PRACTICA 3.

Evaluacin de los efectos del agua del lago de

Xochimilco en el desarrollo embrionario del Danio rerio.

Autores: Barrientos Palacios Ana Miriam, Prez Ortigoza Laura Berenice, Pia Maqueda
Anai Fernanda y Valentn Hernndez Ana Dalia.

Instituciones y laboratorios: Laboratorio de Ecofisiologa, Laboratorio de Recursos
Naturales y Laboratorio de Gentica. Departamento de Ecologa y Recursos Naturales.
Facultad de Ciencias, Universidad Nacional Autnoma de Mxico.
Av. Universidad 3000 Circuito Exterior S/N, C.P. 04510 Ciudad Universitaria.


INTRODUCCIN.
El lago de Xochimilco es uno de los cinco lagos que forman el valle de Mxico, en el
corazn del pas. Los lagos fueron el hogar de algunas culturas mesoamericanas, incluso
los aztecas, Teotihuacanes y Toltecas. En la actualidad ha quedado reducido a unos
pocos canales para disfrute turstico.La zona lacustre de Xochimilco (Figura 1) est
ubicada al sureste de la ciudad de Mxico.
En un estudio realizado en el 2005 en el lago de Xochimilco, la regin fue dividida en 4
estaciones; Apatlaco, Asuncin, Texhuilo, y Cuemanco (Figura 2).

Figura 1. Figura 2.


Entre los parmetros de carcter fsico se encuentran las caractersticas organolpticas,
turbidez y materias en suspensin, temperatura y conductividad. Por otro lado tenemos a
los parmetros de carcter qumico, entre ellos se encuentran salinidad y dureza, pH:
acidez y alcalinidad, oxgeno disuelto, medidores de materia orgnica: DBO y DQO; y
medidores de materia inorgnica: cationes, aniones y metales.


Parmetro Mxima Mnima Observaciones
Transparencia 0.35 m (Octubre) 0.10 m (Abril) Las aguas tratadas
inadecuadas son ricas
en nutrientes y
favorecen la
proliferacin de algas
que impiden el paso
de la luz en esta zona.
Temperatura Promedio
28C

Conductividad 91 mhos cm-1
(Septiembre)
62 mhos cm-1
(Junio)

Tabla 1. Parmetros fsicos de la estacin de Cuemanco.

Parmetro Mxima Mnima Observaciones
Alcalinidad 280 mg L-1 de
CaCO3
(Septiembre)
98 mg L-1 de
CaCO3
(Mayo)
Esta propiedad se ve afectada por la
cantidad y la clase de compuestos
presentes que modifican el pH. El aumento
de la alcalinidad da como consecuencia un
aumento de la disponibilidad del fosforo y
otros nutrimentos.
pH 9.92 unidades 8.59 unidades Esto demuestra una mayor concentracin
de bicarbonatos y una disminucin de CO2.
Oxigeno
disuelto
17 mg O2 L-1
(superficial)
13.2 mg de
O2 L-1
(Fondo)
Se registro el mayor concentracin de
oxigeno debido a las descargas de aguas
tratadas, ricas en nutrimentos, usados por
las algas para su desarrollo liberando
oxigeno al sistema, esto depende de las
condiciones ambientales.
Demanda
Bioqumica
de Oxigeno
75 mg O2 L-1
Demanda
Qumica de
Oxigeno
262.501 mg
O2 L-1

Nitratos 0.00318 mg
NO3 L-1
(Superficie)
0.026 mg NO3
L-1 (Fondo)
Crecimiento de algas y plantas acuticas.
Amonio Promedio
0.312 mg NH4
L-1
Degradacin de la materia orgnica.
Incremento por aporte importante de
fertilizantes y abonos organicos a un cuerpo
de agua.
Tabla 2: Parmetros qumicos de la estacin Cuemanco.


Los pesticidas son substancias que pueden matar directamente a organismos no
deseados p bien controlarlos, por ejemplo, interfiriendo con el proceso reproductivo.
Todos los pesticidas qumicos presentan la propiedad comn de bloquear procesos
metablicos vitales de los organismos. Tal plaga puede ser cualquier organismo vivo que
provoque dao o prdidas econmicas o que transmita o produzca alguna enfermedad.

Las plagas pueden ser animales (como insectos o ratones), plantas no deseadas (malas
hierbas, malezas) o micro-organismos (como enfermedades y virus de las plantas).

