Monografía

MICROBIOLOGIA MDICA VIRUS DE INMUNODEFICIENCIA HUMANA (VIH)
1

UNIVERSIDAD NACIONAL FAUSTINO SANCHEZ CARRION
FACULTAD DE MEDICINA HUMANA
E.A.P. DE MEDICINA HUMANA

CURSO:
MICROBIOLOGA MDICA

DOCENTE:
SEGAMI SALAZAR, HUGO GABRIEL

TEMA:
VIRUS DE INMUNODEFICIENCIA HUMANA

ALUMNA:
TRUJILLO ALUMIAS, Estefani Airita

HUACHO-PER
2014-I


2

INDICE

INTRODUCCION

I. CARACTERISTICAS ESTRUCTURALES DEL VIH Y COMPOSICIN

II. CLASIFICACION

III. ORIGEN DEL SIDA

IV. PATOGENIA Y ASPECTOS PATOLGICOS

V. MANIFESTACIONES CLINICAS

VI. INMUNIDAD

VII. DIAGNOSTICO

VIII. BIBLIOGRAFIA


3

INTRODUCCION

La infeccin por el Virus de la Inmunodeficiencia Humana (VIH) y el Sndrome de Inmunodeficiencia
Adquirida (SIDA) que desencadena en estadios avanzados de la enfermedad son dos conceptos que con
frecuencia se utilizan como sinnimos aunque estrictamente hacen referencia a fenmenos diferentes.
Una persona puede estar infectada por el VIH y no padecer SIDA.

Durante muchos aos la infeccin por VIH se ha tratado en nuestra sociedad como un hecho propio de
grupos marginales, considerando que las personas de buena vida no podan contraer la infeccin y
asociando el concepto de VIH/SIDA a multitud de prejuicios que, todava hoy, persisten y hacen que el
padecimiento de la enfermedad sea considerado un tema tab.

Actualmente, se estima que cerca de 34 millones de personas en el mundo se encuentran infectadas por
el VIH, de las cuales dos tercios residen en pases desarrollados. Estos datos convierten a esta infeccin
en un tema de constante actualidad, de gran inters en investigacin cientfico-mdica y,
consecuentemente, de constantes dudas y mitos que conviven con verdades en la sociedad.

A lo largo de esta serie de artculos, en Ciencia Inquieta iremos ofreciendo al lector informacin que
facilite la comprensin de la diferencia entre infeccin y enfermedad, en qu consiste cada una, cules
son los nuevos descubrimientos, los retos actuales a los que la medicina y la ciencia se enfrentan y,
sobre todo, cules son y cules no son vas de contagio del virus, mitos existentes al respecto y qu
podemos hacer nosotros para prevenir y evitar nuevos casos de infeccin por VIH.

Abramos la puerta al conocimiento cientfico, tumbemos mitos y consideremos la importancia real de esta
enfermedad infecciosa con una visin global, objetiva, actual y fundamentada. A travs de los
comentarios, puedes hacernos llegar dudas, sugerencias o, simplemente, debatir y opinar acerca de lo
que vamos descubriendo juntos.


4

VIRUS DE INMUNODEFICIENCIA HUMANA
I. CARACTERISTICAS ESTRUCTURALES DEL VIH Y COMPOSICIN
El VIH es un miembro del gnero Lentivirus y posee muchas caractersticas
fisicoqumicas tpicas de la familia de los retrovirus al que pertenece. En esta
familia estn tambin: el virus de inmunodeficiencia felina, el virus de
inmunodeficiencia de los simios, el virus visna de las ovejas y el virus de la
anemia infecciosa equina. (TABLA 1)

TABLA 1. PROPIEDADES IMPORTANTES DE LOS LENTIVIRUS ( VIRUS NO ONCGENICOS)

VIRION Esfrico de 80 a 100 nm de dimetro o centro cilndrico.

GENOMA RNA monocatenario, lineal, en sentido positivo, de 9 a 10 kb,
diploide; ms complejo que retrovirus oncognicos y con 6 genes
adicionales

PROTEINAS Glucoprotenas de cubierta muestra variacin antignica; enz.
Transcriptasa inversa contiene viriones en su interior; proteasa para
px. Infectante.

CUBIERTA Presente
REPLICACION Trancriptasa inversa elabora una copia de ADN a partir del RNA
genmico; el ADN del provirus es una plantilla para el ARN viral.
Variabilidad frecuente.

MADURACION Las partculas son extruidas de la membrana plasmtica.

CARACTERISTICAS
SOBRESALIENTES
Destructores de clulas. Infectan clulas del sistema inmunitario.
Provirus vinculados con clulas. Expresin viral a cl. In vivo. Causa
enfermedades crnicas de evolucin lenta. Incluye a los causales del
SIDA


5

La caracterstica morfolgica peculiar del VIH es poseer un nucleoide cilndrico
en el virin maduro. El nucleoide en forma de barra y que constituye un signo
diagnstico es visible en la micrografa electrnica en las partculas
extracelulares cuando son seccionadas en el ngulo apropiado.

1.1) Genoma
El genoma del RNA de los Lentivirus es ms complejo que el de los Lentivirus
transformantes. Los Lentivirus contienen los 4 genes necesarios para la
replicacin de un Lentivirus que son:
Gag
Pro
Pol
Env

Cumplen con las caractersticas generales de replicacin de los retrovirus. El
gen gag codifica las principales protenas estructurales: la protena de matriz
p17, anclada en el interior de la membrana y la protena de la Cpside p24, que
forma por polimerizacin una estructura nuclear cnica que contiene en su
interior un complejo protena-cido nucleico formado por dos copias del ARN
genmico del VIH-1, la nucleoprotena p7 y la transcriptasa inversa p66 (RT). El
gen pol codifica las tres enzimas necesarias para el ciclo infectivo del virus: la
proteasa (PR), la transcriptasa inversa (RT) y la Integrasa (IN)

Se sabe que hasta 6 genes adicionales o auxiliares que regulan la expresin
viral y son importantes en la patogenia in vivo y tienen la caracterstica de
poseen muy poca homologa de secuencias, pero conservan sus funciones los
seis genes denominados inicialmente accesorios: tat, rev, nef, vif, vpu y vpr,
que dan lugar a sus correspondientes protenas con un papel muy importante
en el ciclo biolgico del virus. (FIGURA 1).


6

FIGURA 1. Organizacin del genoma de VIH-1. En la forma proviral el virus integrado esta
flanqueado por las regiones terminales repetidas (LTR) compuestas por las regiones U3, R y
U5. El LTR 5 controla la expresin de los genes estructurales: gag, pol y env, y los accesorios:
tat, rev, nef, vif, vpu y vpr. MA: Matriz, CA: Cpside, NC: Nucleocpside, IN: Integrasa, RT:
Retrotranscriptasa, PR: Proteasa. Los 9 genes de VIH-1 se expresan por medio de diferentes
mensajeros a partir del provirus (ADN) integrado. Los ARN ms largos son exportados al
citoplasma por un mecanismo Rev-dependiente y constituyen el genoma de nuevas partculas
o son traducidos a las protenas estructurales Gag, Pol y Env. Las protenas reguladoras o
accesorias son producto de extenso procesamiento (splicing) del ARN en el ncleo donde se
producen hasta 7 versiones diferentes del ARN transcrito.3

1) Proteina Tat

Es una de las que intervienen en la rplica de fase temprana, acta en la
transactivacin en la cual el producto de un gen viral participa en la
activacin transcriptiva de otros genes del virus.

La transactivacin por parte de VIH es muy eficiente y puede contribuir a
la naturaleza virulenta de las infecciones que ocasiona.


7

2) Protena Rev

Se necesita para la expresin de las protenas estructurales virales;
facilita la exportacin del ncleo de transcritos virales no empalmados.

