A Importncia do Laborat

A Importncia do Laborat

rio de
rio de
Microbiologia no Controle de
Microbiologia no Controle de
Infec
Infec

o nos Servi
o nos Servi

os de Sa
os de Sa

de
de
Jose Carlos de Jose Carlos de
Amorim Amorim
Laborat
Laborat

rio de Microbiologia
rio de Microbiologia
Cl
Cl

nica.
nica.

necess
necess

rio ? Qual a sua fun

rio ? Qual a sua fun

o?
o?

Semeadura de Materiais Cl
Semeadura de Materiais Cl

nicos
nicos

Isolamento de Microorganismos
Isolamento de Microorganismos

Identifica
Identifica

o
o
-
-
quantifica
quantifica

o
o

Teste de suscetibilidade aos
Teste de suscetibilidade aos
antimicrobianos
antimicrobianos

Avalia
Avalia

o de cura microbiol
o de cura microbiol

gica
gica

Rastreamento de MDR
Rastreamento de MDR
ISOLAMENTO EM MEIOS DE
ISOLAMENTO EM MEIOS DE
CULTURA
CULTURA

1
1
-
-
Crescimento
Crescimento
bacteriano em
bacteriano em
uma placa de
uma placa de
agar
agar
sangue
sangue

2
2

colnias de
colnias de
Proteus
Proteus
em
em
agar
agar
chocolate
chocolate
ALGUNS ASPECTOS
ALGUNS ASPECTOS
COLONIAIS
COLONIAIS

E.
E.
coli
coli
e um BGN
e um BGN
lac
lac
-
-
em
em
agar
agar
Mac
Mac
Conkey
Conkey

E.
E.
coli
coli
em
em
agar
agar
EMB
EMB

Coprocultura
Coprocultura
com
com
E.
E.
coli
coli
e colnias
e colnias
de
de
Shigella
Shigella
no EMB
no EMB
Requisitos Essenciais
Requisitos Essenciais

Microbiologistas qualificados
Microbiologistas qualificados

Equipamentos adequados (automatizados
Equipamentos adequados (automatizados
ou semi
ou semi
-
-
automatizados)
automatizados)

Espa
Espa

o f
o f

sico
sico

Meios de Cultura (de boa procedncia)
Meios de Cultura (de boa procedncia)

Pops
Pops
(acess
(acess

veis)
veis)

Livros de registros
Livros de registros

Controle de qualidade
Controle de qualidade

Organiza
Organiza

o, rapidez e clareza nos laudos

o, rapidez e clareza nos laudos

Integra
Integra

o com a CCIH e os cl
o com a CCIH e os cl

nicos
nicos
Sistemas de identifica
Sistemas de identifica

o bacteriana:
o bacteriana:
Podem-se utilizar sistemas automatizados como:
VITEK, MICROSCAN, tiras de API, CRISTAL, BAC-TRAY, ou outros
Sistemas.
* Muito cuidado com os sistemas automatizados.
EQUIPAMENTOS ADEQUADOS
EQUIPAMENTOS ADEQUADOS
Sistemas de identificao
bacteriana
Painis de identificao e antibiograma
LABORAT
LABORAT

RIOS DE
RIOS DE
REFERNCIA
REFERNCIA
(perfis moleculares das cepas
(perfis moleculares das cepas
microbianas)
microbianas)

Laborat
Laborat

rios Centrais
rios Centrais

Laborat
Laborat

rios Universit
rios Universit

rios
rios

Centros de Pesquisa (Funda
Centros de Pesquisa (Funda

es)
es)
PFGE
PFGE
Conjuga
Conjuga

o bacteriana
o bacteriana
Controle de qualidade
- O setor de microbiologia deve possuir
um sistema interno e outro externo de
controle de qualidade dos seus meios e
discos. Cepas ATCCs como E. coli
25922, S. aureus 25923, E. coli 35218,
Pseudomonas aeruginosa 27853,
Enterococcus e Haemophyllus so
fundamentais para controle dos discos e
meios.
Alguns casos clnicos
Isolamento e identificao bacteriana
Dilemas Cl
Dilemas Cl

