ZOOTECNIA TEMA: Hemaglutinacin CURSO: Inmunologa Veterinaria ALUMNA: Julio Enrique Ziga Flores DOCENTE: Dra. Elosa Ziga Valencia. SEMESTRE: VIII Par PRCTICA N 04 I.TEMA: Hemaglutinacin (H.! II. OBJETIVO: "onocer el titulo #emaglutinante $el antgeno que se %a a utili&ar 'ara $i(erentes %irus sea el caso) *DV+ I,V+ I,D+ -,P+ .g+ .s+ etc. NDV: En(erme$a$ $e *e/castle IBD: En(erme$a$ $e la ,ursa $e Fa0ricio o $e 1um0oro III. FUNDAMENTO: 2a 'rue0a se $esarrolla en $os (ases+ una 'rimera que es una reaccin antgeno anticuer'o en un me$io lqui$o 3 una segun$a consistente en la a$icin $e com'lemento+ una #emolisina $e'en$iente $e com'lemento 3 eritrocitos. -i se #a 'ro$uci$o reaccin antgeno 4 anticuer'o+ es $ecir+ si el suero anali&a$o contena anticuer'os (rente al antgeno+ el com'lemento que$a 56a$o 3 no 'ue$e acti%ar la #emlisis $e los gl0ulos ro6os. 7n e6em'lo cl8sico $e utili&acin $e esta 'rue0a es la 'erineumona 0o%ina o la 'leuroneumona 'orcina. IV. MARCO TERICO: 1. I!"#$%&&'( 2a #emaglutinacin es la aglutinacin $e los #emates o gl0ulos ro6os. 2a #emaglutinacin se $e0e a la 'resencia $e antgenos en los eritrocitos+ antgenos ca'aces $e reaccionar con anticuer'os o 0ien con 'rotenas es'ec5cas $e algunos microorganismos (entre las que $estacan las #emaglutininas!. El aumento $el ttulo $e anticuer'os in$ica una in(eccin reciente. %eces+ sim'lemente con $eterminar un ttulo ele%a$o 'o$emos su'oner que se #a 'ro$uci$o una in(eccin reciente. 2os ttulos $e Ig1 'or s solos suelen in$icar una in(eccin 'asa$a. ). P"%*+,- +,-,$,- * ., $*!*&&'( $* ,!'&%*"/#-: Prue0as $e aglutinacin Prue0as $e 'reci'itacin Fi6acin $el com'lemento Prue0as $e #emaglutinacin e in#i0icin $e la #emaglutinacin E2I- Prue0as $e inmuno9uorescencia Prue0as $e neutrali&acin 0. F'1,&'( $*. /.*2*!#: : 2a 56acin $el com'lemento se 0asa en la ca'aci$a$ $el com'lemento 'ara unirse a los com'le6os antgeno 4 anticuer'o. : 2a #emoaglutinacin es un m;to$o $on$e no se mi$e la ca'aci$a$ in(ecciosa $e las 'artculas %irales. : Es una t;cnica in$irecta 'ara me$ir 'artculas %irales+ 'ues en reali$a$ me$iante esta t;cnica se mi$e la canti$a$ $e 'artculas #emoaglutinantes ('rotenas %irales! in$e'en$ientemente si estas est8n inclui$as en la 'artcula %iral o li0res como antgeno. V. DESARROLLO DE LA PRCTICA: 1. M,!*"',.*-: 1.1 R*,&!'3#- *&*-,"'#-: ntgeno) *DV+ I,V+ I,D+ -,P+ .g+ .s+ etc. ,u<er Fos(ato -alino ('H) =.>! nticoagulante lse%er) ?ml 1l0ulos ro6os la%a$os 3 're'ara$os al @A. gua 0i$estila$a $esioni&a$a est;ril ("onstitucin $el antgeno!. 1.) E4%'/# *&*-,"'#: Be(rigera$ora. "entri(uga Placas en V ,otellas Pi'etas multicanal $e >C >CCul Pi'eta autom8tica sim'le $e >C >CC ul Di's "u0etas $e 'l8stico Pi'etas $e @ @C ml Jeringas $e E ml gu6as Pi'etas $e Pasteur ). M%*-!",: -angre $e gallina) >ml 0. P"#&*$'2'*!#: 2a%ar los gl0ulos ro6os 3 're'8ralos al @A+ a%es que se'an li0res $e en(erme$a$. 7san$o una 'i'eta multicanal agregar EC ul $e ,7FFEB -2I*F a to$as las cel$as $e una 5la com'leta en la 'laca $e tra0a6o. 7san$o una 'i'eta autom8tica sim'le agregar EC ul $el antgeno 'uro (*DV! en la 'rimera cel$a $e la 5la. .e&clar 'or @C %eces 3 luego 'asar 'or EC ul a la cel$a $e la segun$a columna. Beali&ar la misma o'eracin #asta la cel$a @>$escartan$o EC ml $e la ltima $ilucin. gregar EC ul $e los gl0ulos ro6os la%a$os a to$os 3 ca$a una $e las cel$as $e la 5la. Homogeni&ar 0ien e incu0ar 'or @ #ora a tem'eratura am0iente. 4. L*&!%",: El titulo $el antgeno ser8 la ltima $ilucin $on$e se o0ser%a #emaglutinacin. Para contar las uni$a$es #emaglutinantes+ em'e&ar $e la ultima #emaglutinacin #acia atr8s (i&quier$a!. P2") @> G H cua$ra$itos 15) 154 156 151 7 150 ) 157 4 151 )6 15)8 7 158 1) 1510 )4 15)0 46 15409 7 @ utg I ?J ul ,P- K ?L ul ,-P 8. I2:;**-: F';%", N< 01: gregan$o el 0u<er salino 3 el antgeno a to$as las cel$as $e una 5la $e la 'laca F';%", N< 0): 2le%an$o la 'laca a la incu0a$ora F';%", N< 00: Besulta$os $e la 'r8ctica que se reali&.