CROMATOGRAFIA DE GASES

Presentado por:
Manuel Francisco lvarez
Oscar Andrs Corredor
Sergio Alfredo Angarita
Carlos Valderrama
Presentado a: Ing. Mgs. Ana Mara Fonseca
Universidad Pedaggica y Tecnolgica de Colombia
Tunja-Boyac
2013
INTRODUCCIN A LA CROMATOGRAFA DE GASES
Introduccin a la cromatografa.
Definicin
Principios bsicos
Cromatografa de Gases
Campo de aplicacin
Partes de un cromatgrafo de gases
LA CROMATOGRAFA DE GASES Y SUS
APLICACIONES
INTRODUCCIN A LA CROMATOGRAFA
Definicin
Principios bsicos
Definicin
Tcnica que permite separar
los componentes de una
muestra debido a su diferente
afinidad entre dos fases
inmiscibles entre s, una
estacionaria (liquida o slida) y
otra mvil (gas o lquida)
to
t1
t2
A B
A B
Flujo de fase mvil
La muestra se introduce en la fase mvil y es transportada a
lo largo de la columna que contiene una fase estacionaria
distribuida.
Las especies de la muestra experimentan interacciones
repetidas (repartos) entre la fase mvil y la fase estacionaria.
Cuando ambas fases se han escogido de forma adecuada, los
componentes de la muestra se separan gradualmente en bandas
en la fase mvil.
Los componentes abandonan la columna en orden creciente
de interaccin con la fase estacionaria.
La amplia gama de seleccin de materiales para la fase mvil
y la estacionaria permite separar molculas que difieren muy
poco en sus propiedades fsicas y qumicas.
PROCESO PRACTICO
(VIDEOCLIP)
Clasificacin de los mtodos cromatogrficos
Cromatografa
Cromatografa de gases Cromatografa de lquidos
Gas Lquido
GLC
Gas Slido
GSC
Lquido Lquido
LLC
Lquido Slido
LSC
Intercambio
inico
IEC
Exclusin
EC
Casos particulares:
Intercambio Inico: Los componentes inicos de la muestra se separan por el
intercambio selectivo con contraiones de la fase estacionaria
Exclusin: La fase estacionaria proporciona una clasificacin de molculas
basada en la geometra y el tamao molecular
Comportamiento cromatogrfico de los compuestos
El comportamiento cromatogrfico de un componente de una muestra
puede describirse de diversas formas:
VR Volumen de retencin
Volmen de fase mvil necesario para transportar la banda de un
componente desde el punto de inyeccin, a travs de la columna,
hasta el detector (en el mximo de pico del componente)
tR tiempo de retencin
Tiempo necesario para que el componente, una vez inyectado pase a
travs de la columna y alcance el detector (en el mximo de pico del
componente)
k razn de reparto
Es una medida del tiempo que el componente est en la fase
estacionaria en relacin con el tiempo que est en la fase mvil
to
t1
t2
A B
A B
Flujo de fase mvil
tB
A B
tA
A
Seal
tiempo
to
t1
t2
tB
tA
k razn de reparto
tR tM VR - VM
k= =
Seal
tiempo
to
tB
tA
tM VM
Donde tM es el tiempo de retencin de
un compuesto que no interaccionara con
la fase estacionaria y tR es el tiempo de
retencin del compuesto de inters. Lo
mismo se puede expresar en relacin con
Los volmenes de retencin.
El objetivo de la cromatografa es doble:
Separar los distintos componentes de la muestra
Identificar los componentes previamente separados
Separar los distintos componentes de la muestra
Selectividad y eficiencia
Buena selectividad
Eficiencia baja
Baja selectividad
Buena eficiencia
Buena selectividad
Buena eficiencia
Identificar los componentes previamente separados
Seleccin de detectores adecuados que permitan el anlisis
cualitativo.
La seleccin de un detector est relacionada con la naturaleza de las
sustancias a determinar.
Los componentes de una muestra se identifican por su tiempo de
retencin
Se pueden emplear tcnicas que aporten una mayor informacin sobre la
naturaleza de los componentes: Acoplamiento con Espectrometra de
Masas
Anlisis Cuantitativos basados generalmente en la integracin del
rea bajo los picos.
