno,
como amonaco o co.mo nitrato. Kretovitch ha demostrado que la respuesta al
suministro de NH3 en casi todas las plantas estudiadas, es la formacin de gluta-
mina aun en plantas cidas como Sedum y en las que normalmente contienen
asparagina. En contraste con la asparagina, cuando se suministra glutamina, sta
entra rpidamente al metabolismo celular presumiblemente va cido glutmico
y cido a-cetoglutrico. La glutamina es un donador de nitrgeno especfico
para diversas sntesis importantes. Es la fuente de tomos de nitrgeno para las
posiciones 3 y 9 del anillo de la purina (ver pgina 238) y del nitrgeno de la amida
del NAD y NADP. El nitrgeno de la amida tambin se usa para la sntesis de
glucosamina y sus derivados, los monmeros de la quitina que son componentes
de la pared celular de los insectos, muchos hongos y unas cuantas plantas superio-
res. El nitrgeno cclico de los aminocidos histidina y triptfano tambin se
provee por la glutamina.
Quizs la reaccin ms importante de la glutamina es su participacin en la
conversin de NH3 y a-cetoglutarato en cido glutmico por las sintetasas de
la glutamina y del cido glutmico (pgina 220). En esta reaccin la alta energa
del nitrgeno de la amida se utiliza para ayudar a la conversin y transferencia del
nitrgeno amdico (de la glutamina) en nitrgeno amnico (del cido glutmico).
No se ha encontrado una reaccin anloga con respecto al nitrgeno amdico de
la asparagina.
En las plantas se encuentran diversos compuestos relacionados con la gluta-
mina. Derivados de la glutamina con grupos metil, metileno o hidroxi sustituidos
en la posicin gamma se encuentran comnmente en las plantas y en ocasiones
constituyen una proporcin grande del nitrgeno soluble. Como la glutamina,
estos compuestos parecen actuar como almacn de nitrgeno. No obstante, los
experimentos han demostrado que por lo general no se metabolizan con rapidez.
No se conocen derivados similares de la asparagina aunque se han encontrado
ciertos derivados con el nitrgeno de la amida sustituido. La significacin meta-
blica no se conoce an.
DESTINO DE LA GLUTAMINA Y LA ASPARAGINA. Se pensaba antes que 10s papeles
de estas dos amidas eran intercambiables en las diferentes especies de plantas.
Ahora es claro que cada una realiza funciones especiales, aunque pueden sobre-
ponerse en diferentes especies de plantas y bajo diferentes condiciones. El resul-
tado es que nuestra comprensin de su metabolismo y su papel est lejos de ser
completo. Ambas amidas juegan un papel en el transporte del nitrgeno. Parece
que la asparagina es el compuesto importante involucrado en la movilizacin del
nitrgeno almacenado como protena en las semillas de plantas como el trbol
lupino, pero en las plantas herbceas y kboles en estado de crecimiento la gluta-
mina es el compuesto de transporte de mayor importancia. Ambas amidas pueden
acumularse como resultado de la presencia de exceso de nitrgeno, pero la acu-
mulacin de asparagina se asocia generalmente con la degradacin de las protenas
en tanto que la glutamina es ms probable que acte en la movilizacin de nitr-
geno para la sntesis proteica.
230
METABOLISMO VEGETAL
__t_ Nitrgeno de la asparagina
. - Nitr6geno de la glutamina
Figura 8-10. Variacin diurna en la composicin del nitrbgeno soluble de
las hojas de Mentha piperita L., desarrollada en das cortos. (De F.C.
Stewart (ed.): Plant Physiology: A Treatise, Vol. I VA, Academic Press,
Nueva York. 1965. Con permiso.)
O
(verde) (amarillo) (caf)
2 4 6
Das sin alimento
Figura 8-11. Cambios en la glutarnina,
asparagina y NH3 en hojas de cebada
durante la falta de alimento. (Redibu-
jado de datos de E.W. Yemm: Proc.
Roy. Soc. Londres. B123:243, 1937.)
METABOLISMO DEL NITROGEN0 231
Esta situacin ha llevado al fisilogo ruso D.N. Przhanishnikov, a la genera-
lizacin de que la presencia de asparagina caracteriza a una planta enferma, en
tanto que la de glutamina indica una planta saludable. Esta generalizacin toma
asidero porque la asparagina se acumula en trigo infectado con soja o chahuistle
y en otras plantas enfermas. De modo similar, F.C. Steward de la Universidad
de Comell, ha demostrado que si se afecta o inhibe el crecimiento por diversas
razones en plantas intactas o en cultivos de tejidos (por ejemplo colocando a las
plantas fuera de su fotoperiodo o suprimindoles un nutriente o un factor del cre-
cimiento necesario) predomina la asparagina. Cuando se deja desarrollar normal-
mente la glutamina se torna la amida dominante. En el metabolismo de las hojas
de menta la glutamina se asocia con la luz del da en tanto que la asparagina pre-
domina en la oscuridad (Figura 8-10).
En otro trabajo, Steward ha demostrado que la glutamina predomina en
las papas crecidas o desarrolladas en ambiente seco con calor ligero y das largos,
en tanto que la asparagina es dominante en papas desarrolladas en condiciones
climticas ms pobres. Una comparacin de cultivares de papas inglesas, america-
nas, hbridas y desarrolladas en invernadero se muestra en la Tabla 8-1.
Puede verse que la proporcin glutamina/ asparagina es alta en las varieda-
des americanas, condicionadas por el buen tiempo y excelentes condiciones de
desarrollo, en tanto que esa proporcin es mucho ms baja en las variedades in-
glesas y en la variedad desarrollada en invernadero bajo condiciones climticas
Tabla 8-1. Diferencias en la composicin del nitrgeno soluble en varias cepas de tubrculos
de papas.
~~ ~~
Aminocido Cultivar Cultivar Hbrido Cultivar Cultivar
peso fresco (Sebago) ingleses (Katahdin) en invernadero:
919 americano americano padres ingles desarrollado
y americanos das cortos y
frescos
cido asp6rtico
cido glutmico
Serina
Glicina
Asparagina
Treonina
Alanina
Glutamina
Lisina
Arginina
Metionina
Prolina
Valina
Leucinas
Fenilalanina
Tirosina
cido amino-
butrico
107
178
66
28
1 38
1 O0
131
3.02 1
63
356
83
244
93
138
128
-
300
78
1 34
67
1,661
54
55
1,142
42
159
66
25
197
167
203
179
-
244
205
190
53
2,200
43
68
858
30
55
225
68
25
Trazas
-
-
-
225
246
276
42
2,672
76
72
754
66
110
-
-
141
24
Trazas
-
86
168
43 1
29
48
1,083
81
24
91
72
81
-
254
196
Trazas
-
240
23 2 METABOLISMO VEGETAL
mucho menos favorables. El fisilogo britnico E.W. Yemm, observ que con-
forme se van degradando las protenas en hojas de cebada sin nutrientes, la gluta-
mina se acumula rpidamente. Conforme avanza la inanicin y las hojas empiezan
a amarillear comienza la acumulacin de asparagina y excede a la glutamina. Con
la disrupcin metablica y la eventual muerte de las hojas por inanicin, se rompe
primero la glutamina y luego la asparagina liberando NH3 libre (Figura 8-11). Sin
embargo, se ha demostrado que en algunas plantas como en las leguminosas, la
asparagina puede cumplir por completo el papel de la glutamina estando asociada
con la transferencia de nitrgeno en reacciones anablicas tales como la forma-
cin de protenas de semillas.
Hay muchas observaciones similares que indican que los papeles principales
de la asparagina y glutamina en las plantas son el transporte de nitrgeno, des-
intoxicacin del amonaco y almacenaje del nitrgeno y movilizacin para las
sntesis. La asparagina parece asociarse con mayor frecuencia con la desintegra-
cin de las protenas o las reacciones catablicas, en tanto que la glutamina se
asocia con las reacciones anablicas y el crecimiento. El cido glutmico y la glu-
tamina tambin pueden relacionarse con la transferencia de nitrgeno que ocurre
durante la degradacin y resntesis proteica, ya sea en la produccin de prote-
nas o en la reconstruccin del complemento celular de protenas estructurales
y enzimticas durante el desarrollo.
PROTEfNAS
Las protenas son la base de la vida, pues todas las reacciones de los sistemas vi-
vientes estn catalizadas por protenas enzimticas. Su sntesis y estructura se
describen en el Captulo 2, pginas 34-38. Estn hechas de secuencias de amino-
cidos ligados entre s por enlaces peptdicos (estructura primaria). El polipp-
tido se enrosca frecuentemente formando una a-hlice estabilizada por enlaces
de hidrgeno (estructura secundaria), la que a su vez puede estar muy doblada
y retorcida en una estructura terciaria tridimensional estabilizada por una varie-
dad de fuerzas o enlaces dbiles o fuertes.
La prdida de la estructura terciaria o desnaturalizacin ocurre cuando los
solventes, el pH, el calor u otros factores rompen el sistema de enlaces y la pro-
tena puede coagularse o precipitarse, proceso que a menudo es irreversible. La
prdida de las propiedades enzimticas acompaa casi siempre la desnaturaliza-
cin, implicando que el sitio activo de las enzimas requiere los repliegues terciarios
de la estructura primaria y secundaria.
TIPOS DE PROTEfNAS. La clasificacin de las protenas usada comnmente se basa
ms en su solubilidad que en su estructura qumica, pues an no se conocen lo
suficiente para plantear una clasificacin basada en su estructura, por lo que el
actual sistema es de uso universal.
A. Protenas simples. Consisten solamente en aminocidos.
Albzirninas. Solubles en agua y soluciones acuosas de sales diluidas. Una clase
importante de protenas, muchas de las cuales tienen propiedades enzimticas.
Globulinas. Insolubles o ligeramente solubles en agua y solubles en SOlUCiO-
nes acuosas de sales diluidas. Las globulinas pueden salinizarse en las Soluciones
METABOLISMO DEL NITROGEN0 233
acuosas por adicin de sulfato de amonio y a un medio de la concentracin de
saturacin. Son protenas importantes como reserva y como enzimas.
Prolaminas. Insolubles en agua, solubles en etanol 50 a 90% en agua. Son
protenas altas en prolina que a menudo se encuentran como reserva en las semi-
llas, como la zena (maz), gliadina (trigo) y hordena (cebada). Algunas enzimas
(como papana) son prolaminas.
Glutelinas. Insolubles en solventes neutros pero solubles en cidos o bases.
La reserva proteica ms importante en las plantas.
Protaminas. Protenas de bajo peso molecular extremadamente ricas en
arginina. Las protaminas se asocian con las protenas nucleares, pero son muy co-
munes en las plantas.
Histonas. Como las protaminas, se caracterizan por su alto contenido de
aminocidos bsicos. Son solubles en agua. Las histonas se encuentran por lo gene-
ral en el ncleo de la clula y se asocian de algn modo con las nucleoprotenas.
Pueden tener un papel especfico como inhibidores o reguladores de genes.
B. Protenas conjugadas. Estos productos contienen, adems de su cadena polipept-
dica, una sustancia diferente (llamada grupo prosttico) que se adhiere a la cadena
por medio de sales o enlaces covalentes. Se agrupan segn su ncleo prosttico.
Mucoproteinas. Combinaciones de protena y carbohidrato, a menudo un
polisacrido de hexosa o de pentosa. Las mucoprotenas animales contienen hexo-
samina, pero las de las plantas, no. Pueden ser componentes de las membranas.
Lipoprotenas. Complejos de protena y una variedad de lipoides. Son las
protenas estructurales ms importantes de las membranas.
Nucleoprotenas. Protenas, a menudo protaminas o histonas, combinadas
por medio de sales con los cidos nucleicos. Existen ciertas dudas sobre la natura-
leza de la asociacin, la cual podra ser un artefacto de tcnica de extraccin.
Crornoproteinas. Un grupo importante y diversificado de protenas que tie-
nen varios pigmentos como grupo prosttico. Casi todas son enzimas importantes.
Son ejemplos la hemoglobina, los complejos clorofila-protena, las protenas
carotenoides y las flavoprotenas.
Metuloprotenas. Muchas enzimas comunes tienen un metal en el grupo
prosttico asociado ms o menos estrechamente con la porcin proteica. El mo-
libdeno de la nitrato reductasa es un buen ejemplo.
FoRMACIdN Y DESINTEGRACIdN DE LAS PROTEINAS. La fuente de los aminoci-
dos para la sntesis proteica vara de un tejido a otro de acuerdo a la situacin
fisiolgica del tejido en el que tiene lugar dicha sntesis. En las plntulas en des-
arrollo algunos aminocidos son transportados de los tejidos de almacenaje en
el endosperm0 o los cotiledones a los pices en crecimiento. En este caso se derivan
de la desintegracin de las protenas o del nitrgeno y el carbono de los carbohi-
dratos almacenados. Otros aminocidos se forman en las hojas o en el sitio de la
sntesis proteica, derivndose el carbono sobre todo de productos de la fotosnte-
sis. Los pices en crecimiento sintetizan algunos de sus aminocidos partiendo del
azcar transportado de otras partes de la planta y pueden ser incapaces de usar
dichos aminocidos suministrados de modo exgeno. Otros aminocidos se for-
man exclusivamente en las hojas o en las races y son transportados a los pices
del tallo o de la raz en crecimiento. Las hojas parecen ser capaces de sintetizar
la mayor parte de sus aminocidos; sin embargo, algunos pueden hacerse en la
234 METABOLISMO VEGETAL
raz partiendo del carbono exportado por las hojas como azcar. Esto puede de-
berse a que el nitrgeno absorbido, una vez que se reduce a NH, , se convierte
rpidamente en aminocido y sta es la forma en que se transporta de regreso a
las hojas. Dentro de las clulas de la hoja algunos aminocidos se forman directa-
mente a partir de productos de la fotosntesis, probablemente en los cloroplastos.
Otros pueden formarse en el citoplasma del carbono derivado de productos de la
fotosntesis que salieron del cloroplasto. Los aminocidos resultantes son entonces
devueltos al cloroplasto donde se produce casi toda la sntesis proteica en la hoja.
Gran parte de la sntesis proteica tiene lugar en los tejidos meristemticos
o en desarrollo. Los tejidos maduros pueden tener cierta produccin de protena,
pero la velocidad de su sntesis declina notablemente durante la maduracin.
Aparentemente las hojas continan sintetizando protena, aunque con tasa reduci-
da, hasta que llegan a la senescencia. En general las hojas desprendidas no muestran
aumento en su contenido proteico; sin embargo, continan mostrando produccin
de protenas. Esto sugiere que de las races se deriva algn factor esencial para el
incremento de aqullas pero no para su sntesis; no se conoce la naturaleza de este
factor o estmulo pero podra ser una citocinina o una sustancia relacionada. La
aplicacin de cinetina a las hojas desprendidas causa una movilizacin de los ami-
nocidos solubles, retarda la desintegracin de las protenas e induce ciertas sntesis.
La desintegracin de las protenas en las plantas est catalizada por enzimas
proteolticas de varias clases y no se conserva el enlace peptdico (o sea, no se hace
ATP ni ningn otro compuesto con alta energa). Hay ciertos indicios de que los
lisosomas, cuerpecillos que contienen enzimas proteolticas y otras degradativas
en las clulas animales tambin pueden estar presentes en los vegetales. En mu-
chas clulas la vacuola principal tiene esta funcin. La degradacin de las prote-
nas que ocurre durante su produccin, tal vez no involucra los mismos procesos
que la protelisis casi general que ocurre en la senescencia o en la germinacin de
las semillas. Parece ms probable que exista un mecanismo de desintegracin
ms selectivo, quiz parcial.
PRODUCCIdN CfCLICA DE PROTEfNAS. La idea de una produccin cclica de las pro-
tenas probablemente se origin por I.P. Borodin en 1878, quien sugiri que las
actividades protoplsmicas, como la respiracin, requieren una continua desinte-
gracin y regeneracin de protena. Los primeros anlisis no pudieron sostener
ni refutar esta idea aunque fue tomada en consideracin por muchos botnicos
durante los 50 aos siguientes. Los fisilogos britnicos F.G. Gregory y P.K.
Sen, despus de largos anlisis de las interrelaciones de la respiracin con el con-
tenido de azcar y con el metabolismo proteico en hojas de cebada, propusieron
un modelo segn el cual una buena parte de la respiracin celular se sostiene por
los aminocidos derivados del ciclo de las protenas como se presenta en la Figura
8-12. Este modelo se propuso antes de que se conociera que la respiracin involu-
cra un ciclo metablico de cidos orgnicos o que los esqueletos de carbono de los
aminocidos pueden derivarse de esta fuente, pero es claro que anticip estas ideas.
Que la produccin cclica de protenas pueda ocurrir de hecho, fue demos-
trado por H.B. Vickery y sus colaboradores en la Estacin de Experimentacin
Agrcola de Connecticut, quienes encontraron que las hojas desprendidas pueden
incorporar "NH3 a las protenas en ausencia de sntesis neta de ellas. F.C. Steward
y colegas, usando substratos marcados con 14C mostraron que la produccin c-
clica de proteinas ocurre en cultivos de tejido de zanahoria y que su velocidad es
METABOLISMO DEL NITR6GENO 236
Figura 8-12. Metabolis-
mo ciclico de las protei-
nas, propuesto por F.G. Amino- Amino- + Acidor- COZ
Gregory y P.K. Sen en bcidos dcidos orgbnlcos
1937. /'
/
/
orgbnlcos - Azcar- COZ
/
cidos /
proporcional a la tasa de crecimiento y respiracin. Ms an, fue posible, como
lo prevea el modelo de Gregory y Sen, demostrar que los aminocidos derivados
de la desintegracin de protenas son oxidados hasta dixido de carbono en su
mayor parte, mientras que simultneamente hay sntesis proteica a partir de ami-
nocidos recin formados con carbono del azcar. La produccin cclica de pro-
tenas tambin ocurre en las hojas, en estos rganos parece ser ms bien un efecto
directo de la diferenciacin bioqumica durante el desarrollo. La produccin
cclica es rpida en las hojas en desarrollo o en los cotiledones que pasan a rga-
nos fotosintticos pero decrece bastante en la madurez y cesa en la senectud. La
relacin con la respiracin parece que se conecta ms probablemente con el reque-
rimiento de ATP para la sntesis de los enlaces perpttidos y esqueletos de car-
bono para la formacin de aminocidos.
PBPTIDOS
Los pptidos pueden formarse como resultado de la sntesis parcial (o sea defec-
tuosa) de las protenas o por su degradacin parcial. Unos pocos tejidos contienen
cantidades altas de pptidos, pero no parecen tener una significacin fisiolgica
importante. Sin embargo ciertos pptidos tienen un papel fisiolgico importante
como cofactores en las reacciones enzimticas. Tienen por lo general sus propias
vas de biosntesis sin relacin con el sistema ribosmico de sntesis proteica. El
tripptido glutatin, y-glutamilcisteinilglicina, es un importante agente en la trans-
ferencia de hidrgeno asociado con varias enzimas redox. El glutatin se forma
por la condensacin del glutamato y la cistena para formar y-glutamilcistena;
el ATP se hidroliza a ADP y Pi en el proceso. Entonces se adiciona la glicina uti-
lizndose una segunda molbcula de ATP. Probablemente los aminocidos se fosfo-
rilan antes de la formacin de enlaces peptdicos. Otros compuestos importantes
que contienen enlaces peptdicos son el cido tetrahidroflico (que tiene parte
en las reacciones de transferencia de formil y metil) y el cid0 pantotnico (una
parte de la molcula de COA). La auxina, cido indolactico, puede inactivarse
cuando se le da a la planta en exceso por conjugacin con el &ido asprtico for-
mando cido indolacetilasprtico, un derivado pept dico inactivo.
PURINAS Y PIRIMIDINAS
Las bases pricas y pirimdicas, componentes importantes de los cidos nucleicos
(Captulo 2, pginas 40-44) se sintetizan a partir de componentes celulares sim-
ples, por complejas secuencias de reacciones. Las purinas y pirimidinas libres no
236 METABOLISMO VEGETAL
se Sintetizan en esa forma. Las purinas se construyen sobre una molcula de ribo-
sa-5-fosfato (R-5-P), formndose directamente nucletidos de pwina. La estruc-
tura pirimdica bsica, el cido ortico, se sintetiza directamente, luego se liga a
la R-5-P y los otros nucletidos pirimdicos se forman a partir de este ribsido. La
sntesis de desoxirribsidos se lleva a cabo por la reduccin del ribsido correspon-
diente. La R-5-P, los aminocidos glutamina, glicina y asprtico, el carbamilfosfato,
el ATP, el COZ y los derivados del cido tetrahidroflico (THFA) son, todos
ellos, donadores de carbono, nitrgeno y fsforo en sntesis qumicas de gran ele-
gancia y economa. Las reacciones que llevan a las purinas se esquematizan en la
Figura 8-13 y las que conducen a las pirimidinas en la Figura 8-14.
La R-5-P requerida se deriva probablemente del metabolismo de la va acce-
soria de las pentosas o posiblemente de los intermediarios del ciclo de Calvin for-
mados durante la fotosntesis. Los aminocidos vienen del conjunto de molculas
Figura 8-13. Sntesis de las purinas, empezando por
la ribosa-5-fosfato (R-5-P). Los productos finales de l a
slntesis estan escritos en maysculas. Los nuevos iltomos
adicionados por cada reacci6n estan encerrados con lnea
punteada.
o-P
I
OH OH
Gl ut ami na Gi ut amat o +Pi
OP
ATP y- ADP +Pi
Gi i ci na
""--
".
' Ri bot i do de glicinamida
P-R-NH
1 " "
Contina
METABOLISMO DEL NITRdGENO
231
Figura 8-13. (continuacin)
Forrnii-THFA +- THFA
O
PR-NH-C-CH,- NH
I I
L, Rib6tido de formilglicinamida
(CHO) - 4
Glutamina
ATP +z
giutamato
ADP +Pi
Rib6tido de formiiglicinarnidina
C
I
CHO
P-R-NH
ATP t ADP + pi
H,N-C
11 \H Rib6tido de aminoimidazol
P- R- N
\ /
HZN-C /
!! \H Rib6tido aminoimidazol del Bcido carboxllico
P - R ~ N
Aspartato
ATP
Fumarato
ADP +Pi
H,N-C
\H Rib6tido aminoimidazol carboxamida
P- R-N
\ /
Formil-THFA -f THFA
Contina
238
Figura 8-13. (continuacin)
METABOLISMO VEGETAL
O
//
H,N-C.
- \
,-
\ , -,, 1 , c , , carboxamida
C N
H\ 11 ? . H Ri b6ti do formami doi mi dazol
N N
HN
HC
I
\N/\N
cido inoslnico
/H (Ri bbt i do de hi poxanti na)
I
P- R
Aspartato
Fumarato NADk NADH + H+
O
+H,O / I
HN
I
/ C\ c, N
C c /
1 1 CH cido xantfl i co
O H \N/ N
P-- R
ADENi Ll CO
Gl utami na
HI POXANTI NA
mostrando la derivacin de cada gr upo
(ver Bcido inosnico)
ti P-R
I
Gl utami na
i
Glutarnato
ATP - AMP +PPI
P- R
METABOLISMO DEL NITR6GENO 239
Figura 8-14. Sintesis de la pirimidina. Los productos finales
de esta slntesis estan escritos en maysculas.
COO H
CHz cido aspartic0
I
I
I
NHZ
I
I
Carbamil fosfato O=C
H, N-CH
P COO H
H,N COOH
I 1
I 1
I
c)=c CHz cido carbamilasp6rtico
HN-CH
COOH
OH
I
&\
I
N yHZ cido dihidroorbtico
HO COOH
NAD'
+
NADH +H+
O H OH
6-fosforibasil
pirofosfato
t
OH
1
N
o=c
I I I
P-O-CH,
w\
\N/C-cooH Orotidina-6-fosfato
OH OH
Contina
240
Figura 8-14. (continuacidn)
METABOLISMO VEGETAL
OH L o ,
I
CH
I I /
C CH CIDO URI D~L I CO
o \ N /
I
P- R
Met i l i na -THFA
OH
I
CIDO TI MI DI L I C~N I
C--CH,
I /
o=c CH
\N
I
P- R
~~
Format o
Aspartato
TI MI NA, mostrando la
derivacin de cada
6t omo
2 ATP ; \ - ADP
OH
I
/ / c\
N
I I I
CH URl Dl NA TRI FOSFATO
oc \ N ,-, CH
I
P-P-P-R
Gl utami na Gl utamato
NH3
NHZ
I
HC \
N CH
11 Cl Tl Dl NA TRI FOSFATO
I
C CH
o/ \ /
N
I
P-P-P- R
derivadas del metabolismo respiratorio. El carbamilfosfato se sintetiza probable-
mente en la reaccin
O
I I
COZ + NH:, + ATP NH, C-O-P + ADP
METABOLISMO DEL NITR6GENO 241
Figura 8-1 5. Degradaci6n de l a purina.
Adenina Guanina
Xantina cido rico
Alantolna cido alantoico
NH2 NH2
I COOH I
'NH2 CHO
O=
+I +NH,/=O
Figura 8-15. Degradaci6n de la purina.
2 urea + Bcido glioXllico
aunque podra derivase de la desintegracin de la citrulina
citrulina "* ornitina + carbamato
carbamato + ATP "* carbamilfosfato + ADP
Los derivados metileno y formil del THFA se forman en las reacciones del
THFA con un donador de hidroximetil idneo como la serina.
serina + THFA + NADP -+ metileno THFA + glicina + H 20
L. formil THFA
Un donador de metil idneo puede formar metil THFA que puede ser oxi-
dado a metiln THFA y el cido frmico tambin puede convertirse directamente
en formil THFA.
Figura 8-16. Degradaci6n de l a pirimidina.
U
Citosina COOH
1 - I;<)::-
\
CH2
CH2
NH3 I
+coz + '
NH2
NH3 +uracilo- H H
Dihidrouracilo p-ureidopropionato p-alanina
COOH
k3icH3 -- NH,
\
CH-CH,
I
O +coz + / CH2
H NH2
Timina cido 0-aminoisobutlrico
242 METABOLISMO VEGETAL
La desintegracin de las purinas produce la formacin de alantona y cido
alantoico que finalmente son convertidos en urea y cido glioxlico (Figura 8-15).
Las pirimidinas se descomponen abrindose el anillo para dar un P-ureido que se
descompone probablemente en NH, y COZ, pero no se ha investigado el mecanis-
mo de la relacin en las plantas (Figura 8-16). Los ribsidos y particularmente los
desoxirribsidos, que provienen del catabolismo del RNA y DNA son metaboliza-
dos rpidamente; si no fuese as su presencia en las clulas podra ser perjudicial
para el metabolismo normal.
ALCALOIDES
Los alcaloides representan un grupo extremadamente heterogneo de compuestos
con uno o ms tomos de nitrgeno generalmente en un anillo heterocclico. Por
su complejidad van desde simples aminas como la ricinina (Figura 8-17) hasta gli-
csidos esteroidales complejos como la solanina (mostrada tambin en la Figura
8-17). Se conocen ms de 1,000 alcaloides en 1,200 especies vegetales. Proba-
blemente la mayora de las plantas contienen pequeas cantidades de algn pro-
ducto alcaloideo. Las que se sabe que contienen grandes o aun impresionantes
cantidades de uno o ms alcaloides, se encuentran distribuidas de modo errtico en
casi todos los grupos, excepto en las algas. Algunos alcaloides son generalizados
en tanto que otros se conocen solamente en un gnero o en una especie. Unos
pocos de los mejor conocidos, junto con las plantas de las que se derivan con ma-
yor frecuencia se presentan en la Figura 8-18.
