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UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO PIO II

BIOTECNOLOGA
PROCESOS INDUSTRIALES ORGNICOS II
FABRICACIN DE BIOPOLMEROS

RECURSOS NATURALES ORGNICOS POTENCIALES DE EXPLOTACIN
En general, los biopolmeros son plsticos que se producen por fermentacin bacteriana.
La mayora de biopolmeros son biodegradables, impermeables, homogneos, resistentes
a los agentes qumicos y con otras caractersticas especficas, todas ellas con elevadas
calidades, no slo en cuanto a materiales, sino tambin, en cuanto a los procesos.

Las principales aplicaciones actuales de los biopolmeros son:

a) Envasado de bebidas carbnicas (polihidroxibutirato).
b) Incremento del rendimiento en los pozos de extraccin de crudo petrolferos.
c) Implantes en prtesis de ciruga, catteres, tubos de drenaje uretrales o traqueales,
etc.

Respecto a los objetos futuros a alcanzar en el desarrollo de los biopolmeros, se puede
citar los siguientes:
a) Nuevos diseos y procesos adaptados a las necesidades aplicativas.
b) Estudios de compatibilidad entre el medio fisiolgico y las caractersticas del
biopolmero correspondiente (hidrofolicidad, propiedades mecnicas, poder de
difusin, estabilidad qumica, adhesividad, resistencia a los cambios trmicos, etc)
c) Influencia de las condiciones esterilizacin en el material (por ejemplo, influencia de la
radiacin).

A continuacin se describe algunos biopolmeros, biodegradables y biocompatibles tales
como, el conocido polihidroxibutirato y el obtenido por la accin de los cidos lcteos y
hidroxipropinico, y la modificacin de las caractersticas superficiales de materiales
biopolimricos por la accin del poliprolactona y polisiloxano, para la mejora de las
propiedades lubricantes de la superficie.


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El biopolmero de mayor potencial de aplicacin:
El Polihidroxibutirato (PHB)

- El polihidroxibutirato (PHB) es un termoplstico de polister aliftico, producido por la
fermentacin bacteriana del Alcalgenes eutropus. Este biopolmero se est produciendo
en gran cantidad por la Marlborough Biopolymers, empresa filial de la Britians Imperial
Chemical Industries.

- El PHB constituye un sistema de almacenaje (acumulador) para la bacteria A. eutrophus,
y puede almacenar hasta 80% de sus peso seco. El punto de punto de fusin del
biopolmero sin modificar, la temperatura de transicin vtrea y las propiedades barrera
son similares a las del propileno, aunque es ms duro, ms frgil y mejor adaptado al
ataque de los disolventes qumicos.

- La firma inglesa est comenzando a producir copolmeros de PHB incorporado un nuevo
monmero, el polihidroxivaleriato (PHV). La relacin de PHB/PHV define la cristalinidad y
el punto de fusin del copolmero obtenido, reduce la rigidez y aumenta la resistencia al
impacto.

- La biodegrabilidad y biocompatibilidad son las claves de las caractersticas del PHB; una
resina de moldeo de PHB/PHV de 1mm de espesor se degrada el 100% despus de 6
semanas de introducida la muestra en agua residuales en ambiente anaerbio, 60/75
semanas en aguas residuales y sucias a 25C, y 350 semanas en agua de mar a 15C.

Todas las circunstancias anteriores hacen al PHB y, Principalmente al PHB/PHV como de
gran utilidad en la produccin de emvases y contenedores biodegradable. El PHB
proportciona una rplica de cuerpo exterior muy suave, siendo compleramente absorbido
por el tejido, de inters para la industria farmacetica. Otras aplicaciones, adems de las
farmaceticas, la constituyen las capas de descarga, de escape, y de retardo para
medicamentos y semillas.



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BIOTECNOLOGA
DEFINICIN OPERACIONAL
En la produccin industrial de PHA, el polister se extrae y purifica a partir de las bacterias
mediante la optimizacin de las condiciones de fermentacin microbiana de azcar o
glucosa.
La compaa qumica britnica Imperial Chemical Industries (ICI), ha desarrollado, un
copolister producido a partir de 3-hidroxibutirato y 3-hidroxivalerianacido. Este se vende
bajo el nombre de "Biopol". Fue distribuido en los EE.UU. por la compaa Monsanto y
Metabolix.

