Calibracin con patrones o estndares: Si se realizan determinaciones
cromatogrficas de muestras de concentracin conocida de alguno de sus
componentes, se puede realizar una recta de calibrado y posteriormente
el anlisis e integracin de una muestra de concentracin desconocida
del citado componente permitir la cuantifcacin del mismo.
Estndar interno: Permite que varen las condiciones de operacin entre
muestra y muestra.
Cromatografa de Gases
Es la tcnica a elegir para la separacin de compuestos orgnicos e
inorgnicos trmicamente estables y voltiles
Un cromatgrafo de gases consiste en el acoplamiento de varios
mdulos bsicos ensamblados para:
Proporcionar un flujo constante de gas portador
Permitir la introduccin de vapores de la muestra en la
corriente de gas que fluye
Contener la longitud apropiada de fase estacionaria
Mantener la columna a la temperatura apropiada (o la
secuencia del programa de temperatura)
Detectar los componentes de la muestra a medida que eluyen
de la columna
Proveer una seal legible proporcional en magnitud a la
cantidad de cada coomponente
Cromatografa de Gases
Cromatografa de Gases
Cromatografa de Gases
Sistema de inyeccin
El modo estndar es la inyeccin
directa, la muestra es inyectada
con una jeringa a travs de un
septum de goma a un alineador
de vidrio donde es vaporizada y
transportada por el gas al
interior de la columna.
El bloque de inyeccin, se
mantiene a una temperatura tal
que permita convertir
prcticamente de forma
instantnea la muestra lquida en
un tapn de vapor.
Existen jeringas especiales para
muestras gaseosas. Tambin se
puede emplear un lazo o bucle
para incoporar las muestras
gaseosas al flujo de gas portador
Sistema de inyeccin
El modo de separacin ms
extendido en la actualidad se
basa en el empleo de columnas
capilares. Estas columnas
requieren muy pequeos
volmenes de muestra.
Esto se logra empleando un
inyector que incorpora un divisor
de flujo (split). Normalmente se
introduce en la columna un 1%
Cuando las sustancias a separar
se encuentran a muy bajas
concentraciones se realiza
inyeccin sin divisor (splitless)
Sistema de inyeccin
Para el anlisis de compuestos
orgnicos voltiles en muestras
slidas y lquidas, se han
desarrollado algunas tcnicas
auxiliares:
Espacio de cabeza (Head space)
Purga y trampa (Purge and trap)
Espacio de cabeza (Head space)
Se analiza la fase de vapor en
equilibrio termodinmico con la
muestra en un sistema cerrado.
Para ello se procura un equilibrio
estable, mediante el control de la
temperatura del vial que contiene
la muestra.
Posteriormente, se arrastra la
fase vapor al interior del
cromatgrafo.
T equilibrio
Gas portador A la columna
Purga y trampa (Purge and trap)
Es aplicable solo a muestras lquidas.
Consiste en la continua renovacin del gas en
equilibrio con la muestra, con lo que se
consigue el desplazamiento dinmico de los
compuestos voltiles de la muestra lquida a
la fase gaseosa.
Los vapores se arrastran a una trampa donde
quedan retenidos y se van concentrando.
Finalizado el proceso se calienta la trampa y
se arrastran los vapores al interior del
cromatgrafo.
T
1) Gas portador
trampa
T baja
T
2) Gas portador
trampa
T alta
A la columna
Columnas cromatogrficas
Columnas capilares Columnas Empacadas
Columnas cromatogrficas empacadas
Se construyen con tubo de acero
inoxidable, niquel o vidrio.
Los dimetros interiores van de 1,6 a 9
mm.
La longitud suele ser inferior a los 3 m.
Se rellenan de un material adsorbente
adecuado a las sustancias que se quiere
separar.
Columnas cromatogrficas capilares
Se construyen con slice fundida.
Los dimetros interiores suelen ser de 200-250 m.
La longitud suele ser superior a los 20 m.
