INSTITUTO SUPERIOR

DANIEL ALCIDES CARRIN

Cultivo De Secrecin Farngea Y Vaginal
Especialidad : Laboratorio clnico
Profesora : Cecilia Maihuay Castro
Curso : Bacteriologa
Seccin : 3ML21
Integrantes:
Arias Polanco, Jossy
Aguirre Huarauya, Kaily
Manuyama Quispe, Betsabe

Objetivos
Objetivo General:
Identificar las posibles especies patgenas de
microorganismos presentes (secrecin farngea y vaginal) a
travs del cultivo de secreciones y de sus reacciones
bioqumicas.
Objetivos Especficos:
Identificar los microorganismos patgenos Gram positivos
encontrados en las glndulas farngeas.
Reconocimiento de bacterias que podemos encontrar en las
secreciones genitales y la identificacin de los antibiticos
indicados.









Marco Terico
Agar Manitol Salado
Fundamento:
En el medio de cultivo, el extracto de carne, la peptona de carne y la
triptena, constituyen la fuente de carbono, nitrgeno, vitaminas y
minerales que promueven el desarrollo microbiano. El manitol es el
hidrato de carbono fermentable. El cloruro de sodio (que se encuentra en
alta concentracin) es el agente selectivo que inhibe el desarrollo de la
flora acompaante, el rojo fenol es el indicador de pH y el agar es el
agente solidificante.
Se trata de un medio altamente selectivo por la alta concentracin de sal y
fermentan el manitol, producen cidos, con los que se modifica el pH del
medio y vira el indicador de pH del color rojo al amarillo. Los
estafilococos crecen en altas concentraciones de sal, y pueden o no
fermentar el manitol.
Los estafilococos coagulasa positiva fermentan el manitol y se visualizan
como colonias amarillas rodeadas de una zona del mismo color. Los
estafilococos que no fermentan el manitol, se visualizan como colonias
rojas, rodeadas de una zona del mismo color o purpura.
Este medio de cultivo es recomendable a partir de muestras clnicas,
alimentos, productos farmacuticos, cosmticos y otros materiales de
importancia sanitaria.


