El microscopio es un aparato de aumento para observar cuerpos transparentes o translucidos, de extraordinaria utilidad en biologa. El mas comnmente usado es el microscopio ptico(existen otros microscopios: varis tipos de microscopio electrnico, ultramicroscopio, de efecto tnel, de ultrasonido, etc). Su nombre completo es : microscopio ptico compuesto ( micro= pequeo ; scopio=mirar, ver; ptico porque utiliza la luz visible y compuesto porque esta formado por varios lentes, a diferencia de una lupa que seria un microscopio sencillo). Esencialmente consiste en la combinacin de dos juegos de lentes el objetivo y el ocular. El objetivo es el lente mas importante del microscopio ya que forma la primera imagen del objeto mientras que el ocular simplemente amplia dicha imagen. Adems, del objetivo depende el poder de resolucin del microscopio, es decir, la capacidad de este para que dos puntos o detalles estructurales situados muy cerca puedan verse como puntos separados. La resolucin mxima del microscopio ptico es de 0,2 micrometros, la del ojo humano es de 0,1 milimetros. Los microscopios que usaras pueden cambiar la imagen de las muestras hasta 675 veces. El objetivo forma una imagen aumentada e invertida respecto del objeto que se observa, el ocular forma una imagen aumentada pero no invertida respecto de la imagen que da el objetivo, por lo tanto nosotros observaremos una imagen aumentada e invertida del objeto que se trate. El microscopio actua amplificando la luz que ha pasado a travs del objeto a observar, por ello es necesario que este sea transaparente o translucido. Para conseguirlo se debe tomar una pequesima cantidad del material a observar, de modo que, siendo tan poco, es transparente. Cuando se trata de una objeto opaco (un hueso, o el corcho ) se pone una lamina finsima que, de tan fina, es transparente. Pero entonces, si es transparente, no se vern muchos detalles. Para que se vean, se somete la muestra a otro tratamiento : se colorea mediante sustancias que tien solo algunas partes de la muestra. Estas dos manipulaciones : conseguir que la muestra se haga transparente y teirla, dejan al material listo para ser observado. Pero manejarlo es muy difcil, pues es muy pequeo y muy poco firme. Para evitar este problema ponemos el material sobre una pequeo vidrio, el portaobjetos o porta y lo tapamos con otro vidrio aun mas fino y mas pequeo, el cubreojetos o cubre (en algunos casos este no es necesario). En conjunto de porta, material y cubre constituyen la preparacin, lista para ser observada al microscopio.
El microscopio debe estar protegido del polvo, humedad y otros agentes que pudieran daarlo. Mientras no est en uso debe guardarse en un estuche o gabinete, o bien cubrirlo con una bolsa plstica o campana de vidrio. Las partes mecnicas deben limpiarse con un pao suave; en algunos casos, ste se puede humedecer con xilol para disolver ciertas manchas de grasa, aceite de cedro, parafina, etc. Que hayan cado sobre las citadas partes. La limpieza de las partes pticas requiere precauciones especiales. Para ello debe emplearse papel "limpiante" que expiden las casas distribuidoras de material de laboratorio. Nunca deben tocarse las lentes del ocular, objetivo y condensador con los dedos; las huellas digitales perjudican la visibilidad, y cuando se secan resulta trabajoso eliminarlas. Para una buena limpieza de las lentes puede humedecerse el papel "limpiante" con ter y luego pasarlo por la superficie cuantas veces sea necesario. El aceite de cedro que queda sobre la lente frontal del objetivo de inmersin debe quitarse inmediatamente despus de finalizada la observacin. Para ello se puede pasar el papel "limpialentes" impregnado con una gota de xilol. Para guardarlo se acostumbra colocar el objetivo de menor aumento sobre la platina y bajado hasta el tope; el condensador debe estar en su posicin ms baja, para evitar que tropiece con alguno de los objetivos. Gurdese en lugares secos, para evitar que la humedad favorezca la formacin de hongos. Ciertos cidos y otras sustancias qumicas que producen emanaciones fuertes, deben mantenerse alejados del microscopio. Manejo del microscopio: Colocar el objetivo de menor aumento en posicin de empleo y bajar la platina completamente. Si el microscopio se recogi correctamente en el uso anterior, ya debera estar en esas condiciones. Colocar la preparacin sobre la platina sujetndola con las pinzas metlicas. Comenzar la observacin con el objetivo de 4x (ya est en posicin) o colocar el de 10aumentos (10x) si la preparacin es de bacterias. Para realizar el enfoque: acercar al mximo la lente del objetivo a la preparacin, empleando el tornillo macromtrico. Esto debe hacerse mirando directamente y no a travs del ocular, ya que se corre el riesgo de incrustar el objetivo en la preparacin pudindose daar alguno de ellos o ambos.. Mirando, ahora s, a travs de los oculares, ir separando lentamente el objetivo dela preparacin con el macromtrico y, cuando se observe algo ntida la muestra, girar el micromtrico hasta obtener un enfoque fino. Pasar al siguiente objetivo. La imagen debera estar ya casi enfocada y suele ser suficiente con mover un poco el micromtrico para lograr el enfoque fino. Si al cambiar de objetivo se perdi por completo la imagen, es preferible volver a enfocar con el objetivo anterior y repetir la operacin. El objetivo de 40x enfoca a muy poca distancia de la preparacin y por ello es fcil que ocurran dos tipos de percances: incrustarlo en la preparacin si se descuidan las precauciones anteriores y mancharlo con aceite de inmersin si se observa una preparacin que ya se enfoc con el objetivo de inmersin. Empleo del objetivo de inmersin: bajar totalmente la platina. Subir totalmente el condensador para ver claramente el crculo de luz que nos indica la zona que se va a visualizar y donde habr que echar el aceite. Girar el revlver hacia el objetivo de inmersin dejndolo a medio camino entre ste y el de x40.d.Colocar una gota mnima de aceite de inmersin sobre el crculo de luz. Terminar de girar suavemente el revlver hasta la posicin del objetivo de inmersin. Mirando directamente al objetivo, subir la platina lentamente hasta que la lente toca la gota de aceite. En ese momento se nota como si la gota ascendiera y se adosara a la lente. 2) OBJETIVOS:
Aprender a utilizar correctamente el microscopio. Conocer todas las partes y las funciones del microscopio. Realizar preparados en fresco, faciles . Saber como utilizar las laminas y como colocar las laminillas. Observar distintas muestras en diferentes aumentos.
3) PROCEDIMIENTO :
-Primero observamos al microscopio , se nos menciono cuales eran sus partes y se nos explico las funciones de cada una.
Se nos explico que en un microscopio se distinguen dos partes: mecnica y ocular. I. Parte mecnica: -Tubo: cilindro hueco en cuyos extremos estn situados estn situados el objetivo y el ocular. -Brazo: columna lateral en la que se apoyan los distintos elementos. -Platina: placa sobre la que se coloca la preparacin, con una pinza para sujetar la lmina. -Macrometrico: provoca un movimiento amplio y sirve para un enfoque aproximado. -Micrometrico: prooca un movimiento muy corto y sirve para un enfoque fino. -Pie: base pesada para mantener la estabilidad del microscopio. II. Parte ptica: -Ocular : juego de lentes de la parte superior del tubo. Lleva marcado el nmero de aumentos que posee. -Objetivos : lentes de la parte inferior del tubo, suelen haber mas de uno, estn sujetos a una pieza llamada revolver , el cual gira y permite cambiar de objetivo. -Condensador : sistema de lentes situados bajo la platina que concentra la luz en el objeto observado. -Diafragma : situado bajo el condensador, regula la cantidad de luz que llega a la muestra.
-Se nos pidi recortar una letra e de un peridico para observarlo al microscopio, se lo coloco en una lamina y se le echo una gota de agua, luego se le coloco una laminilla para cubrirlo.
-RESULTADOS:
4) DISCUSION:
-Como podemos obsevar en las distintas muestras, en una imagen vemos la muestra mucho mas amplia, en cambio en la otra vemos la imagen ms pequea . -Esto es debido al cambio de objetivos en el cual hay distintas medidas haciendo que el tamao de la imagen varie. -Hay varias medidas y de acuerdo a la que eligas la imagen se vera grande o pequea.