Las protenas estructurales son traducidas a partir de mRNA no
empalmados en la fase tarda de la replicacin viral.

3) Protena Nef

La protena Nef ha sido motivo de numerosas investigaciones ya que
participa en funciones diversas.

Intensifica la infectividad del virus, facilita la activacin de los linfocitos T
inactivos y disminuye la expresin de las clulas CD4 y de la clase I del
complejo principal de histocompatibilidad (MHC), lo que puede
representar un mecanismo de escape importante al evadir un ataque
mediado por linfocitos CD8 + citotxicos.

4) Protena Vpr

Incrementa el transporte del complejo de preintegracin viral al interior
del ncleo y tambin detiene las clulas en la fase G2 de su ciclo.

5) Protena Vpu

Estimula la degradacin de linfocitos CD4.

Al igual que Vif, la funcin de interferir con un nuevo factor de restriccin
denominado Tetherin y que tiene como mecanismo antiviral la misin de
impedir la liberacin de partculas de la membrana celular

6) Protena Vif

Las clulas contienen en su interior protenas inhibidoras contra virus,
conocidas como factores de restriccin. Un tipo es APOBEC3G, una
citidina desaminasa que inhibe la rplica del VIH, al suprimir los efectos
de dicha enzima, (A3G). Vif interfiere con la actividad de A3G, anulando
su efecto antiviral y favoreciendo la replicacin del VIH.


8

Otra protena inhibidora es TRIM5, que se liga a las partculas
retrovirales de entrada y las recluta hasta llevarlas a los proteosomas
mucho antes de que aparezca la sntesis del ADN viral.

Las diferentes variedades de VIH no son idnticas, pero al parecer incluyen
toda una gran diversidad de virus similares. En un sujeto infectado se
identifican poblaciones heterogneas de genomas virales, heterogeneidad que
refleja grandes ndices de replicacin de las partculas y una cifra grande de
error de la transcriptasa inversa viral.

Tabla 2. Tamao, localizacin y funcin de las protenas que codifican los 9 genes de VIH-1.
Nombre Tamao Funcin Localizacin
Gag
MA p17 Anclaje de la
membrana Trasporte
al ncleo
Virin
CA p24 Cpside Virin
NC p7 Nucleocpside, unin
a ARN
Virin
p6 Unin a Vpr Virin

Pol
PR p15 Corte de Gag/Pol y
maduracin
Virin
RT p66,p51 Retrotranscripcin y
actividad ARNsa H (p15)
Virin
IN p31 Integracin del Provirus Virin

9

Env gp120/gp41 Glicoprotena de envoltura,
Unin a CD4 y co-
receptores
Membrana externa
del virin
Tat p16/p14 Transactivador
transcripcional
Ncleo y nucleolo
Rev p19 Transporte de ARN fuera
del ncleo
Vehculo nucleolo-
citoplasma
Vif p23 Infectividad (anula A3G) Citoplasma y virin
Vpr p10-15 Transporte nuclear,
estabiliza ciclo celular en
G2/M
Virin
Vpu p16 Liberacin de partculas
en la membrana (anula
Tetherin)
Membrana
Nef p27-25 Inhibe la expresin de
CD4 y HLA clase I
Membrana y citoplasma

CA: cpside; IN: integrasa; MA: matriz; NC: nucelocpside; PR: proteasa; RT:
retrotranscriptasa.

1.2) La envoltura del VIH

El VIH-1 tiene forma de esfera con un dimetro de 100-120nm. Al igual que en
todos los virus envueltos, la envoltura consiste en una bicapa lipdica tomada
de la membrana de la clula humana durante el proceso de gemacin de
nuevas partculas, donde se insertan 80 espculas (protenas virales)
constituidas cada una por varias molculas de gp120 (glicoprotena externa).

Las regiones de mxima divergencia entre diferentes partculas virales se
localizan en el gen env que codifica protenas de cubierta. En esta envoltura se
encuentran presentes algunas protenas de la clula husped y muy
significativamente Env, la glicoproteina de envoltura del VIH. Env se encuentra

10

anclada en la membrana y consiste en un hetero-trmero formado por tres
molculas llamadas glicoprotena 120 (gp120)SU, en la zona ms externa, y un
tronco de una estructura transmembrana que consta a su vez de tres molculas
llamadas glucoprotena 41 (gp41)TM (Figura 2).

Figura 2. Esquema general de la estructura de la partcula de VIH-1. ENV: Envoltura, MA:
Matriz, CA: Cpside, NC: Nucleocpside, IN: Integrasa, RT: Retrotranscriptasa, PR, Proteasa,
ARN: Genoma del virus. Aunque el nmero de spikes de Env (gp120/gp41) que puede recubrir
una partcula de 100-120nm es de ms de 70, las estimaciones ms recientes indican que este
nmero es mucho ms bajo con una media de 14 spikes por virin.

El ncleo del virus contiene: la protena de la cpside, p24 (p26 en VIH-2); la
protena p7/p9 de la nucleocpside; dos copias de ARN; y tres enzimas virales
(proteasa, transcriptasa inversa e integrasa). La protena p24 es el antgeno
ms fcil de detectar y son los anticuerpos contra l, los que se utilizan para el
diagnstico de infeccin por VIH por medio de ELISA. (FIGURA 3).


11

La estructura y funcionalidad de Env son claves para entender aspectos
importantes de la biologa del VIH-1, tales como la interaccin con receptores
celulares (tropismo) y la evasin inmune. Cada partcula de VIH-1 tiene una
cantidad de estas estructuras de Env (spikes) relativamente pequea: 147, a
lo que se aade su fragilidad al ser la unin entre gp120 y gp41 no-covalente.
Este factor probablemente es responsable de la fragilidad y corta infectividad
de las partculas de VIH-1 ya que la mayora de los spikes no son funcionales.
No obstante, el diseo de la envuelta encierra algunas ventajas biolgicas muy
especiales de tal forma que precisamente Env es en gran parte responsable de
que todava no exista una vacuna protectora frente a la infeccin por VIH-1.
Los factores relacionados con la dificultad de neutralizar la infeccin por VIH-1
estn directamente relacionados con Env:

1) gran variabilidad de la envoltura con 5 regiones hipervariables (V) en la
zona ms externa de gp120, que muestran divergencia de una variante viral
a otra, y la regin V3 es importante en la neutralizacin (Figura 5).

2) alto nivel de glicosilacin de Env con ms del 50% de su masa en azcares
(N-glicosilacin), que impide la unin de anticuerpos (escudo de glicanos).

12

3) enmascaramiento conformacional, trmino que describe el que una de las
zonas ms vulnerables de Env, el sitio de unin con los co-receptores (CCR5
CXCR4), no existe hasta que se organiza espacialmente despus del cambio
en la conformacin de gp120 inducido por la interaccin con CD4, y es por
tanto muy poco susceptible a la neutralizacin mediada por anticuerpos
(Figura 4).

Figura 4. La estructura principal de la envoltura del VIH consiste en un trmero de gp120 y
gp41 anclado en la membrana externa (C). Gp120 interacciona con las molculas CD4 y CCR5
o CXCR4 (B) y se produce un cambio conformacional secuencial que activa los dominios
fusognicos de gp41 que median la fusin entre las membranas del virus y la clula (D). La
subunidad gp120 presenta en el exterior zonas hipervariables y una abundante glicosilacin
que dificulta la neutralizacin por anticuerpos. La zona responsable del reconocimiento de CD4
es poco accesible as como la zona de unin al co-receptor CCR5 o CXCR4 que solo se
constituye espacialmente despus de la interaccin con CD4 (B).


13

Los Lentivirus son partculas totalmente exgenas; a diferencia de los retrovirus
transformantes, el genoma lentiviral no contiene gen celular alguno conservado.
Los individuos se infectan cuando se introduce el virus de fuentes exgenas.

