Obtencin de ADN vegetal

Al ensear sobre ADN las dificultades que se observan es que no puede asociar la
estructura de esta molcula y la idea de su presencia en todo organismo vivo. Por eso es
interesante realizar experimentos los que puedan observar en forma concreta lo que se
explica.


Extraccin de ADN vegetal.

Se extraern ADN de pltanos licuados con agua. Una parte de esta mezcla de pltano,
luego es tratada con shampoo y sal, mezclada durante 5-10 minutos, y luego escurrida a
travs de un filtro de caf. A lo filtrado se le agrega alcohol fro y es ste el momento
cuando el ADN de la solucin de banana se precipita y se hace visible.
El detergente disuelve los lpidos (molculas grasas) y las protenas de la membrana
celular, rompiendo las uniones que mantienen la integridad de la misma. De esta forma
se libera el contenido celular. Luego, el detergente forma complejos con los lpidos y las
protenas, permitiendo que los mismos sean separados del ADN por filtracin. As se
libera el ADN. La sal permite que el ADN precipite en una solucin fra de alcohol y
que las cadenas de ADN no se corten.




Materiales:
1 tazas o vaso de plstico
Licuadora
Una cuchara plstica para medir y mezclar
Papel filtro de caf N 2 (conos)
20 ml de agua destilada
Shampoo de color claro
1 pltano
Sal de mesa.
1 pipeta de transferencia plstica o un gotero mdico
1 tubo de ensayo sellado que contenga 95% de etanol
1 conservadora con hielo para enfriar los tubos con alcohol
1 varilla de vidrio o 1 pipeta Pasteur
Procedimiento para la extraccin del ADN
Preparar una solucin de pltano procesada con sal, agua destilada y shampoo (detergente)
mediante los siguientes pasos:
1. En una licuadora, mezclar un pltano por taza de agua destilada (250ml).
2. Licuar por 15-20 segundos, hasta que la solucin se mezcle.
3. En una taza, preparar una solucin consistente en una cucharadita de t de shampoo y
dos pizcas de sal.
4. Agregar 20 ml (4 cucharaditas) de agua destilada.
5. Disolver la sal y el shampoo revolviendo lentamente con la cuchara de plstico evitando
formar espuma.
6. A la solucin preparada en el paso 3, agregar tres cucharaditas de t de la mezcla de
pltano del paso 1.
7. Mezclar la solucin con la cuchara por 5-10 minutos.
8. Mientras uno de los miembros del grupo mezcla la solucin de pltano, otro miembro
pondr el filtro N 2 de caf dentro de otra taza de plstico. Doblar el borde del filtro
alrededor de la taza para que el filtro no toque el fondo de la taza.
9. Filtrar la mezcla vertindola dentro del filtro y dejar que la solucin drene por algunos
minutos hasta que sean 5 ml aproximadamente de filtrado para testear.
10. Tomar un tubo de ensayo con alcohol fro. Para mejores resultados el alcohol debe estar
tan fro como sea posible.
11. Llenar la pipeta plstica con la solucin de banana y agregarla al alcohol. El ADN no es
soluble en alcohol. Cuando el alcohol se agrega a la mezcla, los componentes, excepto
el ADN, permanecen en la solucin mientras el ADN precipita en la capa de alcohol.
12. Dejar la solucin reposar por 2 a 3 minutos sin mover. Es importante no batir el tubo de
ensayo. Se puede observar el ADN blanco el cual precipita en la capa de alcohol.
13. Cuando se obtienen buenos resultados, habr suficiente ADN para levantar con una
varilla de vidrio (el ADN se enrolla a la varilla). O usando una pipeta de Pasteur que
haya sido calentada en la punta para formar un gancho, se puede recuperar (tomar) algo
de ADN. El ADN tiene la apariencia de mucus blanco y fibroso.



