PRACTICA N10

PRUEBAS DE DETECCIN Y PRUEBAS SEROLGICAS

I. COMPETENCIAS

Describe y explica las pruebas de deteccin comnmente utilizadas y las
pruebas serolgicas usadas en la Industria alimentaria.
Identifica experimentalmente alimentos contaminados y resultados de
pruebas serolgicas.

II. RESUTADOS


































Con formato: Prrafo de lista, Justificado, Numerado +
Nivel: 1 + Estilo de numeracin: I, II, III, + Iniciar en: 1
+ Alineacin: Derecha + Alineacin: 0.63 cm +
Tabulacin despus de: 0.95 cm + Sangra: 0.95 cm
Con formato: Justificado








































DISCUSIN

En este estudio se analizaron cepas de E. coli identificadas como EPEC por
serolologa, utilizando antisueros comerciales polivalentes. De las 113 cepas
analizadas por PCR para las E. coli diarreognicas, slo 23 (20%) presentaron
alguno de los 8 genes de virulencia examinados. Este resultado es comparable
con estudios previos. Tamaki y colaboradores evaluaron 1,130 cepas de E. coli
procedentes de varios pases del mundo caracterizadas como enterovirulentas
en base al antgeno O con el uso antisueros comerciales. En este grupo de cepas
slo 263 (23.3%) presentaron alguno de los 6 genes patognicos examinados
(eae, stx, aggR, st, lt, ipaH) (6). En otro estudio similar realizado en Japn, de un
total de 229 cepas identificadas como enterovirulentas en base a sus antgenos
O, slo 40 (17.5%) fueron reconocidas como diarreognicas (7). Sin embargo,
estudios menos recientes reportan prevalencias ms altas. As por ejemplo,
Giammanco y colaboradores reportaron que el 75% de 55 cepas aisladas en Italia
entre 1987 y 1992 e identificadas como EPEC.

Con el objeto de determinar si alguna caracterstica de la muestra tena una
mejor correlacin con la confirmacin de EPEC por PCR, se analiz la frecuencia
de las E.coli segn las caractersticas de la muestra. El recuento de leucocitos as
como la descripcin de las caractersticas macroscpicas de las muestras fue
realizado en cada laboratorio participante. Cabe aclarar que no todas las
muestras contaron con la descripcin de sus caractersticas, motivo por el cual
los denominadores varan en cada caso. El 63% de las muestras presentaron <20
leucocitos x campo; de los cuales un 20% tuvo antisueros comerciales
presentaron propiedades de virulencia asociadas a EPEC (8).

La confirmacin diagnstica de los agentes etiolgicos de diarrea en pediatra se
realiza con fines epidemiolgicos y clnicos. Para los estudios epidemiolgicos en
los que se quiere conocer la prevalencia, incidencia y carga de enfermedad de
cada agente etiolgico es recomendable incidir en el uso del PCR para un
diagnstico preciso. En el caso de los estudios clnicos, para el diagnstico
etiolgico del paciente individual, tiene poca utilidad la determinacin del
patotipo individual de E. coli diarrognica dado que no est establecido en el
paciente peditrico el beneficio del manejo antibitico. Para el caso de diarrea
persistente, existe muy poca literatura sobre ensayos clnicos que prueben el
beneficio del uso de antibiticos (17,19). En el caso de adultos, especficamente
de diarrea del viajero, en la cual los principales agentes son ETEC y EAEC,
mltiples estudios han determinado la utilidad de los antibiticos
(ciprofloxacina, azitromicina, rifaximina entre otros) para reducir el tiempo de
enfermedad (19). En conclusin, la mayora de las cepas clasificada como EPEC
por serologa no presentan el gen eaeA caracterstico de las EPEC por PCR, es
decir hay falsos positivos. Por otro lado, los serotipos clsicos de EPEC pueden
tambin corresponder a otros patotipos de las E. coli diarrognicas, es decir la
serologa de EPEC no es especfica. Por lo tanto, el mtodo de eleccin bebe ser
el uso del PCR.

Hasta que no se disponga de pruebas rpidas, especficas y de fcil acceso, no se
tendr informacin de ensayos clnicos randomizados que demuestren el
beneficio del tratamiento antibitico en pacientes peditricos con
gastroenteritis por las E. coli diarrognicas. La confirmacin diagnstica de los
agentes etiolgicos de diarrea en pediatra se realiza con fines epidemiolgicos
y clnicos.