II. CLASIFICACION

Se han aislado lentivirus de innumerables especies que incluyen ms de dos
docenas de especies de primates africanos no humanos. Se conocen dos tipos
diferentes de virus de SIDA humano: VIH-1 y VIH-2. Ambos se diferencian por
caractersticas de la organizacin de su genoma, y las relaciones filogenticas
(evolutivas), con otros lentivirus de primates.

14

El VIH-1 es el causante de la pandemia mundial de sida mientras que el VIH-2,
aunque tambin puede producir sida, se considera menos patognico y menos
transmisible. El VIH-2 se encuentra confinado principalmente a zonas del frica
occidental, aunque se han detectado algunos casos en Europa y EE.UU. Tanto
el VIH-1 como el VIH-2 provienen de diferentes saltos inter-especie de virus
que infectan en la naturaleza a poblaciones de simios en frica.
La divergencia en secuencias entre los dos tipos de virus rebasa 50 por ciento.
Las cepas del VIH-1 se han clasificado en tres grandes grupos segn su
homologa gentica y se piensa que representan diferentes episodios de salto
inter-especies. Estos son el grupo M (main o principal), el grupo O (outlier), y el
grupo N (no M, no O). El grupo M se ha dividido en 10 subtipos o clados (A,
B, C, D,E, F, G, H,I y J) y en cepas recombinantes entre ellos, denominados
CRF (formas recombinantes circulantes). Los CRF se forman por
recombinacin de fragmentos genmicos de distintos subtipos. Actualmente se
han descrito ms de 30 CRF y su nmero se incrementa constantemente, en la
circulacin de seres humanos en diferentes regiones geogrficas.
En forma similar, se han detectado cinco subtipos de VIH-2 (A-E). Se advierte
enorme variabilidad dentro de cada subtipo. Los clados genticos al parecer no
corresponden con los grupos serotipos de neutralizacin y no hay pruebas de
que difieran las caractersticas biolgicas o patogenia de los subtipos.
De especies de primates no humanos se han obtenido innumerables lentivirus;
estas partculas pertenecen a seis grandes lneas filogenticas. Se considera
que el VIS de los mangabeyes ahumados (un tipo de mono cercopitcido de
frica Occidental) y el VIH-2 son variantes del mismo virus, como lo son los
lentivirus de chimpances y VIH-1. Los VIS de monos verdes africanos, sykes,
mandriles y colobus representan lneas adicionales independientes.

La organizacin de los genomas de los Lentivirus de primates (humanos y
simios) son muy similares. Una diferencia reside en que VIH-1 y el virus del
chimpanc portan un gen vpu, en tanto que VIH-2 y el grupo VIS
sm
tienen un
gen vpx. Otros miembros de VIS no tienen genes vpu ni vpx. Las secuencias
de los genes gag y pol se conservan celosamente. Se advierten diferencias
notables en los genes de las Glucoprotenas de la cubierta; las secuencias de
la porcin protenica transmembranaria estn ms conservadas que las
secuencias de Glucoprotenas externas (el componente protenico expuesto al
exterior de la partcula viral).


15

Al parecer los virus de inmunodeficiencia simia no son patgenos para sus
especies de origen (hospedadores como el chimpanc, el mono verde africano,
el mangabey ahumado), de las que se sabe estn infectadas en sus hbitat
naturales. A diferencia de ello, los monos rhesus no estn infectados en forma
natural en las zonas silvestres en Asia, pero son susceptibles a la induccion de
SIDA simia por diversos virus de inmunodeficiencia simia. El primer virus
identificado de monos rhesus en cautiverio (VIS
mac
) fue la cepa VIH-2 del
mangabey ahumado. (figura 6)

Figura 6

Los lentivirus que no afectan primates originan infecciones persistentes en
varias especies animales; causan enfermedades debilitantes cronicas y a
veces inmunodeficiencia. El virus visna (llamado tambien maedi), que es el
prototipo, causa sntomas neurolgicos o neumona en ovejas de Islandia.
Otros virus originan anemia infecciosa en caballos, y artritis y encefalitis en
cabras. Los lentivirus de felinos y bovinos pueden causar una
inmunodeficiencia; los que no afectan primates tampoco infectan miembros de
esa especie, incluidos seres humanos.

16

III. ORIGEN DEL SIDA

Un breve historia de los retrovirus
El primer miembro de los Retrovirus fue inicialmente descrito en 1911 por Rous
como un agente filtrable, ms pequeo que una bacteria, capaz de transmitir la
produccin de tumores en pollos: el virus del Sarcoma de Rous. Posteriormente
en 1970 Howard Temin y David Baltimore realizaron independientemente el
descubrimiento central del mecanismo de retrotranscripcin. La caracterizacin
de esta nueva enzima, la retrotranscriptasa (RT) que permita sintetizar ADN a
partir de ARN, cuestionaba el dogma prevalente hasta el momento en la
biologa molecular que estableca que la expresin del gen siempre se
realizaba en el sentido ADNARNProtena. La RT explicaba por qu esta
creciente familia de virus ARN poda convertir su genoma en ADN e integrarlo
como un gen ms en el cromosoma de la clula infectada. Ahora sabemos que
este mecanismo ha sido compartido a lo largo de la evolucin por diferentes
retrovirus y otros retroelementos de tal forma que en la actualidad ms del 10%
del genoma humano tiene este origen. En los aos posteriores se describieron
numerosos agentes retrovirales relacionados en su mayora con tumores en
aves y ratones. En 1980 Robert Gallo y su grupo, en plena expansin de las
teoras del origen vrico de los tumores, descubren el primer retrovirus humano,
el HTLV-I, un agente relacionado inicialmente con leucemia de clulas T y
posteriormente con un cuadro neurolgico conocido como paraparesia
espstica tropical. Este mismo grupo describira al ao siguiente otro agente, el
HTLV-II, relacionado esta vez con una rara leucemia de clulas peludas. Este
acontecimiento es doblemente relevante en la historia del VIH y el sida, porque
si bien la investigacin sobre los retrovirus humanos estaba ya plenamente
establecida, precisamente el hecho de que se trataran en su mayora de virus
oncognicos fue motivo de confusin inicial en la interpretacin de la patogenia
de la infeccin por VIH, un retrovirus cuya caracterstica principal es la
destruccin del linfocito T CD4+, y no la transformacin e inmortalizacin
celular.
El VIH se descubri en 1983, a los dos aos de la comunicacin de los
primeros casos de sida, por el grupo de Franoise Barr-Sinoussi y Luc
Montagnier en el Instituto Pasteur de Pars y posteriormente en 1984 por el
propio grupo de Robert Gallo en el Instituto Nacional de Cncer en Bethesda,
EE.UU. Despus de una importante polmica sobre la autora del
descubrimiento, y la diferente nomenclatura propuesta por cada uno de los
laboratorios, en 1986 se acord la denominacin de virus de la
inmunodeficiencia humana.

17

El VIH de seres humanos fue producto del cruzamiento de virus de simios en
zonas rurales de frica, a travs de infecciones de especies, tal vez por
contacto directo de personas con sangre infectada de primates. Los datos
actuales sealan que los equivalentes de VIH-1 y VIH-2 de primates fueron
transmitidos a personas en mltiples ocasiones distintas (siete, como mnimo).
Los anlisis de evolucin de secuencias sitan por 1930 la introduccin de
VIScpz, a las personas, lo cual dio origen al VIH-1 del grupo M, si bien algunas
estimaciones indican que tal fecha fue anterior, hacia 1908. Es probable que
las transmisiones en cuestin se produjeran repetidas veces a travs de los
decenios, pero a mediados del siglo anterior cambios sociales, econmicos y
conductuales particulares generaron circunstancias que permitieron la
expansin, el establecimiento definitivo en seres humanos y el ataque de
dichas infecciones por virus en proporciones epidmicas.


