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EMBRIOGNESE EMBRIOGNESE
nas Plantas Vasculares (cont.)
Espermatfitas:
II Angiosprmicas
20/03/2014
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Ciclo de desenvolvimento nas plantas superiores
Nas Espermatfitas (Gimnosprmicas e Angiosprmicas)
Fase Vegetativa
Embriognese
Desen. vegetat. Ps-embrionrio Fase Juvenil
Fase Adulta
Fase Reprodutiva
Formao de gmetas em estruturas reprodutoras (flores)
(Frutos) Sementes
2
(Frutos), Sementes
2
Caractersticasdas Angiosprmicas
Protlo incluso reabsorvido
Reduo do protlo a algumas Reduo do protlo a algumas
clulas que constituem o saco
embrionrio
Dupla fecundao outro gmeta
conjuga-se com o mesocisto/2
ncleos polares Endosperma
secundrio (3n).
3
Caractersticasdas Angiosprmicas(cont.):
Embriognese
Embries pequenos e organognese precoce (os primeiros
rgos so edificados com um nmero reduzido de
clulas) clulas).
Multiplicao celular ordenada segue padres
geomtricos regulares nas fases iniciais do
desenvolvimento.
4

3
Embriognese
Durante a embriognese estabelece-
se o eixo da planta, com o pice p , p
radicular num plo e o pice caulinar
no outro plo, e estabelece-se o
padro bsico de tecidos nesse eixo
(sistema drmico, sistema fundamental e
sistema vascular).
Fases Desenvolvimento
5
Proembrio muito uniforme na maioria
das Angiosprmicas;
Embrio varia com os taxa.
Oosfera ezigoto deArabidopsisthaliana
6
A oosfera polarizada, grande vacolo do lado micropilar (vacolo
assimetricamente posicionado), ncleo e maior parte do citoplasma do
outro lado.
O zigoto mantm a polaridade.
4
Fases iniciais da Embriognese
A 1 diviso assimtrica. A clula
mais pequena recebe a maior parte
do citoplasma a outra, maior, fica
muito vacuolizada. Esta clula
vacuolizada divide-se mais algumas
vezes, mas sempre no mesmo plano.
De incio origina a clula basal e o
suspensor que liga o embrio ao
saco embrionrio. A outra clula
originar o embrio propriamente
dito Padro axial
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A partir da clula apical por divises
celulares segundo planos altamente
ordenados forma-se uma estrutura
esfrica.
Embrio Globular
A clula embrionria apical divide-se
longitudinalmente estrutura esfrica
constituda por 2 clulas.
A clula do suspensor divide-se A clula do suspensor divide se
transversalmente.
As divises seguintes do embrio so
sncronas e espacialmente ordenadas.
4 clulas, -- 8 clulas;
divises subsequentes camada
superficial com 8 clulas que cobre 8
clulas internas Estado de formao
da protoderme (dermatognio).
Di ises s bseq entes dei am de ser
8
Divises subsequentes deixam de ser
sncronas mas so espacialmente
ordenadas 32 clulas centrais e 32
clulas protodrmicas.
durante este estado de Embrio
globular que surge o primeiro sinal de
diferenciao histolgica.
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Embrio Cordiforme e Embrio Torpedo
A fase globular termina com
divises celulares localizadas
primrdios dos cotildones. p
Durante o estado cordiforme
definem-se tambm os pices
caulinar e radicular,
restabelece-se a polaridade
axial, evidencia-se a
diferenciao histolgica (o
procmbio distingue-se no fim
da fase cordiforme).
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Com o alongamento axial do
embrio inicia-se o estado
torpedo da embriognese,
distingue-se hipoctilo e
radcula. O crescimento dos
cotildones pode levar a que
dobrem.
hipfise
Embriognese emDicotiledneas
Capsella bursapastoris
10
6
Embriognese emMonocotiledneas
11
Os 2 octantes superiores originam o cotildone
As 2 camadas intermdias do origem ao
hipoctilo e ao pice caulinar
As camadas inferiores so os locais de
edificao da radcula e da coifa.
Edificao adventcia
do pice caulinar
relativamente ao eixo
do embrio
12
7
Embrio de monocotiledneas
13
Endosperma
O endosperma forma-se na dupla conjugao
(ncleo gamtico mascul. + 2 ncleos polares /
mesocisto).
Em algumas dicotiledneas (leguminosas) o
endosperma envolve o embrio durante as
fases iniciais da embriognese mas
desaparece durante a maturao da semente
tornando-se os cotildones os rgos de
armazenamento.
( )
14
Noutras dicotiledneas (Ricinus) o
endosperma persiste durante a formao da
semente.
Em monocotiledneas (gramneas) o
endosperma pode constituir 70% da semente.
8
Endosperma contribui para o desenvolvimento do embrio
No s fornece nutrientes mas propicia p p
ambiente e sintetiza substncias
necessrias ao desenvolvimento dos
embries na fases iniciais (embries
imaturos).
