Colegio Jos Agustn Gmez Fecha: 6 de Junio de 2014

Secto: !iologa
"o#esoa: Cala $ais Sil%a
GUIA DE REPLICACIN DEL ADN
Para el mecanismo de replicacin existen 3
hiptesis:
1. Conservativa: cuando el ADN doble hlice
se replica se producen dos dobles hlices, una
tiene las dos hebras viejas se conserva! " la
otra doble hlice posee ambas hebras nuevas.
#. Semiconservativa: las dos dobles hlices
recin sinteti$adas poseen una hebra vieja una
mitad vieja! " otra hebra nueva mitad nueva!.
3. Dispersiva: el ADN doble hlice se rompe
" ori%ina dos dobles hlices, cada una de ellas
con hebras &ue poseen precursores viejos "
nuevos en di'erentes proporciones.
(l proceso de replicacin semiconservativa se
basa en las con'irmaciones de )atson " *ric+,
&ue el material %entico ten,a una capacidad
para hacer copias exactas de s, mismo. (ste
proceso consiste en &ue la molcula de ADN abre sus cadenas separando las bases nitro%enadas a nivel
de los puentes de hidr%eno, de esta 'orma las cadenas act-an como moldes diri%iendo la s,ntesis de
una nueva cadena complementaria a lo lar%o de toda su extensin.
.i ha" una timina /! en la cadena anti%ua, debe encontrarse una adenina A! en la cadena nueva, es
decir, una base p-rica con una pirimidica. De este modo, cada cadena 'orma una copia de su cadena
complementaria ori%inal, produciendo dos replicas exactas de la molcula.
EXPERIMENTO DE MESELSON Y STAHL: HORQUILLA DE REPLICACIN
0eselson " .tahl &uisieron comprobar el modelo de replicacin semiconservativa, para ello utili$aron
istopos de nitr%eno. *ultivaron (. coli durante varias %eneraciones en un medio slo con
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N, de este
modo el ADN de las bacterias conten,a una %ran proporcin de nitr%eno pesado, lue%o tomaron una
muestra " lo colocaron con nitr%eno liviano
12
N " lue%o de replicarse se centri'u% la muestra del ADN de
stas clulas.
*ada nueva muestra de ADN conten,a m3s ADN liviano &ue el anterior, "a &ue el ADN recin 'ormado
ten,a &ue incorporar el
12
N disponible. Adem3s la densidad del ADN de la primera %eneracin era
exactamente intermedia entre la densidad del ADN pro%enitor pesado " la del ADN liviano com-n, como
resultar,a si cada molcula estuviera 'ormada por una cadena vieja pesada! " una cadena nueva
liviana!, lo &ue con'irma la hiptesis de la replicacin semiconservativa.

MECANISMO DE REPLICACIN
4a replicacin es el proceso &ue
permite la 'ormacin de nuevas
copias de la in'ormacin %entica a
partir de una molcula patrn,
ocurre en la 'ase . del ciclo celular
" la velocidad de replicacin es
ma"or en procariontes &ue en
eucariontes.
4os cromosomas eucariontes
tienen una %ran cantidad de ADN,
el cual se halla contenido en dos
molculas lineales, una para cada
crom3tida. .i estas molculas se
replicasen a partir de un sitio -nico
de ori%en, la etapa 5.6 de la
7nter'ase ser,a extremadamente
lar%a.
4a replicacin del ADN se inicia en
numerosas secuencias de
nucletidos llamadas origen de
replicacin, los cromosomas
procariontes tienen un solo ori%en
de replicacin8 en los eucariontes,
existen entre #9 a :9 ori%enes por
cada la$o de cromatina (l ADN es
sinteti$ado en direccin 1; a 3; "
comien$a cuando la topoisomerasa
desenrolla el ADN " la helicasa
rompe los puentes de hidr%eno
abriendo las cadenas del ADN en
el ori%en de replicacin 'ormando la
!r!"a de replicacin &ue aumenta de tama<o a medida &ue
se separan las cadenas hasta 'ormar una estructura en =
denominada #or$!illa de replicacin% cu"os bra$os representan
a las cadenas "a separadas de ADN " el tronco la doble hlice en
v,as de separacin. As, cada burbuja tiene dos hor&uillas de
replicacin &ue a partir de un punto de ori%en com-n avan$an en
direcciones opuestas. 4as hor&uillas desaparecen cuando se van
inte%rando a las burbujas conti%uas.
