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univorsidado do Minho

lscc|a dc lugcu|ar|a
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Monitorizao o An|iso do
lmagom do um koactor boscontinuo
8oquoncia| do Lamas Activadas
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8|ctccuc|cg|a lugcu|ar|a dc 8|crcccsscs
raba||c ctcctuadc scb a cr|cutac
Profossor boutor ugnio Manuo| do Faria Camos Forroira
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Profossora boutora Maria A|ico 2arur Coo|ho
Agcstc dc 006 2




































































AUTORIZADA A REPRODUO INTEGRAL DESTA TESE/TRABALHO
APENAS PARA EFEITOS DE INVESTIGAO, MEDIANTE DECLARAO
ESCRITA DO INTERESSADO, QUE A TAL SE COMPROMETE.


Universidade do Minho, ___/___/______


Assinatura: __________________________________________________



























ao Pedro
aos meus pais: Jlia e Francisco


AGRADECIMENTOS
AGRADECIMENTOS

Gostaria de expressar a minha gratido a vrias pessoas que acompanharam a
elaborao deste trabalho.
Ao orientador, Professor Doutor Eugnio Ferreira, pelo incentivo na realizao
deste trabalho, pelo apoio e amizade demonstrada durante 2 anos de trabalho em
conjunto, e pela coordenao e sugestes sempre pertinentes para a realizao da
dissertao.
co-orientadora, Professora Doutora Alice Coelho, pela recepo calorosa na
Universidade Federal do Rio de J aneiro, pela coordenao no laboratrio, pela amizade
e pelas sugestes sempre importantes para a realizao de um trabalho interessante.
Ao Lus Amaral uma palavra de apreo e gratido, pois sem ele seria impossvel
a compreenso dos programas de anlise de imagem dos flocos.
Ao Professor Doutor J os Teixeira, director do Mestrado em Biotecnologia,
pelos ensinamentos durante a licenciatura em Engenharia Biolgica e por ter aceite a
minha candidatura ao Mestrado em Biotecnologia.
Professora Belkis Valdman, directora da Escola de Qumica, pela
simplicidade e simpatia na recepo.
A todos os professores da ps-graduao em Biotecnologia do Departamento de
Engenharia Biolgica, pela simpatia e pelos ensinamentos prestados.
s professoras de ps-graduao da Universidade Federal do Rio de J aneiro
Professora Doutora Magalli, Professora Doutora Ldia, Professora Doutora Selma e
Professora Doutora Andreia pelos ensinamentos nas suas disciplinas e pela simpatia que
sempre demonstram.
A todos os colegas do grupo BIOSE (Biological Sistems Engineering) da
Universidade Federal do Rio de J aneiro, principalmente aos alunos de ps-graduao,
Priscilla Filomena, Etel, Priscilla Finotelli, Yovanka e Clarice, que me proporcionaram
um excelente ambiente de trabalho e pela amizade que sempre demonstraram. Adoro
vocs!
A todos os amigos do Departamento de Engenharia Biolgica da Universidade
do Minho, Ana Lusa, Flvio, Ctia, Aninha, Ricardo, D. Sameiro e Sr. Santos, pelos
bons momentos que me proporcionaram desde a chegada do Brasil.

v
AGRADECIMENTOS
Roberta por todos os bons momentos durante os nove meses passados no Rio
de J aneiro. Obrigada pelos passeios e pela amizade!
Aos meus pais e ao Pedro agradeo tudo, desde a confiana que sempre
depositaram em mim, a pacincia nos momentos de preocupao e ainda o carinho que
foi extremamente importante durante estes dois anos de mestrado. Amo-vos muito!


vi
SUMRIO

MONITORIZAO E ANLISE DE IMAGEM DE
UM REACTOR DESCONTNUO SEQUENCIAL
DE LAMAS ACTIVADAS

SUMRIO

Este trabalho incidiu na monitorizao de um Reactor Descontnuo Sequencial
escala laboratorial e na anlise de imagem do biosistema, perturbado com concentraes
crescentes de sal. Aps a adaptao microbiana, foi avaliado o processo de nitrificao
atravs das remoes de azoto amoniacal, bem como a remoo de matria orgnica em
termos de CQO, sob adies crescentes de NaCl (0,5 % a 6,0 %). Efectuou-se tambm o
acompanhamento de nitrato e de fosfato do sistema. Pretendeu-se avaliar a
sedimentabilidade das lamas atravs da determinao do ndice volumtrico de lamas e
da turbidez. As ferramentas de anlise de imagem foram utilizadas no processamento
das imagens adquiridas durante as perturbaes do sistema e permitiram determinar
vrios parmetros estruturais e morfolgicos. A partir de tcnicas de estatstica
multivarivel foi possvel aferir quais os parmetros preponderantes na avaliao da
sedimentao das lamas.

Para este estudo, adoptou-se uma estratgia de enchimento por pulsos visando a
obteno de elevadas percentagens de remoo de azoto amoniacal do efluente,
minimizando as concentraes inibitrias para os microrganismos no interior do reactor.
As imagens captadas no final de cada teste foram submetidas a um programa de
processamento (IMAGE J) e posteriormente a outro programa de determinao de
parmetros estruturais e morfolgicos dos agregados microbianos (MATLAB).

Verificou-se que o sistema biolgico adoptado eficiente no tratamento de
efluentes industriais. Contudo, aps a adio de elevadas concentraes de sal o sistema
sofre algumas perturbaes devido variao da fora inica do meio que provoca a
plasmlise celular e consequentemente a desfloculao da biomassa indicada pelo
aumento da turbidez do efluente. Os resultados de turbidez correlacionam-se com os
slidos suspensos volteis. Verificou-se tambm que o ndice volumtrico de lamas
deve ser complementado pela anlise da turbidez do efluente de forma a estimar
correctamente as caractersticas morfolgicas e de sedimentabilidade dos agregados
microbianos.

De referir ainda que com o aumento da concentrao de NaCl no se verificaram
alteraes significativas nas vrias classes de tamanhos estudadas. A anlise dos
mnimos quadrados parciais no permitiu a previso do ndice volumtrico de lamas
nem de turbidez baseando apenas este estudo na morfologia e estrutura da biomassa
agregada, pois existe uma grande quantidade de biomassa dispersa no sistema.



vii
ABSTRACT

MONITORING AND IMAGE ANALYSIS OF AN
ACTIVATED SLUDGE SEQUENCING BATCH
REACTOR

ABSTRACT

The aim of the present work was to evaluate the performance of a Sequencing
Batch Reactor through its monitoring and the activated sludge image analysis, disturbed
with saline wastewater. After the sludge adaptation, it was observed ammonia removal
rate related to the nitrification process and the organic load removal (expressed in COD)
with increasing of NaCl concentration (0,5 % to 6,0 %). The nitrate and phosphate
concentrations were also accompanied during this study. The sludge settleability was
evaluated through the sludge volume index and turbidity determination. Several
morphological and structural parameters of the activated sludge flocs were estimated by
image analysis techniques and correlated with the settleability parameters. Multivariable
statistical techniques were employed to determine the relationships between the
aggregates and the operating parameters, survey the preponderant parameters in the
evaluation of the sludge settleability.

For this study, a filling strategy with symmetric pulses was employed to improve
ammonia removal efficiency, minimizing the inhibitory concentrations for conventional
microorganisms inside the reactor. The activated sludge images acquired at the end of
each test were submitted to processing software (IMAGE J) and afterwards applied to
the software responsible for the structural and morphologic parameter determination
(MATLAB).

It was verified that the biological system adopted is efficient for industrial
wastewater treatment. However, after the addition of high salt concentrations this
system is disturbed due to ionic strength variation that causes cellular plasmolysis and
biomass deflocculation showed by the increase in effluent turbidity. Turbidity results
have been shown to correlate quite well with the volatile suspended solids. It was also
found that the sludge volume index evaluation must be complemented by turbidity
analyses to correctly assess the morphological and settleability characteristics of the
aggregated biomass.

Furthermore, no significant changes for all the studied classes were found with
the increase on NaCl concentration. The multivariate partial least squares analysis did
not allow for reliable sludge volume index or turbidity predictions based solely on the
aggregated biomass morphology data or contents, given the high dispersed bacteria
contents in the sludge.



viii
NDICE GERAL

NDICE GERAL

NDICE GERAL .......................................................................................................... IX
NDICE DE FIGURAS................................................................................................ XI
NDICE DE TABELAS ............................................................................................ XIV
NDICE DE SMBOLOS............................................................................................XV
1. INTRODUO...................................................................................................... 1
1.1. RELEVNCIA DO ESTUDO.................................................................................. 2
1.2. OBJ ECTIVOS....................................................................................................... 4
1.3. EFLUENTES SALINOS......................................................................................... 5
1.3.1. REFINARIAS .................................................................................................... 5
1.3.2. PROCESSAMENTO DE PEIXE ............................................................................ 8
1.4. EFEITO DA SALINIDADE ................................................................................... 11
1.5. PROCESSOS DE TRATAMENTO BIOLGICOS AERBIOS.................................... 14
1.5.1. LAMAS ACTIVADAS......................................................................................... 15
1.5.2. REACTOR DESCONTNUO SEQUENCIAL (RDS)................................................ 17
1.6. MICROBIOLOGIA DO PROCESSO........................................................................ 19
1.6.1. BACTRIAS ................................................................................................... 22
1.6.2. PROTOZORIOS............................................................................................. 25
1.7. REMOO BIOLGICA DE NUTRIENTES............................................................ 27
1.7.1. REMOO DE AZOTO.................................................................................... 27
1.7.2. REMOO DE FSFORO................................................................................ 33
1.8. ANLISE DE IMAGEM....................................................................................... 34
2. MATERIAIS E MTODOS................................................................................ 39
2.1. DESCRIO DA UNIDADE EXPERIMENTAL ........................................................ 40
2.2. INCULO E ACLIMATAO.............................................................................. 42
2.3. COMPOSIO DO EFLUENTE............................................................................ 43
2.4. DESEMPENHO DO REACTOR EM CONDIES SALINAS...................................... 44
2.4.1. ESTRATGIA PULSANTE................................................................................. 44
2.5. MTODOS ANALTICOS.................................................................................... 46

ix
NDICE GERAL

2.5.1. DETERMINAO DA CONCENTRAO DE AZOTO AMONIACAL........................... 47
2.5.2. DETERMINAO DA CONCENTRAO DE NITRATO........................................... 47
2.5.3. DETERMINAO DA CQO ............................................................................. 47
2.5.4. DETERMINAO DE SLIDOS SUSPENSOS VOLTEIS (SSV) ............................. 47
2.5.5. DETERMINAO DO NDICE VOLUMTRICO DO LAMAS (IVL) ......................... 48
2.5.6. DETERMINAO DA TURBIDEZ DO SOBRENADANTE......................................... 48
2.5.7. DETERMINAO DO FOSFATO........................................................................ 48
2.6. AQUISIO E PROCESSAMENTO DE IMAGEM DAS LAMAS ACTIVADAS.............. 48
2.6.1. IMAGE J ....................................................................................................... 49
2.6.2. MATLAB ....................................................................................................... 51
3. RESULTADOS E DISCUSSO ......................................................................... 55
3.1. AVALIAO DA ACLIMATAO....................................................................... 56
3.2. DESEMPENHO PADRO DO SISTEMA................................................................. 57
3.3. DESEMPENHO EM CONDIES SALINAS............................................................ 61
3.4. MORFOLOGIA MICROBIANA ............................................................................. 75
4. CONCLUSES..................................................................................................... 95
5. REFERNCIAS ................................................................................................... 99




x
NDICE DE FIGURAS

NDICE DE FIGURAS

FIGURA 1. COMPOSIO MDIA DO PETRLEO. ................................................................. 5
FIGURA 2. PROCESSAMENTO DO PETRLEO. ...................................................................... 7
FIGURA 3. EXEMPLO DO PROCESSAMENTO DE SARDINHA EM LATA. .................................. 9
FIGURA 4. TIPOS DE TRATAMENTO BIOLGICO AERBIO. ................................................ 15
FIGURA 5. TRATAMENTO DE EFLUENTES POR LAMAS ACTIVADAS.................................... 16
FIGURA 6. ESQUEMA DE FUNCIONAMENTO DE UM RDS................................................... 17
FIGURA 7. ESQUEMA DO MECANISMO DE DECOMPOSIO AERBIA. ............................... 20
FIGURA 8. A) SPHAEROTILUS NATANS; B) MICROTHRIX PARVICELLA; C) THIOTHRIX SP.; D)
NOCARDIA SP............................................................................................................ 23
FIGURA 9. A) VORTICELLA CONVALLARIA; B) EUPLOTES E STYLONCHIA; C) PARAMECIUM; D)
OPERCULARIA. ......................................................................................................... 26
FIGURA 10. TRANSFORMAO DO AZOTO ORGNICO NOS PROCESSOS DE TRATAMENTO
BIOLGICO (ADAPTADO DE METCALF & EDDY, 1991)............................................ 28
FIGURA 11. REMOO BIOLGICA DE FSFORO............................................................... 33
FIGURA 12. RDS UTILIZADO NA REALIZAO DOS TESTES LABORATORIAIS. ................... 41
FIGURA 13. PAINEL DE CONTROLO SUPERVISOR OPERAO DO PROCESSO................... 41
FIGURA 14. SEQUNCIA DE ETAPAS UTILIZADA NA ESTRATGIA PULSANTE..................... 44
FIGURA 15. VARIAO DO VOLUME DO REACTOR. .......................................................... 45
FIGURA 16. VARIAO DO OXIGNIO DISSOLVIDO........................................................... 45
FIGURA 17. REPRESENTAO ESQUEMTICA DO PROCESSAMENTO E ANLISE DAS
IMAGENS DOS FLOCOS MICROBIANOS....................................................................... 51
FIGURA 18. VARIAO DA CONCENTRAO DE AZOTO AMONIACAL DURANTE O PERODO
DE ACLIMATAO PARA CADA CONCENTRAO DE SAL EM ESTUDO. ...................... 56
FIGURA 19. PERFIL DAS CONCENTRAES DE AZOTO AMONIACAL E DE NITRATO A 0,0 %
SAL. ......................................................................................................................... 58
FIGURA 20. PERFIL DAS CONCENTRAES DE FOSFATO E DE CQO A 0,0 % SAL. ............. 59
FIGURA 21. PERFIL CINTICO DAS CONCENTRAES FINAIS DE CQO PARA AS DIFERENTES
CONCENTRAES DE SAL ESTUDADAS. .................................................................... 62
FIGURA 22. REMOO DE CQO PARA AS DIFERENTES CONCENTRAES DE SAL
ESTUDADAS. ............................................................................................................ 64

xi
NDICE DE FIGURAS
FIGURA 23. REMOO DE AZOTO AMONIACAL PARA AS DIFERENTES CONCENTRAES DE
SAL ESTUDADAS....................................................................................................... 65
FIGURA 24. VARIAO DA CONCENTRAO DE NITRATO NO FINAL DE CADA TESTE PARA
AS DIFERENTES CONCENTRAES DE SAL ESTUDADAS............................................. 67
FIGURA 25. VARIAO DA CONCENTRAO DE FOSFATO NO FINAL DE CADA TESTE PARA
AS DIFERENTES CONCENTRAES DE SAL ESTUDADAS............................................. 68
FIGURA 26. TURBIDEZ OBSERVADA PARA AS DIFERENTES CONCENTRAES DE SAL
ESTUDADAS. ............................................................................................................ 69
FIGURA 27. IVL OBSERVADO PARA AS DIFERENTES CONCENTRAES DE SAL ESTUDADAS.
................................................................................................................................ 71
FIGURA 28. VARIAO DA BIOMASSA COM O AUMENTO DA CONCENTRAO DE SAL NO
EFLUENTE................................................................................................................ 73
FIGURA 29. SEQUNCIA DE IMAGENS OBTIDAS DURANTE O PROCESSAMENTO EM IMAGE J.
................................................................................................................................ 76
FIGURA 30.VARIAO DA AT DOS AGREGADOS COM O AUMENTO DA CONCENTRAO DE
SAL. ......................................................................................................................... 77
FIGURA 31.VARIAO DO DEQ
MDIO
DOS AGREGADOS COM O AUMENTO DA
CONCENTRAO DE SAL. ......................................................................................... 77
FIGURA 32.VARIAO DO DEQ DOS AGREGADOS COM O AUMENTO DA CONCENTRAO DE
SAL. ......................................................................................................................... 79
FIGURA 33.VARIAO DO NMERO DE AGREGADOS COM O AUMENTO DA CONCENTRAO
DE SAL..................................................................................................................... 80
FIGURA 34.VARIAO DA REA PERCENTUAL DE AGREGADOS COM O AUMENTO DA
CONCENTRAO DE SAL. ......................................................................................... 81
FIGURA 35. ANLISE DE COMPONENTES PRINCIPAIS AOS PARMETROS DETERMINADOS.82
FIGURA 36.VARIAO DOS PARMETROS MORFOLGICOS COM A CONCENTRAO DE SAL.
................................................................................................................................ 84
FIGURA 37.VARIAO DA COMPACIDADE DOS AGREGADOS COM O AUMENTO DA
CONCENTRAO DE SAL. ......................................................................................... 85
FIGURA 38.VARIAO DA EXCENTRICIDADE DOS AGREGADOS COM O AUMENTO DA
CONCENTRAO DE SAL. ......................................................................................... 85
FIGURA 39.VARIAO DA CONVEXIDADE DOS AGREGADOS COM O AUMENTO DA
CONCENTRAO DE SAL. ......................................................................................... 86

xii
NDICE DE FIGURAS

FIGURA 40.VARIAO DA CONVEXIDADE DOS AGREGADOS COM O AUMENTO DA
CONCENTRAO DE SAL. ......................................................................................... 86
FIGURA 41. PARMETROS VIP NA ANLISE POR PLS DO CONTEDO DE AGREGADOS
MICROBIANOS PARA O IVL....................................................................................... 88
FIGURA 42. REGRESSO LINEAR ENTRE O IVL DETERMINADO EXPERIMENTALMENTE (IVL
OBSERVADO) E O IVL PREVISTO............................................................................... 89
FIGURA 43. PARMETROS VIP NA ANLISE POR PLS DO CONTEDO DE AGREGADOS
MICROBIANOS PARA A TURBIDEZ. ............................................................................ 90
FIGURA 44. REGRESSO LINEAR ENTRE A TURBIDEZ DETERMINADA EXPERIMENTALMENTE
(TURBIDEZ OBSERVADA) E A TURBIDEZ PREVISTA................................................... 91
FIGURA 45. REGRESSO LINEAR ENTRE A TURBIDEZ E A REA TOTAL DE AGREGADOS.... 92
FIGURA 46. REGRESSO LINEAR ENTRE A TURBIDEZ DETERMINADA EXPERIMENTALMENTE
E A CONCENTRAO DE BIOMASSA. ......................................................................... 93


xiii
NDICE DE TABELAS
NDICE DE TABELAS

TABELA 1. PRODUTOS OBTIDOS NAS REFINARIAS DE PETRLEO (DICKNEIDER, 2002)....... 6
TABELA 2. SADAS DE MATERIAIS NO PROCESSO DE DESSALINIZAO EM REFINAO
(MARIANO, 2001)...................................................................................................... 8
TABELA 3. PARMETROS OBSERVADOS NOS EFLUENTES DE PROCESSAMENTO DE PESCADO
(INTRASUNGKHA ET AL., 1999). ............................................................................... 10
TABELA 4. CONCENTRAES (G/L) EXISTENTES NA GUA DO MAR (EDWARDS, 1990).... 21
TABELA 5. COMPOSIO DO EFLUENTE SINTTICO UTILIZADO PARA OS VRIOS TESTES
REALIZADOS. ........................................................................................................... 43
TABELA 6. PARMETROS MORFOLGICOS DETERMINADOS PELO PROGRAMA
MICROFLOCOS_PARAM.............................................................................................. 52
TABELA 7. PERCENTAGENS DE REMOO OBTIDAS SEM INTERFERNCIA DE SAL E
SEDIMENTAO DAS LAMAS. ................................................................................... 60
TABELA 8. TABELA RESUMO COM ALGUNS ESTUDOS REALIZADOS PARA EFLUENTES
SALINOS................................................................................................................... 74
TABELA 9. VARIVEIS DE MAIOR IMPORTNCIA PARA O IVL E PARA A TURBIDEZ USANDO
OS PARMETROS CHAVE DE CADA GRUPO DETERMINADO POR PCA......................... 83




xiv
NDICE DE SMBOLOS

NDICE DE SMBOLOS

AGV cidos Gordos Volteis
AT rea Total de agregados
C/N Razo carbono orgnico/Azoto
CBO Carncia Biolgica de Oxignio
COT Carbono Orgnico Total
CQO Carncia Qumica de Oxignio
Deq Dimetro Equivalente dos agregados
Deq
mdio
Dimetro Equivalente mdio dos agregados
E Eficincia de Remoo
EPS Substncias Polimricas Extracelulares
ETAR Estao de Tratamento de guas Residuais
IVL ndice Volumtrico de Lamas
NH
3
Amonaco
NH
4
+
io Amnio
NO
2
-
Nitrito
NO
2
xido de azoto
NO
3
-
Nitrato
N-Total Azoto Total
OAF Organismos Acumuladores de Fsforo
OD Oxignio Dissolvido
PCA Anlise de Componentes Principais
PLS Mtodo dos mnimos quadrados parciais
P-Total Fsforo Total
RBN Remoo Biolgica de Nutrientes
RDS Reactor Descontnuo Sequencial
SS Slidos em Suspenso
SST Slidos Suspensos Totais
SSV Slidos Suspensos Volteis
VIP Varivel de Maior Importncia
VSZ Velocidade de sedimentao zonal

xv
























1. INTRODUO

INTRODUO
1.1. RELEVNCIA DO ESTUDO
A industrializao e o surgimento de novas tecnologias e produtos promoveram
ao longo dos ltimos anos no s o progresso como tambm vrios problemas
ambientais. No panorama industrial a indstria petrolfera aquela que apresenta maior
impacto ambiental, devido ao volume, composio e recalcitrncia dos seus
constituintes (Lima et al., 2005). Assim, a preocupao ambiental aliada necessidade
do desenvolvimento sustentvel conduziu ao surgimento de legislao que se torna cada
vez mais austera, limitando com maior rigor os nveis de descarga dos contaminantes.
evidente a necessidade do desenvolvimento de tecnologias que propiciem a remoo
simultnea de compostos orgnicos e de nutrientes.
Entre os principais contaminantes da indstria petroqumica destacam-se os
compostos aromticos e amoniacais. Devido s caractersticas recalcitrantes, os
compostos aromticos so acumulados nos corpos receptores causando a diminuio do
oxignio dissolvido. A problemtica das descargas relaciona-se com o facto de que
muitos desses poluentes se encontram dissolvidos no efluente no podendo ser
removidos por processos fsicos convencionais. O azoto e o fsforo, quando lanados
nos cursos de gua, juntamente com a matria orgnica, provocam, para alm do
fenmeno de eutrofizao, a toxicidade nos peixes e ainda a possibilidade de provocar
doenas carcinogneas.