Los alcaloides son ampliamente conocidos por sus serios efectos en los ani-
males; se conocen los efectos de la mayora de los que se presentan en la Figura
8-10. Sin embargo hasta ahora no hay una visin general de su funcin en las plan-
tas. Se ha sugerido que sirven como un mecanismo de proteccin, pero ciertas
plantas alcaloideas, como el tabaco, son por lo menos tan susceptibles -y posible-
mente an ms- a las plagas que muchas no-alcaloideas. Las plantas saprfitas y
parsitas al parecer se desarrollan bien en las plantas alcaloideas. No es probable
que los alcaloides formen compuestos nitrogenados de almacenaje efectivos, dado
su contenido de nitrgeno, generalmente bajo, y la pequea cantidad que se al-
macena. Normalmente las plantas alcaloideas son capaces de formar asparagina,
glutamina o arginina, que son muy eficientes como desintoxicantes del amonaco
Figura 8-17. Estructura de dos alcaloides.
N Galactosa
I /
CH3 Glucosa
Aamnosa
/
Ri ci ni na Solanina
METABOLISMO DEL NITRdGENO 243
o compuestos de almacenaje. Los alcaloides se encuentran frecuentemente en
las partes jvenes en activo crecimiento pero pueden localizarse en otros tejidos
como en la corteza, en la raz o en la hoja. Parece que a menudo se sintetizan
en la raz y se transportan a otra parte de la planta. En algunas plantas se ha
encontrado que ocurre un activo metabolismo de los alcaloides. Tal vez puedan
jugar algn papel en el metabolismo o en el control del desarrollo, pero no se
encontr una relacin obvia, y su papel en la biologa de la planta no se conoce
en el presente.
Figura 8-18. Plantas alcaloideas. (De P.R. Ehrlich y P.H. Raven: Mariposas yplantas. &i. Am.
216(6):106.1967. Usado con permiso.)
I
H
Magnolia
Magnolina
H H
I 1
I I
H 4 - H H - C - H
%amo (marihuana)
nabidiol
I I I I I
H H H H H
H-C--C-C-H
I l l
H H H
Cafe
Cafena
H-C-H
I
H
Strychnos
Estricnina Coca Cocaha L
H - C - - - l F A ( - f H H H I 1 H O n
H H
H
N-C-H H-C--O-C--030=C--C=C=C
1 1 /
I
1 : 1 O/
H
H-C- C -- C -H
/
I 1 I i
H H H
Peyote
Mescal i na
Amapola de opio
I Morfina \ /H
244 METABOLISMO VEGETAL
LECTURAS ADICIONALES
Artlculos en el Annual Review of Plant Physiology bajo el encabezado Nitrogen Metabolism.
Bidwell, R.G.S. y D.J. Dunan: Some recent aspects of nitrogen metabolism. En P.J. Davis (ed.)
Historial and Current Aspects of Plant Physiology. pp. 152-225. Cornel1 University Press.
Ithaca, N.Y. 1975.
Boulter, D., R.J. Ellis y A. Harwood: Biochemistry of protein synthesis in plants. Biol. Rev.
Burns, R.C. y R.W.F. Hardy: Nitrogen Fixation in Bacteria and Higher Plants. Springer-Verlag.
Chibnall, A.C.: Protein Metabolism in the Plant. Yale University Press. New Haven, Conn. 1939
Hewitt, E.J . y C.V. Cutting (eds.): Recent Aspects of Nitrogen Metabolism in Plant. Academic
McKee, H.S.: Nitrogen Metabolism in Plants. Claredon Press, Oxford. 1962.
Nutman, P.S. (ed.): Symbiotic Nitrogen Fixation in Plants. Cambridge University Press, Lon-
dres, 1976.
Steward, F.C. y D.J. Durzan.: Metabolism of Nitrogenous compounds. En F.C. Steward (ed.):
Plant Physiology; a Treatise. Vol. IV-A. Academic Press, Nueva York. 1966.
Stewart, W.P.D.: Nitrogen Fixation in Plants. The Athlone Press, Londres. 1966.
Webster, G.C.: Nitrogen Metabolism in Plants. Row, Peterson, Co. White Plains, N.Y. 1959.
47: 113-175. (1972).
Nueva York. 1975.
(reimpreso 1964).
Press, Nueva York. 1968.
Captulo 9
POLMEROS Y
GRANDES MOLCULAS
En este captulo se tratar brevemente el metabolismo y la formacin de algunos
de los polmeros ms importantes de las plantas y de algunas sustancias complejas
importantes que no se han mencionado previamente. En los textos de bioqumica
puede encontrarse ms informacin sobre la sntesis de otros compuestos orgni-
cos no analizados aqu. Aunque muchos de estos compuestos se encuentran en las
plantas, su metabolismo se conoce solamente por estudios en bacterias o en siste-
mas animales y se presentar esquemticamente. El propsito primario de este
captulo es presentar en forma breve algunas de las transformaciones ms impor-
tantes como referencia.
POLISACARIDOS
ALMI D~N. Generalmente el almidn es degradado por la amilasa o por la fosfori-
lasa (Captulo 6 ) pero su sntesis se lleva a cabo por la transglicosilasa del uridn-
difosfato de glucosa (UDPG) o el adenndifosfato de glucosa (ADPG). Esta reaccin
UDPG UDP
transglicosilasa
O + glucosa, + o + glucosa,,
ADPG ADP
descubierta por el grupo de Leloir en Argentina, hace slo enlaces a- ( 1 :4). El
ADPG parece ser uno de los donadores ms efectivos de la mayor parte del mate-
rial investigado. Esta reaccin es estimulada alostricamente por el producto pri-
mario de la fotosntesis, el cid0 fosfoglicrico (PGA), dando un efectivo control
por retroaccin que asegura la rpida formacin de almidn a la luz. La sntesis
de UDPG o ADPG se efecta por la reaccin
UTP UDEG
fosforilasa
o + G-1-P - o + PPI
ATP ADEG
246 METABOLISMO VEGETAL
La G-1-P puede derivarse de la F-6-P producida en la fotosntesis o de la sacarosa,
el medio ms usual de transporte del carbohidrato. Tambin la sacarosa puede
transferir residuos glicosil al almidn ms directamente, por medio de la sacarosa
sintetasa (Captulo 7) en la forma siguiente
pfructosa
sacarosa +
Un rasgo importante 4
U D P L U D P G -almidn
sacarosa amilo
sintetasa sintetasa
deesta enzima sintetizadora de almidn (a veces lla-
mada amilosintetasa) es que requiere un aceptor primario de por lo menos dos
glucosas (residuales), es decir, maltosa o un oligosacrido de maltosa. Lo mismo
se cree que pasa con la fosforilasa, aunque se sabe de sntesis de amilosa de novo
sin aceptor primario por la fosforilasa del msculo. Esto sugiere que la fosfori-
lasa podra participar en la iniciacin de la sntesis de almidn. Otra enzima
que transfiere grupos es la enzima-D de la papa, que puede transferir grupos de
dos o ms unidades de glucosa de una cadena con ligaduras a-(1:4) a otra. Esta
enzima puede efectuar la sntesis de cadenas largas si los residuos que quedan
despus de la transferencia son removidos. Todas estas enzimas aaden residuos
de glucosa. nuevos al extremo no reductor de la molcula aceptora.
Las ligaduras a-(1:6) que forman las ramificaciones en la amilopectina son
sintetizadas por la enzima Q o factor de ramificacin descubierta por C. Cori.
Esta enzima puede transferir grupos de residuos de glucosa con enlaces (Y-(1 :4)
a la posicin 6 de un residuo de glucosa en otra cadena similar, formando una
ramificacin por el enlace a-(1:6) recin formado. La longitud de la rama inicial
es de cuatro unidades de glucosa, por lo menos. La molcula ramificada resul-
tante puede continuar creciendo por ambos extremos no reductores gracias a la
actividad de la fosforilasa o la amilosintetasa.
El mecanismo de la sntesis del almidn in vivo no se conoce todava.
Las mezclas de enzima Q y fosforilasa no producen una mezcla natural de ami-
losa y amilopectina sino tan slo amilopectina, cuyo grado de ramificacin es
proporcional a la cantidad de enzima Q presente. La relacin entre enzima Q y
transglucosilasa UDPG o ADPG no est clara.
INULINA. La sntesis de esta polifructosana p-(2:1) y la similar levana con enlace
p-(2:6) no se conoce bien. Aparentemente las unidades de fructosa se transfieren
a la posicin 1 o a la 6 en la sacarosa que est siempre presente como terminal no
redudora. Recientemente se aisl UDP-fructosa de los tubrculos de Dahlia, la que
puede ser un intermediario. La inulina es una forma de almacenaje importante
en las races y tallos de plantas tales como Dahlia y Helianthus tuberosum. Es inte-
resante que estas plantas tiendan a dar almidn, no inulina, en sus hojas. Diversas
plantas, especialmente monocotiledneas, forman fructosanas en su tallo y hojas,
por lo general de tipo levana. Sin embargo, en las espigas de los cereales se encuen-
tran frudosanas del tipo de la inulina.
CELULOSA. La reciente investigacin de W. Hassid, en California, demuestra que
la celulosa se fabrica de modo anlogo al almidn, pero el donador de unidades de
glucosa es la guanosindifosfato de glucosa (GDPG) que forma enlaces 8-(1:4). Las
POLfMEROS Y GRANDES MOLfiCULAS 247
preparaciones de Lupinus albus (trbol blanco) libres de clulas hacen celulosa a
partir del UDPH-GDPG.
OTROS POLISACARIDOS. Otros polisacridos, la mayora estructurales (es decir,
componentes de la pared celular) se forman por la enzima transglicosil a partir del
derivado UDP o ADP apropiado. kstos incluyen pectinas, cido pctico, hemice-
lulosa y una variedad de xilenos, arabanos y diversos polisacridos. Las sustancias
pcticas incluyen cido pctico, un cido a- ( 1 :4) poli-D-galacturnico que forma la
lamela media de la pared celular, y pectinas que son similares esencialmente pero
tienen los grupos carboxilo enmascarados por la formacin de steres metlicos.
CH3
I
O
I
c=o
CH3
I
9
c=o
I
H OH H OH
pectina
COOH COOH
- o ; I " c c - F H OH H H OH H OH H H OH
cido pctico
Frecuentemente pueden incluirse otros azcares en la estructura de las sus-
tancias pcticas. Las hemicelulosas representan un grupo de polisacridos mal
definidos, generalmente compuestos por varios azcares diferentes y cidos ur-
nicos. Los detalles de su sntesis no se conocen. l?robablemente se hacen por re-
acciones transglicosil, como las sustancias pcticas y los polisacridos de las algas
relacionados (Captulo 2).
LfPIDOS
Los lpidos de las plantas se dividen en tres grupos principales: las grasas y aceites
presentes en su mayora como reserva alimenticia;; los fosfolpidos y glicolpidos,
principalmente como componentes estructurales de las membranas, y las ceras
que forman la capa exterior protectora o cutcula de la mayora de las plantas.
La sntesis de los cidos grasos es un proceso bastante complejo que pri-
mero se investig en sistemas animales y microbianos. Dado que la mayora de
los cidos grasos naturales consisten de nmeros pares de tomos de carbono y su
@-oxidacin da por resultado la produccin de acetil-COA, se pens primero que
se formaban a la inversa del proceso de oxidacin de acetil-COA (ver pgina 132),
248 METABOLISMO VEGETAL
Figura 6-9); luego se descubri que el CO, es no slo un estimulante de la sn-
tesis de cidos grasos sino tambin un reactante necesario aunque no se convierta
1mismo en grasa. Este hecho se explica por el descubrimiento de que la malonil-
COA, y no la acetil-COA, es la principal donadora de carbono para la sntesis de
ciclo graso. La malonil-COA se hace a partir de la acetil-COA y COZ por medio
de la carboxilasa.
O O
II biotina, Mg2 + I 1
CH3-C-CoA + ATP + COZ + COOH-CH2-C -COA + ADP
acetil-COA
carboxilasa
malonil-COA
Esta reaccin se inhibe con cido palmtico, un cido graso comn, lo que
provee un efectivo mecanismo de control por retroaccin. La acetil-COA reque-
rida probablemente se deriva de la oxidacin del piruvato. Pero esto ocurre en la
mitocondria y la acetil-COA no pasa la membrana mitrocondrial.
Es probable que la fraccin acetato sea transferida a travs de algn trans-
portador a la COA citoplsmica como ocurre en la mitocondria animal. De otro
modo, la acetil-COA podra sintetizarse a partir del citrato, que puede difundir
fuera de la mitocondria, por un mecanismo similar a la reaccin animal.
citrato + ATP + COA + acetil-COA + oxaloacetato + ADP + Pi
La malonil-COA dona un grupo acetil en una reaccin de reduccin libe-
rando COZ y COA reducida; el aceptor es la acetil-COA, o la COA derivada o un
cido graso de carbonos pares en la forma siguiente
O
I I
O
/ I
CH,-C"CoA + COOH"CH,"C"COA + 2 NADPH e
O
I /
CH,-CH,-CH,"C"COA + COASH + 2 NADP + CO, + HZ0
La CoASH se reduce a COA. De hecho la reaccin no es tan sencilla como
aqu se presenta. La COA derivada de los cidos grasos que toma parte es trans-
ferida primero a una protena especial denominada el transportador acil-protena
(ACP). Despus de la condensacin se forma de nuevo una COA derivada del cido
de larga cadena resultante. La sntesis de cido palmtico, un cido graso satura-
do (sin dobles ligaduras), podra sumarizarse as
acetilCoA + 7 malonil-CoA+ 14 NADPH "+
CH3-(CH,),,-COOH + 7 CO, + 8 COA + 14NADP + 6 HZ0
El intermediario en la sntesis de grasa subsecuente es probablemente la
acil-COA-grasa y no el cido graso libre. La sntesis de cidos grasos insaturados se
lleva a cabo por reacciones de reduccin quizs tomando parte la ferredoxina y
el NADPH. Este proceso puede ocurrir en el cloroplasto y se activa con la luz.
POLfMEROS Y GRANDES MOLGCULAS 249
El esqueleto de glicerol de los triglicridos (Captulo 2, pgina 24) proba-
blemente se deriva del intermediario glicoltico dihidroxiacetona fosfato (DHAP)
por reduccin.
CH,OH
I I
C=O + NADH F= HOCH + NAD
I I
CH,OP CH,OP
CH,QH
DHAP glicerofosfato
De otro modo, el glicerol puede formarse a partir de un intermediario no
El paso final en la sntesis de grasa es la combinacin de tres cidos grasos
fosforilado y fosforilarse por la glicerokinasa siendo' el ATP el donador.
por enlaces estricos con el glicerol fosfato en las reacciones siguientes:
I
O
O
I I
I I
I
R,-C-COA
O ~"H,-O"C"R,
I I i
T
HOCH + '
I
O
R,-C-O-~"H + 2 COA
I I
CH20P
R,-C-COA
CH,OP
glicerofosfato acfl-CoA graso cido fosfatdico
O
O
I I
I 1
~CH,-O"C"Rl
O CH,-O-C-R,
I I I I I I R
O
R,-C-O-CH
I
+ R,-C-COA - CH-O-C-R, + COA + Pi
CH,OP
O
I I
CH,-O-C-R,
cido fosfatdico ad-COA graso triglicrido
Los cidos fosfatdicos intermediarios se usan en la formacin de grasas
sustituidas. stas incluyen a las lecitinas, cefalinas y derivados fosfatidil del glice-
rol e inositol, cuyas estructuras se muestran en la Figura 9-1. El primer paso en
la sntesis de las grasas sustituidas es la fosforilacin de la colina (para las leci-
tinas) o la etanolamina (para la cefalina). La colina o la etanolamina son luego
transferidas al trifosfato de citidina formando un derivado de ste que transfiere
la colina y etanolamina al cido fosfatdico liberando monofosfato de citidina.
Luego el nucletido es refosforilado a expensas del .ATP.
Otras grasas sustituidas incluyen a los glicolpidos y sulfolpidos (ver Fi-
gura 9-1). Estos compuestos se encuentran en los cloroplastos y en diversas regio-
nes de la clula metablicamente activas y pueden ser cofactores importantes en
algunas reacciones metablicas o de sntesis.
Las ceras vegetales son compuestos con largas cadenas de carbono, a me-
nudo slo hidrocarbonos, a veces con grupos alcohol, aldehdo o tetona. Gran
parte de estas ceras se depositan en la superficie externa de la parte area de las
plantas, protegindolas de la prdida de agua, de la infeccin y de daos mecni-
cos a las clulas de la epidermis. La mayora de las ceras vegetales que no tienen
260
METABOLISMO VEGETAL
Figura 9-1. Algunos I pidos sustituidos.
O
I I
O
I I
H2C-O-C"R,
I ; ;
I YH
I + I Y H
H, C-O-C- R ,
HC-O-C-R, I ; ;
HC-O-C-R,
CH,
H,C-O-P-O-CH,-CH2-N-CH3 H2C-O-P-O-CH,-CH,-NH,
I I I I 1
O CH3 O
Una lecitina Una cefalina
O
I 1
O
I I
H,C"O"C"R, H,C-O-C-R, OH
I ; I I ;
I
I
o=s=o
Hz~-o", -&"
HC"O"C"R, CH,OH HC-O-C-R,
H, ! - OQoH
OH H OH H
Un galactolipido Un sul fol fpi do
oxgeno o que lo tienen en el grupo alcohol o cetona adherido a la cadena en algn
sitio, poseen un nmero impar de tomos de carbono. Las que llevan un grupo
activo con oxgeno (por ejemplo alcohol o cido carboxlico) al final de la cadena
poseen un nmero par de carbonos.
CLOROFFLA
Ya se vio (Figura 7-4, pgina 165) la estructura de la clorofila. Las transforma-
ciones en su biosntesis fueron estudiadas en animales y bacterias y se presentan
en la Figura 9-2. Los materiales iniciales son el cido succnico, como succinil-
COA, y la glicina. stos se combinan para formar cidod-amino-levulnico; dos
molculas de esta sustancia se condensan y forman porfobilingeno, que contiene
ya un anillo pirrol. Cuatro molculas de porfobilingeno se condensan luego para
formar el porfiringeno que tiene la estructura tetrapirrlica bsica del ncleo
porfirnico. El porfiringeno sufre modificaciones para dar protoporfirina IX,
que posee esencialmente la estructura de la clorofila pero le falta el tomo de Mg.
Se introduce el Mg, se forma el anillo V de ciclopentanona y resulta la protoclo-
rofilida que se conjuga con una protena especial en el plasto, y se reduce por
accin de la luz que absorbe dando clorofilida a.* Luego el grupo fitil se esterifica
sobre el cido propinico en el anillo I V, dando clorofila a. Al parecer la clorofila
*EI ttlrmino c ~o r o ~l i d a generalmente se aplica a una clorofila, a la que le falta el grupo
fitil. Cuando le falta el tomo de Mg a veces se llama una clorofilina.
POLfMEROS Y GRANDES MOLfiCULAS 251
b se forma a partir de la clorofila a por oxidacin del grupo metil en el anillo I1
formando aldehdo.
Recientemente se propuso que el cido S -amino levulnico se elabora en
las hojas de maz y otras por una reaccin mucho ms simple que involucra la re-
duccin de a-cetoglutarato y la transaminacin del producto.
COOH
I
I I
CH,
I
I
CH,
I I I
c=o c=o
I
I I
COOH HC=O H,C=NH,
cido acetoglutrico cido dioxivalrico cido 6-aminolevulnico
COOH COOH
NADH NAD CHZ almina piruvato 2
= + A H, CH,
c=o
Esta sntesis se demostr en Chlorelh y en una bacteria fotosinttica, as
como en maz, frijol, cebada y pepino. Probablemente se produce en todas las
plantas y puede tener una importancia mayor a la va mencionada anteriormente.
El hierro es esencial para la sntesis del cido S -amino levulnico; la carencia
del hierro determina una clorosis caracterstica en los tejidos verdes. La sntesis de
la clorofila a partir de protoclorofila o protoclorofilida requiere de luz en la mayo-
ra de las especies. Las longitudes de onda ms efectiva para esta transformacin
son 450 y 650 nm, que corresponden a la mxima absorcin de la protoclorofila.
Todos los pasos de la sntesis de la clorofila, a partir del cido S -aminolevulnico
ocurren en el cloroplasto, el lugar de la sntesis de este cido no se conoce.
i 2 euccinil-COA + 2 glicina Figura 9-2. Sntesis de la cl orofi l a.
I
J 2c0,
COOH
I
CH,
I I
CH,
I
CH,
I
CH,
I I
COOH
c=o
cido 2 6-smlnolevullnico
CH, _ c=o
\NH2 -- CH,NHI,
COOH
I
CH, coon
I I
CH,
u:H
Porfobilln6geno
H %H, Contina
262 METABOLISMO VEGETAL
Figura 92. (continuacidn)
(4 molculas) I 4NH3
CH,
/
HOOC-CH,-C'H,
I
CHz" CHz-COOH
1 L a c o z
Coproporfi ri n6geno
1 8H +4c0,
Protoporfi ri na IX
Mg-protaporfi ri na
S-adenori l meti oni na
"CH3 de
I
CH,
II
CH, HC----C=O
I I
I I 1
CH, C-O" CH3
COOH o
Porfiringeno
Protocl orofi l a
Contina
POLfMEROS Y GRANDES MOLECULAS 253
Figura 92. (continuaci6n)
Luz +
1
Clorofila
Fitol
H 3 C p c q C H 2 - - C H 3
H3C b > d C H 3 + O r l l + z H Clorofila b
\
Clorofila a I
CH, HC-C=O
CH, C-O-CH,
I I
I II
H3,-C2,-O-C=0 0
ISOPRENOIDES
Este grupo tan diverso de compuestos de las plantas se constituye esencialmente
por polmeros del compuesto isopreno.
YH3
-CH=C-CH=C-
Los isoprenoides comprenden a los esteroides, los pigmentos de caroteno
y la vitamina A, el hule, los terpenos, los aceites esenciales, la cadena de fitol de
la clorofila, y algunas hormonas vegetales importantes: giberelinas y cido absc-
sico. Hay cientos y quiz miles de compuestos en este grupo, y todas l a s plantas
tienen la habilidad de sintetizar algunos de ellos. Ciertas plantas son ricas en iso-
prenoides como el hule. Este importante polmero es producido por varios grupos
de plantas, notablemente hs Euforbiceas a cuyo grupo pertenece el &bol del
hule comercial Heuea braziliensis.
El isopreno no ocurre como tal naturalmente. El ladrillo de construccin
bsico de los isoprenoides es el isopentenil pirofosfato que se forma por tres mo-
lculas de acetil-COA como se ve en la Figura 9-3. Estos compuestos pueden con-
densarse con una molcula de dimetilalil pirofosfato, posteriormente se puede
aadir un ismero derivado de s mismo, para formar monoterpenos, y grupos
adicionales de isopentenol pirofosfato. Las relaciones estructurales de los isopre-
noides comunes de presentan en la Figura 9-4.
Algunos miembros de este grupo son de gran importancia fisiolgica. Las
giberelinas, potentes fitohormonas, se derivan de los diterpenos que forman
estructuras intercclicas. El cido abscisic0 que induce letargo en las plantas tam-
bin se deriva de los intermediarios isoprenoides probablemente a travs de una
va ~metablica similar. Se sugiri que parte del mecanismo del control de creci-
264 METABOLISMO VEGETAL
Figura 9-3. Sntesis de los precursores t erphi cos isopentenil
pirofosfato y dirnetlalil pirofosfato.
O
I 1
O
I I
CH,-C-COA +CH,-C-COA Acetil-COA
It COA
O O
I I 11
CH,-C-CH,-C-COA Acetoacetil-COA
Acetil-CoA7J 1 LCoA
OH O
I I1
I glutaril-COA
CH,-C-CH,-C-C~A 0-hidroxi 0-metil
CH,-COOH
2 NADPH; +c:::Dp+
OH
I
I
CH,-C-CH,-CH,OH Acido meval6nico
CH2-COOH
2 ATP ft- 2 ADP
OH
I
I
CH3-C-CH,-CH,-O-PP cido mevalnico pirofosfato
CH,-COOH
ATP +=A : : , + Pi
CH3,
/C-CH,-CH,-O-P-O-P lsopentenil pirofosfato
CH,
CH,-C=CH-CH2-O-P-O-P Dimetilalil piroforfato
I
CH3
miento y del letargo se lleva a cabo por un intercambiador metablico entre la
sntesis de cido giberlico y de cido abscsico (ver Captulos 22 y 23).
De los sesquiterpenos (unidades de tres isoprenos) derivan diversas hormo-
nas animales, incluyendo la hormona juvenil de los insectos y de atraccin sexual
para el macho. Dado que los insectos parecen ser incapaces de elaborar sesquiter-
penos probablemente obtienen los esqueletos de carbono para estos compuestos
al alimentarse de las plantas. Similarmente, la vitamina A que muchos animales
son incapaces de sintetizar se deriva del caroteno sintetizado por las plantas. Los
esteroides, que a menudo tienen una seria influencia fisiolgica sobre los anima-
les, tambin derivan de los sesquiterpenos. Muchos de los compuestos que dan el
POLfMEROS Y GRANDES MOLGCULAS 255
aroma y sabor caracterstico de las plantas son aceites esenciales (esencia en sen-
tido de perfume).
El hule y las gomas se cuentan entre los productos comerciales ms valiosos
de las plantas. El chicle es una interesante mezcla de isoprenoides formada por una
variedad de ismeros del hule y triterpenoles, generalmente saborizados con mo-
noterpenoles como el aceite esencial de menta.
Figura 9-4. Relaciones de los compuestos isoprenoides. (Las unidades isopreno .est8n
encerradas en un circulo; nx =nljmero de unidades (le isopreno.)
Trementina
t
Monoterpenor Carotenoides
Aceites esenciales
-- Diterpenos (4x1
(fit011
lsoprenol (del
isopentenil pirofosfato)
Acido giberdiico ( 4x )
Mentol; aceites esenciales (2x1
Sesquiterpenes (3x1 _C Escualen0 (6x1
.-.
Aceites esenciales Farnesoi (3x1
COMPUESTOS FENLICOS Y AROMATICOS
Todas las plantas contienen un nmero de compuestos de complejidad variable
cuya unidad es el anillo bencnico. El anillo, o anil:los, puede estar ms o menos
reducido y con muchos grupos de sustitucin posibles. Muchas hormonas natu-
rales y sinteticas son fenoles sustituidos o sus derivados. Ciertos aminocidos,
el grupo prostktico de ciertas enzimas y la sustancia estructural lignina son com-
puestos fenlicos. La mayora de los compuestos fenlicos se deriva de los inter-
mediarios del metabolismo respiratorio a traves del cido shikmico, que se des-
cribe a continuacin.
AMINOCIDOS AROMTICOS; ACIDO INDOLACETICO. La fenilalanina, la tirosina y
el triptfano se forman por transformaciones del clido shikmico ilustradas en la
2 56 METABOLISMO VEGETAL
Figura 9-5. Los compuestos de que se parte son el fosfoenol piruvato, derivado de
la gliclisis, y la eritrosa-4-fosfato que puede derivarse del metabolismo fotosin-
ttico o tambin de la va accesoria de las pentosas en la respiracin. El primer
intermediario estable de importancia que tiene un anillo bencnico es el cido
shikmico que da su nombre a esta va de transformaciones. Una molcula adicio-
nal de cido pirvico se adhiere al CJ para formar cido corsmico. La cadena
lateral piruvil se transfiere por un cambio interno al C-1 formando cido pref-
nico. Este es un importante punto de ramificacin que a travs del cido p-hidro-
xifenilpirvico lleva a la tirosina.