4a replicacin avan$a en 'orma bidireccional, por&ue la s,ntesis "
las dos hor&uillas de replicacin se producen en direcciones
opuestas desde un -nico ori%en.
(l se%mento de ADN &ue se sinteti$a a partir de un ori%en de replicacin con sus dos hor&uillas!, lo
llamamos replicn. De este modo la replicacin del ADN termina cuando se ensamblan los sucesivos
replicones. (sto permite &ue el ADN se sintetice en un tiempo bastante breve para el ciclo de vida de una
clula.
(l desenrollamiento es reali$ado por las en$imas ADN&#elicasas, las cuales recorren la hlice
desenrollando las hebras del ADN a medida &ue avan$an. >na ve$ separadas, las cadenas se combinan
con las prote'nas SS(, llamadas tambin prote,nas desestabili$adoras, &ue evitan &ue se vuelva a
enrollar el ADN.
A medida &ue la en$ima helicasa abre la doble hlice,
dos en$imas complementarias: la topoisomerasa I " la
topoisomerasa II o girasa% van disminu"endo la
tensin torsional acumulada por el superenrollamiento
en el sector no replicado de la doble hlice, utili$an
ener%,a del A/P " se comportan como n!cleasas
cortando las cadenas de ADN! " lue%o como ligasas
restableciendo las uniones 'os'odister!.
? /opoisomerasa 7: corta una de las cadenas " reali$a
desenrollamientos de corto alcance
? /opoisomerasa 77: corta las dos cadenas " abarca una extensin de ADN bastante ma"or
4as ADN?polimerasas slo pueden actuar en direccin 1@ 3@. A medida &ue se separan las cadenas
pro%enitoras en la hor&uilla de replicacin, una presenta sus nucletidos en direccin 1@ 3@ " la otra
en direccin 3@ 1@. (ntonces la primera al ser copiada deber,a 'ormar una cadena hija en sentido 3@
1@, al%o &ue las polimerasas no pueden hacer.
4as clulas solucionan esta situacin de la si%uiente 'orma:
4a cadena hija &ue se 'orm en direccin 1A 3@ se constru"e en 'orma continua " la otra cadena hija
es sinteti$ada de manera discontinua, en pe&ue<os tramos, llamados 'ra%mentos de B+a$a+i, los cuales
se unen entre s, a medida &ue se sinteti$an, por accin de la en$ima ADN&ligasa. (ntonces la s,ntesis
del ADN es bidireccional, no slo por&ue se produce en dos direcciones diver%entes a partir de una
misma burbuja de replicacin, sino tambin por&ue las cadenas de la doble hlice son sinteti$adas en
direcciones opuestas.
4a s,ntesis comien$a con el ADN molde " la en$ima ACN primasa sinteti$a un ceador o primer &ue es
una pe&ue<a cadena de ACN de unos die$ nucletidos de lar%o " es una secuencia de inicio &ue se
ubica en el extremo 3; indicando el lu%ar donde comien$a la 'ormacin de la nueva cadena mediante la
en$ima ADN polimerasa. >na ve$ sinteti$ado el cebador la s,ntesis contin-a si la ADN?polimerasa tiene
disponibles su'icientes desoxirribonucletidos tri'os'atados dA/P, dD/P, d**P " d//P!. Dran parte de
la ener%,a re&uerida durante la replicacin la aportan los desoxirribonucletidos tri'os'atados, &ue
hidroli$an los -ltimos dos %rupos 'os'ato liberando ener%,a! cuando se unen entre s,.
4a cadena &ue se sinteti$a en direccin 1; 3; lo hace en 'orma continua, en cambio la cadena &ue se
sinteti$a en direccin 3; 1; lo hace en 'orma discontinua, sinteti$3ndose cortos 'ra%mentos de ADN
en sentido opuesto, siempre en direccin 1;E 3;, &ue despus son unidos por una ADN li%asa
posteriormente el cebador es removido por la ADN pol 7 " es reempla$ado por ADN. 4a cadena &ue se
sinteti$a en 'orma continua se denomina cadena adelantada " la cadena sinteti$ada en 'orma
discontinua se llama cadena re)agada.