Para alm da indstria petrolfera pode ainda destacar-se as agro-indstrias que
fundamentalmente conservam ou transformam matrias-primas. Entre estas indstrias
destaca-se a indstria alimentar, cujos principais produtos industrializados so: frutas,
legumes e hortalias, carnes, leite e pescado. Os projectos agro-industriais apresentam
grande relevncia para o desenvolvimento econmico e social de cada pas. Existem
agro-indstrias em diferentes nveis tecnolgicos, desde os mais artesanais e
tradicionais at aos mais sofisticados. Em cada situao ocorre uma interveno
ambiental especfica, dependendo da sua localizao e dos recursos naturais disponveis
e necessrios para a implementao do processo produtivo. Em relao actividade
agro-industrial, os principais impactos ambientais esto relacionados com o elevado
consumo de gua (processamento, limpeza, segurana, etc.), contaminao de efluentes,
poluentes atmosfricos e resduos slidos.

2
INTRODUO

Os efluentes gerados nas operaes de lavagem, enxaguamento, transporte
interno das matrias-primas e limpeza de equipamentos, esto intimamente ligados
contaminao das guas, quando estas indstrias no adoptam o tratamento adequado
dos seus efluentes. Estes efluentes possuem constituintes tais como: substncias
orgnicas (gorduras e protenas); nutrientes (azoto e fsforo); substncias inorgnicas e
tambm compostos aromticos.

Para alm dos contaminantes referidos anteriormente, destaca-se ainda um
interferente no tratamento de efluente das indstrias petrolfera e agro-alimentar o
NaCl (sal). Nas refinarias quando se pretende a obteno de derivados com elevado
interesse comercial, originam-se efluentes com elevada salinidade que interferem
posteriormente no tratamento. No processamento de determinados alimentos,
fundamentalmente de peixe, produzem-se tambm efluentes com elevada concentrao
de sal. Assim, extremamente importante o estudo dos efeitos inerentes salinidade,
nomeadamente no que toca ao tratamento biolgico de efluentes.

No contexto do tratamento de efluentes industriais, surge cada vez mais a
necessidade da realizao desse tratamento atravs de processos biolgicos. A utilizao
de microrganismos na degradao dos poluentes encontra-se cada vez mais aplicada em
estaes de tratamento de efluentes domsticos e efluentes industriais.
A remoo biolgica de azoto considerada a forma mais econmica de
controlar a quantidade deste nutriente em efluentes. O processo envolve uma etapa de
nitrificao e uma etapa de desnitrificao. Este tratamento pode ser conduzido em
processos biolgicos convencionais ou adaptados.
No processo, a etapa de nitrificao geralmente reconhecida como a mais
vulnervel, dependendo de muitos factores frequentemente conectados pela natureza
sequencial das suas reaces. Por este motivo, difcil a monitorizao e o ajuste do
processo de nitrificao numa Estao de Tratamento guas Residuais (ETAR). As
particularidades deste processo motivaram o desenvolvimento deste trabalho.

Aps o surgimento de processos biolgicos de tratamento de guas residuais
com elevada capacidade de tratamento, sente-se tambm a necessidade do
acompanhamento do processo ao nvel de determinados parmetros, surgindo assim a
Legislao Ambiental com valores-limite de avaliao da qualidade dos efluentes

3
INTRODUO
tratados. Em Portugal, de acordo com o Decreto-Lei n 236/98, de 1 de Agosto,
qualquer descarga de efluentes est sujeita a licenciamento, o qual ser concedido
mediante o cumprimento de certas condies.

Para alm dos parmetros operacionais, o conhecimento profundo do estado de
funcionamento de uma ETAR essencial sua gesto e pode ser realizado atravs da
observao da microbiologia do licor misto (microbiologia do processo). O controlo
microscpio do licor misto uma ferramenta til e rpida para conhecer o estado de um
reactor biolgico e constitui um elemento base de operao, no s porque permite
diagnosticar as patologias habituais do processo, mas tambm porque permite prever
atempadamente o seu aparecimento.

A anlise de imagem , neste momento, um complemento bem estabelecido das
tcnicas de microscopia ptica uma vez que permite uma classificao e quantificao
no subjectiva e automtica de microrganismos. Com o aumento das capacidades dos
computadores, a anlise de imagem tornou-se uma rotina em vrias aplicaes de
tecnologia celular. As aplicaes mais comuns vo desde a enumerao de bactrias em
alimentos slidos, monitorizao em linha de fermentaes, anlise de texturas de
colnias, determinao da biomassa, etc (Amaral, 1998).

1.2. OBJECTIVOS
Devido perturbao do tratamento de efluentes industriais com sal, pretendeu-
se estudar o efeito de adies crescentes de NaCl (0,5 % a 6,0 %) na remoo de azoto
amoniacal, de CQO (Carncia Qumica de Oxignio) utilizando um RDS (Reactor
Descontnuo Sequencial). Efectuou-se o acompanhamento das concentraes de nitrato
de forma a estudar o processo de nitrificao e o acompanhamento de fosfato. Para
complementar este estudo foram tambm observados os SSV (Slidos Suspensos
Volteis) de modo a averiguar o crescimento da biomassa, IVL (ndice Volumtrico de
Lamas) e Turbidez para a anlise de sedimentabilidade das lamas. Dados como o pH,
OD (Oxignio Dissolvido) e potencial de oxidao-reduo foram obtidos em linha.
A monitorizao do reactor envolveu tambm a utilizao de ferramentas de
anlise e processamento de imagem de forma a caracterizar a biocenose existente no
interior do reactor durante o perodo de estudo.

4
INTRODUO

1.3. EFLUENTES SALINOS
Este estudo baseado na elevada salinidade dos efluentes gerados nas refinarias
e no processamento de peixe.
Elevadas concentraes de sal podem inibir as reaces no processo de
degradao orgnica ou causar stresse osmtico, induzindo a diminuio significativa
da eficincia de tratamento biolgico ou da cintica de biodegradao. Para alm disso,
o elevado ndice de sal induz tambm a lise celular causando um aumento dos slidos
no efluente final. As populaes requeridas de protozorios e de organismos
filamentosos para promover a floculao apropriada so tambm reduzidas
significativamente (Dan, 2001). As questes associadas dificuldade do tratamento de
efluentes salinos sero discutidas ainda neste captulo. Contudo, entendemos relevante o
estudo de um sistema de tratamento de efluentes a elevadas concentraes salinas de
forma a verificar qual a sua capacidade limite de tratamento.
1.3.1. REFINARIAS
O petrleo bruto uma complexa mistura de hidrocarbonetos, que apresenta
contaminaes variadas de enxofre, azoto, oxignio e metais como se pode observar na
Figura 1. A composio dessa mistura varia significativamente em funo do
reservatrio de origem. No seu estado bruto, o petrleo apresenta reduzidas aplicaes,
servindo somente como leo combustvel.
Petrleo
Hidrocarbonetos Outros compostos
Alifticos Aromticos Naftalenos Sulfurados Nitrogenados Oxigenados Metlicos
Petrleo
Hidrocarbonetos Outros compostos
Alifticos Aromticos Naftalenos Sulfurados Nitrogenados Oxigenados Metlicos

Figura 1. Composio mdia do petrleo.

Para que o potencial energtico do petrleo seja aproveitado ao mximo, deve
ser submetido a uma srie de processos, a fim de se desdobrar nos seus derivados
(Tabela 1).

5
INTRODUO
Do ponto de vista ambiental, as refinarias geram elevados ndices de poluio,
uma vez que consomem grandes quantidades de gua e de energia, produzem grandes
quantidades de efluentes lquidos, libertam gases nocivos para a atmosfera e produzem
resduos slidos de difcil tratamento e disposio.

Tabela 1. Produtos obtidos nas refinarias de petrleo (Dickneider, 2002).
Produto da Refinaria Hidrocarbonetos Percentagem
Gasolina C
5
C
10
27
Querosene C
11
C
18
15
Diesel C
14
C
18
11
Gs leo Pesado C
12
C
25
10
leo Lubrificante C
20
C
40
20
Resduo >C
40
17

A refinao de petrleo consiste numa srie de benefcios pelos quais passa o
leo, para a obteno desses derivados, estes sim, produtos de grande interesse
comercial. Esses benefcios englobam etapas fsicas e qumicas de separao, que
originam as grandes fraces de destilao. Estas fraces so processadas atravs de
uma outra srie de etapas de separao e converso que fornecem os derivados finais do
petrleo, gerando efluentes.
Na Figura 2 encontra-se um esquema simplificado mas ao mesmo tempo
representativo das etapas pelas quais passa o petrleo. Para alm destes produtos
obtidos por destilao, possvel obter por reaces de processamento outro tipo de
produtos com maior valor comercial. Estas reaces so projectadas para quebrar
molculas de maiores dimenses em molculas menores, combinar molculas pequenas
para formar molculas maiores, e rearranjar a estrutura das molculas atravs de
reaces de isomerizao. As reaces de craqueamento (ou de quebra) baseiam-se em
processos catalticos que consistem, basicamente, numa reaco de pirlise controlada,
na qual os hidrocarbonetos de cadeia longa so transformados em hidrocarbonetos
menores, na faixa da gasolina, atravs da clivagem de ligaes carbono-carbono na
presena de um catalisador (Dickneider, 2002).

6
INTRODUO

Petrleo
Dessalinizador Reactor
T
O
R
R
E
Gs
Nafta Leve
Nafta Pesada
Querosene
Gasleo
Resduo
Petrleo
Dessalinizador Reactor
T
O
R
R
E
Gs
Nafta Leve
Nafta Pesada
Querosene
Gasleo
Resduo

Figura 2. Processamento do petrleo.

Antes da separao em fraces na refinaria, o petrleo bruto carece de
tratamento para a remoo de sais corrosivos. nesta etapa de dessalinizao que se
produz a maior concentrao de efluentes salinos. O processo de dessalinizao tambm
remove alguns metais e os slidos em suspenso que podem provocar a:
Deteriorao das unidades de destilao ou reduo da sua eficincia;
Corroso dos equipamentos;
Depsito nas paredes dos permutadores de calor, causando entupimentos e
reduo da eficincia;
Deteriorao dos catalisadores que sero usados nas etapas posteriores de
processamento.

A dessalinizao compreende a mistura do petrleo cru aquecido com cerca de
3,0 % 10 % do seu volume em gua, de modo a dissolver os sais indesejveis
(Mariano, 2001). A gua separada do petrleo atravs da adio de desemulsificadores
que ajudam na quebra da estabilidade da emulso e/ou, mais habitualmente, pela
aplicao de um potencial elctrico. A gua que usada na dessalinizao
frequentemente a gua no tratada ou apenas parcialmente tratada proveniente de outras
etapas da refinao. Na Tabela 2 apresentam-se alguns dos constituintes existentes nos
efluentes e nos resduos slidos gerados no processo de dessalinizao do petrleo.



7
INTRODUO
Tabela 2. Sadas de materiais no processo de dessalinizao em refinao (Mariano,
2001).
Etapa Efluente do processo Resduos slidos gerados
Dessalinizao
leo
H
2
S
Fenol
Elevados nveis de slidos
suspensos
Slidos dissolvidos
Elevada CBO
Elevada Temperatura
leo cru/lama da
dessalinizao
(ferrugem, areia, gua, cera
e leo emulsionados,
metais, argila)

O processo de dessalinizao gera uma lama oleosa e uma corrente de gua
salgada residual, com alta CQO, azoto amoniacal, fenis e slidos em suspenso que
normalmente adicionada a outras correntes aquosas residuais provenientes de outras
fases do processamento, sendo posteriormente enviadas para as estaes de tratamento
de efluentes das refinarias.
1.3.2. PROCESSAMENTO DE PEIXE
O processamento de peixe com salmoura produz normalmente elevada matria
orgnica, leos e gorduras e elevados nveis de sal. Esta caracterstica induz
dificuldades em processos biolgicos de tratamento (Mndez et al., 1992). Os principais
impactos ambientais das indstrias de processamento de peixe relacionam-se
fundamentalmente com o elevado consumo de gua, a contaminao de efluentes, a
produo de poluentes atmosfricos e ainda a produo de resduos slidos. Para
evidenciar as fases do processo onde h produo de efluentes salinos, apresenta-se na
Figura 3 um dos possveis esquemas de processamento de sardinha em conserva.


8
INTRODUO

Recepo do peixe
com salmoura
Limpeza do
peixe
Enchimento das
Latas com o produto
Secagem do
produto
Dosagem dos
molhos
Encerramento
das latas
Lavagem das
latas
Esterilizao
Recepo do peixe
com salmoura
Limpeza do
peixe
Enchimento das
Latas com o produto
Secagem do
produto
Dosagem dos
molhos
Encerramento
das latas
Lavagem das
latas
Esterilizao

Figura 3. Exemplo do processamento de sardinha em lata.

O caudal de efluentes gerados nas operaes de lavagem, transporte interno das
matrias-primas, limpeza do ambiente de trabalho e dos respectivos equipamentos est
intimamente ligado contaminao das guas, quando estas indstrias no adoptam o
tratamento adequado dos seus efluentes. As altas concentraes de compostos azotados,
originados na decomposio do material proteico, so caractersticas deste tipo de
indstrias, devendo ser dada particular ateno no s remoo de matria
carbonatada mas tambm matria orgnica azotada (Russo, 1998). Como se pode
observar pela Tabela 3, as indstrias de processamento de peixe exibem elevadas
concentraes de matria orgnica, azoto e fsforo, devendo por isso realizar-se uma
etapa de remoo biolgica de nutrientes (RBN). Existem vrios tipos de processo para a
remoo biolgica de nutrientes que sero abordados ainda neste primeiro captulo.







9
INTRODUO
Tabela 3. Parmetros observados nos efluentes de processamento de pescado
(Intrasungkha et al., 1999).
Processamento
Parmetro Unidade
Salmo Pesc. Selvagem
pH 8 6,7
Condutividade mS/cm 44 1,5
SS mg/L 435 75
CBO mg/L 912 420
CQO mg/L 1633 1429
NH
3
-N mg/L 1,4 10,2
N-Total mg/L 49,7 174,5
PO
4
-P mg/L 19,6 34,4
P-Total mg/L 27,3 61,1

A produo de guas residuais em unidades de processamento de peixes
varivel, dependendo da poca de produo e/ou captura dos peixes e processos
utilizados. O tratamento destes efluentes complexo, devido presena de compostos
proteicos e de elevada concentrao de sal (superior a 30 g/L), principalmente no caso
da produo de conservas (Gharsallah et al., 2002).
O consumo de gua nestas indstrias varia de 18 m
3
/ton a 74 m
3
/ton de peixe
processado. Cerca de 90 % da CQO existente nas guas residuais obtida na recepo e
lavagem do peixe (Battistoni & Fava, 1994). O efluente salino gerado
fundamentalmente quando se efectua a salmoura e tambm quando se promove a
cozedura do peixe onde os nveis de salinidade se encontram entre 2,0 % a 3,0 % (Dan,
2001).

Como referido anteriormente, a elevada salinidade dos efluentes gerados nas
refinarias e nas indstrias de processamento de peixe, uma das causas da dificuldade
de tratamento por sistemas convencionais. Seguidamente, referem-se algumas das
dificuldades sistemticas apresentadas pelos processos, quando so submetidos ao
tratamento biolgico com efluentes de elevada salinidade.



10
INTRODUO

1.4. EFEITO DA SALINIDADE
O tratamento dos efluentes salinos despoletou na comunidade cientfica com um
estudo realizado por Kincannon & Gaudy (1966). Estes investigadores estudaram a
microbiologia de processos biolgicos e concluram que a reduo de concentraes
salinas causa efeitos mais graves na comunidade microbiana do que aumentos graduais
dessas mesmas concentraes de sal. As bruscas alteraes de concentrao salina
originam a libertao de constituintes celulares aumentando a CQO solvel dos
efluentes.
Foram desenvolvidos outros estudos de forma a observar os problemas inerentes
ao tratamento biolgico de efluentes salinos. Este tratamento pode ser efectuado atravs
da utilizao de vrios tipos de reactores, entre os quais se destacam o RDS, lamas
activadas convencionais, reactores de leito fixo, reactor de biodiscos e ainda os
reactores anaerbios. O desempenho de cada tipo de reactor varia de acordo com a
estratgia adoptada na optimizao dos processos.

Segundo experincias realizadas por Kargi & Uygur (1997), existem quatro
dificuldades principais no tratamento biolgico de efluentes salinos, a saber:
Extenso limitada de adaptao: As culturas convencionais existentes nos
sistemas de lamas activadas no podem ser usadas para tratar guas residuais
salinas com concentraes de sal superiores a 3,0 % ou 5,0 %. A salinidade
altera as funes metablicas e causa plasmlise e/ou perda da actividade
microbiana. Consequentemente, as eficincias de remoo de CQO so mais
baixas (Gharsallah et al., 2002).
Sensibilidade para mudanas de fora inica: Variaes na concentrao de
sal entre 0,5 % e 2,0 % causam normalmente dificuldades no desempenho do
sistema. Mesmo com culturas que sofreram aclimatao, o desempenho
adequado do tratamento requer uma composio inica constante. Mudanas
bruscas nas concentraes de sal provocam efeitos mais adversos do que
mudanas graduais. Torna-se essencial a equalizao numa determinada
concentrao de sal antes do tratamento do efluente salino.
Cintica de degradao reduzida: A taxa de degradao biolgica de
compostos orgnicos diminui com o aumento das concentraes salinas. Assim,

11
INTRODUO
os efluentes salinos deveriam ser tratados com razes F/M
(Alimento/Microrganismo) baixas.
Elevada concentrao de slidos suspensos: A existncia de sal nos efluentes
reduz as populaes de protozorios e organismos formadores de flocos,
resultando em baixas eficincias de sedimentao.

Kargi & Diner (1996) estudaram o desempenho de um processo de tratamento
biolgico usando um efluente salino. Utilizaram uma cultura dominante de Zooglea
ramigera (bactrias formadoras de flocos) devido aos efeitos adversos dos efluentes
salinos na microbiologia dos processos de tratamento biolgicos. Apesar da utilizao
destes microrganismos, observaram que concentraes de sal a 2,0 % causam uma
reduo na eficincia de remoo de CQO do processo. A mesma concluso surgiu em
publicaes posteriores (1997, 1998, 1999a, 1999b).

Abu-ghararah et al. (1993) e Intrasungkha et al. (1999) estudaram a remoo
biolgica de nutrientes (RBN). Os primeiros verificaram que para 0,4 % de sal
possvel obter elevadas eficincias de remoo de azoto enquanto que a remoo de
fsforo dificultada, havendo por isso uma diminuio na eficincia do processo,
enquanto que os segundos observaram elevadas eficincias de remoo para
concentraes de sal inferiores (0,03 % a 0,2 %).
A nitrificao em efluentes salinos foi estudada em detalhe por Panswad & Anna
(1999). Estes investigadores verificaram que esta etapa presente na RBN
extremamente sensvel salinidade, obtendo-se 55 % de inibio do processo para
3,0 % de sal. Contudo, a actividade microbiana facilmente recuperada em poucos dias.
Campos et al. (2002) analisaram igualmente a diminuio da actividade
microbiana no processo de nitrificao de efluentes salinos, para concentraes at
0,5 M. A partir desta concentrao, o sistema biolgico comeou a acumular azoto
amoniacal e nitrito. Verificou-se tambm que o aumento da salinidade no afectou
significativamente as propriedades da biomassa microbiana devido aos valores obtidos
de ndice Volumtrico de Lamas (IVL) e a Velocidade de Sedimentao Zonal (VSZ).

Outro mtodo de tratamento de efluentes passa pela utilizao de reactores de
leito fixo. Gharsallah et al. (2002) concluram que aps um perodo de adaptao por
parte dos microrganismos, a CQO e o COT (Carbono Orgnico Total) diminuram,

12
INTRODUO

resultando em elevadas eficincias de remoo. A partir deste momento, a aclimatao
dos microrganismos torna-se uma operao fundamental no tratamento de efluentes
salinos.

A utilizao do RDS para o estudo da remoo biolgica de nutrientes tem vindo
a ganhar grande considerao na comunidade cientfica devido elevada eficincia na
remoo de matria orgnica e nutrientes. Devido facilidade de operao, a sua
aplicao no tratamento de efluentes salinos tem ganho grande nfase.

O RDS estudado por Uygur & Kargi (2004) foi concebido para a verificar os
efeitos inibitrios na RBN atravs da utilizao de um efluente salino (0,0 % a 6,0 %). O
processo de remoo biolgica consistiu na utilizao de fases aerbias, anxicas e
anaerbias por cada ciclo. Com o aumento da concentrao salina do efluente foram
obtidas baixas eficincias de remoo de CQO, azoto amoniacal e fsforo. Para alm do
acompanhamento do processo, foi tambm observada a concentrao de biomassa e a
sedimentao das lamas no final de cada ciclo de operao. Concluiu-se que o aumento
da concentrao de sal afecta tambm a concentrao de biomassa, uma vez que esta
diminuiu durante o tratamento. Verificou-se o aumento do IVL com o aumento da
concentrao de sal indicando o aumento dos slidos suspensos, ou seja, possvel
aumento da concentrao de slidos com menor dimetro (aumento da desfloculao).

A dificuldade do tratamento de efluentes salinos no actual. Todos os
exemplos dados anteriormente referem a diminuio das eficincias de remoo dos
principais poluentes. Surgiu por este facto, a soluo que permitiu melhorar o
desempenho dos processos biolgicos apresentada por vrios investigadores a
utilizao de bactrias haloflicas ou halotolerantes (bactrias que sobrevivem a
elevadas concentraes de sal).