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PROPIEDADES FSICAS Y QUMICAS
MELAZA
La melaza o miel de caa es un producto lquido y espeso derivado de la caa de
azcar,. Su aspecto es muy similar al de la miel aunque de color parduzco muy
oscuro, prcticamente negro. El sabor es dulce, con un pequeo regusto amargo.
Nutricionalmente presenta un altsimo contenido en hidratos de carbono adems
de vitaminas del grupo B y abundantes minerales, entre los que destacan el hierro,
cobre y magnesio. Su contenido de agua es bajo.

DEXTRANO
Las propiedades qumicas y fsicas de los dextranos varan con el mtodo de
produccin; difieren unas de otras en su estructura, peso molecular, grado de
ramificacin de macromolculas, contenido relativo de enlaces glicosdicos,
solubilidad, actividad ptica, y accin fisiolgica.
El elevado peso molecular, la estructura en forma de cadena y los grupos
hidroflicos, determinan las propiedades de este polisacrido.
Los dextranos nativos, (denominados tambin dextrn tcnico) en su estado bruto,
sin refinar usualmente tienen pesos moleculares altos (de 2 a 40 millones o ms), los
dextranos clnicos, tienen pesos moleculares bajos (40 a 90 mil); estos ltimos
pueden ser preparados, por despolimerizacin de dextranos nativos o por sntesis.

L. MESENTEROIDES
El gnero L. mesenteroides tienen un tamao que oscila entre 0.5-0.7x0.7-1.2
micrmetros, de forma esfrica-ovoidea en parejas o cadenas cortas no
esporulados, e inmviles.








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MTODO DE OBTENCIN
Con el fin de optimizar la produccin de dextrana, propusieron un proceso consistente en
las siguientes etapas:
Fermentacin con un bajo contenido de sacarosa (2%), con el fin de minimizar la
produccin de dextrana y maximizar la produccin de la enzima. El medio de
fermentacin con 2% de extracto de levadura, 2% K2HPO4 (efecto amortiguador
importante en la zona de pH de mxima produccin de enzima), y trazas de
MgSO4, MnSO4, FeSO4 y NaCl. En estas condiciones se produce de 1 a 2 unidades
de actividad/ml (1 unidad es la cantidad de enzima que transforma una micromol
de sacarosa por minuto).
Aplicacin de la enzima cruda o parcialmente purificada para la sntesis de
dextrana cruda. La cintica en reactores intermitentes puede hacerse a
concentraciones de 150 g/l de sacarosa. A concentraciones superiores, la enzima
se ve inhibida por exceso de sustrato.
Monsan y Lpez Mungua, desarrollaron un sistema de fermentacin
retroalimentada, que permite mantener baja la concentracin de sacarosa en el
medio, eliminando el fenmeno de represin catablica e incrementando la
produccin de enzima de 7 a 8 veces. En este sistema, el pH debe ser regulado a
6.5, para disminuir la sntesis de dextrana durante la produccin de la enzima. La
adicin de sacarosa se efecta a razn de 20 g/l-h o bien directamente disuelta en
la solucin de hidrxido de sodio que se emplea para la regulacin del pH.
Para la purificacin de la enzima puede aplicarse un sistema de concentracin
purificacin por extraccin lquido-lquido, adicionando polietilenglicol (PM =
1500). En este caso y a diferencia de lo que ocurre en los procesos tradicionales de
extraccin de enzimas por esta tcnica, la dextransacarasa se ubica en la fase
dextrana, pues como el mecanismo de accin lo indica, la enzima se encuentra en
forma de complejo enzima dextrana.






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DESCRIPCIN DEL PROCESO
PROCESO CONVENCIONAL
En este caso ocurren tres procesos durante la fermentacin:
Crecimiento del microorganismo.
Sntesis y excrecin de la enzima dextransacarasa.
Sntesis de la dextrana por accin de la enzima.