nicos:
nicos:
1
1
-
-
Infec
Infec

o do trato urin
o do trato urin

rio (ITU)
rio (ITU)
-
-
Qual o agente causal?
Qual o agente causal?
S.
S.
aureus
aureus
? (MSSA ou MRSA?)
? (MSSA ou MRSA?)
E.
E.
coli
coli
?, K.
?, K.
pneumoniae
pneumoniae
?,
?,
Proteus
Proteus
?
?
(ESBL positivas?)
(ESBL positivas?)
Pseudomonas?
Pseudomonas?
Acinetobacter
Acinetobacter
?
?
Enterococcus
Enterococcus
?
?
Outros.
Outros.
Dilemas Cl
Dilemas Cl

nicos:
nicos:
2
2
-
-
Pneumonia Associada
Pneumonia Associada

Ventila
Ventila

o
o
Mecnica
Mecnica
Pseudomonas? Pseudomonas?
Acinetobacter Acinetobacter? ?
S. S. aureus aureus? ?
K. K. pneumoniae pneumoniae? (ESBL?) ? (ESBL?)
Enterobacter Enterobacter? ?
Outros. Outros.
Como saber qual o agente causal?
Como saber qual o agente causal?
- - Colher aspirado traqueal ou lavado bronco Colher aspirado traqueal ou lavado bronco- -alveolar alveolar
Dilemas Cl
Dilemas Cl

nicos:
nicos:
3
3
-
-
Infec
Infec

o de s
o de s

tio cir
tio cir

rgico
rgico
O que tratar?
O que tratar?
S.
S.
aureus
aureus
? (MSSA ou MRSA?)
? (MSSA ou MRSA?)
Enterococcus
Enterococcus
? (VRE?)
? (VRE?)
Pseudomonas?
Pseudomonas?
Acinetobacter
Acinetobacter
?
?
Outros.
Outros.
O caminho do diagn
O caminho do diagn

stico
stico
microbiol
microbiol

gico
gico

Que exames solicitar ?
Que exames solicitar ?
- -
Cultura para germes comuns?
Cultura para germes comuns?
(
(
piognicos
piognicos
)
)
- -
Cultura para Anaer
Cultura para Anaer

bios?
bios?
- -
Bacterioscopia
Bacterioscopia
?(GRAM)
?(GRAM)
- -
Pesquisa de fungos?
Pesquisa de fungos?
- -
Cultura para fungos?
Cultura para fungos?
- -
Outros.
Outros.
O caminho do diagn
O caminho do diagn

stico
stico
microbiol
microbiol

gico
gico

O que colher?
O que colher?

Em que momento colher?
Em que momento colher?

Em que recipiente, e como
Em que recipiente, e como
armazenar e enviar ao laborat
armazenar e enviar ao laborat

rio?
rio?
Considera
Considera

es importantes:
es importantes:
Correlacionar a suspeita cl Correlacionar a suspeita cl nica com o s nica com o s tio de coleta tio de coleta
Coleta antes do in Coleta antes do in cio da antibioticoterapia, sempre que cio da antibioticoterapia, sempre que
poss poss vel vel
Materiais adequados para coleta e transporte Materiais adequados para coleta e transporte
Observa Observa es gerais: es gerais:
T T cnica ass cnica ass ptica na coleta de todo e qualquer material ptica na coleta de todo e qualquer material
Usar luvas em todos os procedimentos Usar luvas em todos os procedimentos
Identificar os materiais com: Nome, idade, data e hora da Identificar os materiais com: Nome, idade, data e hora da
coleta coleta
Coleta de Hemocultura
Coleta de Hemocultura