Uma nova pesquisa realizada por Uygur (2005), permitiu comparar dois tipos de
consrcios microbianos distintos. Num RDS, semelhante ao da pesquisa anterior,
utilizou um organismo halotolerante (Halobacter halobium) e no outro utilizou esse
mesmo organismo adicionado ao consrcio microbiano convencional existente nas
lamas activadas. Foram obtidas remoes de nutrientes e de CQO elevadas para o
reactor onde se adicionou o organismo halotolerante aos consrcios microbianos

13
INTRODUO
convencionais. Mais uma vez se aferiu a obteno de remoes elevadas de matria
orgnica e nutrientes para concentraes de sal inferiores a 1,0 %.
Woolard & Irvine (1995) realizaram o tratamento de efluentes hipersalinos
(15 %) usando microrganismos com capacidade de sobrevivncia a ambientes com
elevada salinidade. Os microrganismos isolados tm tambm capacidade de degradar o
fenol. Neste estudo verificou-se uma elevada capacidade de remoo do fenol existente
nos efluentes por parte da comunidade microbiana.

A aplicao de biodiscos para o tratamento de efluentes apresenta caractersticas
atraentes para o tratamento de efluentes, sendo por isso utilizado por Kargi & Uygur
(1997). No entanto, foi empregue uma cultura pura de Halobacter halobium (bactrias
halotolerantes) para que a eficincia de remoo fosse superior obtida com culturas
convencionais. Com os dados cinticos alcanados foi elaborado um modelo
matemtico que demonstrou que para a obteno de uma eficincia de remoo de CQO
superior a 90 %, a concentrao de sal no poderia ser superior a 1,0 %.

Em tratamento de efluentes utilizando reactores biolgicos, o RDS aparece como
alternativa ao tratamento de efluentes das refinarias e das indstrias de processamento
de peixe. As suas caractersticas inerentes apresentam-se como soluo para o
tratamento de efluentes da indstria alimentar, considerando todas as alteraes
possveis de caudal e de efluente a tratar (Castro, 2003).

1.5. PROCESSOS DE TRATAMENTO BIOLGICOS
AERBIOS
Anteriormente, atribuiu-se uma elevada importncia aos processos de tratamento
biolgico de efluentes, que de certa forma podem ver diminuda a sua capacidade de
tratamento perante o surgimento de efluentes com elevada salinidade. Assim, esta
seco pretende dar a conhecer os principais processos de tratamento biolgico de
efluentes (Figura 4), para posterior descrio do RDS utilizado neste trabalho.

14
INTRODUO

Tratamento aerbio
Tratamento por biomassa
suspensa
Tratamento por biomassa
aderida
Lamas Activadas Lagunagem
Tanques
Percoladores
Biodiscos
Tratamento aerbio
Tratamento por biomassa
suspensa
Tratamento por biomassa
aderida
Lamas Activadas Lagunagem
Tanques
Percoladores
Biodiscos

Figura 4. Tipos de tratamento biolgico aerbio.

Para alm do tratamento biolgico aerbio, que consiste na utilizao de
microrganismos actuantes na degradao de nutrientes e de matria orgnica
biodegradvel na presena de oxignio, possvel tambm, a utilizao de
microrganismos anaerbios, onde a conformao dos reactores claramente diferente
dos anteriores.
1.5.1. LAMAS ACTIVADAS
No final do sculo XIX e incio do sculo XX as pesquisas desenvolviam-se
apenas em processos de filtrao, estando os processos biolgicos limitados utilizao
de leitos percoladores e tanques spticos. Os tanques spticos perderam parte da sua
popularidade devido a uma restrio de 1896, mas foram logo substitudos por novos
processos anaerbios. Os processos fsico-qumicos eram sem dvida os mais populares
na poca, incluindo a sedimentao, o tratamento qumico, e a prpria diluio.
Contudo, nenhum desses processos oferecia um efluente de elevada qualidade. Neste
contexto, foi recebida a comunicao tcnica do surgimento de um novo processo
designado "lamas activadas" capaz de produzir um efluente claro, lmpido, sem odor e
de alta qualidade (Metcalf & Eddy, 1991).
O sistema de lamas activadas um processo contnuo de tratamento biolgico de
guas residuais que inclui a oxidao da matria orgnica e a nitrificao. Consiste na
formao de flocos microbianos no efluente pelo crescimento de bactrias zoogleais ou
outros organismos na presena de oxignio dissolvido (OD). O efluente e as lamas
activadas so misturados, agitados e arejados (em tanques de arejamento), para logo
aps se separarem as lamas activadas do efluente tratado (por sedimentao em

15
INTRODUO
decantadores por gravidade). Parte das lamas activadas so purgadas do sistema e a
outra parte volta para o sistema de tratamento (Figura 5).

Figura 5. Tratamento de efluentes por lamas activadas.

Os sistemas de tratamento por lamas activadas removem do efluente compostos
orgnicos dissolvidos e matria coloidal bem como slidos suspensos no
sedimentveis e outros constituintes que so captados pelos flocos microbianos. Os
nutrientes (fsforo e azoto) podem ser parcialmente removidos ou volatilizados durante
o processo de tratamento biolgico. Uma das desvantagens deste processo prende-se
com a dificuldade na remoo de cor de alguns efluentes industriais (Ganczarczyk,
1983).

Este sistema de tratamento biolgico pode ser usado para efluentes com baixo ou
elevado caudal, para efluentes domsticos ou industriais, ou ainda para efluentes mistos
(domsticos e industriais).

Em sistemas de lamas activadas, os compostos orgnicos volteis podem ser
volatilizados para a atmosfera devido ao arejamento tumultuoso existente no tanque.
Dependendo do tipo de composto orgnico voltil, pode ocorrer a biodegradao e
tambm stripping. Recentemente, o stripping de compostos orgnicos volteis tem
recebido redobrada ateno devido aos limites de emisso permitidos por Lei
(Eckenfelder, 2000).



16
INTRODUO

1.5.2. REACTOR DESCONTNUO SEQUENCIAL (RDS)
Um Reactor Descontnuo Sequencial (RDS) um sistema de tratamento com
lamas activadas em que as diferentes fases de tratamento ocorrem dentro do mesmo
tanque, como se pode observar pela Figura 6. O termo, originado pela sequncia de
passos pelos quais o reactor passa desde que recebe o efluente, o trata e o descarrega.

1. Enchimento
2. Reaco
3. Sedimentao 4. Descarga
5. Paragem
Tempo
1. Enchimento
2. Reaco
3. Sedimentao 4. Descarga
5. Paragem
Tempo

Figura 6. Esquema de funcionamento de um RDS.

O RDS no remove apenas matria orgnica e slidos suspensos, como os
sistemas de lamas activadas convencionais, pode tambm ser usado na remoo
biolgica de nutrientes azoto e fsforo.

Um ciclo de operao de um RDS implica a passagem por todas as fases
indicadas na Figura 6: enchimento, reaco, sedimentao, descarga e paragem
(Moreira, 2001).

Enchimento: Durante esta fase o efluente adicionado biomassa que se
encontra presente no reactor proveniente do ciclo anterior. O volume de lquido do
reactor aumenta de um volume inicial (V
0
) at um valor mximo. O volume inicial,
contendo os microrganismos, pode variar entre 25 % e 70 % do volume total do reactor
e determinado pela carga a ser tratada, pelo tempo de residncia desejado e pelas

17
INTRODUO
caractersticas de sedimentao da biomassa microbiana (Coelho, 1998). O perodo de
enchimento termina quando se atinge o nvel mximo, dado em geral pelo volume til
do reactor. Pode ser efectuado arejamento durante esta etapa, permitindo que a biomassa
seja misturada, medida que o efluente entra. Aos microrganismos que esto em
contacto com o substrato fornecida uma grande quantidade de oxignio, para facilitar
a sua degradao. A nitrificao e desnitrificao ocorrem no incio desta fase.
Normalmente este o tipo de enchimento usado nos trabalhos experimentais uma vez
que os microrganismos j se encontram aclimatados s condies operacionais.

Reaco: As reaces que se iniciaram na etapa de enchimento do reactor so
conduzidas a volume constante j que no ocorre remoo de slidos. O final desta
etapa dado pelo tempo necessrio para que as transformaes atinjam os nveis de
qualidade desejados, de acordo com as estratgias operacionais que so pr-
estabelecidas. Depois de o substrato ser consumido, entra-se numa fase de escassez de
alimento, em que alguns microrganismos morrem, ajudando na diminuio do volume
de lamas sedimentadas. O tempo desta etapa pode variar de zero, se todas as
transformaes se completarem na etapa de enchimento, at 50 % do tempo total de
ciclo. Normalmente esta fase tem uma durabilidade de 35 % do tempo total de ciclo
(Metcalf & Eddy, 1991).

Sedimentao: Durante esta fase, pra o arejamento, dando lugar separao
dos slidos, ficando sobre as lamas sedimentadas, o efluente limpo e tratado. Durante
este perodo, nenhum lquido deve entrar ou sair do tanque, de modo a evitar turbulncia
no sobrenadante. O tempo de sedimentao tpico varia entre 0,5 e 1,5 horas (Coelho,
1998). O processo de sedimentao num RDS muito mais eficiente do que num
sistema contnuo uma vez que o sistema se encontra completamente parado (Metcalf &
Eddy, 1991).

Descarga: Este perodo caracterizado pela descarga do efluente tratado. Esta
remoo deve ser feita, sem perturbar as lamas sedimentadas. Esta etapa no deve ser
excessivamente longa devido possibilidade de lavagem (washout) de microrganismos
do reactor, alterando assim a produtividade do sistema.

Paragem: Durante este perodo, dever ser feita a purga de lamas. Pode ser
ainda adicionada biomassa (no caso desta se perder durante a etapa de descarga).

18
INTRODUO

A tecnologia apresentada pelo RDS oferece algumas vantagens sobre outros
sistemas de lamas activadas. A utilizao de um RDS permite: controlar o crescimento
filamentoso e os problemas de sedimentao; remover nutrientes sem qumicos uma vez
que se verifica um bom contacto do oxignio com os microrganismos e substrato;
menores custos de manuteno relativamente aos mtodos convencionais; menor rea
para a instalao e menos equipamento de processo, uma vez que apenas se utiliza um
tanque para todas as fases de operao; elevada flexibilidade e controlo dos ciclos de
operao, mediante as necessidades e ainda qualidade elevada do efluente final e
consistncia.
As desvantagens deste sistema so similares aos problemas de qualidade das
lamas associados aos tratamentos convencionais, nomeadamente possveis problemas de
sedimentao, desenvolvimento de espuma, etc. Os problemas especficos incluem as
dificuldades na sedimentao e necessidade de equalizao, quando h um grande
volume de efluente produzido e carncia de oxigenao do meio (Moreira, 1995).

De acordo com as caractersticas do RDS, optou-se por usar este reactor para o
estudo dos efluentes salinos de forma a maximizar a remoo conjunta de CQO e
de azoto amoniacal.

Como se tem referido ao longo deste captulo, os processos biolgicos de
tratamento de efluentes envolvem a utilizao de microrganismos. Seguidamente, so
descritas as comunidades microbianas envolvidas nestes processos bem como as
reaces de sntese de remoo do substrato e da oxidao da matria orgnica.

1.6. MICROBIOLOGIA DO PROCESSO
No processo de degradao de efluentes, parte da matria orgnica oxidada a
produtos finais na produo de energia para os processos vitais; a outra parte
convertida em novas clulas, que na ausncia de matria orgnica passam a metabolizar
as suas reservas celulares (respirao endgena) para obter energia, transformando essa
matria orgnica em produtos finais como CO
2
e H
2
O, como se pode observar pela
Figura 7.

19
INTRODUO
Matria orgnica
(substrato)
Novas clulas
Produtos finais
CO
2
, H
2
0, N
2
e P
O
x
id
a
o
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o
rg

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Resduo no
biodegradvel
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Matria orgnica
(substrato)
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Produtos finais
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g
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n
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Figura 7. Esquema do mecanismo de decomposio aerbia.

As reaces aerbias ocorrem em sequncia na qual predominam os seguintes
mecanismos: sntese (anabolismo) e respirao endgena (catabolismo).
No incio predominam as actividades de sntese, onde a matria orgnica
presente no efluente utilizada pelos microrganismos para as suas actividades
metablicas de crescimento e obteno de energia. Essa fase resulta no consumo de
oxignio e no aumento da populao de microrganismos.
Quando parte da matria orgnica originalmente presente se encontra removida
h a predominncia dos mecanismos da segunda fase da oxidao. No incio desta fase a
populao de microrganismos encontra o seu mximo e, devido baixa disponibilidade
de substrato no meio a principal fonte de alimento passa a ser o prprio protoplasma
celular, predominando assim os mecanismos de auto-oxidao ou de respirao
endgena.

Os principais microrganismos nos processos de tratamento aerbios necessitam,
alm de energia e fonte de carbono para a sntese celular, de alguns elementos
inorgnicos tais como azoto, fsforo potssio, clcio, e ainda outros micronutrientes

20
INTRODUO

minerais. A nutrio microbiana pode ser heterotrfica ou autotrfica dependendo da
sua fonte de alimento.
Os microrganismos heterotrficos so mais importantes porque utilizam matria
orgnica como fonte de energia e como fonte de carbono para a sntese, estabilizando-a.
No grupo de microrganismos heterotrficos, podem destacar-se as bactrias (Zooglea,
Aerobacter, Pseudomonas) e os protozorios (Vorticella, Paramecium, Colpoda),
Rotiferos e Nematodes.
Os microrganismos autotrficos oxidam a matria inorgnica para da obterem
energia, tendo como fonte de carbono o dixido de carbono. Os microrganismos mais
importantes nos processos de lamas activadas so os quimiossintticos, tais como as
bactrias Nitrosomonas e as bactrias Nitrobacter geralmente presentes nos processos
de nitrificao que sero abordados seguidamente.

Para alm dos microrganismos convencionais, existem ainda outros
microrganismos de alguma relevncia para o estudo de efluentes salinos. Vrios
microrganismos so capazes de crescer em ambientes contendo elevadas concentraes
de sal que podem ser divididos em trs categorias: halotolerantes (crescimento entre 0 e
0,3 M de NaCl), haloflicos moderados (crescimento entre 0,2 e 2,0 M de NaCl), e
halofilicos extremos (crescimento entre 3,0 e 5,0 M de NaCl). Na Tabela 4 pode-se
observar a concentrao de vrios ies existente na gua do mar (Edwards, 1990).

Tabela 4. Concentraes (g/L) existentes na gua do mar (Edwards, 1990).
gua do Mar
Na
+
10,8
K
+
0,4
Mg
2+
1,3
Ca
2+
0,4
Cl
-
19,6
Br
-
0,1
Salinidade total 35,2
pH 8,2

Para ambientes com elevada salinidade, os microrganismos haloflicos
apresentam concentraes internas de NaCl diferentes das concentraes externas, isto
, como a concentrao de NaCl externa aumenta, os mecanismos celulares so

21
INTRODUO
desenvolvidos para prevenir o aumento intracelular de NaCl. Elevadas concentraes
internas so txicas para as clulas, consequentemente, as membranas celulares
apresentam baixa permeabilidade aos ies Na
+
(Edwards, 1990).

Nas prximas seces descrevem-se os microrganismos envolvidos no
tratamento aerbio de efluentes, de forma a compreender a sua importncia e tambm a
necessidade do seu estudo que envolve actualmente a utilizao de tcnicas de
processamento de imagem da microbiologia dos processos.
1.6.1. BACTRIAS
As bactrias so microrganismos unicelulares, apresentam-se isoladas ou em
cadeias, possuem forma esfrica, bastonetes ou espiriladas. Especialmente as bactrias
nitrificantes so aptas a sintetizar o seu prprio material celular, a partir de carbono
inorgnico, pela utilizao de energia obtida da oxidao de minerais (azoto amoniacal
para as Nitrosomonas e nitritos para as Nitrobacter).
Num reactor RDS, a maioria da biomassa celular encontra-se organizada em
flocos. Desde o incio das pesquisas, observou-se que no tratamento de efluentes
domsticos prevaleciam bactrias formadoras de flocos designados por Zoogloea
ramigera (Ganczarczyk, 1983). Os flocos so uma estrutura complexa heterognea
constituda por estruturas agregadas designadas de microflocos contendo organismos
metabolicamente activos como no activos. A composio e a actividade alteram com a
idade do floco microbiano (Seviour & Blackall, 1999). A base dos flocos constituda
fundamentalmente por bactrias heterotrficas (Pseudomonas, Achromobacter,
Flavobacterium, Alcaligenes, Arthrobacter, Citromonas e Zoogloea) (J enkins et al.,
2004).
A sustentao dos flocos efectuada atravs de uma matriz polimrica com
composio qumica varivel, referida como substncia polimrica extracelular (EPS).
As EPS formam uma barreira protectora contra alguns perigos existentes no ambiente
exterior celular, como o caso de mudanas bruscas no pH (Liu & Fang, 2003). Sabe-se
hoje que as bactrias filamentosas que causam graves problemas na qualidade do
efluente final, apesar do seu baixo nmero, so extremamente importantes na
manuteno da estrutura do floco (Seviour & Blackall, 1999). A morfologia dos flocos
microbianos de extrema importncia pois permite verificar a capacidade de

22
INTRODUO

sedimentabilidade das lamas nos decantadores, tornando-se necessria a utilizao do
processamento e anlise de imagem.
Na Figura 8 pode-se observar alguns exemplos de bactrias filamentosas com
diferentes respostas a coloraes de Gram e Neisser.
a) b)
c) d)
a) b)
c) d)

Figura 8. a) Sphaerotilus natans; b) Microthrix parvicella; c) Thiothrix sp.; d)
Nocardia sp..

Para se ultrapassarem as situaes de crescimento filamentoso exagerado,
necessrio identificar correctamente a espcie ou espcies responsveis por este
crescimento. Aps a correcta identificao dos microrganismos causadores do problema
filamentoso poder-se- ento optar pelas medidas que incidam sobre as causas do
fenmeno e no apenas sobre os efeitos (Nicolau, 2002). Contudo, nem sempre fcil a
sua identificao devido s semelhanas entre as vrias bactrias filamentosas.

Quando as bactrias filamentosas ocorrem em excesso no sistema de tratamento,
no permitem a sedimentao de lamas no decantador secundrio, resultando num
fenmeno conhecido como bulking. Quando ocorrem em pouca quantidade, observa-se
tambm m sedimentao das lamas devido a formao de flocos pequenos, conhecidos
como pin-point.

23
INTRODUO
O bulking um problema muito habitual nos sistemas de lamas activadas,
resultando numa deficiente sedimentao da lama biolgica, podendo levar sua perda
com o efluente final e diminuio da qualidade do efluente final. Podem surgir outros
problemas associados ao bulking na estao de tratamento de guas residuais (ETAR)
como, por exemplo, o aumento da CQO e de slidos no efluente final, a diminuio da
concentrao de slidos na lama espessada e imediata reduo da idade das lamas, alm
da sobrecarga hidrulica na fase de tratamento de slidos na ETAR.
Podem distinguir-se dois tipos de bulking: o bulking viscoso ou zooglico e o
bulking filamentoso, sendo este o mais preocupante nos tratamentos biolgicos
aerbios. O bulking filamentoso resulta do crescimento excessivo de microrganismos
filamentosos. A partir do crescimento aproximadamente de 10 m de filamentos por ml
existe a desagregao flocular, com a consequente diminuio da sedimentao dos
slidos (Abreu, 2004). Ambos os tipos de bulking tm consequncias na sedimentao e
no espessamento. Embora o bulking seja reconhecido como um dos problemas mais
graves ao nvel dos sistemas de tratamento biolgico por lamas activadas, no existem
solues universais para controlar o excessivo crescimento destes microrganismos. As
aces correctoras dependem do microrganismo em causa. por isso importante
identificar o filamento dominante que provoca o bulking, para tentar solucionar o
problema, adoptando uma aco correctora especfica para combater tal microrganismo.

No tratamento secundrio levado a efeito por qualquer sistema de lamas
activadas frequente o desenvolvimento de uma camada superficial de espuma
(foaming) no reactor biolgico e no sedimentador secundrio. De forma geral,
distinguem-se trs tipos de espumas: Espumas originadas pela colocao em
funcionamento e/ou pela presena de detergentes. So brancas, pouco densas e
dispersveis, aparecendo tanto no reactor biolgico como no sedimentador secundrio;
Espumas originadas pela desnitrificao, que consistem na subida das lamas para a
superfcie do sedimentador secundrio (rising sludge) devido produo de azoto
gasoso; Espumas originadas pelo crescimento excessivo de certos microrganismos
filamentosos.
A espuma provoca vrias disfunes dentro do sistema de lamas activadas uma
vez que reduz a transferncia de oxignio, dificulta a manuteno e produz muitas vezes
um efluente de baixa qualidade. Algumas das bactrias formadoras de espuma, entre as

24
INTRODUO

quais Nocardia asteroides, Rhodococcus equi e Tsukamurella paurometabolum so
patognicas.

Com todos os problemas inerentes proliferao de vrios tipos de
microrganismos filamentosos, considera-se de extrema importncia o estudo atravs de
tcnicas de anlise de imagem da sua relao com as bactrias formadoras de flocos.
Assim, possvel a obteno de dados concretos de monitorizao permitindo aos
operadores o controlo de bulking e de espumas. No entanto, de forma generalizada, o
estudo da aplicao da anlise de imagem foi efectuado apenas morfologia dos
agregados microbianos.
1.6.2. PROTOZORIOS
Nas lamas activadas, para alm dos decompositores (bactrias e fungos) que
retiram a energia para o seu desenvolvimento, a partir da matria orgnica existente em
suspenso no afluente, existem ainda os seus consumidores que so todos os organismos
que predam as bactrias dispersas e outros organismos. neste segundo grupo se
inserem os protozorios. Os protozorios so seres unicelulares, complexos, podendo ter
vrias formas e um dos seus aspectos mais importante o facto de poderem ser usados
para monitorizar a operao de processos de tratamento de guas residuais. Na ausncia
de protozorios, o efluente final caracterizado por possuir uma CBO mais elevada e
uma maior turbidez, devido presena de muitas bactrias dispersas (Madoni, 1994).
A maior parte dos protozorios ciliados presentes nas estaes de tratamento
alimentam-se de bactrias, embora existam outros que predam ciliados ou flagelados.
Estes ciliados bacterifagos das lamas activadas podem ser divididos em trs grupos
funcionais com base no seu comportamento (exemplos observados na Figura 9):
Nadadores: nadam na fraco lquida e permanecendo em suspenso no tanque
de sedimentao (exemplo: Paramecium);
Mveis de fundo: habitam a superfcie dos flocos (exemplo: Aspidisca cicada);
Ssseis: esto fixos por um pednculo aos flocos e precipitam com estes durante
a sedimentao (exemplo: Vorticella convallaria).