La sacarosa es entonces fuente de carbono y energa para el microorganismo, inductor y
sustrato para la enzima. Con una concentracin de 100 g/l es posible obtener 25 g/l de
dextrana. Se emplea igualmente en el medio extracto de levadura (2.5%), sulfato de
magnesio (0.2%) y fosfato dipotsico (5%) y oligoelementos.
El pH inicialmente de 7.0 disminuye por accin del cido lctico producido hasta alcanzar
valores inferiores a 5.0 al final del proceso. Fortuitamente, pasa as en la secuencia
requerida, por el ptimo de crecimiento (7.0), el ptimo de sntesis de la enzima (6.0 6.9)
y el ptimo de actividad (5.0 5.4). El proceso dura unas 16 horas y la temperatura se
mantiene entre 26 y 29C, ya que aunque el ptimo de crecimiento del microorganismo y
actividad de la enzima son de 30C la dextransacarasa no es muy estable a esta
temperatura.
Terminando el proceso, la dextrana es precipitada con metanol o etanol, previa
eliminacin de clulas. Si se desea preparar dextrana clnica, se redisuelve al 5 6% y se
hidroliza con HCl o H2SO4 (pH = 1.0) en condiciones de temperatura y tiempo controladas
para obtener el peso molecular deseado. Empleando una precipitacin fraccionada, es
posible obtener dextrana clnica con rendimientos del 38 40% con respecto a la dextrana
nativa. Se han propuesto igualmente la ultrafiltracin para la recuperacin de fracciones
de un peso especfico.








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DIAGRAMA DE FLUJO

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BIOTECNOLOGA
DIAGRAMA DE BLOQUES

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MODELOS Y REACCIONES QUIMICAS GENERALES

Reaccin qumica principal

Bacteria: L. mesenteroides NRRL B-512F
Enzima: Dextranasacarasa
La sacarosa es invertida por la invertasa, que se encuentra en cantidades muy pequeas
en la caa y que la produce en una parte de su metabolismo el L. mesenteroides, esta
inversin de la sacarosa produce dextrosa y levulosa, el L. mesenteroides a su vez produce
la encima dextranosacarasa que ocasiona la polimerizacin de la dextrosa en los
polisacridos llamados dextranos.



CONDICIONES DE OPERACIN
Tiempo de proceso: 16 horas
Temperatura de proceso: 26-29 C
Rendimiento: 38-40%
Presin: 1 atm









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MECANISMOS DE REACCIN
La dextransacarasa posee un centro activo con dos sitios de unin de sacarosa, y dos
lugares de polimerizacin de dextrano. Estos ltimos estn ocupados por dos nuclefilos,
presumiblemente dos aniones carboxilato, que atacan a las dos molculas de sacarosa
produciendo dos intermediarios covalentes glucosil-enzima, -mediante uniones tipo ster
entre el hidroxilo del carbono 1 de la glucosa y el grupo carboxilo del nuclefilo, liberndose
fructosa como subproducto.
A continuacin, el hidroxilo del carbono 6 de uno de estos intermediarios glucosil-enzima
realiza un ataque nucleoflico sobre el carbono 1 del intermediario glucosilo vecino, con la
formacin de una unin glicosdica (1>6) y el consiguiente intermediario isomaltosil-
enzima. El nuclefilo vecino quedar as libre para atacar a una nueva molcula de
sacarosa, dando lugar a otro intermediario glucosil-enzima. Seguidamente, el hidroxilo del
carbono 6 del recin formado intermediario glucosil-enzima atacar al carbono 1 del
intermediario isomaltosil-enzima, sintetizando una segunda unin (1 6) y un
intermediario isomaltotriosil-enzima. El proceso contina de este modo entre los dos
sitios, mediante la insercin de unidades de glucosa entre la enzima y el extremo reductor
de la cadena de dextrano en crecimiento. La cadena, sin embargo, no se mueve una gran
distancia (ya que slo uno o dos de los residuos glucosilo en el extremo reductor de la
cadena se desplazan unos pocos A para efectuar la transferencia).
Una cadena de dextrano acta como aceptor atacando a un complejo glucosil-enzima, y
liberndose una estructura final en la que el dextrano aceptor constituye la cadena principal
y la cadena de dextrano que se encontraba unida a la enzima ser el punto de ramificacin.
La introduccin de algunos azcares en la reaccin de la dextransacarasa en presencia de
sacarosa, conduca a la sntesis de oligosacridos a expensas de la produccin de dextranos.
De este modo, los residuos de glucosa de la sacarosa eran transferidos por la dextransacarasa
a los hidroxilos libres de aquellos azcares, que se denominaron aceptores .Se ha
determinado que el centro activo de la dextransacarasa, adems de los dos sitios de unin de
sacarosa, y los dos sitios de polimerizacin del dextrano, presenta un sitio de unin de
aceptor.
La cadena de dextrano se libera del centro activo por reaccin con distintos aceptores.
Cuando el aceptor es otra cadena de dextrano, se forman ramificaciones; si el aceptor es
un carbohidrato de bajo peso molecular, el dextrano se libera con el aceptor unido a su