En las dcadas de los 40 y 50, las industrias qumicas de Amrica del Norte y de Europa
occidental produjeron grandes cantidades de muchos pesticidas, en especial insecticidas.
Los ingredientes activos en la mayora de estos pesticidas eran compuestos
organoclorados, muchos de los cuales presentan propiedades notables:

- Estabilidad a la descomposicin o degradacin en el medio ambiente.
- Bajas soluciones en agua, excepto que estn presentes tomos de oxigeno o
nitrgeno en las molculas.
- Alta solubilidad en medios hidrocarbonados, como la materia grasa de los
organismos vivos.
- Relativamente alta toxicidad a los insectos, pero baja para los seres humanos.


Pesticida Cantidad
-endosulfan Detectado
endosulfan sulfato 0,045g/L
BHC (lindano) Detectado
Tabla 3. Pesticidas organoclorados detectados en la estacin Cuemanco.

La zona de Cuemanco es una zona de chinampas y posee una concentracin de metales
pesados en los que se encuentran los siguientes porcentajes.


Metal Cantidad
Arsnico (As) 20.7 ppm
Cobalto (Co) 3.2 pmm
Cobre (Cu) 27 ppm
Cromo (Cr) 14.8 pmm
Hierro (Fe) 11056 ppm
Mercurio (Hg) 90.3 ppm
Nquel (Ni) 10.1 pmm
Plomo (Pb) 54 ppm
Tabla 4. Metales pesados encontrados en Cuemanco.


El pez cebra Danio rerio es una especie de importanciaeconmica en el rea de la
acuicultura ornamental, la cual desde el punto de vistaproductivo requiere de mayor
informacin con carcter cientfico en aspectos como lanutricin, la reproduccin y el
crecimiento en condiciones controladas.

Su uso en investigacin bsica se increment de manera sustancial hace un decenio,
cuando se demostr que poda ser utilizado en gran escala para identificar nuevos genes
por medio de cribados mutacionales. En los cribados mutacionales se inducen errores en
la informacin contenida en los genes, alterando de esta manera la funcin de las
protenas que generan. Los embriones del pez cebra son transparentes.

Esta caracterstica facilita la identificacin del rgano afectado por la mutacin. Mediante
ese mtodo se han encontrado en los ltimos identifican por las malformaciones en la
estructura o alteraciones en el proceso de inters que esos errores causan.

Otras caractersticas explican el xito del pez cebra como modelo biolgico para estudiar
el desarrollo temprano en vertebrados. Por ejemplo, tiene un tiempo aproximado de
generacin de tres meses y los adultos se mantienen frtiles durante ms de doce. Esto
significa que se puede tener un suministro constante de embriones a un costo
relativamente bajo, comparado con otros vertebrados.

El ciclo de vida de un Danio rerio comienza cuando la hembra deposita los huevos en el
agua, donde los fecunda el macho. Las etapas del desarrollo embrionario se suceden
rpidamente; se dan en horas pasada la fecundacin (hpf) o das pasada la fecundacin
(dpf).

Las hembras depositan ms de 200 embriones por semana; los protege una membrana,
el corion (Figura 3 panel medio derecho). Pasados tres das, los embriones eclosionan.
Se los puede mantener en el laboratorio en cajas de cultivo gracias a su reducido tamao
(Figura 3 panel inferior derecho). A partir de los tres meses de vida pueden reproducirse
de manera continua. Un adulto en edad de reproduccin mide aproximadamente 4
centmetros. A diferencia del ser humano, el pez cebra contina creciendo hasta la
muerte.

Como varias larvas pueden vivir en un volumen de lquido del tamao de una gota de
agua, slo se necesitan cantidades mnimas de los compuestos por ensayo. Una ventaja
nica para identificar in vivo compuestos dotados de actividad biolgica en fases
tempranas del desarrollo.

En anlisis de contaminacin ambiental se utiliza Evaluacin de la calidad del agua,
Compuestos orgnicos, Metilmercurio y Cadmio.




Figura 3 Ciclo de vida de Daniorerio



OBJETIVOS:
- Evaluar el efecto de agua de los canales de Xochimilco sobre el desarrollo de
estadios tempranos del pez cebra Brachydanio rerio.
- Analizar los efectos de agua de los canales de Xochimilco en la eficiencia de
eclosin del pez cebra.

METODOLOGIA:
Este experimento consto de dos fases:
1. Montaje: se obtuvieron los embriones del acuario de la facultad de Ciencias y se
mantuvieron en una solucin denominada Hank que es un medio de cultivo
adecuado para su desarrollo, adems que estuvieron bajo las siguientes
condiciones fsico-qumicas: temperatura de 25C, pH de 7.5, oxigeno disuelto a
saturacin 5.0 mg L
-1
, fotoperiodo de 12 hrs luz: 12 hrs oscuridad (OCDE,1998).