Como o processo de lamas activadas se baseia na formao de agregados
bacterianos sobre os quais outros organismos se podem desenvolver, uma populao de
microrganismos com capacidade de se ligar lama tem vantagem sobre a populao que

25
INTRODUO
nada livremente na fraco lquida e que est sujeita a ser levada para fora do sistema,
atravs do efluente (Martins, 2002).
a)
c)
b)
d)
a)
c)
b)
d)

Figura 9. a) Vorticella convallaria; b) Euplotes e Stylonchia; c) Paramecium; d)
Opercularia.

Vrios estudos foram anteriormente desenvolvidos em sistemas biolgicos de
tratamento de guas residuais de forma a analisar a comunidade de protozorios
existente e averiguar os consequentes efeitos no efluente tratado. Ludzack & Noran
(1965) e Kincannon & Gaudy (1968) verificaram que a ausncia de protozorios do
meio provoca um aumento dos slidos suspensos do efluente, logo a turbidez tambm
maior. O estudo realizado por Salvad et al. (2001) permitiu conferir o efeito de adies
crescentes de sal na comunidade de protozorios e metazorios. As concentraes
estudadas variaram de 0,3 % a 4,0 % de NaCl. Entre 0,3 % e 1,0 % observou-se que
poucas espcies sobreviveram. Os protozorios mais resistentes adio de elevadas
concentraes de sal foram a Vorticella sp. e Opercularia articulata (ambos ciliados
ssseis). A partir de 1,0 % de sal no se verificou qualquer presena de protozorios no
sistema, evidenciando o efeito negativo do sal na presena de protozorios no licor
misto.

26
INTRODUO

Pela avaliao microscpica microbiana existente no RDS em estudo, foi
possvel tambm a observao da comunidade de protozorios que ser discutida no
Captulo 3.

1.7. REMOO BIOLGICA DE NUTRIENTES
O azoto e o fsforo existem naturalmente nos corpos receptores e so
indispensveis ao ciclo vital dos microrganismos. O problema reside quando so
encontrados em excesso. A elevada concentrao de azoto e fsforo pode provocar
problemas das mais variadas formas. A eutrofizao o fenmeno que ocorre devido ao
excesso de certos nutrientes bsicos num corpo receptor, causando o desenvolvimento
indesejvel de plantas aquticas. O processo normalmente acentuado quando os
corpos receptores se encontram estagnados como o caso dos lagos, lagoas e
reservatrios.
Neste captulo tem-se referido a importncia da remoo de nutrientes (RBN),
fundamentalmente de azoto e fsforo. Contudo, falta ainda divulgar como possvel a
sua remoo juntamente com a remoo de matria orgnica. Vrios estudos efectuados
demonstram que os processos biolgicos so de confiana e eficientes para a remoo
de fsforo e azoto (Metcalf & Eddy, 1991).
1.7.1. REMOO DE AZOTO
H vrias formas de azoto presentes no meio aqutico, como por exemplo,
amonaco (NH
3
), io amnio (NH
4
+
), nitrato (NO
3
-
), nitrito (NO
2
-
), xido nitroso (N
2
O),
azoto molecular (N
2
) e azoto orgnico na forma de aminocidos, pptidos, aminas, etc.
Segundo Metcalf & Eddy (1991), no tratamento de efluentes os compostos
azotados sofrem transformaes do tipo assimilao, nitrificao e desnitrificao,
convertendo o azoto amoniacal em produtos que podem ser removidos dos efluentes. Na
Figura 10 encontra-se representada a transformao de azoto nos processos biolgicos.

27
INTRODUO
Azoto Orgnico
(protenas, ureia)
Azoto Amoniacal
Azoto Orgnico
(clulas bacterianas)
Azoto Orgnico
(crescimento)
Nitrito
Nitrato Azoto (N
2
)
Decomposio
e hidrlise
Assimilao
Lisee Auto-oxidao
O
2
O
2
Desnitrificao
N
i
t
r
i
f
i
c
a

o
Carbono Orgnico
) (NO
3

) (NO
2

Azoto Orgnico
(protenas, ureia)
Azoto Amoniacal
Azoto Orgnico
(clulas bacterianas)
Azoto Orgnico
(crescimento)
Nitrito
Nitrato Azoto (N
2
)
Decomposio
e hidrlise
Assimilao
Lisee Auto-oxidao
O
2
O
2
Desnitrificao
N
i
t
r
i
f
i
c
a

o
Carbono Orgnico
) (NO
3

) (NO
2


Figura 10. Transformao do azoto orgnico nos processos de tratamento biolgico
(Adaptado de Metcalf & Eddy, 1991).

Na primeira fase do processo o azoto orgnico convertido em azoto amoniacal
enquanto na assimilao ocorre o processo inverso. A decomposio e hidrlise
consistem na transformao do azoto orgnico por intermdio de enzimas catalisadoras,
produzindo, no final da reaco, o io NH
4
+
. A fonte de azoto orgnico o material
produzido aps a hidrlise qumica: aminocidos, acares, aminas e pptidos.
Posteriormente ocorrem as etapas indispensveis remoo de azoto dos efluentes.

NITRIFICAO
O processo de nitrificao envolve a oxidao biolgica de azoto amoniacal a
nitrato em duas etapas, onde ambas so catalizadas por bactrias autotrficas sob
condies aerbias. Na primeira etapa ocorre a oxidao do azoto amoniacal a nitrito
pela aco de bactrias do gnero Nitrosomonas. O nitrito , ento, oxidado a nitrato
atravs da catlise biolgica promovida pelas bactrias do gnero Nitrobacter. O
processo de nitrificao pode ser descrito pelas seguintes reaces:

28
INTRODUO

energia clulas novas 4H O 2H 2NO 3O 2NH
2 2
as Nitrosomon
2 3
+ + + + +
+
(1)
energia clulas novas 2NO O 2NO
3
r Nitrobacte
2 2
+ + +

(2)
A converso de azoto amoniacal a nitrito considerada a etapa limitante do
processo. Vrios estudos revelaram tambm que a acumulao de nitrito se deve
inibio dos microrganismos do gnero Nitrobacter que so responsveis pela oxidao
do nitrito a nitrato. Normalmente esta inibio deve-se elevada concentrao de azoto
amoniacal livre, variaes na temperatura, baixas concentraes de oxignio dissolvido
e elevadas concentraes de slidos suspensos (Coelho, 1998). Alm disso, devido
toxicidade do nitrito essencial que as reaces (1) e (2) decorram sequencialmente
para promover a produo de nitrato e preservar a acumulao de nitrito (Csuros &
Csuros, 1999).

O processo de oxidao em questo afectado por vrios factores sendo os mais
importantes o pH, a temperatura e a concentrao de oxignio dissolvido (OD). Outros
factores tambm parecem ter influncia sobre a nitrificao, tais como a quantidade de
bactrias heterotrficas e a relao Carbono/Azoto (C/N) no meio. Estes factores
explicam, em parte, as variaes encontradas nos valores dos parmetros cinticos
(Ferraz & Gobbi, 1991).

pH
Em sistemas de lamas activadas, Grady & Lim (1980), referem que o pH situado
entre 7 e 9 o mais favorvel para o desenvolvimento de organismos nitrificantes. Para
alm desta gama de pH podem ser tambm observados outros valores, provavelmente
porque o pH no s influencia a taxa de crescimento como tambm a solubilidade de
diferentes compostos (azoto amoniacal, nitrito e metais). medida que o pH diminui, a
taxa de oxidao de azoto amoniacal diminui devido ao io H
+
influenciar a taxa de
crescimento das bactrias nitrificantes (Castro, 2003).

Temperatura
O processo de nitrificao ocorre numa larga faixa de temperatura, de 4 C a
45 C, sendo a temperatura ptima para as bactrias Nitrosomonas igual a 35 C. Para as

29
INTRODUO
bactrias Nitrobacter temperatura ptima encontra-se entre 35 C e 42 C. Este processo
fortemente dependente da temperatura (Ferreira, 2000).

Razo C/N
A razo carbono orgnico/azoto na alimentao do processo tem influncia na
dinmica das populaes de nitrificantes e de organismos heterotrficos que constituem
a biomassa no reactor. A multiplicao da populao de microrganismos presentes no
reactor est relacionada com a manuteno da razo carbono orgnico/azoto (C/N) a
nveis to reduzidos quanto possveis. Uma alta razo C/N retarda a acumulao das
bactrias nitrificantes, principalmente, das responsveis pela nitritao. Com isto o
tempo necessrio para a etapa de oxidao do azoto amoniacal a nitrito aumenta
consideravelmente (Castro, 2003).

Oxignio Dissolvido (OD)
O oxignio dissolvido no reactor um pr-requisito indispensvel para ocorrer a
nitrificao. No caso de concentraes de oxignio dissolvido abaixo de 0,5 mg/L, a
taxa de nitrificao praticamente nula, apesar de as bactrias resistirem em condies
anxicas (Coelho, 1998). Esta concentrao crtica depende das caractersticas da
biomassa, da taxa total de respirao, das resistncias difusionais e da transferncia de
massa.
Para que se atinja a taxa de nitrificao mxima, a literatura recomenda valores
acima de 0,5 mg/L de oxignio dissolvido no meio lquido. No entanto valores mais
elevados, entre 2,0 4,0 mg/L, devem ser mantidos no tanque arejado para garantir que
em pontos de acesso mais difcil do oxignio, como no interior dos flocos formados
durante o processo, seja mantida uma concentrao superior crtica (Coelho, 1998).

Devido a todos estes factores, o processo de nitrificao nos efluentes
considerado como o mais instvel no processo de remoo biolgica de nutrientes,
sendo por isso essencial o seu controlo durante o tratamento por lamas activadas.

DESNITRIFICAO
Este processo biolgico aplicado para remover nitrato dos efluentes pela sua
reduo a azoto molecular (N
2
). Para que esta transformao ocorra, os microrganismos

30
INTRODUO

responsveis pela transformao requerem uma fonte de carbono orgnico (dador de
electres), que pode at ser adicionado artificialmente (von Sperling, 1997). O substrato
orgnico utilizado nesta reaco sempre proveniente de molculas pequenas, ou
matria orgnica biodegradvel. Entre as substncias possivelmente assimilveis
esto o metanol, glicose, glicerina, etanol, acetato e cidos gordos volteis. O substrato
orgnico deveria ser nutriente pertencente carga poluente a ser tratada. Entretanto, h
efluentes onde a concentrao de carbono orgnico muito baixa para que ocorra a
desnitrificao.
Em unidades de tratamento em escala industrial, cujo interesse a remoo
conjunta da carga orgnica e a transformao do azoto nas formas de azoto amoniacal e
nitrato na forma molecular (N
2
), necessrio, frequentemente, o uso de fontes externas
de carbono na etapa de desnitrificao, pois o nitrato o produto de uma reaco de
nitrificao em condies aerbicas, nas quais ocorre tambm eliminao do carbono
orgnico (Souza, 2000).
Admite-se que o nitrato reduzido a nitrito pela enzima nitrato redutase e o
nitrito posteriormente reduzido a N
2
O e N
2
. Uma vez que a reduo do nitrato
realizada quando o oxignio molecular no est presente, h uma necessidade de
condies totalmente anxicas para que a desnitrificao ocorra e o nitrato desempenhe
a funo do oxignio na cadeia de transporte de electres (Furtado et al., 1993).
A sequncia de produtos formados na desnitrificao encontra-se representada
na equao (3).
2 2 2 3
N O N NO NO NO

(3)

Este processo pode ser realizado por uma srie de gneros microbianos
encontrados em sistemas de tratamento de efluentes, incluindo Alcaligenes,
Pseudomonas, Achromobacter, Aerobacter, Bacillus, Flavobacterium, Micrococcus e
Proteus. As bactrias desnitrificantes so bioquimicamente e taxionomicamente
diversas, sendo a maioria heterotrficas e como tal oxidam substncias orgnicas.
A desnitrificao pode ocorrer paralelamente nitrificao e em sistemas
aerbios de lamas activadas. Este facto deve-se formao de zonas pobres em
oxignio, criando zonas anxicas no interior dos flocos microbianos. Este fenmeno
pode tambm ocorrer nos sedimentadores de lamas, onde a disponibilidade de oxignio

31
INTRODUO
escassa e a de nitrato mais elevada proveniente das zonas de nitrificao arejadas
(Ferreira, 2000).

Mais uma vez, existem vrios factores que afectam o processo de desnitrificao
(pH, temperatura e a concentrao de OD). Outro dos factores a ter em ateno para o
processo de desnitrificao a presena de nitrato.

pH
De uma maneira geral, a taxa mxima ocorre na faixa de pH entre 7,0 e 7,5,
diminuindo linearmente com a reduo e com o aumento de pH. Para um pH de 6,0, as
taxas de desnitrificao variam entre 40 e 80 % do valor mximo. Para um pH de 8,0 as
taxas de desnitrificao variam entre 70 e 90 %, aproximadamente. Apesar da
diversidade de informaes concluiu-se que se devem usar valores prximo
neutralidade, evitando-se inferiores a 6,0 e superiores a 8,0 (Metcalf & Eddy, 1991).

OD
A ausncia de oxignio dissolvido um pr-requisito para que ocorra a
desnitrificao, existindo a necessidade de que haja condies anxicas no floco, ou
seja, na vizinhana imediata das bactrias desnitrificantes. Isto no impede que haja
concentraes reduzidas de oxignio dissolvido no meio e mesmo assim ocorra a
desnitrificao, pelo facto das bactrias estarem num micro-ambiente anxico do floco.

xido de Azoto
A presena de NO
3
-
importante para induzir a enzima nitrato redutase. Desta
forma necessria a presena de NO
2
-
no meio. Baixas concentraes de NO
3
-

controlam a taxa de desnitrificao com cintica de primeira ordem. Altas
concentraes de NO
3
-
geralmente afectam a cintica de reduo, inibem a reduo
enzimtica de NO, causando a acumulao de N
2
O.

Neste trabalho, pretende-se apenas o estudo do processo de nitrificao, dada a
estratgia operacional adoptada. No Captulo 3 discute-se esta etapa extremamente
importante no processo de remoo de azoto.

32
INTRODUO

1.7.2. REMOO DE FSFORO
O fsforo presente em guas residuais encontra-se geralmente sob a forma de
fosfato. Em guas residuais domsticas, o fsforo aparece, principalmente, como:
fsforo orgnico, polifosfato e ortofosfato. A remoo de fsforo das guas residuais
envolve a incorporao de fosfato aos slidos em suspenso e a consequente remoo
desses slidos. O fsforo pode ser incorporado em microrganismos ou removido por
precipitao qumica (Metcalf & Eddy, 1991).

Neste trabalho, torna-se tambm relevante a abordagem da remoo biolgica de
fsforo (Figura 11) uma vez que se trabalhou com um sistema de lamas activadas
operando num Reactor Descontnuo Sequencial. No entanto, a estratgia utilizada no
RDS no apresenta uma fase anaerbia, no se esperando por isso elevadas percentagens
de remoo de fsforo do afluente, que seria possvel atingir em condies de
anaerobiose.

Fsforo Fsforo
PHB
PHB
AGV
Fsforo
Anaerbia Aerbia
E
n
e
r
g
i
a
Energia
Fsforo
CO
2
+H
2
O
O
2
ou NO
3
Crescimento
celular
OAF OAF
Fsforo Fsforo
PHB
PHB
AGV
Fsforo
Anaerbia Aerbia
E
n
e
r
g
i
a
Energia
Fsforo
CO
2
+H
2
O
O
2
ou NO
3
Crescimento
celular
OAF OAF

Figura 11. Remoo biolgica de fsforo.

A zona anaerbia oferece uma vantagem competitiva para os armazenadores de
fsforo visto que captam os substratos nesta zona antes dos microrganismos no
armazenadores de fsforo. Assim nesta zona desenvolve-se ou selecciona-se uma
grande populao de microrganismos armazenadores de fsforo, j que os nveis so
significativamente elevados.


33
INTRODUO
O organismo associado mais frequentemente e com mais destaque remoo de
fsforo pertence ao gnero Acinetobacter. Um importante benefcio da seleco desta
populao a preveno da proliferao de bactrias filamentosas que causam
problemas de intumescimento das lamas.
A presena de um reactor anaerbio com cidos gordos volteis (AGV) a
montante dos outros reactores causa o desenvolvimento de uma populao bacteriana
que normalmente no se desenvolve no sistema de lamas activadas convencional (OAF -
Organismos Acumuladores de Fsforo). Em ambiente anaerbio, os organismos
aerbios no utilizam material orgnico; j os OAF tm a opo de armazenar nas suas
clulas os AGV (acetato) do material orgnico presente no afluente como
polihidroxibutirato (PHB). Os organismos usam a energia de polifosfato armazenado
anteriormente, que ento se transforma em fosfato e passa para a fase lquida.
Nas zonas anxicas e aerbias seguintes, o PHB metabolizado pelos OAF para
finalidades catablicas e anablicas, usando nitrato e oxignio como oxidantes. Parte da
energia obtida no catabolismo vai para a regenerao do polifosfato perdido no reactor
anaerbio. Nesse processo ocorre absoro de fosfato da fase lquida para dentro dos
organismos. Outra parte da energia usada para o crescimento dos OAF.
Os OAF, ao captar e reter material orgnico num ambiente anaerbio, tm
vantagem sobre as bactrias mais usuais de lamas activadas que no tem actividade
metablica num ambiente anaerbio.
Como o crescimento dos OAF depende directamente da presena de acetato no
reactor anaerbio extremamente importante evitar a entrada de nitrato, uma vez que no
processo de desnitrificao o acetato seria oxidado pelos organismos convencionais
(Gaspar, 2003).

O acompanhamento das concentraes de fsforo sob a forma de fosfato, com o
aumento da concentrao de sal, permitiu obter algumas concluses que sero
apresentadas no Captulo 3.

1.8. ANLISE DE IMAGEM
Para alm das propriedades biolgicas e qumicas que envolvem a remoo de
nutrientes e de matria orgnica e das propriedades fsicas (disperso, distribuio de

34
INTRODUO

tamanhos, velocidade de sedimentao), a determinao da morfologia dos agregados
microbianos pode ser realizada recorrendo anlise de imagem.
A anlise de imagem uma poderosa ferramenta para o estudo da morfologia e
fisiologia da biomassa bacteriana e das suas relaes com as condies operacionais de
processos no tratamento de efluentes, tanto anaerbio quanto aerbio. Esta
caracterizao permite o estudo do comportamento dos microrganismos (formao dos
flocos, ndice de bactrias filamentosas, protozorios, grnulos anaerbios). A
determinao destes agregados microbianos e a determinao dos parmetros
relacionados com os filamentos so informaes bastante valiosas que a anlise de
imagem pode oferecer aos sistemas biolgicos de tratamento de efluentes.
Em processos aerbios, o reconhecimento das espcies de protozorios e
tambm de metazorios nos tanques de arejamento fornecem informaes considerveis
relativas s condies de operao das ETAR. De facto, tm sido desenvolvidas tcnicas
de processamento de imagem para identificar automaticamente os protozorios nos
tanques de arejamento e as espcies mais comuns de metazorios. Tm sido tambm
testados mtodos automatizados da anlise de imagem para caracterizar a morfologia
dos flocos aerbios, sendo ainda desenvolvidos procedimentos de aquisio de imagem
para optimizao deste processo de aquisio. Seguidamente, so descritos alguns dos
mtodos actualmente mais utilizados na aquisio de imagens, bem como os
procedimentos empregues no tratamento posterior.
Os mtodos de aquisio por cmara de vdeo acoplada a microscpio so os
mais utilizados. As imagens so obtidas atravs de uma placa de aquisio de imagens
instalada no computador. Atravs da placa de aquisio de imagens, a informao
analgica transformada em informao digital em que cada pxel corresponde a um
espao da imagem (com um mnimo limitado pelos sensores de captura da cmara) e
possui um valor que corresponde mdia desse espao. Os formatos de ficheiros de
gravao mais comuns so o tiff (Tagged Image File Format), o bmp (Windows Bitmap)
e o gif (CompuServe Bitmap).
Depois de adquiridas, as imagens so processadas de modo a obter-se uma
imagem binria contendo apenas a informao relevante para o estudo pretendido. O
primeiro passo do processamento de imagens normalmente a eliminao do rudo que
surge durante a aquisio da imagem. Neste passo pode-se utilizar um filtro em que
cada pxel substitudo pelo valor de uma operao englobando os vizinhos do mesmo.

35
INTRODUO
Os filtros mais comuns para este fim so os filtros de mdia, de mediana, adaptativo, o
filtro Wiener e os filtros de baixas frequncias, entre outros (Dougherty, 1994).
Seguidamente, deve aumentar-se o contraste da imagem visualizada, atravs de
uma normalizao, equalizao por histograma ou alterando a intensidade de
visualizao atravs da aplicao de uma funo logartmica ou exponencial ao valor de
cada pxel (Russ, 1995).
Na binarizao da imagem necessrio estabelecer um limite de deteco de cor
que distinga os objectos do fundo. Este limite pode ser definido manualmente ou obtido
automaticamente pelo clculo da mdia ou da mediana da imagem. As imagens podem
ser binarizadas, o que possibilita a obteno dos objectos com valor 1 e do fundo com
valor 0 (os objectos surgem em cor branca sobre um fundo preto). Por vezes
necessrio melhorar a imagem binria de modo a resolver alguns problemas, tais como:
remoo de objectos que se encontrem parcialmente cortados pela fronteira da imagem,
de modo a no falsear os resultados obtidos; remoo de sujidades (fragmentos que so
eliminados pelo programa concebido quando a sua rea superficial inferior a um
determinado valor), o que pode ser conseguido atravs de um filtro de tamanho ou
forma que apenas selecciona os objectos; separao de objectos contguos atravs de
operaes booleanas, eroses, dilataes, entre outras.
A partir das imagens binrias so calculados os parmetros de interesse como
por exemplo o nmero de objectos, tamanho, distribuio de reas, dimenses fractais,
parmetros morfolgicos (esfericidade, compacidade, excentricidade, etc.), entre muitos
outros. A imagem binria pode ainda servir como uma mscara das regies de interesse
na imagem original, e proceder tambm determinao de momentos mssicos e tons
de cinzento, entre outros.

