Los receptores celulares son protenas encargadas del reconocimiento
molecular situados en las membranas celulares, capaces de producir cambios estructurales al unirse a ellos ciertas seales biolgicas. Estos, son susceptibles de sufrir mutaciones genticas que al afectar su estructura, alteran as mismo su funcionalidad, desencadenando un gran nmero de patologas, de las cuales muchas tienen gran impacto a nivel neurofisiolgico. . ! Los receptores celulares pueden clasificarse segn su estructura o el tipo de interacciones que estable"can, pudiendo ser as monomricos, heteromricos, asociados a canales inicos o a en"imas #e$. La adenilato ciclasa% ! & los receptores se unen seales biolgicas #hormonas, neurotransmisores, neuromoduladores, agonistas ' antagonistas% que lo modifican ' generan en la clula variedad de reacciones, inclu'endo la induccin de procesos como la endocitosis, o la e(ocitosis. ! )nos mu' destacados receptores, son los relacionados a los procesos de neurotransmisin. Los neurotransmisores reaccionan con receptores postsin*pticos o autorreceptores presin*pticos tras su liberacin, permitiendo la conduccin del impulso nervioso. ! Los neurotransmisores comparten caractersticas en comn como lo son el ba$o peso molecular ' la polaridad. +asi todos son aminas, amino*cidos o sustancias relacionadas. ,us acciones sin*pticas pueden ser inhibidoras o e(citadoras. ! )na neurona puede almacenar diferentes neurotransmisores, llegando a tener esto una importancia fisiopatolgica, que podra e(plicar la etiologa de trastornos como la esqui"ofrenia, o el control de ciertas funciones del sistema nervioso autnomo. ! Las neuronas poseen mecanismos de regulacin para mantener niveles adecuados de neurotransmisores, dichos mecanismos varan segn la naturale"a del neurotransmisor- si es de naturale"a peptdica o derivados de metabolitos. La regulacin de los niveles de catecolaminas se reali"a en el terminal nervioso, la de los neuropptidos #como las encefalinas, corticotropina ' angiostensina% se reali"a en el cuerpo celular. ! .ntervienen tambin en el estmulo nervioso, los transportadores de neurotransmisores sodio dependientes que se encuentran en la membrana plasm*tica del terminal nervioso ' las clulas gla ad'acentes. La disfuncin de dichos sistemas, pueden dar lugar a deficiencia de neurotransmisores ' enfermedades mentales o metablicas como la fenilcetonuria. ! Los receptores de neurotransmisores son protenas de membrana en la capacidad de reconocer neurotransmisores ' sus agonistas ' antagonistas. Estas uniones generan cambios en las membranas, en su potencial o su resistencia. /ichos cambios moleculares responden a dos mecanismos principalmente, el modelo de 0receptor ionforo1 o al de 0receptor!segundo mensa$ero1. ! 2ara que se lleve a cabo un correcto proceso de reconocimiento celular, es necesario que los receptores se encuentren en la cantidad ' el lugar apropiado, que se encuentren correctamente acoplados las en"imas, efectores ' protenas necesarias para la transmisin del impulso, ' que ha'a un correcto balance en la biosntesis ' degradacin del neurotransmisor. ! 3uchos receptores de neurotransmisores tienen dos componentes funcionales- un lugar de unin para la molcula de transmisin ' un poro transmembrana con permeabilidad selectiva a ciertos iones. La unin receptor! neurotransmisor provoca la apertura del poro, permitiendo el movimiento inico que tiende a igualar el gradiente de concentracin a ambos lados de la membrana. ! +uando la membrana se hace permeable al 4a 5 #o menos permeable al ion 6 5 %, se produce una despolari"acin, generando un potencial e(citador postsin*ptico. ,i por el contrario, sta se hace m*s permeable al 6 5 o al +l ! , resulta una hiperpolari"acin ' como consecuencia un potencial inhibidor postsin*ptico. ! El receptor nicotnico de acetil colina posee cinco subunidades que se acoplan formando en su centro un conducto inico cu'a actividad ' sentido depende de los cambios inducidos ante la presencia o ausencia del transmisor ' diversos efectores. El mal funcionamiento de estos receptores en sistema nervioso central, podra e(plicar el sndrome de &l"heimer, produciendo prdida de memoria ' falta de coordinacin7 al igual que la miastenia gravis, caracteri"ada por un debilitamiento progresivo de la capacidad mvil de los msculos voluntarios, hasta llegar a un estado de postracin total, todo esto, dada una prdida de receptores nicotnicos de acetil colina en las placas neuromusculares. ! Los receptores para dopamina, norepinefrina ' otros neurotransmisores, operan mediante el mecanismo receptor!segundo mensa$ero. Estos receptores est*n acoplados a protenas de membrana que regulan los niveles de segundos mensa$eros en la clula postsin*ptica. &lgunas veces, la unin del transmisor a su receptor, activa o inactiva a una adenilato o guanilato ciclasa, aumentando o disminu'endo la concentracin iontracelular de &32c o 832c. Estos nucletidos actan sobre quinasas que fosforilan otras protenas especficas. ! Los segundos mensa$eros, +a 55 ' &32c pueden inducir procesos de e(ocitosis, glucgenlisis, respiracin mitocondrial, endocitosis ' sntesis de neurotransmisores. 3utaciones en las en"imas de sntesis de &32c, resultan en disfuncin de procesos de aprendi"a$e, habituacin ' sensibili"acin. ! Los nievels de &32c est*n controlados por dos en"imas- la fosfodiesterasa #encargada de su degradacin% ' la adenilatociclasa #sntesis%. La activacin de la adenilato ciclasa requiere de una protena sensible a 892 o 8/2. &s, la formacin del &32c requiere de 892 ' se detiene cuando ste se hidroli"a. 3uchos opi*ceos actan estimulando la hidrlisis del 892. ! )na parte de las acciones de +a 55 , deben asociarse a la quinasa +, que necesita +a 55 ' fosfolpidos para su actividad. :sta es activada por productos de la hidrlisis del fosfatidil inositol. En presencia de /&8, sta quinasa se une a membranas para fosforilar sustratos endgenos. ! Los receptores colinrgicos pueden ser de tipo ;!adrenrgicos o <! adrenrgicos. Los ; 1 se hallan unidos a flu$os de calcio, los otros #;