Embries imaturos isolados, ao
contrrio de embries maduros,
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necessitam de suplemento de sacarose,
aminocidos e fito-hormonas para
completarem o desenvolvimento.
Embriognese e desenvolvimento da semente
Estados
I Globular
II Cordiforme
Caracterizao moleculare morfolgicado desenvolvimento do embrio e da semente

n
e
s
e
III Torpedo, todos os
rgos esto formados
mas no atingiram
tamanho e peso finais
IV Desenvolvimento
da semente sntese e
deposio de protenas
de armazenamento (por
E
m
b
r
i
o
g

16
de armazenamento (por
ex. nos cotildones, que
aumentam de tamanho
e peso)
V Dormncia (pra
transcrio de genes e
sntese proteica,
embrio perde gua)
9
http://dx.doi.org/10.1016/S0981-9428(01)01350-X
During early embryogenesis (i.e,
morphogenesis), seed weight and lipid
content were low whereas important
amounts of starch were transiently
accumulated accumulated.
In the second stage, or maturation phase,
a rapid increase in seed dry weight was
observed and storage oils and proteins
were accumulated in large quantities,
accounting for approximately 40% of dry
matter each at the end of this stage.
During the third and last stage (late
maturation including acquisition of
desiccation tolerance), seed dry weight
remained constant while an acute loss of remained constant while an acute loss of
water took place in the seed. Storage
compound synthesis ended concomitantly
with sucrose, stachyose and raffinose
accumulation. This study revealed the
occurrence of metabolic activities such as
protein synthesis, in the final phase of
embryo desiccation.
17
Fig.1.Growth parametersofdeveloping Arabidopsisseeds.Each datapoint isthe
mean ofat least threeindependent measurements:(), fresh weight;(), dry weight;
(), water content. Bars = SEs which, if not visible, are smaller than the symbol ( ), water content.Bars SEswhich, ifnot visible, aresmaller than thesymbol
Fig.3.Evolution ofcarbohydrate content in developing Arabidopsis seeds.(), hexoses(Fru +Glc)
content;(), starch content;(), sucrosecontent;(), raffinose seriesoligosaccharides (raffinose
and stachyose)content were analysed.Except for oligosaccharides, the total amount of
carbohydrate (A) and its concentration on adryweight basis (B) arepresented.Dataarethe mean
ofthree independent measurements except for 3 DAF, where only two independent measurements
were performed;bars =SEs
18
Fig.4.Synthesisoffatty acidsand lipidsin Arabidopsis
seeds.For each datapoint, thetotal fatty acid amount
(A), thefatty acid composition (B) and theTAGfatty
acid content (C) oftheseed wereaveraged (three
independent measurements).Bars=SEson A and C.
Fig.5.Evolution offreeaminoacidsand protein content in
developing Arabidopsisseeds.Freeaminoacid level was
analysed throughout seed development (A).For each sampling
date, theaminoacid amount wasaveraged and bars=SEs.
Timecourseofstorage()and total ()protein wereanalysed
(B) and each datapoint representsasinglemeasurement.
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Expresso de genes durante a embriognese e
desenvolvimento da semente
Durante as fases de
embriognese e formao da
semente surgem diversos semente surgem diversos
conjuntos de mRNAs como
resultado de variaes
qualitativas e quantitativas da
expresso gnica.
O nmero de genes que se
expressa na fase III
(cotildones) semelhante ao
19
(cotildones) semelhante ao
n de genes que se expressa
na fase de maturao (IV) e
equivalente ao n de genes
que se expressa num caule ou
numa folha desenvolvida.
Expresso de elevado n de genes durante a
embriognese
H milhares (~15 000) mRNAs
diferentes durante a fase
intermdia de maturao, a
maioria dos quais (90%) est maioria dos quais (90%) est
presente no estado de formao
de cotildones e de embrio
maduro.
Alguns genes so expressos
exclusivamente nos embries
e destes h genes especficos
de determinados estados:
um grupo de genes que se um grupo de genes que se
expressa na embriognese
inicial,
outro na fase intermdia de
maturao (codificam protenas
de armazenamento) e
outro que se expressa na fase
final da embriognese e
desenvolvimento da semente
(desidratao da semente). 20
11
Complexidade da expresso gnica no embrio
Os embries das plantas so morfologicamente simples mas muito p g p
complexos em termos de biologia molecular.
Nos embries das plantas, surpreendentemente, expressa-se um
grande n de genes.
Ex: Em embries de Nicotiana tabacum expressam-se ~ 20 000 genes,
aproximadamente o mesmo n de genes que se expressa em rgos
altamente diferenciados tais como folhas, razes, anteras, etc.
(Os RNAs especficos de um determinado estado so uma pequena
fraco do total; contudo so produto de um grande n de genes)
21
fraco do total; contudo, so produto de um grande n de genes).
