BIOLOGIA MOLECULAR DEL

GLOBULO ROJO
Lic. TM. Hctor Herrera Reynoso
Esp.: Citogentica y Biologa Molecular
Los genes codifican protenas
- Secuencias de nucletidos que contienen
informacin para codificar una protena.
Gen 1 Gen 2 Gen 3
Protena 1 Protena 2 Protena 3
ADN: material gentico
Molcula bicatenaria
superenrrollada con
protenas cidas
(Histonas).
Conforma genes:
secciones de ADN
que codifican
protenas y ARN.
Slo 5% de ADN
humano: codifica
protenas.
El ADN como material Gentico
El ADN como material Gentico
Estructura del ADN
Estructura del ADN
Bases Nitrogenadas
La formacin de nucletidos de DNA
Fosfato + desoxirribosa + base nitrogenada + nucletido
5
1
Estructura Primaria del ADN
Estructura Secundaria del ADN
Interacciones dbiles
Replicacin del ADN
Esquema de la replicacin del ADN
primer RNA SSB
topoisomerasas
helicasas
Direccin del
desenrrollamiento
DNA Pol:
(replic)
(reparacin)
(replic
mtDNA)
(replic)
(reparacin)


topo II
(girasa)
*
*
Cadena discontnua
Cadena contnua
SSB
Componentes de la replicacin
Transcripcin
(DNA RNA)
Transcripcin
Sitio de inicio de
la transcripcin (eucariotes)
Expresin regulada
Caja
CAAT
Expresin basal
Gen
estructural
-100 -30
Elementos proximales
Caja GC
Ensamblaje del
complejo de iniciacin
de RNA Pol II:
(TBP y TAFs)
TFIIA
A) Reconocimiento del
promotor por TBP
B) Estabilizacin con
ayuda de TFIIB
C) Reclutamiento de
Holoenzima RNA
Pol II + TFs
Continuacin
D) Unin de complejos,
TFIIH fosforila a
RNA Pol II.
E) Inicio de la transcrip-
cin, separacin de TFs.
Organizacin Genmica y Flujo de Informacin Gentica
Procesamiento del precursor-mRNA
Transcripcin primaria de hnRNA
(exones +intrones)
mRNA traducida a protenas
Modificaciones:
CAP: (5-m7G)
Splicing: empalme de exones
Poly (A) en extremo 3
Splicing (empalme)
Genes eucariotes en forma de mosaico
Exn: secuencia codante
Intrn: secuencia interruptora, reguladora
Transcripcin de unidad completa
(exn+intrn)= hnRNA transcripto primario
Eliminacin de intrones dentro del ncleo
Spliceosome (empalmosoma) complejo de
protenas y RNAs (snRNP)
Transporte al citoplasma solo como mRNA
Mecanismo de Empalme (splicing)
U1
U5
5 3
U2
U6
U4
U2
3
3
snRNP(U1,
U2,U4,
U5,U6)
(proteinas)
Splicing o procesamiento de corte y empalme
poli(A)
Pol
seal
endonucleasa
RNAPol II
Transcripcin:
1- Iniciacin: Una ARN-polimerasa comienza la sntesis del precursor del ARN a
partir de unas seales de iniciacin "secuencias de consenso " que se encuentran
en el ADN.
T A C G A A C C G T T G C A C A T C
A U G C U U G G C A A C G U G
ARNpolimerasa
Transcripcin:
2. Alargamiento: La sntesis de la cadena contina en direccin 5'3'. Despus
de 30 nucletidos se le aade al ARN una cabeza (caperuza o lder) de
metil-GTP en el extremo 5 con funcin protectora.
T A C G A A C C G T T G C A C A T C
A U G C U U G G C A A C G U G
m-GTP
ARNpolimerasa
Transcripcin:
3- Finalizacin: Una vez que la enzima (ARN polimerasa) llega a la regin
terminadora del gen finaliza la sntesis del ARN. Entonces, una poliA-polimerasa
aade una serie de nucletidos con adenina, la cola poliA, y el ARN, llamado
ahora ARNm precursor, se libera.
poliA-polimerasa
A U G C U C G U G U A G A A A A A m-GTP
ARNm precursor
4. Maduracin (cont.): El ARNmprecursor contiene tanto exones como intrones. Se
