SOLO SE ANALIZO UNA LECHE: LECHE DE CAYMA

MESOFILOS VIABLES:
Materiales:
1 matraz Erlenmeyer de 250 mL de capacidad, con 90 mL de agua peptonada
4 a 6 tubos de ensayo con tapn de rosca, con 9 mL de solucin de agua peptonada
8 a 12 cajas de Petri con 20 mL c/u de PCA (Plate Count Agar).y mantenido a 40 C
Incubadora con termostato que evite variaciones mayores de 1.0C, provista con
termmetro calibrado
Bao de agua con termmetro, que mantenga la temperatura a 45 1.0 C
Utensilios estriles (cuchillo, tenedor, cuchara, pinzas) para tomar muestra
Pipetas bacteriolgicas de 10 mL y 1ml

Procedimiento:
Pesar 10 g de muestra y homogeneizar con 90 ml de Agua peptonada 0.1% esteril.
Realizar diluciones decimales empleando tubos de 9 ml.
Depositar 1 mL de cada dilucin en cajas de Petri estriles por duplicado. Marcar las
bases de las cajas con los datos pertinentes antes de inocular.
Agregar de 18 a 20 mL del medio fundido PCA (Plate Count Agar).y mantenido a 40 C.
Para homogenizar, mezclar mediante 6 movimientos de derecha a izquierda, sobre
una superficie lisa y horizontal hasta lograr la completa incorporacin del inculo en el
medio; cuidar que el medio no moje la cubierta de las cajas. Dejar solidificar.
Incubar las cajas en posicin invertida durante 37C durante 2 dias.
Despus de la incubacin, contar todas las colonias desarrolladas en las placas
seleccionadas (excepto las de mohos y levaduras)
Se consideran representativas las cajas que tienen un nmero de colonias dentro del
rango de sensibilidad del mtodo, en este caso, entre 25 y 250 UFC.
Una vez seleccionadas las cajas y hechos los promedios correspondientes, se aplica el
factor de dilucin, que es el inverso y se redondea el nmero a 2 cifras significativas (o
dgitos) y potencias de 10. Cuando el tercer dgito del promedio es 4 o menor, se omite
dejando el nmero de 2 cifras significativas.








RESULTADOS
MUESTRAS
DILUCIONES
UFC/ ml
10 ^ -1 10 ^ -2 10 ^ -3 10 ^ -4
A > 250 > 250 27 26
13* (10^4)
B > 250 > 250 37 20
A > 250 > 250 42 17
35 * (10^3)
B > 250 > 250 27 16
A > 250 > 250 57 17
44 * (10^3)
B > 250 > 250 31 15
A > 250 > 250 27 24
16* (10^4)
B > 250 > 250 43 31
RESULTADO PROMEDIO
92 * (10^3)

COMPARACION:
NO DEBE DE PASAR DE 5*10 ^ 5
LOS RESULTADOS INDICAN QUE LA LECHE ANALIZADA NO POSEE MESOFILOS VIABLES
Bacterias mesoflicas aerobias en placa en Plate Count Agar
incubadas por 48 h. a 37C: 92 000 UFC / mL de muestra.

COLIFORMES FECALES:
Materiales:
1 matraz Erlenmeyer de 250 mL de capacidad, con 90 mL de agua peptonada
4 a 6 tubos de ensayo con tapn de rosca, con 9 mL de solucin de agua peptonada
8 a 12 cajas de Petri con 20 mL c/u de medio VRBA y mantenido a 40 C
Incubadora con termostato que evite variaciones mayores de 1.0C, provista con
termmetro calibrado
Bao de agua con termmetro, que mantenga la temperatura a 45 1.0 C
Utensilios estriles (cuchillo, tenedor, cuchara, pinzas) para tomar muestra
Pipetas bacteriolgicas de 10 mL y 1ml

Procedimiento:
Pesar 10 g de muestra y homogeneizar con 90 ml de Agua peptonada 0.1% esteril.
Realizar diluciones decimales empleando tubos de 9 ml.
Depositar 1mL de cada dilucin en cajas de Petri estriles por duplicado. Marcar las
bases de las cajas con los datos pertinentes antes de inocular.
Agregar de 18 a 20 mL del medio fundido VRBA y mantenido a 40 C. Para
homogenizar, mezclar mediante 6 movimientos de derecha a izquierda, sobre una
superficie lisa y horizontal hasta lograr la completa incorporacin del inculo en el
medio; cuidar que el medio no moje la cubierta de las cajas. Dejar solidificar.
Incubar las cajas en posicin invertida durante 45C durante 2 dias.
Despus de la incubacin, contar todas las colonias desarrolladas en las placas
seleccionadas color violeta o que viran a rosado, debido a que Los coliformes son
bacterias que fermentan la lactosa, acidifican el medio y producen un viraje del
indicador de pH al color rojo intenso. (excepto las de mohos y levaduras)
Se consideran representativas las cajas que tienen un nmero de colonias dentro del
rango de sensibilidad del mtodo.
Una vez seleccionadas las cajas y hechos los promedios correspondientes, se aplica el
factor de dilucin, que es el inverso y se redondea el nmero a 2 cifras significativas (o
dgitos) y potencias de 10. Cuando el tercer dgito del promedio es 4 o menor, se omite
dejando el nmero de 2 cifras significativas.
RESULTADOS
MUESTRAS
DILUCIONES
UFC/ ml
10 ^ -1 10 ^ -2 10 ^ -3 10 ^ -4
A 0 0 0 0
> 100
valor estimado
B 0 0 0 0
A 0 0 0 0 > 100
valor estimado
B 0 0 0 0
A 0 0 0 0
> 100
valor estimado B 0 0 0 0
A 0 0 0 0
> 100
valor estimado
B 0 0 0 0
RESULTADO
> 100
valor estimado

COMPARACION:
NO DEBE DE PASAR DE 10 ^ 2
LOS RESULTADOS INDICAN QUE LA LECHE ANALIZADA NO POSEE COLIFORMES TOTALES.
Coliformes fecales aerobias en placa en VRBA
Incubadas por 48 h. a 45C: >100 UFC / mL de muestra.

La muestra trada por nuestro grupo fue de leche cruda. Al hacer un comparativo de
nuestros resultados vemos, por ejemplo, que "La Norma Venezolana para Lcteos" da
como valores lmites los sgtes. valores:

Vemos que el lmite dado para Coliformes Totales en leche cruda est dada en UFC/ml,
entonces, comparando nuestra muestra de leche, trada de un puesto lechero del sector
Santa Rosa Chiclayo con las muestras dadas en el cuadro, la podemos calificar como
una leche DE TERCERA.


Leer ms: http://www.monografias.com/trabajos89/determinacion-coliformes-totales-
fecales/determinacion-coliformes-totales-fecales.shtml#ixzz32kl3lGwF