MICOLOGA: LOS HONGOS

1. OBJETIVOS
- Conocerla metodologa para diagnosticar micosis en el laboratorio.
- Reconocerlas principales caractersticas macro, microscpicas de los hongos.
- Identificar las diferentes especies de inters mdico-estomatolgico.

2. INTRODUCCIN

Los hongos son organismos eucariontes, sus paredes celulares estn compuestas
por carbohidratos complejos tales como la quitina, glucano, manano, celulosa, etc.
Son hetertrofos, no realizan fotosntesis por carecer de clorofila.
Aproximadamente existen 50,000 especies de hongos, de ellos 300 ms o menos
son patgenos, otros son no patgenos y un gran grupo son utilizados en diversas
industrias (cervecera, panifacin, vitivincola, farmacutica, etc.). Desde el punto
de vista celular los hongos pueden ser de dos clases: Unicelulares o
levaduriformes y miceliales o pluricelulares.

3. MATERIALES PARA LA PRCTICA:

- Placa petri con Agar Sabouraud y otro con Agar Sangre
- Hidrxido de potasio al 10 20% - Azul de Lactofenol
- Lminas montadas de hongos unicelulares, pluricelulares.
- Lminas cultivadas (microcultivos) - Cultivos de hongos
- Microscopio binocular.
4. PROCEDIMIENTO:

Muestras biolgicas de micosis superficiales: Piel, cabellos o uas.
En micosis sistmicas que afecten rganos internos como pulmones, intestinos,
ganglios linfticos, cavidad bucal, etc., la muestra ser SANGRE, esputo, biopsias,
etc.

Coloracin y Microscopa:
Las muestras de micosis superficiales deben ser desqueratinizadas con hidrxido de
potasio al 10 al 20%, luego se colorean con Azul de Lactofenol; dependiendo del tipo de
hongos que se busca..


Siembra Micolgica:
Los medios de cultivo ms utilizados son:
- Agar Sabouraud
- Agar Sangre
- Infusin de cerebro y corazn (BHI)
- Agar Levadura
- Mycobiotic Agar

Los hongos unicelulares o levaduriformes se incuban a 37 C por 72 horas, mientas que
los pluricelulares o miceliales se incuban a la temperatura ambiental de 5 a 7 das.
Mtodos indirectos para diagnstico de micosis sistmicas o profundas.

A. Intradermo - reacciones:
- Histoplasmina
- Paracoccidiodomicotina
- Esporotriquina
- Candidina.

B. Reacciones Serolgicas:
- Aglutinacin
- Precipitacin
- Fijacin de complemento
- Inmunodifusin

C. Pruebas anatmo - patolgicas.








- Agar Mycophil
- Agar Mycosil
- Agar Sangre - Glucosa cisteina
- Agar Lctosado de Sabouraud
-Czapeck

DIAGNOSTICO DE ALGUNAS MICOSIS SISTMICAS
1. Candidiasis
Muestras: Incluyen frots y raspado de lesiones superficiales, sangre, lquido
cefalorraqudeo, biopsia de tejido, orina, exudados, material retirado del catter
intravenoso.
Microscopa: Buscando clulas en gemacin y seudohifas (lo que confirma la
presencia de Candida albicans).
Cultivo: En sabouraud se observan las colonias cremosas y pequeas. Se pueden
hacer algunas pruebas bioqumicas (fermentacin de carbohidratos).
Serologa: Estas pruebas tienen uso limitado, pudiendo usarse tambin
intradermo reacciones como candidina.

2. Histoplasmosis
Muestras para cultivo: Esputo, orina, raspado de lesiones superficiales, aspirado
de mdula sea.

Coloracin y Microscopa: Los cortes histolgicos se colorean con Giemsa, se
observan levaduras en forma de clulas ovoides dentro de las clulas del tejido
afectado.
Cultivo: En sabouraud (a 25 30C). Tambin puede emplearse Agar sangre
glucosa cisteina a 37C (la incubacin es de cuatro semanas como mnimo).
Serologa: Las pruebas se hacen positivas entre la segunda a quinta semana
despus de la infeccin.
Intradermo-reaccin:
Esta prueba cutnea con histoplasmina se hace positiva despus de la infeccin y
permanece positiva durante varios aos.

3. Paracoccidioidomicosis
Muestras Biolgicas: Esputo, exudado de las lesiones bucales, biopsia.
Microscopa: En la microscopa directa de estas muestras, aparecen las
levaduras.
Cultivo: Los cultivos en Agar Sabouraud o en Agar estracto de levadura, se
incuban a la temperatura ambiental, observndose formas miceliales, se confirman
su dimorfismo, cuando se cultiva a 37C observndose levaduriformes.
Serologa: La prueba ms rpida es Elisa.





HONGOS UNICELULARES







Paracoccidioides brasiliensis Candida Albicans





Componentes del Agar Sabouraud:
- ph 5.6.
- Neopeptona oTriptosa
- Lactoglucosa o Maltosa
- Agar
- Agua Destilada

Agar para hongos muy patgeno (muestras muy contaminadas)

- Ideal para dermatofitos
- Peptona de soya
- Glucosa
- Ciclo heximida
- Cloranfenicol
- Agar agar
Micosis Bucales
Candidiasis bucal: Es un estado inflamatorio, infeccioso; caracterizado por la presencia
marchas blancas con aspecto de leche coagulada localizadas en comisuras labiales,
lengua, enca, paladar, al ser removidos dejan una superficie sangrantes (agente causal:
candida albicans).

Histoplasmosis: Micosis infecciosa inflamatoria afecta piel y mucosas de la cavidad
bucal, lcera granulada rodeada de decoloracin purpurea (agente causal: histoplasma
capsulatum).

Paracoccidiomicosis: Pulmonar, mucosa nasal, mucosa bucal son afectados por el
hongo Paracoccidioides brosilicuis, las lesiones en lceras ropas con fondo amarillento
granular.