, < 1 , <
% se hallan unidos a la adenilato ciclasa. Los receptores < estimulan la
actividad de la en"ima, los ;
la inhiben. ! 3odificaciones estructurales de los receptores dopaminrgicos se asocian a enfermedades como el 2ar=inson, en la cual los receptores dopaminrgicos sufren un declive funcional7 o la esqui"ofrenia que se e(plica por la hiperactividad de dichos receptores. >. Inmunohistoqumica 8rupo de tcnicas de inmunotincin que permite demostrar antgenos presentes en la clula o te$idos utili"ando anticuerpos marcados. Esta reaccin es visible si el anticuerpo est* marcado con una sustancia que absorbe o emite lu" o produce coloracin. ,e utili"an como marcadores compuestos de fluorescena #sustancia colorante org*nica% que ba$o lu" )?, emiten lu" de longitud de onda visible que depende de la naturale"a del compuesto. E(isten dos tipos de mtodo inmunohistoqumico- /irecto- el anticuerpo especfico contra la sustancia que se quiere detectar est* marcado con partculas detectables al microscopio #e$.fluorescenciao pero(idasa%. .ndirecto- la seal del anticuerpo se ampla reali"ando sucesivas capas de anticuerpos o marcadores #como son 2ero(idasa@&nti!2ero(idasa #2&2%, +omple$o de &vidina Aiotina pero(idasa #&A+%. Tnica de autorradiografa Esta tcnica utili"a unas molculas biolgicas, a las que sustitu'e un elemento, como un B o el ., por otro elemento radiactivo, e$. B > o . 1C , o bien incorpora un elemento radiactivo, que las clulas ' los te$idos empleen, ' as en un momento determinado se puede interrumpir sus procesos biolgicos mediante la fi$accin, quedando en ese momento la molcula con el istopo radiactivo sorprendida en el lugar de la clula o el te$ido por donde estaba pasando, o donde se almacena, dependiendo del tiempo que media entre la administracin del producto ' la fi$acin. Esta tcnica, nos va a permitir seguir el destino de un compuesto radioactivo en el interior de un organismo como cuantificar, 'a que la intensidad de la impresin en la placa fotogr*fica es proporcional a la cantidad de radioactividad presente en la muestra. Aislamiento, purificacin y fraccionamiento de protenas Precipitacin selectiva: ,e aade gradualmente al crudo de protena una solucin saturada de sulfatos de amonio, que ocasiona la precipitacin de las protenas contaminantes que puede desecharse. &l final, se alcan"a un punto en el que se separa la protena de la solucin. )na ve" se precipita la protena deseada, las protenas contaminantes se de$an en la solucin, mientras que la buscada puede disolverse de nuevo. Cromatografa lquida de columna: aqu se designan varias tcnicas en las que una me"cla de cvomponentes disueltos se fracciona a su paso por cierto tipo de matri" porosa. Los componentes en la me"cla se relacionan con dos fases- la fase mvil, que es el solvente en movimiento7 ' la fase inmvil, que es la matri" a travs de la cual se mueve el solvente. !+romatografa de intercambio inico- sta depende del enlace inico de las protenas con una matri" de material inerte, como la celulosa, que contiene grupos cargados unidos mediante enlace covalente. /os de las resinas de intercambio inico m*s usuales son la dietilaminoetilcelulosa #/E&E%, que es un intercambiador de aniones por su carga positiva, ' la carbo(imetilcelulosa #+3%, que dada su carga negativa, es un intercambiador de cationes. La resina se empaca en una columna ' se permite que la solucin proteica pase a travs de ella en un amortiguador q'e promuevbe la unin de algunas o todas las protenas a la resina. Las protenas se e(traen de la columna en orden, de a que tiene una unin menos fuerte, a la unida con ma'or fuer"a. !+romatografa por filtracin de gel- ,e utili"an polisac*ridos con enlaces cru"ados #de(tranos o agarosa% de diferente porosidad, que permite que las protenas se difundan dentro ' fuera de las cuentas. !+romatografa por afinidad- en esta se aprovechan las propiedades intrnsecas de una protena, lo que permite que esta se retire de manera especfica de la solucin mientras las dem*s quedan en esta. Las protenas interactan con sustancias especficas- en"imas con sustratos, receptores con ligandos, antgenos con anticuerpos, etc. Electroforesis en gel de poliacrilamida: /epende de la capacidad de molculas cargadas para migrar cuando se colocan en un campo elctrico. Las protenas son impulsadas por una corriente que se aplica a travs de una matri" gelatinosa compuesta de acrilamida. El movimiento relativo de las protenas por un gel de poliacrilamida depende de la densidad de carga de las molculas. 3ientras ma'or sea esta, con ma'or fuer"a se impulsar* la protena a travs del gel.