Esta situao diferente da que ocorre nos Animais nos quais a expresso
gnica se vai tornando cada vez mais complexa durante o desenvolvimento.
Identificao de genes do desenvolvimento atravs
de fentipos mutantes
Modelo - Arabidopsis thaliana
(Brassicaceae), 30 cm, ciclo de vida curto (6 (Brassicaceae), 30 cm, ciclo de vida curto (6
semanas), em lab. a 25 C 10 000
plantas/m
2
. Flores hermafroditas e
autopolinizveis.
Aps cruzamento de plantas heterozigticas
descendncia ser homozigtica.
Uma flor pode produzir 30-50 sementes, a
planta inteira vrios milhares.
22
p
O genoma haploide est contido em 5
cromossomas.
Foram identificados por mutaes vrias
centenas de genes.
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Induo de mutaes
a) No passado recente, tratamento de sementes
com substncia qumica mutagnica (como
etil-metanossulfato, EMS);
b) Insero aleatria, nos genes, de T-DNA do
plasmdeo ti de Agrobacterium tumefaciens. p g
Sementes so tratadas com Agrobacterium contendo
plasmdeo ti modificado, c/ genes indutores do tumor
suprimidos e c/ insero de gene de resistncia a
antibitico (Kanamicina). Algumas clulas, dos
embries das sementes tratadas, sero
transformadas por insero do T-DNA (contendo o
gene de resistncia) em alguns dos seus genes.
Em qualquer dos mtodos, para que a
mutao seja transmitida s geraes
23
seguintes necessrio que ocorra numa
clula que contribua para a formao de
gmetas. Significa que a mutao tem de
ocorrer numa clula do meristema apical
caulinar, cujas clulas filhas participem na
formao de flores. Se surgir numa inicial
apical, o sector da planta proveniente dessa
inicial apical com o gene mutado ter a
mutao.
Induo de mutaes
No caso das sementes maduras
tratadas com agente mutagnico.
Com uma frequncia muito baixa
(1 /1000 a 5000 sementes), um
gene necessrio ao gene, necessrio ao
desenvolvimento normal da
plntula, surgir mutado numa das
clulas que originar os gmetas
da planta adulta. Formar-se- um
sector mutante heterozigtico na
camada L2 do pice caulinar que
contribuir para a formao de
gmetas em algumas flores.
Aps autofecundao, dos
gmetas mutados surgiro
24
gmetas mutados surgiro
plntulas mutantes homozigticas
na gerao F1.
das plntulas sero normais
(50% heterozigticas e 25% silvestres).
As heterozigticas aps auto
fecundao originam novamente
mutantes na F2.
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A organizaodo embriode Arabidopsis evidencia2 padresde
segmentaosobrepostos
Padro axial ao longo do eixo
apical-basal ap ca basa
Com 5 segmentos:
SAM
Cotildones
Hipoctilo
Radcula
RAM
Padro radial ao longo do eixo
radial
25
Com 3 camadas tecidos:
Protoderme
Meristema fundamental
Procmbio
Formao do plano bsico do corpo das plantas nas fases iniciais da
embriognese
Durante a embriognese inicial
f t id no se formam os tecidos e os
rgos da planta adulta,
organiza-se somente um corpo
muito simples com:
a) um padro radial -> 3 sistemas
de tecidos, que se inicia no
estado de embrio globular
b) um padro axial (um eixo
b i i 2 tild
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embrionrio com 2 cotildones,
nas dicotiledneas), que se
estabelece no estado de
embrio cordiforme.
14
Formao do plano bsico do corpo das plantas nas fases iniciais da
embriognese
c) Aps embriognese inicial estado
embrio cordiforme maioria das embrio cordiforme - maioria das
estruturas que constitui o corpo de
uma planta adulta resulta da
actividade de meristemas.
Em resumo, durante a
embriognese que se establecem os 3
padres bsicos de desenvolvimento
que persistem na planta adulta:
Padro axial
Simetriabilateral
27
1. Padro radial de disposio dos tecidos
nos rgos;
2. Padro de desenvolvimento axial
(apical-basal);
3. Meristemas primrios que, aps
germinao da semente, originam a
maioria do corpo das plantas.
Nas fases iniciais da embriognese possvel identificar clulas que originaro os
diferentes tecidos e rgos da jovemplanta.
No estado de embrio
globular, como decorrncia Embrio globular Embrio cordiforme
Plntula
g ,
de as divises celulares
ocorrerem segundo planos
precisos, possvel
reconhecer clulas ou grupos
de clulas que originam os 3
sistemas de tecidos: drmico,
fundamental e vascular.
Do mesmo modo no estado
cordiforme identificam-se as
Estado
2clulas
g
Estado Estado
Octante dermatognio
28
regies que originam
cotildones, hipoctilo e
radcula da jovem planta.
Contudo, isto no significa que o
destino de qualquer clula fica
irremediavelmente determinado
durante as fases iniciais da
embriognese.