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o
l
/
m
i
n
)
Figura 26: Demonstrao da atividade CMCase (moL/min) da celulase por diferentes
enzimas utilizadas na empresa Karsten.
Com a utilizao do papel de filtro como substrato possvel analisar a
atividade total, na reao com o papel de filtro e sobrenadante, e a exoglucanase e a -
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glucosidase na reao com o sobrenadante. Porm a atividade endoglucanase tambm
pode ser determinada por este mtodo de forma indireta, tendo o valor total das
atividades e as outras duas das trs atividades possveis para uma celulase se descontam
os valores e se obtm a atividade endoglucanase.
A figura 27 mostra um comparativo das atividades enzimtica dos diferentes
lotes de enzimas e as diferentes atividades determinadas pelo mtodo de papel de filtro.
Na atividade exoglucanase e -glucosidase da Quimilase BP pode se observar um
aumento da atividade de um lote para o outro, variando de 6,7 (UI/mL) no primeiro lote
para 10,9 (UI/mL) no quarto lote. A atividade total dos lotes da Quimilase BP se
manteve constante em todos os lotes. Porm na atividade endoglucanase observa um
decrscimo da atividade entre os lotes que varia de 5,8 para -0,5 (UI/mL).
As enzimas inpalase NCRL e Quimilase combi apresentaram atividades
endoglucanase, exoglucanase, -glucosidase e total baixas quando comparadas com os
lotes Quimilase BP, mais apresentam atividade semelhante aos lotes da Biokey RR4. As
enzimas dos lotes da Biokey RR4 apresentaram grande variao entre as atividades
determinadas pelo mtodo de papel de filtro. Comparando as atividade dos lotes 1 e 3
da Biokey RR4 pode se observar que a atividade total parcialmente igual, com apenas
17 % de variao. Entretanto a atividade endoglucanase maior para o primeiro lote e a
atividade exoglucanase e -glucosidase apresentou maior valor para o terceiro lote. Ao
mesmo tempo no segundo lote da Biokey RR4 as atividades determinadas foram baixas
quando comparadas com o primeiro e o terceiro lote, na atividade endoglucanase teve
uma variao de mais de 70% a diferena na atividade enzimtica, na atividade
exoglucanase e -glucosidase a variao foi de 55% e a atividade total apresentou uma
variao de 62 % de diferena.
35
-1,0
1,0
3,0
5,0
7,0
9,0
11,0
13,0
15,0
Quimilase
BP1
Quimilase
BP2
Quimilase
BP3
Quimilase
BP4
Biokey
RR4 1
(pH 7)
Biokey
RR4 2
(pH 7)
Biokey
RR4 3
(pH 7)
Quimilase
combi
(pH 7)
Inpalase
NCRL
(pH 7)
F
P
A
s
e
(
U
I
/
m
L
)
Atividade exoglucanase e
-glucosidase.
Atividade total
Atividade endoglucanase
Figura 27: Demonstrao da atividade FPAse (UI/mL) da celulase por diferentes enzimas
utilizadas na empresa Karsten.
2.3.2.2. ATIVIDADE DAS AMILASES
A atividade determinada pelo mtodo fornecido pela empresa Clariant,
determina a quantidade de amido hidrolisado pela enzima por hora e mL de enzima,
deste modo pode se definir qual das enzimas apresenta a maior capacidade de retirar a
goma dos tecidos. A figura 28 demonstra as curvas analticas utilizadas para a
determinao do tempo em que cada enzima obteve para alcanar uma absorbncia de
0,25.
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Figura 28: Curvas analticas utilizadas para a determinao do tempo para uma
absorbncia de 0,25.
Pode se observar na figura 29 que a Biokey DSK apresentou maior atividade,
247,80 BAU, comparado com as outras enzimas. J a Quimilase AL AM teve a mais
baixa das atividades, 142,31 BAU. No entanto a Inpalase PE DS apresentou atividade
igual a 203,81 BAU, com valor intermedirio.
