Extraccin de tetraciclina del caldo de fermentacin mediante dos acuosa-phasesystems
compuesto de polietilenglicol y sales basado en cholinium b s t r a c tAiming al desarrollo de la extraccin no slo ms barata, pero tambin biocompatible y sostenible y purificationprocesses para los antibiticos, en este trabajo fue evaluar la capacidad de systems(ATPS) dos fases acuosa compuesto de polietilenglicol (PEG) y sales cholinium-base de tetraciclina, extraen el caldo de fermentacin de Streptomyces aureofaciens. Polmero convencional/sal y sal sal ATPS erantambin estudiaron para propsitos de comparacin. Los novedosos sistemas aqu propuestos son capaces de extraer tetracyclinedirectly del caldo de fermentacin con eficiencias de extraccin superiores al 80%. Un extractionability a la medida de estos sistemas puede lograrse tambin, con extracciones preferenciales o para las fases de polmero-orsalt-rico, y que ms dependen de la sal cholinium base empleada. El resultssupport se reunieron la aplicabilidad de los ATPS biocompatible en la extraccin de los antibiticos del complejo matricesand puede contemplarse como plataformas valiosas para ser aplicado a nivel industrial por pharmaceuticalcompanies. Los antibiticos son compuestos qumicos que pueden ser totalmente o partlysynthesized por viven microorganismos que tampoco inhiben la piensas incluso matar a otros microorganismos. Por lo tanto, son currentlyused en todo el mundo para un control eficaz de los niveles de pathogenicbacteria en humanos y animales. A nivel global, el antibioticmarket lleg a US$ 42 billones (34 billionD) en 2009 *1+. Sin embargo, en los ltimos aos, un nmero de patentes sobrela sntesis y aplicaciones de antibiticos y otro medicamentos haveexpired y se caen en el dominio pblico [2]. El pharmaceuticalindustry se enfrenta al crecimiento de los medicamentos genricos y hay necesidad de acrucial reducir al mnimo los costos operativos mediante la optimizacin de la antibiotics'production y sus pasos de purificacin. Los antibiticos de costo de produccin se deriva, en gran medida, de los procesos de purificacin de extraccin andassociated. En este contexto, es imperativeto encontrar y evaluar nuevo extractivo/purificacin tcnicas conduzca ser escalado-para arriba por las empresas biofarmacuticas.Hay varias clases de antibiticos como - lactmicos, aminoglucsidos, macrlidos y tetraciclinas (TCs). Tetracyclinesare los antimicrobianos bacteriostticos producidos por Streptomyces aureofaciens o Streptomyces rimosus. Son un amplio-spectrumantibiotic puesto que pueden ser utilizados contra Gram positivos y negativebacteria, coccidios, Trichomonas, micoplasma, Chlamydia andRickettsia. Las tetraciclinas inhiben la sntesis de proteinsby bacteriana que ataba a la pequea unidad (30 S) del ribosoma bacteriano mientras preventingthe acceso del aminoacil ARNt al sitio aceptor en el complejo themRNA-ribosoma [3-6]. Adems de sus propiedades antibiticas, las tetraciclinas tambin poseen anti-inflamatorio, anti-apoptoticand anti- neurodegenerativas propiedades [6]. Debido a que todos sus benefitstetracyclines actualmente se aaden al animal feed en orden a preventdiseases, as como un aditivo para alimentacin para acelerar el crecimiento [7].Tcnicas cromatogrficas (particularmente cromatografa de intercambio inico), extraccin lquido lquido o slido lquido es generallyused para la extraccin y purificacin de antibioticsfrom comn del caldo de fermentacin [8-10]. Entre estas tcnicas, la ms usada es la extraccin lquido lquido que tiene beencarried utilizando solventes orgnicos, es decir el acetato de etilo, acetonitrileand metanlico cido tricloroactico (TCA) [11]. La extraccin lquido lquido de este tipo es una tcnica til que implica lowcosts y conduce a un nivel de alta pureza. Sin embargo, estos organicscompounds presenta algunos inconvenientes, ya que son peligrosos para la salud humana [8] volatileand. Teniendo en cuenta la biocompatibilidad de sustainabilityand de los procesos de extraccin, los useof sistemas bifsicos acuosos (ATPS) pueden representar un viableoption. ATPS son considerados un bajo costo, ms apacible y biocompatiblealternative a otras tcnicas de extraccin ya que son mainlycomposed de agua [12-14]. En la ltima dcada, novela ATPS composedof lquidos inicos (ILs) agua orgnico/inorgnico Sales, aminocidos, polmeros o hidratos de carbono tambin han sido propuestos en la literatura [15]. Las principales ventajas del polmero sal o polmero ILATPS, en comparacin con sistemas de polmero, polmero, rel de theirlower viscosidades y posibilidad de cambiar la polaridad de las fases thecoexisting. Por otra parte, generalmente exhiben un phaseseparation rpido y eficiencias de alta extraccin, que pueden ser easilymanipulated por una adecuada seleccin de los iones que componen una determinada sal ILor [15]. De hecho, basado en IL ATPS han utilizado con xito en la separacin, concentracin y purificacin de protenas, antioxidantes, los iones del metales, alcaloides y antibiticos [15].La mayora ILs hidroflico exhiben propiedades nicas que cumples solventes respetuosos como insignificante vaporpressures, no-inflamabilidad y altas trmicas y qumicas estabilidades [16]. Sus ofertas de diversidad qumica nica considerables desarrollar solventes para fines especficos con medida characteristicsby la combinacin de iones apropiados. Debido a sus propiedades attractivephysicochemical, ILs adems han sido aplicada forbio-purificacin y procesos de bio-extraccin [15,17], enzymaticcatalysis [18], bioprocesos y operaciones [19] y el [20] la produccin de biocombustibles. Sin embargo, la mayora ILs son pobremente biodegradables y de biocompatibilidad baja.En este contexto, lquidos inicos y sales basadas en thecholinium ion puede ser una alternativa valiosa; Sin embargo, poco estudiada.Cloruro de Cholinium es un nutriente esencial, como considerada por theInstitute de medicina en 1998, debido a su papel en el cuerpo humano (utilizado para la sntesis del neurotransmisor, sealizacin de membrana celular, etc.). [21]. es de fcil preparacin, relativamente barata, estable en agua y aire, biocompatible y biodegradable. El cholinium-basedsalts, o lquidos inicos (ILs) cuando su punto de fusin es inferior a 100 C, estn constituidos por el 2-hidroxietil-N, N, N- trimethylammoniumcation combinado con los aniones tan diversos como cloruro, bicarbonato, acetato, levulinato, malato, glicolato, entre otros. Por lo tanto, basado en thecholinium sales/ILs son una opcin factible para ser utilizado en theformation de ATPS. Hemos demostrado recientemente los sistemas de dos fases acuosa y de crear posibilidad de tipo polmero sal orsalt sal por la combinacin de PEG y cholinium-basedsalts o por la adicin de una sal inorgnica a ILs ligeramente basada en hydrophobiccholinium [22,23]. Con el objetivo de explorar la applicabilityof esas novela ATPS, este trabajo se centra en el oftetracycline de extraccin directamente en el caldo de fermentacin de S. aureofaciens.Sistemas compuestos de polietilenglicol 600 y choliniumbasedsalts fueron investigados por medio de las eficiencias de extraccin coefficientsand particin obtenidas de tetraciclina. A furtherascertain en la capacidad mejorada de estos novedosos sistemas de extracttetracycline, adems se realizaron experimentos con conventionalpolymer/sal y sal sal ATPS para propsitos de comparacin. Polietilenglicol (PEG) con un peso molecular promedio de 600 g mol1 (abreviado como PEG 600) y tetraciclina (TC), el 98 wt % puro, fueron suppliedby Fluka. Las sales cholinium base fueron adquiridas en Sigma-Aldrich: choliniumchloride, [Ch] Cl, bicarbonato cholinium, Bic [Ch] y cholinium dihydrogencitrate, DHcit *Ch+, con purezas of98 wt %, 80% en peso (en solucin acuosa) y 99% en peso, respectivamente. El acetato de cholinium, CA [Ch] y cholinium dihydrogenphosphate, DHph [Ch], se adquirieron en Iolitec con los niveles de pureza del 98% wt and98 wt %, respectivamente. Estas dos ltimas basadas en cholinium sales caen dentro de la categora de ILssince presentan temperaturas de fusin por debajo de 100 C. Sin embargo, para evitar anyambiguity, todos estos materiales sern thereinafter referidos como sales basado en cholinium.Las estructuras qumicas de las sales de cholinium base investigadas presentan inTable 1. Espectros de RMN de 1H y 13C fueron realizados para evaluar la pureza de eachsample. Todas las muestras son de alta pureza y los proveedores de acuerdo con la indicatedby de los niveles de pureza. Las sales inorgnicas K3PO4 (98 wt %) y Na2SO4 (> 99,0% de peso) eran