Composicin:
Extracto de carne 1.0g
cloruro de sodio 75.0g
D(-) Manitol 10.0g
Peptona 10.0g
Agua destilada 1000.0ml
Rojo de fenol 0.025g
Agar agar 15.0g
Agar Mac Conkey
Fundamento:
Generalmente es usado para aislamiento selectivos de bacilos Gram-
negativos procedentes de fuentes clnicas y no clnicas, tambin para el
examen microbiolgico de embutidos, para siembra directa de muestra
de agua para contaje de coliforme y para aislamiento de bacterias
patgenas en queso y otros productos lcteos.
Las colonias fermentadoras de lactosa producen una cada localizada de
pH, lo cual seguido por la absorcin del rojo neutro, imparte un color rojo
a la colonia. Las sales biliares y el cristal violeta inhiben a las Gram
positivas. La lactosa y el indicador rojo neutro presentes, permiten
diferenciar a las bacterias fermentadoras de lactosa de los no
fermentadores de lactosa.
Composicin:
Peptona proteosa N 3 3g
peptona 17g
Lactosa 10g
Sales biliares 1.5g
Cristal violeta 0.001g
Rojo neutro 0.03g
Agar 13.5g
Cloruro de sodio 7.1g
Agar Chocolate
Fundamento:
Se trata de un agar modificado. Cuando se aade sangre o hemoglobina al
medio de base calentado, se vuelve marrn (de ah su nombre). Este
medio permite el crecimiento de la mayor parte de las bacterias, incluidas
algunas que no crecen en el agar sangre (es decir, Haemophilus, algunas
sepas de Neisseria patgenas).
Se utiliza para el aislamiento de grmenes que necesitan asimilar rpida y
fcilmente los factores x y v presentes en la sangre.
Composicin:
Igual que para el agar sangre, se utiliza como medio base al Agar Casoy,
agar TSA, Agar Nutritivo, etc.,
Agar Sangre
Fundamento:
Los laboratorios clnicos utilizan mucho este medio de cultivo agar
sangre. Los medios contienen dos componentes fundamentales: 1) un
medio basal 2) sangre. Se puede aadir varios suplementos ms para
ampliar el nmero de grmenes que se pueden cultivar en estos medios
de cultivos.
El agar sangre se prepara a partir de un medio base, al cual se aade
sangre, lo que puede aislar y cultivar microorganismos fastidiosos y
exigentes. El ph , ligeramente acido, del medio base favorece reacciones
hemolticas precisas (degradacin o hemolisis de hemates).
Como medio base puede utilizarse el Agar Nutritivo, Agar mueller Hinton,
etc. Especficamente se puede utilizar el Agar Base para Sangre.
Composicin:
Infusin corazn vacuno 500g
Triptosa 10g
Cloruro sdico 5g
Agar 15g
Agar Mueller Hinton
Este medio de cultivo ha sido recomendado universalmente para la
prueba de sensibilidad a los antimicrobianos. Adems es til con el
agregado de sangre para el cultivo y aislamiento de microorganismos
nutricionalmente exigentes.
Fundamento
se trata de un medio recomendado para estudios convencionales de
susceptibilidad bacteriana. Su composicin est bien definida e incluye
extracto de ternera y casena, sales, cationes divalentes y almidn soluble
necesario para que los resultados sean reproducibles.
Este medio carece de inhibidores e indicadores, lo que permite el
crecimiento de una gran cantidad de microorganismos tanto gram
positivos como gram-negativos. Crecen muy bien gonococos y
meningococos con colonias grandes y fcilmente reconocibles,
especialmente con el reactivo de oxidasa.
Este medio es de valor para comprobar la susceptibilidad de Neisseria
gonorrhoeae a las sulfamidas y trimetropin.
Composicin:
Infusin de carne 300g
cidos de casamino 17.5g
Almidn 1.5g
Agar 17g


Prueba de catalasa:
La catalasa es una enzima que descompone al perxido de hidrgeno en
oxgeno y agua, esta enzima es similar a la estructura de la hemoglobina.
Excluyendo al gnero Streptococcus y algunos otros la mayora de las
bacterias aerobias y anaerobias facultativas tienen catalasa.
La base de esta prueba es demostrar la presencia de la enzima catalasa,
colocando 2 o 3 gotas al cultivo.
El resultado es positivo si en la colonia hay efervescencia. Ejemplos:
Catalasa (+): Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Pseudomonas sp.
Catalasa (-): Streptococcus spp.
Prueba De La Coagulasa:
La coagulasa es una protena producida por varios microorganismos que
permite la conversin del fibringeno enfibrina. En el laboratorio, se usa
para distinguir entre diferentes tipos de Staphylococcus. Un resultado de
coagulasa positivo indica que la muestra contiene S. aureus.Esta protena
tambin es producida por Yersinia pestis.[1]La coagulasa reacciona con la
protrombina en la sangre. El complejo resultante se llama
estafilotrombina, y permite que la enzima proteasa convierta el
fibringeno en fibrina. Esto hace que se coagule la sangre. La coagulasa
est estrechamente relacionada con la superficie de la bacteria S. aureus y
puede revestir su superficie con fibrina al entrar en contacto con la
sangre. Se cree que est cubierta de fibrina del Staphylococcus es capaz
de resistir la fagocitosis haciendo esta bacteria tenga un factor de
virulencia mayor.
Si sale positivo (por ejemplo, la colonia problema es S. aureus), el suero
coagular, dando como resultado un cogulo (a veces el cogulo esta tan
desarrollado que el lquido se solidifica completamente).