Al iniciarse la s,ntesis continua del ADN, en cada ori%en se 'orman dos ceadores orientados
diver%entemente uno en cada cadena de la doble hlice " a continuacin la ADN&polimerasa catali$a la
s,ntesis de la cadena continua a%re%ando nucletidos en el extremo 3@ de la hebra en 'ormacin. 0ientras
tanto los cebadores son removidos por una n!cleasa reparadora " su lu%ar es reempla$ado por un
'ra%mento de ADN e&uivalente sinteti$ado por la ADN&polimerasa . As, la cadena continua re&uiere un
solo cebador &ue se 'orma a comien$o de la replicacin, en cambio la cadena discontinua necesita
muchos cebadores, uno para cada 'ra%mento de B+a$a+i.
CORRECCION DE ERRORES
4os errores en la s,ntesis de prote,nas pueden 'avorecer a la supervivencia de la especie, sin embra%o, a
corto pla$o es necesario reparar " conservar esta in'ormacin. *uando se comete un error, la ADN
polimerasa 777 retrocede " elimina los nucletidos hasta encontrar a&uel &ue est correctamente apareado
cuando la en$ima reali$a esta 'uncin se dice &ue tiene actividad de exonucleasa 3; a 1;!. Al alcan$ar el
-ltimo nucletido bien apareado, detiene su movimiento de retroceso " reinicia el movimiento a%re%ando
nucletidos en direccin 1; a 3; a la cadena en crecimiento. .i este control 'alla, &ueda un nucletido mal
apareado, lo &ue se denomina m!tacin &ue al no ser corre%idas por la ma&uinaria de reparacin, se
acumulan a lo lar%o de la vida del individuo lo &ue puede convertirse en un c3ncer.
Correccin mediante n!cleasa reparadora
*onsiste en remover los nucletidos errneos mediante una n!cleasa reparadora, la cual corta la unin
'os'odister &ue conecta al nucletido incorrecto con el nucletido conti%uo, despus la ADN pol II
sinteti$a el 'ra%mento 'altante " en la ADN ligasa une a esa pie$a al ADN cortado. Debe existir al%una
se<al &ue le permita a la nucleasa reparadora distin%uir cual de las dos cadenas del ADN se encuentra el
nucletido incorrecto.
S'ntesis de #istonas
(l ADN se replica en 'orma semiconservativa, las cadenas de la doble hlice pro%enitora, al separarse
para su replicacin, se comparten por i%ual en ambos cromosomas hijos. (n cambio no se sabe como se
se%re%an las histonas, puede ser &ue al cabo de la replicacin sean heredadas totalmente por uno de los
cromosomas hijos, en este caso el otro cromosoma hijo debe procurarse de la totalidad de histonas
nuevas. 4as histonas se sinteti$an en su ma"or parte durante la 'ase 5.6 de la inter'ase " se incorporan al
cromosoma apenas es duplicado el ADN.
Replicacin en Procarione!
(n las bacterias casi todo el ADN se encuentra 'ormando una cadena circular, en cambio en los
eucariontes cada cromosoma no duplicado contiene una cadena lineal asociada a una %ran cantidad de
prote,nas " al%o de ACN.
(n procariontes al existir un *nico p!nto de origen se 'orma slo un ori%en de replicacin. A&u, act-an
tres ADN?polimerasas:
ADN&polimerasa I, es la &ue elimina el cebador " reempla$a los ribonucletidos por
desoxirribonucletidos, rellenando los espacios dejados por la ADN?polimerasa 77. Adiciona 19
nucletidosFse%.
ADN&polimerasa II, tiene actividad de nucleasa, retira
nucletidos de la cadena de ADN en los sitios donde se
produjeron errores o desemparejamientos.
ADN&polimerasa III% es la en$ima responsable de alar%ar
las cadenas en el proceso de replicacin. Adiciona 199
nucletidosFse%.
+UNCI,NES DE LAS ADN&P,LI-ERASA EN E. C,LI
Poli. 7 " Poli. 777
? .,ntesis de ADN en sentido 1@ 3@
? (xonucleasa en sentido 3@ 1@
? *orreccin de errores, removiendo
nucletidos en sentido 1@ 3@
Poli. 7 ? (xonucleasa en sentido 1@ 3@
PRINCIPALES EN.I-AS /UE AC0UAN EN LA REPLICACIN
(n$imas Ceacciones &ue catali$an
ADN?polimerasa 7 procariontes!
(limina el cebador, reempla$ando los
ribonucletidos por desoxirribonucletidos. Cellena
los huecos del ADN.
ADN?polimerasa 77 procariontes! Nucleasa, corri%e errores.
ADN?polimerasa 777 procariontes!
Principal en$ima de la replicacin. .inteti$a la
cadena nueva a partir del cebador. Ceali$a
correccin de pruebas.