Para los estudios epidemiolgicos en los que se quiere conocer la prevalencia,
incidencia y carga de enfermedad de cada agente etiolgico es recomendable
incidir en el uso del PCR para un diagnstico preciso. En el caso de los estudios
clnicos, para el diagnstico etiolgico del paciente individual, tiene poca utilidad
la determinacin del patotipo individual de E. coli diarrognica dado que no est
establecido en el paciente peditrico el beneficio del manejo antibitico. Para el
caso de diarrea persistente, existe muy poca literatura sobre ensayos clnicos
que prueben el beneficio del uso de antibiticos. En el caso de adultos,
especficamente de diarrea del viajero, en la cual los principales agentes son
ETEC y EAEC, mltiples estudios han determinado la utilidad de los antibiticos
(ciprofloxacina, azitromicina, rifaximina entre otros) para reducir el tiempo de
enfermedad.

Cuando una persona se presenta con sntomas y/o antecedentes que sugieren
una hepatitis viral, despus de un periodo de incubacin, que puede llegar hasta
10 semanas, se desarrolla la infeccin aguda con sntomas o no, que puede
resolverse o seguir en cronicidad. Se debe estudiar en la sangre de un individuo
expuesto al virus, la presencia o no de antgenos virales como el HBsAg y el
antgeno" e" HBeAg.

Con lo realizado en la prctica de microbiologa de alimentos pudimos
determinar q la muestra analizada de nctar en la pruebas de deteccin y
serolgicas, pudimos observar en las placas petri si existe crecimiento tanto en
la placas contaminadas como sin contaminar la presencia de microrganismos
como es la bacteria de E.coli en la cual fue infectada la muestra para ver su
reaccin.



III. CONCLUSIONES

Con esta prueba podemos concluir diciendo que pudimos analizar y describir las
diferentes pruebas q pueda realizar con la deteccin serolgica en los alimentos
con el fin de evitar diferentes contaminaciones en los productos alimentarios.

Como tambin se pueda identificar experimentalmente los alimentos en si
contaminados los cuales se identificados a tempo para evitar cualquier
propagacin de alguna enfermedad.




IV. REFERENCIAS BILIOGRAFCAS

Mendo, M. 2005. Medios de cultivo en microbiologa. 5ta Edicin. Ediciones
Laborales S.R.L.
http://es.wikipedia.org/wiki/Reacci%C3%B3n_ant%C3%ADgeno-anticuerpo
1 O'RYAN M, PRADO V, PICKERING LK. A millennium update on pediatric
diarrheal illness in the developing World. Semin Pediatr Infect Dis.
2005;16(2):125-36
2 OCHOA TJ, RUIZ J, MOLINA M, et. al. High frecuency of antimicrobial Drug
Resistance of DiarrheagenicEscherichia coli in infants in Peru. Am J Trop Med
Hyg 2009; 81(2): 296-301.
3 OCHOA TJ, BARLETTA F, CONTRERAS C, MERCADO E. New insights into the
epidemiology of enteropathogenic Escherichia coli infection. Trans R Soc Trop
Med Hyg. 2008; 102(9): 852856.
4 GUION CE, OCHOA TJ, WALKER CM, et. al. Detection of Diarrheagenic
Escherichia coli by Use of Melting-Curve Analysis and Real-Time Multiplex PCR.
J Clin Microbiol 2008;46(5):17521757.
5 BARLETTA F, OCHOA TJ, ECKER L, et. al. Validation of Five-Colony Pool
Analysis Using Multiplex Real-Time PCR for Detection of Diarrheagenic
Escherichia coli. J Clin Microbiol 2009; 47: 1915-1917.
6 TAMAKI Y, NARIMATSU H, MIYAZATO T, et. al. The Relation ship between O-
Antigens and Pathogenic Genes of Diarrea Assosiated Escherichia coli. Jpn J
Infect Dis 2005; 58(2), 65-69
7. NISHIKAWA Y, ZHOU Z, HASE A, et.al. Diarreagenic Escherichia coli isolated
from stools of Sporadic Cases of Diarrheal Illness in Osaka City, Japan between
1997 and 2000: Prevalence of Enteroaggregative E. Coli Heat-Stable
Entorotoxin 1 Gene-Possesing E. coli 2002;55:183-190
8. GIAMMANCO A, MAGGIO M, GIAMMANCO G, et. al. Characteristics of
Escherichia coli strains belonging to enteropathogenic E. Coli serogroups
isolated in Italy from child with diarrhea. J Clin Microbiol 1996; 34(3):689-94.





FACULTAD DE CIENCIAS AGRARIAS
ESCUELA PROFESIONAL DE INGENERIA EN INDUSTRIAS
ALIMENTARIAS

CURSO : LABO. MICROBIOLOGA DE ALIMENTOS

DOCENTE : ING. CYNTHIA BISSO MUOZ

DICENTE : GUTIRREZ ESQUIVEL, PAOLA

TEMAS : Prctica 10

CICLO : 2014 - I