Em geral, a anlise de imagem consiste na segmentao, passo onde se realiza a
distino entre os objectos e o fundo da imagem resultando numa imagem binria. Para
filamentos essa anlise acaba por ser mais difcil uma vez que so necessrias operaes
de realce devido s dimenses dos filamentos serem menores do que os flocos.
Finalmente, procede-se ao reconhecimento dos objectos a partir da luminosidade e da
forma, j que estes dois so os critrios mais importantes.
possvel relacionar a morfologia dos microrganismos existentes nos sistemas
biolgicos com as propriedades de sedimentao das prprias lamas, como demonstram
os trabalhos de Ganczarczyk (1994) ou de Grijspeerdt & Verstraete (1997).

36
INTRODUO

Em trabalhos mais recentes, foi determinada a quantidade de bactrias
filamentosas atravs dos estudos de da Motta et al. (2001a, 2001b), usando
posteriormente esses dados para monitorizar problemas dedecantabilidade nas estaes
de tratamento de guas residuais. Amaral et al. (2002, 2005) relacionaram os
parmetros morfolgicos dos flocos e dos filamentos com os SST e IVL atravs de uma
tcnica de estatstica multivarivel designada por Mtodo dos Mnimos Quadrados
Parciais (PLS).
Apesar do seu elevado potencial, poucos foram os estudos sobre a caracterizao
morfolgica automtica dos protozorios e dos metazorios atravs da anlise de
imagem. O uso de parmetros morfolgicos e das dimenses fractais acoplados s
tcnicas de estatstica multivarivel tais como a Anlise de Componentes Principais
(PCA), para identificar protozorios e metazorios so referidos nos trabalhos de
Amaral et al. (1999). Actualmente o reconhecimento de protozorios por processamento
de imagem tem ganho nfase na comunidade cientfica recorrendo a anlise
discriminante e tambm a redes neuronais.

Neste trabalho pretende-se efectuar o estudo dos flocos microbianos por anlise
de imagem, visualizando a alterao de conformao de acordo com o choque resultante
da adio crescente de sal no sistema.



37























2. MATERIAIS E MTODOS

MATERIAIS E MTODOS

2.1. DESCRIO DA UNIDADE EXPERIMENTAL
Os estudos cinticos, de sedimentao e a anlise de imagem das lamas
activadas foram conduzidos em laboratrio utilizando um RDS (em acrlico com
capacidade para 50 L) contendo aproximadamente 5 L de um inculo. Na Figura 12
observa-se ao lado do RDS o tanque de alimentao de PVC com capacidade para 50 L
de afluente. No interior do RDS encontra-se um agitador HeidolpH (RZR2102)
constitudo por um sistema de agitao tipo p (com 3 ps) tendo como funo a
homogeneizao do meio lquido. O afluente existente no tanque de alimentao foi
adicionado ao RDS recorrendo a uma bomba LMI, modelo Liquitrin DPC-40. O
arejamento foi fornecido atravs de um compressor (modelo CCA2, CIREI), com filtro
de ar, vlvula do tipo on-off e mangueira dispersora para a reduo do tamanho das
bolhas de ar que entram no sistema. Este sistema de arejamento encontrava-se
incorporado no RDS. Pode-se observar pela mesma Figura 12 que a unidade
experimental conta com um microcomputador dedicado obteno em linha da base de
dados e exibio das variveis do processo. Utilizou-se um software comercial de
controlo supervisor FIX-DMACS MMI verso 6.2 (The Intellution Inc.) cujo painel de
operao pode ser observado pela Figura 13. O sistema de controlo permite monitorizar
o sistema de alimentao bem como a agitao e o oxignio dissolvido no licor misto.
Foram utilizados elctrodos de pH (Actron), oxignio dissolvido (Danfoss),
potencial de oxidao-reduo (Actron) e nvel (Smar) na monitorizao em linha do
sistema. Os dados adquiridos eram enviados ao controlador CD-600 (Smar) atravs dos
respectivos transmissores.
Como foi referido no Captulo 1, o acompanhamento do pH de extrema
importncia devido ao crescimento microbiano e a manuteno da biomassa. O
potencial de oxidao-reduo reflecte variaes do sistema, tais como a concentrao
de oxignio dissolvido, de matria orgnica, de alguns compostos txicos e da
actividade microbiana. Indica inclusive, algumas condies de operao do sistema,
como a carga elevada de nutrientes e excesso ou falta de arejamento.


40
MATERIAIS E MTODOS


Figura 12. RDS utilizado na realizao dos testes laboratoriais.



Figura 13. Painel de controlo supervisor Operao do processo.




41
MATERIAIS E MTODOS

2.2. INCULO E ACLIMATAO
Na realizao deste trabalho foi necessrio recorrer a um inculo cedido pelo
Sistema Petrobrs S.A., proveniente da estao de tratamentos de efluentes industriais
da Refinaria Gertlio Vargas (PR) Lamas REPAR. O inculo foi mantido no interior
do reactor durante todo o estudo e o volume inicial de biomassa presente no reactor era
aproximadamente de 5 L com concentrao mdia de 2300 mg/L em SSV.

Quando se pretende a remoo de compostos orgnicos especficos, torna-se
necessria a aclimatao da biomassa ao efluente. O tempo necessrio para a
aclimatao dos microrganismos depende de vrios factores, entre eles destacam-se a
fonte de biomassa, a temperatura de operao e a idade das lamas, podendo ser de
apenas alguns dias ou ento 5 a 6 semanas (Eckenfelder, 2000).

Uma vez que este trabalho pretende verificar o desempenho do RDS a crescentes
concentraes de sal, o inculo foi submetido a etapas de aclimatao sempre que se
alteravam as concentraes de NaCl em estudo. A aclimatao foi essencial para que os
microrganismos apresentassem estabilidade e capacidade de degradao s
interferncias que foram introduzidas no processo biolgico. Deste modo, antes de cada
avaliao cintica, os microrganismos adaptavam-se durante 15 dias ao NaCl
adicionado em concentraes crescentes. De 2 em 2 dias era adicionado ao reactor
efluente juntamente com a concentrao de sal em estudo no momento. Nesse mesmo
perodo de adaptao, foram recolhidas amostras para anlise da eficincia de remoo
de azoto amoniacal e de CQO, a fim de verificar a adaptao da biomassa e capacidade
de remoo.


42
MATERIAIS E MTODOS

2.3. COMPOSIO DO EFLUENTE
O efluente utilizado em todos os testes foi de natureza sinttica, variando apenas
as concentraes de sal utilizadas. A composio do efluente utilizado para este estudo
apresenta-se na Tabela 5 (Coelho, 1998). A presena de alguns elementos com
concentraes muito baixas na composio do efluente, tem como objectivo a
manuteno da biomassa existente no reactor biolgico.

Tabela 5. Composio do efluente sinttico utilizado para os vrios testes realizados.
Componente Concentrao / mg/L
NH
4
Cl 76,1
C
6
H
12
O
6
300
MgSO
4
.7H
2
O 16,7
NaHCO
3
243,3
Na
2
CO
3
162,2
Na
2
HPO
4
.12H
2
O 46,2
CaCl
2
.7H
2
O 4,7
KCL 4,7
CuSO
4
>0,2
ZnSO
4
.7H
2
O >0,2
MnSO
4
.HO >0,2
FeCl
3
.6H
2
0 >0,2
CQO 300
NH
3
25
NO
3
0,0
PO
4
7,0


O estudo do efeito do sal no desempenho do RDS iniciou-se com um ensaio
controlo sem sal no efluente. Aps anlises peridicas dos ndices de remoo de
carbono e azoto, e verificando que a biomassa se apresentava em actividade metablica
adequada, promoveu-se a aclimatao da biomassa ao composto inibitrio iniciando-se
a adio de sal (NaCl) ao meio reaccional. O meio sinttico utilizado apresentava a
composio citada na Tabela 5 acrescido de variadas concentraes de sal (0,5 % a
6,0 %).


43
MATERIAIS E MTODOS

2.4. DESEMPENHO DO REACTOR EM CONDIES SALINAS
Para observar o desempenho do RDS, foram realizados vrios testes com o
intuito de avaliar o comportamento das variveis chave em funo do aumento da
concentrao salina.
2.4.1. ESTRATGIA PULSANTE
Os estudos do desempenho do RDS decorreram durante 360 minutos. A
estratgia, conforme mostra a Figura 14, consiste na alternncia da fase aerbia para a
fase anxica de 30 em 30 minutos. Durante os 210 minutos iniciais a alimentao
variava da mesma forma. Nos 150 minutos finais suprimiu-se a alimentao.
Optou-se pelo enchimento em pulsos simtricos (relacionado com o caudal de
alimentao) devido ao desempenho demonstrado pelo RDS quando comparado com o
enchimento linear em trabalhos desenvolvidos por Coelho (2000). Esta estratgia visa a
obteno de elevadas percentagens de remoo de azoto amoniacal do efluente,
minimizando as concentraes inibitrias para os microrganismos no interior do reactor.
De notar que a agitao no reactor esteve sempre presente ao longo de todo o perodo
experimental. No final de cada teste procedeu-se etapa de separao das lamas do
efluente tratado por sedimentao.

Alimentao e
arejamento
Paragemda
alimentao e
arejamento
Alimentao e
arejamento
Alimentao e
arejamento
Paragemda
alimentao e
arejamento
Paragemda
alimentao e
arejamento
30 min 30 min 30 min
30 min
30 min 30 min
Alimentao e
arejamento
30 min
Paragemda
alimentao
30 min
Paragemdo
arejamento
120 min
INCIO
FIM
Alimentao e
arejamento
Paragemda
alimentao e
arejamento
Alimentao e
arejamento
Alimentao e
arejamento
Paragemda
alimentao e
arejamento
Paragemda
alimentao e
arejamento
30 min 30 min 30 min
30 min
30 min 30 min
Alimentao e
arejamento
30 min
Paragemda
alimentao
30 min
Paragemdo
arejamento
120 min
INCIO
FIM

Figura 14. Sequncia de etapas utilizada na estratgia pulsante.

Para uma melhor compreenso da estratgia adoptada, apresenta-se nas Figuras
15 e 16 a variao de volume e de oxignio dissolvido no interior do reactor,

44
MATERIAIS E MTODOS

respectivamente. Ambos os dados foram adquiridos em linha a partir do software que
supervisiona todo o processo. Os restantes testes realizados apresentam uma tendncia
semelhante que se segue.
0
5
10
15
20
25
30
0 40 80 120 160 200 240 280 320 360
Tempo / min
V
o
l
u
m
e

/

L

Figura 15. Variao do volume do reactor.
0
2
4
6
8
10
0 40 80 120 160 200 240 280 320 360
Tempo / min
O
D

/

m
g
/
L

Figura 16. Variao do oxignio dissolvido.

Como foi anteriormente referido, a estratgia pulsante consiste na adio e
supresso controlada de efluente e de oxignio no sistema, de forma a permitir a
nitrificao do efluente sem afectar a remoo por parte da biomassa existente no
processo. Sendo o sistema de tratamento em batch, estes dados apontam para o aumento

45
MATERIAIS E MTODOS

do volume de licor misto existente no reactor ao longo do tempo, com vrios patamares
devido paragem da alimentao. Nesta fase ocorre a sntese microbiana dos nutrientes
e da matria orgnica. Nos 150 minutos finais suprimiu-se a alimentao,
permanecendo o volume constante.
Quando se opera um sistema na presena de microrganismos aerbios torna-se
fundamental o arejamento do processo. O arejamento permite no s o consumo de
nutrientes como tambm a homogeneizao do sistema que por vezes no satisfatria
quando se utiliza apenas um agitador. Esse arejamento permite aumentar a transferncia
de oxignio do sistema e consequentemente aumentar tambm a eficincia de remoo
de matria orgnica e de nutrientes. Pela Figura 16 observa-se que a partir de 240
minutos de ensaio se extinguiu o arejamento detectando-se no final nveis relativamente
baixos de oxignio.

Os resultados finais dependem das condies operacionais (carga alimentada de
efluente e OD). Sendo assim, para garantir a reprodutibilidade dos resultados
realizaram-se testes em duplicado de forma a manter os valores referidos na Figura 15 e
na Figura 16 constantes.

2.5. MTODOS ANALTICOS
Durante cada teste foram recolhidas amostras (anlises em diferido) da
alimentao, do efluente antes de iniciar o teste no reactor e a cada trinta minutos foi
retirada uma nova amostra para o acompanhamento das concentraes de azoto
amoniacal, nitrato, fosfato e carga orgnica (expressa em CQO). No final de cada teste
foi tambm avaliada a turbidez do efluente e o IVL.
As anlises em diferido foram realizadas de acordo com os procedimentos
descritos no manual Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater
(APHA et al., 1989).
Para observar a variao da concentrao de biomassa ao longo dos testes, foram
retiradas amostras nos tempos, 0 minutos (incio do teste), 210 minutos (fim da
alimentao ao reactor) e 360 minutos (fim do teste) para determinao dos SSV.
Atravs desta anlise possvel averiguar o crescimento microbiano durante cada
ensaio.

46
MATERIAIS E MTODOS

Aps a realizao dos testes em duplicado, procedeu-se anlise da biomassa
por microscopia ptica (Nikon, mod. Eclipse E200) de forma a observar a presena e
tambm a variao da populao microbiana durante o processo. A microscopia
permitiu a implementao de um sistema de anlise digital de imagens de caracterizao
microbiolgica da biocenose do reactor.
2.5.1. DETERMINAO DA CONCENTRAO DE AZOTO AMONIACAL
Esta anlise efectuada empregando-se um elctrodo io selectivo (Corning) de
azoto amoniacal de acordo com o procedimento 4500 NH
3
D (APHA et al., 1989). A
5 mL da amostra so adicionados 50 L de soluo de NaOH 10 M. Foi construda
previamente uma curva padro utilizando cloreto de amnio (NH
4
Cl) em concentraes
variadas devido s variaes de corrente.
2.5.2. DETERMINAO DA CONCENTRAO DE NITRATO
A anlise foi realizada atravs de um mtodo colorimtrico de acordo com o
procedimento 4.132 existente no Standard Methods (APHA et al., 1989).
2.5.3. DETERMINAO DA CQO
A determinao da carga orgnica foi efectuada pela CQO seguindo o mtodo
colorimtrico e a leitura de absorvncia no espectrofotmetro (DR 4000UV, HACH) -
procedimento 5.220D existente no Standard Methods (APHA et al., 1989). Esta
metodologia deve ser usada apenas para concentraes salinas inferiores a 500 mg/L
(0,5 %). A partir da adio de 0,5 % de NaCl detectaram-se interferncias na
determinao da CQO devido precipitao do cloreto existente nas amostras.
Procurou-se, ento, utilizar a metodologia desenvolvida por Freire & SantAnna J r.
(1998) que prope uma modificao no mtodo de determinao de CQO para efluentes
salinos. Mesmo assim, foi necessrio efectuar diluies das amostras antes da adio da
soluo digestora e da soluo cida, uma vez que esta metodologia se aplica a
concentraes inferiores a 6,0 % de sal.
2.5.4. DETERMINAO DE SLIDOS SUSPENSOS VOLTEIS (SSV)
A concentrao da biomassa total foi determinada por mtodo gravimtrico
padro (SSV) nos tempos inicial, final da etapa de enchimento e final do tempo total de
cada ensaio usando os procedimentos 2.540D e 2.540E do Standard Methods (APHA et

47
MATERIAIS E MTODOS

al., 1989). Este teste teve como finalidade a obteno das concentraes de biomassa no
interior do reactor biolgico de forma a avaliar o efeito do sal.
2.5.5. DETERMINAO DO NDICE VOLUMTRICO DO LAMAS (IVL)
O IVL definido como o volume ocupado por 1 g de lodo aps uma decantao
de 30 minutos determinando a partir da biomassa sedimentada no fim de cada ensaio
(procedimento 2.710D do Standard Methods APHA et al., 1989). Os resultados
referentes ao IVL so tambm relacionados com o processamento de imagem, como
apresentado no Captulo 3.
2.5.6. DETERMINAO DA TURBIDEZ DO SOBRENADANTE
A anlise da turbidez foi efectuada aps a determinao do IVL (sedimentao
das lamas durante 30 min). Colocou-se um branco de gua destilada no
espectrofotmetro (DR 4000UV, HACH) a 860 nm e seguidamente a amostra, onde se
obtinha uma turbidez em unidades FTU.
Esta determinao servir para relacionar com o IVL e permite tirar concluses
relativamente sedimentabilidade das lamas. Como a turbidez do efluente tambm
uma forma de estudar a sedimentao das lamas, estes dados so relacionados com o
processamento de imagem.
2.5.7. DETERMINAO DO FOSFATO
Para a determinao da concentrao de fosfato foi adoptado um mtodo
colorimtrico pela utilizao de um reagente de deteco PhosVer. A leitura de
absorvncia foi efectuada no espectrofotmetro (DR 4000UV, HACH) a 890 nm.

2.6. AQUISIO E PROCESSAMENTO DE IMAGEM DAS
LAMAS ACTIVADAS
A aquisio das imagens dos flocos de lamas activadas foi efectuada atravs da
tcnica de microscopia em campo claro com o auxlio de um microscpio (Nikon
Eclipse 200), empregando-se a ampliao de 100 vezes para a visualizao adequada
dos agregados microbianos e mantendo-se constante a iluminao do sistema para todas
as amostras. O microscpio equipado com uma cmara CCD (Nikon Coolpix 990)
dotada de um carto de memria removvel, sendo a captura das imagens realizada por

48
MATERIAIS E MTODOS

uma matriz RGB com dimenses 2048 x 1536 pixis de 24 bit (16 milhes de cores
aproximadamente).
No final do tratamento biolgico foram recolhidos 4 amostras do licor misto,
mantendo-se um perodo de tempo mximo entre a recolha e a aquisio das imagens de
30 minutos. As amostras so preparadas depositando cuidadosamente uma gota (50 L)
do licor numa lmina e coberta com lamela de dimenso (24 x 32) para a observao e
aquisio das imagens. Para cada percentagem de sal estudada foram adquiridas cerca
de 25 imagens por amostra para processamento posterior (total de 100 imagens).
As imagens digitais adquiridas foram guardadas em formato TIFF no carto
removvel de memria e transferidas para o computador com o auxlio de um driver de
leitura, o qual transfere a representao digital das imagens para o conversor analgico-
digital instalado no computador que efectua a leitura do sinal magntico do carto e
armazena a representao digital numa matriz na forma de pxeis no computador.
Para o processamento das imagens digitais utilizou-se um processador Pentium
M com velocidade de processamento de 1.5 GHz e 512 megabytes de memria.
As imagens digitais dos flocos de lamas activadas foram processadas atravs do
software de processamento digital de imagens IMAGE J. Posteriormente, as imagens
binrias obtidas recorrendo ao programa anterior foram utilizadas em ambiente
MATLAB para a determinao de vrios parmetros fundamentais para a realizao do
diagnstico dos agregados microbianos e a sua relao com os parmetros fsico-
qumicos.

2.6.1. IMAGE J
Com a utilizao do programa de anlise de imagem IMAGE J pretende-se obter
uma imagem binria representativa dos agregados microbianos, sendo por isso
necessrio aplicar algum processamento imagem principal.
A primeira fase do processamento de imagem envolve a converso da imagem
escala de cinzentos. A escala de pxeis a cinza representam um nvel de brilho, variando
de preto a branco. Uma imagem que transformada escala de cinza (8-bit) aparece
com um pxel de valor 0 completamente preto e um pxel com um valor de 255
completamente branco. J um pxel de valor intermdio deve apresentar uma cor de
intermdia.

49
MATERIAIS E MTODOS

Seguidamente, aplicou-se a subtraco do fundo da imagem para visualizar os
agregados microbianos separados do prprio fundo da imagem. Para seleccionar o
campo da imagem de interesse para o operador, realizou-se a aplicao de limites de
cinzentos. A partir deste ajuste obtm-se a imagem binria (converso a preto e branco).
A etapa seguinte pretende remover pxeis com dimenses muito pequenas que
no correspondem a flocos. Por diversas vezes surgem pequenas partculas de sujidade
(detritos) na lmina que devem tambm ser excludas. Os programas de processamento
de imagem esto tambm aptos para a funo de eliminao de sujidade.
Posteriormente, aplicaram-se filtros morfolgicos aos objectos da imagem
binria. A eroso altera a forma dos objectos nas imagens reduzindo a estrutura dos
objectos. Aplica-se uma nova opo de processamento da imagem (XOR) onde a
imagem surge apenas com a superfcie dos agregados. Esta tarefa realizada na imagem
original com a imagem que sofreu a eroso.
Finalmente, surgiu na imagem original os contornos dos agregados para a
anlise posterior dos parmetros morfolgicos. Esta imagem tem como objectivo a
visualizao da rea de reconhecimento dos flocos. A Figura 17 mostra todas as etapas
de processamento executadas pelo programa IMAGE J.

50
MATERIAIS E MTODOS

Aquisio das
imagens
Converso
escala de cinza
Subtraco do
fundo
Aplicao de
limites
Eliminao de
pequenos flocos
Preenchimento dos
agregados
Registo
imagem binria
Operador XOR
Seleco da rea
de reconhecimento
Identificao dos flocos Registo
Eroso (1)
Aquisio das
imagens
Converso
escala de cinza
Subtraco do
fundo
Aplicao de
limites
Eliminao de
pequenos flocos
Preenchimento dos
agregados
Registo
imagem binria
Operador XOR
Seleco da rea
de reconhecimento
Identificao dos flocos Registo
Eroso (1)

Figura 17. Representao esquemtica do processamento e anlise das imagens dos
flocos microbianos.

2.6.2. MATLAB
Amaral (2003), na sua tese de doutoramento desenvolveu um programa em
ambiente MATLAB para a determinao de vrios parmetros morfolgicos de
caracterizao dos agregados microbianos. Este programa do ponto de vista estrutural
dos flocos permite o estudo ao nvel das caractersticas baseadas na geometria
Euclidiana e na determinao das dimenses fractais.
A geometria Euclidiana apresenta algumas dificuldades na descrio de objectos
com formas irregulares, contudo deve ser tambm utilizada na presena de flocos com
estrutura regular. Assim, as dimenses fractais surgiram pela incapacidade da geometria
Euclidiana em descrever convenientemente as formas encontradas na natureza. O termo

51
MATERIAIS E MTODOS

dimenso fractal tem definio restrita e contm um vasto leque de grandezas
diferentes embora relacionadas, sendo um indicador da complexidade de um objecto, ou
seja, permite o estudo de um grande nmero de convolues e de irregularidades
presentes na fronteira do objecto. Os valores da dimenso fractal so muito afectados
por diversos factores: a amostragem, os arredondamentos, a resoluo e o prprio valor
da dimenso fractal. Como exemplo apresenta-se a dimenso fractal estrutural mssica
(DBm) que est compreendida, tal como as demais dimenses fractais, entre os valores
de 1 e 2. Esta dimenso fractal tende para 2 em objectos com forma mais regular e
homognea (forma circular adquire valor 2) e para 1 em objectos de forma mais
irregular (e fractal), ou com a forma de linha de espessura unitria, de valor 1.
Apesar da relevncia dada s dimenses fractais, dada extrema importncia aos
resultados obtidos dos parmetros que permitem o estudo estrutural e morfolgico dos
agregados.
A Tabela 6 apresenta todos os parmetros calculados para cada agregado pelo
programa microflocos_param.

