1

UNIVERSIDAD TCNICA PARTICULAR DE LOJA

FITOQUIMICA Y FARMACOGNOSIA

Aguilar Milagros, Montao Jorge, Obaco Fernando, Pozo Gabriel, Tacuri Cristian

EXTRACCION DE ACEITE ESENCIAL DE CLAVO DE OLOR (SYZYGIUM
AROMATICUM) MEDIANTE DESTILACIN POR ARRASTRE DE VAPOR
RESUMEN
En la presente practica se procedi a la extraccin de aceite esencial de clavo de olor (Syzygium
aromaticum) mediante destilacin por arrastre de vapor. Con el aceite extrado se procedi a
realizar una TLC, donde se obtuvo un Rf=0,41. El rendimiento del aceite extrado fue de 3,48 %.
Con la GC-MS se pudo identificar los siguientes compuestos en el extracto: el eugenol (2
metoxi-4-2-propenilfenol) con un 54. 34 %, luego el isoeugenol (2-metoxi-4-propenilfenol) con
22,55%, ergolina-8-carboxamida con 11,29 % y el -carofileno con 7,54 %.
Palabras clave: Aceites esenciales, eugenol, tlc, cromatografa de gases

INTRODUCCION
El clavero (Syzygium aromaticum) es un
rbol generalmente bajo de 3 a 6 metros de
altura (Len, 1968) con hojas perennes
(Bruneton, 2001). Es nativa de las islas
Molucas y crece bien solo en reas
ecuatoriales, de humedad abundante y alta
temperatura altura (Len, 1968). Para
obtener su aceite esencial se puede utilizar
los botones florales pero principalmente las
hojas. La droga es muy caracterstica: olor
aromtico particular, sabor ardiente,
morfologa tpica (Bruneton, 2001).
Su composicin qumica se caracteriza por
la presencia mayoritaria de un
propenilfenol, el eugenol. Principalmente en
forma libre y en parte en forma de acetato de
eugenilo, su contenido oscila entre 70 y 85
%. El eugenol va acompaado de varias
decenas de compuestos terpnicos,
alifticos, aromticos y heterocclicos. El
aceite esencial (de clavos, Ph.eur. 3
a
.ed.)
contiene de 75 a 88 % d eugenol, 5-14 % de
-cariofileno, y de 4-15 % de acetato de
eugenilo (Bruneton, 2001).
Se lo puede emplear para el tratamiento de
pequeas heridas despus de lavado
abundante; como antlgico (cefaleas, dolores
dentales); antlgico en afecciones de la
cavidad bucal y/o farngea (colutorios,
pastillas); en enjuagues para la higiene
bucal. Por va oral, se utilizan
tradicionalmente en el tratamiento
sintomtico de trastornos digestivos: como
gases, digestiones lentas, eructos,
flatulencias. En Alemania, las preparaciones
2

a base de clavo (o aceite esencial) se utilizan
en enjuagues de boca en casos de
inflamacin de la boca o garganta
(Bruneton, 2001).
El eugenol del aceite esencial de clavos es
un potente inhibidor de la agregacin
plaquetaria. Durante mucho tiempo los
cirujanos dentales han empleado el eugenol
en medicacin intracanalar, pero parece que
este producto puede originar lesiones
histolgicas cuando se aplica en contacto
directo con los tejidos vivos lo que ha
llevado a abandonarlo. Interesante por sus
propiedades anestsicas locales (inhibe la
conduccin nerviosa), tambin es
antiinflamatorio (inhibidor de la sntesis de
prostaglandinas y de la quimiotaxis de
leucocitos). A concentraciones bajas (10
-2
-
10
-3
mM/L) es bactericida. El eugenol forma
parte tambin de la formulacin de
disoluciones para enjuagues de boca y
pomadas (Bruneton, 2001).

Fuente: (Bruneton, 2001)
Por va general y a dosis elevadas (0,5
ml/Kg), el aceite esencial del clavo es
toxico, sobre todo en nios pequeos a los
que provoca depresin del SNC, necrosis
hepatocelular, convulsiones y/o trastornos
mayores de la coagulacin. Se metaboliza
rpidamente y se excreta, en su mayor parte
conjugado y en muy baja proporcin
epoxidado (Bruneton, 2001).
El aceite esencial de clavo de olor se obtuvo
mediante destilacin por arrastre de vapor.
Al poseer este aceite esencial un punto de
ebullicin alto puede aislarse en un proceso
de destilacin con algn lquido de punto de
ebullicin inferior, por ejemplo agua
(Ocampo, Ros, Betancur, Ocampo, 2008).