El cido corsmico provee el punto de ramificacin para la sntesis del indol,
que lleva al triptfano y al ncleo indol para el cido indolactico, importante
sustancia en el crecimiento vegetal (ver Figura 9-5). La cadena lateral se desprende
y se adiciona nitrgeno para hacer cido antranlico. Se forma un derivado fos-
foribosil pirofosfato (PRPP) (ver la sntesis de purina, pgina 236) que se convierte
en el derivado glicerilfosfato del indol, el cual pasa a triptfano por reaccin con
la serina. El triptfano puede convertirse en cido indolactico por dos caminos
como se ve en la Figura 9-6. Una interesante salida lateral lleva a la serotonina,
un factor importante en la transmisin de los impulsos nerviosos en el animal.
FENOLES SIMPLES Y LIGNINA. De los intermediarios en las transformaciones que
llevan el cido shikmico, de la fenilalanina o tirosina, se derivan diversos fenoles
simples. Se incluyen los cidos cinmico, cumrico, cafeico, ferlico, protocar-
tecoico, clorognico y qunico, como se ve en la Figura 9-7. Estn ampliamente
distribuidos en las plantas pero sus funciones no son bien conocidas. Algunos
tienen propiedades antibacterianas o antifngicas y podran tener un papel en
la resistencia a las enfermedades en ciertas plantas. Adems, en las plantas se
encuentran muchos productos relacionados con ellos, llamados cumarinas, que
llevan en su estructura un doble anillo (Figura 9-7). Estos compuestos o sus de-
rivados a menudo son extremadamente txicos a los animales, por ejemplo el
dicumarol originado de la cumarina en el trbol durante el almacenaje. Las cuma-
rinas pueden formarse en las plantas en respuesta a la invasin de parsitos ha-
cindolas resistentes a la invasin.
Una enzima interesante en el metabolismo de los compuestos fenlicos es
la fenilalanina amonidiasa (PAL) que cataliza la desaminacin de la fenilalanina
para dar cido cinmico (Figura 9-7), un importante precursor de los compuestos
flavonoides (mostrados en la Figura 9-10). Esta importante enzima cataliza la
reaccin de ramificacin de la molcula, en la va que lleva al cido shikmico
(Figura 9-5), abrindola a un amplio rango de productos secundarios como ligni-
nas, fenoles y cumarinas, as como flavonas y antocianinas. El inters radica en
que la actividad de esta enzima es afectada por una gran variedad de factores ex-
ternos e internos. Vara segn el estado de desarrollo de la planta. Es estimulada
por las lesiones, la infeccin y por el compuesto fitorregulador etileno (ver p-
gina 425). Estos factores estn probablemente correlacionados: las lesiones y la
infeccin a menudo estimulan la formacin de etileno en los tejidos. Los com-
puestos fenlicos que se forman como resultado de la estimulacin de PAL in-
cluyen compuestos bactericidas potentes y los precursores de la lignina necesarios
para reparar las heridas. Ciertas hormonas (notablemente el IAA) inhiben a PAL
y su actividad se incrementa con alto contenido de carbono.
La faceta ms estudiada del PAL es la activacin por la luz, como se ve en
POLfMEROS Y GRANDES MOLECULAS 257
Figura 9-5. Biosntesis de los aminoilcidos aromilticos. Los productos finales de las trans-
formaciones sintcIticas estiln con maysculas.
Fosfoenolpiruvato (PEP)
+ - ci d0 :3-desoxiarabino heptulosnlco-7-fosfato
Eritrosa-4-fosfato
COOH
H OH
cido shi kmi co ci do 5-deshidroqunico
COOH
c=o
I
I
O
II
COOH
0 - 0 -2p 0
COOH CH,-C-COOH CHZ
O-C-COOH
O OH \ NAD*
H
ci d0 pr ef hi co \\ co, ci do fenilpirViC0
cido corismico
+
O I
Gl utami na cido g l u t h i c o 1 CH," E" COOH
Transaminasa
8
Transaminasa I NI., o
+ L C 0 2 0 TI ROSI NA
Q ~ K " " ' - C H , - O - P Serina O 7 C H 2 - f - C O O H NH,
+
1 L Piruvato
I
NH,
I
a:H
CH,-CH-COOH
OH
ci do hi droxi feni l pi rvi co
FENI LALANI NA
cido antranfl i co ' CH,-!-I-COOH
Fosforibosil
pi rofosfato
1 \-
H 3-fosfogliceraldehldo +-
Indol-3-glicerol fosfato
" TRI PTOFANO
258 METABOLISMO VEGETAL
Figura 9-6. Transformaciones del indol. Las transformaciones de
la triptamina y del indol piruvato ocurren en muchas plantas. La
transformaci6n del indolacetonitrilo se restringe a las Brassicaceae
y grupos emparentados. (Ilustraciones, cortesia del Dr. F. Wight-
man. Universidad Carleton, Ottawa, CanadB.)
, - - - Tr i pt of ano
1 / /'-y / "\
' ci do i ndol pi r vi co
I
Tr i pt ami na .- --+ Ser ot oni na
\
\
\ co,
l ndol acet oni t r i l o
\ Indol acet al deh(do
Aci do i ndol acet i co
l ndol al dehf do CH,--COQH
I
H
la Figura 9-8. Varios tratamientos de luz, adems de la azul que se presenta en la
Figura 9-8, activan a la enzima en un amplio rango de tejidos. La fase de retardo
en la respuesta no se pudo explicar hasta ahora, pero puede relacionarse con una
respuesta del fitocromo, un pigmento involucrado en la fotomorfognesis (ver
Captulo 20) . Tanto los datos como los puntos de vista sobre la naturaleza de la
estimulacin son conflictivos. Los inhibidores de la sntesis proteica impiden el
Figura 9-7. Fenoles simples y derivados.
FENOLES SI MPLES
CH
CH
/ I
CH
CH
I /
CH
I 1
CH
I I I
COOH
COOH
COOH
ci do caf ei co
ci do f er l i co ci do p-cum8r i co
Contina
POLfMEROS Y GRANDES MOLECULAS 259
Figura 9-7. (continuacin)
CH
I1
CH
I
c=o
I
HO
COO H
OH
CH COOH
I1
CH
ci do protocatacui co
I
COOH
ci do transcinhmico
ci do cl or oghi co
Cl JMARl NAS
c H 3 - 0 9 &
ErcoDoletina Cumari na
MON~MERO: ; DE LIGNINA
CH CH
CH
CH,OH CH,OH CH,OH
I1
I
CH
CH CH
I I I t
1 I
Al cohol coni f eri l Al cohol sinapil Al cohol D-cumari l
260
METABOLISMO VEGETAL
-
-
e
Irradiado
Testigo (oscuridad)
Figura 9-8. Efecto de l a luz azul en la fenila-
lanina-amonia-liasa (PAL) en el hipoc6tilo de
pepinillo. (De datos H. Smith: The bioche-
O I I I 1 mistry of photomorpho genesis. En D.H.
O 6 12 18 24 Northcote (ed.): Plant Biochemistry. Butter-
Horas de iluminaci6n worths, Londres, 1976.)
incremento de PAL, lo que sugiere que la luz estimula su sntesis. Sin embargo,
la enzima parece estar en un estado de continua sntesis y degradacin (produc-
cin cclica, ver pgina 234) y el efecto de la luz puede ser la inhibicin de su
desintegracin, ms que la estimulacin de su sntesis. Los experimentos en los
que el tejido se incub con agua pesada (DZ O), durante la activacin no mostraron
mayor incorporacin de D en la enzima en el tejido iluminado, que en el testigo
en el oscuridad. Por lo tanto, la estimulacin lumnica parece ser la activacin de
una enzima existente o la prevencin de su destruccin. Otro fundamento para
esta explicacin es la rpida prdida de actividad despus de un tiempo aunque
se contine el tratamiento con luz, como se ve en la Figura 9-8. Los inhibidores
de la sntesis proteica, aplicados cuando la estimulacin est al mximo, previe-
nen la prdida subsecuente, lo que sugiere que el metabolismo proteico est invo-
lucrado tanto en la prdida como en el incremento de actividad. Por ejemplo,
los inhibidores de la sntesis proteica pueden inhibir igualmente la produccin
de activadores e inactivadores del PAL. Estas ideas se resumen en la Figura 9-9.
Es obvio que este sistema no est an totalmente entendido. Sin embargo,
en un ejemplo interesante de una enzima reguladora que controla las actividades
relativas de los procesos metablicos que intersectan sus vas de transformacin.
Por esta razn y porque es fcil de experimentar ha llegado a ser una de las enzi-
mas vegetales ms estudiadas.
Despus de la celulosa, la lignina es la sustancia biolgica ms importante
tanto en trminos de su cantidad total en la Tierra como de su importancia es-
tructural para el tejido leoso o maderable. La lignina es extremadamente difcil
de estudiar como compuesto qumico porque no puede extraerse fcilmente sin
que sufra una fuerte degradacin. Sin embargo, los monmeros de la lignina pue-
den ser aislados y se ha encontrado que son principalmente alcoholes derivados de
sustancias fenlicas simples, como por ejemplo alcoholes coniferil, sinapil y
p-cumaril, mostrados en la Figura 9-7. Los monmeros de la lignina se arreglan al
azar, aparentemente, por medio de un complejo sistema de enlaces mutuos. La
POLfMEROS Y GRANDES MOLGCULAS
LUZ
Slntesis del activador
it-
lnhibidores de la
slntesis proteica
PAL inactivo PAL activo
=d
26 1
, Luz -7, lnhibidores de la
slntesis proteica
Sntesis del
inactivador
Figura 9-9. Posible mecanismo de activacibn de
la fenilalanina monia-liasa (PAL).
naturaleza de algunos de ellos es conocida pero m0 lo es el arreglo integral de
la lignina natural caracterstica. El hecho importante es que una cantidad masiva
de carbono metabolizado es convertido en lignina por la va del cido shikmico.
Esta va tiene pues una importancia bsica en la s,ntesis de muchos metabolitos
importantes que incluyen compuestos tan diversos como los aminocidos de las
protenas, hormonas y materiales estructurales de las plantas.
FLAVONAS Y ANTOCIANINAS. Estos compuestos se relacionan entre s y son de-
rivados de una estructura con triple anillo que se muestra en la Figura 9-10. El
anillo B se deriva de la va del cido shikmico y el resto de la estructura parece
derivarse por una condensacin de unidades de acetil-COA probablemente a con-
tinuacin de su conversin en malonil-COA.
Las flavonas y antocianinas son interesantes; porque tienen colores brillan-
tes. Sin duda son un factor de atraccin de los insectos hacia las flores, donde se
encuentran principalmente. A menudo hay similitud entre las antocianinas de
grupos de plantas emparentados entre s y se han usado en la quimiotaxonoma
(estudio de las relaciones entre los organismos basado en las similitudes o dife-
rencias entre sus constituyentes o sus procesos qumicos). El funcionamiento de
las antocianinas se liga estrechamente con el desarrollo, y ciertas leucoantociani-
MS (sin color) .actan,)segn se sospecha, 'como hormonas del crecimiento en las
semillas en desarrollo.%os factores del medio, incluyendo bajo nitrgeno o fs-
foro, causan un incremento en la formacin de antocianinas en los tallos y hojas.
LLos caractersticos colores del follaje en otoo se deben a las antocianinas, y su
produccin se ve muy afectada por la temperatura. La formacin de antocianina
a menudo se acelera en tejidos viejos. Generalmente su sntesis aumenta con la
luz, siendo la luz azul la ms efectiva,h
26 2
METABOLISMO VEGETAL
Figura 9-10. Antocianidinas y antocianinas. Las antociani-
dinas se caracterizan por la sustitucin en el anillo B.
2' 3'
7 al A lo4, H O P A 04,
6 6' 5'
OH 5'
4
Ncleo de la flavona
O
H
Ncleo de la antocianidina
Antocianidina
Pelargonidina
Cianidina
Delfinidina
Peonidina
Petunidina
Malvidina
3' 4' 5' Color
-
OH -
Rojo
OH OH -
Roj o
OH OH OH Azul
OCH3
OH -
Rojo
OCH3
OH OH
Prpura
OCH3
OH OCH Malva
Las antocianinas son glicsidos derivados en los hidroxilos 3, 5 6 7
en el anillo A y el ncleo central.
3: Varios azcares distintos, el mds comn glucosa, a menudo di o
trisadridos.
5: A veces glucosa, rara vez otros azcares.
7. Rara vez glicosilador y en todo cam solamente por la glucosa.
LECTURAS ADICIONALES
Annual Review of Bi ochemi stry y Annual Review of Plant Physiology.
Bonner, J. y J.E. Varner (eds.): Plant Bi ochemi stry. Academic Press, Nueva York. 1965. Cap.
Pridham, J.B., y T.S. Swain: Biosynthetic Pathways in Hi gher Plants. Academic Press, Nueva
Robinson, T., The Organic Constituents of Higher Plants. Burgess Publishing Co. Minneapolis,
13 y 21-28.
York. 1965.
Minn. 1967.
SECCIN 111
SUELO, AGUA Y AIRE:
LA NUTRICIN
DE LAS PLANTAS
Captulo 10
EL SUELO Y LA
NUTRWCI6N MINERAL
EL SUELO
El suelo suministra soporte fsico y anclaje para muchas plantas, as como nutri-
mentos de diversas clases para la mayora de ellas. Sin embargo, es mucho ms
que un soporte pasivo o un simple recipiente de agua y sales nutritivas; es un
medio complejo que influye en la vida de la planta de muchas maneras, ya que
las races no slo viven en 41sino que crecen a travs suyo, y sus propiedades qu-
micas y fsicas pueden tener fuertes interacciones con las races vivas. El sistema
suelo-raz es un complejo viviente y dinmico cuyas interrelaciones se deben valo-
rar antes de que pueda comprenderse la vida de la planta que crece en l.
TEXTURA Y ESTRUCTURA DEL SUELO. La textura del Sue10 se refiere al tamao
de las partculas individuales. Existen suelos con ,varias texturas, desde las arcillas
extremada y finamente divididas hasta la arena gruesa, junto con variadas canti-
dades de materia orgnica. Las partculas del suelo se clasifican de acuerdo a su
tamao en: arena (2-0.02 mm de dimetro), limo (0.02-0.002 mm de dimetro)
y arcilla (menos de 0.002 mm de dimetro). Una mezcla aproximadamente igual
de estas tres se llama marga. Las partculas de arena son fragmentos de roca pe-
queos, a menudo no intemperizados y no interactan fuertemente con agua o
minerales. Las partculas de arcilla son suficientemente pequeas para ser coloi-
dales y muestran las propiedades de los coloides (ver pgina 14). Las partculas
de limo son intermedias; sus superficies pueden ser lisas o no intemperizadas, a
menudo estn cubiertas con arcilla y as exhiben propiedades intermedias entre
las de arena y arcilla. El agua se percola rpidamente a travs de suelos arenosos
y se evapora de ellos con facilidad. Los suelos arcillosos retienen el agua fuerte-
mente. La capacidad de retencin de agua tambin est muy afectada por la can-
tidad de materia orgnica presente. La relacin entre la textura del suelo y la
cantidad de agua que retiene se muestra en la Tabla 10-1.
La estructura del suelo se refiere a la organizacin de las partculas en terro-
nes o agregados. En suelos arenosos los agregados son generalmente pequeos,
de ruptura fcil y consisten a menudo de granos sencillos. Sin embargc, los
suelos arcillosos o arenosos, particularmente los que contienen mucha materia
orgnica, a menudo se organizan en grumos o migajones de 1 mm a varios de di-
metro. Los buenos suelos tienen una estructura desmenuzable. Esto les confiere
266 SUELO, AGUA Y AIRE: LA NUTRICI6N DE LAS PLANTAS
Tabla 10-1. Relacin entre textura y capacidad de retenci6n
de agua de los suelos.
Textura del suelo Retenci6n de agua,
g/1 ,000 cc
Arena gruesa 40- 1 O0
Marga arenosa 100-175
Marga limosa 150-200
Marga arcillosa 175-225
Arcilla 175-250
Suelos estercolados y de turba 200-300
un rea superficial grande y por ello buenas propiedades de retencin de agua y
buena aireacin. La estructura del suelo puede daarse o cambiarse por medios
mecnicos (por ejemplo, el trabajo en tierras arcillosas cuando estn demasiado
hmedas produce terrones pesados y compactos). Las arcillas pesadas son parti-
cularmente inestables y tienden a enfangarse, con lo cual pierden su estructura
y se tornan una masa slida. Tales suelos son de aireacin y drenaje pobres y
generalmente no son muy productivos. Para usos agrcolas la estructura de los
suelos arcillosos pesados debe reacondicionarse mediante la ruptura de los terro-
nes y la adicin de materia orgnica, lo cual coadyuva a impedir el anegamiento.
La materia orgnica (del 5 al 15% en la mayora de los buenos suelos agrco-
las) es importante para el mantenimiento de la estructura y capacidad retentiva
de agua del suelo. Lo es tambin porque ayuda a la retencin de nutrimentos que de
otro modo podran lavarse del suelo. Adems, la materia orgnica ayuda a sumi-
nistrar substratos para el metabolismo de los organismos del suelo que son incre-
blemente abundantes en la mayora de los buenos suelos. El peso de la totalidad
de organismos (bacterias, hongos, algas y animales invertebrados) en los primeros
treinta centmetros de profundidad de los suelos es impresionantemente grande,
y por lo general flucta entre 500-700 g/m2 (equivalente a 5-7 toneladas/ hect-
rea), pero en algunos puede ser superior a las 10 toneladas de tejido vivo por
hectrea. Estos organismos son muy importantes en la produccin y el manteni-
miento de una buena estructura del suelo; adems, incrementan la fertilidad me-
diante la disolucin o liberacin de nutrimentos ligados que de otro modo po-
dran no estar disponibles para las plantas. Tambin, son de gran importancia
en la fijacin del nitrgeno y en otras relaciones simbiticas con las races de la
plata (ver Captulos 8 y 27). El suelo posee tambin una atmsfera limitada que
puede contener de 10 a 20 veces ms CO, que el aire, tal vez debido a las activi-
dades metablicas de los organismos que contiene. Esto podra ser un factor
importante en la conocida actividad p-carboxilante de las races.
El complejo de eventos que conduce al desarrollo y formacin de tipos
especficos de suelos y la diversidad de sus composiciones estn ms all del al-
cance de este libro. Sin embargo, es importante sealar que el origen, estructura
y composicin del suelo tienen una gran influencia en el grado de aireacin y las
relaciones de agua de los suelos, as como en el espectro, las cantidades y la dis-
ponibilidad de los minerales que contienen. Bstos, a su vez, son factores podero-
sos, determinantes del tipo de plantas que pueden crecer en el suelo y de los
problemas fisiolgicos que stas enfrentan en su crecimiento.
EL SUELO Y LA NUTRICIdN MINERAL 267
AGUA EDAFICA. El agua se presenta en el suelo de diversas formas y est sujeta a
diversos tipos de stress. El agua es retenida en los suelos por fuerzas absorbentes
o por presin hidrosttica (es decir, por abajo de la tabla de agua). Tiende a dejar
el suelo por evaporacin, gravedad o absorcin hacia el interior de las races.
Puesto que el paso del agua a la raz tiene lugar por smosis, debemos considerar
el potencial osmtico del agua del suelo as como, las diversas fuerzas que la re-
tienen en l.
La forma ms efectiva de examinar su movimiento en el suelo es considerar
su potencial de agua, I) (ver Captulo 3). El agua difunde en el suelo como lo hace
entre las clulas de una regin de alto potencial a otra de bajo potencial. Los com-
ponentes del potencial de agua de un suelo son los mismos que los de una clu-
la: potencial de presin ($+), el cual incluye la accin de fuerzas de gravedad, poten-
cial osmtico (&) de la solucin del suelo, y el potencial mtrico ($'M ), una expre-
sin de las diversas atracciones qumicas y fsicas entre el agua y las partculas del
suelo que se traduce en la retencin de agua por los suelos. El potencial mtrico
incluye la atraccin capilar y las fuerzas intermoleculares que fijan agua de hidra-
tacin en los coloides del suelo. En suma, el potencial de agua se puede expresar
en unidades de fuerza o presin como sigue:
El potencial mtrico y el osmtico interactan fuertemente en los suelos
debido a la absorcin selectiva del agua o los solutos, por las partculas coloida-
les, as que su contribucin exacta al potencial de agua del suelo es difcil de
determinar.
Los trminos tensin de agua o potencial de agua se han usado en el pasado
para describir la tendencia de un suelo a absorber agua. Estos trminos son equi-
valentes en valor, pero de signo opuesto a $, el cual describe apropiadamente el
potencial de agua, ms que una caracterstica de la matriz.
El potencial de agua ($') de los suelos vara considerablemente. El valor de
$ en un suelo totalmente saturado de agua pura a presin atmosfrica es cero.
Sin embargo, el agua edfica normalmente est presente como solucin, y en este
caso $' sera inferior a cero en un valor igual al potencial osrntico de la solucin.
En el otro extremo de la escala, el potencial de agua de un coloide seco podra
ser tan bajo como -3,000 bars (3,166 kg/ cm2). Los valores ms usuales fluctan
alrededor de -1 -2 bars en suelos normales. El potencial de agua puede me-
dirse colocando suelo en un recipiente que posea una membrana porosa soste-
nida en su fondo y determinar la presin aplicada (mediante aire o centrifugacin)
que se necesite para forzar el agua a salir.
Cuando el suelo se ha humedecido por completo y se le permite drenar hasta
que el movimiento capilar cese del todo, se dice que est a su capacidad de campo.
Los suelos arcillosos que poseen un rea superficial muy grande y un bajo poten-
cial mtrico pueden retener mucha ms agua que los suelos arenosos. La relacin
entre el potencial de agua y la cantidad de agua presente en los suelos tipicos se
muestra en la Figura 10-1. Se debe advertir que los suelos arcillosos retienen gran-
des cantidades de agua. stos se secan lentamente, pero el agua que permanece
es retenida con gran tenacidad (es decir, su potencial de agua es muy bajo) y nece-
sitan mucha fuerza para extraerla.
Cuando el potencial hdrico desciende demasiado, las plantas ya no son
capaces de absorber el agua necesaria o de absorberla lo suficientemente rpido
268 SUELO, AGUA Y AIRE: LA NUTRICIdN DE LAS PLANTAS
I 1 I I I I
"O -0.25 -0.5 -0.75 -1 .o -1.25
Potencial de agua del suelo, bars
Figura 10-1. Relaci6n entre contenido de agua y potencial de agua, o
tensi6n de humedad del suelo, de los suelos. Las flechas indican la capa-
cidad de campo de los suelos.
para reemplazar la que se pierde por transpiracin. Es en este punto que las hojas
empiezan a marchitarse. Si la prdida de agua se detiene al colocar las hojas en
una atmsfera saturada y ellas se recuperan, se dice que estn en un estado de
marchitez incipiente. Sin embargo, llega un momento en que el contenido de agua
del suelo es tan bajo que las hojas no consiguen recuperarse de la marchitez aun-
que se coloquen en atmsfera saturada de agua. El contenido de agua del suelo
en este punto se llama porcentaje de marchitez permanente. Se considera que es
una constante del suelo, aunque vara ligeramente con la capacidad de la planta-
prueba para absorber agua. Los valores promedio son alrededor del 1% para la
arena, 3-6% para la marga y hasta 10% para la arcilla, lo que representa un po-
tencial de agua de alrededor de -15 bars. El agua que se conserva en el suelo al
porcentaje de marchitez permanente no est disponible para las plantas, y las que
mantienen por mucho tiempo ese porcentaje mueren.
El agua puede presentarse en el suelo de varias formas: como agua de hi-
dratacin de coloides, como agua libre (a menudo en los espacios capilares del
suelo) y como vapor. Cuando las races remueven el agua del suelo, ms agua
difunde hacia el sitio de absorcin para su reemplazo. La resistencia al movimien-
to de agua es un fenmeno complejo pero, en general, es proporcional a la can-
tidad de agua presente en el suelo, al tamao de los espacios o huecos entre las
partculas del suelo y a la tenacidad con la que el agua se adsorbe sobre las part-
culas coloidales del suelo. Evidentemente el agua se mueve mucho ms rpido
en la arena que en la arcilla. Cuando el contenido de humedad del suelo desciende,
el agua puede evaporarse y moverse a travs de 1 como vapor. Por lo tanto, el
potencial osmtico del agua edifica puede llegar a ser un factor importante en su
movimiento porque el sistema agua-aire-agua constituye una barrera semipermea-
ble que permite el paso del agua pero no de slidos disueltos. En general, el mo-
EL SUELO Y LA NUTRICI6N MINERAL 269
vimiento de agua a travs del suelo es muy lento y llega a ser casi imperceptible
en condiciones de porcentaje de marchitez permanente. Las plantas absorben no
slo el agua que se mueve hacia ellas como consecuencia del reducido potencial
hdrico alrededor de las races, sino tambin el agua del suelo, que las races en-
cuentran conforme crecen a travs de l. El enorme y permanente crecimiento de
las races es necesario para satisfacer este requerimiento, aunque naturalmente
no pueden crecer hacia cada partcula del suelo llena o cubierta de agua, pues no
habra suficiente agua para producir tal cantidad de races.
NUTRNENTOS. Los nutrimentos y otros compuestos se presentan en un estado
dinmico en el suelo. Se aaden o remueven de manera continua mediante diver-
sas vas, y la fertilidad de un suelo depende de las tasas relativas de adicin y
remocin de sustancias nutricias. Adems, los elementos pueden retenerse con
ms o menos firmeza en el suelo, por enlaces qumicos y fsicos. As pues, la fer-
tilidad puede afectarse tambin por la facilidad o dificultad con que los nutri-
mentos se absorben por la raz, as como por su tendencia a permanecer o ser
lavados del suelo por la lluvia o el movimiento de agua subterrnea. Los iones di-
sueltos en la fase suelo-agua estn libremente disponibles para las races; los que
estn vinculados a partculas del suelo slo estn disponibles conforme entran
en solucin; de manera que la fertilidad de un suelo depende de la concentracin
de nutrimentos en solucin, no de los elementos nutritivos que contenga.
Puesto que las partculas de suelo se intemperizan y rompen continuamen-
te, su composicin y tasa de degradacin afecta la fertilidad del suelo. Otros
factores que afectan la cantidad y disponibilidad de nutrimentos son pH, con-
tenido de oxgeno y capacidad de intercambio inico del suelo. Este ltimo fac-
tor depende de la naturaleza del mineral y fragmentos de roca de los cuales est
formado el suelo, y particularmente del tamao de las partculas. Un fino suelo
arcilloso contiene micelas coloidales con una enorme rea superficial. Puesto que
l as superficies de los coloides generalmente estn cargadas, pueden ser capaces de
retener grandes cantidades de iones de modo ms o menos firme. Adems, el ma-
terial orgnico presente en el suelo puede tener una gran capacidad de intercambio
inico. sta depende, naturalmente, de la disponibilidad y concentracin de iones
H + o OH - ; asimismo, la tendencia de cualquier ion dado a ser absorbido depende
en gran medida de la concentracin de otros iones presentes.