Tabela 6. Parmetros morfolgicos determinados pelo programamicroflocos_param.
rea
Permetro
Comprimento
Factor Forma
Convexidade
Compacidade
Esfericidade
Dimetro Equivalente
Solidez
Excentricidade
Robustez
Largura
Dimenses Fractais
rea Total
P
a
r

m
e
t
r
o
s

e
s
t
r
u
t
u
r
a
i
s

e

m
o
r
f
o
l

g
i
c
o
s

Percentagem de Reconhecimento

Para que a anlise de imagem seja representativa do sistema, torna-se necessria
a aquisio de elevadas quantidades de imagens servindo ao processamento posterior.
Sendo assim, a quantidade de dados adquiridos e de variveis determinadas elevada.
Aps a aplicao do programa avaliou-se cada um dos parmetros morfolgicos
das imagens binrias correspondentes s concentraes de sal em estudo, para observar

52
MATERIAIS E MTODOS

os parmetros que apresentavam relaes mais significativas com os agregados.
Recorreu-se inicialmente Anlise de Componentes Principais (PCA) para esta
avaliao.
Habitualmente, algumas das variveis calculadas correlacionam-se entre si e por
isso os dados devem ser comprimidos para conter a informao essencial. A PCA uma
ferramenta utilizada na compresso de dados e na recolha de informao encontrando
combinaes das variveis, ou factores que descrevam tendncias nos dados. Esta
anlise importante para compreender as influncias dos vrios parmetros
determinados aos agregados microbianos. Pode constatar-se tambm a existncia de
parmetros com maior influncia nas caractersticas estruturais e morfolgicas dos
agregados.

Seguidamente, utiliza-se o mtodo dos Mnimos Quadrados Parciais (PLS) onde
so analisadas as variveis que se correlacionam com alguns parmetros fsico-qumicos
j determinados experimentalmente (IVL e Turbidez). A fim de permitir uma melhor
compreenso das alteraes dos agregados microbianos durante este estudo, o PLS foi
aplicado aos parmetros estruturais dos flocos e tambm aos parmetros morfolgicos.
O PLS pode ser considerado como um mtodo comum de regresso dos mnimos
dos quadrados. A regresso obtida pelo mtodo de PLS uma tcnica recente que
combina as caractersticas da anlise de componentes principais e da regresso mltipla.
particularmente til quando se necessita prever variveis dependentes atravs da
anlise de variveis independentes.
A eficincia do ajuste do modelo de PLS determinada pelo erro da previso de
forma similar ao mtodo dos mnimos quadrados. O erro da previso, assim como o
nmero de vectores significativos pode ser determinado pelo teste de validao.


53























3. RESULTADOS E DISCUSSO
RESULTADOS E DISCUSSO

Neste captulo avalia-se o desempenho do sistema biolgico de acordo com a
anlise dos diversos parmetros. Inicialmente so apresentados e discutidos os dados
referentes aclimatao da biomassa realizada durante 15 dias para cada condio
experimental. Estes dados permitem inferir o estado da remoo biolgica durante o
perodo de adaptao dos microrganismos s interferncias do sal. Seguidamente,
avalia-se o teste padro a 0,0 % de sal na alimentao ao reactor biolgico. Estes
resultados surgem como indicadores do funcionamento do sistema sem qualquer
interferncia. Posteriormente analisam-se as tendncias dos vrios parmetros obtidos
com adies crescentes de sal. Finalmente, so discutidos os resultados relativos ao
processamento digital de imagem dos flocos bacterianos para as concentraes de sal
estudadas, comparando-os com os parmetros indicadores de sedimentabilidade.
3.1. AVALIAO DA ACLIMATAO
Nesta seco pretende-se avaliar o desempenho do RDS durante o perodo de
aclimatao a cada concentrao de sal estudada. A aclimatao, como foi referido no
Captulo 2, tem como objectivo a adaptao dos microrganismos s condies
experimentais em estudo. A variao da concentrao de azoto amoniacal foi
monitorizada durante o perodo de aclimatao da biomassa e encontra-se representada
na Figura 18.
0
1
2
3
4
5
6
0 2 4 6 8 10 12 14
Tempo / dias
A
z
o
t
o

A
m
o
n
i
a
c
a
l

/

m
g
/
L
0,0 % sal 0,5 % sal 1,0 % sal 2,0 % sal 3,0 % sal 4,0 % sal 6,0 % sal

Figura 18. Variao da concentrao de azoto amoniacal durante o perodo de
aclimatao para cada concentrao de sal em estudo.

56
RESULTADOS E DISCUSSO

A partir da observao da Figura 18 possvel verificar o comportamento da
remoo biolgica de azoto amoniacal do sistema durante a adaptao da biomassa. As
elevadas concentraes de azoto amoniacal no incio do estudo (para 0,0 %) devem-se
possivelmente recuperao do inculo aps um perodo de choques realizado
anteriormente com elevadas concentraes de fenol. O fenol provocou a desfloculao
da biomassa e a respectiva incapacidade de remoo o que se verifica durante os
primeiros dias. Contudo, aps 2 dias de aclimatao ocorre uma diminuio
significativa das concentraes no reactor indicando consequentemente a adaptao
microbiana ao efluente sinttico. Com o aumento da salinidade no sistema, observam-se
algumas variaes nas concentraes de azoto amoniacal, principalmente para 0,5 % e
1,0 %: aps a adio de 0,5 % de sal observam-se oscilaes e elevadas concentraes
de azoto amoniacal, apontando para dificuldades na adaptao dos microrganismos ao
sal, sucedendo a mesma tendncia para 1,0 % apesar das concentraes serem inferiores
aquelas observadas para a condio inferior de salinidade. Nas restantes concentraes
de sal estudadas, os nveis de azoto amoniacal aparentam estabilidade (concentraes
baixas e constantes) o que pode anunciar a adaptao microbiana s vrias condies
experimentais. Efectivamente, a etapa de aclimatao do inculo s diferentes
concentraes de sal estudadas apresentou elevada relevncia, permitindo a adaptao
microbiana aos aumentos sucessivos de NaCl no efluente sinttico.

3.2. DESEMPENHO PADRO DO SISTEMA
Devido instabilidade do processo de nitrificao na remoo biolgica de
nutrientes, considera-se de extrema importncia a utilizao de uma estratgia que
permita a ocorrncia de elevadas taxas de remoo do sistema. O teste realizado com o
efluente sinttico sem qualquer adio de sal pretende demonstrar o perfil da estratgia
em estudo bem como as remoes de azoto amoniacal e de CQO alcanadas neste
sistema biolgico.
A Figura 19 evidencia as oscilaes nas concentraes de azoto amoniacal e de
nitrato num efluente sinttico semelhante a um efluente industrial (consultar a
composio do efluente no Captulo 2).

57
RESULTADOS E DISCUSSO

0
20
40
60
80
100
120
140
160
0 40 80 120 160 200 240 280 320 360
Tempo / min
N
i
t
r
a
t
o

/

m
g
/
L
0
2
4
6
8
10
12
A
z
o
t
o

A
m
o
n
i
a
c
a
l

/

m
g
/
L
Nitrato Azoto amoniacal

Figura 19. Perfil das concentraes de azoto amoniacal e de nitrato a 0,0 % sal.

O perfil da Figura 19 apresenta a diminuio da concentrao de azoto
amoniacal e o aumento da concentrao de nitrato no reactor ao fim de 6 horas de
ensaio sem qualquer interferncia no sistema. Estes dados indicam a ocorrncia do
processo de nitrificao na presena de bactrias Nitrosomonas e Nitrobacter, j que o
io amnio oxidado a nitrito na primeira fase e a nitrato na segunda (consultar as
reaces de nitrificao na Seco 1.7.7). Assim, no final deste teste para 0,0 % de sal
obtm-se uma baixa concentrao de io amnio (praticamente nula perante uma
concentrao alimentada de 25 mg/L) e uma elevada concentrao de nitrato (cerca de
98 mg/L no efluente final) correspondendo a uma converso estequiomtrica de
aproximadamente 100 %.
Verifica-se tambm a oscilao das concentraes de azoto amoniacal nas 3
horas iniciais do teste devido estratgia pulsante adoptada, ou seja, quando o reactor
submetido ao enchimento, os valores de azoto amoniacal aumentam. No perodo de
interrupo da alimentao, os microrganismos consomem o azoto amoniacal,
convertendo-o a nitrato por etapas. No final deste teste padro pode-se observar a
tendncia decrescente do azoto amoniacal (consumo) e a tendncia crescente de nitrato
(formao). Perante estes resultados iniciais apresentados conclui-se que a estratgia
adoptada neste trabalho exibe capacidade na obteno de bons ndices de nitrificao.

58
RESULTADOS E DISCUSSO

Perante os resultados de azoto amoniacal, o efluente poderia ser descarregado
num curso de gua, j que os valores finais so inferiores aos valores mximos
admissveis pela Legislao Ambiental Portuguesa (azoto amoniacal =10 mg/L). No
entanto, a concentrao final de nitrato obtida superior ao valor admissvel (nitrato =
10 mg/L) indicando a necessidade de proceder desnitrificao do efluente ou ento ao
prolongamento do teste at ao limite estabelecido pela Legislao Nacional.

Para alm do estudo das concentraes de azoto amoniacal e de nitrato importa
tambm averiguar a variao de CQO e de fosfato para 0,0 % de sal. Os dados
apresentados na Figura 20 so tambm importantes para a compreenso da eficincia do
reactor utilizado e da estratgia adoptada.
0
10
20
30
40
50
0 40 80 120 160 200 240 280 320 360
Tempo / min
C
Q
O

/

m
g
/
L
0
2
4
6
8
10
F
o
s
f
a
t
o

/

m
g
/
L
CQO Fosfato

Figura 20. Perfil das concentraes de fosfato e de CQO a 0,0 % sal.

Mais uma vez se verifica pela Figura 20 a oscilao nas concentraes de CQO e
nas concentraes de fosfato no reactor biolgico dada a estratgia de alimentao. A
CQO alimentada ao reactor foi aproximadamente igual a 300 mg/L. Obtendo-se uma
concentrao final de 10 mg/L de CQO evidente o elevado consumo da matria
orgnica pela comunidade microbiana existente no meio reaccional. Assim, conclui-se
que esta estratgia apropriada para garantir elevados ndices de remoo de CQO de
um efluente sem a presena de qualquer reagente adicional.

59
RESULTADOS E DISCUSSO

Sendo a concentrao de fosfato alimentada ao reactor de 7 mg/L e obtendo-se
no final do teste uma concentrao no efluente de 4,5 mg/L, conclui-se que existe uma
ligeira tendncia de consumo. Sem qualquer interferncia de sal no meio reaccional,
obtm-se uma baixa remoo de fosfato do efluente indicando que esta estratgia
pulsante no se destina remoo efectiva de fsforo, que neste caso foi analisado sob a
forma de fosfato. Contudo, as bactrias aerbias parecem apresentar alguma capacidade
que permita a remoo de fsforo do efluente apesar de no ser muito evidente nesta
Figura. Para efectivar a remoo de fsforo do efluente, seria necessria a criao de um
ambiente anaerbio como foi referido no Captulo 1.
Perante os resultados de CQO e de fosfato, o efluente poderia ser descarregado
num curso de gua, j que os valores finais so inferiores aos valores mximos
admissveis pela Legislao Ambiental Portuguesa (CQO =150 mg/L e fsforo =10
mg/L).

A Tabela 7 pretende mostrar as percentagens de remoo de todos os compostos
analisados quando no existe no processo qualquer interferncia salina, bem como o
valor de IVL que permite o conhecimento do estado de sedimentabilidade da biomassa.

Tabela 7. Percentagens de remoo obtidas sem interferncia de sal e sedimentao das
lamas.
Percentagem de remoo para 0,0 % sal
CQO 90,48
Azoto amoniacal 98,30
Nitrato ----
Fosfato 11,22
Sedimentao das lamas / mL/g
IVL 120


Pela Tabela 7 possvel constatar remoes de CQO e de azoto amoniacal
superiores a 90 %, indicando a elevada eficincia do RDS na remoo de matria
orgnica e de azoto amoniacal. Na ausncia do processo de desnitrificao no foi
possvel aferir sobre a remoo de nitrato do sistema, contudo observa-se a sua
formao. Para garantir a presena do processo de desnitrificao no sistema seria
necessria a criao de um ambiente anxico, todavia a estratgia teria de ser alterada o

60
RESULTADOS E DISCUSSO

que poderia significar o aumento do tempo de cada teste. A baixa remoo de fosfato do
meio reaccional deve-se ausncia de um ambiente anaerbio apesar da existncia de
algum consumo destes compostos pelos microrganismos aerbios. Finalmente, o valor
de IVL obtido para 0,0 % de sal no efluente final aponta para uma boa sedimentao das
lamas. Tambm pela observao microscpica foi possvel presenciar flocos compactos
na ausncia de sal. Assim, a floculao da biomassa permite a separao efectiva
slido-lquido no reactor biolgico no final do ensaio padro podendo-se verificar pelo
acompanhamento microscpico realizado durante este estudo.

3.3. DESEMPENHO EM CONDIES SALINAS
Nesta seco, apresentam-se os resultados referentes ao desempenho do sistema
perante a interferncia do sal. Como foi referido no Captulo 2, o estudo realizou-se
para concentraes de 0,5 % a 6,0 %, ou seja, desde condies salinas at ambientes
hipersalinos. Pretendeu-se com esta gama de concentraes verificar o limite do sistema
tendo em conta a relao entre os dados cinticos e os dados relativos
sedimentabilidade das lamas.

Inicialmente so apresentados os valores directamente obtidos do reactor
biolgico (concentraes de CQO, Nitrato e Fosfato). Posteriormente analisam-se as
percentagens de remoo comparando-as com as figuras anteriormente discutidas.
Finalmente, discutem-se tambm as propriedades de sedimentabilidade das lamas para
cada concentrao de sal estudada.
Na Figura 21 apresentam-se os valores de concentrao de CQO obtidos aps 6
horas para todas as concentraes de sal estudadas.

61
RESULTADOS E DISCUSSO

60.2
214,9
287,2
270,9
150,5
10,0
0
100
200
300
0 0.5 1 2 3 4
Sal / %
C
Q
O

/

m
g
/
L

Figura 21. Perfil cintico das concentraes finais de CQO para as diferentes
concentraes de sal estudadas.

Como a concentrao de CQO alimentada ao reactor aproximadamente 300
mg/L, verifica-se pela Figura 21 uma elevada eficincia do RDS para 0,0 % de sal j que
a concentrao de matria orgnica no efluente final bastante baixa. Pela anlise da
Figura 21 juntamente com a Figura 20, observa-se que quando no existem
interferncias do sal, o sistema remove a matria orgnica adicionada e a estratgia
utilizada para o seu tratamento adequada uma vez que a concentrao final existente
no efluente se encontra abaixo do limite permitido na Legislao Ambiental.
Quando se inicia a adio de sal no sistema observa-se um aumento significativo
das concentraes finais, atingindo um mximo para 1,0 % de sal, onde neste caso a
eficincia de remoo diminui drasticamente. A incapacidade de remoo de matria
orgnica pelos consrcios microbianos pode ser justificada pela obstruo causada pela
elevada salinidade (alterao da fora inica do meio reaccional), sofrendo um
fenmeno designado por plasmlise celular. A plasmlise a contraco do volume das
clulas por perda de gua. Este fenmeno ocorre quando a clula colocada num meio
hipertnico, ou seja, quando o meio exterior mais concentrado que o citoplasma e a
clula perdem gua por osmose.
A partir da adio de 3,0 % de sal, as concentraes apresentam uma tendncia
decrescente indicando uma nova adaptao microbiana presena de sal no meio
sinttico. Esta adaptao possvel quando no so utilizadas adies bruscas de

62
RESULTADOS E DISCUSSO

salinidade ao licor misto como foi anteriormente estudado por Kincannon & Gaudy
(1966, 1968). Como os microrganismos so submetidos a processos de adaptao
continuados durante o estudo do efeito da salinidade na eficincia do processo
biolgico, possvel observar a aclimatao a determinados ambientes extremos.

O mtodo de determinao de CQO (colorimtrico) foi sujeito a algumas
interferncias. A presena de elevadas concentraes de sal provocou tambm a
precipitao do io Cl
-
com a prata existente na soluo digestora. Assim, o precipitado
inviabilizou por diversas vezes os resultados de CQO obtidos, tendo de se efectuar
diluies das amostras e uma prvia separao do precipitado existente. Devido a este
facto, o valor referente a 6,0% no apresentado devido deficiente concentrao de
prata que permitisse a precipitao total do cloreto existente nas amostras, assim sendo,
mesmo com diluies das amostras no foi possvel a determinao correcta da CQO.
Observa-se pela mesma Figura a incapacidade de adaptao microbiana
salinidade conduzindo consequentemente a um efluente com concentraes de CQO
bastante superiores aos valores-limite enumerados na Legislao Ambiental. Assim
sendo, para 0,5 %, 1,0 % e 3,0 % de sal, o efluente no poderia ser descarregado num
curso de gua. No entanto, aps o prolongamento do estudo a concentraes mais
elevadas de sal, inicia-se um processo de adaptao s condies fornecidas aos
microrganismos, podendo-se observar esse facto no resultado obtido para 2,0 % e 4,0 %
de sal.

Na Figura 22 apresentam-se as remoes de CQO no reactor para as
concentraes de sal estudadas. Os percentuais de remoo so relacionados com as
concentraes apresentadas na Figura 21.

63
RESULTADOS E DISCUSSO

96,6
28,3
4,2
79,9
9,6
49,8
0
20
40
60
80
100
0 0.5 1 2 3 4
Sal / %
R
e
m
o

o

/

%

Figura 22. Remoo de CQO para as diferentes concentraes de sal estudadas.

Pela Figura 22 observa-se uma diminuio da eficincia de remoo de CQO de
96,6 % para 4,0 % com o aumento da concentrao de sal de 0,0 % at 1,0 %. Esta
reduo significativa deve-se possivelmente ao curto perodo de aclimatao da
biomassa. No entanto, esta tendncia decrescente concordante com alguns dos
resultados j apresentados por Uygur & Kargi (2004), Uygur (2006), Kargi & Diner
(1998), Kargi & Uygur (1997). As drsticas alteraes de fora inica no meio
reaccional so tambm responsveis pela reduo da eficincia de remoo como foi
constatado pelos investigadores referidos anteriormente. Quando a concentrao salina
aumentou para 2,0 %, observa-se uma recuperao significativa da biomassa em
remover a CQO (cerca de 80,0 %) do efluente. Possivelmente, esta recuperao deveu-
se apenas adio de sal ter sido efectuada gradualmente e no drasticamente.
Perante estes resultados, pode-se verificar que o sal interfere na remoo de
carga orgnica, possivelmente devido a fenmenos de plasmlise das clulas
microbianas resultando na perda de actividade metablica, j que por anlise
microscpica tambm se observa a reduo dos agregados microbianos. A anlise da
dimenso dos flocos ser efectuada na seco 3.4 deste Captulo.


64
RESULTADOS E DISCUSSO

Como foi referido nos objectivos deste trabalho, pretendeu-se para alm da
monitorizao do sistema, a optimizao da nitrificao. A Figura 23 apresenta a
remoo de azoto amoniacal no RDS.
68,1
82,5
75,3
75,2
24,1
65,0
98,3
0
20
40
60
80
100
0 0.5 1 2 3 4 6
Sal / %
R
e
m
o

o

/

%

Figura 23. Remoo de azoto amoniacal para as diferentes concentraes de sal
estudadas.

Comparando a percentagem de remoo de azoto amoniacal a 0,0 % de sal com
a concentrao de azoto amoniacal no final do ensaio apresentada na Figura 19,
observa-se que a concentrao de azoto amoniacal no efluente final aproximadamente
0 mg/L indicando por isso uma elevada remoo. Porm, para 0,5 % e 1,0 % de sal,
verifica-se uma diminuio nos valores de remoo de azoto amoniacal. Como foi
referido no Captulo 2, o inculo era submetido a perodos de aclimatao entre as
diferentes concentraes de sal (15 dias), no entanto, estes dados indicam que o tempo
de aclimatao no foi suficiente para permitir que os microrganismos responsveis pela
oxidao do azoto amoniacal a nitrito realizassem adequadamente o processo, apesar
dos valores obtidos no perodo de aclimatao serem indicadores de uma boa remoo.
No perodo de aclimatao, as amostras eram recolhidas aps 24 horas da adio de
nova alimentao, enquanto os testes decorriam durante 6 horas. Assim, conclui-se que
para estas duas concentraes de sal, o tempo de processo foi curto para os
microrganismos procederem remoo biolgica. A soluo, neste caso, passaria pelo
alargamento do perodo de aclimatao. Esta concluso est directamente relacionada

65
RESULTADOS E DISCUSSO

com os dados da Figura 18, onde se observa a variao durante todo o perodo de
aclimatao para as concentraes de sal referidas anteriormente.
Acima de 1,0 % de sal, verifica-se que as concentraes salinas no provocam
efeitos prejudiciais para as bactrias Nitrosomonas (bactrias responsveis pela
converso do azoto amoniacal a nitrito), obtendo-se elevadas taxas de remoo. Este
facto deve-se fundamentalmente etapa de aclimatao dos microrganismos que
antecede cada teste realizado. A partir de 2,0 % de sal, observam-se novamente
elevados ndices de remoo de azoto amoniacal indicando a adaptao e recuperao
da actividade microbiana ao sal. Como foi referido no Captulo 1, o arejamento
tumultuoso no interior do reactor pode provocar a volatilizao do azoto amoniacal
(stripping). Porm, esse fenmeno certamente no ocorreu neste trabalho uma vez que o
estudo da volatilizao j havia sido realizado por Coelho (1998) e as amostras eram
analisadas imediatamente aps a recolha.