METODOLOGA:
Para la obtencin del aceite de clavo de olor
se realizaron los siguientes procedimientos:
se prepar el equipo de destilacin en las
instalaciones del laboratorio de Aceites
Esenciales, empleamos los botones florales
de clavo de olor como materia prima, para
un mejor rendimiento, pesamos en una
balanza analtica 2,25 kg de la misma. En el
destilador vertimos una cierta cantidad de
agua y colocamos la materia prima en la
bandeja. Se tapa el destilador, se revisa el
nivel de agua, se cierra la vlvula de control
para evitar que fugue el aceite esencial ya
que es una especie muy voltil y se perdera
rendimiento. Se coloca en la entrada de agua
la manguera que permitir el enfriamiento
del condensador y en la salida de ste una
manguera por donde saldr agua caliente del
mismo, asegurndose de medir la
temperatura inicial al comenzar la
destilacin. Se calienta con llama normal
hasta que ebulla y empieza a salir vapor. En
este punto se controla el calentamiento para
que el destilado no sea demasiado rpido y
lo podamos controlar con un mximo de 5
gotas por segundo. A la salida del
condensador obtenemos un extracto lquido,
3

teniendo en cuenta que el aceite obtenido a
partir del Clavo de Olor es ms denso, lo
que har que se precipite en el fondo y las
partculas de agua se suspendern en la parte
superior, formando as dos fases, una liquida
(superior) y una oleosa (inferior). Se mide la
temperatura final. Se debe recolectar el
aceite esencial mediante intervalos cada
cierto tiempo hasta que la cantidad de
extraccin de aceite muestre un cambio
insignificante en su destilacin. El tiempo
estimado de duracin de este procedimiento
fue de 3 horas. Luego se colecta el destilado
y se lo deja reposar por unas 12 horas, para
que se pueda separar las fases, y obtener
finalmente el aceite. Luego se decanta las
fases oleosas de la acuosa y se obtiene
nuestro Aceite, con el cual se proceder a
realizar las distintas pruebas para su
determinacin qumica. Se realiz la TLC
mediante fase directa, para identificar el
Eugenol que es la sustancia ms activa de
este aceite, para lo cual sembramos una
muestra con la ayuda de un capilar en una
placa de silica gel (fase directa), la
desarrollamos con una fase mvil que est
compuesta por diclorometano 2:3 hexano.
Luego observamos con espectro de luz de
365 nm y con un espectro de 254 nm.
Posteriormente aadimos cido Sulfrico
para fijar en la silica gel y vainillina para
revelar sus componentes mediante
calentamiento. Para el rendimiento pesamos
la materia prima que fue las semillas secas,
luego pesamos la probeta vaca, y despus la
probeta con el aceite obtenido, hay que
recalcar que el aceite mostro algunas gotas
de agua por lo cual bajo el rendimiento
terico del aceite. Finalmente realizamos los
clculos pertinentes obteniendo un
rendimiento de 3, 48 %. En el caso de la
densidad colocamos el aceite en el
picnmetro y lo pesamos, luego colocamos
agua en el mismo y procedimos a tomar su
peso, teniendo en cuenta que la densidad del
agua es 1, la densidad de nuestro aceite fue
0.96 g/ml. As mismo para identificar los
compuestos del extracto se realiz una GC-
MS, con el cual se pudo identificar los
compuestos presentes en este extracto
RESULTADOS Y DISCUSION:
- Se obtuvo un Rf= 0,45 del extracto al
cual se le realizo la TLC empleando una
fase directa (hexano-diclorometano) en
una proporcin 3:2, que presenta un
color amarillo-pardo. Segn Wagner y
Bladt el aceite esencial del clavo de olor
muestra un Rf aproximado a 0,5.
Wagner., Bauer., Melchart, Xiao.,
Staudinger, A., obtuvieron en la especie
Cinnamomum cassia que tambin
contiene eugenol un Rf = 0,41. Todos
los Rf vistos anteriormente se
aproximan al Rf obtenido en nuestra
prctica. Tambin observamos las
placas en luz UV a una longitud de onda
de 254 nm y a 365 nm