La presencia de microorganismos en el suelo afecta fuertemente su fertili-
dad. Los microorganismos pueden ser nocivos al competir con las plantas por iones
que se presentan en bajas concentraciones, porque muchos de estos iones llegan
a estar disponibles en forma orgnica. Alternativamente, la actividad de los micro-
organismos puede afectar el intercambio inico cambiando el pH del suelo, de
manera que algunos elernentos llegan a estar ms disponibles para las plantas. Es-
tos efectos pueden ser muy notables. La infestacin microbiana del suelo puede
aumentar considerablemente el crecimiento de las plantas a1incrementar la dispo-
nibilidad de hierro, boro o molibdeno, por ejemplo.
Los iones pueden estar presentes disueltos en la solucin del suelo, o vin-
culados por reacciones de intercambio inico como nutrimentos intercambiables
en el complejo de intercambio de aqul. A su vez,, pueden presentarse en la es-
tructura molecular de las micelas, de las cuales est compuesto el suelo O estar
muy firmemente unidos a l, de manera que no sean intercambiables.
Los niveles de iones en la solucin del suelo se miden extrayendo mues-
tras de agua y analizndolas. Ciertos iones, como sulfatos y cloruros, solamente
270 SUELO, AGUA Y AIRE: LA NUTRICI6N DE LAS PLANTAS
poseen una dbil energa de enlace y por ello usualmente se presentan en grandes
cantidades en esas soluciones. Otros, como los de calcio y magnesia pueden estar
en cantidades grandes o pequeas segn la naturaleza de las partculas del suelo,
a las que estn absorbidos muy fuertemente, Los niveles de nutrimentos intercam-
biables en el complejo de intercambio se miden mediante percolacin del suelo
con acetato de amonio o cido actico, los que desplazan los iones del complejo
de intercambio. El cido actico usualmente desplaza ms micronutrimentos que
el acetato de amonio, tal vez debido a su mayor solubilidad en soluciones cidas.
Las sustancias no intercambiables pueden medirse luego de una adecuada degra-
dacin qumica del suelo.
Los aniones y cationes quedan retenidos en el complejo de intercambio, lo
que indica que el suelo es anftero (que posee cargas negativas y positivas). La
capacidad de intercambio catinico es por lo regular mucho mayor y ms impor-
tante que el intercambio aninico. La capacidad de intercambio vara enorme-
mente entre suelos, como se muestra en la Tabla 10-2, siendo ms alta en los arci-
llosos y los de alto contenido orgnico. Las diferentes arcillas poseen diferentes
estructuras cristalinas, las que afectan s u capacidad de absorcin inica, as como
su comportamiento ante la hidratacin. Las partculas de caolinita estn formadas
de capas alternantes de slice y almina que se mantienen juntas rgidamente.
Slo las superficies exteriores de las partculas estn disponibles para la absorcin
de agua o intercambio inico, as que la capacidad de iritercambio y retencin de
agua de la caolinita es bastante baja y no se dilata mucho con la hidratacin. Las
partculas de montmorilonita, por otra parte, estn compuestas de capas de al-
mina intercaladas entre dos capas de di ce. Cada uno de estos sandwiches est
laxamente unido al siguiente y el agua o los iones pueden enlazarse sobre todas las
superficies que quedan entre los sandwiches, dentro de las partculas. Por lo tanto,
la montmorilonita posee una gran capacidad para retener agua y minerales y sufre
considerable hinchamiento con la hidratacin.
La disponibilidad para la solucin del suelo, y por lo tanto para las plantas,
de elementos en el complejo de intercambio depende de su energa de ligamiento,
una medida de la firmeza con la cual los iones estn retenidos. El aluminio, el ba-
rio y el fsforo tienen alta energa de ligamiento y, en consecuencia, se presentan a
bajas concentraciones en la solucin del suelo. Los iones como el calcio, el potasio
y el magnesio poseen energas de ligamiento intermedias, en tanto que el sodio y
la mayora de los aniones (cloruro, sulfato y otros) las tienen dbiles y consecuen-
temente tienden a abundar en la solucin del suelo. El fosfato constituye una
Tabla 10-2. Capacidad de intercambio catinico de algunos
suelos.
Tipo de suelo Capacidad,
mEq/ 100 g
Arc I las
Caolinita
Montmorilonita
Humus
Porcin arcillosa de marga
Porci6n orginica de marga
Porcin arenosa de marga
5-1 5
80-120
150-300
3-1 O
10-20
0-1
EL SUELO Y LA NUTRICION MINERAL 271
excepcin por estar por lo comn fuertemente ligado. Los iones con elevada ener-
ga de ligamiento tienden a desplazar iones de baja energa. Asimismo, aadir
una cantidad grande de un ion de enlace ms dbil an, se traduce en el desplaza-
miento y liberacin de una pequea cantidad de iones de enlace ms fuerte. Los
iones hidrgeno e hidroxilo son de enlace muy fuerte, por lo que el pH es impor-
tante en la determinacin de la disponibilidad de minerales presentes en los suelos.
La Figura 10-2 muestra el efecto de la acidez o alcalinidad del suelo sobre la dis-
ponibilidad de varios nutrimentos importantes.
La cantidad de un ion presente en la soluci6n del suelo y el complejo de
intercambio de ste es, por lo tanto, el resultado de varios factores: la cantidad
total presente (que puede tener relacin con la naturaleza mineral de las partcu-
l as del suelo), su capacidad de intercambio, su pH, as como la relativa abundancia
de otros iones. La adicin de un ion de enlace fuerte como el aluminio liberar
ms iones de enlace dbil a la solucin del suelo, incrementndose as su abundan-
cia en la fase del suelo accesible a las races. El fsforo est a menudo en provisin
limitada porque est fuertemente enlazado; los iones hidroxilos que liberan las
Figura 10-2. El efecto del pH sobre la disponibilidad de
nutrimentos para las plantas. La anchura de las bandas ho-
rizontales representa la solubilidad del nutrimento. La
solubilidad este en relaci6n directa a la disponibilidad del
nutrimento en una forma i6nica susceptible de absorberse
por la planta. (De C.J. Pratt: Plant Agriculture. W.H. Free-
man and Company. San Francisco, 1970. Utilizada con
permiso.)
Fuertemente
I I 1
4 4.5 5 5.5 l b
272 SUELO, AGUA Y AIRE: LA NUTRICI6N DE LAS PLANTAS
races desplazan los iones fosfato del complejo de intercambio, lo cual aumenta
la disponibilidad del fosfato. Similarmente, el calcio que se aade a la solucin
del suelo en forma natural o mediante fertilizacin (abono de cal) libera el mag-
nesio y el potasio del complejo de intercambio por desplazamiento.
La remocin de iones del suelo por las races determina la liberacin de
ms iones del complejo de intercambio. As se mantiene un equilibrio dinmico
entre la plata, el agua del suelo y el complejo de intercambio, con el resultado de
que ms nutrimentos llegan a estar disponibles para la raz conforme se remueven,
o mientras ms agua se aada al suelo. Un clculo de los fisilogos austracos
M. Fried y H. Broeshart ilustra este punto. Un acre de maz que produce 100
busheles de grano transpira alrededor de 10 pulgadas-acre de agua durante la esta-
cin de crecimiento. El cultivo requiere 25-50 libras de fsforo, 50-100 libras de
calcio y magnesio y 100-200 libras de potasio. Las soluciones del suelo prome-
dio contienen cerca de 20 ppm de fsforo, 40 ppm de calcio y magnesio, y 100 ppm
de potasio. Siempre que estas concentraciones se mantengan en equilibrio con
el complejo de intercambio del suelo, la cantidad de agua que atraviese la planta
por transpiracin contendr lo suficiente de estos elementos para el crecimiento
del cultivo.
Un sumario de los nutrimentos importantes del suelo se presenta en la
Tabla 10-3, junto con algunas observaciones sobre su distribucin y propiedades.
NUTRICIdN MINERAL
Adems de los elementos mayores de su estructura orgnica, carbono, hidrgeno
y oxgeno, las plantas contienen una gran variedad de elementos en varias formas
qumicas. Evidentemente no se puede categorizar los constituyentes minerales
de las plantas segn el estado en que estn presentes. Una porcin considerable de
minerales, particularmente nitrgeno, azufre y calcio, est presente como parte
de la estructura orgnica. Algunos de los metales estn presentes como compo-
nentes de enzimas y moldculas catalticas. Otros minerales pueden estar presentes
simplemente porque son absorbidos en forma no selectiva junto con agua del suelo
y tienden a acumularse como sustancias inicas disueltas o almacenadas (selenio,
estroncio, sodio y potasio cuando existen en exceso), o como precipitados en el
tejido (aluminio, silicio y calcio).
COMPOSICI6N QUfMICA DE LAS PLANTAS. La precisa composicin mineral de las
plantas es de gran inters cuando se las considera como fuente de alimento, pues
la ausencia o sobreabundancia de ciertos elementos pueden afectar su valor ali-
menticio. Sin embargo, con ciertas excepciones especficas, la composicin de la
planta refleja en gran medida la fertilidad del suelo sobre el cual se desarrolla, de
manera que los anlisis detallados de la composicin de elementos de las plantas
no son de gran valor, excepto para los cientficos agrcolas. Adems, esos datos
son muy difciles de obtener.
La tcnica usual es convertir la planta en cenizas a altas temperaturas y
luego analizarlas qumicamente. La qumica es difcil, y muchos elementos, par-
ticularmente nitrgeno, azufre y cloro, forman compuestos voltiles, a menudo
orgnicos y se pierden parcialmente. Un tpico anlisis de una planta de maz se
presenta en la Tabla 10-4. Puede verse que una gran proporcin de la parte mine-
EL SUELO Y LA NUTRICIdN MINERAL 273
Tabla 10-3. lones nutrientes del suelo.
I on Niveles ordinarios, ppm Observaciones
Solucibn del Complejo de
suelo intercambio
Caz+ 50- 1,000
Mg2+ 1-100
K+ 1-50
Na+ 10-500
Ftz 1 0.1-25
Fe(OHI2+
FeOH2+
Mn2+ 0.2-2
cu2+ o. 1
so4 - 3-5,000
CI- IO-1,000
H2B03- 1 0.14
H6032-
MOO& 3- <0.001
500-2,000
20- 150
10-50
3-50
1-500
14,000
10-1,000
3-20
10-1,000
Bajo
O
Muy bajo
Bajo
Usualmente abundante en suelos calizos, pero
puede ser deficiente en suelos granticos o are-
nosos. El encalado con CaO o Caco3 corrige
esta condicion, adembs de la elevacibn del pH
de suelos bcidos, incrementndose por tanto los
suministros de K + y otros cationes por inter-
cambio. El exceso de encalado podrFa dafiar los
suelos al reducir la disponibilidad de Fe, Mn, Zn,
Cu y B.
Alto en suelos calizos; bajo en los granlticos.
Tiende a fij,arse en suelos arcillosos mediante
absorcibn en la trama cristalina pero permane-
ce en equilibrio con K+ soluble.
Ocasionalmente muy alto en suelos salinos.
Tiende a entrar en complejo con materiales orgb-
nicos. Mbs disponible en suelos bcidos.
Mbs disponible en suelos bcidos. Los 6xidos se
precipitan convirtihdose en disponibles por ac-
cibn bacteriarra.
Muy firmemente enlazado en el complejo de in-
tercambio.
Ms disponible en condiciones alcalinas. Puede
estar firmemente enlazado en el complejo de in-
tercambio. Tanto el Cu como el Zn forman fos-
fatos insolubles.
Fuertemente retenido en el complejo de inter-
cambio. Cantidades considerables de P pueden
retenerse en forma orgbnica. Los fosfatos insolu-
bles de Ca (en pH alto) o AI y Fe (en pH bajo)
son sblo liberados lentamente.
La mayor parte del sulfato de los suelos se en-
cuentra en la solucibn del suelo o en formas or-
gnicas. La contaminacin atmosfdrica ( SO2 y
SO3) constituye una importante fuente de S
para las plantas en areas industriales.
Relacionado principalmente con la acumulacibn
de la sal.
El encalamiento tiende a disminuir la disponibi-
lidad de B.
A diferencia del Mn, el Mo llega a ser mbs dispo-
nible en la forma oxidada en suelos aicalinos.
274 SUELO, AGUA Y AIRE: LA NUTRICION DE LAS PLANTAS
ral es silicio, un elemento que slo se necesita en pequeas cantidades, si no es que
en nada, y ms o menos el 16% del material vegetal no se determin, lo cual indica
las dificultades de este tipo de anlisis. Una serie de datos ms til se presenta
en la Tabla 10-5, la cual ofrece estndares en relacin al estado de los nutrimen-
Tabla 104. Anlisis de una planta de maz.
Elemento Porcentaje de Elemento Porcentaje
toda la planta de ceniza
O 44.4 N
C 43.6 P
H 6.2 K
Ceniza 5.8 ca
Mg
S
Fe
si
Al
CI
Mn
No determinado
25.9
3.6
16.4
4.0
3.2
3.0
1.5
20.8
1.9
2.5
O .6
16.6
Fuente: Adaptado de .C. Mi l l er: Plant Physiology. Mc Graw-Hill Book Com-
pany. Nueva York, 1938.
Tabla 10-5. Estndares para clasificacin de nivel de nutrimentos de los naranjos (Cirrus sinensis)
en base a concentraci6n de elementos minerales en hojas de 4 a 7 meses de edad, ciclo de prima-
vera, de ramas terminales no fructificantes.
Elemento* Deficiente, Rango Rango Rango Excesivo,
inferior a bajo ptimo alto superior a
Nitrbgeno, % 2.2-2.4 2.5-2.7 2.8-3.0 3.0
Fbsforo, % 0.09 0.09-0.11 0.12-0.16 0.17-0.29 0.30
Potasio, % 0.7 0.7-1 .I 1.2-1.7 1.8-2.3 2.4
Calcio, % 1.5 1.5-2.9 3.0-4.5 4.6-6.0 7 .O
Magnesio, % 0.20 0.20-0.29 0.30-0.49 0.50-0.70 0.80
Azufre, % 0.14 0.14-0.19 0.20-0.39 0.40-0.60 0.60
Boro, pprn 20 20-35 36-100 101-200 260
Hierro, ppm 35 35-49 50- 120 130-200 250 ?
Manganeso, ppm 18 18-24 2 5-49 50-500 1,000
Zinc, pprn 18 18-24 25-49 50-200 200
Cobre, ppm 3.6 3.7-4.9 5-12 13-19 20
Molibdeno, pprn 0.05 0.06-0.09 0.1 0-1 2-50 100 ?
sodio, % t
Cloro, % ? ? < 0.2 0.3-0.5 0.7
Litio, ppm t
- <0.16 0.1 7-0.24 0.25
- <I 1-5 12
Fuente: P.F. Smith: Anelisis foliar de cltricos. En N.F. Childers (ed.): Frui t Nutri ti on. Horticultural Publi-
cations. New Brunswick, N.J., 1966. Utilizada con permiso.
*En base a materia seca dado en porcentaje o partes por mill6n. como se indica.
+No se sabe que estos elementos sean esenciales para el normal crecimiento de los ctricos.
?Indica carencia de informaci6n respecto al valor.
EL SUELO Y LA NUTRICI6N MINERAL 27 5
tos de los naranjos, segn el anlisis foliar. Los elementos no esenciales no se in-
cluyen en esta tabla.
MACRO Y MICRONUTRIMENTOS. En este estudio se introduce el concepto de ma-
cro y micronutrimentos. Evidentemente, las plantas necesitan carbono, hidrgeno
y oxgeno. Pero stos estn inevitablemente disponibles en los medios normales
donde ellas crecen ai r e y agua- y no sern tratados aqu. Ciertos elementos
-calcio, magnesio, potasio, nitrgeno, fsforo y azufre- son requeridos por la
planta en grandes cantidades y se llaman nutrimentos mayores o macronu-
trimentos. Otros, como el hierro, manganeso, boro, cobre, zinc, molibdeno y
cloro, se requieren en pequeas cantidades y se llaman nutrimentos menores,
micronutrimentos o elementos traza. Otros pocos elementos son benficos en el
sentido de que mejoran el crecimiento de ciertas plantas pero no son absoluta-
mente necesarios. Ciertos elementos pueden reemplazar parcialmente algunos
nutrimentos esenciales pero generalmente no en forma tan efectiva o completa.
NUTRIMENTOS ESENCIALES. Los primeros investigadores reconocieron un peque-
o grupo de elementos -10s macronutrimentos y el hierro- como esenciales, debi-
do a las dificultades para diriiir experimentos rigurosos. Las impurezas en los
medios de cultivo, en las sales usadas, en los vasos y otros recipientes utilizados,
dificultaron la deteccin de los micronutrimentos requeridos, algunos de los cua-
les se necesitaban slo en pequeas cantidades. Hacia el final del siglo diecinueve
el fisilogo alemn J. von Sachs estableci la tcnica del cultivo de plantas en
agua, ahora llamada hidroponia que elimin muchas de las dificultades debidas a
las impurezas. No obstante, no fue sino hasta mediados del presente siglo que
estuvieron disponibles sales, agua y recipientes de suficiente pureza para demos-
trar la naturaleza esencial de algunos micronutrimentos.
En 1939 los fisilogos norteamericanos DJ. Arnon y P.R. Stout propu-
sieron los siguientes criterios de esencialidad para juzgar el estado exacto de un
mineral en la nutricin de una planta:
1. El elemento debe ser esencial para el crecimiento o reproduccin nor-
2. El elemento no puede ser reemplazado por otro elemento.
3. El requerimiento debe ser directo, es decir, que no sea el resultado de
algn efecto indirecto como toxicidad :relevante, causada por alguna
otra sustancia.
males, los que no pueden proseguir sin l.
Estos criterios son bastante estrictos y se precisa de cierta flexibilidad en
su aplicacin. La fisiologa de las plantas, su composicin y necesidades varan
ampliamente segn las circunstancias. As que un elemento, acaso sea absoluta-
mente esencial bajo ciertas circunstancias, en tanto que bajo otras condiciones
puede ser imposible detectar la necesidad de l. Resulta extremadamente difcil
demostrar la no esencialidad de un elemento. Algunos micronutrimentos pueden
requerirse a un nivel de unos cuantos cientos de tomos o menos, por clula, pero
el ms cuidadoso de los anlisis posibles no podr detectar el nivel de impureza en
las soluciones del cultivo que aportara esta cantidad. A menos que pueda demos-
trarse una deficiencia y que se corrija por la adicin de un elemento, su esenciali-
dad no puede probarse. Por otra parte, su no esencialidad no puede demostrarse
slo por la incapacidad de manifestar una deficiencia.
276 SUELO, AGUA Y AIRE: LA NUTRICI6N DE LAS PLANTAS
Tabla 10-6. Una soluci6n nutritiva para plantas, usada en el laboratorio del autor.
Sustancia Concentraci6n Sustancia Concentraci6n
milimoles/litro mg/litro
Macronutrimentos Micronutrimentos
KN03 5 H3 BO3 2.5
Ca(N03 12 5 MnC12 - H2 0 1.5
MgSO 2 CuCl2 2 Hz O 0.05
KHz PO4 1 ZnCll 0.10
Moo3 0.05
Hierro, FeCI3 (+quelato) 0.62
MEDIOS DE CULTIVO. Puesto que Sachs reconoci la importancia de cultivar plan
tas en un medio no influenciado por algn material de soporte slido o supuesta-
mente inerte, los fisilogos vegetales han estado cultivando plantas en soluciones
nutritivas. stas tienen la ventaja adicional de suministrar condiciones conocidas
con exactitud y reproducibles para el desarrollo de plantas experimentales. El
requisito bsico de un medio exitoso es que provea todos los nutrimentos en can-
tidades adecuadas, que sean disponibles para la planta, y otras condiciones satis-
factorias (pH, por ejemplo). Esto se logra generalmente con un medio de dos o
tres partes, que se mezclan conforme se necesitan, ya que algunos nutrimentos
tienden a la inestabilidad y la precipitacin si se conservan en reposo. El hierro
se suministra a menudo como quelato (del latn parecido a garfio, una sustancia
qumica, por lo regular orgnica, que conserva o enlaza el hierro a otros tomos
como si se tratara de un garfio) pues otros nutrimentos lo precipitan muy fcil-
mente. A su vez una solucin de hierro puede asperjarse sobre las hojas de plantas
porque ste se absorbe fcilmente a travs de las superficies foliares. El medio de
cultivo tambin puede utilizarse en plantas que crecen en suelo o arena u otros
soportes inertes, as como en sistemas hidropnicos. Las races de muchas plan-
tas deben airearse cuando se desarrollan en medio acuoso, puesto que son muy
sensibles a bajas tensiones de oxgeno. Un medio nutritivo tpico que da buenos
resultados en muchos tipos de plantas se muestra en la Tabla 10-6. Ciertas plantas
tienen requerimientos especiales y el medio acaso deba modificarse para cultivar
especies de peculiares exigencias.
MACRONUTRIMENTOS
Se considerar ahora el papel de cada sustancia nutritiva en las plantas y las
consecuencias de su deficiencia. Se debe poner nfasis en que muchos sntomas
de deficiencia se manifiestan de diferente manera en diferentes plantas y que los
niveles de sustancias que causan deficiencia pueden ser totalmente distintos segn
las especies. Algunas personas que han trabajado en este campo durante muchos
aos, desarrollan la destreza de reconocer deficiencias minerales en base a los sin-
tomas visuales. Ello requiere larga experiencia y aun as no siempre es seguro. Tal
es la razn de que esta discusin sea muy general. Una fotografa de plantas que
sufren los efectos de varias deficiencias nutricionales se presenta en la Figura 10-3.
Los elementos pueden desempear tres papeles distintos en las plantas:
electroqumicos, estructurales y catalticos. El papel electroqumico incluye el
277
278 SUELO, AGUA Y AIRE: LA NUTRICI6N DE LAS PLANTAS
balance de concentraciones inicas, la estabilizacin de macromolculas, neutrali-
zacin de cargas y otros. El papel estructural lo desempean elementos incorpora-
dos a la estructura qumica de molculas biolgicas o que se usan en la sntesis de
polmeros estructurales (por ejemplo, calcio en la pectina y fsforo en los fosfol-
pidos). Los roles catalticos corresponden a elementos involucrados en los sitios
activos de las enzimas.
A veces estas categoras se superponen; por ejemplo, el magnesio forma
una parte de la molcula de clorofila y por eso puede afirmarse que juega un papel
estructural. Sin embargo, la clorofila es una molcula cataltica importante que
requiere indispensablemente magnesio para su funcionamiento; por lo tanto, aun-
que el ion magnesio no est directamente implicado en la reaccin de transferencia
de electrones, puede afirmarse que desempea una funcin cataltica en la planta.
CALCIO. Este elemento abunda en la mayora de los suelos, y las plantas rara-
mente muestran su deficiencia en condiciones naturales. Las soluciones nutritivas
les suministran mucho calcio, pero recientemente se ha advertido que en realidad
se desarrollan bien con concentraciones muy bajas, siempre que se hagan algunos
ajustes en la composicin del medio nutritivo.
Esto puede ser de gran importancia en la agricultura pues la aplicacin de
fertilizantes es costosa y el lavado de la sobrefertilizacin es una fuente mayor
de contaminacin. Las altas concentraciones de calcio, que tienden a precipitar
muchas sustancias, pueden ser importantes al impedir los efectos txicos de otras
sales que podran estar presentes en exceso.
El calcio es importante en la sntesis de pectina de la lmina media de la
pared celular. Tambin est involucrado en el metabolismo o formacin del n-
cleo y las mitocondrias. As pues, es un elemento de extraordinaria importancia
para la mayora de las plantas por lo que una reduccin severa determina el dete-
rioro y muerte de stas. Las regiones meristemticas son las primeras afectadas
porque una reduccin de calcio impide la formacin de nuevas paredes celulares,
con lo que se imposibilita la divisin de las clulas. La divisin celular incompleta,
o mitosis, sin formacin de nuevas paredes se traduce en la produccin de clulas
plurinucleadas, lo que es tpico de la deficiencia de calcio. Existen paredes celu-
lares, particularmente en estructuras de soporte como tallos y pecolos, que se
tornan quebradizas o rgidas; ello obstaculiza la expansin de las clulas. La
clorosis de las mrgenes de hojas jvenes, el encorvamiento de puntas foliares
(la enfermedad punta marchita) y la formacin de races atrofiadas e incoloras
son sntomas caractersticos de deficiencia de calcio. Los tubrculos de papa son
pequeos y deformes y los frutos se desarrollan pobremente o estn expuestos
a enfermedades como la pudricin apical del fruto del tomate. Puesto que la
mayor parte del calcio de la planta se inmoviliza una vez depositado, su deficien-
cia es ms impactante en tejidos jvenes; los tejidos viejos pueden resultar ina-
fectados.
Se ha observado una interesante paradoja en limoneros cultivados en Rusia.
A pesar de que estas plantas se cultivan en suelos fuertemente calcreos, con fre-
cuencia muestran sntomas de deficiencia de calcio y niveles anormalmente bajos
de ste se localizan en las hojas. Esta paradoja se debe aparentemente al hecho de
que en suelos fuertemente calcreos, no hay hierro disponible, y la planta sufre
de deficiencia de hierro. Una de las consecuencias de esta deficiencia es una reduc-
cin de la absorcin del calcio. A s que, debido a este curioso mecanismo, un
exceso de calcio se traduce en deficiencia de este nutrimento.
EL SUELO Y LA NUTRICIdN MINERAL 279
El calcio slo es til en funciones catalticas menores, involucrndose (aun-
que por lo regular no exclusivamente) como activador de unas cuantas enzimas,
como la fosfolipasa. Es probable que esta capacidad se requiera slo en cantidades
mnimas, as que probablemente nunca se desarrolle una deficiencia en esta fun-
cin. Acaso tenga un importante papel como desintoxicante de cido odi co:
cristales de oxalato clcico se observan a menudo en las vacuolas de las clulas
vegetales.
MAGNESIO. En los suelos, el magnesio es mucho menos abundante que el calcio,
y la deficiencia de magnesio no es rara en plantas que se cultivan en suelos areno-
sos y algo cidos. La mayora de las plantas lo requieren en grandes cantidades, y
el uso de fertilizantes de magnesio (caliza dolom5tica triturada es uno de los mejo-
res) se est extendiendo.
El magnesio desempea importantes funciones en la planta. Parece estar
implicado en la estabilizacin de partculas ribos6micas, al enlazar las subunidades
que forman el ribosoma. Est involucrado en numerosas reacciones de diversa ca-
pacidad, en primer lugar puede servir para ligar enzima y substrato, como por
ejemplo en reacciones que implican transferencia de fosfato desde el ATP, en las
que el magnesio acta como un eslabn que vincula la enzima a su substrato (Fi-
gura 10-4). En segundo lugar, puede servir para alterar la constante de equilibrio
de una reaccin mediante enlace con un producto, como por ejemplo en ciertas
reacciones de quinasas. En tercer lugar, puede anexarse formando un complejo
a un inhibidor enzimtico.
El magnesio es un activador, mediante uno o ms de estos mecanismos, de
muchas reacciones de transferencia de fosfato (excepto fosforilasas), de enzimas
implicadas en la sntesis de cidos nucleicos y tambin de muchas enzimas que
involucran transferencia de dixido de carbono: reacciones de carboxilacin y
descarboxilacin. Como tal, el magnesio es decisivo en las reacciones de metabo-
lismo energtico, as como en la sntesis de constituyentes del ncleo, cloroplasto
y ribosoma. Finalmente, el magnesio constituye una parte integrante de la mol-
cula de clorofila y es, por lo tanto, esencial en la fotosntesis.
Los sntomas de deficiencia de rnagnesio son muy caractersticos. Se
desarrolla clorosis entre las nervaduras foliares o pueden aparecer pigmentos
brillantes de color rojo, naranja, amarillo o prpura. Puesto que el magnesio es
muy soluble y de rpido transporte por toda la planta, los sntomas de su defi-
ciencia generalmente aparecen primero en las hojas maduras.
