Inmunologa, Microbiologa y Enfermedades Infecciosas

Ciclo 2014 1

GUA DE ESTUDIO

UNIDAD 1: Microbiologa Bsica

Semanas 1-2

Dra. Carolina De Montreuil Iturri

BACTERIOLOGA BSICA

I. BACTERIAS
INTRODUCCIN
Las bacterias son microorganismos unicelulares procariotas que presentan un tamao de unos
pocos micrmetros (por lo general entre 0,5 y 5 m de longitud) y diversas formas incluyendo
esferas (cocos), barras (bacilos), sacacorchos (vibrios) y hlices (espirilos).
Son los organismos ms abundantes del planeta. Son ubicuas, se encuentran en todos los hbitats
terrestres y acuticos; crecen hasta en los ms extremos como en los manantiales de aguas
calientes y cidas, en desechos radioactivos, en las profundidades tanto del mar como de
la corteza terrestre. Algunas bacterias pueden incluso sobrevivir en las condiciones extremas
del espacio exterior. Se estima que se pueden encontrar en torno a 40 millones de clulas
bacterianas en un gramo de tierra y un milln de clulas bacterianas en un mililitro de agua dulce.
En total, se calcula que hay aproximadamente 510
30
bacterias en el mundo.
Del estudio de las bacterias se encarga la Bacteriologa, que es una disciplina de la Microbiologa,
que ha estado presente a lo largo de la historia de la humanidad. Las bacterias son responsables
de millones de muertes de personas a nivel mundial. Entre algunas enfermedades infecciosas
bacterianas, causantes de grandes epidemias, se encuentran: la difteria, clera, tuberculosis, sfilis,
ttanos, tos ferina, y fiebre tifoidea. Sin embargo, tambin existen infecciones bacterianas que
aunque estn asociadas en menor frecuencia como causa de muerte, son un problema de salud
pblica en pases en vas de desarrollo como el nuestro, entre las que podemos mencionar:
diarreas (causadas por Shigella o Escherichia coli), infecciones de vas urinarias, faringoamigdalitis,
gonorrea, tracoma y brucelosis.

II. ESTRUCTURA BSICA

1. Estructura intracelular
Citoplasma
La membrana citoplasmtica bacteriana tiene una estructura similar a la de plantas y animales. Es
una bicapa lipdica compuesta fundamentalmente de fosfolpidos en la que se insertan molculas
de protenas. En las bacterias realiza numerosas funciones entre las que se incluyen las de barrera
osmtica, transporte, biosntesis, transduccin de energa, centro de replicacin de ADN y punto
de anclaje para los flagelos. A diferencia de los eucariotas, generalmente no
contiene esteroles (son excepciones micoplasmas y algunas proteobacterias).

Muchas importantes reacciones bioqumicas que tienen lugar en las clulas se producen por la
existencia de gradientes de concentracin a ambos lados de una membrana. Este gradiente crea
una diferencia potencial anloga a la de una batera elctrica y permite a la clula, por ejemplo, el
transporte de electrones y la obtencin de energa. La ausencia de membranas internas en las
bacterias significa que estas reacciones tienen que producirse a travs de la propia membrana
citoplasmtica, entre el citoplasma y el espacio periplsmico.

Puesto que las bacterias son procariotas no tienen orgnulos citoplasmticos delimitados por
membranas y por ello presentan pocas estructuras intracelulares. Carecen de ncleo celular,
mitocondrias, cloroplastos y de los otros orgnulos presentes en las clulas eucariotas, tales como
el aparato de Golgi y el retculo endoplasmtico. Como excepcin, algunas bacterias contienen
estructuras intracelulares rodeadas por membranas que pueden considerarse primitivos
orgnulos.

Genoma bacteriano
El genoma bacteriano o nucleoide est formado por una gran molcula de ADN de doble cadena,
superenrollado que si bien no posee la organizacin de un cromosoma y la asociacin con
histonas, puede estar asociado a ciertas protenas. El ADN se une a zonas estratgicas de los
mesosomas de la membrana plasmtica en un sitio denominado oriC para iniciar su duplicacin.
Pueden existir como elementos facultativos pequeas cadenas circulares de ADN libres en el
citosol denominadas plsmidos, con capacidad para replicarse independientemente del genoma
bacteriano.

Ribosomas
Poseen u tamao de 70s y poseen una estructura diferente a la de los ribosomas de las clulas
eucariotas (80s) y por ello han podido desarrollarse antimicrobianos que acten sobre los
ribosomas bacterianos y no sobre los ribosomas del hombre y los animales.