trata, por lo tanto, de un ARNmno apto para que la informacin que contiene sea
traducida y se sintetice la correspondiente molcula proteica. En el proceso de
maduracin un sistema enzimtico reconoce, corta y retira los intrones y las
ARN-ligasas unen los exones, formndose el ARNm maduro.
cola
Cabeza
ARNm
precursor
ARNm
maduro
AAAAAA
AUG
UAG
Maduracin del ARNm (Visin de conjunto).
Regin codificadora del gen
Promotor E1 I1 E2 I2 E3 Terminador
ADN
ATC
TAC
cola
Cabeza E1 I1 E2 I2 E3
ARNm
precursor
AAAAAA
AUG
UAG
Cabeza
cola
ARNm
maduro
AAAAAA
AUG
UAG
Los ribosomas estn adosados
a la membrana del retculo
endoplsmico rugoso
La replicacin o duplicacin
y la transcripcin ocurren en
el ncleo
La traduccin ocurre
en el citoplasma
ARN de transferencia
ARN de transferencia activado:
cargado con el aminocido
correspondiente
ARN de transferencia activado:
cargado con el aminocido
correspondiente
ANTICODON
TRADUCCIN
ARN --- Protena
TRADUCCIN
ARN --- Protena
Ribosoma
CODIGO
GENETICO
ARNm
CODIGO
GENETICO
ARNm
Iniciacin: La subunidad pequea del ribosoma se une a la regin lder del ARNm y el
ARNm se desplaza hasta llegar al codn AUG, que codifica el principio de la protena. Se les
une entonces el complejo formado por el ARNt-metionina (Met). La unin se produce entre el
codn del ARNm y el anticodn del ARNt que transporta la metionina (Met).
ARNt
Anticodn
Codn
Subunidad menor del ribosoma
P A
A U G C A A
U A C
3
AAAAAAAAAAA 5
U G C U U A C G A U A G
ARNm
M
e
t
(i)
1er aminocido
Elongacin I: A continuacin se une la subunidad mayor a la menor completndose el
ribosoma. El complejo ARNt-aminocido
2
, la glutamima (Gln) [ARNt-Gln] se sita enfrente del
codn correspondiente (CAA). La regin del ribosoma a la que se une el complejo ARNt-Gln
se le llama regin aminoacil (A).
M
e
t
Subunidad menor del ribosoma
P A
A U G C A A
U A C
3
AAAAAAAAAAA
5
G
l
n
G U U
U G C U U A C G A U A G
(i)
Elongacin II: Se forma el enlace peptdico entre el grupo carboxilo de la metionina (Met) y
el grupo amino del segundo aminocido, la glutamina (Gln).
P A
A U G C A A
U A C
ARNm
3
AAAAAAAAAAA
5
G
l
n
-
M
e
t
G U U
U G C
U U A C G A U A G
Elongacin III: El ARNt del primer aminocido, la metionina (Met) se libera.
P A
A U G C A A
5
U

A

C
G
l
n
-
M
e
t
G U U
U G C
U U A C G A U A G
ARNm
3
AAAAAAAAAAA
Elongacin IV: El ARNm se traslada, de tal manera que el complejo ARNt-Gln-Met queda
en la regin peptidil del ribosoma, quedando ahora la regin aminoacil (A) libre para la
entrada del complejo ARNt-aa
3
P A
A U G C A A
G
l
n
-
M
e
t
G U U
U G C U G C U U A C G A U A G
ARNm
AAAAAAAAAAA
3
5
Elongacin V: Entrada en la posicin correspondiente a la regin aminoacil (A) del
complejo ARNt-Cys, correspondiente al tercer aminocido, la cistena (Cys).
P A
A U G C A A
G
l
n
-
M
e
t
G U U
U G C U G C U U A C G A U A G
ARNm
3
AAAAAAAAAAA
5
A C G
C
y
s
Elongacin VI: Unin del pptido Met-Gln (Metionina-Glutamina) a la cistena (Cys).
P A
A U G C A A
G U U
U G C U G C U U A C G A U A G
ARNm
3
AAAAAAAAAAA
5
A C G
C
y
s
-
G
l
n
-
M
e
t
Elongacin VII: Se libera el ARNt correspondiente al segundo aminocido, la glutamina
(Glu).
P A
A U G C A A
U G C U G C U U A C G A U A G
ARNm
3
AAAAAAAAAAA
5
G