POTASIO. El potasio es requerido en grandes cantidades por las plantas y una
deficiencia de este elemento puede ser frecuente en suelos ligeros o arenosos
o O 0
HO" I I 'O-P--0- ri bosa-adeni na
Figura 104. Posible papel del magnesio en el
enlace del ATP a una enzima.
280 SUELO, AGUA Y AIRE: LA NUTRICI6N DE LAS PLANTAS
debido a su solubilidad y a la facilidad con la que puede lavarse de ellos. Por lo
regular se presenta en cantidades suficientes en suelos arcillosos, donde est fir-
memente retenido. El potasio es el catin que prevalece en plantas y puede estar
implicado en el mantenimiento del balance inico de las clulas.
El potasio no parece tener funcin estructural en las plantas, pero desem-
pea numerosos papeles catalticos, que en su mayora no estn claramente
definidos; se desconoce, adems, la naturaleza exacta de los grandes requerimien-
tos de potasio. Muchas enzimas, por ejemplo varias de las implicadas en la sntesis
proteica, no operan eficientemente en ausencia de potasio, aunque no parece
enlazarse a ellas de la manera usual. Su efecto acaso se ejerza sobre la conforma-
cin proteica, determinando la exposicin de los sitios activos. Sin embargo, esto
no parece explicar la alta especificidad del potasio, el que puede ser reemplazado
slo ocasional e ineficazmente por el sodio. El potasio se necesita en grandes can-
tidades; por ejemplo, se requiere mucho ms potasio que magnesio para la activa-
cin de una enzima dependiente. El potasio se enlaza inicamente a la piruvato
quinasa, que es esencial en la respiracin y el metabolismo de carbohidratos; de
manera que este elemento es muy importante en todo el metabolismo de las
plantas.
La deficiencia de potasio generalmente se empieza a manifestar con una
clorosis tpicamente moteada de las hojas maduras que luego se distribuye a las
jvenes, pues ste elemento es muy mvil en las plantas. Se producen reas ne-
erticas a lo largo de los mrgenes y en las puntas de las hojas, las que se enroscan
de una manera caracterstica y puede producirse un extenso ennegrecimiento o
chamuscamiento de las hojas.
La deficiencia de potasio se manifesta con frecuencia por hbitos de creci-
miento en roseta, o achapmamiento. Otras consecuencias son la reduccin del
crecimiento caulinar, el debilitamiento del tallo y la baja resistencia a patgenos,
de manera que las plantas deficientes, en especial cereales, fcilmente son acama-
das (se tienden ante la intemperie) y atacadas por las enfermedades. Debido a la
reduccin de la sntesis proteica y el dao a la respiracin, los compuestos de bajo
peso molecular como aminocidos y azcares tienden a acumularse a niveles inu-
sualmente altos, mientras que se reducen las protenas y los polisacridos.
NITR6GENO. El metabolismo y los procesos de fijacin del nitrgeno se han
considerado en el Captulo 8, y no es necesario que se traten aqu. El nitrgeno
tiene un lugar especial en la nutricin no slo debido a su elevado requerimiento
por las plantas sino porque est casi completamente ausente de la roca madre de
la cual se forman los suelos. La presencia de nitrgeno en el suelo es casi totalmen-
te el resultado de la accin biolgica, abono artificial o fertilizacin natural (resul-
tante de las descargas elctricas atmosfricas). Es probable que la mayora de las
plantas vivan en condiciones naturales en un estado de carencia de nitrgeno que,
sin embargo, no es crtico debido a su gran adaptabilidad a amplios rangos de
nutricin.
El nitrgeno es de extraordinaria importancia en las plantas porque es un
constituyente de protenas, cidos nucleicos y muchas otras sustancias importan-
tes. No parece poseer, sin embargo, ninguna funcin especfica cataltica o elec-
troqumica aparte del hecho de estar estructuralmente implicado en la mayora de
las molculas catalticas.
Una deficiencia de nitrgeno casi invariablemente se traduce en una palidez
gradual o clorosis de las hojas maduras que llegan a tornarse amarillentas y se des-
EL SUELO Y LA NUTRICIdN MINERAL 281
prenden. Por lo regular no se presenta necrosis. La clorosis se extiende de las hojas
maduras a las jvenes, las que usualmente no muestran los sntomas caractersti-
cos de deficiencia hasta que estn muy avanzados en las partes viejas de la planta,
lo que indica que el nitrgeno de las hojas maduras se moviliza y transporta a las
partes jvenes en crecimiento conforme se necesita. Un sntoma tpico de defi-
ciencia de nitrgeno es la produccin de antocianinas en tallos, nervaduras foliares
y pecolos los cuales pueden volverse rojos o prpuras. Las hojas jvenes de plan-
tas deficientes a veces son ms erguidas y se extienden menos de lo normal; asi-
mismo, la ramificacin o ahijamiento se suprime debido al continuo letargo de
yemas laterales.
Las plantas responden de varias maneras a suministros altos o bajos de
nitrgeno. La sobreabundancia de nitrgeno causa con frecuencia una gran pro-
liferacin de tallos y hojas, pero determina una reduccin de frutos en plantas de
cultivo. Las papas reaccionan a la sobrefertilizacin nitrogenada produciendo
vstagos grandes, verde-oscuros y de apariencia saludable pero de races escasas
y tubrculos ms pequeios. Un suministro de nitrgeno ligeramente reducido
(aunque no a una diminucin crtica), en relacin al suministro de potasio y fs-
foro, da generalmente una produccin mucho mayor de semilla y fruto de los
cuhlvos agrcolas.
~SFORO. La absorcin de fsforo ocurre como ion fosfato inorgnico mono-
valente o divalente. Gran parte del fosfato en la planta existe en forma orgnica
pero es probable que se transporte principalmente en estado inorgnico. El
fosfato se retiene firmemente en el complejo mineral del suelo en la misma
forma que el potasio, y su absorcin por las plantas tal vez sea obstaculizada
por un exceso de calcio. Por lo tanto, la deficiencia de fsforo, aunque con
frecuencia no lo bastante severa para causar sntomas morfolgicos generales,
tal vez no sea rara en la naturaleza. El fsforo, como el nitrgeno, es muy im-
portante como parte estructural de muchos compuestos, principalmente cidos
nucleicos y fosfolpidos. Adems, el fsforo desempea una funcin indispensa-
ble en el metabolismo energtico; la elevada energa de la hidrlisis del pirofosfato
y diversos enlaces de fosfato orgnico se utilizan para impulsar reacciones qumicas.
Como es de esperar, la deficiencia de fsforo afecta todos los aspectos del
metabolismo vegetal y el crecimiento. Algunos resultados de una baja de fsforo,
como el letargo de las yemas laterales, se deben en realidad a una resultante de-
ficiencia de nitrgeno. Los sntomas de deficiencia de fsforo son: prdida
de hojas maduras, desarrollo de antocianinas en tallos y nervaduras foliares y, en
casos extremos, desarrollo de reas necrticas en diversas partes de la planta. Las
plantas deficientes de fsforo son de lento desarrollo y a menudo achaparradas.
Lo mismo que en la deficiencia de nitrgeno, los sntomas aparecen primero en l a s
hojas maduras debido a la gran movilidad del fsforo pero, a diferencia de la defi-
ciencia de nitrgeno, las hojas de plantas deficientes en fsforo tienden a tornarse
verde oscuras o bien la clorosis se extiende a las nervaduras foliares, as como
a las lamelas. Tambin se pueden acumular carbohidratos solubles. Una de l a s
caractersticas de la deficiencia es un gran incremento de la actividad de la fosfa-
tasa; esto tal vez est relacionado con la movilizacin y reutilizacin del fosfato
disponible que tiene lugar bajo estas condiciones.
AZUFRE. El azufre se presenta como sulfato en la fraccin mineral de muchos
suelos, pero a menudo se presenta tambin en forma de azufre elemental o sulfu-
282 SUELO, AGUA Y AIRE: LA NUTRICI6N DE LAS PLANTAS
ros de hierro (FeS, FeS2) que no estn disponibles para las plantas. Numerosos
microorganismos del suelo son capaces de oxidar el azufre o los sulfuros a sulfato
e hidrolizar los compuestos orgnicos de azufre que acaso constituyan una buena
parte de ste de los suelos ms frtiles. En reas industrializadas (y reas cercanas
a fenmenos naturales como giseres o volcanes productores de azufre gaseoso)
el dixido y el trixido de azufre (SO2 y SO3 ) atmosfricos pueden ser fuentes
importantes de nutricin de azufre. Ciertamente, es muy difcil demostrar defi-
ciencia de este elemento en plantas de invernadero cultivadas en las grandes ciu-
dades industriales debido al alto contenido de azufre del aire, ya que el azufre
que ste transporta es absorbido directamente por la planta o se disuelve en el
medio nutritivo.
El azufre tiene funciones algo ms especializadas que cualquiera de los
otros dos nutrimentos aninicos mayores, nitrgeno y fsforo, Forma parte de
los aminocidos cistina, cistena y metionina, y es un importante constituyente
de protenas, as como de algunos compuestos de actividad biolgica como el
glutatin, la biotina, la tiamina y la coenzima A. El ezufre est con frecuencia
en forma de grupos sulfhidrilos ("SH) oxidables, los cuales forman el sitio activo
de algunos agentes redox y de transferencia de electrones. Tambin es importante
en la formacin de puentes disulfuro (S-S), involucrados en la formacin y esta-
bilizacin de la estructura terciaria de las enzimas y otras protenas. Muchos inhi-
bidores o venenos poderosos actan atacando a grupos sulfhidrilos; su accin
puede a menudo reducirse o atenuarse mediante la adicin excesiva de algunos
compuestos SH que inmovilicen al inhibidor.
El azufre se convierte en compuestos orgnicos mediante un derivado de
la adenosina, el 3'-fosfoadenosin-5'-fosfosulfato (PAPS) descrito por Franz
Lipmann y colaboradores, en 1956. Este compuesto se forma a expensas del ATP
MgZ+
SO,'- + ATP - adenosin-5'-fosfosulfato + PPi
2P i
sulfurilasa
i
Mg2 +
A P S + ATP - PAPS + ADP
quinasa
La mitad del azufre del PAPS es entonces reducida (posiblemente por la
ferredoxina y no por el NADH o el NADPH) e incorporada a molculas orgnicas
por vas an no claramente comprendidas. La sulfito reductasa es una enzima
similar en muchos aspectos a la nitrito reductasa (vase pgina 215) y, al igual que
sta, puede derivar sus electrones de la porfirina siroheme que contiene hierro. El
azufre del PAPS finalmente se reduce a sulfur0 y ste se combina con acetil serina
para formar el aminocido cistena portador de azufre, como sigue:
CH2-O"CH2-COOH
I
CH2-SH
I
I
CHNH, + PAPS "--+CHNH, + CH,-COOH + ADP
I
COOH
acetil-serina
COOH
cistena acetato
EL SUELO Y LA NUTRICIdN MINERAL 283
Los detalles de esta reaccin no son completamente claros. El substrato de
la reduccin tal vez sea el APS en vez del PAPS, y molculas transportadoras des-
conocidas pueden estar involucradas en el paso reductor que produce sulfur0 y su
transferencia a la acetil serina.
La deficiencia de azufre raramente ocurre emla naturaleza, aunque se des-
cubri que la enfermedad amarillamiento del t se produce por la deficiencia de
azufre. Se caracteriza por una clorosis general y un amarillear de las hojas que
se inicia por lo regular en las hojas jvenes, contrariamente a lo que ocurre con la
deficiencia de nitrgeno. Los disturbios metablicos que siguen a la deficiencia
de azufre pueden ser muy intensos, principalmente porque la planta est imposi-
bilitada para producir protenas como resultado de una disminucin de amino-
cidos que contienen azufre. El nitrgeno soluble tiende a acumularse y los
aminocidos ricos en nitrgeno como la glutamina y la arginina alcanzan grandes
concentraciones. La ruptura de la arginina puede incluso conducir la produccin
de urea y amonaco a una seria carencia de azufre, una condicin de las plantas
poco comn bajo otras circunstancias.
MICRONUTRIMENTOS
Los micronutrimentos usualmente se utilizan en funciones catalticas y slo se
necesitan en cantidades mnimas. Aunque son de amplia distribucin en suelos,
algunos micronutrimentos estn ausentes o en baja provisin en ciertas keas del
mundo, debido a que la roca madre de la cual se forma el suelo carece de ellos,
Adems, condiciones de pH del suelo, presencia de otros solutos y nivel de ox-
geno, pueden afectar la solubilidad o la capacidad de la planta para absorberlos, de
manera que no son raras las deficiencias. Las deficiencias de iones de micronutri-
mentos especficos son responsables de muchas enfermedades vegetales tpicas,
de gran inters en s mismas. Debido a dificultades; experimentales, la naturaleza
esencial de muchos micronutrimentos y su relacin con enfermedades especficas,
a menudo bien conocidas, no se haba establecido sino recientemente. En reali-
dad, el estatus de varias sustancias como sodio, silicio, cloro y aluminio, an no
est claro.
HIERRO. Se requiere ms hierro que ningn otro micronutrimento, y se lo ha
considerado como macronutrimento, o como una categora en s mismo. Sin
embargo, esta alta demanda puede estar relacionada con la fuerte tendencia del
hierro para formar compuestos insolubles de varias clases en el suelo y la planta,
que lo hacen inaprovechable o intil. Los suelos Jcalinos o calcreos producen
comnmente plantas deficientes en hierro aunque ste abunde en los minerales
del suelo, debido a la formacin de xidos o hiclrxidos de hierro insolubles.
Por lo tanto, el exceso de otros minerales puede cznu8ar deficiencia de hierro por
precipitacin de ste en formas inaprovechables. Por otra parte, tambin puede
ocurrir toxicidad por hierro si los suelos en los que abunda se vuelven fuerte-
mente cidos.
La extraordinaria importancia del hierro se relaciona con dos hechos im-
portantes: el hierro es parte del sitio cataltico de muchas enzimas xido-reduc-
toras importantes, y es esencial para la formacin de clorofila, aunque no forma
parte de la molcula. La importancia del hierro en protenas heme (citocromos
y citocromo oxidasa) de la cadena transportadora de electrones se deriva de su
284 SUELO, AGUA Y AIRE: LA NUTRICION DE LAS PLANTAS
capacidad de existir en forma oxidada o reducida; es decir, que puede adquirir
o perder un electrn, sufriendo un cambio de Valencia al hacerlo. Sin embargo,
tambin est presente en varias enzimas oxidantes de importancia (por ejemplo,
catalasa y peroxidasa), en las cuales no sufre cambios de Valencia. Una de las con-
secuencias de su deficiencia es un incremento compensatorio en oxidasas no
frricas cuya accin puede reemplazarse parcialmente con la de las enzimas res-
piratorias que contienen hierro. Este es un elemento que forma parte de varias
enzimas sin grupo heme como algunas flavoprotenas y la ferrodoxina, agente
transportador de electrones de extraordinaria importancia. Adems, puede estar
estructuralmente involucrado en lpidos lamelares del ncleo, cloroplastos y
mitocondrias y parece requerirse en la sntesis de protenas de membranas. Se
ha demostrado que se requieren mayores niveles de hierro en la divisin celular
que en la respiracin, lo cual indica sus funciones mltiples.
El papel que cumple en la sntesis de clorofila no est claro, y puede tener
relacin tanto en la sntesis de componentes estructurales de los cloroplastos
como en la sntesis de la propia molcula de clorofila. Se ha encontrado que la
cantidad de hierro suficiente para mantener el crecimiento de clulas de Euglena
es ms baja que la cantidad que demanda la sntesis de clorofila a un maximum.
Asimismo, no est aparentemente involucrado de modo especfico en aquellos
pasos enzimticos de la sntesis de clorofila que se han investigado. Tal vez la
sntesis de esta molcula ocurre como parte de la sntesis total de la estructura
del plastidio, la que se vera limitada en s misma si no hubiera suficiente hierro
disponible para producir la cantidad necesaria de citocromos, ferredoxina y otros
compuestos frricos catalticos o estructurales. Apoya este concepto el hallazgo
de que la clorosis, resultante de la deficiencia de hierro, se caracteriza por la
simultnea prdida de clorofila y la desintegracin de los cloroplastos. Esto
es tambin consistente con el hecho de que el grado de clorosis en las hojas no
guarda estrecha correlacin con el contenido de hierro, a menos que ste se
suministre a una tasa baja y constante.
Los sntomas de deficiencia de hierro son fcilmente reconocibles y muy
especficos. La clorosis que se produce esti restringida estrictamente a las hojas
ms jvenes de las plantas en crecimiento, sin evidente achaparramiento o necro-
sis. La clorosis de plantas que se cultivan en suelos alcalinos o deficientes en
hierro se remedia fcilmente asperjando una solucin de hierro (usualmente hierro
en complejo con un quelato, como el cido etilendiaminotetractico, EDTA).
La incipiente deficiencia de hierro en los rboles frutales del oeste de Estados
Unidos y varios pases mediterrneos sola tratarse, antes del descubrimiento
de la eficacia de aspersiones foliares, insertando clavos de hierro en los troncos.
MANGANESO. El manganeso se presenta de diversas formas en el suelo, el ion
manganeso reducido (Mn +) es la forma en que generalmente se absorbe. El man-
ganeso, como el hierro, llega a ser deficiente en suelos oxidantes o alcalinos por-
que se convierte en formas inaprovechables.
El manganeso se involucra mucho en funciones catalticas: es el metal
activador de algunas enzimas respiratorias y de reacciones del metabolismo del
nitrgeno y la fotosntesis; se necesita para el funcionamiento de la nitrato
reductasa, por cuya razn las plantas deficientes en manganeso requieren NH3.
Tambin se necesita para la operacin de algunas enzimas en el metabolismo de la
hormona cido indolactico. El papel ms importante del manganeso en la foto-
sntesis reside en la secuencia de reacciones mediante las cuales se derivan electrones
EL SUELO Y LA NUTRICIdN MINERAL 285
del agua y se libera oxgeno. El manganeso tambikn puede tener un papel estruc-
tural en los cloroplastos, los que se tornan susceptibles a la luz en su ausencia y
finalmente pierden su estructura y se desintegran bajo condiciones de disminucin
extrema de manganeso. La estructura de mitocondrias y ncleos no parecen afec-
tarse del mismo modo, lo que indica que el papel del manganeso en los cloroplas-
tos, a diferencia del hierro, tal vez sea bastante especfico.
Los sntomas de deficiencia de manganeso consisten en la formacin de
manchas necrticas sobre las hojas y necrosis de cotiledones de plntulas de legu-
minosas. La movilidad del manganeso es compleja y depende de las especies y de
la edad de la planta, as que los sntomas pueden aparecer primero en hojas
jvenes o maduras. Las enfermedades deficitarias tpicas son la mancha gr i s de
la avena, los amarillamientos moteados de la remolacha azucarera y la man-
cha fangosa de los guisantes.
BoRO. El boro est presente en pequeas cantidades de la mayora de los suelos
pero su disponibilidad es a menudo muy pobre porque est ligado estrechamente
a complejos de la estructura del suelo. La absorcin del boro es muy baja en sue-
los con mucho calcio y el encalado tiende a reducir su absorcin, lo que sugiere
que el calcio induce al boro a participar en complejos o a precipitar en el suelo,
o bien reduce la capacidad de las races para absorberlo.
El boro es un elemento cuya funcin en el metabolismo vegetal an no se
comprende con claridad, aunque es demostrable su papel esencial para el creci-
miento de la planta. El transporte y la absorcin de los azcares se reducen mucho
en ausencia de boro y se sugiri que el azcar acaso se desplaza en forma de com-
plejos de borato en la planta. Se encontr que los azcares radioactivos se incorpo-
ran ms rpidamente a travs de la superficie foliar si se aaden al mismo tiempo
pequeas cantidades de borato; asimismo, la adicin de boro incrementa el trans-
porte de productos radioactivos de la fotosntesis en l4 COZ . Tambin se sugiri
que el efecto del borato sobre el transporte quizs se deba a que entra en comple-
j o con las membranas celulares. Los efectos caractersticos de su deficiencia, que
por lo regular se traduce en muerte de meristemos y aborto de flores, pueden ser
el resultado del transporte reducido de los azcares hacia reas de elevado metabo-
lismo, que es donde ms se necesitan. Existen, sin embargo, puntos de vista opues-
tos. El boro puede operar como un natural y necesario inhibidor vegetal, que
controla la actividad enzimtica dirigida a la produccin de sustancias fenlicas
txicas. Tambin se ha sugerido que el boro puede estar involucrado en muchos
aspectos de la diferenciacin y el desarrollo celular.
Los sntomas de deficiencia de boro son muy caractersticos. Las hojas
tienden a engrosar y oscurecerse, y los meristemos de vstagos y races mueren,
dando a la planta una apariencia de atrofia y achaparramiento, como en la en-
fermedad apical del-tabaco. Las aberraciones del desarrollo pueden determinar el
depsito anmalo de tejido suberoso en rboles frutales (mancha seca y sarna
negra, o corazn corchoso de las manzanas). La desorganizacin metablica
conduce a la desintegracin de c6lulas en rganos pulposos, dando origen a desr-
denes tales como pudricin del corazn o corazn acuoso en .el betabel y el
nabo. Un efecto muy comn de incipiente deficiencia de boro, que se encuentra
a menudo en plantas cultivadas en suelos granticos8 cidos (los arndanos son es-
pecialmente susceptibles), es el aborto de flores y frutos en desarrollo.
COBRE. El cobre se presenta en pequeas cantidades en casi todos los suelos, los
cuales son continuamente reabastecidos por la intemnperizacin de minerales que
286 SUELO, AGUA Y AI RE: LA NUTRI CI dN DE LAS PLANTAS
contienen cobre. Est normalmente presente en el complejo de intercambio de
los suelos donde est retenido firmemente pero disponible para las plantas, de ma-
nera que su deficiencia en la naturaleza es rara. Sin embargo, la fertilizacin
excesiva con fosfatos puede reducir su disponibilidad al formarse precipitados
insolubles, y las huertas frutales ocasionalmente sufren por deficiencia.
El cobre desempea funciones exclusivamente catalticas en las -plantas,
siendo parte de varias enzimas importantes como la polifenol oxidasa y la cido
ascrbico oxidasa. Est presente en la plastocianina de los cloroplastos, un compo-
nente importante del sistema transportador de electrones de la fotosntesis, y
puede estar involucrado en la reduccin de nitritos.
La deficiencia de cobre causa necrosis en las hojas y les da una apariencia
marchita y oscura. Las tpicas enfermedades por deficiencia son el reclamo
de las plantas cultivadas, en donde las hojas se arrollan apretadamente y se tornan
blancas en las puntas, as como la muerte regresiva de los kboles frutales,
donde las hojas se marchitan y caen, la corteza llega a ser spera y fisurada, con
exudacin de sustancias gomosas.
ZINC. El zinc est ampliamente distribuido en los suelos, pero como muchos otros
metales llega a ser menos aprovechable conforme aumenta el pH. El resultado es
un cierto grado de deficiencia, muy generalizado, particularmente en huertos de
ctricos en suelos neutros o alcalinos. El zinc tiene relacin directa con la sntesis
del cido indolactico (IAA) y como tal su deficiencia puede causar cambios
sustanciales en la forma y hbito de crecimiento de ciertas especies, produciendo
plantas atrofiadas y de baja altura, con pobre desarrollo de la dominancia apical.
Adems, el zinc es un activador obligado de numerosas e importantes enzimas
en las que se incluyen las deshidrogenasas del cido lctico, cido glutmico, al-
cohol y pirimidn nucletido. El zinc parece estar implicado en la sntesis de
protenas, puesto que su deficiencia puede traducirse en un sustancial incre-
mento de compuestos nitrogenados solubles.
Los sntomas de deficiencia de zinc incluyen atrofiamiento y reduccin
notable del tamao de la hoja, que conduce a la hoja pequea y la roseta
de manzanos y durazneros, as como clorosis intervenal, que produce la hoja
moteada y el frenching de los ctricos. Una carencia de zinc produce la enfer-
medad yema blanca del maz y puede conducir a una considerable reduccin
de la floracin y la fructificacin as como achaparramiento y crecimiento radical
pobremente diferenciado.
MOLIBDENO. El molibdeno se presenta en muy pequeas cantidades en muchos
suelos, pero a pesar de su escaso requerimiento por las plantas parece existir una
deficiencia inicial generalizada. Se absorbe ms fcilmente en suelos de pH elevado
(a diferencia de la mayora de los metales); de ah que tienda a existir escasa dis-
ponibilidad en suelos cidos, granticos y arenosos. El papel ms importante del
molibdeno es el de la reduccin de nitratos y fijacin de nitrgeno; su deficiencia,
particularmente en plantas con fijacin simbitica del nitrgeno, se traduce en
una disminucin del contenido de nitrgeno orgnico. Ello induce sntomas de
deficiencia de nitrgeno, lo cual hace ms difcil la deteccin de deficiencia del
molibdeno. Sin embargo, el molibdeno tiene, evidentemente, otras funciones
porque la mayora de las plantas lo necesitan aunque se desarrollen en presencia
de fertilizantes de amonio.
EL SUELO Y LA NUTRICI6N MINERAL 287
Los sntomas de deficiencia de molibdeno incluyen la marchitez moteada y
marginal de las hojas, que produce la enfermedad mancha amarilla del fruto de
los ctricos. La clorosis comienza en las hojas de mayor edad, como en la deficiencia
de nitrgeno pero, a diferencia de las plantas deficientes en ste, los cotiledones
permanecen con una apariencia verde y saludable. La cola de ltigo es una en-
fermedad deficitaria de molibdeno, caracterstica de coles y plantas afines, en las
que las hojas jvenes se distorsionan considerablemente debido a una nerva-
dura central prolongada y limbos angostos, de exiguo desarrollo y generalmente
rasgados.
CLORO. Hasta donde se sabe, el cloro es absorbido por la planta y permanece en
ella en forma de ion. Si bien la deficiencia nunca ocurre en la naturaleza, en 1953
los fisilogos norteamericanos T.C. Broyer, P.R. Stout y colegas, encontraron que
es esencial para el crecimiento del tomate. En ausenc:ia de cloro las plantas se mar-
chitan, las races se atrofian y se reduce la produccin del fruto. D.I. Arnon ha
demostrado recientemente el imprescindible requerimiento de iones cloro en la
fotosntesis de cloroplastos aislados. Se supone que por lo menos parte de la nece-
sidad de cloro de las plantas es consecuencia de tal requerimiento. Queda claro
ahora que el requerimiento de este elemento es amplio y probablemente universal.
Es interesante comentar, acerca de la dificultad para establecer la necesidad de un
micronutrimento, que Stout y Broyer dudaron de sus propios resultados (duda
que fue ampliamente compartida), hasta ahora que se demostr el papel del cloro
en la fotosntesis.
CLAVE PARA SfNTOMAS DE DEFICIENCIAS NUTRICIONALES*
Elemento
deficiente
a. Hojas maduras afectadas
b. Efectos generalizados en toda la planta; hojas inferiores
se secan y mueren.
c. Plantas verde-claro, hojas inferiores amarillas, tor-
nndose pardas al secarse; pednculos cortos y
delgados.
c. Plantas verde oscuro; comnmente aparecen colores
rojo o prpura; hojas inferiores amarillas, verde
oscuras conforme se secan; pednculos cortos y
delgados.
b. Efectos localizados, abigarramiento o clorosis:; hojas
inferiores no se secan pero se tornan abigarradas o clo-
rticas; mhgenes foliares plegadas y retradas.
c. Hojas moteadas o clorticas, a veces rojizas, puntos
necrticos, pednculos delgados.
c. Hojas moteadas y clorticas; puntos necrticos pe-
queos y entre las nervaduras o prximos a los; tipices
y mrgenes, pednculos delgados.