2. Estructura extracelular
Pared celular
Por fuera de la membrana citoplasmtica se encuentra una pared celular rgida que est presente
en todas las bacterias, con excepcin de los micoplasmas.

Sus funciones son:
1) Proteger a las bacterias de la diferencia de presin osmtica entre el medio interno de la
bacteria y del exterior
2) Funciona como una barrera contra sustancias txicas qumicas y biolgicas presentes en el
medio externo.
3) Su rigidez es la que proporciona la forma a la bacteria.

El componente principal de la pared celular es la murena, un pptidoglicano que consiste en una
cadena lineal de dos azcares alternados, N-acetilglucosamina (NAGA) y cido N-acetilmurnico
(NAM). A cada residuo de NAM se halla ligado un tetrapptido. Estos tetrapptidos intervienen en
la unin de las cadenas adyacentes de murena mediante un puente peptdico intermediario. Estas
fibras se entrelazan entre s dando como resultado una estructura muy rgida y estable.

Representacin esquemtica de una porcin pptidoglicano de la pared bacteriana
Existen dos tipos de pared bacteriana lo que permiti dividir a las bacterias en dos grupos en base
a la coloracin de Gram: aquellas capaces de retener el colorante cristal violeta luego de la
decoloracin con alcohol acetona (bacterias gram positivas) y aquellas que pierden el decolorante
por decoloracin (gram negativas).

Por otro lado podemos nombrar otros tres grupos: 1) Las micobacterias que poseen una
estructura que responde a los grampositivas pero no se tien con ese colorante porque su pared
tiene adems un alto contenido en lpidos. 2) Los treponemas que tienen una estructura de pared
de gramnegativas pero no pueden ser observados con la coloracin de Gram porque son tan
delgados que caen por debajo de los lmites de resolucin del MO. 3) Los micoplasmas que
carecen de pared celular.
Pared celular de las bacterias grampositivas
La pared celular de las bacterias gram positivas es ms gruesa que la de las bacterias gram
negativas (pptidoglicano y cidos teicoicos) y otros carbohidratos y protenas que varan de
acuerdo a la especie. El principal componente es el peptidoglicano o capa de murena que es muy
gruesa.

Esquema de la ultraestructura de la pared celular de las bacterias gram positivas

El segundo componente de importancia en la pared celular de las bacterias grampositivas son los
cidos teicoicos que constituyen los mayores determinantes antignicos que definen la
individualidad inmunolgica de estas bacterias, actan como receptores para bacterifagos e
inhiben la fagocitosis. Otras molculas presentes en la pared de las bacterias gram positivas son
los carbohidratos como los carbohidratos C de Streptococcus que definen la especificidad de
grupos o protenas como la protena M del Streptococcus del grupo A o la protena A del
Staphylococcus aureus.

Pared celular de las bacterias gramnegativas
El espesor de la pared celular de las bacterias gramnegativas es considerablemente menor que el
de una bacteria grampositivas y estructuralmente dichas paredes tienen poca similitud en s.
La cantidad de murena es mucho menor y forma una delgada pero resistente capa que protege a
la bacteria. Adems carece de cidos teicoicos. Solo unas pocas cadenas de murena estn unidas
a otras cadenas paralelas por medio de tetrapptidos y son suficientes como para formar una
malla de murena. El resto de las cadenas permanecen sueltas y sumergidas en un fluido que
contiene agua y molculas libres, para formar un gel periplsmico que aparece a ambos lados de la
pared celular. El espacio periplsmico no es un espacio lleno de fluido sino que es un verdadero
gel que define el periplasma.
Por fuera del periplasma se encuentra una estructura denominada membrana externa. Est
formada por dos semicapas, la interior, compuesta por fosfolpidos y la exterior compuesta por
Lipopolisacrido (LPS) que tiene actividad de endotoxina. El LPS posee una regin I o antgeno O
(que es antignico y caracterstico de ciertas especies bacterianas), un polisacrido central y una
regin III o Lpido A (el cual es el responsable de la actividad endotxica del LPS). La endotoxina
puede actuar como pirgeno endgeno y desencadenar la cascada del complemento y de la
coagulacin.

Esquema de la ultraestructura de la pared celular de las bacterias gram negativos
La membrana externa presenta adems protenas denominadas porinas que la atraviesan, cuyas funciones
son actuar de canales para nutrientes, son receptores para bacterifagos y permiten la adherencia a
receptores especficos del husped.