Impalase PE DS
y = -0,0212x + 0,7633
R
2
= 0,9894
0
0,2
0,4
0,6
10 12 14 16 18 20 22 24
Tempo (min)
A
b
s
(
6
0
8
n
m
)
Quimilase AL AM
y = -0,0173x + 0,6147
R
2
= 0,9779
0
0,2
0,4
0,6
10 12 14 16 18 20 22 24
Tempo (min)
A
b
s
(
6
0
8
n
m
)
Biokey DSK
y = -0,0164x + 0,4914
R
2
= 0,9265
0
0,1
0,2
0,3
0,4
10 12 14 16 18 20
Tempo (min)
A
b
s
(
6
0
8
m
n
)
37
0
50
100
150
200
250
300
Impalase PE DS Quimilase AL AM Biokey DSK
B
A
U
(
g
d
e
a
m
i
d
o
/
h
.
m
l
d
e
a
m
i
l
a
s
e
)
Figura 29: Demonstrao da atividade da amilase BAU (g de amido / h . ml de amilase)
por diferentes enzimas utilizadas na empresa Karsten.
2.3.2.3. ATIVIDADE DA CATALASE
A atividade da catalase determinada pelo mtodo de medio da absorbncia
(Figura 30), mostrou que os lotes da Biokey 2H apresentou uma grande variao, de
114,36 M H
2
O
2
/mL para 2075,53 M H
2
O
2
/mL, ou seja, o lote dois tem o poder de
proporcionar uma maior degradao de perxido de hidrognio. J as enzimas Invazime
Cat e a Quimipur ENZ tiveram a atividade baixa quando comparada com o segundo lote
da Biokey 2H, mais com pouca variao entre elas (6%). Deste modo pode se dizer que
estas enzimas apresentam uma ao de degradao de H
2
O
2
muito parecidas, a Invazime
Cat tem uma atividade de 369,64 M H
2
O
2
/mL e 230,54 M H
2
O
2
/mL para a Quimipur
ENZ.
38
0,0
500,0
1000,0
1500,0
2000,0
2500,0
Biokey 2H
(lote 1)
Biokey 2H
(lote 2)
Invazime Cat Quimipur ENZ
C
I
U
(
M
H
2
O
2
/
m
L
)
Figura 30: Demonstrao da atividade da catalase (M H
2
O
2
/mL) por diferentes enzimas
utilizadas na empresa Karsten.
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2.3.3. CONCLUSO DAS ANLISES DAS ATIVIDADES
ENZIMATICAS
A anlise da atividade das celulases com o substrato de CMC 4% que mostra a
atividade endoglucanase, observou-se que a atividade enzimtica dos lotes da Quimilase
BP teve pouca variao (10,3 a 11,7moL/min). J a Biokey RR4 apresentou variao
entre os lotes (1,6 a 3,3 moL/min), porm para a Inpalase NCRL e a Quimilase combi
no se obteve outros lotes para um comparativo. Entretanto estas duas enzimas
apresentaram atividade endoglucanase baixa comparada com a enzima cida Quimilase
BP, podendo-se dizer que a Quimilase BP tem um maior poder de ataque da cadeia
celulsica, fornecendo assim uma melhor reduo de pilling e p.
A utilizao do papel de filtro como substrato possibilitou a anlise da
atividade total, a exoglucanase e a -glucosidase, e ainda a atividade endoglucanase. A
atividade total dos lotes da Quimilase BP se manteve constante em todos os lotes. Na
atividade exoglucanase e -glucosidase a Quimilase BP teve acrscimo da atividade de
um lote para o outro, (6,7 a 10,9 UI/mL ). Porm na atividade endoglucanase observou-
se um decrscimo da atividade entre os lotes que varia de 5,8 para -0,5 (UI/mL). Estes
resultados mostram que a Quimilase BP quando analisada sua atividade enzimtica com
o substrato slido Papel de filtro contradiz a anlise realizada com CMC, pois com o
substrato CMC a atividade endoglucanase se manteve constate, o que no se v na
anlise com o Papel de filtro como substrato, onde se teve um decrscimo de atividade,
mostrando que cada lote possui um poder de ataque da cadeia celulsica.
As enzimas dos lotes da Biokey RR4 apresentaram grande variao entre as
atividades determinadas pelo mtodo de papel de filtro e as enzimas Inpalase NCRL e
Quimilase combi apresentaram atividades endoglucanase, exoglucanase, -glucosidase
e total semelhantes aos lotes da Biokey RR4, mais so baixas quando comparadas com
os lotes da enzima Quimilase BP mostrando que estas enzimas possuem um poder baixo
de ataque da cadeia celulsica.