A estratgia utilizada neste trabalho no foi optimizada para a remoo de
nitrato do efluente (desnitrificao), uma vez que durante as experincias no eram
alcanadas as condies ideais anxicas. Assim, como apenas se pretendeu a formao
de nitrato, apresentam-se os resultados referentes sua produo durante as
experincias realizadas para cada concentrao de sal estudada (Figura 24). A anlise
desta Figura importante para se conhecer experimentalmente a relao entre a
remoo de azoto amoniacal e a produo de nitrato.


66
RESULTADOS E DISCUSSO

4,16
1,10
5,72
9,42
7,49
3,43
98,18
0
50
100
0 0.5 1 2 3 4 6
Sal / %
N
i
t
r
a
t
o

/

m
g
/
L

Figura 24. Variao da concentrao de Nitrato no final de cada teste para as diferentes
concentraes de sal estudadas.

A formao de nitrato constitui a etapa final da nitrificao e exerce um efeito
txico menor nos corpos receptores do que o nitrito. A concentrao de nitrato resulta
em primeira instncia, das protenas existentes nos processos de decomposio orgnica
podendo surgir tambm crescimento de algas indesejveis.
Observa-se pela Figura 24 uma diminuio drstica das concentraes de nitrato
obtidas no final de cada teste para as vrias concentraes salinas estudadas. Verifica-se
que para 0,0 % de sal ocorreu uma converso de 100 % do azoto amoniacal em nitrato,
encontrando-se o valor de acordo com a remoo de azoto amoniacal apresentada na
Figura 23. Comparando os resultados de nitrato com os de azoto amoniacal, verifica-se
que para 0,5 % e 1,0 % persiste o problema do reduzido tempo de aclimatao ao sal.
Obtm-se, como na Figura 23, uma baixa concentrao de nitrato para 1,0 %. Para
2,0 % de sal observa-se um ligeiro aumento da concentrao indicando a adaptao
microbiana salinidade. No entanto, para 3,0 %, 4,0 % e 6,0 % os valores diminuem
gradualmente podendo indicar uma inactivao, ou mesmo plasmlise celular das
bactrias Nitrobacter responsveis pela transformao do nitrito em nitrato. A partir de
2,0 % de sal, os valores referentes remoo de azoto amoniacal so elevados,
indicando deste modo a eficincia do processo. Contudo, no se visualizam elevadas
concentraes de nitrato, podendo indicar a acumulao de nitrito no reactor. No
possvel afirmar a sua presena uma vez que no foram realizados testes s

67
RESULTADOS E DISCUSSO

concentraes de nitrito. A acumulao de nitrito altamente txica para o ambiente
aqutico. O seu efeito consiste no impedimento da respirao celular. Normalmente, o
nitrito rapidamente consumido pelas bactrias nitrificantes, formando o nitrato
(comparativamente no txico). Se o processo de oxidao pelas bactrias for inibido,
como parece ser o caso, pode ocorrer um aumento desfavorvel de concentrao de
nitritos.

A ltima avaliao cintica antes da anlise de sedimentabilidade das lamas
realizada ao fosfato. Apesar de j ter sido referido o seu acompanhamento, importa
abordar a sua evoluo no meio reaccional medida que se aumenta a concentrao de
sal no efluente. Na Figura 25 apresentam-se os valores referentes ao fosfato no fim do
ensaio para cada concentrao de sal estudada.
4,5
14
15,8
17,6
14,7
9,5
12,9
0
5
10
15
20
0 0.5 1 2 3 4 6
Sal / %
F
o
s
f
a
t
o

/

m
g
/
L

Figura 25. Variao da concentrao de fosfato no final de cada teste para as diferentes
concentraes de sal estudadas.

Como foi referido na seco 3.1, a concentrao de fosfato na alimentao
aproximadamente 7 mg/L ocorrendo uma pequena remoo de fosfato no reactor sem
qualquer interferncia de sal no meio reaccional. Aps a adio de sal, a comunidade
microbiana evidencia a influncia negativa do sal na remoo biolgica de fsforo
devido ao aumento das concentraes finais deste constituinte no efluente.

68
RESULTADOS E DISCUSSO

A presena de microrganismos aerbios permite a remoo de fsforo apesar
desta no apresentar expressividade quando comparada com a presena de um ambiente
anaerbio. Contudo, o acompanhamento da concentrao de fsforo permitiu observar
que at 3,0 % de sal ocorre um aumento desta concentrao com o aumento da
concentrao de sal alimentada ao reactor. Este aumento deveu-se possivelmente
plasmlise celular que permitiu a libertao de compostos intracelulares de fsforo. A
partir desta concentrao ocorre uma ligeira diminuio de fosfato no efluente final o
que pode significar a sua utilizao na biossntese microbiana. Estes resultados
encontram-se de acordo com os obtidos por Uygur (2006).

Na eficincia de um tratamento biolgico comungam dois tipos de abordagens: o
estudo da remoo de matria orgnica e nutrientes e ainda o estudo da sedimentao
das lamas. Inicia-se a anlise sedimentabilidade das lamas biolgicas que por sua vez
so de extrema importncia para o processamento de imagem.
A Figura 26 apresenta a variao da turbidez existente no efluente no fim dos
testes realizados para as vrias concentraes de sal estudadas.
11
14
22
25
29 30
0
10
20
30
0 0.5 1 2 3 4 6
Sal / %
T
u
r
b
i
d
e
z

/

N
T
U

Figura 26. Turbidez observada para as diferentes concentraes de sal estudadas.

A estabilidade dos agregados microbianos existentes em sistemas de lamas
activadas crucial no processo de separao slido-lquido. A perda de estabilidade
conduz desfloculao, aumentando a turbidez do efluente e consequentemente
diminuindo a capacidade de sedimentao. O aumento da turbidez encontra-se

69
RESULTADOS E DISCUSSO

associado a mudanas no arejamento e agitao, temperatura e fora inica, que podem
ocorrer no interior do reactor biolgico. Efectivamente, a estratgia pulsante conduz a
alteraes no arejamento do reactor o que pode modificar as caractersticas microbianas.
Na Figura 26, observa-se um aumento gradual da turbidez at ao momento que
estabiliza (4,0 % e 6,0 % de sal). Estes valores indicam que h uma maior quantidade de
slidos suspensos devido parcial desfloculao da biomassa existente no reactor pelas
adies crescentes de sal. Este fenmeno de desfloculao foi anteriormente estudado
por Wiln et al. (2000) verificando que o aumento da turbidez se deve exposio das
lamas a consecutivas condies de desfloculao e floculao, causando danos
progressivos nos flocos e a acumulao de material no floculado no sistema. Verifica-
se igualmente um aumento das partculas de menores dimenses no efluente. Estes
resultados podem ser facilmente justificados pela anlise de imagem dos flocos
microbianos (seco 3.4). Com a ausncia de protozorios responsveis pela captura de
bactrias em suspenso no efluente e devido aos efeitos de plasmlise microbiana,
aumenta a concentrao de slidos em suspenso no efluente final.
Segundo Ginoris (2006), o estudo contnuo da turbidez durante os 15 dias de
aclimatao deixa transparecer o seu aumento devido elevada percentagem de flocos
com pequenas dimenses (<100 m). Assim sendo, apesar da aclimatao microbiana
ser benfica para os microrganismos, acaba por no favorecer a formao dos flocos
microbianos, pois so incapazes de recuperar a sua forma inicial. A avaliao da
turbidez pode ser complementada pelo estudo do IVL obtido no final de cada teste
realizado. possvel o aumento em simultneo de agregados com pequenas e grandes
dimenses dependendo da hidrofobicidade dos constituintes da matriz polimrica. A
Figura 26 apresenta a variao do IVL com o aumento da concentrao de sal.

70
RESULTADOS E DISCUSSO

21.6
23.4
15.1
14.0
31.1
53.1
120.6
0
40
80
120
160
0 0.5 1 2 3 4 6
Sal / %
I
V
L

/

m
L
/
g

Figura 27. IVL observado para as diferentes concentraes de sal estudadas.

A determinao do IVL uma metodologia amplamente adoptada no estudo da
sedimentao do licor misto em sistemas de lamas activadas (RDS). Este parmetro
indica ao operador o estado de formao e manuteno dos agregados microbianos.
Segundo Uygur & Kargi (2004), o IVL aumenta devido plasmlise causada
pelo aumento das concentraes de sal no efluente. Verificaram tambm a diminuio
da concentrao de biomassa no reactor com o aumento do sal resultando por isso na
baixa capacidade de sedimentao. No entanto, atravs de outro estudo realizado por
Campos et al. (2002), o IVL no altera significativamente as propriedades fsicas dos
agregados microbianos durante a realizao de estudos com sal, havendo por isso um
decrscimo no IVL durante o perodo experimental.
No presente estudo, observa-se pela Figura 27 uma diminuio do IVL com o aumento
da concentrao de sal at 3,0 %, aumentando acima deste valor, o que contraria os
resultados obtidos por Uygur & Kargi (2004). Atravs do processamento de imagem
apresentado na seco 3.4 as concluses de Campos et al. (2002) tambm no se
confirmam uma vez que se distinguiram diferentes propriedades fsicas dos agregados
microbianos com o aumento da salinidade do afluente. Os resultados da Figura 27
poderiam permitir concluir que a biomassa observvel pelo teste gravimtrico
apresentava uma boa sedimentabilidade. Contudo, pela Figura 26, verifica-se a
existncia de uma grande quantidade de biomassa suspensa no efluente. Assim, atravs
da definio de Bitton (1994), o fenmeno de pin-point conduz a um efluente com baixo

71
RESULTADOS E DISCUSSO

IVL e elevada turbidez. Este fenmeno que pode ocorrer em sistemas de lamas activadas
provoca a quebra de agregados para formas mais pequenas, compactas, esfricas mas
estruturalmente fracas devido baixa concentrao de bactrias filamentosas existentes
no sistema. Contudo, os agregados de estrutura mais alargada sedimentam facilmente
enquanto que os mais pequenos no sedimentam.
O IVL indicia a capacidade de sedimentao da biomassa microbiana e neste
caso os agregados microbianos observveis de estrutura mais larga existentes no meio
reaccional apresentam alguma qualidade de sedimentao. Esta tendncia encontra-se
de acordo outros estudos realizados por Moon et al. (2002). Estes autores verificaram
que durante o perodo experimental, os microrganismos eram submetidos a longos
perodos de aclimatao e verificava-se inicialmente uma tendncia crescente do IVL,
mas no final os valores referentes a este parmetro decresciam. Este decrscimo estava
relacionado com o aumento contnuo de biomassa no reactor biolgico. Entretanto, no
final do estudo, para 10000 mg/L de NaCl, o IVL apresentou um valor superior aos
anteriores indicando a deteriorao das propriedades de sedimentao das lamas. Este
facto foi observado atravs da anlise do tamanho dos flocos e das dimenses fractais,
onde se verificou uma diminuio de ambos os parmetros morfolgicos.
Perante diversos estudos realizados por Wiln (2000, 2003, 2004), existem
vrios parmetros que esto directamente associados floculao ou desfloculao dos
agregados microbianos e que por sua vez interferem nos resultados de IVL e de turbidez.
A desfloculao pode ser observada com a inibio da actividade microbiana por
condies anaerbias, adio de inibidores metablicos e ainda a reduo da
temperatura para valores inferiores a 4 C. Efectivamente, durante os 15 dias de
aclimatao da biomassa para adaptao a cada concentrao de sal em estudo, as
condies de agitao e arejamento do reactor sofreram diversas perturbaes, no
sendo mantidas as condies ideais de aerobiose no licor misto, submetendo os
microrganismos a fenmenos sucessivos de floculao e desfloculao.
Outra forma de analisar a sedimentao das lamas passa pela avaliao da
extraco de EPS. Como foi referido no Captulo 1, a matriz de EPS participa na
formao de agregados microbianos, sendo constituda por polissacardeos, protenas,
glicoproteinas, cidos nucleicos e fosfolpidos. Este teste foi efectuado por McSwain et
al. (2004) constatando que o aumento dos flocos microbianos permite o aumento das
protenas e dos polissacardeos no meio reaccional, sendo a contribuio proteica maior
que os polissacardeos na extraco de EPS. Segundo Wiln et al. (2003), as protenas

72
RESULTADOS E DISCUSSO

contribuem para a hidrofobicidade das lamas activadas resultando na floculao
microbiana. Tambm Ginoris (2006) observou a variao de protenas e de
polissacardeos perante adies crescentes de fenol no sistema e concluiu que ocorre um
aumento da razo entre ambos juntamente com a diminuio do IVL. Concluiu que a
biomassa era composta por flocos redondos, densos e pequenos com boas propriedades
de compactao, o que provocou a diminuio do IVL.
Apesar de no terem sido efectuados testes s EPS, pela avaliao do IVL ao
licor misto observa-se a adaptao do sistema aps adio de crescentes concentraes
de sal j que se observa constncia nos valores obtidos para 4,0 % e 6,0 %.

O aumento da concentrao de sal no efluente promoveu o aumento da
concentrao de biomassa no reactor durante o perodo de testes correspondendo
tambm diminuio do IVL como se pode observar na Figura 28.
2500
3150
5030
4740
4115
4465
3015
0
2000
4000
6000
0 0.5 1 2 3 4 6
Sal / %
C
o
n
c
e
n
t
r
a

o

B
i
o
m
a
s
s
a

/

m
g
/
L

Figura 28. Variao da biomassa com o aumento da concentrao de sal no efluente.

Observa-se na Figura 28 que a concentrao de biomassa (SSV) que se manteve
no reactor durante o estudo efectuado, aumentou de 2,5 g/L no incio do estudo para 0,0
% de sal at aproximadamente 5,0 g/L no final do trabalho para 6,0 % de sal. Estes
resultados so coincidentes com os obtidos por Moon et al. (2002) e Hamoda & Al-
Attar (1995) sugerindo assim, que no intervalo de concentraes avaliadas, o sal no
interferiu significativamente no crescimento microbiano. No entanto, a partir de 2,0 %,
a velocidade de crescimento microbiana diminuiu gradualmente com o aumento da

73
RESULTADOS E DISCUSSO

concentrao salina alimentada, constatando-se a presena de um efeito inibitrio deste
composto sobre o crescimento celular. Assim, a partir da adio de 2,0 % de NaCl,
considera-se que o sal apresenta um ligeiro efeito inibitrio no sistema.
Contudo, devido ao aumento de turbidez e pela anlise microscpica possvel
observar a existncia de uma grande quantidade de biomassa em suspenso no efluente
que corresponder a flocos de menores dimenses, como foi tambm observado por
Ginoris (2006).

Antes de se iniciar a avaliao da morfologia dos agregados microbianos,
apresenta-se na Tabela 8 um resumo de alguns estudos efectuados a efluentes salinos
por vrios investigadores e finalmente efectuar-se- uma comparao com os resultados
obtidos neste estudo em particular.

Tabela 8. Tabela resumo com alguns estudos realizados para efluentes salinos.
Autores Reactor % Sal Microrganismos Resultados
Kargi &
Dincer, 1996,
1997, 1999
Biodiscos 0,0 % - 10 %
50 % de
halotolerantes e
50 % de
convencionais
0 % - E =93 %
5 % - E =85 %
10 % - E =60 %
Kargi &
Dincer, 1995
Batch 1,0 % - 5,0 %
Zooglea
ramigera
Diminuio de
remoo de CQO
Woolard &
Irvine, 1995
RDS 15 %
Bactrias
haloflicas
Elevadas
remoes de fenol
Uygur &
Kargi, 2004
RDS 0,0 % - 6,0 %
Acumuladores
fsforo,
Nitrificantes,
Desnitrificantes
Diminuio de
remoo CQO,
Azoto amoniacal,
Fsforo e aumento
do IVL
Uygur, 2005 RDS 0,0 % - 6,0 %
Halobacter livre
Halobacter com
convencionais
As eficincias de
remoo so mais
elevadas para os
consrcios
Presente
estudo
RDS 0,0 % - 6,0 % Convencionais
Elevadas
remoes de
Azoto amoniacal,
baixas remoes
de CQO

Existe uma variabilidade entre os estudos efectuados com efluentes salinos.
Conclui-se que os testes realizados com consrcios microbianos convencionais

74
RESULTADOS E DISCUSSO

juntamente com microrganismos halotolerantes so indicadores de elevadas remoes
de matria orgnica e de nutrientes, no entanto o aumento da concentrao salina a
nveis muito elevados faz com que haja uma diminuio significativa das eficincias
devido aos fenmenos de plasmlise que envolvem a comunidade microbiana. No
presente estudo obtiveram-se excelentes resultados na remoo de azoto amoniacal do
efluente apenas utilizando consrcios de microrganismos convencionais estando de
acordo com os resultados apresentados por Uygur (2006), porm com uma possvel
acumulao de nitrito. J os resultados obtidos na remoo de CQO permitem concluir
que a sua diminuio se deve ausncia de microrganismos halotolerante e haloflicos,
que devido s suas caractersticas apresentam uma maior resistncia s agresses
provocadas pela elevada fora inica do meio reaccional.

3.4. MORFOLOGIA MICROBIANA
A avaliao da morfologia microbiana merece destaque devido sua
importncia perante as interferncias do sal anteriormente apresentadas pelos
parmetros fsico-qumicos. Devido aos resultados obtidos para a turbidez e para o IVL
consegue-se prever uma influncia do sal na morfologia dos prprios agregados
microbianos. Durante a aquisio das imagens constatou-se uma modificao na
estrutura dos agregados que poder ser confirmada pela anlise que se segue.
Apesar de no ter sido realizado qualquer processamento de imagem aos
protozorios existentes no licor misto, observou-se efectivamente a diminuio e
finalmente a sua eliminao com o aumento da salinidade do efluente, confirmando
desta forma os resultados obtidos por Salvad et al. (2001).
Como referido no final do Captulo 2, as imagens adquiridas ao longo do
trabalho foram processadas atravs de um programa desenvolvido em IMAGE J. O
processamento das imagens passou por uma srie de etapas fundamentais ao perodo de
determinao dos parmetros morfolgicos.
Este processamento serviu de base anlise realizada em MATLAB onde foram
determinados os parmetros morfolgicos dos agregados microbianos. Estes parmetros
so determinantes na descrio dos flocos microbianos. Foi aplicado o mtodo de PLS
de forma a relacionar os parmetros mais significativos com os dados fsico-qumicos.
Na Figura 29 encontra-se representada uma imagem adquirida de agregados em
microscopia e algumas etapas do seu processamento em IMAGE J.

75
RESULTADOS E DISCUSSO


[1] Imagem Adquirida [2] Escala cinza [3] Subtraco do Fundo
[6] Subtraco de [4] e [5] [5] Eliminao de pixeis [4] Imagem Binria
[6] Eroso (1) [7] Aplicao de XOR [8] rea Reconhecida

Figura 29. Sequncia de imagens obtidas durante o processamento em IMAGE J.

O processamento das imagens adquiridas para cada concentrao de sal em
estudo realizado de acordo com a descrio existente na seco 2.6.8 do Captulo 2. A
Figura 29 exibe todos os passos do processamento de imagem no programa IMAGE J e
verifica-se pela imagem [8] uma elevada rea de reconhecimento dos agregados
microbianos. Aps a aplicao deste programa s imagens correspondentes a cada
concentrao de sal em estudo, aplicou-se o programa desenvolvido por Amaral (2003)
para a determinao dos parmetros morfolgicos.

Inicialmente procede-se avaliao de dois parmetros estruturais microbianos
facilmente mensurveis pelo programa desenvolvido por Amaral (2003). A Figura 30
ilustra a variao da rea Total (AT) e a Figura 31 ilustra a variao do Dimetro
equivalente mdio (Deq
mdio
) dos agregados com o aumento da concentrao de sal no
RDS. A AT determinada a partir da rea cumulativa de todos os agregados
constituintes de cada imagem adquirida para cada concentrao de sal em estudo. O Deq

76
RESULTADOS E DISCUSSO

determinado a partir da rea projectada (em 2 dimenses) de cada um dos objectos
tridimensionais. Estes resultados so comparados com os dados obtidos
experimentalmente de turbidez e de IVL.

0
0.5
1
1.5
2
2.5
0 1 2 3 4 5 6
% Sal
A
T

/

m
m
2
/
u
m

Figura 30.Variao da AT dos agregados com o aumento da concentrao de sal.
0.05
0.1
0 1 2 3 4 5
% Sal
D
e
q

m

d
i
o

/

m
6
m

Figura 31.Variao do Deq
mdio
dos agregados com o aumento da concentrao de sal.

Atravs da Figura 30 observa-se uma tendncia decrescente da AT, semelhante
diminuio do IVL apresentado na Figura 27 apesar de ocorrer uma ligeiro aumento
quando a concentrao de sal no reactor foi de 0,5 %. O resultado referente ao Deq
mdio

(Figura 31) dos flocos tambm apresenta algumas oscilaes durante o estudo realizado,

77
RESULTADOS E DISCUSSO

apesar da tendncia decrescente, indicando que o tamanho dos flocos vai diminuindo
com o aumento da salinidade. Nesta concentrao salina, ocorreram de facto algumas
alteraes estruturais aos agregados microbianos e de desempenho como foi j referido
na seco 3.3 deste Captulo. A adio de sal ao efluente e o curto perodo de
aclimatao teve efeitos nas eficincias de remoo (de nutrientes e de matria
orgnica) e como forma de proteco s mudanas de fora inica do meio ter ocorrido
o aumento da AT e consequentemente o aumento tambm do Deq
mdio
dos agregados
provocado pelo aumento da rea dos flocos com maiores dimenses. Observa-se em
particular nesta concentrao salina um aumento do nmero de flocos de pequenas
dimenses presentes em cada uma das imagens adquiridas, aumentando desta forma a
AT de agregados. O aumento do Deq
mdio
quando a concentrao de 0,5 % e as
restantes variaes podem dever-se possivelmente prpria desfloculao que torna os
flocos menos resistentes e durante a preparao da lmina para a observao
microscpica por anlise de imagem acabam por se achatar mais, compensando a
perda da biomassa da desfloculao (da Motta et al., 2002).
A posterior diminuio da AT e do Deq
mdio
permite concluir que ocorreu a
desfloculao da biomassa, convergindo com os resultados de turbidez (aumento de
slidos suspensos - flocos de pequenas dimenses) e IVL (flocos com maiores
dimenses apresentam boa sedimentabilidade). Com o aumento da concentrao salina,
evidente a menor quantidade de agregados presente nas imagens adquiridas no final de
cada teste.