5) CONCLUSIONES:
El microscopio ha sido uno de los avances cientficos mas importantes del hombre porque ha significado un gran avance para la ciencia y hoy en da lo sigue siendo, por que gracias a el se investigan y desarrollan muchas ciencias. En esta prctica se han aprendido las partes del microscopio su correcto uso, manipulacin y mantenimiento. El microscopio es una importante herramienta ya que sin este aparato seria imposible visualizar los microorganismos a simple vista, es fundamental en el avance de la citologa, citogentica, microbiologa, fitopatologa virologa, bacteriologa, parasitologa y dems ciencias que se trabaja con microorganismos.
6) CUESTIONARIO:
I. Describa los diferentes tipos de microscopio e indique su uso en medicina.
Microscopio ptico: tambin llamado "microscopio liviano", es un tipo de microscopio compuesto que utiliza una combinacin de lentes agrandando las imgenes de pequeos objetos. Los microscopios pticos son antiguos y simples de utilizar y fabricar. Microscopio compuesto: es un aparato ptico hecho para agrandar objetos, consiste en un nmero de lentes formando la imagen por lentes o una combinacin de lentes posicionados cerca del objeto, proyectndolo hacia los lentes oculares u el ocular. El microscopio compuesto es el tipo de microscopio ms utilizado. Microscopio fluorescente : es un tipo especial de microscopio liviano, que en vez de tener un reflejo liviano y una absorcin utiliza fluorescencia y fosforescencia para ver las pruebas y sus propiedades. Microscopio electrnico : es uno de los ms avanzados e importantes tipos de microscopios con la capacidad ms alta de magnificacin. En los microscopios de electrones los electrones son utilizados para iluminar las partculas ms pequeas. El microscopio de electrn es una herramienta mucho ms poderosa en comparacin a los comnmente utilizados microscopios livianos. Microscopio de campo claro : consiste en una fuente luminosa, un condensador que enfoca los rayos de luz sobre la muestra una platina sobre la cual se coloca la muestra, un objetivo y un ocular a travs del cual se puede observar directamente el espcimen. La utilidad del microscopio ptico reside en su capacidad de magnificacin y lo que es ms importante, su capacidad de resolver detalles estructurales. Microscopio de luz ultravioleta: se utiliza una fuente de luz ultravioleta y depende de la absorcin de esa luz por las molculas de la muestra. Sus resultados se registran fotogrficamente. No es posible examinar en forma directa el espcimen en el ocular, ya que la luz ultravioleta daa la retina. Este mtodo sirve para detectar cidos nucleicos, especficamente bases puricas y pirimidicas del nucletido. Tambin es til para detectar protenas que contienen ciertos aminocidos. Microscopio de polarizacin: es una simple modificacin del microscopio ptico, pero el espcimen es atravesado por luz paralizada y se usa otro polarizador que se hace rotar para detectar la orientacin molecular en muestra de tejidos. Microscopio de contraste de fase: permite observar clulas y tejidos sin colorear y por eso resulta especialmente til para el examen de clulas vivas y cortes gruesos de material plstico no coloreados. Existen pequeas diferencias del ndice de refraccin en diferentes partes de la clula y en distintas partes de una muestra de tejido. La luz que pasa por regiones de mayor ndice de refraccin experimenta una deflexin y queda fuera de fase con respecto al haz principal de las ondas de luz. Microscopio de barrido con focal: Es un sistema relativamente nuevo se usa para estudiar la estructura de sustancias biolgicas. En este microscopio se utiliza un rayo lser de iluminacin que es fuertemente convergente y por lo tanto produce un punto de barrido muy poco profundo. La luz que emerge del punto es dirigida a un tubo foto multiplicada, donde es analizada. Se utiliza un sistema de espejos para mover el rayo lser a travs del espcimen iluminando un solo punto por vez.