Preguntas para el anlisis de la experiencia
1. Por qu se puede suponer que el pltano contiene ADN? Dnde se encuentra
ese ADN?
2. Qu otro tipo de sustancias es posible encontrar entre los componentes del
pltano?
3. Cul es la funcin del detergente en la experiencia?
4. Cul es la funcin de la sal en la experiencia?
5. Cul es la funcin del alcohol en la experiencia?
6. Al finalizar la experiencia se obtiene un mucus blanco y fibroso que sera el
ADN. Es posible que la molcula de ADN se visualice a simple vista? Por
qu?
7. A partir de la respuesta anterior, qu creen que contiene el ADN obtenido en
la experiencia?
8. Se podra utilizar otros alimentos para extraer ADN? En tal caso, cules
podran ser esos alimentos?
9. Se podra decir, entonces, que comemos genes?
10. Qu ocurre con el material gentico que se consume?


Extraccin de ADN

Objetivo
Utilizar unas sencillas tcnicas para poder extraer el ADN de un producto natural
Observar la estructura fibrilar del ADN.
Introduccin
ADN es la abreviatura del cido desoxirribonucleico (en ingls, DNA). Constituye el material
gentico de los organismos. Es el componente qumico primario de los cromosomas y el
material del que los genes estn formados.
Materiales Productos
Vasos de precipitados o vasitos de
plstico.
Tubos de ensayo
Un cuchillo
Palitos de pinchos
Una batidora
Cebolla grandes frescas
Kiwis
Agua destilada
Detergente lavavajillas
Sal
Zumo de pia o de papaya
Alcohol de 96 muy fro

Realizacin prctica
1.- Cortamos la zona central de la cebolla en dados
2.- En un vaso de agua echamos 3 cucharaditas de detergente
lavavajillas y una de sal y aadimos agua destilada hasta llenar
el vaso.
3.- Mezclamos esta solucin con los trozos de cebolla
4.- Licuamos el conjunto, con la batidora, a velocidad mxima
durante 30 segundos
5.- Filtramos el lquido obtenido con un filtro de caf.
6.- Llenamos un cuarto de un tubo de ensayo con la disolucin
filtrada.
Aade otro tanto de zumo de pia y mezclamos bien.
7.- Aadimos un volumen de alcohol muy fro equivalente al del
filtrado, cuidadosamente, hacindolo resbalar por las paredes
del vaso para que forme una capa sobre el filtrado.
8.- Dejamos reposar durante 2 3 minutos hasta que se forme
una zona turbia entre las dos capas. A continuacin
introducimos la varilla y extraemos una maraa de fibras
blancas de ADN.



Precauciones
Cuando aadas el alcohol fro debes hacerlo de forma que resbale por las paredes del
tubo para que forme una capa sobre el filtrado. Puedes utilizar la varilla de vidrio o una
cucharilla para ayudarte.



Explicacin cientfica

ADN en la interfase
agua-alcohol

La extraccin de ADN requiere una serie de etapas
bsicas. En primer lugar tienen que romperse la pared
celular y la membrana plasmtica para poder acceder al
ncleo de la clula. A continuacin debe romperse
tambin la membrana nuclear para dejar libre el ADN.
Por ltimo hay que proteger el ADN de enzimas que
puedan degradarlo y para aislarlo hay que hacer que
precipite en alcohol.
La solucin de lavavajillas y sal ayudada por la accin de
la licuadora es capaz de romper la pared celular y las
membranas plasmtica y nuclear.
Los zumos de pia y papaya contienen un enzima, la
papana, que contribuye a eliminar las protenas que
puedan contaminar el ADN.
El alcohol se utiliza para precipitar el ADN que es soluble
en agua pero, cuando se encuentra en alcohol se
desenrolla y precipita en la interfase entre el alcohol y el
agua.