Para a avaliao da variao dos agregados tambm importante proceder
anlise dos diferentes tamanhos de flocos. Consequentemente agruparam-se os flocos
com diferentes classes de Deq: dimetros inferiores a 0,01 mm; 0,01 0,1 mm e
agregados superiores a 0,1 mm. Desta forma, apresenta-se na Figura 32 a variao com
a salinidade do Deq dos flocos.


78
RESULTADOS E DISCUSSO

0
0.05
0.1
0.15
0.2
0.25
0 0.5 1 2 3 4 6
% Sal
D
e
q


/

m
m
0 - 0.01 mm 0.01 - 0.1 mm >0.1 mm

Figura 32.Variao do Deq dos agregados com o aumento da concentrao de sal.

Pela Figura 32 observa-se que os flocos com pequenas dimenses se mantm
constantes durante o estudo efectuado. Os flocos com Deq superior a 0,1 mm diminuem
e os flocos com dimenses mdias aumentam durante o estudo. Comparando a Figura
32 com a Figura 31, verifica-se que o aumento do Deq para 0,5 % sal se deve ao
aumento dos flocos com Deq superior a 0,1 mm e que a consequente diminuio se
deve ao aumento dos flocos de dimenses inferiores (0,01 0,1 mm).

Foi tambm abordado o nmero de flocos presentes para cada concentrao de
sal estudada. A evoluo da quantidade de cada classe de agregados em termos de
nmero percentual apresentada na Figura 33.

79
RESULTADOS E DISCUSSO

0
20
40
60
80
0 0.5 1 2 3 4 6
% Sal
N

m
e
r
o

/

%
<0.01 mm 0.01 - 0.1 mm >0.1 mm

Figura 33.Variao do Nmero de agregados com o aumento da concentrao de sal.

A gama de dimetros estudados muito pequena comparada com outros estudos
que foram anteriormente realizados com processos aerbios. Os agregados pequenos
so os predominantes durante o estudo realizado. Quando no ocorre qualquer
interferncia de sal no meio, existe um equilbrio de flocos muito pequenos e mdios
enquanto que os de maiores dimenses praticamente no existem. Verifica-se um maior
nmero de flocos com dimenses muito pequenas. Estes decrescem com o incremento
da salinidade, havendo consequentemente um aumento dos agregados com dimenses
entre 0,01 0,1 mm. O aumento desta classe de agregados e da classe de dimetros
inferiores a 0,01 mm pode indicar a presena do fenmeno depin-point.
Contudo, esta anlise no reflecte efectivamente a importncia de cada tipo de
agregados como a distribuio da rea percentual. Esta mais representativa de cada
classe e apresenta-se na Figura 34.

80
RESULTADOS E DISCUSSO

0
20
40
60
80
100
0 0.5 1 2 3 4 6
% Sal

r
e
a

/

%
<0.01 mm 0.01 - 0.1 mm >0.1 mm

Figura 34.Variao da rea Percentual de agregados com o aumento da concentrao
de sal.

Os flocos com dimetros inferiores a 0,01 mm apresentaram durante todo o
estudo uma rea total de agregados inferior a 5,0 %. At 3,0 % de sal observa-se que a
rea total era praticamente ocupada por flocos de dimenses superiores a 0,1 mm. A
partir desta concentrao verifica-se uma predominncia dos agregados de mdias
dimenses. Contudo, a diferena entre os flocos de dimenses mdias e superiores a 0,1
mm no muito grande no final do estudo o que pode indicar que a diminuio do IVL
se deve presena de flocos com dimenses superiores a 0,1 mm de elevada densidade.
O aumento da turbidez durante este estudo deve-se ao aumento da rea ocupada por
flocos com dimenses compreendidas entre 0,01 0,1 mm (cerca de 60 % no final).
A turbidez sendo determinada por leitura de absorvncia permite uma avaliao
dos flocos em suspenso. Conclui-se desta forma que o aumento da turbidez
provocado pelo aumento dos flocos de dimetro entre 0,01 0,1 mm com caractersticas
de flocos pin-point que apresentam por isso uma menor densidade. A diminuio do
IVL avaliada pelos agregados com dimenses superiores a 0,1 mm, com elevadas
capacidades de sedimentao e que esto presentes durante todo o estudo realizado
apesar de se encontrarem em menor nmero, mas ocupando uma maior rea nas
imagens. Na determinao do IVL, como utilizado um mtodo gravimtrico os flocos
de pequenas dimenses no so to evidentes.


81
RESULTADOS E DISCUSSO

Com o objectivo de compreender as alteraes morfolgicas durante as adies
crescentes de sal no reactor biolgico, foram avaliados os parmetros relacionados com
a estrutura dos flocos bem como os que se encontram relacionados com a morfologia
dos agregados. Desta forma, seria possvel seleccionar quais os parmetros que exercem
uma maior influncia nos agregados. Assim, a Figura 35 apresenta relaes entre alguns
parmetros estruturais e morfolgicos.

Figura 35. Anlise de Componentes Principais aos parmetros determinados.

As variveis apresentadas na Figura 35 mostram que algumas so similares (uma
vez que algumas delas se encontram bastante prximas). Observa-se que os parmetros
rea, permetro, comprimento e largura podero ser resumidos apenas a um parmetro j
que pela PCA a localizao aproximadamente igual e influencia positivamente no
segundo componente principal. A convexidade e a excentricidade apresentam
influncias diferentes uma vez que uma delas positiva e a outra negativa. A
compacidade tambm poder ser automaticamente seleccionada para uma posterior
avaliao uma vez que no se encontra associada a nenhum outro parmetro. Os
restantes parmetros morfolgicos so extremamente importantes para os flocos por
apresentarem um peso positivo no primeiro componente principal mas poder ser
seleccionado apenas um deles devido sua proximidade.

82
RESULTADOS E DISCUSSO

A determinao do nmero de componentes principais est relacionada com a
correlao dos dados. Assim, quanto mais elevada a varincia entre os vrios dados,
melhor ser essa correlao. Neste caso a Figura 35 apresenta-se sob a forma
tridimensional j que foram utilizados 3 componentes principais para que a varincia
fosse superior a 90 %. Esta avaliao permitiu concluir que todos os parmetros
relacionados com a estrutura dos agregados bem como os parmetros morfolgicos
apresentam uma forte relao com os flocos, apesar da convexidade, compacidade e
excentricidade serem parmetros com influncia diferente dos restantes.
Os parmetros seleccionados anteriormente so importantes na avaliao dos
flocos microbianos e devem ser correlacionados com os parmetros fsico-qumicos
determinados experimentalmente. Os parmetros clssicos mais relevantes para a
anlise de imagem so aqueles que se relacionam directamente com a
sedimentabilidade. Assim, efectuou-se o estudo particular do IVL e da turbidez,
parmetros fsicos que podem ser correlacionados com os parmetros morfolgicos.
Os parmetros de natureza estrutural e morfolgica que se encontram agrupados
por observao da Figura 35 so submetidos a uma nova avaliao desta vez recorrendo
a mtodos de estatstica multivarivel (PLS) que permita averiguar quais os parmetros
mais importantes. A Tabela 9 apresenta os resultados referentes a cada grupo de
variveis associadas por PCA usando como variveis Y a Turbidez e o IVL.

Tabela 9. Variveis de maior importncia para o IVL e para a turbidez usando os
parmetros chave de cada grupo determinado por PCA.

IVL e Turbidez
Dimetro Equivalente 1.0962
Comprimento 1.0595
Largura 1.0452
Permetro 0.7638
Robustez 1.3535
Solidez 0.8857
Extenso 0.6752
Esfericidade 0.9632


Destaca-se a seleco da robustez e do dimetro equivalente como parmetros de
maior relevncia na previso do IVL e da Turbidez. Estes dois parmetros vo ser

83
RESULTADOS E DISCUSSO

associados convexidade, excentricidade e compacidade para uma ltima avaliao
por estatstica multivarivel.

De forma a compreender as alteraes dos agregados durante o estudo, foi
tambm realizada uma anlise morfolgica aos parmetros seleccionados anteriormente
(compacidade, excentricidade, convexidade e robustez) para cada uma das classes
(Figura 37, Figura 38, Figura 39 e Figura 40). A Figura 36 apresenta a variao mdia
de cada um dos parmetros referidos anteriormente.
0
0.2
0.4
0.6
0.8
1
0 1 2 3 4 5 6
Sal / %
Comp. mdia Conv. mdia Excent. mdia Robus. mdia

Figura 36.Variao dos parmetros morfolgicos com a concentrao de sal.

Os valores dos parmetros analisados encontram-se entre 0,6 e 0,8 indicando que
existe uma organizao compacta e regular dos flocos. A distribuio da convexidade
para cada concentrao salina em estudo encontra-se numa gama de valores que
apontam para uma elevada consistncia dos flocos em estudo. Perante os resultados
obtidos por Amaral (2003) para os macroflocos (grnulos anaerbios) foi possvel
concluir uma elevada semelhana com a estrutura dos microflocos deste estudo,
demonstrando desta forma a elevada densidade e consequentemente a facilidade na
sedimentao. No entanto torna-se essencial a avaliao de cada um dos parmetros
morfolgicos individualmente para cada classe de agregados em estudo. Provavelmente
os resultados da Figura 36 devem-se elevada percentagem em nmero dos agregados
mais pequenos ( <0,01 mm).

84
RESULTADOS E DISCUSSO

0
0.2
0.4
0.6
0.8
1
0 1 2 3 4 5
Sal / %
C
o
m
p
a
c
i
d
a
d
e
6
<0.01 mm 0.01-0.1 mm >0.1 mm

Figura 37.Variao da compacidade dos agregados com o aumento da concentrao de
sal.

0
0.2
0.4
0.6
0.8
1
0 1 2 3 4 5 6
Sal / %
E
x
c
e
n
t
r
i
c
i
d
a
d
e
<0.01 mm 0.01-0.1 mm >0.1 mm

Figura 38.Variao da excentricidade dos agregados com o aumento da concentrao
de sal.

85
RESULTADOS E DISCUSSO

0
0.2
0.4
0.6
0.8
1
0 1 2 3 4 5 6
Sal / %
C
o
n
v
e
x
i
d
a
d
e
<0.01 mm 0.01-0.1 mm >0.1 mm

Figura 39.Variao da convexidadedos agregados com o aumento da concentrao de
sal.
0
0.2
0.4
0.6
0.8
1
0 1 2 3 4 5
Sal / %
R
o
b
u
s
t
e
z
6
<0.01 mm 0.01-0.1 mm >0.1 mm

Figura 40.Variao da convexidadedos agregados com o aumento da concentrao de
sal.

Cada classe de tamanhos apresenta diferentes valores de cada um dos parmetros
morfolgicos. Os agregados de maiores dimenses (>0.1 mm) apresentam uma baixa
compacidade (0,6) o que indica a presena de uma estrutura quebrada e frgil. Apesar
de todas as classes de agregados apresentarem uma excentricidade semelhante,
representando estruturas alongadas, a classe de dimenso superior a 0,1 mm exibe

86
RESULTADOS E DISCUSSO

valores ligeiramente superiores. A convexidade atinge valores de 0,9 para os agregados
de menores dimenses o que indica uma estrutura regular, bastante diferente da
irregularidade dos agregados com dimenses superiores a 0,1 mm devido aos valores se
encontrarem entre 0,2 e 0,5.
Os agregados com dimenses intermdias (0,01 a 0,1 mm) apresentam uma
morfologia semelhante ao que era esperado para flocos pin-point, ou seja, flocos
compactos com valores de robustez de 0,7 e menos alongados devido aos valores de
excentricidade e de compacidade se encontrarem entre 0,75 e 0,7, respectivamente.
A avaliao dos agregados de dimenses mais pequenas ( <0,01 mm) torna-se
mais difcil devido menor quantidade de pxeis que os representam, embora paream
ser compactos (robustez em torno de 0,9), extremidades lisas (convexidade em torno de
0,9) embora ligeiramente alongados (excentricidade em torno de 0,75 e compacidade
em torno de 0,6).
A anlise dos parmetros morfolgicos mais significativos (convexidade,
compacidade, robustez e excentricidade) no exibiu qualquer mudana significativa
para as classes de agregados estudadas. Uma vez mais pode-se inferir que o processo de
desfloculao da biomassa em bactrias dispersas no resultou em mudanas
significativas em termos de morfologia de agregados como tinha ocorrido na
distribuio por classes dos agregados.

Torna-se necessrio recorrer a mtodos de estatstica multivarivel que permitam
indagar sobre os parmetros mais importantes para a determinao do IVL e da turbidez.
As variveis X foram seleccionadas antecipadamente pela apreciao por PCA e os
grupos de variveis sofreram tambm uma abordagem por PLS de forma a verificar
quais os parmetros mais importantes na determinao do IVL e da turbidez.
A anlise por PLS para o IVL e para a turbidez envolveu os aspectos estruturais
(rea total dos agregados e dimetro equivalente) e os aspectos morfolgicos
(convexidade, robustez, excentricidade e compacidade).
A Figura 41 apresenta as variveis de maior importncia para a determinao do
IVL, enquanto que a Figura 43 apresenta as variveis de maior importncia para a
determinao da turbidez. Estas Figuras foram obtidas atravs da aplicao do mtodo
de PLS existente no software SIMCA-P 8.0. Os valores VIP reflectem a importncia dos
termos no modelo ambos respeitantes matriz Y, isto ao IVL e/ou turbidez. Os valores

87
RESULTADOS E DISCUSSO

VIP so determinados a partir de todas as variveis. As variveis que apresentam um
valor VIP superior a 1 traduzem maior relevncia na matriz Y.
0.00
0.20
0.40
0.60
0.80
1.00
1.20
1.40
C
o
n
v
R
o
b
u
s
A
T
D
e
q
E
x
c
C
o
m
p
V
I
P

Figura 41. Parmetros VIP na anlise por PLS do contedo de agregados microbianos
para o IVL.

Os parmetros que apresentaram maior relevncia para o IVL foram a
convexidade, robustez e a rea total dos agregados uma vez que estas variveis
apresentaram um valor VIP superior a 1. Foram usadas 3 variveis latentes no estudo do
IVL uma vez que o aumento de variveis latentes no mostrou nenhuma melhoria
significativa. A partir destes dados possvel determinar os valores de IVL previstos
pelo mtodo dos mnimos parciais. O coeficiente de correlao alcanado usando estes
dados para prever o IVL encontra-se representado na Figura 42.

88
RESULTADOS E DISCUSSO

R
2
=0.9355
0
20
40
60
80
100
120
140
0 20 40 60 80 100 120 140
IVL previsto
I
V
L

o
b
s
e
r
v
a
d
o

Figura 42. Regresso linear entre o IVL determinado experimentalmente (IVL
observado) e o IVL previsto.


Foi alcanado um valor para o coeficiente de correlao de 0,935 entre os
valores observados e previstos de IVL. Entretanto, observa-se pela Figura 42 uma forte
dependncia entre o coeficiente de correlao e o valor mais elevado de IVL que
representa o estado inicial do sistema sem qualquer adio de sal. Quando este valor foi
removido, o coeficiente de correlao diminuiu drasticamente para 0,545, assim poder-
se-ia concluir que a avaliao de IVL no pode ser determinada baseando-se unicamente
na estrutura e morfologia dos agregados. Assim, e dado o facto de que o IVL depende
dos slidos suspensos totais (TSS), e consequentemente da biomassa dispersa, este
resultado era esperado no presente estudo devido ao elevado contedo de biomassa
dispersa.


89
RESULTADOS E DISCUSSO

0.00
0.20
0.40
0.60
0.80
1.00
1.20
1.40
A
T
R
o
b
u
s
D
e
q
C
o
n
v
E
x
c
C
o
m
p
V
I
P

Figura 43. Parmetros VIP na anlise por PLS do contedo de agregados microbianos
para a turbidez.

Os parmetros que apresentaram maior relevncia para a turbidez foram a rea
total dos agregados e a robustez uma vez que estas variveis apresentaram um valor VIP
superior a 1. Neste caso tambm foram usadas 3 variveis latentes j que o aumento de
variveis latentes no mostrou nenhuma melhoria significativa. A partir destes dados
possvel determinar os valores de turbidez previstos pelo mtodo dos mnimos parciais.
O coeficiente de correlao alcanado usando estes dados para prever a turbidez
encontra-se representado na Figura 44.

90
RESULTADOS E DISCUSSO

R
2
=0.9943
0
5
10
15
20
25
30
35
5 10 15 20 25 30 3
Turbidez prevista
T
u
r
b
i
d
e
z

o
b
s
e
r
v
a
d
a
5

Figura 44. Regresso linear entre a turbidez determinada experimentalmente (Turbidez
observada) e a turbidez prevista.


Pela Figura 44 possvel observar um elevado coeficiente de correlao (0,994)
entre a turbidez observada e a turbidez prevista pela aplicao do mtodo dos mnimos
quadrados parciais. Apesar do resultado ser satisfatrio, esta avaliao requer algum
cuidado devido ao elevado contedo de bactrias em suspenso no sistema biolgico.
De facto, embora seja verdade que as percentagens em nmero e rea (Figura 33 e
Figura 34, respectivamente) dos flocos pin-point aumentem, a rea total de agregados
diminui gradualmente, sendo assim, o contedo de flocos pin-point tambm diminui. A
Figura 45 pretende mostrar a relao entre a turbidez e a rea total dos agregados
microbianos.

91
RESULTADOS E DISCUSSO

R
2
=0.9444
0
5
10
15
20
25
30
35
0 0.5 1 1.5 2 2
rea Total de Agregados / m
2
/dm
3
T
u
r
b
i
d
e
z

/

F
A
.5
U

Figura 45. Regresso linear entre a turbidez e a rea total de agregados.

O aumento da turbidez com a crescente adio de sal depende fortemente do
aumento de bactrias dispersas no reactor. Quando a turbidez correlacionada
directamente com a rea total dos agregados (Figura 45) possvel observar uma
relao inversa entre ambos e um coeficiente de correlao de 0,944. Provavelmente
esta relao representa apenas a converso da biomassa por desfloculao para bactrias
dispersas, uma vez que a reduo da turbidez com o aumento do contedo em agregados
no possvel.
Finalmente, o estudo da relao entre a turbidez e os slidos suspensos volteis
(SSV) que correspondem concentrao de biomassa encontra-se representado na
Figura 46.


92
RESULTADOS E DISCUSSO

R
2
=0.990
0
5
10
15
20
25
30
35
2 3 4 5
SSV / g/L
T
u
r
b
i
d
e
z

/

F
A
6
U

Figura 46. Regresso linear entre a turbidez determinada experimentalmente e a
concentrao de biomassa.

O coeficiente de correlao de 0,990 significa que a turbidez correlacionada
com os SSV do sistema indicando que o aumento de biomassa, nomeadamente as
bactrias dispersas, causador deste fenmeno (aumento da turbidez). Como h uma
forte dependncia da turbidez avaliada em termos de bactrias dispersas, nenhuma
aplicao de estatstica multivarivel por anlise dos mnimos quadrados parciais pode
ser completamente de confiana baseando o estudo unicamente nas caractersticas
estruturais e morfolgicas dos agregados microbianos.


93























4. CONCLUSES
CONCLUSES

O tratamento de um efluente sinttico salino foi realizado usando um RDS.
Adoptou-se uma estratgia por pulsos simtricos para a alimentao e para o arejamento
que permitiu obter bons ndices de remoo de azoto amoniacal, comprovando a
finalidade da estratgia (nitrificao de efluentes).

Este trabalho permitiu concluir que o processo de aclimatao de extrema
importncia para os microrganismos de forma a no promover choques de carga e a
consequente perda dos catalisadores biolgicos do reactor. Verificou-se que a
perturbao inicial (0,5 % NaCl) indicou a necessidade do prolongamento da fase de
aclimatao devido s elevadas concentraes de azoto amoniacal obtidas.

Obtiveram-se percentagens de remoo de azoto amoniacal entre 98 % (para 0,0
% sal) e 24 % (para 1,0 % sal). Esta baixa remoo alcanada deve-se
fundamentalmente ao curto perodo de adaptao microbiana.

As percentagens de remoo de CQO situaram-se entre 90 % (para 0,0 % sal) e
27 % (para 4,0 % sal) que comprovam vrios estudos realizados por Uygur & Kargi
(2004), Uygur (2005), Kargi & Diner (1998), Kargi & Uygur (1997). A diminuio da
remoo de CQO deve-se possivelmente aos vrios factores que sensibilizam os
consrcios microbianos nomeadamente a sensibilidade para mudanas de fora inica
que provoca a plasmlise celular e a inactivao microbiana.

O acompanhamento do nitrato indicou a possibilidade do azoto amoniacal ser
apenas oxidado a nitrito, enquanto que a concentrao de fosfato foi aumentando no
reactor devido tambm a fenmenos de plasmlise como foi comprovado por Uygur
(2006).

Para se efectuar a abordagem sedimentabilidade das lamas necessrio ter em
conta tanto os valores de IVL como os de turbidez. Com o aumento da salinidade o IVL
diminuiu podendo indicar uma elevada sedimentabilidade, no entanto a turbidez
aumentou. Assim, conclui-se atravs deste trabalho que no possvel relacionar a
sedimentabilidade de lamas apenas com o IVL.


96
CONCLUSES

Para as elevadas concentraes de sal o sistema sofreu perturbaes devido a
variaes de fora inica que causaram a desfloculao da biomassa em bactrias
dispersas que pode ser confirmada pela elevada turbidez e pelos baixos valores de IVL.

Devido relao directa entre a concentrao de biomassa e a turbidez conclui-
se que existe uma maior quantidade de slidos em suspenso devido parcial
desfloculao da biomassa. Estes resultados sustentam tambm os resultados obtidos no
processamento de imagem, onde a presena de flocos de pequenas dimenses (pin-
point) aumenta com a perturbao salina.

Apesar de no ter sido realizado qualquer processamento de imagem aos
protozorios existentes no licor misto, observou-se a diminuio e finalmente a sua
eliminao com o aumento da salinidade do efluente, confirmando desta forma os
resultados obtidos por Salvad et al. (2001). Mais uma vez se confirma tambm o
aumento da turbidez na presena de muitas bactrias dispersas.

A anlise dos mnimos quadrados parciais no permitiu obter previses dos
valores de IVL nem de turbidez baseando apenas o estudo nos dados referentes
morfologia da biomassa agregada, devido ao elevado contedo de bactrias dispersas
nas lamas.


97























5. REFERNCIAS
REFERNCIAS

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