Nitrgeno
Fsforo
Magnesio
Potasio
Contina
288 SUELO, AGUA Y AIRE: LA NUTRICION DE LAS PLANTAS
Clave para sntomas de deficiencias nutricionales* (continuacin)
Elemento
deficiente
c. Puntos necrticos grandes, eventualmente emplaza-
dos sobre las nervaduras, hojas gruesas, pednculos
cortos.
a. Hojas jvenes afectadas
b. Yemas terminales muertas; distorsin y necrosidad de
hojas jvenes.
c. Hojas jvenes encorvadas, luego mueren a partir de
c. Hojas jvenes verde claro en la base, mueren desde
las puntas y los mxgenes.
la base; hojas retorcidas.
b. Yemas terminales permanecen vivas pero clorticas o
marchitas, sin manchas necrosadas.
Zinc
Calcio
Boro
c. Hojas jvenes marchitas, sin clorosis, extremo del
c. Hojas jvenes no marchitas; se presenta clorosis.
tallo dbil. Cobre
d. Pequeas manchas necrticas, las nervaduras per-
d. Manchas necrticas ausentes.
manecen verdes. Manganeso
e. Nervaduras verdes. Hierro
e. Nervaduras clorticas. Azufre
*Adaptada de: Diagnostic Techniques for Soils and Crops. American Potash Institute.
Washington, D.C. 1948.
ELEMENTOS BENBFICOS Y TdXICOS
Adems de los elementos esenciales que se consideraron previamente, existen mu-
chos informes en la literatura acerca de una vasta gama de elementos con efectos
promotores del crecimiento que pueden reemplazar en parte a los elementos esen-
ciales. Asimismo, en el suelo hay algunas sustancias que pueden ser txicas aun
en pequeas cantidades (naturalmente, cualquier sal es txica si se presenta en
exceso).
ELEMENTOS BENI~FICOS. En stos se incluyen el cobalto, el sodio, el selenio, el
silicio, el galio y posiblemente otros.
Cobalto. Es necesario para algunos organismos, particularmente algas y
otros microorganismos. Es un componente de la vitamina B12 y diversos com-
EL SUELO Y LA NUTRICI6N MINERAL 289
puestos afines que actan en el metabolismo de compuestos de un carbono (gru-
pos metilo, formilo, formaldehdo y carboxilo). !Esta imprescindible necesidad
de cobalto, sin embargo, es tan baja que no puede demostrarse con facilidad.
Probablemente 1 parte en l oL2 sea suficiente, lo que est ms all de los lmites
de purificacin o cuantificacin. El cobalto parece ser necesario para las bacterias
implicadas en la fijacin simbitica del nitrgeno y muchos sistemas simbiticos
fijadores del nitrgeno son incapaces de sobrevivir sin una suplementacin de
cobalto o de nitrgeno.
Sodio. Se ha descubierto su utilidad en el crecimiento de muchas plantas,
particularmente las halfitas (que gustan de sales). Aquellas plantas que respon-
den a l tienden a acumular grandes cantidades, mi.entras que otras, sin respuesta
ante 1, lo absorben muy poco. La halfita Atriplex, una planta del desierto,
parece requerir sodio para una gluclisis eficiente. Algunas plantas se enfrentan
con el problema de vivir en suelos ricos en sodio. Los mangles ejemplifican una
solucin a este problema; ellos no absorben sodio. Ciertas especies de Atriplex,
por otra parte, absorben grandes cantidades de soclio pero no se presenta acumu-
lacin t6xica porque el sodio es nuevamente desechado por transporte activo
hacia clulas glandulares especiales de las superficies foliares. Se ha demostrado
recientemente que el sodio es un nutrimento esencial para plantas que poseen
la va fotosinttica C4 y la anatoma de Kranz. La razn de este requerimiento,
o de su relacin con la fotosntesis C, , es desconocida.
Selenio. Ha suscitado mucho inters porque se comporta en algunas plantas
como sucedneo del azufre. Se forman aminocidos que lo contienen, en forma
parecida a la cistena y la metionina, que inhiben la sntesis o las propiedades
catalticas de las protenas. Por otra parte, ciertas plantas del gnero Astragalus
(una leguminosa) acumulan grandes cantidades de este elemento y parecen tener
un metabolismo de selenio bien desarrollado, no del todo semejante al del azufre.
Ciertas plantas tienen una tolerancia considerable, o incluso una necesidad de
selenio, y su presencia indica un alto nivel de este elemento en el suelo. Se ha
propuesto que el efecto benfico del selenio para ciertas plantas se debe, en rea-
lidad, a la anulacin (mediante el selenio) de la toxicidad del fsforo a la cual
estas plantas son susceptibles.
Silicio. Se requiere para el crecimiento de diatomeas cuya concha ex-
terna est compuesta de este elemento. Se ha descubierto que ciertos cereales,
como el arroz p el maz, se desarrollan mejor con suplementos de slice; &te pue-
de constituir hasta el 20% del peso seco de estas plantas. Se dice que el silice
reduce la transpiracin y mejora la resistencia a 10s patgenos, acaso debido a
que EX? deposita en las paredes celulares y las heridas. Sin embargo, el silicio no
parece necesitarse en el metabolismo vegetal. Atena la deficiencia de fosfato
porque el silicato se absorbe ms firmemente que el fosfato, y desplaza a &te
hacia la solucin del suelo. La adicin de silicato reduce tambin la toxicidad
del hierro y el manganeso, presumiblemente por la precipitacin de estos ele-
mentos.
Galio. Se ha demostrado su requerimiento, a niveles extremadamente bajos,
por AspergiZlus niger mediante cuidadosos experimentos del fisilogo norteameri-
cano R.A. Steinberg, pero no se ha intentado repetir sus experimentos delicados y
meticulosos, y la necesidad del galio por plantas no se ha demostrado.
290 SUELO, AGUA Y AIRE: LA NUTRICI6N DE LAS PLANTAS
Vanadio. Es requerido en concentraciones muy bajas (0.01 ppm) por el
alga verde Scenedesmus y posiblemente otros microorganismos. Puede actuar en
la fijacin del nitrgeno, reemplazando parcialmente al molibdeno en la nitro-
genasa.
SUSTITUCI~N. Se ha demostrado que ciertos metales reemplazan a otros en
funciones especficas del desarrollo vegetal. Generalmente, el elemento reempla-
zante acta con menos eficacia o slo durante una parte del ciclo de vida. El
bario y estroncio son capaces de sustituir, por lo regular no con mucha eficacia,
el requerimiento extremadamente bajo de ciertos hongos y bacterias. El estroncio
puede aliviar parcialmente los sntomas de deficiencia de calcio en el maz pero
no contribuye a la formacin de pectatos como lo hace el calcio. Mediante asper-
sin foliar se mitiga una clorosis de durazneros cultivados en suelos pobres de
estroncio y es posible que se identifique la necesidad de ste en ciertas plantas.
El rubidio y el cesio pueden aliviar una disminucin de potasio, al igual que el
sodio, pero en forma muy limitada, El berilio es capaz de sustituir el magnesio
en ciertos hongos y parcialmente en tomates. La adicin de berilio estimula el
desarrollo de ciertas plantas (ballico y kale) pero inhibe otras (frijol). El germanio
puede aliviar temporalmente la deficiencia de boro incrementando la movilidad
del que est disponible en la planta, y se ha demostrado que el vanadio reemplaza
al molibdeno en la funcin fijadora de nitrgeno de Azotobacter chroococcum,
pero no de otras especies. El alga Scenedesmus presenta una mejora en la fotosn-
tesis en presencia de vanadio, el que puede por lo tanto ser til o necesario para
el proceso.
ELEMENTOS T~XI COS. Ciertos elementos, por ejemplo metales pesados como pla-
ta, mercurio, o plomo, pueden alcanzar altas concentraciones localizadas en el
suelo (por ejemplo en escoriales mineros) y muestran un poderoso efecto txico.
A veces surgen, bajo ciertas circunstancias, variedades genticas resistentes que
logran tolerar concentraciones muy altas de otros elementos txicos. Se sabe
que el tungsteno es txico para organismos fijadores de nitrgeno debido a que
inhibe por competencia la absorcin del molibdeno. El germanio inhibe el meta-
bolismo del silicio y puede ser txico para organismos que necesitan o utilizan
silicio, como diatomeas, arroz o tabaco. El aluminio tambin es txico y puede
inhibir el desarrollo de las plantas en circunstancias naturales porque tiende a
precipitar dentro o alrededor de las races, donde interfiere la absorcin del hierro
y el calcio. El aluminio, asimismo, interfiere mucho en el metabolismo del fsfo-
ro, lo que determina la acumulacin de cantidades grandes de fosfato inorganic0
en las races, pero reduce su cawcidad metablica y de transporte.
ELEMENTOS TRAZA EN PLANTAS DE WIPORTANCIA ECONdMICA
LAS ENFERMEDADES DEFICITARIAS Y LOS EFECTOS TdXICOS EN ANIMALES. LOS
animales consumen plantas; de ah se deduce que los animales que se nutren de
plantas deficientes en un mineral especfico pueden sufrir la deficiencia de ese mi-
neral. Adems, los minerales presentes en exceso en plantas alimenticias s i bien
no afectan a stas- pueden intoxicar a los animales que las consumen. Por ejem-
plo, ciertos suelos turbosos muy altos en materia orgnica, de ciertas partes del
EL SUELO Y LA NUTRICIdN MINERAL 291
mundo, son pobres en cobre y esta deficiencia se refleja en el ganado mediante
diarrea acuosa, una forma aguda de esa enfermedad. La mayora de los suelos
mineralizados contienen abundante cobre; en ciertos suelos cuprferos las plan-
tas pueden acumular entre 50 y 60 ppm de cobre, y los animales que las consumen
pueden sufrir alteraciones en la sangre como hemlisis e ictericia, debido a envene-
namiento de cobre. Al hombre parece que no le afecta. El excesivo molibdeno de
ciertos suelos provoca la diarrea acuosa en las vacas cuando el contenido en el
forraje se eleva a 20-100 ppm, muy superior en comparacin a los 3 ppm o menos
de las reas pobres en ese elemento.
La deficiencia de cobalto que se presenta en ciertas reas, particularmente
de Australia y Nueva Zelanda, provoca languidez o agotamiento, enfermedad que
slo afecta a los rumiantes. El cobalto aparentemente es necesario para la sntesis
de vitamina B, por la microflora del rumen. L s enfermedad aguda conocida
como tambaleos de alpiste se presenta cuando los rumiantes consumen plantas
de Phalaris tuberosa deficientes en cobalto. En ausencia de suficiente cobalto para
producir vitamina B1 , una poderosa neurotoxina, aparentemente derivada de
un precursor en el Phalaris, se libera por las bacterias del rumen. El efecto es muy
similar a la deficiencia de vitamina B1 en humanos con anemia perniciosa. Al
faltar la vitamina BIZ se forman sustancias neurot6xicas, en este caso por la mi-
croflora simbitica.
Los habitantes de muchas partes del mundo sufren de bocio debido a la
deficiencia de yodo, resultante del bajo contenido en este elemento en las plantas.
Los alimentos marinos, particularmente algas, acumulan grandes cantidades de
yodo y la gente que los consume (por ejemplo los japoneses) no sufren de bocio
aunque vivan en lugares donde hay suelos deficientes en yodo. Este problema ha
sido resuelto principalmente por el uso de sal yodada. El flor es otro elemento
que afecta al hombre; con una cantidad moderada de flor (hasta 1 ppm en el
agua para beber) se consigue una gran reduccin de las caries dentales. Los suelos
ricos en flor, que existen en algunas reas, producen plantas muy altas en flor,
y los animales que se nutren de ellas pueden padecer anomalas dentales y de
otro tipo.
Un efecto txico interesante y significativo lo causa el selenio. Los suelos
de una vasta rea de las Grandes Llanuras de NorteamBrica, desde Alberta hasta
Arizona, son selenferos, y el alto contenido de este elemento en plantas cultiva-
das en esos suelos causa la caracterstica enfermedad alcalina extenuante de los
animales de granja. Un contenido superior al 0.5 ppm en el suelo es potencial-
mente peligroso y se sabe de reas con cifras superiores a 10 ppm donde el enve-
nenamiento por selenio es severo. La cantidad de! selenio en plantas forrajeras
flucta usualmente entre 10 y 50 ppm bajo estas condiciones. Sin embargo,
ciertas plantas que parecen tener un fuerte metabolismo de selenio y acaso lo
necesiten, pueden acumular hasta 10,000 ppm de seleni0 de los mismos suelos.
Si los animales se nutren de ellas, rpidamente desarrollan envenenamiento agudo
por selenio, llamado tambaleos de ciego, y mueren, a menudo convulsivamente.
Diversas especies de la leguminosa Astragalus y su gnero afn Oxytropis se han
denominado cizaa loca debido a su efecto dramtico sobre 10s animales que las
consumen. Se han hecho intentos para disminuir la absorcin de seleni0 por
las plantas, adicionando azufre en exceso (con lo que se esperara interferir el
metabolismo del selenio), pero fracasaron porque los suelos selenferos por 10
regular Ya son muy altos en azufre, el cual se deriva en gran medida del yeso.
La intoxicacin por selenio rara vez afecta al hombre porque los que lo acumu-
292 SUELO, AGUA Y AIRE: LA NUTRICI6N DE LAS PLANTAS
lan no se utilizan como alimento humano, y gran parte del selenio de los granos
y plantas de cultivo se localiza en el afrecho y otras partes que se eliminan durante
el proceso de beneficio para alimento humano.
LAS PLANTAS COMO INDICADORAS. Ciertas plantas se desarrollan solamente en
suelos muy ricos en ciertos minerales especficos. Las as llamadas plantas indica-
doras incluyen: Merceya Zatifolia (musgo de cobre), que slo se desarrolla en
suelos abundantes en cobre, y Astragalus, as como otros gneros (StunZeyu,
Oonopsis y Xylorrhiza), que parecen necesitar selenio y slo se desarrollan en
suelos ricos en tal elemento. La presencia o ausencia de otros elementos deter-
mina tpicas cambios en el crecimiento vegetal que pueden coadyuvar al diagns-
tico; por ejemplo, vstagos atrofiados y races engrosadas sugieren abundante
hierro, manchas necrticas blancas indican excesivo cobalto, y se dice que altos
niveles de boro inducen a un crecimiento de arbustos en forma redondeada y con
produccin de hojas grandes y verde-oscuras. Estas y otras caractersticas simi-
lares se han usado, particularmente en los primeros tiempos, por exploradores
mineros como un primer signo de la existencia de minerales en el suelo que indi-
caran depsitos comerciales en las cercanas.
LECTURAS ADICIONALES
Articulos en Annual Review of Plant Physiology bajo el encabezado Nutrition and Absorption.
Chapman, H.D. (ed.): Diagnostic Criteria f or Plants and Soils. University of California. Davis,
Epstein, E.: Mineral Nutrition of Plants: Principles and Perspectives. John Wiley & Sons, Inc.,
Fried, M. y H. Broeshart: The Soil-Plant System. Academic Press, Nueva York, 1967.
Gauch, H.G.: Inorganic Plant Nutrition. Dowden, Hutchinson & Ross, Mc., Stroudsburg, Pa.,
Kitchen, H. B. (ed.): Diagnostic Techniques f or Soils and Crops. American Potash Institute,
Russel, B.W.: Soils conditions and Plant Growth. Longmans, Green & Co., Nueva York. 1961.
Steward, F.C. (ed.): Plant Physiology: A Treatise, Vol. 111. Academic Press, Nueva York. 1963.
Division of Agricultural Science. 1966.
Nueva York, 1972.
1972,
Washington, D.C. 1948.
Captulo 11
ABSORCI~N
Y MOVIMIENTO
DEL AGUA
MOVIMIENTO DEL AGUA
EL PROBLEMA DE LA PERDIDA DE AGUA. La mayora de las plantas terrestres ne-
cesitan sistemas eficientes para absorber y movilizar el agua. Ello se debe a que su
nutricin fundamental es gaseosa y poseen un sistema de intercambio gaseoso
muy eficaz. La consecuencia es la prdida irrecuperable del agua transpirada a
traves de las hojas, que son rganos de intercambio de gases (ver Captulo 14,
pgina 353). El agua as perdida debe recobrarse continuamente por absorcin y
transporte desde el suelo.
Gran parte del sistema hdrico de la planta, por lo tanto, puede conceptuarse
como el resultado de un mal necesario. Sin embargo, algunas ventajas resultan del
flujo continuo del agua a travs de ella. El agotamiento del agua edfica que rodea
las races determina el acceso de solucin fresca de las Breas circundantes del suelo
y esto, sin duda, ayuda a la planta a extraer nutrimentos de volmenes mucho ma-
yores del suelo. La simple difusin, eventualmente redistribuye los nutrimentos
hacia las reas agotadas por la absorcin radical, pero el arrastre de solventes del
flujo de masa de la solucin del suelo hacia las races acelera considerablemente
el proceso. Una segunda e indirecta ventaja consiste en que se establece una co-
rriente ascendente de agua en la que los solutos pueden movilizarse, y gran parte
de la distribucin de sales y otros solutos por toda la planta tiene lugar, sin duda,
en el flujo de masa de la corriente transpiratoria. Una tercera ventaja es que la
prdida de agua permite a la planta cierto grado de control sobre su balance ener-
gtico. Las hojas han de absorber energa de la luz solar que incide sobre ellas. A
veces les puede ser imposible utilizar lo suficiente de esta energa en la fotosnte-
sis, as que la temperatura foliar puede llegar a ser peligrosamente alta. Bajo tales
circunstancias, cierta energa puede disiparse por la evaporacin del agua, y este
proceso puede coadyuvar, por lo tanto, a deshacerse del exceso de energa.
El agua se mueve por la planta, penetrando principalmente va las races y
saliendo va las hojas, en respuesta a un gradiente de potencial, el cual entonces
debe disminuir continuamente desde el suelo hacia la atmsfera. En esencia, la
Planta acta como eslabn en el sistema hdrico al permitir el flujo del agua hacia
abajo de un gradiente de potencial, desde el suelo a la atmsfera. Parte del movi-
miento es mediante difusin, usualmente por smosis, y parte de l, mediante
flujo de masa.
294 SUELO, AGUA Y AIRE: LA NUTRICIdN DE LAS PLANTAS
La participacin de diversos procesos en el movimiento del agua se estudia-
r ms adelante, en relacin al movimiento del agua a travs de diferentes tejidos.
No todos los procesos se comprenden claramente. Adems de la difusin pasiva
del agua hacia abajo de un gradiente de potencial, se ha propuesto a menudo
que lo que hace moverse al agua de un lugar a otro, contra un gradiente de po-
tencial, es consecuencia de un gasto de energa metablica. Sin embargo no se
ha aportado una prueba clara de ese movimiento activo. El movimiento me-
diante bombeo fsico o mecnico, por lo tanto, parece improbable. Las fuerzas
determinantes del movimiento pasivo del agua son, en ltima instancia, las que
establecen gradientes de potencial, hacia abajo de los cuales puede difundir el
agua. Muchas de estas fuerzas son ambientales y no estn bajo el control de la
planta. Otras, como por ejemplo el movimiento activo de iones de clula a clula,
que pueden establecer un gradiente osmtico, son resultado de actividades me-
tablicas internas de la planta y por lo tanto seran internamente controladas.
Los problemas de transporte del agua en plantas muy primitivas y sumer-
gidas, son relativamente simples y relacionados principalmente con el transporte
de solutos orgnicos e inorgnicos. Ciertas plantas como los musgos, desarrolla-
ron soluciones a los problemas de la sequa que dependen principalmente de la
capacidad para sobrevivir a la desecacin. Las plantas superiores, sin embargo,
son incapaces de hacer esto y desarrollaron una diversidad de mecanismos que
impiden la prdida del agua e incrementan su absorcin. Gran parte del estudio
que sigue se dedicar al comportamiento de plantas superiores.
ENTRADA DEL AGUA A LAS CJtLULAS. El consenso de la opinin actual es que el
agua entra a las clulas por smosis, es decir, por movimiento en favor de un gra-
diente de potencial. El concepto de absorcin activa del agua, es decir, la trans-
ferencia de molculas de agua a travs de una membrana en contra de un gradiente
de potencial o a una tasa acelerada, se ha invocado de tiempo en tiempo. Ciertos
experimentos sugieren que el gasto de energa respiratoria puede ser necesario
para la absorcin del agua y esto se anticip como evidencia de un proceso activo
de absorcin. Sin embargo, parece altamente probable que la necesidad de la ener-
ga respiratoria es indirecta y resulta de los siguientes hechos: 1) la absorcin del
agua requiere tejido viviente activo para mantener la organizacin de la estructura
celular y subcelular, y 2) la energa se necesita para transportar solutos de clula
a clula para crear los gradientes de potencial osmtico que movilicen el agua. En
consecuencia, el movimiento activo del agua se define mejor como el resultado
del movimiento de solutos con requerimientos de energa que origina la smosis.
Un significativo argumento en contra del bombeo metablico activo o
transporte de molculas de agua lo expuso el fisilogo norteamericano J. Levitt,
quien demostr que la permeabilidad de las membranas al agua es tan grande que
se requerira gastar una increble cantidad de energa para resolver significativa-
mente el escape o retroflujo del agua alrededor de esa bomba.
ESPACIO LIBRE APARENTE. El agua difunde directamente del suelo al interior del
espacio libre de las races. El espacio libre se define como la parte de la raz o
de tejido donde la solucin que baa el tejido tiene acceso directo y libre. En la
prctica este espacio no puede medirse con exactitud, pero una cercana aproxima-
cin es el espacio libre aparente (ELA), el cual se define en base a datos experi-
mentales, como el valor expresado por la fraccin
ABSORCIdN Y MOVIMIENTO DEL AGUA 295
soluto total en el tejido
concentracibn del soluto de la solucin circundante
en la cual est baado el tejido
ELA =
cuando se alcanza el equilibrio de difusin. Evidentemente, este valor no puede
obtenerse con absoluta precisin, pero mediciones aproximadas sealan que el
ELA de las races est dentro del rango de 6-10% del volumen de tejido total. La
medicin directa indica que el agua que ocupa los espacios intercelulares y las pa-
redes celulares del tejido radical incluyendo las vacuolas, constituye cerca del
7-10% del volumen del tejido. Esto sugiere que el ELA de las races es esencial-
mente las paredes de las clulas y los espacios intercelulares. El ELA no incluye las
vacuolas que estn separadas de los fluidos que circundan la clula por el citoplas-
ma, y el sistema membranoso de la clula del plasmalema y el tonoplasto.
ENTRADA DEL AGUA A LAS RAfCES
LA PRESIN DE LA RAZ. Si una planta se decapita y riegan sus races, el agua pue-
de exudar del tallo seccionado. Si se inserta un manmetro al tallo seccionado,
puede demostrarse que el agua exuda con una presin medible que ocasionalmen-
te puede alcanzar hasta 2-3 bars (30-40 psi). Este fenmeno se denomina presin
radical y se ha estudiado mucho como parte de ]Lasfuerzas que movilizan el agua
desde las races a la porcin area de la planta. Si bien esta presin es insuficiente
para mover el agua hasta la copa de los rboles grandes, puede intervenir en el
ascenso de la savia de ciertas especies. Sin embargo, puesto que la presin radical
moviliza el agua en forma ms bien lenta (es decir, el flujo es lento) y con seguri-
dad la presin de la raz desciende hasta cero cuando la prdida de agua es m-
xima, es improbable que contribuya significativamente al movimiento total del
agua en la planta. La importancia de la presin radical consiste en que suministra
un mecanismo para llenar con agua los vasos del xilema de la planta. Esto puede
ser muy importante para los bejucos cuyos vasos se vacan de agua durante el in-
vierno. Adems, la continuidad del agua a travs del xilema de muchas plantas
herbceas puede romperse durante los das clidos cuando disminuye el agua del
suelo (vase pgina 267), y la presin radical producida durante la noche vuelve
a llenar los vasos, de manera que el suminsitro de agua no se pierde permanente-
mente. A fin de comprender la presin de la raz se examinarn las rutas y meca-
nismos del movimiento del agua hacia el interior y a travs de la raz.
APOPLASTO Y SIMPLASTO. En 1932 el fisilogo alemn E. Mnch, desarroll el
concepto de apoplasto y simplasto en las races, ilustrado en la Figura 11-1. El
apoplasto consiste de todo el espacio de las races que es equivalente por lo gene-
ral al espacio libre, es decir, las paredes de clulas y los espacios intercelulares,
ms el tejido de la estela que da libre acceso al agua, principalmente los vasos del
xilema. Lo importante de destacar es que el apoplasto es discontinuo y est sepa-
rado en dos regiones. Una es la corteza y los tejidos por fuera de la endodermis;
la otra es el tejido de la estela, incluyendo los contenidos de los vasos conducto-
res no vivos localizados por dentro de la endodermis. La endodermis provee la
discontinuidad debido a la banda de Caspary, un engrosamiento altamente sube-
rizado de las paredes celulares que impide el paso del agua del exterior al interior,
Banda de
Caspary
I .
Citoplasma
Banda de
Caspary
B
Endodermis
A
Apoplasto: Adviertase la discontinuidad
en la banda de Caspary
. . . . . Simplasto: Las conexiones de cblula a celula
.. . . ' ' ' :. ' . se establecen vla plasmodesmos
Figura 11- 1. La estructura radical en relaci6n al movimiento de agua.
A. Diagrama de una secci6n transversal de una raz para mostrar el con-
B. Diagrama de tres cdlulas endodrmicas (vistas desde el interior de la
cepto de apoplasto-simplasto.
estela hacia fuera), que muestran la banda de Caspary.
o viceversa, a menos que atraviese las clulas, es decir, a travs de las membranas
celulares y el citoplasma. As pues, puede conceptuarse la raz como un osm-
metro, en el que la endodermis fuera la membrana osmticamente activa. Las
sustancias disueltas, o soluciones, pueden difundir o fluir irrestrictamente va el
apoplasto por la corteza hacia la endodermis, pero para acceder a la estela deben
atravesar l a s membranas diferencialmente permeables de la endodermis.
El simplasto consta de todos los protoplastos de las clulas, es decir, la por-
cin de las clulas en el interior de los lmites de la membrana diferencialmente
permeable externa de la clula. Las vacuolas, por estar separadas del citoplasma
por una segunda membrana diferencialmente permeable, tampoco perteneceran
al sistema. Debido a que los protoplastos estn conectados de clula a clula va
pequeos cordones de citoplasma que penetran la pared celular, llamados plasmo-
desmos, el simplasto de toda la raz puede considerarse como un solo sistema
continuo.