U

U
A C G
C
y
s
-
G
l
n
-
M
e
t
(i)
Elongacin VIII: El ARNm corre hacia la otra posicin, quedando el complejo ARN
t3
-Cys-
Glu-Met en la regin peptidil del ribosoma.
P A
A U G C A A
U G C U G C U U A C G A U A G
ARNm
3
AAAAAAAAAAA
5
A C G
C
y
s
-
G
l
n
-
M
e
t
Elongacin IX: Entrada del complejo ARNt-Leu correspondiente al 4 aminocido, la
leucina.
P A
A U G C A A
U G C U G C U U A C G A U A G
ARNm
3
AAAAAAAAAAA
5
A C G
C
y
s
-
G
l
n
-
M
e
t
A A U
Leu
Elongacin X: Este se sita en la regin aminoacil (A).
P A
A U G C A A
U G C U G C U U A C G A U A G
ARNm
3
AAAAAAAAAAA
5
A C G
C
y
s
-
G
l
n
-
M
e
t
A A U
L
e
u
Elongacin XI: Unin del pptido Met-Gln-Cys con el 4 aminocido, la leucina (Leu).
Liberacin del ARNt de la leucina. El ARNm se desplaza a la 5 posicin
P A
A U G C A A
U G C U G C U U A C G A U A G
ARNm
3
AAAAAAAAAAA
5
A

C

G
A A U
L
e
u
-
C
y
s
-
G
l
n
-
M
e
t
Elongacin XII: Entrada del ARNt de la leucina, el 5 aminocido, la arginina (ARNt-Arg).
P A
A U G C A A
U G C U G C U U A C G A U A G
ARNm
3
AAAAAAAAAAA
5
A A U
L
e
u
-
C
y
s
-
G
l
n
-
M
e
t
G C U
A
r
g
Elongacin XIII: Unin del pptido Met-Gln-Cys-Leu con el 5 aminocido, la
arginina (Arg). Liberacin del ARNt de la leucina (Leu). El ARNm se desplaza a la
6 posicin, se trata del un codn de finalizacin o de stop.
AAAAAAAAAAA
P A
A U G C A A
ARNm
U G C
U U A C G A U A G
3
5
A

A

U
G C U
Arg-Leu-Cys-Gln-Met
Finalizacin I: Liberacin del pptido o protena. Las subunidades del ribosoma se disocian
y se separan del ARNm.
AAAAAAAAAAA
P A
A U G C A A
ARNm
U G C
U U A C G A U A G
3
5
G C U
A