18

IV. PATOGENIA Y ASPECTOS PATOLGICOS
A) Fases del ciclo vital del VIH:
1. ACOPLAMIENTO, UNIN AL CORRECEPTOR Y FUSIN:
En su cubierta, el VIH tiene protenas que son atradas con fuerza haca el receptor
CD4 que se encuentra en la superficie de un linfocito-T CD4 (o cooperante) o de las
otras clulas inmunitarias enumeradas anteriormente. El VIH se une al receptor CD4 y
activa otras protenas presentes en la membrana de la clula
(denominadas correceptores, como el CCR5 o el CXCR4) que permiten que ambas
superficies se fusionen. Despus de la fusin, el VIH libera su material gentico (ARN)
dentro de la clula diana.
Los frmacos antirretrovirales llamados inhibidores del correceptor CCR5 (maraviroc
[Celsentri] es el nico comercializado)y los inhibidores de la fusin (efuvirtida
[Fuzeon] es el nico frmaco en el mercado de esta familia) actan durante esta
primera fase del ciclo vital.
2. TRANSCRIPCIN INVERSA:
El material gentico del VIH es ARN, pero para poder actuar sobre la clula, tiene que
convertirlo primero en ADN. La protena viral denominada transcriptasa inversa se
encarga de convertir la cadena simple de ARN vrico en una cadena doble de ADN;
este nuevo ADN se llamar ADN proviral o provirus.
Los frmacos antirretrovirales inhibidores de la transcriptasa inversa estn diseados
para bloquear el proceso de transcripcin inversa. Existen dos tipos: los anlogos de
nuclesido (con su subtipo anlogo de nucletido) y los no anlogos de nuclesido.
3. INTEGRACIN:
El ADN del VIH (proviral) es conducido al ncleo de la clula ocupada, donde
una enzima viral (llamada integrasa) se encarga de incorporar el ADN vrico dentro
del propio ADN de la clula. A partir de ahora, cuando la clula produce nuevas
protenas, tambin produce nuevas copias del VIH.
El provirus (se denomina as al ADN viral incorporado en el material gentico celular)
puede permanecer inactivo durante varios aos sin producir nuevas copias del VIH, o
produciendo muy pocas. As, se trata de clulas infectadas con virus latente.
Los frmacos antirretrovirales inhibidores de la integrasa, de los cuales raltegravir (es el
nico frmaco comercializado, estn diseados para bloquear la integracin.


19

4. TRANSCRIPCIN:
Cuando la clula diana recibe una seal para volverse activa, el provirus utiliza una
protena celular llamada polimerasa para crear copias del material gentico del VIH.
Como el ADN no puede abandonar el ncleo de la clula, el material gentico se
transcribe a ARN (lo que se conoce como ARN mensajero [ARNm]), que s pueden
atravesar las paredes del ncleo celular. El ARNm sirve como patrn para la formacin
de cadenas largas de protenas del VIH.
Los frmacos antirretrovirales antisentido o inhibidores de la transcripcin (IT), una
clase de frmacos que se encuentra en fases iniciales de la investigacin, podran
bloquear la transcripcin.
5. ENSAMBLAJE:
Una vez generadas las cadenas de protenas virales, otra enzima del VIH
(llamada proteasa) acta como una tijera dividiendo dichas cadenas en pequeas
protenas individuales, que pueden cumplir varias funciones; algunas se transforman en
enzimas del VIH tales como la transcriptasa inversa, mientras que otras se unen a las
copias del material gentico del virus, ensamblndose as nuevas partculas del VIH.
Los frmacos antirretrovirales inhibidores de la proteasa (IP) estn diseados para
bloquear la divisin de protenas virales e impedir as el ensamblaje de la nueva copia
de VIH.
6. GEMACIN:
El nuevo virus ensamblado brota de la clula y, al desprenderse, se lleva consigo
parte de la envoltura exterior de sta (la membrana celular). Esta envoltura, que acta
como recubrimiento, es atravesada por combinaciones de protenas y azcares,
conocidas como glucoprotenas del VIH. Estas glucoprotenas son necesarias para que
el VIH se pueda acoplar al CD4 y a los correceptores. Las nuevas copias del VIH ya
estn listas para infectar a otras clulas.
Existen compuestos en experimentacin denominados inhibidores de la
maduracin que actuaran para impedir el ensamblaje y gemacin finales del VIH.


20

B) Linfocitos T CD4, clulas anamnsicas y latencia

El signo cardinal de la infeccin por VIH es el agotamiento del numero de los
linfocitos cooperadores-inductores T, como consecuencia de la replicacin de
VIH en dicha poblacin de clulas y tambin la muerte de linfocitos T no
infectados, por mecanismos indirectos. Las clulas comentadas expresan el
marcador fenotpico CD4 en su superficie y la molcula en cuestin constituye el
principal receptor del virus; posee notable afinidad por la cubierta viral. El
correceptor de VIH sobre los linfocitos es el receptor CXCR4 quimiocinico.

En los comienzos de la infeccin, VIH primarios aislados son macrofagotropicos.
Sin embargo, todas las cepas de VIH infectan linfocitos T CD4 primarios (pero
no las lneas de dichas clulas inmortalizadas in vitro). Al evolucionar la infeccin
los virus M-trpicos dominantes son sustituidos por los T-trpicos.

La adaptacin de tales partculas primarias en el laboratorio, en las lneas de
linfocitos T inmortalizadas, hace que pierdan su capacidad de infectar monocitos
y macrfagos. Las consecuencias de la disfuncin de los linfocitos T CD4
causada por la infeccin por VIH son devastadoras, porque los linfocitos
mencionados intervienen de manera fundamental en la respuesta inmunitaria de
humanos. Son los encargados de manera directa o indirecta de inducir un
conjunto muy amplio de funciones de clulas linfoides y no linfoides; dichos
efectos incluyen activacin de macrfagos, induccin de funciones de linfocitos
citoliticos naturales y clulas B, as como la secrecin de diversos factores
solubles que inducen la proliferacin y la diferenciacin de clulas linfoides que
afectan las clulas hematopoyticas.

En cualquier momento particular solo una pequea fraccin de linfocitos T CD4
es infectada en forma productiva y muchas de las clulas con dicho ataque son
destruidas, pero sobrevive una fraccin y recupera su estado anamnesico en
reposo. En las clulas anamnsicas es pequea o nula la expresin del gen viral
y de este modo permite que sea un reservorio latente, estable, a largo plazo del
virus. Menos de una clula por milln de linfocitos TCD4 en reposo alberga
provirus latentes de VIH-1, si la persona recibe satisfactoriamente
antirretrovirales. Incluso despus de 10 aos de tratamiento los enfermos
presentan cambio mnimo en la magnitud en reservorio con nmero de VIH
latentes, Porque con gran lentitud se deteriora el reservorio latente de las clulas
anamnsicas infectadas.

Es poco probable la cura de la infeccin por VIH; si existiera un milln de clulas
anamnsicas infectadas en el cuerpo se necesitaran unos 70 aos para que se
deterioraran y murieran. Cuando las clulas mencionadas se exponen al

21

antgeno o se interrumpe la farmacoterapia, se activa y libera el virus infectante.
Es posible que existan tambin entre los macrfagos, los hemoblastos o las
clulas cerebrales otros reservorios o depsitos no sensibles a frmacos.