Se verifico el estado de desarrollo de los embriones y se montaron 10 embriones
por tratamiento, esto bajo diferentes porcentajes de presencia de agua de
Xochimilco primero sin filtrar (hablamos de 0%, 25%, 50% y 100%) estos con su
respectiva replica.

Finalmente se filtr el agua, con sus respectivas replicas por lo que se utilizaron en
total 160 organismos.

2. Monitoreo: Inicialmente se realizo el primer monitoreo a los cuatro das de haber
montado y el ultimo a los cinco das, en el cual observamos los organismos
muertos, si ya haban eclosionado, si su morfologa era regular, asi como el
comportamiento (en el caso de la irrigacin).

RESULTADOS:
Los resultados del presente bioensayo muestran que hubo una mayor mortandad de
embriones en los tratamientos sin filtrar, como puede verse en la tabla 5, el testigo sin
filtrar tiene una supervivencia del 60% en el quinto da a diferencia del testigo filtrado que
es del 90%, sin embargo se observo tambin diferencias significativas en el tratamiento
del 100% de agua de los canales de Xochimilco entre las muestras sin filtrar y filtradas
dado que la primera mostro una supervivencia del 20% al quinto da mientras que en la
filtrada obtuvo un 100% de mortandad.
Se observo una mayor diferencia entre las replicas de los tratamientos testigos al igual
que los que se encontraban con el 100% del agua de Xochimilco, mientras que en los
dems tratamientos los resultados fueron menos discrepantes entre ellos (Grfica 1).







La eficiencia de eclosin se pudo observar de mejor forma en el quinto da como puede
verse en la imagen 2 en la cual se observa que en las muestras filtradas hay una mayor
eficiencia de eclosin con un promedio del 50% de eclosin en el quinto da, solamente la
muestra filtrada al 100% presenta un 0% de eclosin en el quinto da (tabla 6).









En ambos tratamientos se observo que la irrigacin fue lenta, por tanto no se encontraron
diferencias significativas entre ambos, sin embargo solo en los tratamientos donde la
muestra se encontraba al 50% filtrada hubo malformaciones en la cola (tabla 7).











DISCUSIN.

Los resultados entre tratamientos fueron los esperados, es decir, se esperaba una mayor
mortandad en los tratamientos sin filtrar ya que se propone que en ellos hubiera un mayor
contenido de contaminantes adems de que quizs presentara una mayor materia
orgnica por la misma razn.

Se esperaba que no hubieran diferencias significativas entre las replicas de un mismo
tratamiento sin embargo en algunos casos no fue as.

Las diferencias entre las replicas se cree que fueron errores quizs del observador, no se
le puede atribuir esta situacin a las condiciones dado que eran las mismas.

La sobrevivencia fue disminuyendo conforme paso el tiempo, lo cual posiblemente se
debe a un mayor tiempo de exposicin, ya que fue en este da donde se observaron
malformaciones en la cola y movimientos ms lentos, adems mostraron una irrigacin
lenta.

La eficiencia de eclosin fue mayor en las muestras filtradas y con una menor
concentracin de agua de Xochimilco lo que indicara que los peces crecen mejor en
aguas no tan contaminadas, en otras palabras se podramos suponer que son especies
sensibles, esto sin mencionar que el pez cebra no es autctono del lago de Xochimilco,
solo se presento una eclosin del 70% en el agua sin filtrar pero este porcentaje se
alcanzo hasta el quinto da indicando que el desarrollo es ms lento, esto es, que tardo
ms tiempo en eclosionar.


CONCLUSION.

Se observ que existe una mayor afectacin entre mayor sea la concentracin del agua
de Xochimilco. Es necesario realizar estudios ms detallados sobre los compuestos que
se encontraban presentes as como sus concentraciones, para determinar cul de ellos
es el que causa de la baja eclosin, una baja irrigacin en los sobrevivientes y la
elevada tasa de mortalidad, ya que en los tratamientos filtrados estas afectaciones
disminuan.

Tambin es necesario que se lleve a cabo un estudio donde se pueda observar
durante ms tiempo como y cuantos organismos desarrollan a una fase adulta, adems
de que se analic si las afectaciones son a largo plazo o dependen del tiempo de
exposicin es decir si al revertir las condiciones adversas el organismo se recupera.



BIBLIOGRAFIA.

Evaluacin in situ del efecto biolgico de metales pesados en el ajolote
Ambystomamexicanum, Gonzlez Rendn, Elena Sherezada, 2006, Facultad de ciencias,
UNAM.

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