II. Qu cuidados debe tenerse con un microscopio?
Al finalizar el trabajo, hay que dejar puesto el objetivo de menor aumento en posicinde observacin, asegurarse de que la parte mecnica de la platina no sobresale del borde de la misma y dejarlo cubierto con su funda. Cuando no se est utilizando el microscopio, hay que mantenerlo cubierto con su funda para evitar que se ensucien y daen las lentes. Si no se va a usar de forma prolongada, se debe guardar en su caja dentro de un armario para protegerlo del polvo. Nunca hay que tocar las lentes con las manos. Si se ensucian, limpiarlas muy suavemente con un papel de filtro o, mejor, con un papel de ptica. No dejar el portaobjetos puesto sobre la platina si no se est utilizando el microscopio. El cambio de objetivo se hace girando el revlver y dirigiendo siempre la mirada a la preparacin para prevenir el roce de la lente con la muestra. No cambiar nunca de objetivo agarrndolo por el tubo del mismo ni hacerlo mientras se est observando a travs del ocular. Mantener seca y limpia la platina del microscopio. Si se derrama sobre ella algn lquido, secarlo con un pao.
III. Qu es un colorante? Qu tipos de colorantes existen?
-Son compuestos orgnicos que tienen alguna afinidad especfica por los materiales celulares. Los colorantes se utilizan en microscopia cuando deben visualizarse componentes de clulas y tejidos en material animal y vegetal. Frecuentemente estas tcnicas de visualizacin pticas son los nicos mtodos de identificar y diferenciar tales tejidos. Los colorantes para microscopia se utilizan principalmente en histologa, citologa y microbiologa, pero tambin en el anlisis de fibras textiles, papel y otros productos tcnicos. -Tipos: anionicos, catinicos, liposolubles, simples, diferenciales, selectivas.
IV. Esquematice y denomine la formacin de la imagen final en un microscopio simple y de un microscopio compuesto.
-Formacion de la imagen en un microscopio simple: En el esquema se muestra la formacin de la imagen, cuando se ha colocado el objeto entre la lente y su foco principal. Se obtiene una imagen virtual y derecha, con tanta mayor amplificacin cuanto ms prximo al foco se encuentre el objeto.
-Formacion de la imagen en un microscopio compuesto: La distancia entre el ocular y el objetivo debe ser calculada de manera que la imagen real obtenida por el objetivo se forme entre el ocular y su punto focal (11). El aumento del microscopio depender en principio de la longitud focal del objetivo. Mientras ms pequea sea esta longitud y el objeto se acerque al objetivo, ms grande ser la imagen real. El aumento tambin depende de la distancia focal del ocular y mientras ms corta sea esta, mayor ser el aumento.
V. Defina :
-Imagen real: Es aquella que se forma cuando, tras pasar por el sistema ptico, los rayos de luz son convergentes. Esta imagen no la podemos percibir directamente con nuestro sentido de la vista, pero puede registrarse colocando una pantalla en el lugar donde convergen los rayos. -Imagen virtual: Es aquella que se forma cuando, tras pasar por el sistema ptico, los rayos divergen. Para nuestro sentido de la vista los rayos parecen venir desde un punto por el que no han pasado realmente. La imagen se percibe en el lugar donde convergen las prolongaciones de esos rayos divergentes. Es el caso de la imagen formada por un espejo plano. Las imgenes virtuales no se pueden proyectar sobre una pantalla. -Longitud de onda: Longitud de onda se le denomina a la distancia que hay entre dos crestas consecutivas de una onda. La luz, el sonido, las ondas de radio, etc. tienen longitudes de onda. La longitud de onda es inversamente proporcional a la frecuencia, osea que a menor longitud de onda mayor frecuencia y viceversa. Las longitudes de onda se pueden medir en metros, centmetros, milmetros, micrmetros, nanmetros (millonsima de un metro), etc. Todo depende de la comodidad, ya que la longitud de onda puede variar enormemente (de varios metros a unos pocos nanmetros). -Limite de resolucin: Lmite de resolucin vendra a ser la menor distancia entre dos objetos para que puedas visualizarlos separados. Te marca la minima distancia entre dos objetos que puedes diferenciar. -Poder de resolucin: El poder resolutivo es la capacidad que tiene un microscopio (o el ojo humano, etc.) de percibir por separado dos puntos pequeos, adyacentes y cercanos. Vale decir, es la capacidad para percibir detalles. El poder resolutivo aumenta a medida que disminuye la distancia que separa dichos punto.