C. Monocitos y macrfagos

Los dos tipos de clulas intervienen decisivamente en la diseminacin
y la patogenia de la infeccin por virus de inmunodeficiencia humana. Algunos
subgrupos de monocitos expresan el antigeno de superficie CD4, y por ello se
fijan en la cubierta del virus. El correceptor de dicho virus en los monocitos y
macrfagos es la quimiocina CCR5. En el cerebro, los principales tipos celulares
infectados por VIH al parecer son los monocitos
y los macrfagos, y ello pudiera tener consecuencias importantes para la
aparicin de manifestaciones neuropsiquiatras que acompaan a la infeccin
por virus de inmunodeficiencia humana. Los macrfagos infectados de alveolos
pulmonares pudieran intervenir en la neumonitis intersticial en algunos enfermos
de sndrome de inmunodeficiencia adquirida.

En fecha temprana despus de la infeccin predominan las cepas
macrofagotropicos de VIH y ellas son las que originan las infecciones iniciales
incluso si la fuente de transmisin contiene virus M-trpicos y T-trpicos.

Se ha pensado que los monocitos y los macrfagos constituyen reservorios
importantes de VIH en el cuerpo. A diferencia del linfocito T CD4, el monocito es
relativamente refractario a los efectos citopaticos de VIH y por ello el virus,
adems de sobrevivir en el interior de la clula, puede ser transportado por ella a
diversos rganos como los pulmones y el cerebro. Los macrfagos infectados
pueden seguir produciendo virus por largo tiempo.

D. rganos linfoides

Los rganos linfoides intervienen decisivamente en la infeccin por virus de
inmunodeficiencia en humanos. Los linfocitos en la sangre perifrica constituyen
solo alrededor de 2% del conjunto total de ellos y el resto est ms bien en
rganos linfoides; precisamente en estos ltimos se generan las respuestas
inmunitarias especficas. La red de clulas dendrticas foliculares en los centros
germinales de los ganglios linfticos atrapa antgeno y estimula la aparicin de
una respuesta inmunitaria. Durante toda la evolucin de la infeccin no tratada
(incluso durante la fase de latencia clnica), hay replicacin activa de VIH en los
tejidos linfoides. El microambiente del ganglio linftico es ptimo para que se

22

establezca y propague la infeccin por el virus. Hay liberacin de citocinas que
activan un gran fondo comn de linfocitos TCD4 que son muy susceptibles a la
infeccin por virus de inmunodeficiencia humana. Al evolucionar la enfermedad y
llegar a etapas ulteriores se altera la arquitectura de los ganglios mencionados.

E. Clulas del sistema nervioso

Las anormalidades del sistema nervioso son frecuentes en etapas ulteriores de
la infeccin y constituyen un cuadro definitorio del sndrome de
inmunodeficiencia adquirida. La enfermedad de dicho sistema aparece en
grados variables en 40 a 90% de los pacientes; los cuadros comprenden
encefalopata por VIH, neuropatas perifricas y como problema ms grave, el
complejo de demencia por sndrome de inmunodeficiencia adquirida.
Mecanismos patgenos directos e indirectos podran explicar la
inmunodeficiencia humana. Los tipos predominantes de clulas en el cerebro
que son infectadas por el VIH son los monocitos y los macrfagos. El virus
puede penetrar en el parnquima cerebral, valindose de monocitos infectados
que liberan citocinas, que son toxicas para las neuronas, as como factores
quimiotacticos. Lo anterior desencadena infiltracin al encfalo de clulas
inflamatorias. Rara vez aparece VIH en las neuronas, los oligodendrocitos
y los astrocitos (si es que lo hace).

V. MANIFESTACIONES CLINICAS

Las etapas de infeccin incluyen una infeccin primaria, diseminacin del virus
a rganos linfoides, latencia clnica, aumento de la expresin del VIH,
enfermedad clnica y muerte. La duracin promedio entre la infeccin primaria y
la evolucin hasta enfermedad clnica es de aproximadamente 10 aos en
promedio (vara de 8 a 11 aos). En casos no tratados por lo general tiene
lugar durante los dos aos posteriores al inicio de los sntomas clnicos.
Despus de la infeccin primaria, transcurre un periodo de 4 a 11 das entre la
infeccin de la mucosa y la viremia inicial. La viremia es detectable durante casi
8 a 12 semanas. En este periodo el virus se disemina ampliamente a todo el
cuerpo y se siembra en los rganos linfoides. En muchos pacientes (50-75%)
se puede desarrollar un sndrome parecido a la mononucleosis, de 3 a 6
semanas despus de la infeccin primaria. En este periodo inicial hay una
disminucin de las clulas T CD4 circulantes. Una semana a tres meses
despus de la infeccin aparece una respuesta inmunitaria al VIH, la viremia

23

plasmtica disminuye y se restablece la concentracin de clulas T CD4. Sin
embargo esta respuesta inmune es incapaz de liberar al husped por completo
de la infeccin y las clulas infectadas por el VIH persisten en los ganglios
linfticos.
En la primera etapa, pocas semanas despus de la infeccin, muchas
personas presentan un cuadro agudo similar a una gripe o a una
mononucleosis de curso limitado, que dura una o dos semanas. Despus de
ese lapso, en la segunda etapa de la infeccin 135 personas infectadas pueden
permanecer asintomticas por meses o aos. En esta etapa asintomtica, el
virus contina replicando, pero se encuentra controlado por los anticuerpos
circulantes y las clulas citotxicas, en un estado de equilibrio. La carga viral
despus de la etapa aguda se estabiliza, aunque con ciertas oscilaciones, entre
0.000 o 100.000 copias de RNA/ml.

A este valor se lo denomina set point. No todos los individuos infectados tienen
el mismo set point. Lo que es caracterstico de esta etapa esta disminucin
lenta, pero continua y progresiva, de los linfocitos CD4 (colaboradores o helper).
La tercera etapa o SIDA comienza cuando se observa una drstica reduccin
de los linfocitos CD4 acompaada por un aumento de la carga viral y 13
apariciones de infecciones oportunistas (10) que, debido a la severa
inmunodepresin, sin terapia, terminan causando la muerte de los enfermos en
la mayora de los casos. La duracin de esta etapa depende en parte del
tratamiento antiviral que se les proporcione a los enfermos.


24

Los linfocitos T CD4 son los principales productores del virus parecen tener
una gran tasa de recambio. Una vez infectados los linfocitos tienen una vida
media de 1,6 das. Con el tiempo el paciente desarrollar sntomas generales y
enfermedad clnica aparente manifestadas por infecciones oportunistas o
neoplasias. Con frecuencia la evolucin del SIDA se acompaa de un cambio
en las cepas monocito o macrofagotrficas (M-trficas) del virus VHI-1 hacia las
variantes linfocitotrficas (T-trficas).
La caracterstica fundamental de las infecciones por VIH es la disminucin de
linfocitos inductores de clulas T cooperadoras, el resultado de la replicacin
del VIH en esta poblacin de linfocitos, as como de muerte clulas T no
infectadas por mecanismos indirectos. Al principio de la infeccin, los aislados
del VIH son M-trficos, conforme avanza la infeccin, son sustituidos por los
virus T-trficos.


25

DATOS CLINICOS
En general:
El trmino SIDA es con frecuencia mal empleado, ya que la infeccin a causa
del VIH se caracteriza por una amplia variedad de fases clnicas, con sus
respectivas manifestaciones, una de las cuales es la del SIDA, que representa
el estadio final de esta infeccin. El sida se caracteriza por una evidente
neoplasias pocos comunes (en especial el sarcoma de Kaposi) o una gran
variedad de infecciones oportunistas.

Las fases clnicas de la infeccin-enfermedad por VIH/SIDA son:
1. Infeccin aguda retroviral o retrovirosis aguda
2. Perodo de portador asintomtico
3. Fase de complejo relacionado con el SIDA
4. Fase de caso SIDA
De todas estas, conviene detallar fundamentalmente la primera.