Curiosidades y otras cosas
El ADN fue identificado inicialmente en 1868 por Friedrich Miescher, bilogo suizo, en los
ncleos de las clulas del pus obtenidas de los vendajes quirrgicos desechados y en el
esperma del salmn. l llam a la sustancia nuclena, aunque no fue reconocida hasta 1943
gracias al experimento realizado por Oswald Avery
La estructura del ADN es una pareja de largas cadenas de nucletidos. La estructura de doble
hlice del ADN fue descubierta en 1953 por James Watson y Francis Crick. Una larga hebra de
cido nucleico est enrollada alrededor de otra hebra formando un par entrelazado. Dicha
hlice mide 3,4 nm de paso de rosca y 2,37 nm de dimetro, y est formada, en cada vuelta,
por 10,4 pares de nucletidos enfrentados entre s por sus bases nitrogenadas.
Slo tenemos un 30% ms de genes que un diminuto gusano, el cual tiene solo un milmetro
de longitud y posee 959 clulas, en tanto que nosotros alrededor de 100 billones. Y mientras
que los seres humanos poseemos aproximadamente 100.000 millones de neuronas, el
diminuto gusano cuenta nicamente con 302.
En comparacin con el arroz nos va an peor, puesto que un grano de arroz tiene muchos ms
genes que una persona, y todava no se le ha ocurrido ni la ms tonta de las ideas.


ADN

Estructura en donde se encuentra la informacin gentica, y cuya funcin es almacenar
las instrucciones para la sntesis de molculas de RNA de secuencias especficas de
nucletidos. Se le puede encontrar en cloroplastos, mitocondrias, cromosomas y como
plsmidos. Est formado por una cadena doble de nucletidos, cada uno de los cuales
contiene: azcar desoxirribosa, bases nitrogenadas ( adenina, citosina, guanina, timina ),
radical fosfato Los nucletidos se unen formando largas cadenas, en un orden y
proporcin determinados.
Casi todo el ADN de las clulas se localiza en el interior del ncleo. Las molculas de
ADN componen los genes, que contienen las instrucciones codificadas qumicamente
para la produccin de casi todas las protenas que necesitaran las clulas. El ncleo
regula la sntesis de protenas al enviar molculas de RNA mensajero, que son copias de
partes de los genes que codifican protenas a travs de la membrana nuclear en direccin
al citoplasma. El ADN se asocia con las protenas y forma un complejo denominado
cromatina. Las molculas de ADN son largas y delgadas de modo que deben estar
empaquetadas en el ncleo con suma regularidad.
cidos nucleicos
Son biomolculas orgnicas formadas por largas cadenas de nucletidos. Tienen como
funcin el almacenar la informacin gentica para el funcionamiento y desarrollo del ser
vivo. Existen dos tipos de cidos nucleicos: el ADN (cido desoxirribonucleico) y el
ARN (cido ribonucleico).






















Como extraer tu propio ADN

Ingredientes Material
Detergente lava vajillas (que no sea antimicrobiano) 3 cucharas soperas
Agua 3 vasos de precipitados
Alcohol 1 matraz erlenmeyer
Sal

Procedimiento
1) Poner una cucharada de agua en un vaso de precipitados, con esa agua enjugarse por
un lapso de 30 segundos. Regresar el agua al vaso de precipitados.
2) En otro vaso de precipitados agregar cucharada de sal y agregar 100 ml de agua,
agitar hasta obtener una disolucin.
3) Hacer otra disolucin con el detergente liquido de lava vajillas y agua en la siguiente
proporcin 1:3 (agregar 1 cucharada de detergente y 3 cucharadas de agua)
4) Agregar una cucharada de la disolucin de agua con sal, y una cucharada de la
disolucin de detergente con agua al vaso donde est el agua con la que te enjuagaste
la boca.
5) Agregar el alcohol muy lentamente por las paredes hasta formar una pelcula muy
delgada entre nuestra mezcla inicial y el alcohol.