Hay dos tipos:
Empacadas con partculas slidas ocupando el total del dimetro
de la columna (micro-empacadas)
Tubulares abiertas, con trayectoria para el flujo abierta y sin
restriccin por el centro de la columna
Ejemplos de fases estacionarias en cromatografa de gases
Separaciones por punto de ebullicin de compuestos en un
intervalo amplio de pesos moleculares:
Escualano
Polidimetilsiloxano
Para hidrocarburos insaturados y otros compuestos
polidifenildimetilsiloxano
policarboranometilcianoetilsilicn
Para compuestos nitrogenados
poliamida
policianoetilmetilsilicon
Para alcoholes, steres, cetonas y acetatos
polietilenglicol
pentaeritritol tetracianoetilado
Horno
Las columnas cromatogrficas se enrollan, se sujetan en un
soporte y se introducen en el interior de un horno
El horno debe poderse calentar y enfriar rpidamente
La temperatura se debe poder programar para poder trabajar en
rgimen de gradiente
Muchas aplicaciones y mtodos cromatogrficos requieren
comenzar a temperaturas por debajo de la ambiental
T1
T2> T1
Horno
Caractersticas ideales de un detector para Cromatografa de Gases:
Sensibilidad alta y estable; tpicamente 10
-8
g soluto/s
Bajo nivel de ruido
Respuesta lineal en un amplio rango dinmico
Tiempo de respuesta corto
Buena respuesta para toda clase de compuestos orgnicos
Insensibilidad a las variaciones del flujo y la temperatura
Estabilidad y robustez
Simplicidad en su operacin
Identificacin de compuestos positiva
Tcnica no destructiva
Pequeo volumen en prevencin del mezclado de componentes
Sistemas de deteccin
Sistemas de deteccin
Detector de ionizacin de llama (FID)
Este detector aade hidrgeno al
eluyente de la columna.
La mezcla pasa a travs del
conducto de un mechero, donde se
mezcla con aire externo y luego
arde.
Cuando entra en la llama material
ionizable del eluyente de la columna
Se quema y la corriente aumenta
notablemente.
Este detector es ideal para compuestos
oxidables.
No responde a los compuestos de
carbono totalmente oxidados, como
carbonilos o carboxilos y grupos ster
Sistemas de deteccin
Detector de conductividad trmica (TCD)
Utiliza un filamento caliente
colocado en el flujo de gas emergente.
La cantidad de calor por conduccin
que pierde el filamento hacia las
paredes del detector depende de la
conductividad trmica de la fase
gaseosa.
Es til para determinar la presencia
incluso de pequeas cantidades de
materiales orgnicos que producen
una reduccin relativamente grande
en la conductividad trmica del
eluyente de la columna.
Sistemas de deteccin
Detector de captura de electrones (ECD)
El eluyente pasa entre dos electrodos.
Uno de los electrodos tiene en su
superficie un radioistopo que emite
electrones de alta energa conforme
decae.
Los electrones bombardean el gas
portador (N2) formndose un plasma
que contiene iones positivos, radicales
y electrones trmicos.
Se aplica una diferencia de potencial
de modo que se recolectan los
electrones generados.
Los compuestos que absorben
electrones reaccionan con los
electrnes trmicos disminuyendo la
corriente del detector, la cual es
medida y permite la cuantificacin
Sistemas de deteccin
Detector de espectroscopa de masas (MS)
Los eluyentes son ionizados y
fragmentados.
Los iones resultantes se dirigen a
travs de un cuadrupolo y se ordenan
en funcin de su masa.
Ese detector permite obtener el
espectro de masas del compuesto que
ha eluido.
Podemos por tanto conocer, adems
del tiempo de retencin el espectro de
masas del compuesto y contrastarlo
con bibliotecas de espectros.
Se trata por tanto de un detector
universal para la mayora de los
compuestos conocidos.