Fase de infeccin aguda retroviral
Se corresponde con la llegada del virus al sujeto y se caracteriza, desde el
punto de vista clnico, por 2 situaciones:
Puede ser asintomtica, como ocurre en la mayora de los pacientes.
O sintomtica, en cuyo caso el cuadro clnico presenta sntomas muy variados,
a saber:
a) Sntomas generales: fiebre, faringitis, linfadenopatas (cuadro parecido al de
la mononucleosis infecciosa), artralgias, mialgias, anorexia y prdida de peso.
b) Sntomas dermatolgicos: erupcin eritematosa maculopapular, urticaria
difusa y alopecia
c) Sntomas gastrointestinales: nuseas, vmitos, diarrea y ulceraciones
mucocutneas
d) Sntomas neurolgicos: cefalea, dolor retroorbitario, meningoencefalitis,
neuropata perifrica, radiculitis y sndrome de Guillain-Barr.

26

En su mayora, como son manifestaciones tan inespecficas, es frecuente que
mdicos y pacientes no les concedan importancia y a su vez se dificulte
determinar con exactitud la frecuencia de este cuadro clnico agudo; no
obstante, en diferentes estudios se describen como las ms comunes: la fiebre
asociada a fatiga, la erupcin eritematosa maculopapular y el sndrome adnico
parecido al de la mononucleosis infecciosa. De forma general, estos sntomas
se manifiestan aproximadamente durante 6 a 8 semanas y no requieren
tratamiento especfico, solo sintomtico. Mientras ms sintomtica y duradera
sea esta fase, peor pronstico tendr la evolucin clnica del paciente,
caracterizada por una gran viremia inicial, con destruccin de las clulas del
sistema inmunolgico y disminucin transitoria de su nmero. Lentamente se
produce una respuesta inmune contra el virus, por lo que se reduce el volumen
de partculas virales en la sangre, pero contina su replicacin en los rganos
linfticos (sobre todo en ganglios linfticos y bazo, que constituyen el principal
reservorio del virus); o sea, la respuesta inmune inicial no basta para eliminar el
virus. Durante esta etapa existe el inconveniente de que el resultado de la
serologa del VIH es negativo, aunque los antgenos virales sean positivos.

Fase o perodo de portador asintomtico
Despus de la primera, el paciente pasa a la fase ms larga de la enfermedad:
la de portador asintomtico, que en nuestro pas tiene una duracin promedio
de 11,5 aos, aunque los nuevos tratamientos la han ido prolongando. El
enfermo puede estar asintomtico por completo o presentar un sndrome
adnico, con las siguientes caractersticas: ms de 3 meses de evolucin,
ganglios firmes pero no leosos, mviles e indoloros, sin cambios en la piel que
los recubre y ubicados en 2 ms regiones contiguas.
Comnmente se excluyen las adenopatas de localizacin inguinal, por la
diversidad de causas que las producen; pero cuando son de gran tamao,
deben evaluarse junto con las de otras regiones y tenerlas en cuenta, sobre
todo en individuos con factores de riesgo para ser infectados por el VIH. Se
denomina linfadenopata generalizada persistente y de manera general se
considera como un esfuerzo o lucha del sistema inmunolgico para vencer la
infeccin.
Puede o no haber esplenomegalia. Estos pacientes, aunque asintomticos,
representan un gran problema epidemiolgico, ya que a travs de relaciones
sexuales desprotegidas trasmiten la enfermedad e infectan a nuevas personas.
A pesar de ello prosigue la replicacin del virus, aunque muy baja, por lo cual

27

no hay tal estado de latencia o de no replicacin; esto se asocia con altos
ttulos de anticuerpos, por lo que el diagnstico en dicha fase es serolgico.

Fase de complejo relacionado con el SIDA
A medida que pasan los aos y progresa la enfermedad, le sigue la fase
conocida como complejo relacionado con el SIDA, que representa una fase
intermedia entre el portador asintomtico y la de caso SIDA o final. Aparecen
los primeros sntomas o se presentan enfermedades relacionadas con una
inmunodeficiencia subyacente, por lo que estos pacientes ya no estarn como
en la fase anterior, pero los problemas sern menos graves que en la siguiente.
Esta fase se conoce tambin como SIDA menor o presida y clnicamente se
reconoce por distintos sntomas:

- Generales: malestar general, astenia persistente, sndrome febril prolongado y
prdidade peso
- Hematolgicos: anemia y trombocitopenia (con sndrome purprico o sin l)
- Linfadenopticos: con las caractersticas descrltas anteriormente
- Respiratorios: tos seca persistente
- Digestivos: diarrea
- Dermatolgicos: candidiasis oral (heraldo), dermatitis seborreica, herpes
simple recurrente (anal o genital), herpes zoster y verrugas genitales
- Neurolgicos: polineuropata, sndrome ansioso- depresivo y meningitis
asptica.
La duracin de esta fase depende de factores como:
Tipo de cepa viral infectante
Respuesta inmunolgica del husped
Tratamiento impuesto, tanto antirretroviral como de cada una de las
situaciones clnicas.
Tratamiento inmunomodulador (factor de transferencia e interfern).

28

Durante esta fase hay tendencia al aumento progresivo de la replicacin viral y
a una disminucin de las funciones inmunes del organismo.

Fase SIDA o caso SIDA
Es el estadio final de la infeccin por VIH y se caracteriza por la aparicin de
infecciones oportunistas y tumores raros. Desde el punto de vista inmunolgico
representa una grave inmunodepresin, con una deplecin notable del nmero
de linfocitos CD4, cuya importante participacin en la respuesta inmune es bien
conocida. Hay una aIta replicacin viral, favorecida por la debilidad del sistema
inmunolgico.
Clnicamente se considera que un paciente es un posible caso SIDA cuando
tenga alguna de las afecciones relacionadas en la fisiopatologa, las que se han
extendido con el tiempo a medida que los centros para el control de
enfermedades van informando una alta incidencia de una determinada
enfermedad asociada a la infeccin por el VIH. Suele ser frecuente que un
enfermo en esta fase padezca varias afecciones indicadoras de SIDA.
Actualmente, adems de las enfermedades indicadoras de SIDA, tambin se
ha incluido para el informe de caso SIDA a pacientes con recuento de clulas
CD4 < de 200 por mm3, con independencia del estado clnico en que se
encuentren. Esto se conoce como SIDA inmunolgico. Otros autores 15, 16
clasifican la infeccin por VIH desde el punto de vista clnico en las 3 fases
siguientes:
Fase precoz o aguda
Fase intermedia o crnica
Fase final o de crisis.
En cada una de ellas se describen los mismos elementos clnicos ya citados.
Es evidente que la primera es la que mejor nos ubica en la evolucin natural de
la enfermedad.

Las personas que estn infectados con VIH y que han desarrollado la fase
SIDA, pasan por dos estados a nivel neurolgico con manifestaciones clnicas:
1. No neurolgicas y 2. Neurolgicas.


29

Las manifestaciones No Neurolgicas, se presentan en un 30% de las
personas infectadas por VIH-SIDA y experimentan un sndrome seudoagripal
entre 3 a 6 semanas despus de ser infectadas, la mayora no nota ningn
sntoma inmediatamente o poco despus de la infeccin. Cuando los sntomas
aparecer, el sndrome pseudoagripal incluyen fiebre, mialgias, cefaleas, fatiga,
sntomas gastrointestinales y en ocasiones, erupciones cutneas, el sndrome
puede ir acompaado de esplenomegalia y linfadenopata. En raras ocasiones
se desarrolla una meningitis aguda asptica poco despus de la infeccin,
como ocurre en la encefalopata o en el sndrome de Guillain-Barr.
La infeccin que ms afecta a los pacientes con SIDA, es la neumona por
Pneumocystis carinii caracterizada por una tos crnica, no productiva y disnea
que a veces es lo bastante grave como para producir hipoxemia y sus
consecuentes efectos cognoscitivos. Otra enfermedad que inicialmente se
asocio con el desarrollo del SIDA es el sarcoma de Kaposi, una lesin antes
muy poco frecuente, que produce manchas de color azul prpura. Otras
enfermedades comunes son protozoos (Toxoplasma gondii), por hongos
(Candida albicans) bacterias y virus.