ADN?polimerasa eucariontes
.inteti$a los 'ra%mentos de ADN discontinuos a
partir del cebador.
ADN?polimerasa eucariontes!
Cellena los huecos dejados por el cebador " repara
errores como un se%undo sistema de reparacin.
ADN?polimerasa eucariontes!
.inteti$a la hebra continua a partir del cebador "
reali$a lecturas de prueba.
Gelicasas
Compen los puentes de hidr%eno, separando las
cadenas del ADN.
Primasas .inteti$an el primer o cebador.
Prote,nas ..H
.e extienden sobre las hebras del ADN evitando
autoapareamientos entre las bases libremente
expuestas
/opoisomerasas 7 " 77 *orri%en el superenrollamiento
AC0I1IDADES
A partir de la in'ormacin entre%ada en la %u,a " con el material de apo"o investi%ado por usted responda:
1. I*u3l es el aporte del experimento reali$ado por 0eselson " .tahl con respecto a la replicacin del
ADNJ
?Demostraron &ue el ADN es semiconservativo
#. Describa la propuesta sobre el mecanismo de replicacin del ADN de )atson " *ric+
? Propusieron &ue el ADN era semiconservativo, por&ue el material %entico pod,a hacer copias exactas
de s, mismo abriendo sus cadenas separando las bases nitro%enadas, para &ue las cadenas actuaran
como moldes diri%iendo la s,ntesis de una nueva cadena complementaria a lo lar%o de toda su extensin.
3. IPor &u es una replicacin semiconservativaJ
?Por&ue al momento de terminar de sinteti$arse, las # molculas idnticas resultantes van a poseer una
hebra del ADN ori%inal " una nueva.
2. *omplete el cuadro, indicando la 'uncin de cada en$ima
En)imas +!ncin
G(47*A.A Compen los puentes de hidr%eno, separando las cadenas de
ADN
/BPB7.B0(CA.A *orri%en el s-per enrollamiento
Prote,na ..H (vitan el auto apareamiento entre las bases libremente
expuestas
ADN polimerasas ADN pol 7 : Cellena los huecos del ADN.
ADN pol 77 : retira nucletidos de la cadena de ADN en los
sitios donde se produjeron errores o desemparejamientos.
ADN pol 777: alar%a las cadenas en el proceso de replicacin.
ACN primasa sinteti$a un ceador o primer2indica el l!gar donde empie)a
la replicacin3
ADN li%asa >ne el 'ra%mento de nucletidos al ADN cortado.
1. I*u3l es la importancia de la replicacin de ADNJ
?4a importancia es &ue al %enerar las dos molculas de ADN las clulas hijas &ue se %eneren a travs de
la divisin celular sean idnticas " no &ueden con la mitad de material %entico.
K. IPor &u se dice $!e las dos cadenas de ADN son antiparalelas4
-porque unas van en un sentido, es decir 3' a 5' y la cadena complementaria va de 5' a 3', es decir, en un
sentido opuesto
L. IA &u se denomina cebador o MprimerM " cmo 'uncionaJ
?Por&ue es el lu%ar donde comien$a la replicacin, es una cadena de aproximadamente 19 nucletidos
&ue sinteti$a la en$ima ACN primasa.
:. IA &u se re'ieren las expresiones 1A " 3AJ
? 5' se refiere al extremo de la cadena donde est el fosfato del nucletido, y 3' al extremo de la cadena
donde est el OH del azcar del nucletido, en este OH es donde se pega el fosfato del nucletido
siguiente as que la direccin de sntesis de una nueva cadena de ADN se hace en sentido 5' a 3
N. Descria las caracter'sticas de los 5ragmentos de ,6a)a6i
? son fragmentos de ADN que se forman en la replicacin , un lado de la cadena de ADN se duplica en
forma continua y la otra cadena en fragmentos despus se unen los fragmentos y forman la cadena lineal
y se unen a la otra cadena.
19. IA &u estructuras se denomina burbuja " hor&uilla de replicacinJ
Hurbuja se le llama a el espacio
11. /anto en procariontes como en eucariontes la iniciacin de la replicacin del DNA re&uiere ciertos
componentes. I*u3les sonJ
1#. Nombre " caracterice la 'uncin de las en$imas participantes de la reparacin de errores
13. Cealice un cuadro comparativo con 2 di'erencias entre replicacin en procariontes " eucariontes
12. indi&ue la 'uncin de los desoxirribonucletidos tri'os'atados