Cpsula y matrices exopolisacridas

Por fuera de la pared, algunas bacterias presentan una capa de polisacridos o de protenas que
puede ser gruesa o delgada, rgida o flexible, que es una cubierta continua formada por un gel
hidroflico. Cuando la estructura es firme y tiene bordes definidos, se habla de cpsula. Esta est
organizada en una matriz muy compacta que excluye las partculas como las de tinta china.
Cuando la estructura es amorfa y de bordes poco definidos e irregulares se habla de glicoclix o
matriz exopolisacridas; en este caso no excluira a las partculas y sera ms difcil de ver. Aunque
la mayora de las cpsulas son polisacridas, existen algunas que son polipeptdicas como las de
Bacillus anthracis. La cpsula es un determinante de patogenicidad para la bacteria ya que le da
resistencia a la fagocitosis y a la lisis intracelular y le permite la adherencia a las mucosas del
husped. Tal es su importancia en la virulencia que se ha visto que bacterias que pierden su
cpsula se vuelven avirulentas o no patgenas. La cpsula es un importante determinante
antignico que sirve en algunas bacterias para preparar vacunas (Haemophilus influenzae y
Neisseria meningitidis).

III. CLASIFICACIN
Las bacterias son organismos con una gran variedad de formas que van de las esfricas hasta las
espirilo (con forma de muelle). Segn su forma las bacterias las podemos clasificar como:
1. Coco, con forma esfrica
2. Bacilo, con forma de bastn
3. Vibrio, con forma de coma
4. Espirilo, con forma helicoidal
5. Espiroqueta, con forma de tirabuzn

Cocos: Proviene del griego kkkos, lo que se traduce como grano, es de forma esfrica. Estas se
clasifican en: A. diplococo, cocos en grupo de dos. B. tetracocos, cocos en grupo de cuatro. C.
estreptococo, cocos en cadenas. D. estafilococos, cocos en agrupaciones irregulares o en racimo.
Bacilos: Proviene del latn baculus, lo que significa varilla, tienen forma de bastoncillo.
Formas helicoidales: Vibrios: ligeramente curvados y en forma de coma. Espirilos: en forma
helicoidal rgida o en forma de tirabuzn. Espiroquetas: en forma de tirabuzn (helicoidal flexible).

IV. NUTRICIN BACTERIANA
El xito evolutivo de las bacterias se debe en parte a su versatilidad metablica. Todos los
mecanismos posibles de obtencin de materia y energa podemos encontrarlos en las bacterias.
Segn la fuente de carbono que utilizan, los seres vivos se dividen en Auttrofos, cuya principal
fuente de carbono es el CO2, y Hetertrofos cuando su fuente de carbono es materia orgnica. Por
otra parte segn la fuente de energa, los organismos o seres vivos pueden ser Fottrofos, cuya
principal fuente de energa es la luz, y Quimitrofos, cuya fuente de energa es un compuesto
qumico que se oxida.
Atendiendo a las anteriores categoras, entre las bacterias podemos encontrar las siguientes
formas, como puede apreciarse en el esquema: 1. Las bacterias quimiohetertrofas, utilizan un
compuesto qumico como fuente de carbono, y a su vez, este mismo compuesto es la fuente de
energa. La mayor parte de las bacterias cultivadas en laboratorios y las bacterias patgenas son
de este grupo. 2. Las bacterias quimioauttrofas, utilizan compuestos inorgnicos reducidos como
fuente de energa y el CO2 como fuente de carbono. 3. Las bacterias fotoauttrofas, utilizan la luz
como fuente de energa y el CO2 como fuente de carbono. 4. Las bacterias fotohetertrofas,
utilizan la luz como fuente de energa y biomolculas como fuente de carbono.



V. REPRODUCCIN CRECIMIENTO BACTERIANO
1. Reproduccin Bacteriana
Generalmente las bacterias se reproducen por Fisin binaria, una forma de reproduccin asexual,
como se ve en el siguiente esquema:


Tras la duplicacin del ADN, que est dirigida por la ADN-polimerasa que se encuentra en los
mesosomas, la pared bacteriana crece hasta formar un tabique transversal separador de las dos
nuevas bacterias.
Pero adems de este tipo de reproduccin asexual, las bacterias poseen unos mecanismos de
reproduccin sexual o parasexual, mediante los cuales se intercambian fragmentos de ADN. Esta
reproduccin puede realizarse por transformacin, por conjugacin o por transduccin.
TRANSFORMACIN: Consiste en el intercambio gentico producido cuando una bacteria es capaz
de captar fragmentos de ADN, de otra bacteria que se encuentran dispersos en el medio donde
vive.