Las manifestaciones neurolgicas son las que pueden afectar a un paciente
afectado por VIH-SIDA. La enfermedad ms importante que los trabajadores de
salud mental deben tener en cuenta es la encefalopata por VIH que en un
momento se denomin complejo demencia-SIDA, que se asocia con el
desarrollo de un tipo de demencia subcortical que puede afectar, en distinto
grado, al 50% de los pacientes infectados por VIH-SIDA. Tambin hay que
considerar otras enfermedades y complicaciones del tratamiento en el
diagnostico diferencial de un paciente infectado por VIH con sntomas
neuropsiquitricos. Sntomas tales como fotofobia, cefalea, rigidez de nuca,
debilidad motora, prdida sensorial y cambios a nivel de la conciencia y
conducta. La infeccin del SNC tambin puede producir una variedad de
neuropatas perifricas que deberan ser un indicio para que los clnicos de
salud mental consideren la extensin de las complicaciones en el SNC.

Infecciones por oportunistas
Las causas predominantes de morbilidad y de mortalidad en personas en fase
tarda de la infeccin por VIH son las infeccione por oportunistas, es decir,
cuadros graves inducidos por agente que rara vez causan una enfermedad
importante en la personas inmunocompetente. Las infecciones antes
mencionadas por lo comn no aparecen en sujetos infectados por VIH hasta

30

que el numero de linfocitos T CD4 ha disminuido del nivel normal de 1 000
clulas/l, a menos de 200 clulas.
Conforme se han creado tratamientos contra algunos de los patogenos
oportunistas ms comunes y la atencin de los enfermos de SIDA permite que
sobrevivan mayor tiempo, ha cambiado el espectro de infecciones por
oportunistas.

Las infecciones ms comunes por oportunistas en enfermos de SIDA no
tratados incluyen las causadas por:
1. Protozoos: especies de Toxoplasma gondii, Isospora belli,
Cryptosporidium.
2. Hongos: Candida albicans, Cryptococcus neoformans, Coccidioides immitis,
Histoplasma capsulatum, Pneumocystis jiroveci.
3. Bacterias: especies de Mycobacterium avium-intracellulare,
M. tuberculosis, Listeria monocytogenes, Nocardia asteroides,
Salmonella y Streptococcus.
4. Virus: citomegalico, del herpes simple, de varicela-zoster, adenovirus, de
poliomavirus JC, de hepatitis B y C. Las infecciones por herpesvirus son
frecuentes en enfermos de SIDA y a menudo se detectan en la saliva mltiples
partculas de ese tipo. La retinitis por virus citomegalico es la complicacin
ocular ms comn y grave del sndrome de inmunodeficiencia adquirida.

VI. INMUNIDAD

Las personas infectadas por VIH generan respuestas mediadas clulas y de tipo
humoral contra los antgenos propios del virus. Poco despus de la infeccin
aparecen los anticuerpos contra diversos antgenos frecuentes en esas
partculas Innumerables individuos infectados sintetizan anticuerpos
neutralizantes contra VIH, dirigidos contra la Glucoprotenas de la cubierta.

Sin embargo, son pequeos los niveles de su actividad neutralizante y muchos
de los anticuerpos contra la cubierta no poseen tal accin. Se piensa que la
glucosilacion densa puede inhibir la unin del anticuerpo neutralizante a la
protena de la cubierta; la Glucoprotenas de la cubierta muestra enorme

31

variabilidad en sus secuencias, y dicha variacin natural permite la evolucin de
poblaciones sucesivas de virus resistentes que no son reconocidos por los
anticuerpos neutralizantes existentes.

Los anticuerpos neutralizantes se miden in vitro al inhibir la infeccin del VIH, de
las lneas de linfocitos susceptibles. La infeccin por los virus se cuantifica por
medio de:

1) la tcnica de transcriptasa inversa que mide la actividad enzimtica de las
partculas VIH liberadas

2) el mtodo de inmunofluorescencia indirecta, que mide el porcentaje de
clulas infectadas

3) la reaccin en cadena de polimerasa-transcriptasa inversa (RT-PCR,reverse
transcriptase polymerase chain reaction) o tcnicas de amplificacin del DNA de
cadena ramificada (bDNA), que miden los cidos nucleicos del virus de
inmunodeficiencia humana.

Surgen respuestas de tipo celular dirigidas contra las protenas de virus de
inmunodeficiencia humana. Los linfocitos D citotxicos (CTL, cytotoxic T
lymphocytes) reconocen los productos de los genes env, pol, gag, y nef y dicha
reactividad es mediada por linfocitos CD3-CD8 con restriccin de complejo de
histocompatibilidad mayor.

VII. DIAGNSTICO

La infeccin por VIH se detecta por tres mtodos:

1) Aislamiento del virus.

2) Cuantificacin serolgica de anticuerpos contra el virus.

3) Medicin del cido nucleico o los antgenos del virus.

A. Aislamiento del virus

El VIH se cultiva de los linfocitos de la sangre perifrica (y a veces de muestras
de otros sitios). El nmero de linfocitos infectados circulantes vara con la etapa
de la enfermedad. En el plasma y en las clulas sanguneas perifricas de

32

enfermos de SIDA se identifican grandes nmeros de virus, en comparacin con
lo observado con personas asintomticas. La magnitud de la viremia al parecer
constituye una correlacin mejor de la etapa clnica de la infeccin que la misma
presencia de anticuerpos. La tcnica de aislamiento ms sensible es cultivar
conjuntamente la muestra problema con mononucleares de sangre perifrica,
estimulados por un mitogeno y no infectados. Las partculas de VIH primaria
tienen una proliferacin muy lenta en comparacin con las cepas adaptadas en
el laboratorio. La proliferacin de los virus se detecta al estudiar los lquidos
sobrenadantes del cultivo despus de siete a 14 das, para que surja la actividad
de transcriptasa inversa o los antgenos especficos del virus (p24).

La gran mayora de sujetos con anticuerpos contra VIH-1 (positividad) tendrn el
virus, que se puede cultivar de sus clulas sanguneas. Sin embargo, las
tcnicas de aislamiento son lentas y laboriosas y se circunscriben a estudios de
investigacin.

Las tcnicas de amplificacin por PCR se utilizan ms a menudo para identificar
el virus en muestras clnicas.

B. Serologa

En el comercio se consiguen equipos de prueba para medir anticuerpos, con la
tcnica de enzimoinmunoanalisis (EIA, enzyme-linked immunoassay). Los
mtodos en cuestin, si se practican de manera apropiada, poseen sensibilidad
y especificidad mayores del 98%. Cuando se usan los mtodos basados en EIA
para el cribado de poblaciones con una pequea prevalencia de infecciones por
VIH (como los donadores de sangre), al surgir una prueba positiva en una
muestra de suero habr que repetirla para mayor confirmacin.

Si la nueva prueba EIA es reactiva, se realizara una prueba confirmatoria para
descartar resultados positivos falsos. La tcnica ms usada para la confirmacin
es la inmunotransferencia en que se detectan protenas de pesos moleculares
especficos, propias de virus de inmunodeficiencia humana.