El alcohol queda en la parte superior formando una delgada capa entre la cual
observaremos pequeas burbujas y cerca de estas unos hilillos blancos (ese es nuestro ADN)

ADN
A nivel molecular somos muy simples, pues todos los seres vivos que pueblan la tierra
estn compuestos por un pequeo nmero de molculas. De hecho, la materia viva consiste
principalmente en largas molculas en las cuales un determinado patrn se repite una y otra
vez, en ocasiones con pequeas variaciones. Adems, algunas de ellas se pliegan de manera
elaborada, compleja y extremadamente precisa.
Esto les permite actuar como catalizadores, acelerando la velocidad de las reacciones
qumicas. A dichos catalizadores se les llama enzimas.
En esencia, podemos agrupar las molculas de la vida en cuatro grupos: azcares (que
aportan la energa), lpidos (cuya funcin es principalmente estructural, como la formacin de
membranas), protenas (que proporcionan la maquinaria que permite el funcionamiento
celular) y cidos nucleicos(que portan la informacin).

Resulta sorprendente lo extraordinariamente selectiva que ha demostrado ser la vida a
la hora de escoger las molculas. Por ejemplo, del enorme nmero de aminocidos posibles
slo utiliza 20. Y si una protena tpica contiene del orden de un centenar de aminocidos,
entonces podramos construir al menos 20
100
, un nmero muchsimo mayor que el de tomos
de nuestra galaxia. Sin embargo, la mayora de los organismos vivos usan menos de 100.000
tipos de protenas.

Una de las propiedades bsicas de la vida es su habilidad para reproducirse a s misma.
A pesar de toda la diversidad que observamos, a nivel molecular la reproduccin de todos los
organismos sigue el mismo plan: un cierto tipo de polmero -un cido nucleico- con forma de
doble hlice, el ADN, gobierna el proceso a travs de un mecanismo de "molde".
Eslabones de informacin

Los eslabones con los que se construye el ADN se llaman nucletidos, y estn
compuestos nicamente de un azcar, un fosfato y uno de cuatro posibles carbohidratos
llamados bases nitrogenadas. Podran haberse utilizado muchas, pero la vida, otra vez, ha sido
selectiva y slo utiliza la adenina (A), guanina (G), citosina (C) y timina (T). Son las cuatro
letras de nuestro cdigo gentico.

El ADN es donde se conserva y quien transmite la informacin biolgica. Pero hay otro
tipo de cido nucleico, el ARN, fundamental para la supervivencia del individuo: se encarga
principalmente de articular las instrucciones contenidas en el ADN, como la sntesis de
protenas.

Explicar de dnde vino toda esta organizacin es uno de los grandes retos del siglo XXI.
Para hacernos una idea de nuestra ignorancia: no tenemos ni idea de cmo, a partir de los
ladrillos bsicos de la vida -como los aminocidos o las bases de los cidos nucleicos-
aparecieron el ARN, el ADN. Ni, por supuesto, cmo apareci la primera clula.
El sexo

Los helechos actuales son bsicamente iguales a los de hace cientos de millones de
aos. Lo mismo ocurre en el caso de los xifosuros ?tambin conocidos como las cacerolas de
las Molucas?, las tortugas marinas o los cocodrilos. Aunque hay especies que han
evolucionado rpidamente. Un ejemplo es la nuestra, a la que acompaan el caballo o el
elefante.

Esencialmente las especies evolucionan porque se producen "errores" en la copia de
la macromolcula base de la vida, el ADN. Sin embargo, si la evolucin dependiera
nicamente de las mutaciones sera aburridamente tarda. Pero la mayora de los seres vivos
descubrieron hace entre 1.700 y 1.500 millones de aos un mecanismo maravilloso capaz de
producir una gran variedad de combinaciones genticas en cada generacin: el sexo.

Adems de mover el mundo, el sexo ha sido fuente de diversidad, pues con la
reproduccin sexual los genes de los padres se combinan y recombinan en cada generacin
produciendo una configuracin gentica nica. El sexo baraja las cartas del genoma y permite
probar multitud de combinaciones que slo por mutacin hubieran llevado millones de aos.
Claro que tiene sus inconvenientes. El mayor es la prdida de la inmortalidad. Si nos
reprodujramos asexualmente, con cada divisin produciramos clones de nosotros mismos.
Salvando las inesperadas y escasas mutaciones, seramos como las bacterias, que se
mantienen prcticamente tal como eran hace miles de millones de aos. El sexo nos hace
mortales.