MECANISMO DE ABSORC16N. El concepto de apoplasto-simplasto llev en 1938,
a los fisilogos norteamericanos AS. Crafts y T.C. Broyer, a la propuesta de un
mecanismo de absorcin y transporte del agua a la estela. La solucin del suelo,
que contiene iones disueltos, difunde hacia el interior de la porcin externa del
apoplasto (fuera de la endodermis). Los iones son absorbidos hacia el simplasto
ABSORCI6N Y MOVIMIENTO DEL AGUA
297
desde la solucin del suelo en el apo lasto por un proceso activo (considerado en
el siguiente captulo, pgina 314). H stos son transportados activamente a travs
del simplast0 de clula a clula va conexiones intercelulares (plasmodesmos),
pasan la endodermis y llegan al interior de la estela, donde son vertidos al aPoPlas-
to. Con esto abaten la concentracin de iones en la porcin cortical externa del
apoplasto y elevan su concentracin en el apoplasto de la estela. Esto establece un
gradiente osmtico, puesto que el potencial de agua (I) ) es ms alto que en la Cor-
teza que en la estela, y el agua difunde a travs de la barrera osmtica endodrmi-
ca al interior de la estela. La difusin osmtica resultante del agua dentro de la es-
tela es suficiente para establecer una significativa presin hidrosttica en la estela,
lo cual determina que el agua fluya hacia arriba, a los elementos de xilema del
tallo. Tal mecanismo explica satisfactoriamente los fenmenos de presin radical.
Se debe reflexionar en la pregunta por qu6 los iones han de absorberse ha-
cia el interior del simplasto de la corteza, y luego salir de all para incorporarse
hacia el interior del apoplasto en la estela? La respuesta es, aparentemente, que
la concentracin de oxgeno es suficientemente alta en la corteza para permitir
que el metabolismo genere la energa necesaria para la absorcin activa de solutos.
Este es el momento crtico en que la energa se gasta, que se origina el gradiente
de potencial de agua a travs de la endodermis, necesario para movilizar el agua y
crear una presin hidrosttica en la estela.
Se ha supuesto que la concentracin de ox.geno en los tejidos ms profun-
dos de la raz, especficamente en la estela, es ms baja debido a la prolongada
ruta de difusin y a la utilizacin del oxgeno en las partes externas de la raz.
Por lo tanto, la insuficiente energa producida metablicamente est disponible
para retener los iones en el simplasto de la estela contra un gradiente de potencial;
como resultado, ellos fluyen al interior del apoplasto. Un informe reciente del
laborario de P.J. Kramer, demuestra que la concentracin del oxgeno es sin duda
mucho ms baja en el exudado del xilema, lo cual indica un gradiente de oxgeno
relativamente grande en la raz. Esto proporciona un plausible (aunque no com-
probado) mecanismo de absorcin de iones al simplasto en la corteza, donde el
oxgeno, y por lo tanto la energa respiratoria, estn disponibles para liberarse en
el apoplasto de la estela donde el oxgeno es escaso.
Una segunda cuestin debe considerarse: Lesla endodermis en realidad un ver-
dadero saco osmtico como el que este mecanismo requiere? Puesto que la estela
se desarrolla mediante crecimiento (divisin y alargamiento celular) por el extremo,
es aparentemente de extremo abierto. Sin embargo, se produce muy poca absor-
cin de agua en la regin de la raz donde las clulas de xilema se estn diferen-
ciando. Adems, las clulas jvenes en diferenciacin, destinadas a ser xilema, estn
llenas de citoplasma en este estadio, y por lo tanto no ofrecen una va de escape
de poca resistencia para el agua, como sucede en el xilema maduro de la raz
diferenciada. As que el extremo abierto del saco endodrmico est esencial-
mente taponado. En algunas plantas pueden encontrarse ocasionalmente clulas
de paredes delgadas en la endodermis. Estas clulas de paso, que se ven en la Figura
11-2, se encuentran a menudo frente a los vasos de xilema y parece que permiten
el libre paso de soluciones desde la corteza hacia la. estela. Sin embargo, sus paredes
radiales siempre estn fuertemente suberizadas; en consecuencia, probablemente
no constituyan vas para el flujo de masa de solutos. Se presentan discontinuida-
des en la banda de Caspary donde las races laterales forman su conexin con
la estela del tallo principal (Figura 11-2). Sin embargo, esto puede suministrar la
nutricin de la raz lateral recientemente desarrollada antes que su tejido vascular
298 SUELO, AGUA Y AIRE: LA NUTRICI6N DE LAS PLANTAS
Figura 11-2. Secci6n transversal de la raz principal de la avena ( Avena sativa) que muestra una
ralz rameal (derecha). El coloreo fluorescente permite que el citoplasma aparezca grisdceo a
blanco; y las paredes celulares lignificadas o suberizadas, blanco brillantes. Son visibles la endo-
dermis con sus paredes fuertemente suberizadas (End) y los vasos lignificados del xilema (X).
Las cdlulas de paso (PC) se pueden ver opuestas a los vasos de xilema, y las flechas indican dis-
continuidades en la endodermis prbximas a la raz rameal. (De E.B. Dumbroff y D.R. Pierson:
Can. J. Bot , 49: 35-38. (1971). Utilizada con permiso. Fotografa cedida amablemente por el
Dr. Pierson.)
se conecte a la del tallo principal. De cualquier manera, teniendo en cuenta un
cierto grado de escape, si no es excesivo, no se hace insostenible la teora.
Se debe mencionar brevemente el efecto del potencial osmtico del agua
edfica sobre la absorcin del agua y la presin radical. Puesto que el agua se mue-
ve en favor de un gradiente de potencial desde el suelo al interior del xilema, es
evidente que el potencial osmtico del agua edfica tiene un efecto directo. Es po-
sible detener por completo la exudacin del agua por presin de la raz a travs
de un tallo seccionado, colocando las races en una solucin de potencial osm-
tic0 suficientemente fuerte, en cuyo punto el potencial de agua del xilema del
tallo sea aproximadamente igual al potencial osmtico de la solucin externa. El
potencial osmtico de las clulas corticales de la raz no es muy importante en
este proceso. Sin considerar si el agua se mueve a travs o alrededor de ellas,
mientras el potencial de agua en el xilema sea inferior al del agua edfica, Sta
se mover desde el suelo al xilema. Las plantas pueden, por lo tanto, absorber
agua de soluciones cuyo potencial osmtico sea mayor que el de las clulas cor-
ticales o absorbentes, siempre que el potencial de agua del xilema sea suficiente-
mente bajo (es decir, que tenga un valor negativo suficientemente alto).
ABSORCI6N Y MOVIMIENTO DEL AGUA 299
ABSORCIdN DE AGUA EN PLANTAS TRANSPIRANTES. Cuando el agua se pierde por
transpiracin debe reemplazarse a travs de las races. La prdida de agua de las
hojas significa que la cantidad de agua en la planta se reduce; consecuentemente
su potencial es bajo (se torna fuertemente negativo) y el agua difunde hacia el in-
terior de las races en favor del gradiente de potencial as producido. Las races
no parecen contribuir activamente en el proceso. Por el contrario, acaso lo estor-
ben. Si se remueven l a s races la absorcin del agu,a por el vstago disminuye con-
siderablemente. Al matar las races sumergindolas en agua hirviendo se reduce
su resistencia, de manera que el agua puede succionarse mecnicamente a travs
de la planta ms rpido que cuando las races estn vivas; evidentemente ofrecen
resistencia a la absorcin. No obstante ello, son esenciales porque su gran super-
ficie absorbente provee el contacto necesario ent:re la parte area de la planta y
el agua del suelo. Si bien las races pueden entorpecer la absorcin desde un re-
cipiente de agua, son necesarias para el aprovechamiento de la que est finamente
dispersa por todo el suelo.
La mayora de las plantas necesitan oxgeno para producir un sistema radi-
cal lo suficientemente grande para absorber agua.. Los suelos inundados pueden
inhibir el desarrollo radical de manera drstica, debido a la carencia de oxgeno
que, aun cuando el suelo tenga un excesivo suministro de agua, Sta se absorbe
insuficientemente y la planta se marchita. Sin embargo, si bien las races son
esenciales, operaran como un sistema pasivo a travs del cual el agua se desplaza
bajo la influencia del gradiente de potencial que se produce por su prdida en
las hojas.
LA RUTA DEL AGUA A TRAVfiS DE LOS TEJIDOS
Ahora se debe considerar este problema: se mueve el agua realmente slo en el
apoplasto o tambin a travs de las vacuolas de ]las clulas? Se ha sugerido que
el agua se mueve a travs de la corteza de la raz por difusin osmtica de clula a
Figura 11-3. Aparato para medir la absorcin de agua.
Pot6metro
Hoj a o 4pice vegetal
insertado y sellado
La absorcin de
mi de por el mov
de la burbuja en
t ubo capilar
La hoja se sumerge en
agua o aceite de parafi na
transpiracin
para detener la
300 SUELO, AGUA Y AIRE: LA NUTRICI6N DE LAS PLANTAS
la Suspensi6n ;\ de
U
, +
o
W
U
I
I-"
TiemDo -+
A
m l a transpiraci6n
Suspensi6n de
TiemPo +
2.0 ci
t t
0.5
O 10 20 30 40 50 60 70
Tiempo, rnin
B C
Figura 114. Resultados esperados (A y B) y reales (C) de un experimento sobre absorcin de
agua en hoja de Pelargonium. (Datos en C de resultados de P.E. Weatherly: En A.J. Rutter y F.
H. Whitehead (eds.): The Water Relations of Plants. Blackwell Scientific Publications. Oxford.
1963. Utilizados con permiso.)
clula, no por libre difusin a travs del apoplasto. Tal sistema requerira un gra-
diente de potencial de agua entre capas sucesivas de clulas, desde el exterior al
interior de la corteza. Un gradiente de potencial osmtico no sera necesario, si
la combinacin de la presin de turgencia o hidrosttica fuese tal que existiese
un continuo gradiente de potencial de agua. Sin embargo el problema de regula-
cin y mantenimiento de tal gradiente podra ser considerable.
El fisilogo britnico P.E. Weatherly, en Aberdeen, ha desarrollado un mtodo
experimental con referencia a este problema en los tejidos de hoja y tallo. Existen
dos posibilidades: 1) el agua se mueve slo a travs de las regiones del espacio libre
de las paredes de las clulas y espacios intercelulares (el apoplasto), o 2) se desplaza
tambin a travs de vacuolas de clulas. El experimento se realiza con el extremo
de una planta bajo tensin de agua. Una planta de geranio (Pelargonium) se des-
prende por encima del suelo y se inserta a un potmetro, un mecanismo sensible
para medir la absorcin del agua, con las hojas en una atmsfera seca para promo-
ver la prdida de agua, como se muestra en la Figura 11-3. Si las hojas se sumer-
gen repentinamente en agua o aceite de parafina, la prdida de agua cesa de inme-
diato y la tasa de absorcin disminuye. Ahora bien, si toda o la mayor parte del
agua de las clulas est implicada en el transporte, toda estar bajo tensin simi-
lar; en consecuencia, cuando cesa la prdida de agua, su absorcin disminuir a
una tasa estable hasta que se alivien las tensiones internas. El resultado experimen-
tal, medido con el potmetro, dara una curva como la que muestra la Figura 11-4A.
Sin embargo, si el agua se est desplazando solamente en el apoplasto (aunque
necesariamente en equilibrio con una importante cantidad de agua inmvil de las
vacuolas), resultar una curva diferente cuando se detenga la transpiracin, como
se muestra en la Figura 11-4B. Primero, habr una cada repentina del flujo con-
ABSORCI6N Y MOVIMIENTO DEL AGUA 301
Figura 11-5A. Fotomicrografia electr6nica de celulas del floema y una clula de la vaina fascicu-
lar (a la izquierda arriba) de hoja del algodonero (Gossypium hinuturn) en las cuales se han de-
positado cristales de azul de Prusia del agua que se mueve a traves de la hoja. Los cristales del
azul de Prusia pueden verse en la pared celular y el citoplasma pero no en las vacuolas o (en B,
siguiente pdgina) en la cutcula. (Fuente: T.O. Pizzolato, J.L. Burbano, J .D. Berlin, P.R. Morey
y R.N. Pease: J. xp. Bot ., 27, 145-61 (1976). Utilizada con permiso. Fotografa cedida ama-
blemente por el Dr. Berlin.)
I
forme la tensin se atene, Ello ocurrir ms rp:idamente, puesto que slo un
pequeo volumen de agua ser necesario para elevar la tensin en el pequeo volu-
men del sistema de flujo. En consecuencia, puesto que el agua vacuolar debe estar
finalmente en equilibrio con el agua en movimiento del apoplasto, sta continuar
entrando, pero con mayor lentitud, aliviando la tensin en las vacuolas con un
equilibrio ms lento. Esto determina la curva bifsica que se muestra en la Figura
11-4B. La Figura 11-4C muestra los resultados de un experimento real dirigido
por Weatherly. Indica claramente que el agua en movimiento en el tejido del tallo
y la hoja no es equivalente al agua total del sistema sino solamente a una pequea
proporcin de ella. As pues, la segunda posibilidad, la de que el agua se moviliza
tanto a travs del apoplasto como de las vacuolas, es probablemente la correcta.
En recientes experimentos, se dejaron transpirar hojas de algodn con sus
302 SUELO, AGUA Y A I RE: LA NUTRI CI dN DE LAS PLANTAS
Figura 11-58. Pared celular de una c6lula epidrmica de una hoja de
algodonero tratada como en A pero mostrada a un aumento mucho
mayor (Fotografa proporcionada amablemente por el Dr. J .D. Ber-
lin, Texas Tech University.)
pecolos en una solucin de ferrocianuro de potasio; luego estas hojas se trataron
con una solucin de iones frricos que precipitaron el ferrocianuro como azul de
Prusia, visible al microscopio ptico y en micrografas electrnicas. Los resultados
de este estudio, en el que los depsitos de cristales de azul de Prusia mostraron las
rutas y el flujo del agua, confirman que el agua se mueve principalmente a travs
del citoplasma y paredes celulares y no a travs de vacuolas. Una tpica microgra-
fa electrnica se muestra en la Figura 11-5.
EL ASCENSO DE LA SAVIA
LAS FUERZAS NECESARIAS. El agua puede difundir de clula en clula hacia abajo
de un gradiente y puede entrar al xilema con fuerza sufiente para generar altas
presiones de 2-3 bars o an mayores. No obstante, esta presin radical nunca es
suficiente para elevar el agua a la copa de un rbol de gran altura, y con frecuencia
puede ser demasiado baja en la mayora de las plantas, en particular cuando la
prdida de agua es muy alta. Adems, el flujo desde la presin radical no es lo su-
ficientemente alto para explicar el movimiento de los volmenes de agua que tiene
lugar a travs de un rbol. Ello requiere una presin de 10 bars (150 psi) para ele-
var el agua a 90 metros, altura de un rbol de gran tamao, y se requiere mayor
presin para vencer la resistencia en el tronco y mantener un flujo adecuado.
Evidentemente, esta presin no puede suministrarse desde abajo puesto que las
presiones de la raz de tal magnitud nunca han sido medidas. La capilaridad, po-
tencial mtrico de un sistema con vas estrechas, podra ser suficiente para elevar
ABSORCIdN Y MOVIMIENTO DEL AGUA 303
el agua a cortas distancias en los tallos, pero no a la altura o en las cantidades que
se requieren.
La solucin al problema descansa en la idea de que el agua se mueve en fa-
vor de un gradiente de potencial desde el suelo a la atmsfera, va la planta. Ello
significa que un potencial de agua muy bajo en la atmsfera, relativo al potencial
de agua del suelo, suministra la fuerza que sube el agua de la planta a las hojas.
En otras palabras, conforme el agua se evapora desde la superficie foliar, ms agua
es jalada hacia arriba por la tensin que as se crea.
A primera vista las fuerzas implicadas parecen increblemente grandes. Pa-
rece imposible que las delicadas clulas de la hoja puedan soportar tensiones de
150 psi o mayores sin que se colapsen. Sin embargo, en razn de su pequeo ta-
mao, las clulas pueden tolerar tensiones mucho ms grandes. El potencial de
agua del aire es muy bajo: cerca del 50% de humedad relativa (HR) est muy pr-
ximo a 1,000 bars, o 15,000 psi, y es mucho ms grande a HR baja.* La diferen-
cia del potencial de agua (AI)) entre clulas foliares y atmsfera es con frecuencia
muy grande, y la prdida de agua de superficies celulares foliares genera una ten-
sin tremenda en el interior de las clulas; ello se at!enGa por el flujo de agua desde
clulas internas, y finalmente desde el xilema de las venas foliares, as que la ten-
sin se trasmite al agua del xilema.
LA COHESIdN Y EL AGUA, Ahora el problema es ,cmo puede el agua ser empu-
jada hacia arriba en un sistema de tubos, como el xilema, a distancias mayores
que la altura de una columna de agua sostenida por 1 atmsfera (atm) de presin
(9.14 m)? Si se intentase levantar el agua de un tubo ejerciendo succin en su ex-
tremo superior, la columna se rompera y un vacio (o casi vaco lleno de vapor
de agua) se formara en el momento que la altura de la columna alcanzase cerca de
9 metros. La respuesta reside en el hecho de que las molculas de agua tienen gran
afinidad entre s, y delgadas columnas de agua pueden soportar una tensin de
hasta 1,000 atm sin que se rompan debido a las propiedades cohesivas de las mo-
lculas. La teora de que el agua puede ser empujada hacia lo alto de rboles gran-
des en largas columnas filiformes del xilema fue ,adelantada hacia 1894 y 1895
por varios cientficos y elaborada por H. Dixon en. Gran Bretaa, y O. Renner en
Alemania, a principios del siglo veinte. Estas co1u:mnas normalmente no forman
vacos (rupturas) porque la propiedad cohesiva de las molculas de agua es sufi-
ciente para impedir su separacin o alejamiento de las paredes de los vasos.
Figura 11-6. Medici6n con dendrmetro del dimetro de un tronco de rbol. (De B.S. Meyer,
D.B. Anderson y R.H. Bohning: Introduction to Plant Phy.siology. Por Li t t on Educational Pu-
blishing, Inc. Reimpreso con permiso de Van Nostrand Reinlhold Company.)
*Conociendo la temperatura en grados absolutos ( 2 ) y la HR, el potencial de agua (q )
del aire puede calcularse de la ecuacin J, (bar s)= -10.7 T lomg (100/HR)
304 SUELO, AGUA Y AIRE: LA NUTRICION DE LAS PLANTAS
La evidencia que sostiene la teora de que el agua es empujada hacia arriba
por la fuerza de la evaporacin foliar es indirecta. Se ha demostrado claramente
que el agua se desplaza en el xilema. Ello puede hacerse mediante inyeccin de
colorantes, rastreadores radioactivos, o pequeos impulsos de calor en el interior
de un tronco de rbol y siguiendo el movimiento del marcador. El hecho de que
el agua del xilema est6 bajo tensin puede observarse mediante cortes en el inte-
rior del tallo de una planta: el agua chasquear dentro del xilema y si se aade
agua a la superficie seccionada ser llevada hacia el interior. Si se coloca un mi-
crfono sensible contra el tallo de una planta, se podr escuchar el chasquido de
los cordones de agua de xilema, particularmente en das calurosos y secos. Las
amplias interrupciones o vacos pueden causar marchitez severa, debido a que
una columna rota ya no puede transmitir a las races la tensin necesaria para
elevar el agua. Se presupone que estos cordones interrumpidos se reconectan en
la noche por la presin de la raz, cuando disminuye la tensin causada por la
evaporacin de agua de las hojas.
Tal vez la evidencia ms efectiva surge de mediciones con el dendrmetro,
dispositivo consistente en un cinturn de metal cuya circunferencia exacta es
variable y calculada mediante un fino instrumento, que mide el permetro de un
tronco de rbol. Puede demostrarse experimentalmente que una pieza de tubera
de caucho se contrae en su periferia ante la succin, es decir, si sus contenidos
estn bajo tensin. Lo mismo se aplica a un tronco de irbol. Las mediciones del
dendrmetro demuestran que la periferia de un rbol disminuye durante el da
cuando son ms altas las tasas de evaporacin, lo que indica que los contenidos
estn bajo creciente tensin. En contraste, se incrementa en la noche cuando la
evaporacin disminuye y la tensin sobre el agua del tronco se reduce. Una tpica
medici6n de dendrmetro se muestra en la Figura 11-6.
Con esta teora de movimiento de agua en los tallos surge el problema de
que las interrupciones en la columna acuosa son el resultado de sequa excesiva,
formacin de burbujas gaseosas de gas disuelto y rupturas mecnicas. Estas rup-
turas deben, tericamente, inactivar el cordn de xilema donde ocurren y reducir
la capacidad del sistema para movilizar el agua. Muchas de esas rupturas suceden
pero no parecen afectar seriamente el m0virnient.o del agua. Presumiblemente
cuando la tensin se relaja en la noche, la columna se reconecta de nuevo. Si los
cortes se hacen en un tronco de rbol de modo que desaparezcan continuas co-
lumnas verticales de xilema, el agua an puede ascender en zig-zag, si bien a una
tasa reducida. Parece probable que el transporte lateral se produce como conse-
cuencia de la difusin en el parnquima del xilema, el tejido vivo de la madera.
TAMAO DE LOS VASOS. Han surgido interrogantes sobre el tamao de los vasos
de xilema a travs de los cuales debe fluir el agua. Se ha demostrado que en peque-
os vasos la tasa de flujo del agua vara de acuerdo al cuadrado del radio del vaso
(ley de Poiseuille). Las plantas con tallos largos y estrechos, como los bejucos,
tienden a poseer vasos de gran dimetro que permiten altas tasas de flujo. Puesto
que la tasa de flujo vara inversamente a la longitud, tal arreglo permite la trans-
ferencia del agua a travs de largas distancias en un tallo de pequeo dimetro.
Sin embargo, tales vasos estn ms expuestos a la ruptura de la columna de agua,
y ia gran presin radical de los bejucos puede estar asociada a la necesidad de vol-
ver a llenar vasos que se vaciaron debido a los vacos o a las rupturas.
Por otra parte, los rboles que poseen un dimetro mucho ms grande en
relacin a su longitud, tienden a poseer elementos conductores de xilema ms
ABSORCI6N Y MOVIMIENTO DEL AGUA 305
Tabla 11- 1. Valores estimados para poten-
cial de agua (I )) y diferencia de potencial
de agua (AI)) en un hipot6tico sistema
suelo-planta-aire. La planta es un rbol
pequefio, el suelo est bien irrigado y el
aire est aproximadamente a 50%de hu-
medad relativa, a 22'C (I ) =-1,000 bars)
dI, bars A$, bars
Agua edfica -0.5
Raz
-2 -1.5
Tallo -5 -3
Hoja
-1 5 -1 o
Aire -1,000 -985
pequeos. Esto significa que el agua puede ser impulsada a alturas mayores por
fuerzas ms grandes, y la reduccin de la capacidad de transporte causada por va-
sos de pequeo dimetro es compensada por el dimetro agrandado del tronco
y el nmero correspondientemente mayor de elementos conductores.
Los cambios extremos de temperatura son probablemente la causa de la
formacin de burbujas en el agua bajo tensin, y es probable que la congelacin
de sta provoque la ruptura de la columna de agua porque los gases disueltos se
separan de la solucin en congelacin. Esto puede explicar el por qu las plantas
que viven en las zonas de fro atemperado o rticas, tienden a poseer tallas de
vasos inferiores a las de plantas que viven en zonas tropicales. Los rboles de con-
feras,-que comnmente medran en climas templados o rticos, carecen en absoluto
de vasos y slo poseen traqueidas de dimetro mucho ms pequeo.
TEORAS ALTERNATIVAS. Se han aportado varias propuestas alternativas. Una
consiste en que el agua asciende en los rboles principalmente como vapor. Em-
pero, se sabe que la mayor parte del agua en el xilema est en estado lquido, no
de vapor. Se han propuesto distintas formas de activos sistemas de bombeo pero
no se han encontrado dispositivos mecnicos o bioqumicos que pudieran llevar-
lo a cabo. Parece improbable el transporte activo de agua en clulas vivas de rbo-
les. En primer lugar la resistencia de las clulas vivas al flujo sera muy grande y
aumentaran considerablemente las fuerzas que se requieren para movilizar gran-
des cantidades de agua. Si a una planta marchita se le cortan las races y su tallo
se coloca en agua, se recobra con ms rapidez que cuando las races de una planta
intacta se colocan en agua. Esto demuestra la gran resistencia al transporte del
agua por parte del tejido vivo y hace suponer que el agua se desplaza a travs
del tallo en tejido no vivo. La aplicacin de venenos o fro como inhibidores me-
tablicos al tallo de un &bol tambin provoca poco o ningn efecto sobre el
movimiento del agua, lo que refuerza el concepto de que las clulas muertas estn
implicadas en el transporte del agua y que no hay gasto de energa en s u tallo.
En consecuencia, la posibilidad de que las clulas vivas contribuyan sustan-
cialmente al movimiento ascencional del agua es bastante remota. La teora de
que el agua asciende en el xilema de las plantas grandes fundamentalmente bajo
la influencia de las fuerzas de evaporacin de las superficies foliares, parecera ser la
I
I
O
(00%
h
- o
U
ABSORCI6N Y MOVIMIENTO DEL AGUA 307
explicacin ms correcta. Una considerable dosis de evidencia sostiene este punto
de vista, en tanto que las dems alternativas carecen de apoyo o parecen contra-
venir los hechos conocidos.
EL FLUJO DEL AGUA
El agua se mueve bajo la influencia de un gradiente en el potencial de agua ( J / ) y
su movimiento se dificulta por diversas resistencias al flujo que incluyen la visco-
sidad de la solucin, la permeabilidad de las membranas y la resistencia al flujo en
los pasajes estrechos. Considerando todas estas resistencias juntas, a un estado uni-
forme de tasa de flujo (F) en cualquier parte del sistema se referir a estas canti-
dades como
AJ /
I ; =
resistencia
y para todo el sistema
AJ/ total
suma de resistencias
F =
En un sistema de estado uniforme la tasa de flujo es constante, de manera que
es posible relacionar la resistencia de cualquier parte del sistema a la cada del po-
tencial de agua a travs de esa parte del sistema. Algunas medidas estimadas de
potencial de agua en varias partes del sistema suelo-aire-agua de una planta se mues-
tran en la Tabla 11 -1. Puede advertirse que el valor ms grande para A J/ corresponde
al punto donde el agua abandona la hoja y se evapora hacia la atmsfera. Esto
indica que la resistencia en este punto es mucho m.ayor que en cualquier otro lu-
gar del sistema. Por tanto, este es el punto en el que debiera aplicarse el control
efectivo del sistema. Los mecanismos de control y su operacin se estudian en el
Captulo 14, en la seccin sobre los estomas.
Algunos valores reales de mediciones de potenciales de agua del suelo y
rboles bajo distintas condiciones y a diferentes horas del da se presentan en la
Tabla 11-2. Puede observarse que los potenciales de agua, y por tanto las tasas de
flujo, estn directamente relacionadas a las condiciones de irrigacin (las cuales
afectan los potenciales de agua del suelo), la hora del da y condiciones atmosf-
ricas (las cuales afectan el potencial de agua del aire). Por tanto, la tasa de flujo
del agua a travs de los rboles, que es directamente proporcional al diferencial de
potencial de agua entre el aire y el suelo, vara con las condicones externas cam-
biantes, y el balance hdrico de las plantas se ajusta automticamente a las con-
diciones externas y al requerimiento para diferentes tasas de flujo.
RESUMEN
El proceso del movimiento de agua a travs de la planta puede sintetizarse como
sigue: el agua penetra al espacio libre o apoplasto de las races y se mueve por
smosis para salvar la barrera impuesta por la banda de Caspary de la endodermis.