Ms a menudo se identifican anticuerpos contra la protena p24 del centro de la
partcula o las Glucoprotenas gp41, gp120 o gp160 de la cubierta.
El perfil de respuestas contra antgenos especficos del virus cambia con el
transcurso del tiempo y la evolucin clnica hasta llegar al sndrome de
inmunodeficiencia adquirida. Se conserva el nivel de anticuerpos contra las
Glucoprotenas de la cubierta (gp41, gp120, gp160), pero disminuyen las
dirigidas contra las protenas Gag (p17, p24, p55). La disminucin del nivel del

33

anticuerpo contra p24 puede ser el signo que anticipe el comienzo de los signos
clnicos y otros marcadores inmunitarios de la evolucin.

En laboratorios que no cuentan con los medios para practicar EIA y en
situaciones en que es imposible esperar los resultados de pruebas, se recurre a
mtodos sencillos y rpidos para detectar anticuerpos contra virus de
inmunodeficiencia humana. Tales mtodos se realizan en sangre o lquidos de la
boca y se basan en principios como las reacciones de aglutinacin de partculas
o inmunomanchas. Son mtodos rpidos que detectan anticuerpos contra VIH
en muestras de sangre completa en las que no se necesita preparacin. Se
pueden realizar fuera de los laboratorios corrientes.

Se cuenta tambin con equipo para estudios en el hogar. La tcnica comprende
la colocacin de gotas de sangre despus de un pinchazo de la yema de un
dedo en una tarjeta tratada especialmente; esta ltima es enviada a un
laboratorio autorizado, para practicar las pruebas.

La mediana de lapso hasta la seroconversin despus de infeccin por VIH es
de tres a cuatro semanas. Casi todas las personas mostraran anticuerpos
detectables en un plazo de seis a 12 semanas despus de la infeccin y
prcticamente todos los sujetos presentaran positividad en trminos de seis
meses. Muy pocas veces la infeccin por VIH dura ms de seis meses sin que
surja una respuesta detectable de anticuerpos.


34

Se han ensayado numerosas fases slidas, desde los tubos de cristal de los
orgenes a las actuales microplacas de 96 pocillos de plstico tratado para
aumentar su capacidad de adsorcin (en su superficie) de molculas y con
fondos de pocillo pticamente claros para poder realizar las medidas de
densidad ptica en instrumentos especficos, espectrofotmetros de lectura de
placas que han recibido el nombre de lectores ELISA. Actualmente se estn
desarrollando dispositivos de mayor capacidad, por ejemplo con 384 y 1536
pocillos, adecuados para los sistemas de 'screening' masivo de los sistemas
robotizados (HTS, 'High-throughput system')

Los lectores ELISA son espectrofotmetros capaces de realizar lecturas
seriadas de cada uno de los pocillos de la placa ELISA. A diferencia de un
espectrofotmetro convencional, con capacidad de leer todas las longitudes de
onda del ultravioleta y el visible de manera continua, los lectores de ELISA
disponen de sistemas de filtros que slo permiten la lectura de una o pocas
longitudes de onda. Son la que se corresponden con las necesarias para
determinar la densidad ptica de los cromgenos ms comnmente utilizados.
El ELISA es sensible razonablemente especfico; aunque es muy improbable
que de un falso negativo, puede dar falsos positivos. Por esta razn, los
resultados positivos se confirman usando a prueba de Wester Blot, ms cara y
laboriosa pero ms sensible y especifica. Seroconversin es el cambio, despus
de la infeccin por VIH de un test de anticuerpo VIH negativo a un resultado
positivo. Lo seroconversin suele producirse entre 6 a 12 semanas despus de
la infeccin, aunque en casos raros la seroconversin puede tardar de 6 a 12
meses.

35

El Western blot, o inmunoblot, es una tcnica analtica usada para
detectar protenas especficas en una muestra determinada (una mezcla
compleja de protenas, como un extracto tisular). Mediante una electroforesis
en gel se separan las protenas atendiendo al criterio que se desee: peso
molecular, estructura, hidrofobicidad, etc. Hay casi tantas posibilidades
como tipos de electroforesis existen. Luego son transferidas a una membrana
adsorbente (tpicamente de nitrocelulosa o de PVDF) para poder buscar la
protena de inters con anticuerpos especficos contra ella.
Finalmente, se detecta la unin antgeno-anticuerpo por actividad
enzimtica, fluorescencia entre otros mtodos. De esta forma se puede
estudiar la presencia de la protena en el extracto y analizar su cantidad relativa
respecto a otras protenas.
Esta tcnica es hoy en da imprescindible en varios campos de la biologa,
como la biologa molecular, la bioqumica, la biotecnologa o lainmunologa.
Existe toda una industria especializada en la venta de anticuerpos
(monoclonales y policlonales) contra decenas de miles de protenas diferentes.
El Western blot fue desarrollado en el laboratorio de George Stark, en
la Universidad de Stanford. El nombre (Western, occidental en ingls) le fue
dado por W. Neal Burnette, y consiste en un juego de palabras con una tcnica
anloga pero que usa DNA, el Southern (sureo) blot, que en este caso debe
su nombre a su descubridor, Edwin Southern. Otras tcnicas que fueron
nombradas siguiendo este criterio son el Northern blot (en el que se separa e
identifica RNA), el Eastern blot, el Southwestern blot.

C. Deteccin de cidos nucleicos o antgenos

Para detectar RNA viral en muestras de seres humanos a menudo se utilizan
tcnicas de amplificacin como RT-PCR, PCR de DNA y bDNA. El mtodo de
RT-PCR utiliza enzimas para amplificar el RNA del VIH; la tcnica de bDNA
amplifica RNA del virus por mtodos de hibridacin seriada de oligonucletidos.

Las tcnicas son cuantitativas y se utilizan estndares de referencia; con cada
una es necesario incluir testigos positivos y negativos apropiados. Los mtodos
de ndole molecular mencionados son muy sensibles y constituyen la base para
las cuantificaciones del nmero de virus en plasma. La heterogeneidad de las
secuencias de VIH puede menoscabar la sensibilidad de estas tcnicas para
detectar infecciones por virus de inmunodeficiencia humana. Marcadores de

36

prediccin importantes son los niveles de RNA del VIH, que sealan la evolucin
de la enfermedad y constituyen medios tiles para vigilar la eficacia de las
terapias antivirales.

El diagnstico temprano de infeccin por VIH en hijos de madres infectadas se
practica por medio de tcnicas de deteccin del RNA del VIH-1 plasmtico. La
presencia de anticuerpos de la madre hace que no sean tiles los estudios
serolgicos.

Poco despus de la infeccin se detecta por medio de EIA en plasma, niveles
pequeos del antgeno p24 del VIH-1 circulante. El antgeno a menudo no se
detecta despus de que aparecen los anticuerpos (porque la protena p24 forma
complejos con los anticuerpos contra ella), pero a veces reaparece en etapa
Tarda de la infeccin y tal signo conlleva mal pronstico.


37

VIII. BIBLIOGRAFIA

Jawetz, Melnick & Adelberg , Microbiologa Mdica,. Editorial Mc Graw Hill - Mxico, D.F.
25
a
Edicin - Ao

2010.

Murray, P., Rosenthal, K. & Pfaller, M. Microbiologa Mdica. Editorial Gea Consultora-Espaa.
2008

http://gtt-vih.org/book/print/1781

Delgado, Rafael
Publicado en Enferm Infecc Microbiol Clin.2011; 29 :58-65 - vol.29 nm 01

Monografía

Transféré par

Informations du document

Titre original

Copyright

Formats disponibles

Partager ce document

Partager ou intégrer le document

Options de partage

Avez-vous trouvé ce document utile ?

Ce contenu est-il inapproprié ?

Droits d'auteur :

Formats disponibles

Monografía

Transféré par

Droits d'auteur :

Formats disponibles

MICROBIOLOGIA MDICA VIRUS DE INMUNODEFICIENCIA HUMANA (VIH)

Vous aimerez peut-être aussi