NUMERACION DE MICROOGANISMOS AEROBIOS MESOFILOS VIABLES

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NUMERACIN DE MICROORGANISMOS AEROBIOS MESOFILOS
VIABLES

a) OBJETIVOS:

Realizar un recuento de bacterias mesfilas viables en los alimentos como un
indicador microbiano.
Analizar cada una de las colonias, que se van a obtener.

b) FUNDAMENTO TEORICO:
El anlisis de los alimentos y para determinar la existencia, tipo y nmero de
microorganismos es bsico para la microbiologa de alimentos. Sin embargo ninguno
de los mtodos utilizados habitualmente permite determinar el nmero exacto de
microorganismos que existe en un determinado alimento.

Son cuatro los mtodos bsicos utilizados para investigar el nmero
total de microorganismos:

1.- Recuento en placa (SPC) para la determinacin del nmero de clulas viables
2.- Mtodo del nmero ms probable (MPN) de grmenes como clculo estadstico
del nmero de clulas viables.
3.-Tcnicas de reduccin de colorantes para el clculo del nmero de clulas viables
con capacidad reductora.
4.- Recuento microscpico directo (DMC) tanto para clulas viables como para las no
viables.

El recuento en placa es el mtodo ms utilizado para la determinacin del nmero de
clulas viables o unidades formadoras de colonias (u.f.c.) en un alimento.

Recuento de aerobios mesfilos:
En este grupo se incluyen todas las bacterias, mohos y levaduras capaces de
desarrollarse a 30 C en las condiciones establecidas.
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En este recuento se estima la microflora total sin especificar tipos de
microorganismos.
Refleja la calidad sanitaria de un alimento, las condiciones de manipulacin, las
condiciones higinicas de la materia prima.
Un recuento bajo de aerobios mesfilos no implica o no asegura la ausencia de
patgenos o sus toxinas, de la misma manera un recuento elevado no significa
presencia de flora patgena. Ahora bien, salvo en alimentos obtenidos por
fermentacin, no son recomendables recuentos elevados.
Un recuento elevado puede significar:

- Excesiva contaminacin de la materia prima.
- Deficiente manipulacin durante el proceso de elaboracin.
- La posibilidad de que existan patgenos, pues estos son mesfilos.
- La inmediata alteracin del producto.
El recuento de mesfilos nos indica las condiciones de salubridad de algunos
alimentos.
Mtodos normalizados:

ISO 4833:

Directiva general para el recuento de microorganismos. Mtodo por recuento de
colonias a 30 C.

AF V 08-051:

Mtodo de rutina para el recuento de microorganismos. Mtodo de recuento de las
colonias a 30 C.







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c) EQUIPOS Y MATERIALES:
Placas Petri.
Pipetas bacteriolgicas de 1 y 10 ml.
Bao de agua regulado a 44-46 C para mantener el agar licuado
Incubadora regulada a 29-31C
Contador de colonias
Agar plate count.
Muestras de un alimento.

d) PROCEDIMIENTO:

1. Preparar la muestra para hacer las diluciones necesarias.









2. Pipetear por duplicado a placas de Petri estriles alcuotas de 1 ml a partir de
dilucin 10, 10,10,10,10,10. Se sugieren esta serie de diluciones cuando
no se conoce el rango aproximado del nmero de bacterias.


Muestra de
sndwich de pollo.
Triturar con el mortero,
el pollo del sndwich,
hasta obtener una
mezcla homognea,
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3) Agregar rpidamente a las placas de Petri 15 ml de agar licuado y temperado.
Entre la preparacin de la dilucin y la adicin del agar no debe transcurrir ms de 10
minutos.





4) mezclar inmediatamente las alcuotas con el agar mediante movimientos de
vaivn y rotacin de las placas Petri. Una secuencia satisfactoria de pasos es la
siguiente:
a) mover la placa de arriba abajo 5 veces en una direccin
b) rotar 5 veces la placa en el sentido de las agujas de reloj
c) mover la placa 5 veces en la direccin que haga ngulo recto al usado en el
primer tiempo
d) rotar veces la placa en sentido inverso al de las agujas de reloj
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Computo del recuentro estndar en placa:

Seleccionar 2 placas correspondientes a una dilucin que contenga entre 30
y 300 colonias utilizando un contador de colonias.

Si las placas de 2 diluciones consecutivas presentan recuentos menores a
que 30 y mayores que 300, tomar el promedio de los 2 recuentos.

Si el nmero de colonias de las placas de 2 diluciones consecutivas estn
dentro del rango de 30 300, computar el recuento para cada una de las
diluciones y establecer la relacin de los 2 recuentos. Si el cociente es menor
que 2, reportar el promedio de los 2 valores, pero, si el recuento mayor
contiene 2 veces o ms a menor, en este caso se reportara el recuento del
menor.

Multiplicar por el factor de dilucin reciproco de la dilucin utilizada.
Reportar el resultado como numero de microorganismos aerobios mesfilos
por gramo o mililitro segn el caso.

Computo del estimado del recuentro estndar en placa:

Si las placas de todas las diluciones muestran ms de 300 colonias, dividir
cada duplicado de placas de la dilucin ms alta en secciones darles
convenientes (2,4,8) y contar todas las colonias en una o ms secciones
.Multiplicar el total en cada caso por el factor apropiado para obtener el
numero de colonias de colonias por toda la placa .promediar los estimados
Rotar 5 veces la placa en
sentido inverso al de las
agujas del reloj.
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de las 2 placas duplicadas y multiplicar por la dilucin correspondiente
reportar el resultado como un estimado del numero.
Si no hubiese colonias en placas de la mayor concentracin, reportar el
estimado como menor que la inversa de la dilucin.

e) RESULTADOS:










En ambas placas se observa mayor cantidad de colonias.
As mismo se cuenta la mayor cantidad.

RESULTADOS FINALES:
Placa 10
-5
= 570000 = 57 x 10
-5
ufc/gr

Placa 10
-6
= 200000= 2x 10
-
ufc/gr





Placa

Placa

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f) CONCLUSIONES:

La prevencin para que los microorganismos infesten los alimentos, es la
refrigeracin.
Con este mtodo, podemos controlar los microorganismos en nuestros
alimentos.

g) REFERENCIA BIBLIOGRFICA:

http://es.scribd.com/doc/27308101/ANALISIS-DE-MICROORGANISMOS-
AEROBIOS-MESOFILOS
http://espanol.answers.yahoo.com/question/index?qid=20090307050252
AA4EvLa
















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UNIVERSIDAD NACIONAL JORGE BASADRE GROHMANN

FACULTAD CIENCIAS AGROPECUARIAS

ESCUELA ACADEMICO PROFESIONAL EN INDUSTRIAS ALIMENTARIAS





NOMBRE: DORIS LANCHIPA COHAILA

CODIGO: 2010-35182

TEMA: NUMERACION DE MICROORGANISMOS AEROBIOS MESOFILOS

VIABLES

PROFESORA: ING. AMELIA CASTRO

CURSO: LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA

ESPECIALIDAD: INDUSTRIAS ALIMETARIAS





TACNA-PERU
2013