CONJUGACIN: En este proceso, una bacteria donadora F+ transmite a travs de un puente o pili,
un fragmento de ADN, a otra bacteria receptora F-. La bacteria que se llama F+ posee un plsmido,
adems del cromosoma bacteriano.

TRANSDUCCIN: En este caso la transferencia de ADN de una bacteria a otra se realiza a travs de
un virus bacterifago, que se comporta como un vector intermediario entre las dos bacterias.

a. el virus se acopla a la bacteria b. el virus rompe la pared bacteriana c. el virus inyecta su
ADN
2. Crecimeinto Bacteriano
Es un incremento en el nmero de clulas o aumento de la masa microbiana. El crecimiento es un
componente esencial de la funcin microbiana, ya que una clula individual tiene un periodo de
vida determinado en la naturaleza y la especie se mantiene solamente como resultado del
crecimiento continuao de la poblacin celular. Una bacteria es una mquina capaz de duplicarse
as misma. Los procesos sintticos de crecimeinto implican no mas de 2000 reacciones
bioqumicas. El crecimeinto microbiano ocurre a travs de fisin binaria, ejemplo E. coli puede
completar su ciclo en 20 min.
La velocidad de crecimiento es el cambio en el nmero de clulas por unidad de tiempo. El tiempo
requerido para que a partir de una clula se formen dos clulas o el tiempo requerido para
duplicar una poblacin de clulas se llama Tiempo de generacin o tempo de duplicacin. En una
sola generacin se diplica el nmero de clulas o masa celular, en minutos, en ocasiones horas o
das.
Incremento del nmero de clulas en el tiempo
Ciclo de crecimiento
Un cultivo bacteriano simple y homogneo Tiene un ciclo de crecimiento como el de la figura.

Puede dividirse en varias fases:
a. Fase de latencia: Cuando las bacterias se adaptan a las condiciones de crecimiento. Es el
perodo en el que las bacterias individuales estn madurando y no tienen an la
posibilidad de dividirse. Durante esta fase se produce la sntesis de ARN, enzimas y otras
molculas.
b. Fase exponencial: Es un perodo caracterizado por la duplicacin celular. El nmero de
nuevas bacterias que aparecen por unidad de tiempo es proporcional a la poblacin
actual. Si el crecimiento no se limita, la duplicacin continuar a un ritmo constante, por lo
tanto el nmero de clulas y la tasa de crecimiento de la poblacin se duplica con cada
perodo de tiempo consecutivo. El crecimiento exponencial no puede continuar
indefinidamente, sin embargo, porque el medio llega pronto al agotamiento de nutrientes
mientras se acumulan los desechos.
c. Fase estacionaria: En esta fase la tasa de crecimiento disminuye como consecuencia del
agotamiento de nutrientes y la acumulacin de productos txicos. Se caracteriza por un
valor constante del nmero de bacterias a medida que la tasa de crecimiento de las
bacterias se iguala con la tasa de muerte bacteriana.
d. Fase de muerte: En esta fase las bacterias se quedan sin nutrientes y mueren.



VI. SESIONES TERICAS
Temario:
Diferencias entre clulas eucariotas y procariotas.
Estructura bacteriana interna y externa: Cromosoma, plsmidos, ribosoma, membrana
citoplasmtica, pared celular (peptidoglucano, cido teicoico, lipopolisacrido), cpsula,
glucoclix, flagelos, fimbrias. Sntesis del peptidoglucano.
Semejanzas y diferencias entre bacterias grampositivas y gramnegativas.
Divisin celular y crecimiento bacteriano.
Esporulacin.
Intercambio gnico en los procariotas (Transformacin, conjugacin y transduccin).

Lectura obligatoria:
Texto resumen de la clase.
Libro de texto (Murray):
- Diferencias entre clulas eucariotas y procariotas: p 9.
- Estructura bacteriana: pp 11 a 20.
- Sntesis del peptidoglucano: p 17.
- Semejanzas y diferencias entre bacterias grampositivas y gramnegativas: Pp 12 a 15.
- Divisin celular y crecimiento bacteriano: Pp 20, 31 y 32.
- Esporulacin: pp 20 y 21.
- Intercambio gnico en los procariotas: Pp 33 a 36.

Fuentes bibliogrficas
Microbiologa Clnica. Guillem Prats. 2006