365 nm
4

Rf= 0,42

- Para obtener el rendimiento del aceite
esencial empleamos la siguiente
formula:
R (%) = (a / b ) * 100
()



R (%)= 3.48
Segn Bruneton el rendimiento del
aceite es de 150 a 180 ml/kg, en nuestro
caso obtuvimos un volumen de 70,61 ml,
que posiblemente se debe al tiempo de
extraccin aproximado de 3 horas que duro.
- Aproximadamente 1 ml de aceite
esencial de clavo de olor se procedi a
realizar una identificacin de los
compuestos obtenidos mediante GC-MS
y obtuvimos el siguiente cromatograma:

Los compuestos ms representativos que se
identificaron en esta prueba fueron: el
eugenol (2 metoxi-4-2-propenilfenol) con un
54. 34 %, luego el isoeugenol (2-metoxi-4-
propenilfenol) con 22,55%, ergolina-8-
carboxamida con 11,29 % y el -carofileno
con 7,54 %.

DATOS DEL PROCESO
EXTRACTIVO:
Cantidad de Material (g) 2250g
Densidad Aparente del
material (g/ cm
3
)
1.03
Tipo de Destilacin Arrastre de
Vapor
Temperatura (C) 20 C
Presin (mmHg) 4.5
atm.
Tiempo de destilacin 3
horas
Presin Atmosfrica (mm
Hg)
1 atm.
Temperatura Entrada y
salida del Refrigerante.
entrada: 16
C
salida: 18 C
Longitud de
Refrigeracin (cm)
44cm
Volumen de aceite 70, 61 ml
5

extrado
Rendimiento (%) 3.48%
Color del aceite Amarillo
claro







BIBLIOGRAFIA:
- Bruneton, J., (2001).aceites
esenciales. Farmacognosia,
fitoqumica, plantas medicinales.
Espaa. Editorial Acribia.
- Len, J., (1968). Fundamentos
botnicos de cultivos tropicales.
Per. Editorial IICA
- Ocampo, R., Ros, L., Betancur, L.,
Ocampo, D. (2008). Curso prctico
de qumica enfocado a la biologa ya
los alimentos. Colombia. Editorial
Universidad de Caldas
- Wagner, H., Bladt, S., (2009). Plant
Drugs Analysis. Alemania. Editorial
Springer
- Wagner, H., Bauer, R., Melchart, D.,
Xiao, P., Staudinger, A., 2011.
Chromatographic fingerprinter
analysis of herbal medicines.
Alemania. Editorial Springer












6

Cuestionario

- Qu mtodos segn la bibliografa se emplean comnmente para separar el aceite
del agua y poder recuperarlo?
- En la destilacin por arrastre por vapor de agua intervienen dos lquido: el agua y la
sustancia que se destila, estos lquidos no suelen ser miscibles, y para separar estas fases se
secan agregando sulfato de sodio anhidro y luego se filtra con papel filtro, as vamos a tener
el extracto orgnico (Guarnizo, 2009).
- Cul es la composicin qumica del aceite obtenido por su grupo en la experiencia
realizada?
- Las semillas de clavo de olor producen aproximadamente un 15% a 20% de aceite voltil, el
cual es responsable del caracterstico olor y sabor. El tallo produce cerca del 5% de aceite y
las hojas 2%, adems las semillas contienen un complejo de taninos, gomas, resinas y varios
glucsidos de esteroles.
- Este aceite esencial comprende un total de 23 componentes identificados, entre ellos
eugenol (76,8%), seguido de -cariofileno (17,4%), -humuleno (2,1%) y acetato de
eugenilo (1,2%) como componentes principales. El aceite esencial de clavo de olor
demostr actividad de barrido contra la hydracyl 2,2-difenil-1-picrilo (DPPH) radical a
concentraciones ms bajas que las concentraciones de eugenol, hidroxitolueno butilado
(BHT), y hidroxianisol butilado (BHA), vanilina y metil N amil cetona 10%, taninos 10%,
triterpenos (cido oleanlico) 1% (Jirovetz, et al. 2006).
- Cmo se evala la calidad organolptica de un aceite esencial?
- La propiedad organolptica est vinculada a la volatilidad de la sustancia y esto se evala
mediante el tamao y la forma, estado electrnico, isometra y la posicin cis/trans del
producto (Trucco, 2003).
- Qu mtodos permiten determinar la composicin qumica de un aceite esencial?
- Estos mtodos se realizan con la finalidad de identificar sustancias y conocer la composicin
de la droga o planta, entre ellos existen mtodos cualitativos y cuantitativos.
- Cualitativos: reacciones de coloracin o precipitacin, reacciones de fluorescencia, anlisis
cromatogrfico, cromatografa en capa fina, cromatografa de gases, cromatografa lquida
de alta precisin. Mtodos espectrofotomtricos, espectro infrarrojo, espectro UV, espectro
RMN, espectrometra de masas.