Cromatografa Inica
Polaridad
Basndose en la polaridad de la fase estacionaria y
la fase mvil, se distinguen los siguientes mtodos
de cromatografa lquida:
Polaridad de la
fase estacionaria
Polaridad de la
fase mvil
inico
polar
no polar
no polar polar inico
Cromatografa en
fase normal
Cromatografa en
fase reversa
Cromatografa de pares inicos
Cromatografa inica
El intercambio inico como mecanismo de
separacin
La gran mayora de las separaciones por cromatografa inica
ocurren por intercambio inico sobre fases estacionarias con
grupos funcionales cargados. Los correspondientes contraiones
del eluyente se localizan en la vecindad de los grupos funcionales
y se intercambian con iones del analito de la misma carga en la
fase mvil. Para cada ion el proceso de intercambio se caracteriza
por un equilibrio de intercambio inico correspondiente, que
determina la distribucin del analito (M
+
A
-
) entre la fase mvil
y la fase estacionaria:
| | | |
| | | |
f.e. f.m.
f.m. f.e.
A
E A
E A
K

=
A
-
es el ion del analito
E
-
es el ion del eluyente (contraion)

+ +
. e . f . m . f . m . f . e . f
A E A E
El intercambio inico como mecanismo de
separacin
El grupo ms importante de intercambiadores inicos son los basados
en resinas sintticas hechas de un copolmero de estireno y
divinilbenceno.
Los intercambiadores catinicos se obtienen por posterior sulfonacin
de esta resina de estireno-divinilbenceno. Los intercambiadores
aninicos por posterior clorometilacin seguida de aminacin.
Intercambiador catinico Intercambiador aninico
Cromatografa inica
Tambin llamada cromatografa de intercambio inico, determina
iones inorgnicos y orgnicos, normalmente por conductividad.
Se utilizan dos tipos de tcnicas en la prctica:
Supresin qumica, en la que la conductividad de fondo se suprime
tanto qumica como electrnicamente. Normalmente utilizada en
aniones.
Supresin electrnica, en la que se emplean eluyentes con sales de
cidos orgnicos en baja concentracin sobre intercambiadores de
iones de muy baja capacidad para alcanzar una conductividad de
fondo relativamente baja, que puede ser suprimida directamente por
medios electrnicos.
Supresin qumica
Se basa en el uso de sales de cidos dbilmente disociables (NaHCO
3
, por ejemplo) como
eluyentes. Estos eluyentes se pueden eliminar en gran medida mediante una reaccin post-
columna de acuerdo con el siguiente proceso
El cido carbnico formado como resultado del intercambio catinico se disocia muy
dbilmente, por lo que aporta poca conductividad.
Por otro lado, los iones de la muestra sufren la reaccin correspondiente. Por ejemplo, para
el cloruro
El proceso de supresin convierte el NaCl al correspondiente cido fuerte, el cual tiene una
mayor conductividad que la sal original. Cuanto menor fuerza tenga el cido producido, el
incremento en sensibilidad debido a la supresin qumica ser menor.
Supresin qumica
Eluyente - bomba
Inyeccin de
muestras
Separacin
Supresin Deteccin
Sin supresin qumica
Eluyente: cido ftlico
Con supresin qumica
Eluyente: HCO
3
-
/CO
3
-
Aniones
Cationes sin supresin qumica
Eluyente - bomba
Inyeccin de
muestras
Separacin
Supresin Deteccin
Deteccin por conductividad
La conductividad es una medida de la capacidad que tienen las disoluciones
de electrolitos para transportar la corriente por migracin inica en un
campo elctrico aplicado entre dos electrodos.
La conductividad () es directamente proporcional a la concentracin para
disoluciones diluidas, siguiendo la relacin
Donde
es la conductividad equivalente en Scm
2
mol
-1
c(eq) es la concentracin equivalente en eq/l o normalidad
1000
) eq ( c A
= k
Eluyente - bomba
Inyeccin de
muestras
Separacin
Derivatizacin Deteccin
Deteccin UV/VIS
Directa: Se usa en la determinacin de iones que absorben
fuertemente en el rango UV (nitrito, nitrato y aniones orgnicos,
p.e.) en presencia de altas concentraciones de iones inorgnicos
(cloruro, fosfato y sulfato, p.e.) que tienen escasa o nula absorcin
UV.
Indirecta: Se utiliza con eluyentes de alta absorcin UV
(ftalato, p.e.). De este modo, los iones con menor actividad UV
que el eluyente darn picos negativos y los iones con mayor
actividad UV que el eluyente darn picos positivos.