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extremo reductor. Finalmente, una pequea cantidad de glucosa se forma cuando el agua
acta como aceptor; esta reaccin representa la hidrliside la sacarosa.












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TECNOLOGA DE PURIFICACIN DEL PRODUCTO PRINCIPAL A OBTENER
Para obtener un mejor producto se debe purificar la enzima, para purificarla se puede
aplicar un sistema de concentracin-purificacin por extraccin liquido-liquido,
adicionando polietilenglicol (PM=1500).En este caso y a diferencia de lo que ocurre en los
procesos tradicionales de extraccin de enzimas por esta tcnica, la dextransacarasa se
ubica en la fase dextrana, pues como el mecanismo de accin lo indica, la enzima se
encuentra en forma de complejo enzima-dextrana.







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IMPACTO AMBIENTAL DE LOS MATERIALES USADOS, Y LA PROPUESTA DE MITIGACIN.
Los biopolmeros pueden ser sostenibles, por ser renovables ya que estn hechos
de materiales de plantas que pueden crecer ao tras ao de forma indefinida.
Estos materiales vegetales provienen de los cultivos no alimentarios. Por lo tanto,
el uso de biopolmeros creara una industria sostenible .Adems, los biopolmeros
tienen el potencial de reducir las emisiones de carbono y reducir las cantidades de
CO2 en la atmsfera: esto es debido a que el CO2 que se libera cuando se degradan
pueden ser reabsorbidos por los cultivos. Algunos biopolmeros son
biodegradables: son descompuestos en CO2 y agua por microorganismos.

Algunos de estos biopolmeros biodegradables son compostables: se pueden poner
en un proceso de compostaje industrial y se descomponen en un 90% dentro de
los seis meses. En Europa hay una casa de compostaje logotipo estndar y asociada
que permite a los consumidores identificar la eliminacin de estos materiales. Una
buena parte de los pases del denominado Tercer Mundo poseen una ventaja
indiscutible en este campo. Es una alternativa que sus gobiernos y pueblos deben
tener en cuenta, como forma de impulsar su propio desarrollo.

Ya se han dictado directivas y acuerdos supranacionales que dan pautas para tal
fin, entre ellos el Convenio sobre Diversidad Biolgica, el cual estableci tres
objetivos a cumplirse:

la conservacin de la diversidad biolgica

el uso equilibrado y sostenible de sus componentes

y la participacin justa y equitativa de los beneficios que se deriven de los
recursos genticos.


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Es necesario, entre otras cosas, un compromiso fuerte con la conservacin de los
recursos, la preservacin ambiental y las tecnologas sostenibles. Al interior de
cada nacin, esto puede lograrse mediante acuerdos y una voluntad poltica slida
que respalden la elaboracin y puesta en marcha de proyectos agroindustriales,
que incluyan la produccin de biopolmeros, que permitan la explotacin
equilibrada y sostenible de los recursos naturales propios de cada regin. Ya se
vienen percibiendo signos crecientes del deseo de las personas de vivir en mayor
armona con la naturaleza y dejar a las futuras generaciones un planeta saludable.
























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APLICACIN Y FINES DEL PRODUCTO ELABORADO, TRATAMIENTO DE DESPERDICIOS
En los biopolmeros utilizados para la esttica miles de mujeres en el mundo
han pasado por la angustia de comenzar a ver la aparicin de severas
infecciones en sus cuerpos, e incluso percibir su piel necrosada, tras haberse
practicado un procedimiento esttico que se supona las dejara ms bellas; es
el caso de las damas que se inyectaron los conocidos biopolmeros en alguna
zona de su cuerpo, sin saber las graves consecuencias que estos materiales
ocasionan.