T
T

cnica:
cnica:
Selecionar veia a ser puncionada Selecionar veia a ser puncionada
Identificar os frascos com nome, n Identificar os frascos com nome, n mero da amostra mero da amostra
e hora da coleta e hora da coleta
Romper os lacres dos frascos e desinfet Romper os lacres dos frascos e desinfet - -los com los com
lcool a 70% lcool a 70%
Cal Cal ar luvas est ar luvas est reis e proceder reis e proceder limpeza do local da limpeza do local da
pun pun o com o com lcool a 70%, deixando agir por 1 min. lcool a 70%, deixando agir por 1 min.
Passar solu Passar solu o de PVPI a 10% ou Iodo a 1% ou 2% o de PVPI a 10% ou Iodo a 1% ou 2%
de forma centr de forma centr fuga, deixando agir por 1 min. fuga, deixando agir por 1 min.
Proceder Proceder coleta: Rela coleta: Rela o de 1/10 sangue/volume o de 1/10 sangue/volume
dos frascos. dos frascos.
Erros mais freq
Erros mais freq

entes:
entes:
1 1 - - Crescimento de trs ou mais bact Crescimento de trs ou mais bact rias emurina de jato m rias emurina de jato m dio: dio:
- - Falhas t Falhas t cnicas na anti cnicas na anti- -sepsia sepsia
- - Demora no transporte ou semeadura Demora no transporte ou semeadura
2 2 - - L L quor quor comresultado de cultura negativa, emque h comresultado de cultura negativa, emque h evidncias de evidncias de
bact bact rias no rias no gram gram: :
- - Falha no armazenamento e/ou transporte Falha no armazenamento e/ou transporte
- - Falha na semeadura Falha na semeadura
Da coleta ao laborat
Da coleta ao laborat

rio:
rio:
Da coleta ao laborat
Da coleta ao laborat

rio:
rio:
Erros mais freq
Erros mais freq

entes:
entes:
3
3

Coleta de
Coleta de
swab
swab
emsuperf
emsuperf

cie de feridas, sema devida

cie de feridas, sema devida
escarifica
escarifica

o
o
:
:
-
-
Crescimento de trs ou mais microorganismos
Crescimento de trs ou mais microorganismos
(
(
colonizantes
colonizantes
)
)
4
4

Quanto
Quanto

hemocultura:
hemocultura:
- -
Crescimento misto em amostras
Crescimento misto em amostras
Falha na anti
Falha na anti
-
-
sepsia
sepsia
Da coleta ao laborat
Da coleta ao laborat

rio:
rio:
Erros mais freq
Erros mais freq

entes:
entes:
5
5

Ponta de cateter:
Ponta de cateter:
- -
Tamanho superior a 5cm
Tamanho superior a 5cm
- -
Amostra enviada em gel transporte
Amostra enviada em gel transporte
- -
Amostra enviada em soro fisiol
Amostra enviada em soro fisiol

gico
gico
A pesquisa de
A pesquisa de
multi
multi
-
-
resistentes
resistentes
deve ser
deve ser
feita ininterruptamente tanto para
feita ininterruptamente tanto para
Pseudomonas, como para
Pseudomonas, como para
Acinetobacter
Acinetobacter
, MRSA, GISA,
, MRSA, GISA,
VRSA,
VRSA,
VRE, ESBL, "CESP,"
VRE, ESBL, "CESP,"
Burkholderia
Burkholderia
capacia
capacia
,
,
Stenotrophomonas
Stenotrophomonas
maltophilia
maltophilia
e outros
e outros
mecanismos de resistncia relevantes.
mecanismos de resistncia relevantes.
O livro de rotina deve ser de f
O livro de rotina deve ser de f

cil
cil
entendimento, para verificar o
entendimento, para verificar o
andamento e a concluso de exames, e
andamento e a concluso de exames, e
deve ser acess
deve ser acess

vel ao pessoal da CCIH,

vel ao pessoal da CCIH,
a qualquer hora do dia que for
a qualquer hora do dia que for
necess
necess

rio;
rio;
Deve
Deve
-
-
se montar junto com a CCIH o
se montar junto com a CCIH o
plantel de antibi
plantel de antibi

ticos a serem testados

ticos a serem testados
e liberados para a unidade hospitalar,
e liberados para a unidade hospitalar,
sempre dentro dos padres do CLSI.
sempre dentro dos padres do CLSI.
A integrao entre a CCIH e a
microbiologia de extrema importncia,
para o diagnstico microbiolgico
especfico, o monitoramento de
resistncia bacteriana e uso racional de
antibiticos, possibilitando um melhor
gerenciamento de antibiticos,
customizao e conseqente sobrevida
dos pacientes.
CASO CLNICO 1 :