7

- Qu mtodos se utilizan para caracterizar o conocer las propiedades fsicas de un
aceite esencial?
Estos mtodos tienen como objetivo garantizar que cumplan con las normas de calidad y
deteccin de adulteraciones como la discriminacin de calidad, y determinacin de que el
producto es natral, los parmetros utilizados son: densidad, poder rotatorio ndice de
refraccin, miscibilidad en etanol, punto de inflamacin y rango de destilacin. Mtodos
fundamentales de anlisis de propiedades aceites esenciales.
Propiedades fsicas
Apariencia (viscosa, etc). Color (desde amarillo claro hasta azul oscuro) Olor (dulce, acido,
amaderado, fresco, etc).Densidad relativa a 20C (generalmente menor a 1, ejemplo 0.845)
ndice de refraccin a 20C (147428 nD, etc). Rotacin ptica a 20C((+)135.34, (-)245.63
Z) Solubilidad en mezclas alcohol-agua (alcoholes rebajados). (Valarezo, 2008)
Propiedades Qumicas
Miscibilidad en etanol. ndice de acidez. ndices de saponificacin y ster. Determinacin de
aldehdos y cetonas. Formacin de fenilhidrazonas. ndice de acetilo. Tcnicas
cromatogrficas: TLC, TLC/AgNO3, HRGC, HPLC. Mtodos espectroscpicos: UV, IR, GC-MS,
1H-, 13C-NMR. (Valarezo, 2008)
- Indique el tratamiento pos-destilacin que le dara a un aceite esencial para
mantener su calidad durante el tiempo de almacenamiento antes de su uso.
- Deben ser colocados en frasco oscuro o mbar perfectamente bien cerrado para evitar el
ingreso de aire,, nunca guardar en botellas de plstico. Conservar a temperatura ambiente,
no calentarlos a bao mara (Lavabre, 1995).

Bibliografa.


Albarracin, G. (2009). Comparacion de dos mtodos de extraccin de aceite escencial usando pipper
aduncum procedente de la zona cafetera. Trabajo de grado, 28-29.
Guarnizo, A. (2009). Experimentos de qumica orgnica. 88-90. Armenia: Ediciones Elizcom.
Jirovetz, L., Buchbauer, G., Stoilova, I., Stoyanova, A., Krastanov, A., & Schmidt, E. (28 de Julio de 2006).
Chemical Composition and Antioxidant Properties of Clove Leaf Essential Oil. Agriculural and Food
Chemestry, 6303-6307.
8


Lavabre, M. (1995). Aromaterapia libro prctico. Mxico: Lasser Press Mexicana.

Trucco, F. (2003). Ctedra de Faramacognosia y productos naturales. Ctedra de Faramacognosia y
productos naturales. Montevideo, Uruguay: Publicaciones de la catedra de farmacognosia.

Valarezo, E. (1 de julio de 2008). memorias. Recuperado el 2014, de memorias:
http://memorias.utpl.edu.ec/sites/default/files/documentacion/ingenieria-quimica/utpl-ingenieria-
quimica-2008-aceites-esenciales.pdf
PAGINA AISLAMIENTO DE EUGENOL
http://books.google.com.ec/books?id=qmFQ3LwymmMC&pg=PA41&dq=destilaci%C3%B3n+por+arra
stre+de+vapor&hl=es&sa=X&ei=6Be7U-
GnOOrhsASNmoHgCw&ved=0CBkQ6AEwAA#v=onepage&q=destilaci%C3%B3n%20por%20arrastre%2
0de%20vapor&f=false