Con reaccin post-columna: Usada en la deteccin de metales de
transicin (Fe, Ni, Cu, Mn y Zn, p.e.)
Eluyente - bomba
Inyeccin de
muestras
Separacin
Deteccin
Deteccin electroqumica
Se utiliza ocasionalmente. Requiere que los iones a determinar sean
susceptibles de oxidarse o reducirse. Entre ellos hay muchos compuestos
orgnicos (azcares y aminas, p.e.), metales de transicin y aniones como
nitrito, nitrato, haluros, sulfuro, cianuro, sulfito y sulfato.
Hay cuatro tcnicas diferentes :
Amperometra: Medida de la corriente a potencial constante
Culombimetra: Medida de la corriente a potencial constante con 100% de
conversin del analito
Voltametra: Medida de la corriente frente al potencial en un rango definido
de potencial
Amperometra de pulsos: Medida de la corriente a pulsos de potencial
constante
Estado, cantidad y preparacin de muestras
Los lquidos que sean acuosos o miscibles en el agua se pueden
analizar directamente. Los lquidos, slidos y gases inmiscibles en
agua deben ser extrados o disueltos en disolucin acuosa antes del
anlisis.
El volumen tpico a analizar es de 5 a 200 l, aunque se puede
partir de volmenes tan grandes como 100 ml, utilizando tcnicas
de preconcentracin cromatogrficas cuando se requiera una mayor
sensibilidad.
Dilucin y filtracin son los procedimientos ms comunes de
preparacin de muestras. Se requiere extraccin para muestras no
acuosas o preconcentracin para muestras diluidas. La necesidad de
derivatizacin precolumna es rara.
Tcnicas complementarias
Absorcin atmica, emisin atmica y plasma de
acoplamiento inductivo. Se usan para determinar la
cantidad total de un metal en vez de una cierta forma
inica.
PORTAL DE REVISTAS UR
REVISTA CIECIAS DE LA SALUD
Caracterizacin por cromatografa de gases-espectrometra de masas del thinner comercialmente disponible
en la ciudad de Cartagena
Jesus Olivero, Katia Noguera, Wilson Maldonado
Resumen
El thinner es uno de los productos de mayor utilizacin en la industria de las pinturas, lubricantes y
pegamentos. Su composicin es variable de acuerdo con su uso y calidad. Sin embargo, la exposicin crnica
es una preocupacin debido a que puede afectar rganos principales tales como pulmones, hgado, rin y
glndulas suprarrenales. En este estudio fue caracterizada la composicin de varias muestras de
thinner, disponibles comercialmente en la ciudad de Cartagena, que fueron recolectadas en diferentes
almacenes y analizadas por cromatografa de gases acoplada a espectrometra de masas(GC/MS). Los
resultados mostraron que no solo la composicin, sino tambin la distribucin relativa de los componentes
presentes en las muestras son variables. Treinta y dos compuestos fueron detectados, entre los que se
encuentran:tolueno, o-xileno, pxileno y etilbenceno, con frecuencias de aparicin de 91,7, 66,7, 75,0 y
66,7 %, respectivamente. El desconocimiento del riesgo de intoxicacin, generado al manipular este tipo de
mezclas, puede ser la causa de muchos de los problemas de salud en personas expuestas al thinner, tanto en
actividades laborales como domsticas. Una minera de datos mostr la asociacin potencial entre los
componentes del thinner y manifestaciones clnicas, las cuales incluyen dao renal y heptico, prdida de
cabello, alteraciones hematolgicas, dermatitis, ansiedad y problemas de equilibrio, entre otras. En
conclusin, el thinner posee gran variabilidad tanto en sus componentes como en la proporcin relativa de los
mismos. Los efectos perjudiciales en la salud por exposicin directa o indirecta a estos componentes han sido
ampliamente descritos en la literatura
Palabras clave
Neurotxico, solvente, exposicin ocupacional
FUENTE BIBLIOGRAFICA:
http://revistas.urosario.edu.co/index.php/revsalud/article/view/2806