A

U
Arg-Leu-Cys-Gln-Met
Finalizacin II: Despus unos minutos los ARNm son digeridos por las enzimas del
hialoplasma.
AAAAAAAAAAA
ARNm
3
5
A U G C A A U G C U U A C G A U A G
(i)
DOGMA CENTRAL DE LA BIOLOGA MOLECULAR
DOGMA CENTRAL DE LA BIOLOGA MOLECULAR
Hebra molde
Hebra molde
Transcripcin
Transcripcin
Traduccin
Traduccin
Muchas protenas tienen que sufrir
modificaciones post-traduccionales
La cadena polipeptdica liberada, para ser funcional:
1. Debe plegarse para formar la estructura terciara (o
cuaternaria) correcta.
2. Algunas han de sufrir modificaciones qumicas
postraduccionales como formacin de puentes disulfuros,
hidroxilaciones, glucosilaciones, acetilacin, etc.
3. Han de alcanzar tambin su localizacin final por medio de
pptido seal o secuencias de trnsito: sufrir rupturas
proteolticas especficas.
4. Se recambian si son errneas o si son muy "viejas.
Todos estos pueden ocurrir
secuencialmente, pero habitualmente son
simultneos.
Estructura primaria
(Secuencia lineal)
Residuos de los distintos aminocidos
Estructura secundaria
(forma adoptada espontneamente)
Estructura terciaria
(Forma tridimensional: globular,
tubular, como una rueda, etc.)
Las protenas sufren transformaciones post-traduccionales
Bases Moleculares de la Gentica
Plegamiento de protenas
Chaperonas: asistencia al
plegamiento
El ADN como material Gentico
Plegamiento correcto de las protenas
Asistencia del
plegamiento:
chaperoninas.
Hsp60 y Hsp70
Rearregla cadena
polipeptdica que
expona residuos
apolares.
La cara cis del AG recibe vesculas con protenas inmaduras.
La cara Trans del AG produce vesculas con protenas maduras.
Aparato de golgi
. Apilamiento de vesculas o sacos
membranosos: cisternas.
Empaquetamiento de
macromolculas:
RE ---->Golgi ----> Transporte celular
cis medial trans
Procesador, clasificador y
modificador de protenas: enzimas,
glucoprotenas, protenas de
secrecin, etc.
Cmo se mueven las protenas al AG?
Transporte de vesculas necesita aporte
energtico.
Las vesculas que salen del RER pueden ser
destinadas al AG o a otras organelas asi como al
exterior de la clula.
En el AG (cis) se enlazan grupos de
carbohidratos.
Las subunidades de una protena se enlazan
tambin en AG (cis).
En la cara trans la protena se envuelve en
vacuolas que son exportadas hacia distintos
destinos.
El AG aade
carbohidratos a
las glicoprotenas
MEMBRANA BIOLGICA: MOSAICO
FLUDO
1. Ancladas a lpidos:
Inter. covalentes:
lpidos membrana.
Exo o citoplasmticas
2. Perifricas
Inter. dbiles:
regiones polares
protenas integrales y
cabezas polares.
Intra o extracelular.
Restringe movimiento
de protenas
integrales y
citoesqueleto.
3. Integrales
Unida firmemente a la
membrana.
Disociada con agentes
desnaturalizantes,
solventes orgnicos,
detergentes.
Protenas de membrana
ESTRUCTURA MOLECULAR DE LA MEMBRANA CELULAR
DE LOS GLOGULOS ROJOS
ESTRUCTURA MOLECULAR DE LA MEMBRANA CELULAR
DE LOS GLOGULOS ROJOS
ESTRUCTURA MOLECULAR DE LA MEMBRANA
CELULAR DE LOS GLOBULOS ROJOS
Biologa Molecular del Grupo Sanguneo ABO
. Tres alelos comunes (A,B y O) estn en el locus ABO del cromosoma 9.
Los genes A y B codifican Glucosiltransferasas que producen el Ag A y
B. El gen O no codifica una enzima funcional.
.
Biologa Molecular del Grupo Sanguneo ABO
. Oligosacridos que portan los Ags ABH pueden unirse a cualquier
protena (glicoprotena), esfingolpido (glicoesfingolpido)
lipido (Glicolpido).
Biologa Molecular del Grupo Sanguneo ABO
La glucosiltransferasas A y B adicionan azcares especficos a
las cadenas de oligosacridos que han sido convertidos a H por
la fucosiltransferasa producido por el gen H
Yamamoto y Hakomori mostraron que los genes A y B difieren
en la sustitucin de 7 pb: 4 de estas posicin 176, 235, 266 y
268 de los aas de la transferasas A y B. La s sustituciones 266
y 268 son ms significativas en determinar la especificidad del
azcar, aunque la sustitucin en la posicin 235 tambin tiene
el mismo efecto.
Los alelos A y B que resultan en disminucin expresin de Ags
A y B puede ser producto de mutaciones que originan enzimas
con habilidad reducida para incorporar azcares A y
Una delecin de 1 pb puede formar un gen A2 ocultando al
carboxilo terminal de la secuencia que codifica a la transferasa
A.
La glucosiltransfersa especfica para A2, posee un dominio
extra de 21 aas, este dominio es el responsable para la baja
actividad transferasa y el reconocimiento restringido del
sustrato por estaenzima.
Mapa Genmico de los Grupos Sanguneos
Mapa Genmico de los Grupos Sanguneos
BIENVENIDOS AL PERU
MUCHAS GRACIAS