A atividade enzimtica das amilases mostrou que a Biokey DSK apresentou
maior atividade, 247,80 BAU, que a Quimilase AL AM, 142,31 BAU e a Inpalase PE
DS, 203,81 BAU,
A atividade enzimtica da catalase mostrou que os lotes da Biokey 2H
apresentaram uma grande variao, (114,36 M H
2
O
2
/mL a 2075,53 M H
2
O
2
/mL). As
40
enzimas Invazime Cat (3649,64 M H
2
O
2
/mL) e a Quimipur ENZ (230,54 M
H
2
O
2
/mL) tiveram a atividade baixa quando comparada com a Biokey 2H.
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CONSIDERAES FINAIS
Na Karsten, tive oportunidade de conhecer e vivenciar a rotina de uma grande
indstria, deparando-me com desafios e imprevistos do cotidiano de uma produo,
alm de aspectos organizacionais, noes de relacionamento interpessoal, novos valores
e posturas.
O estgio realizado desenvolveu-se principalmente no laboratrio da rea do
beneficiamento, onde se verificou a importncia de todo o trabalho voltado para a
obteno de produtos que respeitam o consumidor, permitiu assim, uma viso global da
empresa e a compreenso do controle de produo.
A interao ente os colaboradores promoveu o compartilhamento de
informaes muito relevantes nas atividades realizadas na empresa.
A realizao do estgio curricular proporcionou experincias enriquecedoras
no sentido da aplicao dos conhecimentos tericos adquiridos ao longo da vida
acadmica do curso de Qumica.
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REFERNCIAS
Andreaus, J., Seminrio internacional: aplicao da biotecnologia na indstria txtil.
Universidade regional de Blumenau, Departamento de qumica, Blumenau, 52-67,
2001.
Andreaus, J., Zilz L., Budag, B., Scharf, M. and Cavaco-Paulo, A., I Congresso da
Sociedade Brasileira de Biotecnologia, 12-14 de Novembro, 179-202, 2001.
Asquieri, E. R., Fernandes, L, P., Monteiro, V. N., Ulhoa, C. J., Produo de amilases
pelo fungo macrophomina phaseolina, Revista eletrnica de farmcia, Vol. IV (1), 43-
51, 2007.
Bom, E. P. S., Corvo, M. L. and Ferrara, M. A., Enzimas em biotecnologia: produo,
aplicao e mercado. Rio de janeiro, 2008.
Cavaco-Paulo A. M., Influncia da agitao mecnica e da composio enzimtica no
tratamento do algodo com celulases, Tese de Doutorado, Univ. do Minho, 1995.
Galliani, A. C., Relatrio de estgio obrigatrio do curso de Engenharia Qumica da
Universidade Regional de Blumenau. Blumenau, 2008.
Ghose, T.K., Measurement of Cellulases Activities, Pure & Appl. Chem. 59, 257-268,
1987.
Karsten; Histrico Institucional. Disponvel na internet via:
http://karsten.com.br/2007/hp_ptb/institucional_historico_principal.php, capturado em
10 de novembro de 2008.
Marchi, A., Menezes, F. G. and Salem, V., Beneficiamento txtil na prtica. So Paulo,
Golden Qumica do Brasil, 2005.
43
Mansur, L. R. C. O., Utilizao de soro de leite para a produo de amilases por
bacillus sp. smia-2. Dissertao de Mestrado, Universidade Estadual do Norte
Fluminense Darcy Ribeiro, campos dos Goytacazes, 2006.
Silva, C. M. P, Tratamento alcalino e enzimtico de fibras sintticas. Dissertao de
Mestrado, Universidade do Minho, 2002.
Spier, M. R, Produo de enzimas amilolticas fngicas -amilase e amiloglucosidase
por fermentao no estado slido. Dissertao de Mestrado, Universidade Federal do
Paran, 2005.
Vasconcelos, A. J. C., Obteno de tecidos de polister de baixo peso por tratamento
enzimtico. Dissertao de Mestrado em Qumica Txtil, Universidade do Minho, 2005.