Criana de 10 anos internada com fratura
de tbia. feita uma cirurgia e a criana
inicia um quadro de febre, com alteraes
clnicas e perfil hematolgico compatveis
com osteomielite. Aps alguns dias com
oxacilina, sem melhora, colhe-se secreo
do dreno cirrgico para cultura; isolado em
cultura, numerosas colnias de
Acinetobacter sp.
Paciente internado com quadro compatvel
com meningococcemia, colhe-se
hemocultura. relatado pelo laboratrio,
verbalmente, com 48 horas de cultura, o
crescimento de Acinetobacter. Aps
discusso do caso clnico com a
infectologista e a reviso da cultura,
verificou-se que por um equvoco do
microbiologista, embora fosse um CGN, no
era Acinetobacter, mas sim, Neisseria
meningitidis.
CASO CLNICO 2:
CASO CL
CASO CL

NICO 3 :
NICO 3 :
enviado ao laborat enviado ao laborat rio de microbiologia, rio de microbiologia,
l l quido pleural proveniente de paciente da quido pleural proveniente de paciente da
emergncia. emergncia.
Deste Deste solicitado solicitado gram gram e cultura. Ao e cultura. Ao
avaliarmos o avaliarmos o gram gram, verificamos a presen , verificamos a presen a a
de numerosos leuc de numerosos leuc citos e numerosos CGN, citos e numerosos CGN,
confirmados com nova lmina de confirmados com nova lmina de gram gram. Os . Os
corantes esto corantes esto ok ok. .
O que houve ?... Tratar este CGN ?... O que houve ?... Tratar este CGN ?...
1- Uma bacterioscopia de um lavado broncoalveolar de
um paciente com pneumonia, em CTI, sai em 20 ou 30
minutos e, pode direcionar muito um tratamento emprico
preliminar.
2- Com a bacterioscopia e a cultura consegue-se um
ganho em sobrevida dos pacientes, no hospital, com menor
tempo de internao e, com isso, diminuio considervel
dos custos hospitalares.
3- A bacterioscopia da urina no centrifugada pode definir
se a infeco por uma bactria gram positiva ou gram
negativa.
A importncia da
A importncia da
bacterioscopia
bacterioscopia
(GRAM)
(GRAM)
Para se avaliar a importncia de um setor de
Para se avaliar a importncia de um setor de
microbiologia em um hospital, deve
microbiologia em um hospital, deve
-
-
se ter
se ter
em conta:
em conta:
Em muitas situa
Em muitas situa

es, tratamentos
es, tratamentos
sem laudos microbiol
sem laudos microbiol

gicos so emp
gicos so emp

ricos e
ricos e
podem surtir em agravamento do quadro do
podem surtir em agravamento do quadro do
paciente e, conseq
paciente e, conseq

ente falha teraputica.

ente falha teraputica.
Algumas vezes por
Algumas vezes por

m, onde se sabe qual

m, onde se sabe qual

o
o
agente mais prevalente, pode o tratamento
agente mais prevalente, pode o tratamento
emp
emp

rico funcionar; entretanto, nas longas

rico funcionar; entretanto, nas longas
interna
interna

es, onde a suscetibilidade a aquisi

es, onde a suscetibilidade a aquisi

o
o
de uma gama de germes
de uma gama de germes

muito grande,
muito grande,
inclusive
inclusive
multi
multi
-
-
resistentes
resistentes
, a possibilidade de
, a possibilidade de
falha teraputica
falha teraputica

grande.
grande.