La biotecnologa de los polmeros naturales se basa en el uso de las rutas
metablicas por las cuales microorganismos sintetizan Biopolmeros a partir de
materias primas de origen natural ya que dichas vas metablicas son
susceptibles de ser rediseadas o alteradas para conseguir fabricar polmeros
de composicin determinada.

Los materiales polimricos industriales han sido basados en polmeros
sintticos de origen petroqumico. Sin embargo, la preocupacin por el medio
ambiente y la disminucin de los hidrocarburos ha llevado a la investigacin y
al descubrimiento de microrganismos que pueden sintetizar polmeros como
parte de sus procesos metablicos.

Algunos Biopolmeros son capaces de eliminar una amplia gama de
contaminantes suspendidos y disueltos (orgnicos e inorgnicos) que se
encuentran en las corrientes de aguas residuales, ya sean provenientes de la
industria, causadas por la lluvia del procesamiento de aguas negras.





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OPCIONES DE REVALORIZACIN DE LOS BIOPLSTICOS
Aunque estos materiales se disean bajo el prisma de un sistema de gestin de
ciclo cerrado, los bioplsticos, en la mayora de los casos, pueden ser recuperados
y reciclados como los plsticos convencionales: valorizacin trmica, reciclado
qumico y reciclado mecnico. Sin embargo, al contrario que los plsticos
convencionales, pueden ser reciclados orgnicamente mediante compostaje.

El compostaje es un mtodo de recuperacin especialmente apropiado en
aplicaciones de acolchado, bolsas de residuos orgnicos y artculos de jardinera
entre otras. En este tipo de aplicaciones, la biodegradabilidad representa un valor
aadido. Los envases de alimentos de corto tiempo de duracin tambin son una
opcin interesante para ser compostados. De esta forma, el envase de bioplsticos
contaminado con residuos orgnicos puede ser recuperado sin necesidad de otras
operaciones de tratamiento. No obstante, la eficiencia de este proceso de
recuperacin depende de las infraestructuras de recogida de residuos que estn
implantadas a nivel local o regional.

Comparando el compostaje con otras opciones de recuperacin, se puede resumir
que:
. Reciclado orgnico. El compost resultante puede utilizarse para mejorar la calidad
del suelo y evitar el uso de fertilizantes.
. Reciclado qumico. Puede ser una opcin interesante en biopolisteres como el
PLA o los PHA. Mediante tratamiento qumico las cadenas que constituyen estos
biopolmeros pueden ser de-polimerizadas dando lugar a los monmeros que
pueden ser purificados y polimerizados de nuevo. Este mtodo requiere que
existan suficientes cantidades de estos biopolmeros separados de forma selectiva.




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CASOS PROBLEMTICOS DE INTERS INDUSTRIAL
Los biopolmeros son peligrosos principalmente por 3 razones: La primera es que
pueden desencadenar una excesiva reaccin inflamatoria en el organismo,
granulomas, porque el organismo identifica al biopolmero como un objeto extrao
y se desencadena una reaccin defensiva. La segunda es que pueden migrar del
lugar donde fueron infiltrados creando complicaciones a distancia. La tercera es
que la mayora de las veces no tienen ningn control sanitario lo que aumenta el
riesgo de complicaciones y efectos secundarios por infeccin. Otras consecuencias
importantes de los biopolmeros son alergias, fibrosis, lesiones y cambios en la
textura de la piel.
Los signos locales ms comunes son: inflamacin, irregularidades en la piel,
edema, eritema, cicatrices queloideas, hiper o hipopigmentaciones, ulceraciones,
endurecimiento, necrosis y fstulas, en raros casos, en los que la sustancia sale con
un aspecto de crema dental. Las ulceraciones tardan meses o aos en sanar, pero
generalmente curan con el tiempo. La alogenosis iatrognica conlleva, adems de
las complicaciones fsicas, problemas psicolgicos y de autoestima, eso sin
mencionar que altera la calidad de vida de los pacientes afectados.