El potencial osmtico se genera con la absorcin de solutos desde la solucin del
308 SUELO, AGUA Y AIRE: LA NUTRICIdN DE LAS PLANTAS
suelo por los protoplastos de las clulas corticales y el transporte de esos solutos
va el simplasto a travs de la endodermis, que se contina por su retorno al apo-
plasto dentro de la estela. En este proceso puede producirse cierta presin posi-
tiva en el xilema de la parte inferior del tallo, la cual puede ser suficiente para
transportar agua lentamente hasta una altura considerable de aqul. Este puede
ser el mecanismo mediante el cual se reparan las columnas de agua que se rompen
o se rellenan los vasos xilemticos vacos. Sin embargo, la principal fuerza impul-
sora del movimiento ascencional del agua, es la evaporacin de Bsta de las super-
ficies foliares. El agua asciende en el tallo, atrada hacia arriba por la tensin que
produce su prdida desde las hojas. La propiedad cohesiva del agua es suficiente
bajo circunstancias normales, as las columnas de agua resisten la tensin del
impulso ascencional que causan las fuerzas de evaporacin.
LECTURAS ADICIONALES
Artfculos en Annual Reviews of Plant Physiology bajo el encabezado Water Relations.
Slatyer, R.O.: Plant Water Relations. Academic Press, Nueva York. 1967.
Steward, F.C. (ed.): Plant Physiology: A Treatise. Vol. 11. Academic Press, Nueva York. 1959.
Sutcliffe, J.: Plants and Water. St. Martins Press, Inc. Nueva York. 1968.
Captulo 12
ABSORCI~N
Y TRANSFERENCIA
DE SOLUTOS
MECANISMOS PARA EL MOVIMIENTO DE SOLUTOS
Los solutos pueden movilizarse por difusin a tr;rvs de canales que presentan
barreras fsicas, o pueden ser arrastrados mediante el flujo del solvente (fuerzas
de arrastre de solvente). Sin embargo, si una barrera fsica, como una membrana
o un material coloidal como el citoplasma, interfiere su libre paso, una diversidad
de mecanismos puede implicarse en la transferencia del soluto a travs de la ba-
rrera. Si sta no es completa, la solucin puede atravesarla o los componentes de
la solucin pueden difundir a travs de ella. Sin embargo, es evidente que la tasa
de difusin o de flujo se ver afectada por las propiedades de la barrera. Si sta
pertenece a un sistema viviente, como membrana o citoplasma, los solutos pue-
den atravesarla por difusin pasiva o por transporte activo (transporte activo es
la transferencia efectiva de molculas de un sitio a otro mediante algn proceso
que requiera energa). La diferencia es que si las molculas se mueven por difu-
sin, lo hacen slo en favor de un gradiente de potencial, en tanto que si lo hacen
por transporte activo, parecen moverse en contra de ese gradiente.
Los solutos tambin pueden atravesar una membrana por medio de otros
procesos. El material puede movilizarse por la formacin de burbujas o vesculas
sobre un lado de la membrana que descargan sus (contenidos sobre el otro lado.
Este proceso se denomina pinocitosis y es bsicamente la descarga de pequeas
vacuolas a travs de una membrana. La pinocitosis constituye un proceso no selec-
tivo porque los solutos se mueven slo como parte de la pequea burbuja de
solucin, no independientemente. El transporte activo, por otra parte, puede
ser altamente selectivo.
DI FUSI ~N
CARACTERfSTICAS DE LA MEMBRANA Y EL SOLUTO. Las SUStanCiaS no electroliti-
cas (partculas sin carga) tienden a difundir a travs de membranas a una tasa ms o
menos proporcional a su solubilidad en lpidos o solventes grasos, e inversamente
proporcional a su tamao molecular, como se muestra en la Figura 12-1. La de-
pendencia en tamao sugiere que las molculas deben atravesar espacios o huecos,
y que las membranas celulares son estructuras cribosas o compuestas de micelas o
310 SUELO, AGUA Y AI RE: LA NUTRI CI 6N DE LAS PLANTAS
entre solubilidad a las grasas, tamao
Molkulas
molecular y permeabilidad en c6lulas
grandes
de Chara, de diversas sustancias no
*aja L ~
electro1 ticas. (Modificada con datos
Baja -. Alta de R. Colander: Phvsiol. Plant..
Solubilidad a grasas 2:302. 1943.)
pequeas subunidades dispuestas en cierto patrn regular con espacios entre ellas.
Sin embargo, el hecho de que la tasa de difusin de solutos vare con su solubilidad
a las grasas apoya los modelos de estructura de membranas (Captulo 3, pgina 53)
que indican una O ms capas lipidicas. Es posible, empero, que una estructura
compuesta, consistente de una doble capa discontinua, con poros de diverso tama-
o, pudiera representar ms correctamente el verdadero estado de cosas. El efecto
de solubilidad de grasas podra resultar del movimiento de solutos, ya sea a tra-
vs de la estructura, o a travs de huecos o poros en ella, ordenados con grupos
lipof licos expuestos.
Las paredes celulares parecen ser permeables a la mayora de los solutos,
mientras que la permeabilidad de las membranas es mucho menor, de ah que sea
la sustancia celular viva la que afecta y controla el transporte de solutos al interior
y hacia fuera de las clulas. Las paredes celulares y los espacios intercelulares que
son permeables al agua son tambin esencialmente pesmeables a los solutos. Los
gases disueltos se mueven con mucha ms libertad; las clulas son casi tan per-
meables a los gases como al agua.
Sin embargo, las paredes celulares no tendran mucha importancia en el
transporte de solutos. Estn perforadas por numerosos poros u orificios diminutos
llamados plasmodesmos (ver Figura 3-1). La membrana citoplsmica externa (plas-
malema) de clulas adyacentes est en intimo contacto con cada plasmodesmo.
Puesto que puede haber hasta 5 X 10' plasmodesmos por cm2, significa que las
clulas contiguas poseen gran cantidad de canales a travs de los cuales tiene lugar
transporte activo o pasivo de sustancias sin que tengan que atravesar la pared ce-
lular. Por lo tanto, las propiedades de las membranas y su interaccin con los
solutos es la faceta ms importante de la transferencia de solutos.
El estudio de la difusin de electrolitos y su transporte a travs de mem-
branas presents problemas especiales. Generalmente los iones tienen una permea-
bilidad mucho menor que las partculas sin carga, porque sta les dificulta penetrar
una membrana con grupos activos o cargados que los repelen o atraen (y por lo
tanto los inmovilizan). Como resultado de la carga, los iones tienden a rodearse
de una capa importante de molculas de agua, y esta envoltura de hidratacin
agranda su tamao lo suficiente como para afectar la penetracin a travs de los
poros de la membrana. Adems, en general, los iones son fuertemente lipofbi-
cos, de ah que posean tasas bajas de difusin. Finalmente, el movimiento y dis-
ABSORCI6N Y MOVIMIENTO DEL AGUA 311
tribucin de iones son afectados por el potencial elctrico del sistema as como
por su potencial qumico. El movimiento de iones, por lo tanto, se considera por
separado, junto con un estudio de los mecanismor; por los cuales los iones o solu-
tos pueden transferirse activamente a travs de membranas.
DIFUSION Y PERMEABILIDAD. La difusin de molculas es su movimiento neto
hacia abajo de un gradiente de energia libre o potencial qumico. La tasa de
difusin vara con el gradiente de potencial qumico o la diferencia en actividad
(en esencia equivalente a la concentracin) a travs de la distancia de difusin. En
consecuencia, el flujo molecular a travs de una membrana (J, el nmero de par-
tculas que atraviesan un rea dada de membrana en un tiempo dado) es propor-
cional a la fuerza de transporte, que es la diferencia de concentracin sobre cual-
quier lado de la membrana ( A C) :
J =PAC
donde P es un coeficiente de permeabilidad, que mide la capacidad para atravesar
la membrana de la sustancia en cuestin. Sin embargo, la permeabilidad de una
membrana es proporcional a la capacidad de movimiento de soluto para difundir
a travs de ella, e inversamente proporcional al grosor de la membrana. Conse-
cuentemente, el flujo puede medirse mediante
D
J =- AC
X
donde D es el coeficiente de difusin de una sustancia dada, a travs de la mem-
brana, y X es el espesor de la membrana. Esto demuestra que el grosor de la
membrana es extremadamente imp0rtant.e. Puesta, que los coeficientes de difu-
sin de la mayora de las sustancias son muy pequeos, se necesitan membranas
lo ms delgadas posible para transporte eficiente. De hecho, los valores de D son
tan pequeos para muchos solutos que podran no penetrar a la tasa necesaria a
menos que est en operacin algn mecanismo de transporte activo.
ACUMULACrdN POR DIFUSIN. El proceso de acumulacin, que usualmente se
produce dentro de la clula implica una concentracin ms alta de la sustancia
sobre un lado de la membrana que sobre el otro. Dado que la fuerza motora
de la difusin se origina en una diferencia de conc'entracin, es imposible que se
consiga la acumulacin mediante simple difusin, ya que ninguna diferencia
de concentracin es posible en equilibrio. Sin embargo, si las condiciones den-
tro de la membrana son tales que el estado fsico o qumico de la sustancia se
cambia al entrar, puede producirse alguna acumulacin importante. Por ejemplo,
si se suministra a las clulas el colorante vital rojo neutro, ste se acumula en su
interior a una concentracin que puede superar en 30 veces la concentracin exter-
na. Esto se debe a que el colorante se suministra a un pH alrededor de 8, al cual las
molculas no estn disociadas. Al entrar en una clula cuya solucin vacuolar
tenga un pH cercano a 5.6 las molculas de colorante se disocian. Puesto que las
paredes celulares son impermeables a la forma inica del colorante, ste no podr
difundir al exterior de nuevo, y se produce la acumulacin. El proceso, sin embargo,
no tiene lugar sin gasto de energa. El sistema celular, cualquiera que sea, aporta
312 SUELO, AGUA Y AIRE: LA NUTRICION DE LAS PLANTAS
la fuerza motora y sostiene el pH interno suficientemente bajo para mantener las
molculas de colorante en forma ionizada. De manera similar, si una molcula se
precipita, adsorbe o cambia qumicamente al entrar en una clula, puede ser con-
concentrada sin que se necesite ningn proceso activo de transporte. Nuevamente,
la propia clula suministra la fuerza impulsora que aporta la energa necesaria para
inactivar las molculas que acceden a su interior.
MOVIMIENTO DE IONES
PROBLEMAS ESPECI ALES. El movimiento de iones y su transporte a travs de
membranas implican problemas especiales. Debido al gran tamao de su envoltura
de hidratacin y a su escasa solubilidad lipdica, generalmente los iones presentan
muy baja permeabilidad a travs de las membranas. Las fuerzas que actan sobre
iones que incluyen gradientes de potencial elctrico, o gradientes de potencial de
carga, son lo ms importante de esto, as que sus movimientos estn influidos tanto
por distribucin de carga como por concentracin. Adems, el movimiento de un
ion influye automticamente sobre el patrn de carga del sistema, de modo que el
movimiento de otros iones se ve afectado sin importar el signo de sus cargas. En
consecuencia, el movimiento activo de iones puede llevarse a cabo por la genera-
cin de gradientes elctricos, y viceversa.
ANTAGONISMO. Este es un fenmeno importante que puede proteger a las plantas
de los efectos txicos de ciertos iones. Una planta que se coloca en una solucin
diluida de cloruro de potasio, acumular iones de potasio rpidamente hasta alcan-
zar niveles txicos, y puede morir. Sin embargo, si en la solucin hay cantidades
nfimas de calcio, la absorcin de potasio se reduce considerablemente y no se
presenta toxicidad. Se dice que el calcio antagoniza con la absorcin de potasio.
De manera similar, el calcio antagoniza con el sodio, y tambin el sodio o el po-
tasio, agregados en pequeas cantidades, antagonizan la absorcin de calcio. Apa-
rentemente los iones no han de estar relacionados (es decir, no estn en el mismo
grupo en la tabla peridica) para que sea efectivo el antagonismo. El sodio no
interfiere la absorcin del potasio, y el bario no se opone al calcio; en cambio, el
sodio o el potasio sern antagnicos con respecto al bario o al calcio. Se cree que
el calcio es necesario para la integridad estructural de las membranas. En su ausen-
cia, los mecanismos selectivos de transporte se interrumpen y se incrementa la
indiscriminada permeabilidad de la membrana. Esto podra ser la base del efecto
antagnico del calcio.
Slo se necesitan concentraciones pequeas del ion antagonizante para que
el antagonismo sea reversible. Por lo tanto, es improbable que el antagonismo
opere al nivel de transportadores de iones especficos. Se ha propuesto que los
elementos antagnicos pueden afectar la estructura coloidal de la superficie
absorbente, ejerciendo as una influencia, pero las cantidades que se requeriran
para cambiar efectivamente la permeabilidad de las membranas parecen ser de-
masiado grandes. No se ha adelantado ninguna otra explicacin satisfactoria con
relacin al antagonismo. El proceso es de indudable valor en el campo. Muchos
suelos poseen ciertos elementos en exceso, en particular potasio o calcio y
con seguridad ocurriran efectos txicos si algunos mecanismos de regulacin, co-
mo el antagonismo, no se desarrollaran. Sin embargo, tambin existe un lado
negativo: el exceso de algunos iones pueden interferir la incorporacin de otros
ABSORCIdN Y MOVIMIENTO DEL AGUA 313
iones necesarios e inducir, as, sntomas de deficiencia, aun cuando el ion nece-
sario est presente en cantidades suficientes en el suelo. En consecuencia, el exceso
de sodio en el suelo acaso provoque deficiencia de calcio a travs del antagonismo.
POTENCIAL ELECTROQU~MICO. Al igual que las partculas no inicas difunden ha-
cia abajo de un gradiente de potencial qumico, los iones difunden en favor de
un gradiente de potencial electroqumico. Tal gradiente posee un componente qu-
mico y un componente elctrico. Existe un gradiente de potencial qumico si la
concentracin de un ion en un lado de una membrana es mayor que en el otro.
Un gradiente de potencial elctrico puede resultar de la presencia de iones o par-
tculas cargadas, pero tambin de la carga sobre un lado de la membrana con res-
pecto al otro (es decir, las cargas pueden estar asociadas con la superficie de la
membrana o con algn componente fijo o no difusible sobre uno u otro ladode
la misma).
Por lo tanto, puede existir una situacin donde, por ejemplo, un catin est
ms concentrado dentro de la clula que en el exterior, pero que el interior de la
clula est negativamente cargado con respecto al exterior. A s el ion tender a
difundir hacia fuera y abajo del gradiente de potencial qumico, pero tender
a difundir hacia dentro y abajo del gradiente de potencial elctrico. La direccin
final del movimiento estar determinada por el componente del gradiente (elc-
trico o qumico) ms acentuado.
La relacin entre el electropotencial y el potencial qumico se define por
la ecuacin de Nernst, que se ha derivado de las leyes bsicas fsicas y qumicas
donde A es la diferencia electropotencial a travs de la membrana y ai/a, es la
diferencia de potencial qumico, siendo la relacin de actividad interna y externa
(esencialmente la actividad es equivalente a la concentracin molar). R es la cons-
tante del gas, F la constante de Faraday y z es la carga por ion, o Valencia. Supo-
niendo una temperatura constante puede observarse que para cada ion
concentracin interna
concentracin externa
A = -K log
o, en otras palabras, el potencial electroqumico a travs de una membrana vara de
acuerdo al logaritmo de la razn de la concentracin inica en uno u otro lado
de la membrana. Esta relacin es extraordinariamente valiosa en el estudio del
transporte activo (pgina 318).
EQUILIBRIO DE DONNAN. El equilibrio de Donnan es un fenmeno de acumula-
cin de iones llamado as en homenaje a su descubridor: F.G. Donnan. Si existe
una carga negativa de no difusin sobre un lado de una membrana (para simplifi-
car puede decirse dentro de una clula), esto genera un gradiente de potencial a
travs de la membrana en favor del cual difunden los iones. El resultado es que,
en equilibrio electroqumico, la concentracidn (potencial qumico) de iones no
necesariamente es igual dentro que fuera. Por lo tanto, como resultado de un des-
314 SUELO, AGUA Y AIRE: LA NUTRICI6N DE LAS PLANTAS
equilibrio elctrico que se mantiene debido a cargas de no difusin, se establece
un desequilibrio de concentracin.
La ecuacin que describe el equilibrio de Donnan establece que la razn
de iones positivamente cargados, del interior al exterior, debe igualar la razn de
iones negativamente cargados, del exterior
centracin).
[iones positivos dentro] -
[iones positivos fuera]
-
al interior (los corchetes indican con-
[ iones negativos fuera]
[iones negativos dentro]
La Figura 12-2 muestra una situacin que representa una clula en la cual las
cargas internas fijas estn balanceadas por iones de potasio. La clula est situada
en una solucin de potasio (Figura 12-2B), y est inicialmente fuera de equilibrio
con su solucin circundante. Luego de alcanzar el equilibrio, como se ve en la
Figura 12-2C, el potasio se ha concentrado dentro de la clula y el cloruro es ex-
cluido como resultado de la influencia de los cambios negativos permanentes en
el interior. Este equilibrio del tipo Donnan puede concentrar las sustancias de
una clula hasta ms de 30 veces la concentracin externa o del medio ambiente.
La acumulacin de zinc por las races, por ejemplo, se debe principalmente a la
formacin de un equilibrio de Donnan as como a la formacin de derivados de
zinc estables o no ionizados dentro de la clula.
EL POTENCIAL DE MEMBRANA. Se ha determinado que la mayora de las mem-
branas biolgicas tienen un potencial o diferencia de carga de un lado a otro; en
general el lado interior de las clulas es negativo con relacin al exterior. Tales
potenciales de membrana influyen sobre el flujo de iones, pero de hecho pueden
establecerse por una difusin desigual de iones. Un potencial se forma, por ejem-
plo, si existen cargas fijas sobre uno de los lados de la membrana. De la misma
forma, pueden resultar en un potencial, como muestra la Figura 12-3, tasas des-
iguales de difusin de los componentes inicos de una sal a travs de la membra-
na, tasas desiguales de difusin de diferentes iones en lados opuestos de la mem-
brana, o transporte activo de una partcula cargada, ion, o electrn. Cualquiera
sea la fuente de potencial, Sta afecta el gradiente de potencial electroqumico
a travs de la membrana y, por lo tanto, la difusin de iones. Es posible, adems,
que los potenciales elctricos o gradientes de potencial de las plantas sean impor-
tantes en el establecimiento de patrones de desarrollo (ver Captulos 19 y 20,
pginas 488, 522). Hasta ahora la fisiologa y la generacin de potenciales no se
han estudiado tan intensamente en las plantas como en los animales.
TRANSPORTE ACTIVO
DEFINICI6N. El transporte activo es la transferencia de iones o molculas a tasas
o cantidades que parecen contravenir las leyes de difusin y equilibrio electro-
qumico. Ello slo puede conseguirse mediante inversin de energa. Por lo tanto,
el transporte activo puede definirse como el movimiento de iones contra un po-
tencial electroqumico mediante el uso de energa derivada del metabolismo. Es
la participacin del metabolismo como fuerza impulsora de transporte.
Uno de los problemas inherentes al concepto de transporte activo es que el
ABSORCION Y MOVIMIENTO DEL AGUA
315
A
\ ~ "
B Figura 12-2. Equilibrio de Donnan.
A. Clula1 con cargas fijas neutralizadas por
iones K+.
do. Ell K+ se ha acumulado dentro de la
B. Clula1 situada en una solucin de KCI.
C. El equilibrio de Donnan se ha estableci-
clula,, el CI-se ha excluido.
~"
4K+ 8Kf
o
o
Na+_l:+
C
GIL- -+ Figura 12:-3. Potencial de membrana.
A. Las cargas fijas dan por resultado una
carga negativa en el lado derecho de la
memblrana.
B. Tasas [desiguales de difusin de aniones y
cationes resultan en carga positiva en el
lado derecho de la membrana.
C. Tasas 'desiguales de difusin de iones de
negativa en el lado derecho de la mem-
brana.
Aqu dos procesos coadyuvan a la forma-
ci6n de una carga negativa en el lado de-
t
B
4-
H+ igual carga dan por resultado una carga
o
e- D. Transporte activo de cargas o iones:
D recho de la membrana.
316 SUELO, AGUA Y AIRE: LA NUTRICIdN DE LAS PLANTAS
aporte de energa puede ser totalmente extrao al proceso real del transporte, y
el grado de esa condicin extraa habr de determinar si el proceso se considera
activo o pasivo. Por ejemplo, aun para establecer un equilibrio de Donnan, una
concentracin qumica pasiva de iones en favor de un gradiente de potencial elec-
troqumico, requiere, en esencia, un gasto de energa metablica para establecer
y mantener el sistema, as como las cargas fijas que hagan posible la concentracin
de Donnan. Igualmente, los solutos pueden ser transportados activamente a tra-
vs de una membrana y, como consecuencia, el agua se difundir a travs de la
membrana por smosis. Sin embargo, el mecanismo por el que se desplaza el agua
es esencialmente pasivo, por debajo de un gradiente de potencial. En este caso,
el trmino activo puede, entonces, aplicarse a la transferencia de solutos pero
no a la transferencia de agua.
El fisilogo vegetal norteamericano J . Levitt ha establecido cuatro criterios
para caracterizar el transporte activo:
1.
2.
3.
4.
A
Que la tasa de transporte supere la que se prev para la permeabilidad y
el gradiente electroqumico.
Que el estado estable final del potencial electroqumico no est en equi-
librio en la regin de transporte.
Que exista una relacin cuantitativa entre el grado de transporte y el de
energa metablica invertida.
Que el mecanismo de transportacin dependa de la actividad celular.
menudo puede haber confusin porque los investigadores no examinan
crticamente el sistema para determinar si la acumulacin no resulta de algn pro-
ceso no activo como un equilibrio de tipo Donnan, o de la formacin de algn
derivado electroqumico inactivo (por ejemplo, precipitado, iones de una partcu-
la sin carga, un derivado qumico, etc.). Muchos de los as llamados procesos
activos pueden finalmente reconocerse como pasivos. Obviamente, es difcil o
imposible estudiar iones que formen derivados de componentes celulares, o se
absorban con facilidad a ellos, tales como fosfato o hierro. En consecuencia, el
estudio del transporte activo es bastante difcil.
I
J
U
.O
.- :/ L ? 50 .
S
I I I absorcin de K + por las races de cebada. (De da-
O .
Figura 124. El efecto de la temperatura sobre la
O 10 20 30 tos de D.R. Hoagland y T.C. Broyer: Plant Physi ol .
Temperatura, OC 11 :471-507. 1936.)
ABSORCIdN Y MOVIMIENTO DEL AGUA 317
APOYO EXPERIMENTAL PARA EL TRANSPORTE ACTIVO. Una de las tcnicas re-
cientes ms importantes que ha permitido a los fisi6logos atacar estos problemas
consiste en el uso de istopos de iones no naturales como el bario y el rubidio.
Los istopos son rastreados fcilmente, son susceptibles de ser medidos en peque-
as cantidades y las condiciones se simplifican por la presencia de grandes dep-
sitos celulares de los iones en cuestin. La situaci6n puede complicarse porque
muchos de los sistemas de transporte son bastante especficos en cuanto a iones
pero usualmente son capaces de transportar iones estrechamente relacionados.
As, un sistema transportador de potasio puede transportar rubidio, y el rubidio
radioactivo ha sido muy utilizado para estudiar el sistema transportador de potasio.
Los primeros experimentos sobre transporte activo incluyeron estudios
sobre los efectos de varios factores de importancia en el metabolismo. Inicialmente
se descubri que la acumulacin de potasio estaba fuertemente afectada por la
temperatura (Figura 12-4) y el oxgeno (Figura 12-Ei), factores ambos que inciden
en el metabolismo. La adicin del azcar, substrato respiratorio, tambin estimula
la incorporacin inica por las races (Figura 12-6). Finalmente, la absorcin
inica es proporcional a la tasa misma de respiracin, tal y como se mide mediante
la absorcin de O2 y la evolucin del CO, (Figura 12-7). Todos estos datos y los
resultados de muchos experimentos similares sugieren claramente que en el trans-
porte de los iones en cuestin interviene la energa metablica liberada en el pro-
ceso de respiracin.
absorcin de K + por races de cebada. (De 50L 25 o -
Figura 12-5. El efecto del oxgeno sobre la
datos de D.R. Hoagland y T.C. Broyer: O 25 50 75 100
Plant Physiol., 11 :471-509. 1936.)
'10 oxi geno
.c
.
N 1 0 0
8
m
-
u
2 U - 3 1-
Figura 12.6. El efecto de los niveles de he-
25
xosa en los tejidos sobre la absorci6n de CI-
2
por raices de cebada. (De datos de M.G.
I I I
Pitman, J. Mowat y H. Nair: Aust. J. BioL
0.5 1 .o 1.5
SCi., 24:619-31. 1971.)
Concentracin de azcar, mg/g
318 SUELO, AGUA Y AIRE: LA NUTRICI6N DE LAS PLANTAS
Ea adicin de sales o iones a las races y otros tejidos usualmente determina
un claro incremento de la respiracin. El incremento por encima del nivel funda-
mental de respiracin se conoce como respiracin de sales. La inferencia consiste
en que la respiracin de sales representa la acentuacin metablica necesaria para
generar energa para el transporte activo de iones. Desafortunadamente la relacin
no siempre es linear y la respiracin de sales contina aun despus de que las sales
son removidas. En consecuencia, la respiracin de sales no ofrece muchos indicios
tiles en relacin al acoplamiento de la respiracin y el transporte inico.
DEMOSTRACIdN Y PRUEBA DEL TRANSPORTE ACTIVO. Si bien 10s datos presenta-
dos son muy sugestivos, se necesita una evidencia cuantitativa ms rigurosa de la
existencia del transporte activo y una manera de determinar inequvocamente si
est teniendo lugar en una situacin dada. Anteriormente se present la ecuacin
de Nernst, que relaciona la diferencia electro-potencial de una membrana con la
actividad qumica de la sustancia
Esto puede simplificarse incorporando valores numricos a las constantes y
suponiendo una temperatura de aproximadamente 20C.
58 conc. dentro
z conc. fuera
E(mv) = ~ . log
o mediante un reordenamiento
conc. dentro
conc. fuera 58
E( n1v )z
1 og
-
-
-
150'
v)
a,
O
-
5
m
: 100
-
._
m
U
P
E
- 50
-
u)
C
Figura 12-7. Relacin entre la respira-
cin de tejidos y la absorci6n de iones
NO3 - y CI- por las racesdel trigo. (De
datos de H. Lundegardh y H. Burstrom:
Biochem. Z., 277:223-49-49. 1935.) COZ respirado, mg
I
50 1 O0 150 200
ABSORCI6N Y MOVIMIENTO DEL AGUA 319
La constante numrica 58 ascendera a 59 con una temperatura de 25C.
z representa la carga de Valencia de la partcula en cuestin, negativa para un
anin y positiva para un catin. El valor de z para. el sodio o el potasio sera 1;
para el calcio o el bario, 2; para el cloro, -1 ; y para e l sulfato, -2.
A condicin de que se establezca un genuino equilibrio, y que los iones
puedan movilizarse a ambos lados de una membrana, esta expresin puede utili-
zarse para determinar con toda claridad si ha tenido lugar una acumulacin activa
o la expulsin de un ion. Primero, se debe establecer que los iones en cuestin
estn realmente libres de movimiento hacia cualquier direccin de la membrana;
los istopos radioactivos han probado ser muy tiles para hacer esto. Luego es
necesario medir la diferencia de carga de la membrana, usando un voltmetro sen-
sible y rnicroelectrodos, lo que de ninguna manera constituye un procedimiento
fcil. Finalmente, se debe medir la concentracin de los iones dentro y fuera de
la clula lo cual requiere una micro