Materiales







Placas petri
Muestras de
secreciones
Tubos y
gradilla
Esptula




Hisopo
Aza de siembra
Frasco
Pizeta Probeta
Mechero
Equipos
Cocinilla
Estufa incubadora
Autoclave
Balanza mecnica




Procedimiento
1. Procedimiento De Secrecin Farngea.
Preparamos los medios selectivos (Agar Mac Conkey, Manitol
Salado, Agar chocolate y Agar Sangre), antibiograma.
Sembramos la muestra de secrecin farngea y llevamos a
autoclavar.
Luego realizamos las pruebas de la Catalasa y Coagulasa.
Sembramos la muestra en el antibiograma y luego colocamos los
antibiticos.
2. Procedimiento De Secrecin Vaginal.
Preparamos los medios selectivos (Agar Mac Conkey, Manitol
Salado, Agar chocolate y Agar Sangre), antibiograma.
Sembramos la muestra de secrecin vaginal y llevamos a
autoclavar.
Luego realizamos las pruebas de la Catalasa y Coagulasa.
Sembramos la muestra en el antibiograma y luego colocamos los
antibiticos.





Resultados
1. resultados de secrecin farngea.
Mac Conkey
No crecieron colonias no hay presencia de entero bacterias Gram (-).







Manitol Salado
No crecieron colonias ni viro el medio







Agar Chocolate
Colonias juntas medianas de color blanco y colonias pequeas plomas
por presencia de cocos y estreptococos.


Agar Sangre
Colonias grandes y pequeas plomas, colonias con un halo verdoso en el
medio, las colonias plomas por presencia de estafilococo y el halo verde
por estreptococos (hemolisis alfa).


Prueba De La Catalasa
Catalasa (+) si es estafilococo (agar sangre)




Prueba De La Coagulasa
Coagulasa (-) no es estafilococo aereus.





Antibiograma
Sensible: Gentamicina, Amoxicilina, Ampicilina y Cefadroxil.
Resistente: Cefotaxima, Lincomicina, Eritromicina






2. resultados de secrecin vaginal.
Manitol Salado
Colonias medianas, pequeas redondas de color blanco y el medio que
era rojo viro a amarillo por presencia de estafilococo.





Agar Chocolate
Colonias grandes de color blanco, pequeas de color mostaza y medianas de color amarillo. La
colonias plomas grandes son por presencia de estafilococo y las pequeas mostaza por diplococo
Gram positivo.







Prueba De La Catalasa
Catalasa (+) si es estafilococo (m.s)






Prueba De La Coagulasa
Coagulosa (-) no es estafilococo aereus




Antibiograma
No se vio resultado de ningn antibitico porque en medio se contamino y crecieron colonias en
el antibiograma.

Conclusin
Secrecin vaginal: Con el cultivo ya terminado y por los resultados
dados hemos llegado a la conclusin que en la muestra de
secrecin vaginal se encontraron estafilococos, diplococos y
estreptococos Gram positivos descartando estafilococo aereus
mediante la prueba de la coagulosa y neisseria gonorrea por los
diplococos Gram positivos crecido en el agar chocolate viendo as
que la persona tiene una infeccin por bacterias y debemos darle un
tratamiento adecuado mediante el resultado antibiograma.

Secrecin farngea: Con el cultivo ya terminado y por los resultados
dados hemos llegado a la conclusin que en la muestra de secrecin
farngea se encontraron estafilococos (agar chocolate) y
estreptococos (agar sangre) descartando entero bacterias por que
no crecieron colonias en el agar Mac Conkey Gram (-) y por la
prueba de la oxidasa, descartando tambin que sea estafilococo
aereus por la prueba de la coagulosa, viendo que la infeccin est
dada por las bacterias ya mencionadas debemos dar el adecuando
tratamiento mediante el resultado del antibiograma.






Bibliografa
http://www.britanialab.com.ar/esp/productos/b02/simedio.htm
http://es.wikipedia.org/wiki
http://www.britanialab.com.ar/esp/productos/b02/tcbsmedio.ht
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Medios De Cultivo En Microbiologa Autor: Manuel Mendo Rubio